กิจกรรมของ Xanthine Oxidoreductase ส่งผลต่อ Aristolochic Acid Nephropathy อย่างไร

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ทาเคโอะ อิชิอิ, โทโมฮิโระ คุมะเกะ, ฮิโรมิจิ วาคุอิ, ชินโงะ อูราเตะ, โชเฮ ทานากะ และคณะ

บทนำ

โรคไตเรื้อรัง (CKD) เป็นที่แพร่หลายทั่วโลก และโรคต่างๆ ที่เกี่ยวข้องรวมถึงความผิดปกติของไฟโบรติกทำให้เกิดความท้าทายในเนื้อเยื่อไต [1] การเพิ่มขึ้นของ CKD ส่งผลให้จำนวนผู้ป่วยที่ต้องฟอกไตเพิ่มขึ้น และภาระทางการเงินที่เพิ่มขึ้น อันเนื่องมาจากค่าใช้จ่ายในการฟอกไต [2] ดังนั้นจึงมีความจำเป็นเร่งด่วนในการลดและป้องกันการทำงานของไตบกพร่อง ซึ่งนำไปสู่ภาวะไตวายระยะสุดท้าย เพื่อศึกษา CKD เราเน้นที่แบบจำลองสัตว์ของกรดอริสโตโลจิค(AA) ทำให้เกิดโรคไตซึ่งมีลักษณะเป็นพังผืดแบบก้าวหน้า เอเอ (กรดอริสโตโลจิค) โรคไตเป็นปัญหาบนคาบสมุทรบอลข่าน[3,4] และในประเทศจีนที่โรคไตมู่ถง [5] เป็นโรคเฉพาะถิ่น นำไปสู่การเป็นพังผืดและภาวะไตวายระยะสุดท้ายที่ไม่สามารถกลับคืนสภาพเดิมได้ [6] นอกจากนี้ วิถีชีวิตสมัยใหม่ยังนำไปสู่โรคความดันโลหิตสูง เบาหวาน กรดยูริกในเลือดสูง และโรคเกาต์ ซึ่งกำลังเป็นปัญหาทั่วโลก นอกจากทำให้เกิดโรคเกาต์แล้ว ภาวะกรดยูริกในเลือดสูงยังได้รับรายงานเมื่อเร็วๆ นี้ว่าเป็นปัจจัยเสี่ยงสำหรับการเกิดภาวะไตเสื่อมและความดันโลหิตสูง [7-9]

กรดยูริกทำให้เกิดเครือข่ายโรคที่เกี่ยวข้องกับผลึกโดยการสะสมของผลึกโมโนโซเดียมยูเรต [10] ซึ่งเป็นผลมาจากเมแทบอลิซึมของพิวรีน สิ่งนี้ทำให้เกิดความเสียหายต่อเนื้อเยื่อที่เกี่ยวข้องกับความเครียดออกซิเดชันและการอักเสบของเนื้อเยื่ออันเนื่องมาจากการสร้างซูเปอร์ออกไซด์โดยแซนทีน ออกซิโดเรดักเตส(XOR)[11,12]. XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส) ถูกค้นพบเมื่อประมาณ 100 ปีที่แล้ว และมีการดัดแปลง xanthine dehydrogenase(XDH) และ xanthine oxidase (XO) เมื่อประมาณ 30 ปีที่แล้ว [13] ภายใต้สภาวะทางสรีรวิทยา XO มีอยู่ในนมและมีบทบาทในการฆ่าเชื้อทางสรีรวิทยา [14,15] ในร่างกาย XDH ทำปฏิกิริยากับ NAD ได้ดีกว่า ในขณะที่ XO ไม่สามารถทำได้ แต่จะผลิตซูเปอร์ออกไซด์แอนไอออน (O2) และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2)[16-19] เป็นที่ทราบกันดีว่า O2 และ H2O2 ทำให้เนื้อเยื่อเสียหาย [1] XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)การแสดงออกถูกควบคุมโดยการย่อยสลายของ ATP ที่เกิดจากสภาวะทางพยาธิวิทยาบางอย่าง เช่น ขาดเลือด ขาดออกซิเจน และความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ซึ่งถูกกระตุ้นโดยความเครียดของเซลล์ ภายใต้สภาวะทางพยาธิวิทยาเหล่านี้ ATP จะถูกเผาผลาญเป็นไฮโปแซนทีน แซนทีน และกรดยูริกผ่านปฏิกิริยาที่เร่งปฏิกิริยาโดย XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)[12]. XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)ผลิตออกซิเจนชนิดปฏิกิริยา (ROS) เช่น ซูเปอร์ออกไซด์ อนุมูลไฮดรอกซิล ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ และเปอร์ออกซีไนไตรท์ [20] XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)ยังกระตุ้นระบบ renin-angiotensin ในเนื้อเยื่อ ซึ่งส่งเสริมความเสียหายของอวัยวะและเส้นโลหิตตีบของไตผ่านการกระตุ้นวงจรป้อนกลับเชิงบวก [12]

