ผลการป้องกันของ Glycoside ทั้งหมดจาก Cistanche Salsa ต่อการบาดเจ็บของตับจากการทดลอง

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964audrey.hu@wecistanche.com

Wang Yanfang, Zhao Jijun, Hai Pengli, Xue Peifeng, หลี่ฮุ่ย, หลี่หมินฮุ่ย

เชิงนามธรรม

ในการทดลองนี้ ได้มีการสร้างแบบจำลองการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์ในหนูทดลอง และใช้ตัวบ่งชี้ทางชีวเคมีของการทำงานของตับและการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาของตับเป็นตัวบ่งชี้การตรวจสอบ ตรวจสอบผลการป้องกันของ glycoside ทั้งหมดของ cistanche salsa ต่อการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์ในการทดลอง. ให้ทั้งหมดไกลโคไซด์ของ cistanche salsaปริมาณสูง (130 มก./กก.) และขนาดปานกลางโดยทางสายยาง (100 มก./กก.) ขนาดยาต่ำ (65 มก./กก.) และยาบิดเนตเตต (150 มก./กก.) เป็นยากลุ่มควบคุมเชิงบวก ผลการศึกษาพบว่า ALT และ AST ในซีรัมเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ กิจกรรม SOD ในตับลดลงและเนื้อหา MDA เพิ่มขึ้น ไขมันในเซลล์ตับปรากฏขึ้น ไกลโคไซด์รวมของกลุ่มยาซัลซ่าซิสทานเช่ในปริมาณสูงมีประสิทธิภาพในการปรับปรุงดัชนีการทำงานของตับและลดการเสื่อมของไขมันในเซลล์ตับ บนพื้นฐานนี้ การกำหนดเบื้องต้นของเอ็กไคนาโคไซด์และแอคทีโอไซด์ปริมาณรวมของ glycoside ของ cistanche salsa คือ 29.1 เปอร์เซ็นต์ การทดลองข้างต้นแสดงให้เห็นว่า glycoside ทั้งหมดของ cistanche salsa มีผลในการป้องกันอาการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์ในหนูทดลอง และยังได้รับการยืนยันด้วยว่า echinacoside และ acteoside เป็นส่วนประกอบสำคัญของ glycoside ทั้งหมดของ cistanche salsa

คำสำคัญ: ไกลโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนเช่ซัลซ่า; โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง แอคทีโอไซด์; อิชินาโคไซด์; อาการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์

Citanche ซัลซ่าเป็นพืช Cistanche ของตระกูล Orobanchaceae (Orobanchaceae) หรือที่รู้จักในชื่อ salina ซึ่งเป็นไม้ยืนต้นที่เป็นกาฝากกระจายอยู่ทั่วไปในทะเลทราย ทะเลทราย และพื้นที่แห้งแล้งอื่นๆ พื้นที่การผลิตหลักอยู่ในซินเจียงและมองโกเลียใน 1]. เนื่องจากข้อเท็จจริงที่ว่า Herba Cistanche ของตระกูลเดียวกันและในสกุลเดียวกันได้รับการขุดค้นในปริมาณมาก และพืชกาฝากนั้นยากที่จะสืบพันธุ์ ทรัพยากรทางการแพทย์ก็ลดลงทุกวัน และเป็นการยากที่จะตอบสนองความต้องการของตลาด ในประเทศของเรา ซัลซ่า cistanche พื้นบ้านถูกใช้แทน cistanche deserticola แต่มีรายงานการวิจัยเพียงเล็กน้อย เพื่อชี้แจงคุณค่าทางยาให้ชัดเจนยิ่งขึ้น ไกลโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนเช่ซัลซ่า (กลัยโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนเช่ซัลซ่า) ซึ่งเป็นกลุ่มของสารที่มีฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ได้รับการศึกษาทางเภสัชวิทยาไกลโคไซด์ทั้งหมดของ cistanche salsa มีผลในการป้องกันเส้นประสาท[2] และสามารถปกป้อง DNA จากความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจากไฮดรอกซิล (OH·) [3] Cistanche salsa phenylethanoid glycosides สามารถเพิ่มกิจกรรม superoxide dismutase (SOD) ในเนื้อเยื่อหัวใจ ตับ และสมองของหนูเมาส์ได้อย่างมีนัยสำคัญ [4] การวิจัยข้างต้นชี้ให้เห็นว่าไกลโคไซด์ทั้งหมดของ cistanche salsaมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ

