ผลการป้องกันของเรสเวอราทรอลต่อการด้อยค่าของไตที่เกิดจากอะคริลาไมด์
Feb 23, 2022
พื้นหลัง: อะคริลาไมด์ (ACR) มีการใช้งานที่หลากหลาย มันมีการด้อยค่าของไตผล งานนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาบทบาทการปกป้องที่เป็นไปได้ของ resveratrol (RVS) เหนือ ACR-mediatedการด้อยค่าของไตในหนู กลไกพื้นฐานที่แนะนําซึ่งเข้าร่วมในการคุ้มครองดังกล่าวได้รับการตรวจสอบแล้ววัสดุและวิธีการ:หนูเผือกผู้ใหญ่ Sprague-Dawley สามสิบตัวถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่ม: การควบคุม ACR และ RVS หลังจาก 4 สัปดาห์ไตถูกลบออกและเตรียมพร้อมสําหรับการศึกษาทางเนื้อเยื่อวิทยาอิมมูโนฮิสโตเคมีและชีวเคมี กิจกรรมของการเกิดออกซิเดชันของเนื้อเยื่อ (malondialdehyde [MDA]) และเครื่องหมายต่อต้านการเกิดออกซิเดชัน (กลูตาไธโอน [GSH]) ได้รับการประเมินผลลัพธ์:อะคริลาไมด์เหนี่ยวนําให้เกิดไตเกี่ยวกับไตความรักในรูปแบบของการหดตัวและการบิดเบือนของ glomeruli ด้วยรอยย่นของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของพวกเขาและการขยายตัวของช่องว่างปัสสาวะ การเปลี่ยนแปลงท่อความเสื่อมมีอยู่อย่างชัดเจนในท่อที่ซับซ้อนใกล้เคียง เซลล์ท่อเนื้อร้ายแสดง vacuolation ไซโตพลาสซึมกับเซลล์เยื่อบุผิว desquamated ภายในลูเมนท่อ. ACR เพิ่มการสะสมของเส้นใยคอลลาเจนในเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเส้นเลือดฝอยไตและทําให้เกิดความหนาของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเกี่ยวกับไตคลังข้อมูลและเกี่ยวกับไตท่อ การบริหารงานของ RVS ให้การปกป้องสูงแก่ไต. โกลเมรูลีและเกี่ยวกับไตท่อเกือบจะปกติ เนื้อหาของเส้นใยคอลลาเจนและปฏิกิริยา Schiff กรดเป็นระยะของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเกี่ยวกับไตท่อลดลง 70% และ 19% เชื่อมโยงกับกลุ่ม ACR ระดับครีเอตินินและยูเรียลดลง 51% และ 47% RVS ก่อให้เกิดบทบาทในการป้องกันดังกล่าวผ่านฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระเนื่องจากระดับ MDA ลดลง 45% ในขณะที่ระดับ GSH เพิ่มขึ้น 83% เมื่อเทียบกับกลุ่ม ACR สรุป: อะคริลาไมด์ทําให้เกิดความผิดปกติของโครงสร้างและการทํางานของไต มันก่อให้เกิดไตความเสียหายผ่านความเครียดออกซิเดชันและการตายของเซลล์ ด้วยการใช้ RVS ปกติไตสถาปัตยกรรมถูกเก็บรักษาไว้โดยมีการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างเล็กน้อย เพิ่ม, การทํางานไตการทดสอบกลายเป็นเรื่องปกติ RVS ออกแรงป้องกันผ่านคุณสมบัติต่อต้าน apoptotic และสารต้านอนุมูลอิสระ มอร์ฟอล 2021; 80, 4: 985–993)