สารสกัดจาก CISTANCHE

ก่อนหน้านี้เรารายงานว่าการรักษาด้วย XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)สารยับยั้งสามารถปรับปรุงการอยู่รอดของผู้ป่วยในการฟอกไต [21] XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)การยับยั้งอาจลดความเครียดออกซิเดชันที่เกี่ยวข้องกับความเสียหายของอวัยวะเนื่องจากภาวะไตวาย ในการศึกษานี้ เราวิเคราะห์ XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมในไต พลาสมา หัวใจ ตับ และกล้ามเนื้อใน AA . นี้(กรดอริสโตโลจิค)- เกิดโรคไต.AA(กรดอริสโตโลจิค)เข้าสู่เซลล์เยื่อบุผิวท่อไตผ่านช่อง OAT1 บนเยื่อหุ้มชั้นใต้ดิน มันหยุดวัฏจักรของเซลล์และบังคับให้เซลล์ได้รับการตายของเซลล์ทำให้เกิดพังผืดที่ไม่สามารถย้อนกลับได้ AA(กรดอริสโตโลจิค)สามารถทำได้ในไตโดยไม่ทำลายอวัยวะอื่น เราเลือก AA(กรดอริสโตโลจิค)เพราะมันแสดงให้เห็นกลไกไฟโบรติกต่อภาวะไตวายระยะสุดท้าย ซึ่งทำหน้าที่เป็นแบบจำลองของการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลันที่สามารถพัฒนาไปสู่โรคไตเรื้อรังได้ จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือเพื่อตรวจสอบความเกี่ยวข้องของ XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมในแง่ของความเสียหายของเนื้อเยื่อ AA(กรดอริสโตโลจิค)แบบจำลองเป็นแบบจำลองของการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลันที่มีโอกาสก้าวหน้าไปสู่โรคไตเรื้อรัง เราตรวจสอบความเสียหายของเนื้อเยื่อในแบบจำลองนี้โดยพิจารณาจาก XOR . ที่ขึ้นกับเวลา(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรม.

วัสดุและวิธีการ

สัตว์

หนู C57BL/6 เพศผู้อายุ 12 สัปดาห์ (ซื้อจากห้องปฏิบัติการ Charles River Laboratories) ได้รับมอบหมายให้เป็น AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มบำบัดหรือกลุ่มควบคุมกระสายยา แต่ละกลุ่มถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่มย่อยขึ้นอยู่กับว่าพวกเขาถูกสังเวยที่ 0, 2 หรือ 4 สัปดาห์หลังจากการฉีดครั้งที่สี่ AA(กรดอริสโตโลจิค)(2.5 มก.·กก.) ถูกบริหารให้โดยการฉีดเข้าช่องท้องสัปดาห์ละครั้งเป็นเวลาสี่สัปดาห์ติดต่อกันตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [22] สูตรการให้ยานี้ใช้เพื่อกระตุ้นให้เกิดพังผืดเรื้อรังที่มีอัตราการเสียชีวิตต่ำ XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมได้รับการประเมินตาม AA(กรดอริสโตโลจิค)การบริหารและตรวจเนื้อเยื่อ XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)ความเสียหายที่เกี่ยวข้อง ก่อนการสังเวย (24 ชั่วโมง) เก็บปัสสาวะในกรงเมตาบอลิซึมตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [23] (0 กลุ่มสัปดาห์ n=4, กลุ่ม 2 สัปดาห์ n=3, กลุ่ม 4 สัปดาห์ n{{ 7}},ควบคุม n=4)(รูปที่ 1) หนูทดลองอยู่ภายใต้วัฏจักรมืด 12 ชม./12 ชม. ที่ 25 และได้รับอาหารมาตรฐาน (0.3 เปอร์เซ็นต์ NaCl,3.6 kcal gl,13.3% พลังงานเป็นไขมัน (Oriental MF;Oriental Yeast Co.,Ltd, และเหนือ แมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา))พร้อมน้ำเข้าฟรี การศึกษานี้ได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการสัตว์ทดลองของมหาวิทยาลัยโยโกฮาม่า และดำเนินการตามแนวทางปฏิบัติสำหรับสัตว์ทดลองของกระทรวงสาธารณสุข แรงงาน และสวัสดิการ เซรั่มอัลบูมินถูกวัดโดยใช้โบรโมเครซอลกรีน (BCG); อัลบูมินในปัสสาวะวัดโดยใช้อิมมูโนแอสเซย์ที่มีความขุ่น และตรวจวัดค่า creatinine(Cr) ในซีรัมและปัสสาวะโดยใช้วิธีเอนไซม์

