การเปิดใช้งานความทรงจำที่ใช้สื่อกลาง Hippocampal อีกครั้งในระหว่างการรวมตัวใหม่เพื่อขัดขวางความกลัวตอนที่ 2

ต่อไป เราจะประเมินผลกระทบระยะยาวของการจัดการของเรา จำลองสิ่งที่ค้นพบข้างต้นด้วยการออกแบบการทดลองที่คล้ายกัน

อาจมีความเชื่อมโยงกันอย่างมากระหว่างผลกระทบระยะยาวและความทรงจำ ในด้านหนึ่ง ผลกระทบระยะยาวอาจมีผลกระทบอย่างมากต่อความจำ และในทางกลับกัน ความจำอาจส่งผลต่อผลกระทบระยะยาวของเราได้

ประการแรก ผลกระทบระยะยาวต่อความทรงจำส่วนใหญ่สะท้อนให้เห็นในสองแง่มุม ด้านแรกคือผลกระทบต่อการทำงานทางสรีรวิทยาของผู้คน และอีกด้านคือผลกระทบต่อสภาพจิตใจของผู้คน

ผลกระทบระยะยาวอาจส่งผลต่อสรีรวิทยาของเรา เช่น ในด้านต่างๆ เช่น อาหาร การนอนหลับ และการออกกำลังกาย หากเราอยู่ในสภาพแวดล้อมที่ไม่ดีต่อสุขภาพเป็นเวลานาน เช่น การรับประทานอาหารที่ไม่สมดุล คุณภาพการนอนหลับที่ไม่ดี การขาดการออกกำลังกายเป็นเวลานาน เป็นต้น ผลข้างเคียงในระยะยาวเหล่านี้จะทิ้งความทรงจำบางอย่างไว้ในร่างกายของเรา ซึ่งส่งผลต่อสมองของเรา กิจกรรมและความทรงจำ

ในขณะเดียวกันผลกระทบระยะยาวก็จะส่งผลต่อสภาพจิตใจของเราด้วย เช่น ความตึงเครียด วิตกกังวล ความเครียด มากเกินไป ซึ่งจะส่งผลเสียต่อความจำของเรา

ผลกระทบระยะยาวของความทรงจำก็มีความสำคัญเช่นกัน ความทรงจำที่ดีสามารถทำให้เรามีความกระจ่างแจ้ง เป็นอิสระ และมั่นใจมากขึ้น ทำให้เราสามารถควบคุมชีวิตของตัวเองและผลที่ตามมาในระยะยาวได้มากขึ้น ช่วยให้เราปรับสภาวะได้ดีขึ้น ซึ่งช่วยลดความเครียด ความวิตกกังวล และปัจจัยที่ไม่พึงประสงค์อื่นๆ ปรับปรุงความสามารถในการต้านทานความคับข้องใจ และเพิ่มความสามารถในการปรับตัว

ดังนั้นเราจึงควรใส่ใจกับผลกระทบของผลกระทบระยะยาวต่อเราในชีวิตประจำวันของเรา ใส่ใจกับสุขภาพและสภาพจิตใจที่ดี ปลูกฝังนิสัยการใช้ชีวิตที่ดีต่อสุขภาพและการปรับตัวที่ดี เพื่อให้ความทรงจำของเราเต็มอิ่มและรับมือกับได้ดีขึ้น ผลกระทบระยะยาว บรรลุการเติบโตอย่างมีนัยสำคัญของตัวเอง จะเห็นได้ว่าเราต้องปรับปรุงความจำ และ Cistanche Deserticola สามารถปรับปรุงความจำได้อย่างมาก เนื่องจาก Cistanche Deserticola ยังสามารถควบคุมความสมดุลของสารสื่อประสาท เช่น การเพิ่มระดับของอะเซทิลโคลีนและปัจจัยการเจริญเติบโต สารเหล่านี้มีความสำคัญมากต่อความจำและการเรียนรู้ นอกจากนี้ Cistanche Deserticola ยังช่วยเพิ่มการไหลเวียนของเลือดและส่งเสริมการส่งออกซิเจน ซึ่งช่วยให้สมองได้รับสารอาหารและพลังงานที่เพียงพอ ซึ่งจะช่วยปรับปรุงความมีชีวิตชีวาและความอดทนของสมอง

