ผลการป้องกันของ taxifolin ต่อความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก Pazopanib: แบบจําลองหนูทดลอง

กรุณาติดต่อ:oscar.xiao@wecistanche.comเพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

นามธรรม:Pazopanib เป็นสารยับยั้งไทโรซีนไคเนสที่ใช้โดยทั่วไปสําหรับการรักษาไตระยะแพร่กระจายเซลล์ มะเร็งและเนื้อเยื่ออ่อนขั้นสูง มันสามารถทําให้เกิดระดับต่างๆของความเป็นพิษต่อตับ การศึกษาของเรามีวัตถุประสงค์เพื่อ ตรวจสอบผลกระทบของ taxifolin ต่อ pazopanib ที่เกิดจากความเป็นพิษต่อตับ. หนูทั้งหมด 18 ตัวแบ่งออกเป็นสามกลุ่ม: กลุ่ม pazopanib (PP), pazopanib บวก taxifolin (TPP), และการควบคุม (C) Taxifolin ได้รับการจัดการเพื่อ TPP (n=6) กลุ่มที่มีขนาด 50 มก./กก. น้ํากลั่นถูกฉีดด้วยวาจาไปยังกลุ่ม C (n=6) และ PP (n=6) เป็นตัวทําละลาย ต่อจากนั้น, pazopanib 200 มิลลิกรัม/กก. เป็นยาให้กับกลุ่ม TPP และ PP ผ่านทางกระเพาะอาหาร. ขั้นตอนนี้ซ้ําแล้วซ้ําอีกวันละครั้งเป็นเวลาสี่สัปดาห์ จากนั้นหนูทุกตัวก็ถูกสังเวยและตับของพวกเขาก็ถูก ถูก เอา ออก มาลอนเดียลดีไฮด์ (MDA), กลูตาไธโอนทั้งหมด (TSH), สถานะออกซิแดนท์ทั้งหมด (TOS) และสถานะสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด มีการประเมินระดับ (TAS) ระดับ MDA และ TOS สูงขึ้นในกลุ่ม PP เมื่อเทียบกับระดับของ พารามิเตอร์อื่น ๆ (P<0.001). this="" and="" tas="" levels="" were="" lower="" in="" the="" pp="" group="" than="" in="" the="" tpp="" and="" c="" groups=""><0.001), and="" the="" aspartate="" aminotransferase="" (ast),="" alanine="" aminotransferase="" (alt),="" and="" lactate="" dehydrogenase="" (ldh)="" levels="" were="" higher.="" furthermore,="" liver="" tissue="" damage,="" including="" hemorrhage,="" hydropic="" degeneration,="" and="" necrosis="" was="" observed="" in="" the="" pp="" group.="" administration="" of="" taxifolin="" before="" pazopanib="" significantly="" improved="" degenerative="" changes.="" our="" study="" demonstrated="" that="" the="" administration="" of="" taxifolin="" is="" significantly="" effective="" in="" preventing="" pazopanib-induced="" hepatotoxicity="" in="">

คำ:แบบจําลองการทดลอง, ความเป็นพิษต่อตับ, ความเครียดออกซิเดชัน, pazopanib, taxifolin

2 (1)

โปรดคลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

แนะ นำ

Pazopanib (Votrient) ซึ่งเป็นสารยับยั้งไทโรซีนไคเนสได้รับการอนุมัติจากสํานักงานคณะกรรมการอาหารและยาแห่งสหรัฐอเมริกา (องค์การอาหารและยาแห่งสหรัฐอเมริกา) และสํานักงานยาแห่งยุโรปสําหรับการรักษามะเร็งเซลล์ไต [1] นอกจากนี้ยังได้แสดงให้เห็นประสิทธิภาพการรักษาในการรักษา sarcoma เนื้อเยื่ออ่อนขั้นสูงที่ไม่ใช่ adipocytic [2, 3] และมะเร็งรังไข่เยื่อบุผิว [4] Pazopanib เป็นสารยับยั้งไคเนสหลายไทโรซีนที่กําหนดเป้าหมายไปที่ตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของเยื่อบุผนังหลอดเลือด (VEGF) 1, 2 และ 3; Pazopanib เป็นสารยับยั้งไคเนสแบบหลายไทโรซีนที่กําหนดเป้าหมายไปที่ตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของเยื่อบุผนังหลอดเลือด (VEGF) 1, 2 และ 3; Pazopanib เป็นสารยับยั้งการเจริญเติบโตของเยื่อบุผนังหลอดเลือด (VEGF) 1, 2 และ 3; Pazopanib เป็นสารยับยั้งการเจริญเติบโตของเยื่อบุผนังหลอดเลือด (VEGF) 1, 2 และ 3; Pazopanib เป็นสารยับยั้งไค c-kit; และตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้จากเกล็ดเลือด (PDGF-R) [5] โรคอุจจาระร่วง, ความดันโลหิตสูง, ความเป็นพิษต่อหัวใจ, เหตุการณ์เลือดออกและลิ่มเลือดอุดตัน, การเจาะทางเดินอาหาร, ความผิดปกติทางระบบประสาท, ตับอ่อนอักเสบเฉียบพลัน, pneumothorax, และผลข้างเคียงของการเผาผลาญได้รับการปฏิบัติในระหว่างการใช้ pazopanib [6]. ในการทดลองทางคลินิกของ pazopanib, ความเป็นพิษต่อตับประจักษ์เป็นการเพิ่มขึ้นของเซรั่ม transaminase (อะลานีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ALT; aspartate aminotransferase, AST) และระดับบิลิรูบิน. ความเป็นพิษต่อตับอาจรุนแรงและถึงแก่ชีวิตได้ เอนไซม์ตับซีรั่มควรได้รับการตรวจสอบก่อนเริ่ม pazopanib และควรตรวจสอบซ้ําในสัปดาห์ที่ 3, 5, 7 และ 9; ในเดือนที่ 3 และ 4; และตามที่ระบุไว้ทางคลินิก หลังจากนั้นควรดําเนินการตรวจสอบเป็นระยะ เนื่องจากผลข้างเคียงที่สําคัญของ pazopanib นี้จึงมีคําเตือนแบบบรรจุกล่องเพื่อแจ้งเตือนผู้ป่วยและบุคลากรทางการแพทย์เกี่ยวกับความเสี่ยงที่อาจเกิดขึ้นจากความเสียหายของตับ [7] การตรวจคัดกรองสารยับยั้งไคเนสโมเลกุลขนาดเล็ก 31 ชนิดในหลอดทดลองที่ได้รับการรับรองจากสหรัฐอเมริกา องค์การอาหารและยาเปิดเผยว่าความเป็นพิษต่อตับที่เกี่ยวข้องกับ pazopanib เกี่ยวข้องกับความเสียหายของไมโตคอนเดรีย [8] ในการศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้อนุพันธ์ของอัลดีไฮด์และสาร n-oxide ของ pazopanib ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าทําให้เกิดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นและเพิ่มอนุมูลออกซิเจนอิสระจึงทําให้เกิดพิษต่อตับ [9–11] Mingard et al. แสดงให้เห็นว่ากลไกของความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก pazopanib เป็นหลักอาจเกิดจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นที่เพิ่มขึ้นในไมโตคอนเดรีย [12] ในบริบทนี้ข้อมูลจากวรรณกรรมแสดงให้เห็นว่าความเครียดออกซิเดชันเป็นหนึ่งในกลไกพื้นฐานของความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก pazopanib และสามารถกําจัดได้ด้วยการบําบัดด้วยสารต้านอนุมูลอิสระ ฟลาโวนอยด์เป็นหนึ่งในสารจากพืชที่ได้รับการศึกษาบ่อยที่สุดเนื่องจากมีการกระจายตัวอย่างกว้างขวางและความสามารถในต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพ [13] ไดไฮโดรฟลาโวนอลกลุ่มของฟลาโวนอยด์จัดแสดงกิจกรรมทางชีวภาพต่าง ๆ รวมถึงกิจกรรมการกําจัดแมลงชนิดออกซิเจนที่ทําปฏิกิริยา (ROS) และกิจกรรมการยึดโลหะ แท็กซี่โฟลิน (3,5,7,3',4'-pen-tahydroxy-flavanone หรือ 2,3-dihydroquercetin) เป็นหนึ่งในไดไฮโดรฟลาโวนอลที่มีส่วนประกอบเล็กน้อยของซิลิมาริน พิโนจินอล และเวโนรูตัน [14] Taxifolin มีอยู่ในเปลือกสนมาริไทม์ฝรั่งเศสเปลือกต้นสนดักลาสไม้ต้นสนชนิดหนึ่งไซบีเรียและผลไม้รสเปรี้ยวองุ่นน้ํามันมะกอกและหัวหอมในธรรมชาติ [15] สามารถสกัดและใช้งานได้ง่าย การศึกษาหลายชิ้นได้แสดงบทบาทของพวกเขาในการยับยั้งการก่อตัวของอนุมูลอิสระในระยะสําคัญของการตายของเซลล์โดยเฉพาะอย่างยิ่งในการบาดเจ็บจากภาวะขาดเลือดในสมอง [16, 17] นอกจากนี้ยังพบว่า Taxifolin มียาต้านมะเร็งและผลป้องกันระบบประสาท[18–20]. ในการศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้ Zhou et al. แสดงให้เห็นว่า taxifolin มีความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระสูง [21] เพื่อความรู้ที่ดีที่สุดของเราผลกระทบการป้องกันของ taxifolin ต่อความเป็นพิษต่อตับที่เกี่ยวข้องกับ pazopanib ยังไม่ได้รับการศึกษา ดังนั้นเราจึงมุ่งเป้าไปที่การตรวจสอบว่ามีผลกระทบในการป้องกันที่อาจเกิดขึ้นจาก taxifolin ต่อการบาดเจ็บที่ตับที่เกิดจาก pazopanib ในหนูหรือไม่