อุบัติการณ์ของโรคตับจากแอลกอฮอล์ (ALD) เพิ่มขึ้นทุกปีในประเทศของฉัน แอลกอฮอล์กลายเป็นสาเหตุอันดับสองของความเสียหายของตับ รองจากไวรัสตับอักเสบ [5] สำหรับการรักษาอาการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์นั้น ยังขาดยาที่ปลอดภัยและมีประสิทธิภาพ วิธีการใช้ทรัพยากรพืชเพื่อพัฒนายาป้องกันแอลกอฮอล์และปกป้องตับและผลิตภัณฑ์เพื่อสุขภาพได้รับความสนใจอย่างกว้างขวางในอุตสาหกรรมยาและอาหาร หลังจากที่มีการตีพิมพ์อย่างกว้างขวาง พบว่าอาการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์เกี่ยวข้องกับความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และรวม glycoside ของ cistanche salsa มีผลต่อการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์ย. การวิจัยเกี่ยวกับผลการป้องกันยังคงว่างเปล่า การวิจัยในการทดลองนี้เป็นพื้นฐานทางวิทยาศาสตร์สำหรับการพัฒนาและการใช้ประโยชน์จากไกลโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนเช่ซัลซ่า

1 วัสดุและอุปกรณ์

1. 1 ยาและน้ำยา

ซิสแทนเช่ ซัลซ่าจัดทำโดยห้องปฏิบัติการหลักของการระบุและมาตรฐานยาสมุนไพรของมองโกเลีย วิทยาลัยการแพทย์เป่าโถว ยาหยอด Bifendate (Zhejiang Wanbang Pharmaceutical Co., Ltd., หมายเลขแบทช์ A02121139); ชุดอะลานีนอะมิโนทรานส์เฟอเรส (ALT), ชุดกรดอะมิโนทรานส์เฟอเรส (AST), ชุดทดสอบมาลอนไดอัลดีไฮด์ (MDA), ชุดซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเทส (SOD), ชุดตรวจวัดโปรตีนสีน้ำเงินสดใส Coomassie (สถาบันวิศวกรรมชีวภาพหนานจิง Jiancheng, หมายเลขชุด 20110422); สุรา 56 องศา (Beijing Red Star Co., Ltd.); รีเอเจนต์อื่น ๆ นั้นบริสุทธิ์ในประเทศ

1. สัตว์ 2 ตัว

หนู 72 ตัวของสายพันธุ์คุนหมิง มีน้ำหนัก 17-22 ก. (ศูนย์สัตว์ทดลองของมหาวิทยาลัยมองโกเลียใน ใบรับรองคุณสมบัติสัตว์หมายเลข:6 (มองโกเลีย 2002-0001))

1. 3 ตราสาร

เครื่องวัดสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่มองเห็นด้วยรังสีอัลตราไวโอเลต [Unico (Shanghai) Instrument Co., Ltd., รุ่น UV-2000]; เครื่องอ่านไมโครเพลท (เบ็คแมน โคลเตอร์ สหรัฐอเมริกา รุ่น AD340); เครื่องหมุนเหวี่ยงความเร็วสูง (Hangzhou Aipu Instrument Equipment Co., Ltd. รุ่น TG18-WS); โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (Thermo Fisher Scientific, Model Ultimate 3000); เครื่องชั่งเชิงวิเคราะห์ (METTLER TOLEDO Instruments Co., Ltd. รุ่น AR153O); Ultrasonic Oscillator (Shanghai Branson รุ่น SB3200); สารดูดความชื้นแช่แข็ง (Beijing Boyikang Experimental Instrument Co., Ltd., รุ่น FD-1-50)