การวิเคราะห์กรงเมตาบอลิ

การวิเคราะห์เมตาบอลิเคจดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Techniplast,Paola,Malta)[23,24] วัดปริมาณอาหารและน้ำในแต่ละวัน

การวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อ

การวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [25,26] ไตได้รับการแก้ไขด้วย PFA 4 เปอร์เซ็นต์และฝังในพาราฟิน ส่วนต่างๆ (หนา 4Im) ถูกย้อมด้วยไตรโครมของ Masson สำหรับการวิเคราะห์โครงสร้างของไต พื้นที่ไฟโบรติกของไตถูกวัดแบบดิจิทัลโดยใช้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสง (BZ-9000; Keyence, Osaka, Japan) ภาพที่ได้เป็นสีแดง/น้ำเงิน และสีน้ำเงินถูกดึงออกมา หลังจากไบนาไรเซชันเมื่อพิจารณาถึงความสมดุลโดยรวม พบว่าเยื่อบุผิวท่อและส่วนที่ย้อมสีน้ำเงินของลูเมนไม่เป็นไฟโบรติกและถูกตัดออกและคัดแยกออกเพื่อวัดปริมาณไฟโบรติก พื้นที่ พังผืดในช่องท้องรวมอยู่ในการหาปริมาณ ความเสียหายคั่นระหว่างหน้าของ Tubulo ถูกกำหนดให้เป็นอัตราส่วนระหว่างพื้นที่ที่เปื้อนกับพื้นที่ของชิ้นงานทดสอบทั้งหมด นอกจากนี้เรายังประมาณการถดถอยอย่างง่ายระหว่างเนื้อเยื่อ XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมและความเสียหายคั่นระหว่างหน้าของ tubulo ( เปอร์เซ็นต์ ).

รูปที่ 1ขั้นตอนการทดลองและไทม์ไลน์สำหรับโมเดลเมาส์ หนูเมาส์ C57BL/6 เพศผู้ถูกกำหนดให้กับกลุ่มบำบัดกรดอะริสโตโลจิก I(AA) หรือกลุ่มควบคุมกระสายยา แต่ละกลุ่มถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่มย่อยขึ้นอยู่กับว่าพวกมันถูกสังเวยที่ 0,2 หรือ 4 สัปดาห์หลังจากนั้น การฉีดครั้งที่สี่ AA (2.5 mg.kg -1) ถูกฉีดเข้าช่องท้อง (ip) สัปดาห์ละครั้งเป็นเวลาสี่สัปดาห์ติดต่อกัน ก่อนการสังเวย 24 ชั่วโมง (Sx) เก็บปัสสาวะไว้ในกรงเมตาบอลิซึมตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ สำหรับ 0-กลุ่ม AA สัปดาห์ n=4, 2-กลุ่มสัปดาห์ n= 3,4-กลุ่มสัปดาห์ n=4 และกลุ่มควบคุม n{{ 15}}. ระดับ creatinine clearance (Ccr) ในซีรัมถูกวัดทันทีหลังจากการฉีด AA ครั้งสุดท้าย

ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสเชิงปริมาณเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ (RT-qPCR)