วัสดุและวิธีการ

หนูเผือก Wistar ตัวผู้สิบแปดตัวแต่ละตัวมีน้ําหนักระหว่าง 277-290 กรัมซึ่งจัดหามาจากศูนย์ทดลองและวิจัยทางการแพทย์ของมหาวิทยาลัย Ataturk ถูกนํามาใช้ในการศึกษา หนูถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่ม (หกกลุ่มในแต่ละกลุ่ม) และถูกเก็บไว้ในกรงในห้องที่มีอากาศถ่ายเทโดยมีแสง 12 ชั่วโมง / ช่วงมืด 12 ชั่วโมงที่อุณหภูมิคงที่ (22 ° C) และการเข้าถึงอาหารและน้ําฟรี การทดลองในสัตว์ได้ดําเนินการตามแนวทางของสถาบันสุขภาพแห่งชาติสําหรับการใช้งานและการดูแลสัตว์ทดลอง (NIH Publications No. 8023, ปรับปรุง 1978). การศึกษานี้ได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ท้องถิ่นของมหาวิทยาลัย Ataturk, Erzurum, ตุรกี (คณะกรรมการจริยธรรมฉบับที่: 2020/46 ลงวันที่ 16 เมษายน 2020) สารเคมี pazopanib ที่ใช้ในการทดลองนั้นจัดทําโดย Novartis (อิสตันบูลตุรกี) เคตามินจัดทําโดยไฟเซอร์ (อิสตันบูลตุรกี) และ taxifolin จัดทําโดย Evalar Russia (มอสโกรัสเซีย) กลุ่มทดลองสัตว์ทดลองแบ่งออกเป็น 3 กลุ่มต่อไปนี้: กลุ่มควบคุม (C), pazopanib เพียงอย่างเดียว (PP) และกลุ่ม taxifolin + pazopanib (TPP) ขั้นตอนการทดลอง Taxifolin ถูกรับประทานยาให้กับกลุ่ม TPP (n = 6) ด้วยยา 50 มก. / กก. โดย gavage เข้าไปในกระเพาะอาหาร. น้ํากลั่นทั้งหมด 0.5 มล. ถูกฉีดด้วยวาจาไปยังกลุ่ม C (n= 6) และ PP (n = 6) เป็นตัวทําละลาย หนึ่งชั่วโมงหลังจาก taxifolin หรือน้ํากลั่นได้รับ, pazopanib 200 มิลลิกรัม /kg ถูกบริหารให้กับกลุ่ม TPP และ PP ผ่านทางกระเพาะอาหาร. เรากําหนดปริมาณของ taxifolin และ pazopanib จากการศึกษาก่อนหน้านี้ พบว่า Taxi-folin มีประสิทธิภาพด้วยขนาด 50 มก./กก. ในการรักษาความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นที่เกิดจากซิสพลาติน [22] นอกจากนี้การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า pazopanib เป็นพิษต่อตับในขนาด 150–300 มก. / กก. [9] ขั้นตอนข้างต้นซ้ําแล้วซ้ําอีกวันละครั้งเป็นเวลาสี่สัปดาห์ ในตอนท้ายของช่วงเวลานี้สัตว์ทุกตัวถูกสังเวยภายใต้การดมยาสลบด้วยคีตามีนขนาดสูง (120 มก. / กก.) ร่วมกับ diazepam (5 มก. / กก.) เนื้อเยื่อตับของหนูถูกกําจัดออกเพื่อวัดระดับ malondialdehyde (MDA), กลูตาไธโอนทั้งหมด (TSH), สถานะออกซิแดนท์ทั้งหมด (TOS) และระดับสถานะสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด (TAS) เนื้อเยื่อตับถูกตรวจสอบทางจุลพยาธิวิทยา นอกจากนี้ยังมีการวัดกิจกรรม ALT, AST และแลคเตทดีไฮโดรจีเนส (LDH) ในตัวอย่างเลือดของสัตว์

Improve immunity

Cistanche สามารถปรับปรุงภูมิคุ้มกันได้

สารเคมี

pazopanib ที่ใช้ในการทดลองจัดทําโดย Novartis (อิสตันบูลตุรกี) ketamin จัดหาโดย Pfizer (อิสตันบูลตุรกี) และ taxifolin จัดทําโดย Evalar Russia (มอสโกรัสเซีย)

กลุ่มทดลอง

สัตว์ทดลองแบ่งออกเป็น 3 กลุ่มต่อไปนี้: กลุ่มควบคุม (C), pazopanib เพียงอย่างเดียว (PP) และกลุ่ม taxifolin + pazopanib (TPP)

ขั้นตอนการทดลอง

Taxifolin ได้รับยารับประทานให้กับกลุ่ม TPP (n = 6) ด้วยยา 50 มก. / กก. โดย gavage เข้าไปในกระเพาะอาหาร. น้ํากลั่นทั้งหมด 0.5 มล. ถูกฉีดด้วยวาจาไปยังกลุ่ม C (n= 6) และ PP (n = 6) เป็นตัวทําละลาย หนึ่งชั่วโมงหลังจาก taxifolin หรือน้ํากลั่นได้รับ, pazopanib 200 มิลลิกรัม /kg ถูกบริหารให้กับกลุ่ม TPP และ PP ผ่านทางกระเพาะอาหาร. เรากําหนดปริมาณของ taxifolin และ pazopanib จากการศึกษาก่อนหน้านี้ พบว่า Taxi-folin มีประสิทธิภาพด้วยขนาด 50 มก./กก. ในการรักษาความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นที่เกิดจากซิสพลาติน [22] นอกจากนี้การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า pazopanib เป็นพิษต่อตับในขนาด 150–300 มก. / กก. [9] ขั้นตอนข้างต้นซ้ําแล้วซ้ําอีกวันละครั้งเป็นเวลาสี่สัปดาห์ ในตอนท้ายของช่วงเวลานี้สัตว์ทุกตัวถูกสังเวยภายใต้การดมยาสลบด้วยคีตามีนขนาดสูง (120 มก. / กก.) ร่วมกับ diazepam (5 มก. / กก.) เนื้อเยื่อตับของหนูถูกลบออกเพื่อวัดระดับ malondialdehyde (MDA), กลูตาไธโอนทั้งหมด (นี้), สถานะออกซิแดนท์ทั้งหมด (TOS) และระดับสถานะสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด (TAS) เนื้อเยื่อตับถูกตรวจสอบทางจุลพยาธิวิทยา นอกจากนี้ยังมีการวัดกิจกรรม ALT, AST และแลคเตทดีไฮโดรจีเนส (LDH) ในตัวอย่างเลือดของสัตว์ เก็บตัวอย่างเลือดจากหลอดเลือดดําหางด้านข้าง ของหนูที่ไม่ดมยาสลบ หลังจากรักษาหางด้วยความอบอุ่น น้ําหลอดเลือดขยายตัวได้ดีและเหมาะสม สําหรับการจัดการ