2 วิธีการและผลลัพธ์

2. 1 การศึกษาปริมาณไกลโคไซด์รวมของกิจกรรมซัลซ่าซิสแทนเช่

2. 1. 1 รวมไกลโคไซด์ของการสกัดซัลซ่า cistanche

2. 1. 1. 1 การสกัดสารสกัดหยาบ

ชั่งผงหยาบ cistanche salsa 100 กรัม เติมเอทานอล 70 เปอร์เซ็นต์ 600 มล. และแช่ไว้ 3 ชั่วโมง สกัดด้วยอัลตราโซนิกเป็นเวลา 30 นาที กรอง และทำซ้ำขั้นตอนข้างต้นสองครั้งบนสารตกค้างของตัวกรอง ผสมสารกรองและเข้มข้นเพื่อนำเอธานอลกลับคืน ไม่มีรสชาติของแอลกอฮอล์ รวบรวมสารสกัดและแช่เยือกแข็งเพื่อให้ได้สารสกัดดิบ cistanche salsa 19.46 ก.

2. 1. 1. 2 กระบวนการทำให้บริสุทธิ์

ใส่สารสกัดดิบของ cistanche salsa 10 กรัมลงในบีกเกอร์ เติมน้ำ 20 มล. ให้ละลายในอัลตราซาวนด์ เติมเอธานอล 80 มล. เขย่าให้เข้ากัน วางไว้ 12 ชั่วโมง จากนั้นทำการกรอง กรองเข้มข้นเพื่อให้ฟื้นตัว เอทานอลจนไม่มีรสชาติของแอลกอฮอล์ และนำไปแช่เยือกแข็งเพื่อให้ได้ไกลโคไซด์ทั้งหมดของสารสกัด cistanche salsa 8.408 กรัม

2. 1. 2 การจัดกลุ่มและการบริหารสัตว์

หนู 72 ตัวถูกให้อาหารแบบปรับเปลี่ยนได้เป็นเวลา 2 วันก่อนการทดลอง และสุ่มแบ่งออกเป็น 6 กลุ่ม โดยแต่ละตัวมีหนู 12 ตัว ได้แก่ กลุ่มควบคุมว่าง กลุ่มแบบจำลองการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์ และกลุ่มควบคุมเชิงบวก (150 มก. /kg bidentate), รวม glycoside ของกลุ่ม cistanche salsa high-dose (13{15}} mg/kg), glycoside ทั้งหมดของกลุ่ม cistanche salsa ขนาดกลาง (100 มก./กก.) และ glycoside ทั้งหมดของ cistanche salsa ต่ำ- กลุ่มขนาดยา (65 มก./กก.) สัตว์ในแต่ละกลุ่มได้รับการบริหารให้ในกระเพาะอาหาร (ig) วันละสองครั้ง และปริมาตร ig คือ 0.2 มล./20 กรัมของน้ำหนักตัว กลุ่มควบคุมเปล่าและกลุ่มแบบจำลองได้รับปริมาณน้ำเกลือเท่ากัน สองชั่วโมงหลังจากการบริหารให้แต่ละครั้ง ยกเว้นกลุ่มควบคุมที่ว่างเปล่า กลุ่มอื่น ๆ ได้รับสุรา 56 องศาที่ 0.4 มล./20 กรัมของน้ำหนักตัว ig เป็นเวลา 10 วันติดต่อกันเพื่อทำให้เกิดรูปแบบการบาดเจ็บที่ตับเฉียบพลันจากแอลกอฮอล์ วันที่ 9 ของการสร้างแบบจำลอง ไม่อนุญาตให้ถือศีลอด วันที่ 10 ให้ไวน์ขาว 56 องศา 3 ชม. นำลูกตาไปเจาะเลือดและแยกซีรั่มออก หลังจากเก็บเลือดแล้ว หนูก็ถูกสังเวย ชั่งน้ำหนัก นำกลีบตับด้านขวามาใส่ในสารละลายฟอร์มาลดีไฮด์ 10 เปอร์เซ็นต์ ตรึงตับที่เหลือไว้ในตู้เย็นที่อุณหภูมิ -20 องศา

