ส่วนที่ 2 ผลการป้องกันของ Phenylethanol Glycosides จาก Cistanche Tubulosa ต่อภาวะตับอักเสบจากตับที่เกิดจากโปรตีนในซีรัมของวัวในหนู
Mar 06, 2022
ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com
NF-κB p65 และการแสดงออกของคอลลาเจน I หลังจากการแทรกแซงของยาในเซลล์ HSC-T6 เพื่อที่จะระบุลักษณะสัญญาณของการเกิดพังผืดในตับ ยีนควบคุมหลักสองยีนในตับถูกกำหนดโดยการทดสอบ RT-PCR ข้อมูลแสดงให้เห็นว่าเซลล์ tHSC-T6 จากกลุ่มควบคุมมีระดับ NF- κB และคอลลาเจนประเภท I mRNA ที่ต่ำกว่า ในทางกลับกัน TGF- 1 กระตุ้นเซลล์ HSC-T6 ให้เพิ่มการควบคุม NF-κB (P <{12}}.01) และ="" col-i="" (p="">< 0.01)="" mrna="" ที่มีระดับสูงกว่า="" ที่อยู่ในกลุ่มควบคุม="" เมื่อมีความเข้มข้นของ="" cphgs="" ต่างกัน="">phenylethanoid glycoside จาก cistanche) ผลลัพธ์ของ NF-κB p65 [P NF-κB=0.001 สำหรับ 100 ug/ml, P NF-κB=0.002 สำหรับ 75 ug/ml, P NF-κB {{ 11}}.007 สำหรับ 50 ug/ ml และ P NF-κB=0.012 สำหรับ 25 ug/ml ตามลำดับ] และ Col-I [P Col-I=0.006, P Col -I=0.009, P Col-I=0.014, P Col-I=0.019 ตามลำดับ] แสดงการแสดงออกที่ลดลงของ mRNA เหล่านี้ (รูปที่ 7)
การวิเคราะห์ Western blot ของระดับคอลลาเจน I หลังจากการแทรกแซงของยาในเซลล์ HSC-T6 รูปที่ 8 แสดงระดับการแสดงออกของโปรตีนคอลลาเจน I ในเซลล์ HSC-T6 ของกลุ่มทดลองต่างๆ ระดับการแสดงออกของโปรตีนคอลลาเจน I ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มขนาดยาต่างๆ ของ CPhGs(phenylethanoid glycoside จาก cistanche)(100 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร, 75 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร, 50 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร และ 25 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) เปรียบเทียบกับกลุ่ม TGF- 1
การอภิปราย
CPhGs(phenylethanoid glycoside จาก cistanche)เป็น phenylethanoid glycoside ที่แยกออกมาและทำให้บริสุทธิ์จากเหง้าของ Cistanche ซึ่งใช้เป็นยาสมุนไพรจีนโบราณ ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา CPhGs ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีความสามารถอันทรงพลังในการป้องกันการบาดเจ็บที่ตับ (20) ดังนั้นเราจึงมุ่งที่จะตรวจสอบว่า CPhG มีผลในการยับยั้งการเกิดพังผืดในตับอักเสบจากการเกิดพังผืดในตับที่เกิดจาก BSA ในหนูแรทหรือไม่ BJRG มักใช้เป็นยารักษาโรคตับในจีน มันทำจากเปลือกเต่า Radix Paeonia rubra, Cordyceps Sinensis, Radix isatidis และอื่น ๆ มีผลในการเติมเต็ม Qi และเลือด บรรเทาความเมื่อยล้า อ่อนโหนด นอกจากนี้ จากการศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า มันมีหน้าที่ที่ชัดเจนในการปิดกั้นการเกิดพังผืดในตับในระยะเริ่มต้น ยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์ที่เก็บไขมัน และลดการสังเคราะห์คอลลาเจน [21] ดังนั้น BJRG จึงถูกใช้เป็นยาในเชิงบวกในการศึกษานี้
การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาของการเกิดพังผืดในตับในหนูที่เกิดจากการฉีด BSA มีความคล้ายคลึงกับการเปลี่ยนแปลงในโรคตับแข็งในมนุษย์ [22] CPhGs(phenylethanoid glycoside จาก cistanche)ลดระดับของการเกิดพังผืดในตับโดยขึ้นอยู่กับขนาดยาและยับยั้งการเปลี่ยนแปลงของ HSC เป็นเซลล์ที่มีลักษณะคล้าย myofibroblast ลดระดับของซีรั่ม ALT, AST, HA, LN, CIV, TGF- 1 และดัชนีตับ และการแสดงออกที่ถูกระงับอย่างเห็นได้ชัด ของคอลลาเจน I, คอลลาเจน III และ TGF- 1 ในเนื้อเยื่อตับ ขั้นตอนของการเกิดพังผืดในตับมีความสัมพันธ์กับระดับซีรั่มของ HA, LN และ IV-C ซึ่งเครื่องหมายอาจมีบทบาทในการตรวจหาระดับของการเกิดพังผืดในตับ [23] มีรายงานว่า HA เป็นทรัพยากรหลักของเมทริกซ์นอกเซลล์ IV-C เป็นองค์ประกอบสำคัญของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินจะถูกสังเคราะห์อย่างมากมายและสะสมอย่างหนักในระยะก่อนหน้าของโรคตับแข็งในตับ ระดับซีรั่มของ LN และ IV-C เป็นดัชนีของอัตราการหมุนเวียนของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินและแสดงระดับของการเกิดพังผืดในบริเวณพอร์ทัลและเส้นเลือดฝอยไซน์ [24] PC III เป็นตัวบ่งชี้ในการวินิจฉัยโรคพังผืดในตับและโรคตับแข็งในระยะแรก แต่ความไวและความจำเพาะไม่สูง และไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างระยะต่างๆ ของการเกิดพังผืดในข้อมูลอ้างอิงจำนวนมาก [24, 25]
การศึกษานี้ได้รับผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกัน นอกจากนี้ การสังเกตส่วนที่ย้อมด้วยสีไตรโครมของ H&E และ Masson ยังแสดงเนื้อเยื่อตับปกติที่มี lobules ตับและไซนูซอยด์ในตับที่ชัดเจน โครงสร้างเนื้อเยื่อตับในกลุ่มแบบจำลองไม่เป็นระเบียบ และเนื้อเยื่อตับและไซนูซอยด์ในตับถูกแทนที่ด้วยเนื้อเยื่อเกี่ยวพันจำนวนมาก อย่างไรก็ตาม พบการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มบำบัดเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง ที่สำคัญ การแสดงออกของคอลลาเจนชนิดที่ 1 และการแสดงออกของคอลลาเจนชนิดที่ 3 มีบทบาทสำคัญในการพัฒนาการเกิดพังผืดในตับ ซึ่งการอุดตันนี้สามารถป้องกันและรักษาโรคพังผืดในตับได้ ดังนั้นการสร้างและการสะสมในเนื้อเยื่อตับของคอลลาเจนชนิดที่ 1 และคอลลาเจนชนิดที่ 3 จึงเป็นตัวกำหนดที่สำคัญของประสิทธิภาพในการต้านการเกิดพังผืดของตับ TGF- 1 ยังเป็นโปรไฟโบรเจนิกไซโตไคน์ที่สำคัญในการบาดเจ็บที่ตับและออกฤทธิ์ทางชีวภาพด้วยการดำเนินการทางเภสัชวิทยาหลายอย่าง [26] จำเป็นต้องมีความสมดุลระหว่างการกระทำเหล่านี้เพื่อรักษาสภาวะสมดุลของเนื้อเยื่อ การแสดงออกที่ผิดปกติของ TGF- 1 เกี่ยวข้องกับการเกิดโรคของโรคตับ [27, 28] เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่า TGF- 1 เป็นไซโตไคน์ที่สำคัญซึ่งเกี่ยวข้องกับการเกิดพังผืดในตับในระยะเริ่มต้น