แนะ นำอะคริลาไมด์ (ACR) เป็นมลภาวะต่อสิ่งแวดล้อมที่รู้จักกันดีซึ่งก่อให้เกิดผลกระทบที่เป็นพิษต่อระบบต่างๆ ต่อผู้คนหลังจากการสัมผัสทั้งในด้านอาชีพและอาหาร [2, 22] มันมีคุณสมบัติที่เป็นอันตรายมากมาย: การก่อมะเร็งความเป็นพิษต่อจีโนมพิษต่อระบบประสาทและความเป็นพิษต่อระบบสืบพันธุ์ [5, 7] ACR และแอนะล็อกของมันใช้กันอย่างแพร่หลายในการใช้งานทางเคมีและสิ่งแวดล้อมต่างๆ และผลิตโดยการให้ความร้อนแก่วัสดุชีวภาพที่ได้จากเนื้อเยื่อพืช [25] การก่อตัวของ ACR เกิดขึ้นระหว่างการแปรรูปอาหารเนื่องจากการสัมผัสกับคาร์โบไฮเดรตที่อุณหภูมิสูงกว่า 200 ° C [12] ระดับสูงของ ACR ได้รับการพบในอาหารบริโภคกันทั่วไป, โดยเฉพาะอย่างยิ่ง; มันฝรั่งทอดและขนมปัง [31]
อะคริลาไมด์ถูกดูดซึมจากระบบทางเดินอาหารและกระจายอย่างกว้างขวางในของเหลวในร่างกายและเก็บไว้ในตับและไตเป็นที่ทราบกันดีว่า ACR ทําให้เกิดการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างและการทํางานในหลายอวัยวะ การเกี่ยวกับไตเซลล์ท่อได้รับการเปลี่ยนแปลง vacuolar เสื่อมการแทรกซึมของเซลล์อักเสบและ oedema periglomerular [28] นอกจากนี้การบริหาร ACR ในหนูยังเพิ่มระดับของซีรั่มยูเรียครีเอตินินกรดยูริคและเกี่ยวกับไตไซโตไคน์ proinflammatory [1]. เมแทบอลิซึมของ ACR กระตุ้นการปล่อยอนุมูลอิสระ (ROS) ซึ่งเริ่มต้นความเครียดออกซิเดชันที่นําไปสู่ความไม่สมดุลในการพัฒนาและการย่อยสลายของ ROS [19] นอกจากนี้ยังก่อให้เกิดการเกิดไขมัน peroxidation และอันตรายดีเอ็นเอ [1]
มีการศึกษาผลของสารต้านอนุมูลอิสระและสารประกอบต้านการอักเสบหลายชนิด เช่น น้ํามันมะกอก วิตามินอี และกรดอะมิโนซาลิไซลิก 5 ชนิดเพื่อป้องกันและรักษาที่เกิดจาก ACRการด้อยค่าของไต[9, 19]. เรสเวอราทรอล (RVS) เป็นไฟโตเล็กซินที่พบในอย่างน้อยพืช 72 ชนิด ซึ่งหลายชนิดกินโดยมนุษย์ รวมถึงมัลเบอร์รี่ ถั่วลิสง และองุ่น [8] RVS มีฤทธิ์ต้านการอักเสบยาต้านเกล็ดเลือดสารต้านอนุมูลอิสระและต่อต้านการก่อมะเร็งรวมถึงความสามารถในการลดความเสียหายของไตเกิดจากสารประกอบทางเคมี [8, 10] อย่างไรก็ตาม ยังไม่ชัดเจนว่า RVS สามารถป้องกัน ACR ที่เกิดจาก ACR ได้หรือไม่การด้อยค่าของไตหรือเปล่า ดังนั้นเราจึงศึกษาผลความเสียหายออกซิเดชันและ apoptotic ของ ACR มากกว่าไตและตรวจสอบบทบาทการปกป้องของ RVS มากกว่าดังกล่าวการด้อยค่าของไตในหนู