2. 1. 3 การประมวลผลทางสถิติ

ใช้ซอฟต์แวร์สถิติ SPSS 11.5 เพื่อประมวลผลข้อมูล วิเคราะห์ความแปรปรวน P<0.05 is="" statistically="">

2. 1. 4 ผลของ glycoside ทั้งหมดของ cistanche salsa ต่อน้ำหนักตัว น้ำหนักตับ และดัชนีตับของการบาดเจ็บที่ตับเฉียบพลันจากแอลกอฮอล์ในหนูทดลอง

ดังแสดงในตารางที่ 1 น้ำหนักตับและดัชนีตับของหนูเมาส์ในกลุ่มแบบจำลองมีค่ามากกว่ากลุ่มควบคุมว่างอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05), indicating="" liver="" damage.="" compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" liver="" weight="" and="" liver="" index="" of="" mice="" in="" the="" total="" glycoside="" of="" the="" cistanche="" salsa="" high-dose="" group="" and="" the="" positive="" control="" group="" were="" significantly="" reduced="" (p=""><0.01). there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" the="" total="" glycoside="" of="" cistanche="" salsa="" medium="" and="" low-dose="" groups="" (="" p="">0.05).

2. 1. 5 ผลของไกลโคไซด์รวมของซิสแทนเช่ซัลซ่าต่อซีรั่ม AST และ ALT

เลือดที่เก็บรวบรวมถูกหมุนเหวี่ยงที่ 3.5×103 รอบ/นาที เป็นเวลา 10 นาทีเพื่อเตรียมซีรัม โดยใช้วิธีการของ Lai การอ่านค่า UV-Vis spectrophotometer 505 nm ถูกใช้เพื่อกำหนดกิจกรรมของ ALT และ AST ในซีรัม ตามที่แสดงในตารางที่ 2 ซีรั่ม ALT และ AST ในกลุ่มแบบจำลองมีค่าสูงกว่ากลุ่มควบคุมที่ว่างเปล่าอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05), indicating="" that="" the="" model="" group="" was="" successfully="" modeled.="" the="" serum="" alt="" and="" ast="" of="" mice="" in="" the="" positive="" control="" group="" were="" significantly="" lower="" than="" those="" in="" the="" model="" group=""><0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" serum="" alt="" and="" ast="" of="" mice="" in="" the="" total="" glycoside="" of="" the="" cistanche="" salsa="" high-dose="" group="" were="" significantly="" lower=""><0.01). there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" the="" total="" glycoside="" of="" the="" cistanche="" salsa="" middle="" and="" low="" dose="" group="" and="" the="" model="" group="" (p="">0.05).

2. 1. 6 ผลของ glycoside ทั้งหมดของ cistanche salsa ต่อเนื้อหา MDA และกิจกรรม SOD ในตับ

ใช้เนื้อเยื่อตับ 0.3 กรัมเพื่อเตรียม 10 เปอร์เซ็นต์และ 1 เปอร์เซ็นต์ให้เป็นเนื้อเดียวกัน ปั่นแยกตับ 1 เปอร์เซ็นต์ให้เป็นเนื้อเดียวกันด้วยความเร็ว 3.5 × 103 รอบ/นาที เป็นเวลา 10 นาที แล้วนำส่วนลอยเหนือตะกอน สารละลาย โปรตีนในตับโฮโมจีเนตถูกกำหนดโดยวิธี Coomassie Brilliant Blue ใช้ supernatant homogenate ตับ 1 เปอร์เซ็นต์ ดำเนินการตามกล่องทดสอบ SOD และอ่านที่ 450 นาโนเมตรบนเครื่องอ่านไมโครเพลท ใช้ส่วนลอยเหนือตะกอนของตับที่เป็นเนื้อเดียวกัน 10 เปอร์เซ็นต์ ดำเนินการตามชุดตรวจวัด MDA และวัดค่าการดูดกลืนแสง (A532) ด้วยสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่ 532 นาโนเมตร