RNA ทั้งหมดถูกสกัดจากเนื้อเยื่อไตโดยใช้ ISOGEN (Nippon Gene, Tokyo, Japan) และ cDNA ถูกสังเคราะห์โดยใช้ระบบการสังเคราะห์เส้นใยแรก SuperScript III (Invitrogen) RT-qPCR ดำเนินการโดยใช้มาสเตอร์มิกซ์ TaqMan PCR และโพรบ TaqMan ที่ออกแบบมา (Applied Biosystems, Foster City,CA,USA) บนระบบตรวจจับลำดับ ABIPRISM 7000 ระดับการแสดงออกของ mRNA เป้าหมายถูกทำให้เป็นมาตรฐานเป็น 18S rRNA โพรบ TaqMan ที่ใช้สำหรับ PCR มีดังนี้: การเปลี่ยนโกรทแฟคเตอร์เบต้า 1(TGF เบต้า 1), MM01178820_มล.;คอลลาเจนลา, มม00801666_gl;ปัจจัยกระตุ้นการขาดออกซิเจน 1 อัลฟา (HIF{{ 8}}ก), มม01198376_มล.; และ angiotensinogen (AGT), Mm00599662_m1;RAS ที่เกี่ยวข้องกับ C3 botulinum toxinซับสเตรต 1(RAC 1)Mm01201656_ml;NADPH Oxidase 1 (NOX 1)Mm00549170_m1; CCAAT/โปรตีนจับตัวเสริม, อัลฟา C/EBPa Mm00514283_sl; เพอรอกซิโซม proliferator รีเซพเตอร์แกมมา (PPARy) Mm00440940_ml และปัจจัยการถอดรหัสที่มีผลผูกพันสเตอรอล 1 (SREBF1), Mm00550338_m1

XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)การวัดกิจกรรม

กิจกรรมของแซนทีนออกซิโดเรดักเตสถูกวัดสามครั้ง (0 สัปดาห์,2 สัปดาห์, 4 สัปดาห์หลังจาก AA(กรดอริสโตโลจิค)การบริหารให้)(n=4 ในแต่ละกลุ่ม) ในเนื้อเยื่อหัวใจ ตับ ไต และกล้ามเนื้อตามวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [27] โดยสังเขป ไต ตับ หัวใจ หรือกล้ามเนื้อ homogenates หรือพลาสมาถูกเติมลงในส่วนผสมของ [1C2.15N2] xanthine, NAD plus และ oxonate ใน Tris buffer (pH 8.5) และถูกบ่มที่ 37 เป็นเวลา 30 นาที จากนั้น เมทานอลที่มี [1C2,15N2jUA ถูกเติมลงไป และของผสมถูกหมุนเหวี่ยงที่ 3000×g ที่ 4 เป็นเวลา 15 นาที ปริมาณของ [13C2,15N]UA ที่ผลิตในส่วนลอยเหนือตะกอนถูกวัดโดยใช้ LC/TQMS (Nexera/QTRAP4500, SHIMADZU/SCIEX).XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมถูกแสดงออกเป็น[1C2,1NJUA nmol/min/mg โปรตีน [27]

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ผลลัพธ์ของ AA(กรดอริสโตโลจิค)และเปรียบเทียบกลุ่มควบคุมโดยใช้ t-test แบบ unpaired P-values<0.05 were="" considered="" statistically="" significant.="" all="" analyses="" were="" performed="" using="" prism="" 8="" ver.8.3.1(yokohama,="">

CISTANCHE สมุนไพรสำหรับผู้ป่วยโรคไต

ผลลัพธ์

สำหรับหนูที่เสียสละใน 4 สัปดาห์หลังจากการฉีดครั้งที่สี่ น้ำหนักตัวในรถและ AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มคือ 31.1 ก.±0.4 ก. และ 31.1 ก.±0.4 ก. ตามลำดับ ที่การฉีดครั้งแรก สองสัปดาห์ต่อมา (หลังการฉีดครั้งที่สี่และระหว่างช่วงเวลาการสังเกต) น้ำหนักตัวคือ 31.9 g±{{10}}.4 ก. ในกลุ่มกระสายยา ในขณะที่ถึงขั้นต่ำ 27.8 g±0.7g (ป<0.05)in the="">(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่ม (รูปที่ 2). ระดับซีรัม Cr ถูกวัดทันทีหลังจาก AA . สุดท้าย(กรดอริสโตโลจิค)ฉีด. ระดับ Cr คือ {{0}}.11lg±0.02 mg·dL-1 ในกลุ่มกระสายยาและสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญใน AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่ม (P<0.05). the="" levels="" continued="" to="" increase="" in="" the="" experimental="" group="" at="" 2="" and="" 4="" weeks="" after="" the="" end="" of="">(กรดอริสโตโลจิค)การบริหาร หลังจาก AA . สุดท้าย(กรดอริสโตโลจิค)การบริหารให้ ยูเรียไนโตรเจนในเลือดในเลือด (BUN) คือ 25.7 mg.dL-1±0.2 mg·dL-1 และ 53.8mg·dL-1±5.1 mg·dL -l ในรถและ AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มตามลำดับ(P<0.05). bun="" continued="" to="" increase="" in="" the="">(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มในช่วงระยะเวลาติดตามผล การกวาดล้าง Cr ครั้งแรก (Ccr) ซึ่งวัดเมื่อสิ้นสุด AA(กรดอริสโตโลจิค)การบริหารให้ คือ 690.1 μLmin-1± 71.4 μLmin-1 ในกลุ่มกระสายยาและ 183.8 μLmin-'± 12.9 μLmin l ใน AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่ม ระดับ Ccr ใน AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มยังคงอยู่ในระดับต่ำที่ 2 สัปดาห์และ 4 สัปดาห์หลังจากAA(กรดอริสโตโลจิค)การบริหาร (P<0.05;table 1="" and="">