คลิกรู้วิธีปรับปรุงการทำงานของสมอง

อย่างไรก็ตาม แทนที่จะให้หนูทดสอบการคืนสถานะหลังจากการช็อกทันที เราปล่อยให้หนูไม่ถูกรบกวนอยู่ในกรงบ้านเป็นเวลา 2 สัปดาห์หลังจากการสูญพันธุ์ จากนั้นจึงทำการทดสอบการฟื้นตัวที่เกิดขึ้นเองตามธรรมชาติ (รูปที่ 1n)

ยี่สิบสี่ชั่วโมงหลังจากการปรับสภาพความกลัว (รูปที่ 1o) ในระหว่างการเรียกคืน ทั้งกลุ่ม ChR2 ที่เป็นบวกและเป็นกลางจะแข็งตัวน้อยลงในช่วงครึ่งหลังของเซสชันเมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุม eYFP (รูปที่ 1p) เราไม่เห็นความแตกต่างกลุ่มระหว่างการสูญพันธุ์ (รูปที่ 1q และรูปที่ 1c เพิ่มเติม)

สอดคล้องกับผลกระทบที่เห็นในระหว่างการเรียกคืน การทดสอบการฟื้นตัวตามธรรมชาติเผยให้เห็นว่าหนูทั้งเชิงบวกและเป็นกลาง-ChR2 แข็งตัวน้อยกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุม eYFP และเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มเชิงลบ-Chr2 แสดงให้เห็นว่าการจัดการของเราสร้างผลกระทบที่ยั่งยืนต่อกระบวนการดึงหน่วยความจำความกลัวซึ่งเห็นได้ชัดสองสัปดาห์หลังจากการสูญพันธุ์ (รูปที่. 1r, ส)

ที่สำคัญ เราแสดงให้เห็นการลดลงของการแช่แข็งที่สังเกตได้หลังจากติดแท็กและกระตุ้นความทรงจำเชิงบวก ไม่สามารถนำมาประกอบกับการฉีดไวรัสหรือการกระตุ้นด้วยแสงเพียงอย่างเดียว โดยเฉพาะเราพบว่าการเปิดใช้งานหน่วยความจำเชิงบวกที่ติดแท็ก (การสัมผัสของผู้หญิง) (รูปที่ 3a เสริม) หลังจากที่หนูเป็น FC เพื่อแสดงการแช่แข็งหลังช็อตที่เพิ่มขึ้น (รูปที่ 3b, c เสริม) ส่งผลให้มีการแช่แข็งน้อยลงในหนู ChR2 เท่านั้นที่ได้รับการกระตุ้นด้วยเลเซอร์ .

เมื่อเปรียบเทียบกับหนู ChR2 ที่ไม่ได้รับการกระตุ้น หนู eYFP ที่ได้รับการกระตุ้น และไม่มีไวรัส/ไม่มีกลุ่มเลเซอร์ นี่เป็นเรื่องจริงในระหว่างการเรียกคืน (รูปที่ 3 เพิ่มเติม) ในวันแรกของการสูญเสีย และในช่วง 3 นาทีแรกของการสูญพันธุ์ (รูปที่ 3e เพิ่มเติม, f) ตามที่คาดไว้ เราไม่เห็นความแตกต่างของกลุ่มในระหว่างการช็อกทันที (รูปที่ 3g เสริม) แต่เห็นว่าการแช่แข็งในกลุ่ม ChR 2- Laser On ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มอื่น ๆ ทั้งหมดที่คืนสถานะ (รูปที่ 3 เพิ่มเติม h, I)