ดังแสดงในตารางที่ 3 ปริมาณ MDA ในตับของกลุ่มแบบจำลองสูงกว่าในกลุ่มควบคุมเปล่าอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05), and="" the="" sod="" activity="" was="" significantly="" reduced=""><0.05). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" mda="" content="" in="" the="" liver="" of="" the="" positive="" control="" group="" was="" significantly="" lower=""><0.01), and="" the="" activity="" of="" sod="" was="" significantly="" increased=""><0.01). compared="" with="" the="" model="" group,="" the="" mda="" content="" of="" the="" total="" glycoside="" of="" the="" cistanche="" salsa="" high-dose="" group="" was="" significantly="" lower=""><0.01), and="" the="" activity="" of="" sod="" was="" significantly="" increased=""><0.01). the="" total="" glycoside="" of="" cistanche="" salsa="" medium="" and="" low="" dose="" groups="" had="" no="" difference="" in="" mda="" and="" sod="" compared="" with="" the="" model="" group="" (p="">0.05).

2. 1. 7 ผลของ Total glycoside ของ cistanche salsa ต่อการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพของเนื้อเยื่อตับในหนูเมาส์

การตรวจทางพยาธิวิทยา: ตรึงเนื้อเยื่อตับด้วยฟอร์มาลดีไฮด์ 10 เปอร์เซ็นต์ ส่วนที่ฝังด้วยพาราฟินทั่วไป (ความหนา 5 ไมโครเมตร) การย้อมสี HE และการสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาของตับภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง

ตับของกลุ่มควบคุมที่ว่างเปล่ามีสีแดงเข้มและมีเนื้อสัมผัสที่อ่อนนุ่ม โครงสร้างของเนื้อเยื่อตับเป็นปกติและโครงสร้างของก้อนตับไม่บุบสลาย เป็นรูปหลายเหลี่ยมที่มีขอบเขตชัดเจน นิวเคลียสมีลักษณะกลมและตั้งอยู่ตรงกลางเซลล์อย่างชัดเจน ปริมาณตับของหนูในกลุ่มแบบจำลองและปริมาณไกลโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนเช่ซัลซ่ากลุ่มสื่อกลางและปริมาณต่ำเพิ่มขึ้นและสีกลายเป็นสีเหลือง การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาภายใต้กล้องจุลทรรศน์ส่วนใหญ่เป็นการเสื่อมสภาพของไขมันในเซลล์ตับ โดยมี lipid vacuoles และ hepatocytes แบบกระจายในเซลล์ ขนาดใหญ่ ไซโตพลาสซึมเต็มไปด้วยหยดไขมันขนาดเล็กและแวคิวโอล และนิวเคลียสยังคงอยู่ตรงกลาง ในกลุ่มควบคุมเชิงบวกและกลุ่มควบคุมไกลโคไซด์รวมของกลุ่มที่ได้รับยา cistanche salsa ในปริมาณสูง ไขมันในเซลล์ตับในหนูทดลองลดลงในระดับหนึ่ง และจำนวนหยดไขมันลดลงในระดับหนึ่ง

2. 2 การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักของการรวมตัวของไกลโคไซด์ของซิสแทนเช่ ซัลซา

2. 2. 1 เงื่อนไขโครมาโตกราฟี

เงื่อนไขโครมาโตกราฟีคือคอลัมน์โครมาโตกราฟี ZORBAX ODS (250×4.6 mm, 5μm); เฟสเคลื่อนที่: เมทานอล 0.2 เปอร์เซ็นต์ สารละลายกรดฟอร์มิก (27.5∶72.5), การชะเกรเดียนต์; อุณหภูมิคอลัมน์ 30 องศา ; อัตราการไหล 1 มล./นาที; ตรวจจับความยาวคลื่น 334 นาโนเมตร ภายใต้เงื่อนไขโครมาโตกราฟีข้างต้น การแยกของเอ็กไคนาโคไซด์และแอคทีโอไซด์ดี.