การวิเคราะห์ทางชีวเคมี

สําหรับการวิเคราะห์ทางชีวเคมีของเนื้อเยื่อตับมีการเตรียม homogenates จากเนื้อเยื่อและ 0.2 กรัมของตัวอย่างถูกนํามาจากเนื้อเยื่อแต่ละชิ้น ระดับกลูตาไธโอนและมาลอนเดียลดีไฮด์ทั้งหมดในสารเหนือธรรมชาติที่ได้จากโฮโมจีเนตเหล่านี้ถูกกําหนดโดยใช้วิธีการที่เหมาะสมตามวรรณคดี เนื้อเยื่อถูกทําให้เป็นเนื้อเดียวกันในบัฟเฟอร์ฟอสเฟตเย็นน้ําแข็ง (50 mM, pH 7.4) ที่เหมาะสมสําหรับตัวแปรที่จะวัด เนื้อเยื่อ homogenates ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 5,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 ° C และ supernatants ถูกสกัดเพื่อวิเคราะห์สิ่งนี้และ MDA การวัดค่าสเปกโตรโฟโตเมตริกทั้งหมดดําเนินการผ่านเครื่องอ่านไมโครเพลท (BioTek, Winooski, VT, USA)

การวิเคราะห์มาลอนเดียลดีไฮด์ (MDA)

การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ MDA ขึ้นอยู่กับแนวทางที่ใช้โดย Ohkawa et al. ที่เกี่ยวข้องกับการวัดการดูดกลืนแสงของสเปกโตรโฟโตเมตริกของการดูดซับของคอมเพล็กซ์สีชมพูที่เกิดจากกรดไธโอบาร์บิทูริก (TBA) และ MDA ตัวอย่างเนื้อเยื่อ-โฮโมจีเนต (25 ไมโครลิตร) ถูกเพิ่มเข้าไปในสารละลายที่มีโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต 80 กรัม/ลิตร 25 ไมโครลิตร และสารละลายผสม 1 มล. (กรดอะซิติก 200 กรัม/ลิตร + 1.5 มล. ของ 8 กรัม/ลิตร 2-ไทโอบาร์บิทูเรต) [23] ส่วนผสมถูกบ่มที่ 95 ° C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เมื่อเย็นตัวลง n-butanolpyridine 1 มล. (15:1) ก็ถูกเพิ่มเข้ามา ส่วนผสมถูกกระแสน้ําวนเป็นเวลา 1 นาทีและหมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 10 นาทีเวลา 16,000 น. การดูดซับของสิ่งเหนือธรรมชาติวัดที่ 532 นาโนเมตร เส้นโค้งมาตรฐานได้มาจากวิธีการโดยใช้โพรเพนเมทอกซี 1,1,3,3,3-เตตระ

การวิเคราะห์กลูตาไธโอนทั้งหมด

กลูตาไธโอนทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์โดยใช้วิธีการที่กําหนดโดย Sedlak และ Lindsay DTNB (5,5'dithiobis [กรด 2ni-trobenzoic]) ไดซัลไฟต์เป็นสื่อกลางของโครโมเจนิก และ DTNB จะลดลงได้ง่ายโดยใช้กลุ่มซัลฟอยด์ริล [24] สีเหลืองในระหว่างการลดจะถูกวัดผ่านสเปกโตรโฟโตเมตรีที่ 412 นาโนเมตร สําหรับการวัดสารละลายค็อกเทล (บัฟเฟอร์ Na-ฟอสเฟต 5.85 มล. 100 mM, 2.8 มล. 1 mM DTNB 3.75 มล. 1 mM NADPH และกลูตาไธโอนรีดิวเทส 80 μl 625 U / l) ถูกเตรียมไว้ ก่อนการวัดกรดเมตาฟอสฟอริก 0.1 มล. ถูกเพิ่มเข้าไปในเนื้อเยื่อ - homogenate 0.1 มล. และหมุนเหวี่ยงเป็นเวลา 2 นาทีที่ 2,000 รอบต่อนาทีเพื่อ deproteinization จากนั้นสารละลายค็อกเทลขนาด 0.15 มล. ก็ถูกเพิ่มเข้าไปในสารเหนือธรรมชาติ 50 ไมโครลิตร กราฟมาตรฐานได้มาจากการใช้กลูตาไธโอนไดซัลไฟด์ (GSSG)