รูปที่ 2การเปลี่ยนแปลงน้ำหนักตัวในช่วงระยะเวลาสังเกต หนูถูกติดตาม 4 สัปดาห์หลังจากการฉีด AA สุดท้าย น้ำหนักตัวในกระสายยาและกลุ่ม I(AA) ของกรดอะริสโตโลจิกคือ 31.1±0.4 ก. และ 31.1 ก.±04 ตามลำดับ ที่การฉีดครั้งแรก ภายในสัปดาห์ที่ 4 น้ำหนักตัวของกลุ่มควบคุมเท่ากับ 31.2 ± 0.6 กรัม แต่น้ำหนักตัวของกลุ่ม AA เท่ากับ 29.3± 1.4 กรัม สองสัปดาห์ต่อมา (ในช่วงระยะเวลาการสังเกต) น้ำหนักตัวอยู่ที่ 31.9± {{20}}.4 กรัมในกลุ่มยานพาหนะ ในขณะที่กลุ่ม AA มีค่าต่ำสุดที่ 27.8± 0.7 กรัม (P<0.05).0-week group="" n="4,2-week" group="" n="3,4-week" group="" n="4,control" n="4." error="" bars="" represent="">

การเปลี่ยนแปลงในการขับอัลบูมินในปัสสาวะ

การขับอัลบูมินในปัสสาวะถูกวัดทันทีหลังจากสี่AA(กรดอริสโตโลจิค)การฉีด ค่าคือ Cr ใน 260±0.9 ug·mg1 และ 240.8±100.0 ug·mg1 กระสายยาและ AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มต่างๆ ตามลำดับ ที่ 4 สัปดาห์ การขับอัลบูมินในปัสสาวะเท่ากับ 18.3±0.6 ug mg1 และ 194.3± 59.8 ug·mg1Cr ในกระสายยาและ AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มตามลำดับ (P<0.05;>

ตารางที่ 1.กิจกรรมของ xanthine oxidoreductase (XOR) ในแบบจำลองโรคไตที่เกิดจากกรด aristolochic (AA)

XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมในพลาสมาและเนื้อเยื่อ

พลาสมาXOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมคือ 73.3± 8.0 pmol·min'mg1 และ 77.8±4.2 pmol·min มก. ในกระสายยาและ AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มตามลำดับในตอนท้ายของ AA(กรดอริสโตโลจิค)การบริหาร. ไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในพลาสมาXOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมระหว่างสองกลุ่ม ณ เวลาใดก็ได้ (รูปที่ 4A)

รูปที่ 3การเปลี่ยนแปลงของ creatinine ในซีรัม (Cr), Cr clearance (Ccr) และการขับอัลบูมินในปัสสาวะ (A) ระดับซีรัม Cr ถูกวัดทันทีหลังจากการฉีดกรดอริสโตโลจิก I(AA) ครั้งสุดท้าย ระดับ Cr คือ {{0}}.11 ± 0.02 mg-dL-' ในกลุ่มกระสายยาและสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม AA (0.30±0.02 มก. .dL-1;ป<0.05). the="" levels="" continued="" to="" increase="" in="" the="" experimental="" group,="" at="" 2="" weeks="" and="" 4="" weeks="" after="" the="" end="" of="" aa="" administration.(b)="" first="" ccr,="" which="" was="" measured="" at="" the="" end="" of="" the="" aa="" administration,="" was="" 690.1="" ±="" 71.4="" ul-min-'in="" the="" vehicle="" group="" and="" 183.8±="" 12.9="" μl·min-1="" in="" the="" aa="" groups.="" the="" levels="" in="" the="" aa="" groups="" remained="" low="" at="" 2="" weeks="" and="" 4="" weeks="" after="" aa="" administration=""><0.05; table="" 1="" and="" fig.3a,="" 3b).(c)="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" measured="" immediately="" after="" four="" aa="" injections.="" the="" values="" were="" 26.0="" ±="" 0.9="" and="" 240.8±="" 100="" ug-mg-1="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively.="" two="" weeks="" later,="" the="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" 18.8±="" 1.7="" ug-mg-1="" and="" 78.3±="" 10.6="" ug.mg-1="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,=""><0.05).at 4="" weeks,="" the="" urinary="" albumin="" excretion="" was="" 18.3±="" 0.6="" ug·mg-'and="" 194.3±="" 59.8="" ug·mg-'="" cr="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively=""><0.05;fig.3c).0-week group="" n="4," 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.="" *represents="">< 0.05,="" and="" **="" represents=""><>