2. 2. 2 การเตรียมสารละลายอ้างอิง

ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ 1.3 มก. และ 1.2 มก. ของเอ็กไคนาโคไซด์และแอคทีโอไซด์สารอ้างอิงเพื่อเตรียม {{0}}.13 มก./มล. สารละลายสารอ้างอิงอิไคนาโคไซด์และสารละลายอ้างอิงแอกทิโอไซด์ 0.12 มก./มล.

2. 2. 3 การเตรียมสารละลายทดสอบ

ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ 0.1082 ก. ของไกลโคไซด์ทั้งหมดของสารสกัดซิสแทนเช่ ซัลซ่า และเจือจางเป็น 50 มล. ด้วยสารละลายโมบายเฟส

2. 2. 4 ความสัมพันธ์เชิงเส้น

วาดโซลูชันอ้างอิงอย่างแม่นยำ {{0}} 06, 0. 12. 0. 18. {0}}. 24. 0. 30, 0. 48. 0. 54. 0.72 1. ที่ 20 มก./มล. ฉีด 5 ไมโครลิตรลงในโครมาโตกราฟีของเหลวตามลำดับ และคำนวณสมการถดถอยด้วยปริมาตรการฉีด (ug) ของสารอ้างอิงทั้งสองเป็น abscissa และพื้นที่พีคที่สอดคล้องกันเป็น พิกัด อิชินาโคไซด์: Y=11.868 X-0.0785, R=0.9997; แอคทีโอไซด์: Y=18.026X-0.1913, R=0.9997 เป็นผลให้สารอ้างอิงอีไคนาโคไซด์มีความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดีในช่วง 0.0635 ถึง 0.4445 ug; สารอ้างอิงแอกทิโอไซด์อยู่ในช่วง 0.059 ถึง 1.18 ไมโครกรัม ความสัมพันธ์เชิงเส้นภายในดี

2. 2. 5 การทดสอบความแม่นยำ

วาดสารละลายทดสอบเดียวกันได้อย่างแม่นยำ 10 ไมโครลิตร และฉีดซ้ำ 5 ครั้งภายใต้สภาวะโครมาโตกราฟีด้านบน บันทึกโครมาโตแกรมและกำหนดพื้นที่พีค ผลที่ได้คือ RSD ของ echinacoside 0.89 เปอร์เซ็นต์ ,RSD ของacteoside อยู่ที่ 1.87 เปอร์เซ็นต์ แสดงว่าความเที่ยงตรงของเครื่องมืออยู่ในเกณฑ์ดี

2. 2. 6 การทดสอบความเสถียร

สารละลายทดสอบเดียวกันตามลำดับที่ 0, 2, 4, 8, 16, 32, 40, 48 ชั่วโมง วาดอย่างถูกต้อง 10 ลิตร ฉีดเข้าไปในโครมาโตกราฟีของเหลว บันทึกโครมาโตแกรม และวัดพื้นที่พีค . ผลลัพธ์คือ RSD ของ echinacoside 1. 58 เปอร์เซ็นต์ RSD ของแอคทีโอไซด์คือ 0 49 เปอร์เซ็นต์ แสดงว่าสารละลายทดสอบภายใน 48 ชั่วโมง