คำ:เรสเวอราทรอล, อะคริลาไมด์, ไต, ไต, ไตวายเรื้อรัง
วัสดุและวิธีการ
หนูเผือกผู้ใหญ่ Sprague-Dawley สามสิบตัวที่มีน้ําหนัก 170–200 กรัมถูกรวมไว้ในการศึกษาของเรา สัตว์เหล่านี้ได้รับการดูแลในกรงตาข่ายลวดที่กว้างขวางในห้องพิเศษที่มีแสงตะวันโดยตรงและการระบายอากาศตามธรรมชาติ หนูสามารถเข้าถึงหนูเชาเชาและน้ํามาตรฐานได้ฟรี สัตว์ทุกตัวได้รับการรักษาตามแนวทางมาตรฐานสําหรับการดูแลและการใช้สัตว์ทดลอง การศึกษาได้รับอนุญาตจากคณะกรรมการจริยธรรมคณะแพทยศาสตร์มหาวิทยาลัยไคโรประเทศอียิปต์ขั้นตอนการปฏิบัติตามนั้นเป็นไปตามมาตรฐานทางจริยธรรมขององค์กรที่รับผิดชอบและปฏิญญาเฮลซิงกิปี 1975 ซึ่งแก้ไขในปี 1983
การออกแบบเชิงทดลองหนูถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่ม (10 ในแต่ละกลุ่ม): การควบคุม (ให้น้ํากลั่นในขนาด 1 มล.), กลุ่ม ACR และกลุ่ม RVS (ACR + RVS ร่วมกัน)
สารเคมีอะคริลาไมด์ได้มาจากภาชนะผงที่ซื้อโดยบริษัทไบโอเทน (สหราชอาณาจักร) ที่มีน้ําหนัก 500 กรัม มันละลายในน้ํากลั่นในความเข้มข้น 10 กรัม / ลิตร มันได้รับในขนาด 1 มล. ของน้ํากลั่นที่มี 40 มก. / กก. / วันรับประทานผ่าน gavage กระเพาะอาหาร [9] เรสเวอราทรอล (ความบริสุทธิ์, > 99%) ถูกซื้อจากซิกม่า-อัลดริช (เซนต์หลุยส์, มิสซูรี, สหรัฐอเมริกา) มันละลายในไดเมทิลซัลฟอกไซด์และเจือจางในน้ําเกลือทางสรีรวิทยา 0.9% มันได้รับในขนาดประจําวันของ 20 มก. / กก. / วันรับประทานผ่านทางปากในกระเพาะอาหาร [18]. ในตอนท้ายของการทดลอง (หลังจาก 4 สัปดาห์) สัตว์แต่ละตัวจะถูกชั่งน้ําหนักและตัวอย่างเลือดถูกถอนออกจากหลอดเลือดดําหางโดยใช้หลอดเส้นเลือดฝอยเฮปาริไนซ์ละเอียด การไตถูกสกัดล้างด้วยน้ําเกลือและปล่อยให้แห้งบนกระดาษพล็อต
การศึกษาด้วยกล้องจุลทรรศน์แสงไตตัวอย่างได้รับการแก้ไขในฟอร์มาลิน 10% ขาดน้ําในเอทิลแอลกอฮอล์ล้างในไซลอลและฝังอยู่ในขี้ผึ้งพาราฟิน ส่วนที่หนา 5 μm ถูกตัดและติดตั้งบนสไลด์แก้ว ส่วนอื่น ๆ ถูกติดตั้งบนสไลด์ที่มีประจุบวกสําหรับอิมมูโนฮิสโตเคมี ส่วนต่างๆ อยู่ภายใต้หัวข้อต่อไปนี้: — haematoxylin และ eosin (H&E) และส่วนที่เปื้อนไตรโครมของ Masson ถูกจัดทําขึ้นตาม Suvarna et al. [24]; - การประเมินทางฮิสโตเคมี: คราบกรด Schiff (PAS) เป็นระยะ: ส่วนที่เปื้อน PAS ถูกจัดทําขึ้นตาม Suvarna et al. [24]; การวิเคราะห์อิมมูโนฮิสโตเคมีของโปรตีน X ที่เกี่ยวข้องกับ Bcl-2 (BAX) [20] มีการเตรียมส่วนพาราฟิน จากนั้นเพิ่มเซรั่มในปริมาณที่เหมาะสมลงในส่วนเป็นเวลา 