ยกเว้นไต XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส) กิจกรรมในเนื้อเยื่อที่ตรวจไม่แตกต่างกันระหว่างกลุ่ม เอเอ(กรดอริสโตโลจิค) กลุ่มไม่แสดงความแตกต่างใน XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส) กิจกรรมในหัวใจ ตับ และกล้ามเนื้อ เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ณ เวลาใดก็ได้ (ภาพที่ 4BD) อย่างไรก็ตาม ในเนื้อเยื่อไต XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส) กิจกรรมใน AA(กรดอริสโตโลจิค) กลุ่มได้รับการยกระดับในช่วงระยะเวลาสังเกต ในสัปดาห์ที่ 0 XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส) กิจกรรมคือ 254.3± 19.9 pmolmin 1.mg1 และ 556.8±52.9 pmol·min1mg1 TP ในกระสายยาและ AA(กรดอริสโตโลจิค) กลุ่มตามลำดับ(P<0.0001).two weeks="" later,="" the="">แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส) กิจกรรมคือ 231.5±20.4 pmolmin一mg1 และ 430±55.6 pmolmin'mg1TP ในกระสายยาและ AA(กรดอริสโตโลจิค) กลุ่มตามลำดับ(P<0.05).at week="" 4,="" the="" activities="" were="" 237.5±9.9="" pmolmin1mg1a="" and="" 410.5="" ±="" 30.5="" pmol:min1mg="" g1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="">กรดอริสโตโลจิค) กลุ่มตามลำดับ(P<0.05;fig. 4e).="">

การแสดงออกของตัวบ่งชี้การเกิดพังผืดในเนื้อเยื่อไต

ตรวจสอบระดับการแสดงออกของ mRNA ของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเกิดพังผืดของไต การแสดงออกของคอลลาเจน1 (Col1) ของไตเพิ่มขึ้นในAA(กรดอริสโตโลจิค)เทียบกับในกลุ่มรถทุกจุดเวลา(P<0.05; fig.="" 5a).="" additionally,="" the="" renal="" expression="" of="" transforming="" growth="" factor="" β(tgf-β)="" was="" increased="" in="" the="">(กรดอริสโตโลจิค)เทียบกับในกลุ่มรถท้าย AA(กรดอริสโตโลจิค)การบริหารและหลัง 2 สัปดาห์ (P<0.05), and="" showed="" a="" tendency="" to="" increase="" after="" 4="" weeks="" (fig.="">

รูปที่ 4กิจกรรมของแซนทีนออกซิโดเรดักเตสในพลาสมาและเนื้อเยื่อ (A) กิจกรรมของแซนทีนออกซิโดเรดักเตส(XOR) ในพลาสมาคือ 73.3± 8.0 pmol·min-1.มก.-1และ 77.8± 4.2 pmol- ขั้นต่ำ-1.มก.-1 ในกลุ่มกระสายยาและกรดอริสโตโลจิก I(AA) ตามลำดับ ที่ส่วนท้ายของการบริหารให้ AA ไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญในกิจกรรม XOR ในพลาสมาระหว่างทั้งสองกลุ่ม ณ เวลาใดก็ได้ (BD)ยกเว้นไต กิจกรรม XOR ในเนื้อเยื่อที่ตรวจไม่แตกต่างกันระหว่างกลุ่ม กลุ่ม AA ไม่แสดงความแตกต่างของกิจกรรม XOR ในหัวใจ ตับ และกล้ามเนื้อเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ณ เวลาใด (E) อย่างไรก็ตาม ในเนื้อเยื่อไต กิจกรรม XOR ในกลุ่ม AA จะเพิ่มขึ้นระหว่างการสังเกต ระยะเวลา. ที่สัปดาห์ 0 กิจกรรม XOR คือ 254.3± 19.9 pmol.min-1.mg-1 และ 556.8± 52.9 pmol·min-1.mg-1 TP ในรถและกลุ่ม AA ตามลำดับ (P<0.0001). two="" weeks="" later,="" xor="" activity="" was="" 231.5±="" 20.4="" pmol-min-1.mg-1="" and="" 430±="" 55.6="" pmol-min-1.mg-1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively=""><0.05). at="" week="" 4,="" the="" activity="" was="" 237.5±="" 9.9="" pmol.min-1.mg-1="" and="" 410.5="" ±="" 30.5="" pmol-min-1.mg-1="" tp="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="">< 0.05).="" o-week="" group="" n="4," 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.="" *represents="">< 0.05,="" and="" **represents=""><>