ความมั่นคงก็ดี

2. 2. 7 การทดสอบการทำซ้ำ

ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำประมาณ 0.2 มก. ของชุดตัวอย่างเดียวกัน รวม 5 ส่วน และเตรียมสารละลาย 5 ส่วน ตามวิธีการกำหนดเนื้อหา ปิเปต 10 ไมโครลิตรอย่างถูกต้องลงในโครมาโตกราฟีของเหลว บันทึกโครมาโตแกรม และกำหนดพื้นที่พีค ผลที่ได้คือ echinacoside RSD ที่ 1.91 เปอร์เซ็นต์ และ RSD ของ Verbascum glycosides เท่ากับ 2.08 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งบ่งชี้ว่าวิธีการตรวจวัดมีความสามารถในการทำซ้ำได้ดี

2. 2. 8 การทดสอบอัตราการฟื้นตัว

ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ 0.2 ก. ของ aไกลโคไซด์ทั้งหมดของ cistanche salsa, เพิ่มจำนวนเอ็กไคนาโคไซด์และแอคทีโอไซด์สารอ้างอิงตามลำดับ เตรียมสารละลายทดสอบตามวิธีข้อ 2.2.3 ข้างต้น และดำเนินการกำหนดตามวิธีการกำหนดปริมาณภายใต้สภาวะโครมาโตกราฟีที่ระบุ ผลลัพธ์ อัตราการกู้คืนเฉลี่ยของ echinacoside เท่ากับ 98.49 เปอร์เซ็นต์ RSD 1.06 เปอร์เซ็นต์ อัตราการฟื้นตัวเฉลี่ยของ acteoside เท่ากับ 97.35 เปอร์เซ็นต์ และ RSD เท่ากับ 1.45 เปอร์เซ็นต์

2. 2. 9 การกำหนดตัวอย่าง

วาดสารละลายอ้างอิงและสารละลายทดสอบอย่างละ 10 ไมโครลิตรอย่างแม่นยำ ฉีดตัวอย่าง กำหนดเงื่อนไขโครมาโตกราฟีด้านบน และคำนวณเนื้อหาตัวอย่างโดยวิธีมาตรฐานภายนอก ผลลัพธ์แสดงในตารางที่ 4 เนื้อหาเฉลี่ยของ echinacoside คือ 24.5 เปอร์เซ็นต์ และเนื้อหาเฉลี่ยของแอคทีโอไซด์คือ 4.6 เปอร์เซ็นต์

3 การอภิปราย

ความเสียหายของตับจากแอลกอฮอล์หมายถึงความเสียหายของตับและการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาที่เกิดจากการดื่มหนักในระยะยาว การดื่มแอลกอฮอล์มากเกินไปในระยะยาวอาจทำให้เซลล์ตับถูกทำลาย และจากนั้นก็พัฒนาเป็นพังผืดในตับ และแม้กระทั่งโรคตับแข็ง [6] เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง กลุ่มที่ได้รับยา cistanche salsa high-dose ในกลุ่มโมเดล ไกลโคไซด์ทั้งหมดในการทดลองนี้ลดการทำงานของ ALT และ AST ในซีรัมของหนูอย่างมีนัยสำคัญ ลดเนื้อหาของ MDA ในตับ และเพิ่มกิจกรรมของ SOD อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งช่วยลดไขมันในเซลล์ตับได้ในระดับหนึ่ง , ลดจำนวนหยดไขมัน. ไม่มีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มที่มีขนาดยากลางและขนาดต่ำกับกลุ่มแบบจำลอง ผลการทดลองนี้สอดคล้องกับผลการวิจัยของ pผลการหมุนเวียนของไกลโคไซด์ทั้งหมดของ Cistanche ต่ออาการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์ในหนู [7].