30 นาที peroxidase ภายนอกถูกปิดการใช้งานด้วยสารละลายเมทานอลที่มี H2O2 (1:50) เป็นเวลา 10 นาทีและล้างด้วยน้ําเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) ส่วนเนื้อเยื่อถูกบล็อกด้วยเซรั่ม 1.5% เป็นเวลา 30 นาที ส่วนต่างๆ ถูกบ่มด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิ Bax (โปรตีน BAX ต่อต้านมนุษย์, DakoCytomation, เดนมาร์ก) ตามด้วยแอนติบอดีทุติยภูมิ (การเชื่อมโยงไบโอทินิเลตสากลจากชุดเชิงพาณิชย์ LSAB: DakoCytomation, เดนมาร์ก) ต่อจากนั้นตัวอย่างถูกบ่มด้วยเอนไซม์ AB เป็นเวลา 30 นาทีและล้างด้วย PBS ตรวจพบสัญญาณเชิงบวกโดยใช้สารตั้งต้น peroxidase chromogenic การควบคุมเชิงลบรวมถึง PBS แทนที่จะเป็นแอนติบอดีทุติยภูมิ
การวิเคราะห์ภาพและการวัดค่าสัณฐานวิทยาการใช้ระบบคอมพิวเตอร์วิเคราะห์ภาพ Leica LAS V3.8 (สวิตเซอร์แลนด์) พารามิเตอร์ต่อไปนี้ได้รับการประเมิน: เส้นผ่านศูนย์กลางของเกี่ยวกับไตglomeruli และท่อที่ซับซ้อนใกล้เคียงความกว้างของเกี่ยวกับไตพื้นที่และความสูงของเยื่อบุผิวท่อใกล้เคียงเยื่อบุ การเพิ่มจํานวน glomeruli ที่มีการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างได้รับการประเมินเป็นเปอร์เซ็นต์ของจํานวน glomeruli ทั้งหมด นอกจากนี้ยังมีการประเมินเนื้อหาของเส้นใยคอลลาเจน ในส่วนเนื้อเยื่อวิทยาที่ย้อมด้วย PAS ความหนาแน่นของแสงของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของท่อที่ซับซ้อนใกล้เคียงและชั้นข้างขม่อมของแคปซูลของ Bowman ถูกกําหนดเพิ่มเติม ในพื้นที่ย้อมสีภูมิคุ้มกัน BCL2 เปอร์เซ็นต์ของปฏิกิริยาภูมิคุ้มกันก็ถูกวัดเช่นกัน
การศึกษาทางชีวเคมีตัวอย่างเลือดที่ถอนออกจากหนูก่อนที่จะเสียสละถูกนํามาใช้สําหรับการประเมินทางชีวเคมีในภาควิชาชีวเคมีและอณูชีววิทยาคณะแพทยศาสตร์มหาวิทยาลัยไคโรประเทศอียิปต์
ระดับยูเรียและครีเอตินินในซีรั่มถูกประเมินโดยวิธีการวัดสีทั่วไปโดยใช้ชุดทดสอบ Quanti Chrom TM (DIUR-500 และ DICT-500) ตามวิธี Jung และ Jaffe ที่ได้รับการปรับปรุงตามลําดับ [32] ค่าเฉลี่ยของพารามิเตอร์ทางชีวเคมีเหล่านี้ถูกคํานวณและอยู่ภายใต้การวิเคราะห์ทางสถิติ