การวัดค่า TOS และ TAS

ระดับ TOS และ TAS ของ homogenates เนื้อเยื่อถูกวัดโดยใช้วิธีการที่ทันสมัยอัตโนมัติของการกําหนดและชุดอุปกรณ์ที่มีอยู่ (Rel Assay Diagnostics, Sehitkamil, ตุรกี) ซึ่งแต่ละชิ้นผลิตโดย Erel et al. [25,26] วิธีการวัด TAS ขึ้นอยู่กับการฟอกสีโดยสารต้านอนุมูลอิสระของสีลักษณะของ ABTS ที่เสถียรกว่า (2,2'-and-bis (3-ethylbenzothiazoline- 6-sulfonic acid)) ไอออนบวกที่รุนแรงและการวัดที่ 660 นาโนเมตร ผลลัพธ์แสดงเป็นนาโนมอลไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2) เทียบเท่า/ลิตร ในวิธี TOS สารออกซิแดนท์ที่มีอยู่ในตัวอย่างจะออกซิไดซ์คอมเพล็กซ์ไอออน - โอเดียนิซิดีนเหล็กกับเฟอร์ริกไอออน โมเลกุลกลีเซอรอลซึ่งมีอยู่มากมายในตัวกลางปฏิกิริยาได้ปรับปรุงปฏิกิริยาออกซิเดชั่น ไอออนเฟอร์ริกผลิตคอมเพล็กซ์สีที่มีสีส้มไซลินอลในตัวกลางที่เป็นกรด ความเข้มของสีซึ่งสามารถวัดค่าสเปกโตรโฟโตเมตริกได้ที่ 530 นาโนเมตรนั้นสัมพันธ์กับปริมาณโมเลกุลออกซิแดนท์ทั้งหมดที่มีอยู่ในตัวอย่าง ผลลัพธ์แสดงเป็น μmol Trolox เทียบเท่า/ลิตร ดัชนีความเครียดออกซิเดชัน (OSI) ถูกใช้เป็นอัตราส่วนร้อยละของ TOS ต่อ TAS OSI คํานวณเป็น TOS / TAS × 100

การวิเคราะห์ ALT

การหาปริมาณเรซิน ALT ของซีรั่มดําเนินการโดยวิธีสเปกโตรโฟโตเมตริกด้วยเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติ Roche Cobas 8000 ปฏิกิริยาระหว่าง L-อะลานีนและ 2-oxoglutarate ถูกเร่งปฏิกิริยาโดย 3,4 ALT. ไพรูเวตที่เกิดขึ้นจะลดลงโดย NADH ในปฏิกิริยาที่เร่งปฏิกิริยาโดย L-แลคเตทและ LDH ซึ่ง NAD+ ถูกสร้างขึ้น ไพริดอกซัลฟอสเฟตทําหน้าที่เป็นโคเอนไซม์ในปฏิกิริยาการถ่ายโอนอะมิโน ช่วยให้มั่นใจได้ถึงการกระตุ้นเอนไซม์อย่างสมบูรณ์ แอล-อะลานีน + 2-ออกโซกลูตาเรตให้ผลผลิต (ALT) ไพรูเวต + แอล-กลูตาเมต และไพรูเวต + NADH + H+ ให้ผลผลิต (LDH) L-แลคเตท + NAD+ อัตราของอัตราการออกซิเดชั่น NADH เป็นสัดส่วนโดยตรงกับกิจกรรม ALT ตัวเร่งปฏิกิริยา การวิเคราะห์ AST การหาปริมาณ AST ของซีรั่ม AST ดําเนินการโดยวิธีสเปกโตรโฟโตเมตริกด้วยเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติ Roche Cobas 8000

ตัวเร่งปฏิกิริยา AST

การถ่ายโอนกลุ่มอะมิโนระหว่าง L-aspartate และ 2-oxoglutarate เพื่อสร้าง 3,4 AST ออกซาโลอะซิเตตและ L-กลูตาเมตในตัวอย่าง จากนั้นออกซาโลอะซิเตตจะทําปฏิกิริยากับ NADH ต่อหน้ามาเลตดีไฮโดรจีเนส (MDH) เพื่อสร้าง NAD+ ไพริดอกซัลฟอสเฟตทําหน้าที่เป็นโคเอนไซม์ในปฏิกิริยาการถ่ายโอนอะมิโน L-แอสพาร์เตต + ผลผลิต 2-ออกโซกลูตาเรต (AST) ออกซาโลอะซิเตต + แอล-กลูตาเมต และออกซาโลอะซิเตต + NADH + H+ ให้ผลผลิต (MDH) L-malate + NAD+ อัตราการเกิดออกซิเดชันของ NADH เป็นสัดส่วนโดยตรงกับกิจกรรม AST ตัวเร่งปฏิกิริยา