ไกลโคไซด์ทั้งหมดของ cistanche salsa ช่วยปกป้องเซลล์ตับที่ถูกทำลายโดยลดการซึมผ่านของเยื่อหุ้มเซลล์และเพิ่มเนื้อหาของ ALT และ AST ที่ปล่อยเข้าสู่กระแสเลือด มันสามารถเพิ่มกิจกรรมของ SOD และกำจัดอนุมูลอิสระจำนวนมากที่ผลิตโดยแอลกอฮอล์ในการเผาผลาญของร่างกาย ; สามารถลดการก่อตัวของ MDA และป้องกันไม่ให้เกิดความเสียหายต่อโครงสร้างเมมเบรนของเซลล์เนื้อเยื่อ [8-10] ไกลโคไซด์ทั้งหมดของซัลซ่า cistanche มีผลในการป้องกันการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์ และมีความสัมพันธ์ของผลเชิงปริมาณ การตรวจสอบวรรณกรรม ไม่มีการวิเคราะห์เชิงปริมาณของสารออกฤทธิ์ของไกลโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนเช่ซัลซ่า ในบทความนี้ เนื้อหาเกี่ยวกับแอคทีโอไซด์และเอ็กไคนาโคไซด์ส่วนประกอบหลักของไกลโคไซด์ทั้งหมดของซิสแทนเช่ซัลซ่า ได้รับการวิเคราะห์เชิงปริมาณเป็นครั้งแรกโดย HPLC ซึ่งคิดเป็นร้อยละ 29.1 ของไกลโคไซด์ทั้งหมด ให้พื้นฐานทางวิทยาศาสตร์สำหรับการพัฒนาและการใช้ประโยชน์ของซัลซ่ารวมของไกลโคไซด์ การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่พบว่า echinacoside มีผลในการป้องกันเซลล์ PC12 ที่ได้รับความเสียหายจากไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์และความเสียหายจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในหนูที่เป็นโรคสมองเสื่อมในหลอดเลือด [11,12] ทั้งคู่echinacoside และ acteoside มีฤทธิ์ยับยั้งความเป็นพิษต่อเซลล์ของตับเกิดจาก D GalN และ TNF- [13] นอกจากนี้ สันนิษฐานว่ารวม glycoside ของ cistanche salsa ปกป้องหนูจากอาการบาดเจ็บที่ตับจากแอลกอฮอล์อาจได้รับการปรับปรุงโดยเอ็กไคนาโคไซด์และแอคทีโอไซด์เพื่อเพิ่มการทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระในเซลล์ ปรับปรุงความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระของเซลล์ตับ จึงรักษาความสมบูรณ์ของพลาสมาเมมเบรนของเซลล์ตับ เพื่อให้เซลล์ตับสามารถทำงานได้ตามปกติ ทำหน้าที่ป้องกันและชดเชย เราจะแยกสารประกอบต่อไปในการศึกษาในอนาคตและใช้เทคนิคทางอณูชีววิทยาเพื่อศึกษาการควบคุมสารประกอบโมโนเมอร์ในการตายของเซลล์ตับและความสัมพันธ์ของสารประกอบเหล่านี้กับการควบคุมยีนเป้าหมายที่เกี่ยวข้อง

อ้างอิง

1 จาง HW. การศึกษาองค์ประกอบทางเคมีและ

ลายนิ้วมือของ Cistanche salsa (CA Mey.) G. Beck Ho hot: วิทยาลัยการแพทย์มองโกเลียใน, ปริญญาโท 2551.

2 Tian XF, ปู่ XP Phenylethanoid glycosides จาก Cistanches salsa ยับยั้งการตายของเซลล์ที่เกิดจาก methyl phenyl pyridinium ion ในเซลล์ประสาท เจ เอทโนฟาร์มาคอล, 2005, 97: 59-63.

3 วัง XW, Jiang XY, Wu LY ผลการขจัดของไกลโคไซด์ของ Cistanche ต่ออนุมูลอิสระและการป้องกันความเสียหายของดีเอ็นเอที่เกิดจาก OH· ในหลอดทดลอง China Pharm J, 2001, 36: 29-32

4 วู HH. การเตรียมและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์จาก Cistanche salsa หนานจิง: Nanjing Agricultural University, MSc. 2551.