ระดับเนื้อเยื่อของมาลอนเดียลดีไฮด์ (MDA) และกลูตาไธโอนลดลง (GSH)การเกี่ยวกับไตเนื้อเยื่อถูกทําให้เป็นเนื้อเดียวกันในบัฟเฟอร์เย็น 5-10 มล. (โพแทสเซียมฟอสเฟต 50 mM, pH 7.5. 1 mM EDTA) ต่อเนื้อเยื่อกรัมจากนั้นจะถูกหมุนเหวี่ยงที่ 100,000 กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 ° C ผู้วิเศษถูกถอดออกเพื่อทดสอบและเก็บไว้บนน้ําแข็ง การทดสอบ Malondialdehyde ดําเนินการด้วยการทดสอบกรดไทโอบาร์บิทูริก (TBA) ในสารเหนือธรรมชาติตามวิธีการที่แนะนําโดย Buege และ Aust [4]MDA ทําปฏิกิริยากับ TBA เพื่อให้สารประกอบสีแดงดูดซับที่ 535 นาโนเมตร การวัด GSH ขึ้นอยู่กับการลดลงของ 5,5-dithiobis (กรด 2-nitrobenzoic) (DTNB) ด้วย GSH ที่ลดลงเพื่อสร้างสารประกอบสีเหลือง [6]
การวิเคราะห์ทางสถิติค่าเฉลี่ยของสัมพัทธ์ไตน้ําหนัก การวัดฮิสโตมอร์โฟเมตริก และระดับทางชีวเคมีได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ SPSS เวอร์ชัน 22 การประมาณค่าทางสถิติทําได้โดยใช้ ANOVA ตามด้วยการเปรียบเทียบแบบคู่ของ Bonferroni
ผลลัพธ์
การประเมินด้วยกล้องจุลทรรศน์แสงการตรวจสอบของกลุ่มควบคุมแสดงให้เห็นถึงสถาปัตยกรรมที่สมบูรณ์ของเกี่ยวกับไตเยื่อหุ้มสมอง การเกี่ยวกับไตเยื่อหุ้มสมองถูกสร้างขึ้นจากเกี่ยวกับไตcorpuscles และ tubules ที่ซับซ้อนใกล้เคียงและส่วนปลายที่ซับซ้อน (รูปที่ 1A) การตรวจสอบของเกี่ยวกับไตเยื่อหุ้มสมองของกลุ่ม ACR เปิดเผยการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างที่ทําเครื่องหมายไว้ การเกี่ยวกับไตglomeruli แสดงให้เห็นถึงการหดตัวการบิดเบือนการแบ่งส่วนและ vacuolation ในระดับปานกลางถึงระดับปานกลางโดยมีช่องว่างปัสสาวะกว้างขึ้น การเกี่ยวกับไตtubules ถูกขยายด้วยการลดลงของความสูงของเยื่อบุผิวของพวกเขาและขยายของ lumina ของพวกเขา เซลล์เยื่อบุของพวกเขาแสดงให้เห็นถึงการ vacuolation ไซโตพลาสซึมการกระจายตัวของเซลล์และการก่อตัวของการหล่อภายในหลอดถูกพบในท่อที่ซับซ้อนจํานวนมาก คั่นระหว่างหน้าพบว่าหลอดเลือดแออัดที่มีความหนา intimal และการแทรกซึมของเซลล์ขนาดใหญ่สามารถมองเห็นได้ (รูปที่ 1B–D) การตรวจสอบของกลุ่ม RVS เผยให้เห็นลักษณะเกือบปกติของ glomeruli และ tubules ส่วนใหญ่ พบการแทรกซึมของเซลล์อักเสบคั่นระหว่างหน้าน้อยที่สุด (รูปที่ 1E)
เนื้อหาของเส้นใยคอลลาเจนเนื้อหาของเส้นใยมีน้อยในกลุ่มควบคุม เนื้อหาเพิ่มขึ้นรอบ ๆ ชั้นข้างขม่อมของแคปซูลของ Bowman และเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเกี่ยวกับไตท่อในกลุ่ม ACR (9 เท่า) และ RVS (2 เท่า) เมื่อเกี่ยวข้องกับกลุ่มควบคุม เนื้อหาในกลุ่ม RVS ลดลง 70% เมื่อเกี่ยวข้องกับกลุ่ม ACR (รูปที่ 2A–C, ตารางที่ 1)