การวิเคราะห์ LDH

การกําหนดปริมาณเซรั่ม LDH ดําเนินการโดยวิธีสเปกโตรโฟโตเมตริกด้วยเครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติ Roche Cobas 8000 นี่เป็นวิธีการมาตรฐานที่ปรับให้เหมาะสมตาม Deutsche Gesellschaft für Klinische Chemie (DGKC) LDH เร่งปฏิกิริยาระหว่างไพรูเวตและ NADH เพื่อสร้าง NAD+ ด้วย L-แลคเตท ไพรูเวต + NADH + H + ผลผลิต (LDH) L-แลคเตท + NAD + อัตราเริ่มต้นของการเกิดออกซิเดชัน NADH เป็นสัดส่วนโดยตรงกับกิจกรรม LDH ตัวเร่งปฏิกิริยา การลดลงของการดูดซับถูกกําหนดโดยการวัดที่ 340 นาโนเมตร

การตรวจทางจุลพยาธิวิทยา

เนื้อเยื่อตับถูกวางไว้ในสารละลายฟอร์มาลินบัฟเฟอร์ 10% หลังจากเนื้อร้ายของหนู จากนั้นตัวอย่างจะถูกติดตามผลเป็นประจําและฝังอยู่ในบล็อกพาราฟิน ส่วนห้าไมโครเมตรถูกนํามาจากบล็อกวางลงบนสไลด์และอยู่ภายใต้การตรวจทางพยาธิวิทยาของเขาภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสงด้วยการย้อมสี hematoxylin-eosin การประเมินการตกเลือดการเสื่อมสภาพของไฮโดรปิคและเนื้อร้ายได้ดําเนินการกึ่งปริมาณ 0 ไม่มี; 1, อ่อน; 2 ปานกลาง; และ 3 รุนแรง

การวิเคราะห์ทางสถิติ

การวิเคราะห์ทางสถิติดําเนินการโดยใช้ IBM SPSS Statistics สําหรับ Windows เวอร์ชัน 19.0 Armonk, NY, USA สถิติเชิงพรรณนาถูกคํานวณสําหรับแต่ละตัวแปร ผลลัพธ์ถูกบันทึกเป็นค่าเฉลี่ย± SD สําหรับตัวแปรต่อเนื่อง ความสําคัญของความผันแปรระหว่างกลุ่มถูกกําหนดโดยใช้วิธีการวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) ตามด้วยการวิเคราะห์โดยการทดสอบตุรกี ค่า P<0.05 was="" considered="" significant.="" in="" the="" histopathological="" examination,="" the="" differences="" between="" the="" groups="" were="" determined="" by="" the="" kruskal-wallis="" test,="" which="" is="" one="" of="" the="" nonparametric="" tests,="" and="" groups="" that="" exhibited="" differences="" were="" determined="" by="" the="" mann-whitney="" u="" test.="" between-group="" statistical="" differences="" for="" body="" weight="" changes="" of="" the="" rats="" were="" analyzed="" using="" the="" paired="">

ผล

ผลทางชีวเคมี

ระดับค่าเฉลี่ยและค่ามัธยฐานของพารามิเตอร์แสดงอยู่ในตารางที่ 1 ระดับซีรั่ม ALT, AST และ LDH สูงขึ้นอย่างมีนัยสําคัญในกลุ่ม PP เมื่อเทียบกับกลุ่ม C และ TPP (P<0.001). alt="" and="" ast="" levels="" were="" higher="" in="" the="" tpp="" group="" compared="" with="" the="" c="" group=""><0.001;><0,01); however,="" alt="" and="" ast="" levels="" were="" significantly="" decreased="" in="" the="" tpp="" compared="" with="" the="" pp="" group.="" there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" the="" c="" and="" tpp="" groups="" in="" terms="" of="" ldh="" levels=""><0.001) (fig.="" 1).="" mda="" levels="" were="" significantly="" higher="" in="" the="" pp="" group="" compared="" with="" the="" c="" and="" tpp="" groups=""><0.001). the="" levels="" were="" significantly="" lower="" in="" the="" pp="" group="" compared="" with="" the="" c="" and="" ttp="" groups=""><0.001). there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" c="" and="" tpp="" groups="" in="" terms="" of="" mda=""><0.001). tsh="" levels="" were="" lower="" in="" the="" tpp="" group="" compared="" with="" the="" c="" group=""><0.001) but="" compared="" with="" the="" pp="" group,="" the="" tsh="" levels="" were="" significantly="" increased="" in="" the="" tpp="" group="" (fig.="" 2).="" tos="" levels="" were="" significantly="" higher="" in="" the="" pp="" group="" compared="" with="" the="" c="" and="" tpp="">

มะเดื่อ. 1. ผลกระทบของ taxifolin ต่อระดับ AST, ALT และ LDH ใน ตัวอย่างเลือดของหนูที่ได้รับ pazopanib แถบแสดงการ หมายถึง± SD