ยิ่งไปกว่านั้น ผลกระทบนี้จะเกิดขึ้นเฉพาะเมื่อหนูได้รับการเปิดใช้งานหน่วยความจำที่ติดแท็กอีกครั้งในบริบทของ FC (รูปที่ 4a เพิ่มเติม) ต่อไปเราติดแท็กหน่วยความจำเชิงบวก (การสัมผัสของผู้หญิง) จากนั้นหนู FC ที่แสดงการแช่แข็งหลังช็อก (รูปที่ 4b เพิ่มเติม)

เมื่อหน่วยความจำนี้ถูกเปิดใช้งานอีกครั้งในบริบทใหม่ และหนูถูกส่งกลับไปยังบริบทการปรับสภาพ 24 ชั่วโมงต่อมา การแช่แข็งไม่ลดลงในกลุ่ม ChR2 ในระหว่างการเรียกคืน (รูปที่ 4c เพิ่มเติม)

การแช่แข็งยังคงคล้ายกับการควบคุม eYFP ตลอดการสูญพันธุ์และการคืนสถานะ (รูปที่ 4 เพิ่มเติม, e) การค้นพบเหล่านี้แสดงหลักฐานว่าการจัดการของเราเกิดขึ้นผ่านการรวมตัวกันใหม่ เนื่องจากมีความจำเพาะเมื่อหนูสัมผัสถึงความทรงจำตามธรรมชาติของความทรงจำเกี่ยวกับความกลัว ซึ่งในกรณีนี้ เกิดจากการสัมผัสกับบริบทของการปรับสภาพ

ความสำคัญของวาเลนซ์: การเปิดใช้งานประสบการณ์กรงในบ้านที่เป็นกลางอีกครั้งโดยไม่ได้ตั้งใจในระหว่างการรวมเข้าด้วยกันใหม่ไม่เพียงพอที่จะรบกวนความทรงจำแบบ Afear

ผลลัพธ์ข้างต้นแสดงให้เห็นว่าการรบกวนของฮิปโปแคมปัสที่เกิดจากการเปิดใช้เอนแกรมเชิงบวกหรือเป็นกลางอีกครั้งมีประสิทธิภาพในการลดความกลัวแบบมีเงื่อนไขมากกว่าเอ็นแกรมที่เกี่ยวข้องกับประสบการณ์เชิงลบ

เพื่อวัดความสำคัญของวาเลนซ์เพิ่มเติม ขั้นแรกเราได้ทดสอบว่าประสบการณ์กรงสะอาดแบบใหม่นั้น "เป็นกลาง" จริง ๆ หรือไม่ แทนที่จะเป็นเชิงบวกหรือเชิงลบ เนื่องจากสิ่งเร้าแบบใหม่สามารถมีส่วนร่วมชุดแนวทางที่ซับซ้อนและการหลีกเลี่ยงเส้นทางโดปามีนที่เกี่ยวข้องกับความโดดเด่น รางวัล และนีโอโฟเบีย –52. ดังนั้น สำหรับองค์ประกอบที่เป็นกลางของการทดลองครั้งต่อไป เราจึงใช้ประสบการณ์แบบกรงในบ้านแทน โดยที่หนูไม่ถูกรบกวน

ประการที่สอง เราถามว่าประสบการณ์เชิงบวกที่ไม่เกี่ยวข้องกับการสัมผัสกับผู้หญิงนั้นเพียงพอที่จะลดความกลัวหรือไม่ ดังนั้นเราจึงใช้การสัมผัสโคเคน53 เป็นประสบการณ์เชิงบวกครั้งต่อไป ในที่สุดก็อ่อนแอลงหากการไม่สามารถลดการแช่แข็งด้วยการกระตุ้นเชิงลบระหว่างการเรียกคืนความทรงจำด้วยความกลัวนั้นเป็นผลมาจากความทรงจำเหล่านั้นทับซ้อนกัน