ฮิสโตเคมีของไตในกลุ่มควบคุมเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเกี่ยวกับไตท่อและชั้นข้างขม่อมของแคปซูลของ Bowman แสดงให้เห็นถึงปฏิกิริยา PAS ที่อ่อนแอ การเพิ่มเส้นขอบแปรงปลายยอดของความซับซ้อนใกล้เคียง
ท่อ (PCT) เหมือนเดิมและบางส่วนบดบังลูมินาท่อ (รูปที่ 3A) เยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเกี่ยวกับไตท่อและชั้นข้างขม่อมของแคปซูลของ Bowman ของกลุ่ม ACR แสดงปฏิกิริยา PAS ที่รุนแรง (สูงกว่ากลุ่มควบคุม 42%) นอกจากนี้ขอบแปรงปลายสุดของ PCT ก็ถูกลดทอนลง (รูปที่ 3B) ด้วยการใช้ RVS ปฏิกิริยา PAS จึงเทียบได้กับกลุ่มควบคุมและต่ํากว่ากลุ่ม ACR 19% (รูปที่ 3C ตารางที่ 1)
การย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมี BAXBAX แสดงปฏิกิริยาที่อ่อนแอในกลุ่มควบคุม (รูปที่ 4A) เปอร์เซ็นต์พื้นที่ของเซลล์ภูมิคุ้มกัน BAX เพิ่มขึ้น 4.5 เท่าในกลุ่ม ACR ที่ตรงกับกลุ่มควบคุม (รูปที่ 4B, C, ตารางที่ 1) ด้วยการใช้ RVS เปอร์เซ็นต์พื้นที่ของเซลล์ภูมิคุ้มกันลดลง 56% เท่ากับกลุ่ม ACR อย่างไรก็ตาม เปอร์เซ็นต์พื้นที่ในกลุ่ม RVS สูงกว่ากลุ่มควบคุม 1.4 เท่า (รูปที่ 4D ตารางที่ 1)
เครื่องหมายทางชีวเคมีและออกซิเดชั่น/ต้านอนุมูลอิสระระดับซีรั่ม creatinine และยูเรียเพิ่มขึ้นในกลุ่ม ACR 2.75 เท่า 1.9 เท่าที่เชื่อมโยงกับกลุ่มควบคุม ด้วยการใช้ RVS ร่วมกันระดับของ creatinine และยูเรียลดลง 51%, 47% เป็นพันธมิตรกับ ACR อย่างไรก็ตามระดับของ creatinine และยูเรียในกลุ่ม RVS อยู่ที่ 83% ซึ่งสูงกว่ากลุ่มควบคุม 55% (ตารางที่ 1)
ค่าของเครื่องหมายออกซิเดชั่น (MDA) ในกลุ่ม ACR เพิ่มขึ้น 1.4 เท่า ในขณะที่เครื่องหมายป้องกันออกซิเดชั่น (GSH) ลดลง 1.3 เท่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ด้วยการใช้ RVS ระดับ MDA ลดลง 45% ในขณะที่ระดับ GSH เพิ่มขึ้น 83% เมื่อเทียบกับกลุ่ม ACR ถึงกระนั้นระดับของเครื่องหมายทั้งสองก็อยู่ห่างจากกลุ่มควบคุม (ตารางที่ 1)
การเปลี่ยนแปลงของไตสัณฐานวิทยาและ PCTเปอร์เซ็นต์ของ glomeruli ที่ได้รับผลกระทบในกลุ่ม ACR เพิ่มขึ้น 8.8 เท่าเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ด้วยการใช้ RVS เปอร์เซ็นต์ของ glomeruli ที่ได้รับผลกระทบลดลง 71% เท่ากับกลุ่ม ACR; อย่างไรก็ตาม เปอร์เซ็นต์ในกลุ่ม RVS สูงกว่ากลุ่มควบคุม 1.6 เท่า (ตารางที่ 2)