การแสดงออกของปัจจัยกระตุ้นการขาดออกซิเจน (HIF-1a) ในเนื้อเยื่อไต

ระดับการแสดงออกของ mRNA ของ HIF-1a ยังถูกตรวจสอบอีกด้วย การแสดงออกของไตของ HIF-1o สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มเปรียบเทียบกับในกลุ่มยานพาหนะ(P<0.001) at="" the="" end="" of="">(กรดอริสโตโลจิค)การบริหารที่ 2 สัปดาห์และ 4 สัปดาห์(P<>

การแสดงออกของส่วนประกอบ NADPH ในเนื้อเยื่อไต

การแสดงออกของยีน RACI และ NOXI ใน AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มได้รับการยกระดับอย่างต่อเนื่องเมื่อเทียบกับกลุ่มยานพาหนะ (P<>

การแสดงออกของเครื่องหมาย adipogenesis ในเนื้อเยื่อไต

เครื่องหมาย Adipogenesis การแสดงออกของยีน C/EBP และ PPAR และการแสดงออกของยีน SREBF1 ของเครื่องหมาย lipogenesis ใน AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มถูกยกระดับอย่างต่อเนื่องเมื่อเทียบกับกลุ่มยานพาหนะ (P<0.05;fig. 5f,="">

รูปที่ 5การแสดงออกของยีนในเนื้อเยื่อไต (A) ตรวจสอบระดับ mRNA ของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเกิดพังผืดของไต การแสดงออกของคอลลาเจนในไต-1 (Col-1)ถูกทำให้สูงขึ้นในกลุ่มกรดอริสโตโลจิก I(AA) เมื่อเทียบกับกลุ่มกระสายยาที่จุดเวลาทั้งหมด(P<0.05).(b)additionally, renal="" expression="" of="" transforming="" growth="" factor-β(tgf-b)was="" increased="" in="" the="" aa="" groups="" compared="" to="" the="" vehicle="" group="" at="" the="" end="" of="" aa="" administration="" and="" 2="" weeks="" later=""><0.05), and="" showed="" a="" tendency="" to="" increase="" after="" 4="" weeks.="" (c)="" the="" mrna="" levels="" of="" hypoxia-inducible="" factor-1="" alpha="" (hif-1α)="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" hif-1a="" was="" significantly="" higher="" in="" the="" aa="" groups="" compared="" with="" the="" vehicle="" group="">< 0.001)="" at="" the="" end="" of="" aa="" administration,at="" 2="" weeks,="" and="" 4="">< 0.05).(d,="" e)the="" mrna="" levels="" of="" nadph="" components="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" (rac1)="" and="" (nox1)was="" elevated="" in="" the="" aristolochic="" acid="" i(aa)="" groups="" compared="" to="" the="" vehicle="" group=""><0.05).(f-h) the="" mrna="" levels="" of="" adipogenesis="" and="" lipogenesis="" markers="" were="" examined.="" renal="" expression="" of="" (c/ebpa),="" (ppary),="" and="" (srebf1)was="" elevated="" in="" the="" aristolochic="" acid="" i(aa)="" aroups="" compared="" to="" the="" vehicle=""><0.05). 0-week="" groun="" n="4" 2-week="" group="" n="3," 4-week="" group="" n="4," control="" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" ttest="" in="" each="" week.*="" represents="" p="" <="" 0.05,="" and="" **represents=""><>