เพื่อทดสอบสิ่งนี้ เราได้ติดแท็กเซลล์ dDG ที่ทำงานอยู่เมื่อหนูเป็น FC ในบริบท C เป็นประสบการณ์เชิงลบครั้งต่อไปของเรา เนื่องจากในทางทฤษฎีจะประกอบด้วยเซลล์บางเซลล์เดียวกันกับหน่วยความจำความกลัวที่ได้รับในบริบท A เนื่องจากลักษณะทั่วไป เพื่อตอบคำถามเหล่านี้ เรา เปิดหน้าต่างการแท็กอีกครั้งจาก DOX และติดป้ายกำกับหน่วยความจำเชิงบวก เป็นกลาง หรือลบใน dDG (รูปที่ 2a)

หนูที่ได้รับมอบหมายให้อยู่ในกลุ่มเชิงลบเริ่มแรกคือ FC incontext C ซึ่งแสดงให้เห็นถึงการแช่แข็งหลังการกระแทกอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 2b) วันรุ่งขึ้นพวกเขาเป็น FC เหมือนเมื่อก่อนในบริบท A. Mice FC ในวันก่อนหน้าแสดงการแช่แข็งที่สูงกว่ากลุ่มอื่นๆ ก่อนและหลังช็อก (รูปที่ 2c) ในระหว่างการเรียกคืน หนู ChR2 เชิงลบยังคงแสดงการแช่แข็งมากขึ้นเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม ChR2 อื่น ๆ (รูปที่ 2d) ซึ่งสังเกตได้ตลอดเซสชัน

อย่างไรก็ตาม ไม่มีการลดลงตามเวลาจริงในการหยุดนิ่งในกลุ่ม ChR2- ใดๆ เมื่อเปรียบเทียบกับคู่สัญญา eYFP ในส่วนใดๆ ของเซสชันการเรียกคืน (รูปที่ 2d) ไม่พบความแตกต่างของกลุ่มระหว่างการสูญพันธุ์ (รูปที่ 2e และรูปที่ 1d เพิ่มเติม) หรือการกระแทกทันที (รูปที่ 2f)

การกระตุ้นด้วยแสงของหน่วยความจำโฮมเคจไม่เพียงพอที่จะแข่งขันกับความทรงจำที่น่ากลัว เนื่องจากในระหว่างการคืนสถานะ เราสังเกตว่ามีเพียงหนู ChR2 ที่เป็นบวกเท่านั้นที่แสดงการแช่แข็งน้อยกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุม eYFP และกลุ่มเชิงลบ (รูปที่ 2g) หนูเมาส์เชิงลบ-ChR2 แสดงให้เห็นการแช่แข็งที่เท่ากันในการควบคุม (รูปที่ 2g, h)

ผลลัพธ์เหล่านี้ยืนยันการค้นพบครั้งก่อนของเรา ซึ่งแสดงให้เห็นว่าการกระตุ้นด้วยแสงของความทรงจำเชิงบวกที่แข่งขันกัน แต่ไม่ใช่ความทรงจำที่เป็นกลางหรือเชิงลบ เพียงพอที่จะขัดขวางการรวบรวมความกลัวอีกครั้ง

การลดลงของการแช่แข็งที่สังเกตได้ไม่ได้เกิดจากการเคลื่อนย้ายที่เพิ่มขึ้น

ในกลุ่มหนูที่แยกจากกัน เซลล์ dDG ที่เกี่ยวข้องกับการเข้ารหัสการสัมผัสโคเคนถูกแท็กปิด DOX (รูปที่ 2i) ในวันถัดไป เพื่อประเมินว่าการกระตุ้นเอ็นแกรมโคเคนจะกระตุ้นให้เกิดการเคลื่อนไหวมากเกินไปหรือไม่ เราได้ทดสอบหนูในทุ่งโล่ง โดยเราได้เปิดใช้งานเอ็นแกรมโคเคนอีกครั้งในช่วง 5 นาทีสุดท้ายของการทดสอบ 10 นาที

เราพบว่าไม่มีความแตกต่างของกลุ่มในจำนวนการข้ามเส้นทั้งหมด (รูปที่ 2j) ระยะทางที่เดินทาง (รูปที่ 2k) หรือความเร็ว (รูปที่ 2l) ซึ่งบ่งชี้ว่าการแช่แข็งที่ลดลงที่สังเกตได้ในการทดลองครั้งก่อนไม่ได้เกิดจากการเคลื่อนที่ที่เพิ่มขึ้น