ในกลุ่ม ACR เส้นผ่านศูนย์กลางของไตลดลง 58% โดยเพิ่มความกว้างของพื้นที่ปัสสาวะ 2.4 เท่าซึ่งตรงกับกลุ่มควบคุม ด้วยการใช้ RVS เส้นผ่านศูนย์กลางของไตเพิ่มขึ้น 1.26 เท่าโดยลดความกว้างของพื้นที่ปัสสาวะลง 57% เท่ากับกลุ่ม ACR เส้นผ่านศูนย์กลางของไตและความกว้างของพื้นที่ปัสสาวะใน RVS และกลุ่มควบคุมเหมือนกัน (ตารางที่ 2) ในกลุ่ม ACR เส้นผ่านศูนย์กลางของ PCT เพิ่มขึ้น 31% ในขณะที่ความสูงของ epi เยื่อบุของพวกเขาthelium ลดลง 62% เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ด้วยการใช้ RVS เส้นผ่านศูนย์กลางของ PCT ลดลง 18% ในขณะที่ความสูงของเยื่อบุผิวเยื่อบุผิวเพิ่มขึ้น 1.4 เท่าเท่ากับกลุ่ม ACR พารามิเตอร์ทั้งสองเทียบเคียงได้ใน RVS และกลุ่มควบคุม (ตารางที่ 2)
การอภิปรายอะคริลาไมด์เหนี่ยวนําให้เกิดไตเกี่ยวกับไตความรักในรูปแบบของการหดตัวและการบิดเบือนของ glomeruli ด้วยรอยย่นของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของพวกเขาและการขยายตัวของช่องว่างปัสสาวะ การเพิ่มการเปลี่ยนแปลงท่อความเสื่อมมีอยู่อย่างชัดเจนใน PCT เซลล์ท่อเนื้อร้ายแสดง vacuolation ไซโตพลาสซึมกับเซลล์เยื่อบุผิว desquamated ภายในลูเมนท่อ. นอกจากนี้ ACR ทําให้เกิดการแทรกซึมของเซลล์อักเสบขนาดใหญ่ด้วยความแออัดของหลอดเลือดไต อะคริลาไมด์ทําให้เกิดพังผืดที่เกิดจากการสะสมของเส้นใยคอลลาเจนเพิ่มขึ้น 9 เท่าในเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเส้นเลือดฝอยในไต เส้นใยคอลลาเจนดังกล่าวอาจเป็นผลมาจากปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังชั้นนอกที่ช่วยกระตุ้นการเพิ่มจํานวนไฟโบรบลาสต์และการสังเคราะห์คอลลาเจน [14]เยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเกี่ยวกับไตคลังข้อมูลและเกี่ยวกับไตท่อของกลุ่ม ACR แสดงปฏิกิริยา PAS ที่รุนแรง (สูงกว่ากลุ่มควบคุม 42%) ความหนาของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินท่อเป็นลักษณะทั่วไปของการฝ่อและอาจเกี่ยวข้องกับ hyalinosis [14] ความหนายังเป็นสาเหตุที่เป็นไปได้ของการขนส่งที่ใช้งานลดลงใน PCT ทําให้เกิด micro-albuminuria [14]
ขอบแปรงของ PCT ในกลุ่ม ACR ถูกขัดจังหวะ การสูญเสียขอบแปรงเป็นสัญญาณทางสัณฐานวิทยาที่เก่าแก่ที่สุดของการทํางานของท่อใกล้เคียงบกพร่อง [17, 27] นอกจากนี้การสูญเสียขอบแปรงยังส่งผลต่อพลังการดูดซึมซ้ําของ PCT ด้วยการสูญเสียกลูโคสเกลือและน้ําจํานวนมากในปัสสาวะ [17, 27] สิ่งนี้ส่วนใหญ่อธิบายถึงการเปลี่ยนแปลงทางเซรุ่มวิทยาที่สังเกตได้ (ระดับซีรั่มที่สูงขึ้นของยูเรียและครีเอตินิน) เส้นผ่านศูนย์กลางของ PCT เพิ่มขึ้น 31% ในกลุ่ม ACR ซึ่งส่วนใหญ่เป็นกลไกการชดเชยเพื่ออนุรักษ์การทํางานของไต[15].