พังผืดของเนื้อเยื่อไต

พื้นที่การเกิดพังผืดของไตคั่นระหว่างหน้าเท่ากับ 1.8±0.7 เปอร์เซ็นต์ และ 9.1± 1.9 เปอร์เซ็นต์ (P<0.05)in the="" vehicle="" and="">(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มตามลำดับในตอนท้ายของ AA(กรดอริสโตโลจิค)การบริหาร. เซลล์เยื่อบุผิวท่อหลายชนิดสูญเสียไปจากกระบวนการอะพอพโทซิส สองสัปดาห์ต่อมา พื้นที่ไฟโบรติกเท่ากับ 2.1 ±0.4 เปอร์เซ็นต์ และ 8.1±4.7 เปอร์เซ็นต์ในกระสายยาและ AA(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มตามลำดับ ที่ 4 สัปดาห์ พื้นที่การเกิดพังผืดของไตคั่นระหว่างหน้าเท่ากับ 3.6±1.1 เปอร์เซ็นต์ และ 15.3±2.6 เปอร์เซ็นต์ (P<0.05)in the="" vehicle="" and="">(กรดอริสโตโลจิค)กลุ่มต่างๆ ตามลำดับ บริเวณอะพอพโทติกแบบท่อที่ O สัปดาห์ถูกแทนที่ด้วยบริเวณไฟโบรติกโดยการเปลี่ยนแปลงรูปแบบเนื้อเยื่อ (รูปที่ 6A, B) การประเมินด้วยกล้องจุลทรรศน์ของคราบ Masson trichrome พบว่าเนื้อเยื่อไต XOR(แซนทีน ออกซิโดเรดักเตส)กิจกรรมมีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับพื้นที่ไฟโบรติกคั่นระหว่างหน้า (เปอร์เซ็นต์ o) (P<0.0012,r²=>

รูปที่ 6พังผืดของเนื้อเยื่อไต (A, B) พื้นที่เกิดพังผืดของไตคั่นระหว่างหน้าเท่ากับ 1.8± 0.7 เปอร์เซ็นต์ และ 9.1 ± 1.9 เปอร์เซ็นต์ (P<0.05) in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively,at="" the="" end="" of="" aa="" administration.="" two="" weeks="" later,="" the="" areas="" were="" 2.1+0.4%="" and="" 8.1="" +="" 4.7%="" in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively.="" at="" 4="" weeks,="" the="" interstitial="" renal="" fibrosis="" areas="" were="" 3.6±="" 1.1="" and="" 15.3=""><0.05) in="" the="" vehicle="" and="" aa="" groups,="" respectively,="" scale="" bar="" indicated="" 200="" um,(c)="" kidney="" tissue="" xor="" activity="" was="" significantly="" correlated="" with="" interstitial="" fibrotic="" area(%)using="" microscopic="" evaluation="" of="" masson="" trichrome="" stain="" （p="0.0012" 产="0.40）." this="" suggests="" that="" xor="" activity="" contributed="" to="" tissue="" damage="" leading="" to="" end-stage="" renal="" disease.="" 0-week="" group="" n="4," 2-week="" group="" n="3,4-week" group="" n="4,control" n="4.Error" bars="" represent="" sem.="" statistical="" analysis="" was="" performed="" using="" multiple="" t-test="" in="" each="" week.*represents="">< 0.05,="" and="" **="" represents=""><>

CISTANCHE

หมายเหตุ: สมุนไพรจีนโบราณ cistanche (เรียกอีกอย่างว่า "สมุนไพรมังกร" และ "โสมทะเลทราย") เติบโตในทะเลทรายที่แห้งแล้งและอบอุ่นเท่านั้น ในฐานะหนึ่งในสมุนไพรอมตะทั้งเก้า Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa) มีส่วนผสมที่ทรงประสิทธิภาพมากมาย เช่น echinacoside, acteoside, ไกลโคไซด์ฟีนิลเลทานอยด์ทั้งหมด, ฟลาโวนอยด์, โพลีแซคคาไรด์ ฯลฯ ส่วนผสมที่มีประสิทธิภาพเหล่านี้ทำให้ซิสทานช์กลายเป็นสมุนไพร สมุนไพรบำรุงและวัสดุอาหารสำหรับภูมิคุ้มกันของผู้คน อวัยวะภายใน เซลล์สมองและเซลล์ประสาท ฯลฯ การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ได้ยืนยันผลต่อไปนี้ของ cistanche (ประโยชน์ของ cistanche): ปรับปรุงภูมิคุ้มกัน; ปรับปรุงสมรรถภาพทางเพศและการทำงานของไต ป้องกันความเมื่อยล้า; ต่อต้านริ้วรอย; ปรับปรุงหน่วยความจำ โรคพาร์กินสัน; โรคอัลไซเมอร์; สารต้านอนุมูลอิสระ; สบายท้องผูก; ต้านการอักเสบ; ส่งเสริมการเจริญเติบโตของกระดูก ผิวขาว; ปกป้องตับ; เป็นต้น

คลิกที่นี่เพื่อเป็นส่วนหนึ่ง Ⅱ

เอ็กไคนาโคไซด์