นอกจากนี้ เวลาที่ใช้ในพื้นที่ตรงกลางเผยให้เห็นความแตกต่างที่ไม่มีกลุ่ม (รูปที่ 2 นาที) ซึ่งบ่งชี้ว่าการกระตุ้นความทรงจำที่เกี่ยวข้องกับอะโคเคนโดยธรรมชาตินั้นไม่ใช่ทั้งทำให้เกิดความวิตกกังวลหรือวิตกกังวล

หนูจะดำเนินการตอบสนองสำหรับการเปิดใช้งานหน่วยความจำเชิงบวกอีกครั้ง

แม้ว่าฮิปโปแคมปัสมีส่วนเกี่ยวข้องในการประมวลผลประสบการณ์เชิงบวก แต่ก็คิดว่าจะทำร่วมกับหลายภูมิภาคที่เกี่ยวข้องกับการปรับระบบประสาท รวมถึงบริเวณหน้าท้อง (VTA)

VTA เป็นองค์ประกอบที่สำคัญของระบบการให้รางวัลของสมอง และสภาวะอารมณ์เชิงลบ (เช่น ความวิตกกังวล) จะถูกควบคุมโดยการควบคุมที่ผิดปกติของ VTA เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่าการกระตุ้นตนเองในกะโหลกศีรษะ (ICSS) ของ VTA นั้นให้รางวัลแก่พฤติกรรมของผู้ปฏิบัติงานอย่างมาก โดยที่สัตว์ฟันแทะจะคงการส่งแรงกระตุ้นทางไฟฟ้าซึ่งส่งผลให้เกิดการปล่อยโดปามีน54,55

ขั้นตอนนี้ได้รับการดัดแปลงก่อนหน้านี้ เพื่อรวมไว้ในการกระตุ้น vivooptogenetic ของเซลล์ประสาทโดปามีนใน VTA ในการแท็กและเปิดใช้งานเซลล์ dDG อีกครั้งที่ทำงานในระหว่างประสบการณ์เชิงบวกนี้ เราได้แสดง ChR2 ในเซลล์ dopaminergic VTA โดยใช้หนูแปลงพันธุกรรมซึ่งแสดง Cre ภายใต้การควบคุมของตัวขนส่งโดปามีน (DAT)

เราฉีดไวรัสเวกเตอร์ AAV5-Ef1a-DIO-(hChR2-E123A)-eYFP ของเรา และปลูกฝังใยแก้วนำแสงฝ่ายเดียวเข้าไปใน VTA นอกจากนี้เรายังฉีด c-Fos-tTA-TRE- (ChR2) -eYFP และปลูกฝังใยแก้วนำแสงโดยมุ่งเป้าไปที่ dDG ทั้งสองข้าง (รูปที่ 3a) ในตอนแรกหนูเคยชินกับห้องผ่าตัดและได้รับอนุญาตให้เข้าถึงวงล้อได้โดยไม่มีผลกระทบใดๆ ซึ่งถือเป็นมาตรการพื้นฐาน

วันรุ่งขึ้น หนูถูกวางกลับเข้าไปในกล่องผ่าตัด และมีพอร์ตจมูกสองช่อง ช่องหนึ่งทำงานอยู่และอีกช่องไม่ทำงาน จมูกยื่นเข้าไปในพอร์ตที่ใช้งานซึ่งสร้างการกระตุ้น VTA แบบออพโตเจเนติกส์ ในขณะที่จมูกยื่นเข้าไปในพอร์ตที่ไม่ใช้งานไม่ก่อให้เกิดการกระตุ้นและทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมที่เลือกปฏิบัติ หนูได้รับการฝึกอบรม ICSS สามครั้ง จากนั้นจึงถอด DOX ออก