ความเครียดออกซิเดชันเป็นกลไกที่ทําให้เกิดโรคหลักที่ ACR ก่อให้เกิดความเสียหายของไต. ความเครียดออกซิเดชันคือการเปลี่ยนแปลงในความสมดุลระหว่างสารออกซิแดนท์และสารต้านอนุมูลอิสระในความโปรดปรานของสารออกซิแดนท์ [3]. นักวิจัยหลายคนพิสูจน์บทบาทความเครียดออกซิเดชันของ ACR มากกว่าไตค่าของเครื่องหมายออกซิเดชั่น (MDA) ในกลุ่ม ACR เพิ่มขึ้น 1.4 เท่า ในขณะที่เครื่องหมายป้องกันออกซิเดชั่น (GSH) ลดลง 1.3 เท่า[23] ความเครียดออกซิเดชันสร้างอนุมูลอิสระออกซิเจน (ROS) ที่ทําปฏิกิริยากับชีวโมเลกุลจํานวนมากในเซลล์, นําไปสู่ความเสียหายออกซิเดชันในที่สุด [16]. ROS ถูกกําจัดโดยกลไกการป้องกันเซลล์หลายอย่างที่เกี่ยวข้องกับการไม่ใช้เอนไซม์ (GSH) โปรตีน GSH peroxidase แปลงไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เป็นน้ําและไขมันเปอร์ออกไซด์กับแอลกอฮอล์ที่เกี่ยวข้อง [30] การใช้ ACR เป็นเวลานานทําให้กิจกรรม GSH ลดลง ผลที่ตามมาในการเพิ่มการผลิต O2 และ H2O2 ที่ส่งผลให้การผลิต OH– [11] นักวิจัยหลายคนเชื่อว่า ระดับของ MDA เป็นหลักฐานที่เพียงพอของความเครียดออกซิเดชัน [13] และค่าที่สูงขึ้นของ MDA เปิดเผยการเพิ่มขึ้นของไขมัน peroxidation.
การตายของเซลล์ยังเป็นกลไกที่ทําให้เกิดโรคอีกอย่างหนึ่งที่ ACR ก่อให้เกิดเกี่ยวกับไตความรัก [23] ปฏิกิริยา BAX เพิ่มขึ้น 4.5 เท่าในกลุ่ม ACR BAX ออกแรงกิจกรรม proapoptotic [29] เรสเวอราทอลซึ่งเป็นหนึ่งในฟลาโวนอยด์ให้การปกป้องสูงแก่ไตเป็นโกลเมรูลีและเกี่ยวกับไตท่อเกือบจะปกติ เมื่อเทียบกับกลุ่ม ACR เนื้อหาของเส้นใยคอลลาเจนและปฏิกิริยา PAS ของเกี่ยวกับไตท่อลดลง 70, 19% นอกจากนี้ระดับของ creatinine และยูเรียลดลง 51, 47% นักวิจัยหลายคนบันทึกผลการป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระจากภายนอกของ RVS มากกว่าไตRVS ก่อให้เกิดบทบาทในการป้องกันดังกล่าวผ่านฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระเนื่องจากระดับ MDA ลดลง 45% ในขณะที่ระดับ GSH เพิ่มขึ้น 83% เมื่อเทียบกับกลุ่ม ACR[21]. RVS ป้องกันการผลิตซูเปอร์ออกไซด์จากเอนโดเธเลียลไนตริกออกไซด์ซินเทสที่ไม่ปะปนกันและทําให้เกิดรอยยับของการแสดงออกของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระต่างๆ [30] กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของฟลาโวนอยด์จํานวนมากเกิดจากการกําจัดอนุมูลอิสระออกซิเจนโดยตรงหรือสายพันธุ์ออกซิเจนตื่นเต้นรวมถึงการยับยั้งเอนไซม์ออกซิเดชั่นที่ผลิต ROS [26] กลไกการป้องกันอีกประการหนึ่งของ RVS คือผ่านฤทธิ์ต้าน apoptotic ด้วยการใช้ RVS เปอร์เซ็นต์พื้นที่ของเซลล์ BAX ภูมิคุ้มกันลดลง 56% เท่ากับกลุ่ม ACR
บทสรุปโดยสรุป ACR ทําให้เกิดความผิดปกติทางโครงสร้างและการทํางานของไต. มันก่อให้เกิดความเสียหายของไตผ่านความเครียดออกซิเดชันและการตายของเซลล์ ด้วยการใช้ RVS ปกติไตสถาปัตยกรรมถูกเก็บรักษาไว้โดยมีการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างเล็กน้อย RVS ออกแรงป้องกันผ่านคุณสมบัติต่อต้าน apoptotic และสารต้านอนุมูลอิสระ