การอภิปราย

Pazopanib เป็นตัวแทนในช่องปากที่ยับยั้งไทโรซีนไคเนสซึ่งเกี่ยวข้องกับปัจจัยการเจริญเติบโตของเยื่อบุผนังหลอดเลือดปัจจัยการเจริญเติบโตของเกล็ดเลือด, และตัวรับ Kit. มันเป็นการรักษาที่มีประสิทธิภาพสําหรับมะเร็งเซลล์ไตขั้นสูง (RCC) และเนื้อเยื่ออ่อน sarcoma [27–29] ความเป็นพิษต่อตับเป็นปัญหาสําหรับการประยุกต์ใช้ทางคลินิก ระดับความสูง ALT และ AST ที่เกิดจาก Pazopanib มักพบในผู้ป่วยและอยู่ในช่วง 46 ถึง 60% สําหรับเกรดความเป็นพิษทั้งหมดตั้งแต่ 8 ถึง 15% สําหรับความเป็นพิษระดับ 3 และจาก<1% to="" 2%="" for="" grade="" 4="" toxicity="" [7].="" a="" meta-analysis="" of="" clinical="" trials="" of="" pazopanib="" confirmed="" a="" 42%="" incidence="" of="" all-grade="" alt="" increase="" and="" an="" 8.2%="" incidence="" of="" high-grade="" alt="" increase="" [30].="" pazopanib-induced="" hepatotoxicity="" has="" been="" associated="" with="" the="" hfe="" (hemochromatosis="" gene)="" mutation="" on="" chromosome="" 6="" [31],="" but="" the="" exact="" mechanisms="" of="" pazopanib-induced="" liver="" injury="" remain="" unclear.="" cetin="" et="" al.="" demonstrated="" the="" pazopanib-induced="" hepatotoxicity="" biochemically="" and="" histopathologically="" in="" an="" experimental="" rat="" model="" [32].="" wang="" et="" al.="" demonstrated="" that="" pazopanib="" triggered="" oxidative="" stress,="" increased="" free="" oxygen="" radicals,="" and="" caused="" hepatotoxicity="" [9].="" it="" has="" also="" been="" reported="" that="" pazopanib-induced="" hepatotoxicity="" can="" be="" due="" to="" increased="" oxidative="" stress="" in="" mitochondria="" [12].="" these="" findings="" indicate="" that="" oxidative="" stress="" can="" be="" an="" important="" mechanism="" of="" pazopanib-induced="" hepatotoxicity.="" flavonoids="" are="" one="" of="" the="" main="" groups="" of="" plant="">สารต้านอนุมูลอิสระและมีคุณสมบัติคีเลตสูง

พบกันอย่างแพร่หลายในใบและดอกของพืช และยังพบอย่างมากมายในอาหารและเครื่องดื่มที่ทําจากพืช [34] Taxifolin (3,5,7,3,4-Penta-hydroxy flavanone หรือ dihydroquercetin) เป็นฟลาโวนอลซึ่งเป็นคลาสย่อยของฟลาโวนอยด์และส่วนใหญ่พบในผลไม้รสเปรี้ยวหัวหอมน้ํามันมะกอก ฯลฯ [35] Topal et al. แสดงให้เห็นว่า taxifolin มีสารต้านอนุมูลอิสระที่สําคัญการไล่ล่าอย่างรุนแรงและกิจกรรมคีเลต พวกเขาแนะนําว่าสามารถใช้ในอุตสาหกรรมอาหารและยาเพื่อลดการก่อตัวของผลิตภัณฑ์ออกซิเดชั่นที่เป็นพิษ [36] คาร่าและเพื่อนร่วมงานแสดงให้เห็นว่า taxifolin มีผลในการป้องกันที่ช่วยลดการบาดเจ็บของไตออกซิเดชันที่เกิดจากซิสพลาติน [37] ในการศึกษานี้เราได้ตรวจสอบผลการป้องกันของ taxifolin ต่อความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก pazopanib ในหนู ผลทางชีวเคมีของเราบ่งชี้ว่า pazopanib เพิ่มขึ้น ระดับของ MDA และ TOS ซึ่งเป็นพารามิเตอร์ออกซิแดนท์และลดระดับของ TSH และ TAS ซึ่ง เป็นพารามิเตอร์สารต้านอนุมูลอิสระในเนื้อเยื่อตับของหนู ในทํานองเดียวกันระดับเซรั่ม AST, ALT และ LDH ก็สูงขึ้นอย่างมีนัยสําคัญในกลุ่ม PP เมื่อเทียบกับ TPP กลุ่ม Pazopanib ทําให้เกิดการตกเลือดการเสื่อมสภาพของไฮโดรปิกและเนื้อร้ายในเนื้อเยื่อตับหนู การตรวจทางจุลพยาธิวิทยาพบว่าความเสียหายของตับลดลง pazopanib ในกลุ่ม TPP ลดลง. เราตั้งข้อสังเกตว่า taxifolin ในขนาด 50 มก. / กก. มีจุลพยาธิวิทยาและ ผลการป้องกันทางชีวเคมีต่อ pazopanib ที่เกิดจาก ความเป็นพิษต่อตับออกซิเดชัน ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่า pazopanib เปลี่ยนความสมดุลของสารออกซิแดนท์และสารต้านอนุมูลอิสระในความโปรดปราน ของสารออกซิแดนท์ในเนื้อเยื่อตับของหนูและต่อมา ทําให้เนื้อเยื่อตับเสียหายและเพิ่ม AST ซีรั่ม ระดับ ALT และ LDH ผลทางชีวเคมีของสิ่งนี้ การศึกษามีความสอดคล้องอย่างเต็มที่กับจุลพยาธิวิทยา ผลลัพธ์ Taxifolin ยับยั้งผลต้านอนุมูลอิสระของ pazopanib