พวกเขาถูกนำกลับมาในการฝึกซ้อมครั้งที่สี่ โดยติดแท็กเซลล์ dDG ที่ตอบสนองต่อการกระตุ้นตัวเองด้วย VTA ในวันต่อมา การเข้าถึงพอร์ตจมูกถูกจำกัด และการหมุนของล้อทำให้เกิดการกระตุ้น dDG แบบออปติคอลเพื่อเปิดใช้งานเอ็นแกรมการกระตุ้นตัวเองของ VTA อีกครั้ง สิ่งนี้ทำเพื่อประเมินว่าหนูจะดำเนินการตอบรับเชิงบวกหรือไม่ (VTA-ChR2, dDG-ChR2) หรือประสบการณ์ที่เป็นกลาง (VTA-eYFP, dDG-ChR2) เมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุม dDG-eYFP (รูปที่ 3a)

หนูที่ฉีดด้วย ChR2 ใน VTA จมูกโผล่เข้าไปในพอร์ตที่ใช้งานอยู่นั้นสูงกว่าพอร์ตที่ไม่ได้ใช้งานอย่างมีนัยสำคัญ และพวกมันเพิ่มขึ้นในเซสชันที่แสดงให้เห็นถึงความสามารถของหนูในการเลือกปฏิบัติระหว่างพอร์ตและการกระตุ้นด้วยแสงด้วยตนเองเพื่อรับรางวัล (รูปที่ 3b – e) เมื่อเปรียบเทียบการวัดเส้นฐานล้อกับการฝึกและการทดสอบ หนูที่ฉีดด้วย ChR2 ใน VTA และ dDG ทำให้การหมุนล้อเสร็จสมบูรณ์มากขึ้น ซึ่งยังคงเคลื่อนไหวเป็นระยะเวลาและระยะทางที่ยาวขึ้น (รูปที่ 3f–h) และทำให้เกิดการกระตุ้นมากขึ้น (รูปที่ 3i) เมื่อเปรียบเทียบกับ กลุ่มอื่นๆ ทั้งหมด

การค้นพบนี้แสดงให้เห็นว่าหนูจะทำการตอบสนองของผู้ปฏิบัติงานเพื่อรักษาการเปิดใช้งานหน่วยความจำเชิงบวกโดยเฉพาะอย่างยิ่ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งหน่วยความจำของการกระตุ้นตนเองของ VTA หนูไม่ได้แสดงพฤติกรรมนี้เพื่อความทรงจำของการเปิดรับกล่องผู้ปฏิบัติงานในกรณีที่ไม่มีการกระตุ้น VTA หลังจากการทดสอบนี้ หนูได้รับโปรโตคอลการทดลองเดียวกันกับเมื่อก่อนที่พวกเขาอยู่ที่ FC ในบริบทที่พวกเขาแสดงให้เห็นการแช่แข็งหลังการกระแทก (รูปที่ 3j และรูปที่ 1e เพิ่มเติม) จากนั้นทำการทดสอบการเรียกคืนความทรงจำด้วยความกลัว

การเปิดใช้งานเอ็นแกรมกระตุ้นตนเองของ VTA (VCDC) อีกครั้งในระหว่างการเรียกคืนช่วยลดการแช่แข็งตลอดเซสชัน (รูปที่ 3k) ระดับยังคงต่ำตลอดการสูญพันธุ์ (รูปที่ 3l และรูปที่ 1e เพิ่มเติม) การช็อกทันที (รูปที่ 3m) และการคืนสถานะ (รูปที่ 3n)

สิ่งที่น่าสนใจระหว่างกลุ่ม twodDG-eYFP กลุ่มที่ได้รับการกระตุ้น VTA ก่อนหน้านี้ (VCDE) แสดงให้เห็นถึงผลประโยชน์ของประสบการณ์นี้ซึ่งแสดงระดับการแช่แข็งระดับกลางเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม VCDC และกลุ่มควบคุมอื่น ๆ ใน EXT1 (รูปที่ 3l) และจาก การคืนสภาพด้วยไฟฟ้าช็อตทันที (รูปที่ 3o) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าการแทรกแซงจากประสบการณ์ที่คุ้มค่าสามารถต่อต้านสภาวะอารมณ์เชิงลบได้