ความเครียดที่เกิดจากออกซิเดชันกระตุ้น TGF- 1 ซึ่งส่งผลให้เกิดการกระตุ้นการผลิตและการสะสม ECM อย่างหลัง [29] ดังนั้น หนึ่งในกลยุทธ์ที่มีประสิทธิผลในการผลิตยาต้านไฟโบรซิสในตับคือการระบุสารต้าน TGF- 1 การวิเคราะห์ทางอิมมูโนฮิสโตเคมีพบว่าการแสดงออกของคอลลาเจนชนิดที่ 1 คอลลาเจนชนิดที่ 3 และ TGF- 1 สามารถตรวจพบกระบวนการทางพยาธิวิทยาของการเกิดพังผืดในตับได้ การแสดงออกของคอลลาเจนประเภท I, คอลลาเจนประเภท III และ TGF- 1 ในกลุ่มการรักษาลดลง ซึ่งลดลงอย่างมีนัยสำคัญใน CPhG ขนาดสูง(phenylethanoid glycoside จาก cistanche)โดยเฉพาะกลุ่มบำบัด และแนะนำว่า CPhG เป็นตัวยับยั้งคอลลาเจนชนิด I, คอลลาเจนชนิด III และ TGF- 1 ที่มีประสิทธิผล สันนิษฐานได้ว่า CPhG สามารถปรับปรุงการทำงานของคอลลาเจนเนส รักษาสมดุลไดนามิกของการสังเคราะห์และการย่อยสลาย ECM ดังนั้นจึงล่าช้าและป้องกันการก่อตัวของพังผืดในตับ CPhGs(phenylethanoid glycoside จาก cistanche)ไม่เพียงแต่สามารถทำให้พังผืดในตับที่เกิดจาก BSA ในหนูดีขึ้นเท่านั้น แต่ยังอาจเกี่ยวข้องกับการยับยั้งการกระตุ้นของ HSC ในหลอดทดลองด้วย การกระตุ้น HSC ถือเป็นขั้นตอนสำคัญของการเกิดพังผืด ในการศึกษานี้ ผลการศึกษาแสดงให้เห็นว่าการบริหาร CPhG จาก 25 ถึง 100 ug/ml ช่วยลด NF-κB p65 ที่ลดลง การแสดงออกของคอลลาเจน I mRNA และการแสดงออกของโปรตีนคอลลาเจน I ใน HSC ได้อย่างน่าทึ่ง NF-κBมีบทบาทสำคัญในการปรับการตอบสนองของภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อหรือสิ่งเร้า [30] การสะสมของ NF-κBในเซลล์ตับอาจส่งผลให้เกิดการสรรหา cytokines ที่อักเสบ/ตัวกลางไกล่เกลี่ย ซึ่งทำให้เกิดการพัฒนาของพังผืด [31, 32] นอกจากนี้ คอลลาเจนยังเป็นดัชนีที่มีความละเอียดอ่อนซึ่งสะท้อนถึงระดับการเกิดพังผืดและคิดเป็นประมาณ 50 เปอร์เซ็นต์ของโปรตีนทั้งหมดในตับที่มีเส้นใย [33]
ด้วยเหตุนี้ เราจึงตั้งสมมติฐานว่ากลไกระดับโมเลกุลที่ต่อต้านการเกิดพังผืดของตับนั้นเชื่อมโยงกับ CPhGs(phenylethanoid glycoside จาก cistanche)- การยับยั้งการแสดงออกของ NF-κB ซึ่งเป็นประโยชน์ต่อบทบาทเสริมฤทธิ์กันของการลดทอนความเป็นพิษของภูมิคุ้มกันและความเครียดจากการอักเสบในเนื้อเยื่อตับที่มีรอยโรค BSA การแก้ไขเพิ่มเติมเกี่ยวกับความผิดปกติของการเผาผลาญเพื่อปรับปรุงการทำงานของตับ
บทสรุป
โดยสรุป การศึกษาของเราระบุว่าCPhGs(phenylethanoid glycoside จาก cistanche)ลดทอนขอบเขตของการเกิดพังผืดในตับที่เกิดจาก BSA ในหนูทดลองอย่างมีนัยสำคัญ กลไกอย่างน้อยบางส่วนอาจเกิดจากผลการยับยั้งของ CPhG ต่อองค์ประกอบของ ECM และการกระตุ้นการเสื่อมสภาพของ ECM และ/หรือโดยการยับยั้งโดยตรงของการสังเคราะห์คอลลาเจนประเภทที่ 1 คอลลาเจนชนิดที่ 3 และการแสดงออกของ TGF{ {0}}. ก่อนหน้านี้ เราคาดว่า CPhG สามารถใช้ในผลิตภัณฑ์ดูแลสุขภาพหรือในยารักษาทางคลินิกเพื่อป้องกันการเกิดพังผืดในตับของมนุษย์ จำเป็นต้องมีการศึกษาในอนาคตเพื่อสร้างประสิทธิภาพของ CPhG เป็นยาป้องกันพังผืดในตับที่มีศักยภาพ
ตัวย่อ
CPhG:ฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์จากซิสแทนเช; BSA: เซรั่มอัลบูมินจากวัว; HSC-T6: เซลล์ตับ stellate; Hyp: ไฮดรอกซีโพรลีน; BJRG: เม็ดผสม Biejiararangan; TGF- 1: การเปลี่ยนแปลงปัจจัยการเติบโต 1; ALT: อะลานีนอะมิโนทรานสเฟอเรส; AST: แอสพาเทตอะมิโนทรานสเฟอเรส; HA: กรดไฮยาลูโรนิก; LN: ลามินิน; PC III: โปรคอลลาเจนประเภทที่สาม; IV-C: คอลลาเจน Type IV; NF-κB: ปัจจัยนิวเคลียร์ kappa-light-chain-enhancer ของเซลล์ B ที่เปิดใช้งาน; RT-PCR: ปฏิกิริยาลูกโซ่ transcriptase-polymerase ย้อนกลับ; SDS-PAGE: โซเดียม โดเดซิล ซัลเฟต-โพลีอะคริลาไมด์ เจล อิเล็กโทรโฟรีซิส