Prevent Alzheimer's disease

Cistanche สําหรับโรคอัลไซเมอร์

Conclusıon

โดยสรุปเราได้แสดงให้เห็นเป็นครั้งแรก ในวรรณคดีที่ว่า taxifolin สามารถป้องกันความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจาก pazopanib ในแบบจําลองหนู ผลการศึกษาที่มีแนวโน้มของการศึกษานี้บ่งชี้ว่าจําเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อทดสอบสารนี้ในแบบจําลองสัตว์อื่น ๆ และใน มนุษย์

หนังสืออ้างอิง

1. Pal SK, Hossain DMS, จาง Q, แฟรงเกล พีเอช, โจนส์ โจนส์ โจ, คาร์-ไมเคิล ซี และคณะ Pazopanib เป็นการรักษาบรรทัดที่สามสําหรับมะเร็งเซลล์ไตระยะแพร่กระจาย: ประสิทธิภาพทางคลินิกและการวิเคราะห์ทางโลกของโปรไฟล์ไซโตไคน์ J Urol. 2015; 193: 1114–1121. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
2. เอ็นโดเอ็ม, นีลเซ่น TO. Pazopanib สําหรับซิโคมาเนื้อเยื่ออ่อนระยะแพร่กระจาย มีดหมอ. 2012; 380: 801 ผู้เขียนตอบ 801 [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
3. Karch A, Koch A, Grünwald V. การทดลองระยะที่ 2 เปรียบเทียบ pazopanib กับ doxorubicin เป็นการรักษาบรรทัดแรกในผู้ป่วยสูงอายุที่มี sarcoma เนื้อเยื่ออ่อนระยะแพร่กระจายหรือขั้นสูง (EPAZ): โปรโตคอลการศึกษาสําหรับการทดลองแบบสุ่มที่มีกลุ่มควบคุม ทดลอง 2016; 17: 312. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
4. Dinkic C, Eichbaum M, Schmidt M, Grischke EM, Gebauer G, Fricke HC, et al. Pazopanib (GW786034) และ cyclophosphamide ในผู้ป่วยมะเร็งรังไข่ที่ดื้อต่อแพลตตินัมกําเริบกําเริบก่อนการรักษา - ผลการทดลอง PACOVAR กี-ยีเนโคล ออนคอล. ... 2017; 146: 279–284. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
5. Sleijfer S, Ray-Coquard I, Papai Z, Le Cesne A, Scurr M, Schöffski P, et al. Pazopanib ซึ่งเป็นสารยับยั้งการสร้างเส้นเลือดใหม่แบบ multikinase ในผู้ป่วยที่มีเนื้อเยื่ออ่อนขั้นสูงที่กําเริบหรือทนไฟ: การศึกษาระยะที่สองจากองค์กรในยุโรปเพื่อการวิจัยและการรักษาเนื้อเยื่ออ่อนมะเร็งและกลุ่มเนื้องอกกระดูก (การศึกษา EORTC 62043) เจ คลิน ออนคอล. ... 2009; 27: 3126–3132. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
6. เลือก AM, Nystrom KK Pazopanib สําหรับการรักษามะเร็งเซลล์ไตระยะแพร่กระจาย คลินธีร์. ... 2012; 34: 511–520. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]

7. การบริหารข้อมูลการสั่งจ่ายยา USF และ D. Pazopanib (Votrient) 2010.
8. จางเจ, ซัลมิเนนเอ, หยาง X, ลั่ว Y, อู๋คิว, ไวท์เอ็ม, และคณะ ผลของสารยับยั้งไคเนสโมเลกุลขนาดเล็กที่ได้รับการรับรองจาก FDA 31 ชนิดต่อไมโตคอนเดรียในตับหนูที่แยกได้. อาร์ค พิษอล. ... 2017; 91: 2921–2938. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
9. Wang YK, Yang XN, Liang WQ, Xiao Y, Zhao Q, Xiao XR, et al. มุมมองเมตาโบโลมิกของพิษต่อตับเฉียบพลันที่เกิดจาก pazopanib ในหนู Xenobiotica. 2019; 49: 655–670. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
10. หยางเอ็ม, เรือนเจ, เกาเอช, หลี่ N, หม่าเจ, เสวียนเจ, และคณะ. หลักฐานแรกของ pyrrolizidine อัลคาลอยด์ N-ออกไซด์ที่เกิดจากโรคไซนัสอุดตันในตับในมนุษย์. อาร์ค พิษอล. ... 2017; 91: 3913–3925. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
11. Choudhury Y, Toh YC, Xing J, Qu Y, Poh J, Li H, et al. เซลล์ที่มีลักษณะคล้ายเซลล์ตับเฉพาะผู้ป่วยที่ได้มาจากเซลล์ต้นกําเนิดพหูพจน์เหนี่ยวนําให้เกิดแบบจําลองความเป็นพิษต่อตับที่เป็นสื่อกลางของ pazopanib ตัวแทนวิทย์. 2017; 7: 41238. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
12. Mingard C, Paech F, Bouitbir J, Krähenbühl S. กลไกของความเป็นพิษที่เกี่ยวข้องกับสารยับยั้งไทโรซีนไคเนสหกตัวในเซลล์ตับของมนุษย์ เจ แอปเพล พิษอล. ... 2018; 38: 418–431. [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]
13. กุมาร เอส, แพนดีย์ เอเค. 2013. เคมีและกิจกรรมทางชีวภาพของฟลาโวนอยด์: ภาพรวม. ScientificWorldวารสาร 2013: 162750 [เมดไลน์] [ครอสรีฟ]