การเปิดใช้งานเซลล์ประสาท dDG ที่มีป้ายกำกับแบบสุ่มก็เพียงพอแล้วในการส่งเสริมการรวมความกลัวอีกครั้ง

ต่อไป เราถามว่าการกระตุ้นความจำเชิงบวกโดยเทียมซึ่งเกี่ยวข้องกับการกระตุ้นเซลล์ประสาทชุดเล็ก ๆ หรือไม่ (<10%)38, can update a fear memory during reconsolidation, could we circumvent the positive-valence prerequisite to achieve a similar effect if we activate a larger population of neurons not necessarily tied to memory? 

การทดลองที่ไม่เหมือนกับก่อนหน้านี้ ซึ่งเราใช้กลยุทธ์การติดแท็กที่เหนี่ยวนำโดย cFos เพื่อติดป้ายกำกับเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับประสบการณ์ที่แตกต่างกัน ที่นี่ เราใช้ avirus กับโปรโมเตอร์ที่เป็นส่วนประกอบ (CaMKIIa) เพื่อสุ่มติดแท็ก dDGneurons ด้วย ChR2 (รูปที่ 4a)

หนูถูกฉีดไวรัสเจือจางที่ไม่เจือปนเพื่อติดฉลากเปอร์เซ็นต์หรือเศษส่วนจำนวนมากของเซลล์ dDG ตามลำดับ หนูแสดงให้เห็นถึงการแช่แข็งหลังการกระแทกหลังจากเป็น FC (รูปที่ 4b และรูปที่ 1f เพิ่มเติม)

ในระหว่างการเรียกคืนในวันรุ่งขึ้น เซลล์ประสาทที่มีป้ายกำกับถูกกระตุ้นทางสายตา ในช่วงครึ่งแรกของวิทยานิพนธ์ เราพบว่าการแช่แข็งลดลงแบบเรียลไทม์ทั้งในกลุ่ม ChR2 ที่ไม่เจือปนและกลุ่ม ChR2 ที่เจือจาง แต่ในช่วงครึ่งหลัง มีเพียงกลุ่มที่ไม่มีการเจือปนเท่านั้นที่แสดงการเยือกแข็งน้อยลง (รูปที่ 4c)

กลุ่ม ChR2 ที่ไม่เจือปนยังคงแสดงการแช่แข็งน้อยลงตลอดการสูญพันธุ์ (EXT1 & EXT2) (รูปที่ 4d) และทั้งกลุ่ม ChR2 ที่ไม่เจือปนและเจือจางจะแข็งตัวน้อยกว่ากลุ่ม eYFP ในช่วง 3 นาทีแรกของ EXT1 (รูปที่ 1f เพิ่มเติม)

ตามที่คาดไว้ ไม่มีความแตกต่างระหว่างกลุ่มในระหว่างการช็อกทันที (รูปที่ 4e) ในการคืนสถานะ เราสังเกตเห็นการแช่แข็งที่ลดลงในกลุ่ม ChR2 ทั้งที่ไม่เจือจางและเจือจางเมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุม eYFP (รูปที่ 4f) และเปรียบเทียบกับการกระแทกทันที (รูปที่ 4g)

ผลกระทบของเรามีมากกว่าในกลุ่มที่ไม่มีการเจือปน โดยแนะนำว่ากระบวนการที่ยึดตามการรวมใหม่สามารถมีส่วนร่วมได้โดยการเปิดใช้งานวงดนตรีที่ไม่ได้เชื่อมต่อกับเอนแกรมของวาเลนซ์เฉพาะหากมีการเปิดใช้งานเซลล์เพียงพอ กลยุทธ์การปรับหน่วยความจำนี้อาจคล้ายกับโปรโตคอลการกระตุ้นที่ได้รับการอนุมัติให้ใช้ในมนุษย์ในปัจจุบัน 62,63

For more information:1950477648nn@gmail.com