ผลประโยชน์ที่แข่งขันกัน ผู้เขียนประกาศว่าพวกเขาไม่มีส่วนได้เสียที่แข่งขันกัน ผลงานของผู้เขียน TL, JZ, SPY, LM, MT และ SLZ คิดและออกแบบการทดลอง SPY, TL และ JZ วิเคราะห์ข้อมูล SPY และ JZ เขียนต้นฉบับ TL, LM และ JZ ตรวจทานต้นฉบับ ผู้เขียนทั้งหมดอ่านและได้รับการอนุมัติต้นฉบับสุดท้าย. รับทราบ งานวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนโดย National Natural Science Foundation of China (81260624) ผู้เขียนขอขอบคุณอย่างจริงใจต่อศาสตราจารย์ เถา หลิว สำหรับข้อเสนอแนะในการปรับปรุงการเขียนบทความนี้ รายละเอียดผู้แต่ง 1 ภาควิชาพิษวิทยา คณะสาธารณสุขศาสตร์ มหาวิทยาลัยการแพทย์ซินเจียง เลขที่ 393 ถนนซินยี่ อุรุมชี 830011 เขตปกครองตนเองซินเจียงอุยกูร์
ภูมิภาค ประเทศจีน. 2 ห้องปฏิบัติการหลักสำหรับการแพทย์อุยกูร์ สถาบัน Materia Medica of Xinjiang เมือง Urumqi 830004 ประเทศจีน 3 No. 140 Xinhua South Road, Tianshan District, Urumqi 830000 เขตปกครองตนเองซินเจียงอุยกูร์, จีน ได้รับ: 6 สิงหาคม 2015 ยอมรับ: 24 พฤศจิกายน 2015
อ้างอิง
โคเฮน-นาฟตาลี เอ็ม, ฟรีดแมน เอสแอล สถานะปัจจุบันของการรักษาด้วยยาต้านการแข็งตัวของเลือดในผู้ป่วยโรคตับเรื้อรัง Adv Gastroenterol. 2011;4(6):391–417.
Puche JE, สายมัน Y, ฟรีดแมน SL. เซลล์ตับและพังผืดในตับ บจก. 2013;3(4):1473–92.
เอร์นานเดซ-เกอา วี, ฟรีดแมน เอสแอล การเกิดโรคของพังผืดในตับ อนุศาสน์ ปทุม. 2011;6:425–56.
Sohrabpour AA, Mohamadnejad M, Malekzadeh R. บทความทบทวน: การกลับรายการของโรคตับแข็ง อาหาร Pharmacol Ther. 2012;36(9):824–32.
Raven PH, Zhang LB, Ventenat O. สถาบันวิทยาศาสตร์จีน ฉบับที่ 23 จีน: กองบรรณาธิการของ Flora of China; 2013. พี. 1–16.
คณะกรรมการเภสัชตำรับจีน กระทรวงสุขาภิบาลแห่งสาธารณรัฐประชาชนจีน. เภสัชตำรับจีน ตอนที่ 1 จีน: สำนักพิมพ์อุตสาหกรรมเคมี; 2553. หน้า. 126.
Yan GH, Tian JH, Long BW, Li N. ความคืบหน้าการวิจัยของ phenylethanoid glycosides จาก Cistanche tubulosa เซ็นทรัล เซาท์ ฟาร์มา 2012;10:692–5.
Li J, Huang D, He L. ผลกระทบของ Rou Cong Rong(Herba Cistanches Deserticola) เกี่ยวกับความเป็นพิษต่อระบบสืบพันธุ์ในหนูเมาส์ที่เกิดจากไกลโคไซด์ของ Leigongteng (Radix et Rhizoma Tripterygii) เจ ตราดิษฐ์ ชินเมด. 2014;34(3):324–32.
Xing Y, Liao J, Tang Y, Zhang P, Tan C, Ni H, และคณะ ACE และสารยับยั้งการรวมตัวของเกล็ดเลือดจาก Tamarix Hojnacki Bunge (พืชโฮสต์ของ Herba Cistanches) ที่กำลังเติบโตในซินเจียง Pharmacogn แม็ก. 2014;10(38):111–7.
Jia Y, Guan Q, Jiang Y, Salh B, Guo Y, Tu P และอื่น ๆ การแก้ไขอาการลำไส้ใหญ่บวมที่เกิดจากโซเดียม dextran sulfate ในหนูทดลองด้วยสารสกัดจาก Cistanche tubulosa ที่อุดมด้วย echinacoside Phytother Res. 2014;28(1):110–9.
