ตอนที่ 2|Acteoside ยับยั้ง RANKL-Mediated Osteoclastogenesis โดยการยับยั้งการเหนี่ยวนำ C-Fos และเส้นทาง NF-kB และลดการผลิต ROS
Mar 06, 2022
สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม โปรดติดต่อ ali.ma@wecistanche.com
ตอนที่ 2|Acteosides ส่งเสริมการเจริญเติบโตของกระดูกอย่างไร?
คลิกเพื่อ Cistanches กับ Acteoside
การอภิปราย
การเปลี่ยนแปลงของกระดูกถูกควบคุมอย่างเข้มงวดโดยความสมดุลระหว่างการสร้างกระดูกโดยเซลล์สร้างกระดูกและการสลายของกระดูกโดยเซลล์สร้างกระดูก การสลายของกระดูกเป็นเวลานานและมากเกินไปทำให้เกิดความไม่สมดุลของการหมุนเวียนของโครงกระดูก ส่งผลให้เกิดโรคที่เกิดจากการดูดซึมของกระดูก เพื่อสำรวจผลกระทบของแอคทีโอไซด์เกี่ยวกับการสร้างกระดูก เราใช้มาโครฟาจสองชนิด BMM ที่เพาะเลี้ยงขั้นต้น และเซลล์ RAW264.7 เซลล์เหล่านี้ถูกกระตุ้นด้วย RANKL เพื่อแยกความแตกต่างออกเป็นเซลล์สร้างกระดูกทั้งที่มีและไม่มีแอคทีโอไซด์. เราแสดงให้เห็นเป็นครั้งแรกว่าแอคทีโอไซด์ยับยั้งการสร้างความแตกต่างและการสร้าง osteoclastแอคทีโอไซด์ด้วยตัวมันเองที่ความเข้มข้นที่ตรวจสอบแล้วไม่ได้ทำให้ความมีชีวิตของมาโครฟาจขั้นต้นที่เพาะเลี้ยงลดลงทั้งในสภาวะการเจริญเติบโตและความแตกต่างแอคทีโอไซด์การรักษายังลดกิจกรรมการสลายของ osteoclasts ที่โตเต็มที่ ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าแอกทิโอไซด์ยับยั้งการสร้างกระดูกจากแมคโครฟาจและกิจกรรมการสลายของออสติโอพลาสต์ ผลลัพธ์จากระบบการเพาะเลี้ยงของเรา ซึ่งไม่รวมเซลล์สร้างกระดูกหรือเซลล์สโตรมอล ยังแนะนำว่าแอคทีโอไซด์ป้องกันการก่อตัวของเซลล์สร้างกระดูกโดยออกฤทธิ์โดยตรงกับสารตั้งต้นของกระดูก RANKL เปิดใช้งาน MAPK รวมถึง p38, ERK และ JNK ไคเนสทั้งสามนี้เกี่ยวข้องกับการสร้างความแตกต่างของ osteoclastic ในระยะเริ่มต้น และด้วยเหตุนี้การยับยั้งของพวกมันทางเภสัชวิทยาหรือด้วยการถ่าย JNK ที่โดดเด่นและเชิงลบจะยับยั้งการสร้างกระดูกที่เกิดจาก RANKL [29] ผลลัพธ์ของเราเปิดเผยว่าแอคทีโอไซด์การปรับสภาพก่อนจะยับยั้งไคเนสเหล่านี้ทั้งหมด ซึ่งบ่งชี้ถึงการควบคุมลงของ MAPK ที่ไม่จำเพาะเจาะจง ผลลัพธ์นี้แตกต่างไปจากรายงานก่อนหน้านี้ว่า EGCG ซึ่งเป็นสารประกอบต้านการอักเสบที่สำคัญในกรีนที ลดการเปิดใช้ JNK โดยเฉพาะโดยไม่ส่งผลกระทบหรือการกระตุ้น p38 ใน BMM ที่กระตุ้นด้วย RANKL [7] มีรายงานว่า Paeonol ซึ่งเป็นสารต้านการอักเสบที่ได้มาจากสมุนไพรจีนสามารถยับยั้ง ERK และ p38 ได้ แต่ไม่ใช่ขยะ phosphorylation ในเซลล์ RAW264.7 ที่กระตุ้นด้วย RANKL[30] ในทางตรงกันข้าม silibinin ซึ่งเป็นสารยับยั้งใหม่ในกระดูก ช่วยลดการกระตุ้นการทำงานของ p38, ERK และ JNK [31] การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าผลของสารต้านการดูดซับต่อการกระตุ้น MAPK โดย RANKL นั้นขึ้นอยู่กับสารประกอบนั้น แม้ว่า MAPK ทั้งสามส่วนจะเกี่ยวข้องกับการสร้างกระดูกในวัยเจริญพันธุ์ในระยะเริ่มต้น เมื่อพิจารณาจากการสังเกตว่าแอกทีโอไซด์ลดระดับ p-JNK ใน BMM ที่กระตุ้นด้วย RANKL แม้จะอยู่ที่ 1 มม. การอุดตันของ JNK แทนที่จะเป็น p38 MAPK หรือ ERK ดูเหมือนจะเป็นเหตุการณ์ที่เฉพาะเจาะจงมากขึ้นในแอคทีโอไซด์- เป็นสื่อกลางในการต่อต้าน osteoclastogenesis ในเซลล์ แม้ว่าแอกทิโอไซด์ที่ความเข้มข้นเท่ากันจะไม่ลดจำนวนเซลล์สร้างกระดูกใน BMM แต่การทรีทเมนต์ของแอกทิโอไซด์ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้เรายังพบว่าการปรับสภาพด้วย SP600125 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งทางเภสัชวิทยาที่จำเพาะต่อ JNK ช่วยป้องกันการก่อตัวของเซลล์สร้างกระดูก (ไม่แสดงข้อมูล) อย่างมาก โดยรวมแล้ว การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าการส่งสัญญาณที่เป็นสื่อกลางของ JNK มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการปราบปรามของแอคทีโอไซด์ที่เป็นสื่อกลางของการสร้างกระดูกซึ่งกระตุ้นโดย RANKL การส่งสัญญาณ NF-kB ควบคุมเหตุการณ์ของเซลล์ รวมถึงการตายของเซลล์ ความก้าวหน้าของวัฏจักรเซลล์ การยึดเกาะของเซลล์ การผลิตไซโตไคน์ และการอยู่รอดในมาโครฟาจ [32] การส่งสัญญาณ NF-kB ยังจำเป็นสำหรับการพัฒนา osteoclast ซึ่งแสดงให้เห็นโดยการปรากฏตัวของโรคกระดูกพรุนในหนู NF-kB-knockout [33,34] ดังนั้น การยับยั้ง NF-kB จึงเสนอให้เป็นเป้าหมายที่มีประสิทธิผลสำหรับสารต้านการดูดกลืนแสงเพื่อควบคุมการทำงานของเซลล์สร้างกระดูกและรักษาโรคกระดูกพรุน การดัดแปลงหลังการแปลของโปรตีน NF-kBsubfamily มีความสำคัญในการปรับกิจกรรม NF-kB โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ฟอสโฟรีเลชันของหน่วยย่อย p65 และไคเนส IkB มีความสำคัญสำหรับ NF-kB เพื่อกระตุ้นการสร้างกระดูก [7] การค้นพบปัจจุบันของเราแสดงให้เห็นว่าการกระตุ้น RANKL เพิ่มกิจกรรมการจับ DNA ของ NF-kB และฟอสโฟรีเลชันของหน่วยย่อย p65 และ Ikea ทั้งในเซลล์ BMM และ RAW264.7 การปรับสภาพด้วยแอกทิโอไซด์ยับยั้งการเพิ่มขึ้นที่เกิดจาก RANKL เหล่านี้ ส่งผลให้กิจกรรม NF-kB ที่มีการควบคุมลดลง ดังนั้น ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า นอกเหนือจาก MAPK แล้ว การส่งสัญญาณ NF-kB เป็นเป้าหมายหลักของแอกทีโอไซด์ในการยับยั้งการสร้างความแตกต่างและการก่อตัวของ osteoclast จากมาโครฟาจที่กระตุ้นด้วย RANKL นอกเหนือจากการส่งสัญญาณ NF-kB แล้วเส้นทาง c-Fos/c-Jun/NFATc1 มีบทบาทสำคัญในการพัฒนาเซลล์สร้างกระดูก ดังนั้นการขาดโปรตีนเหล่านี้สามารถจับกุมการสร้างกระดูก [35,36] ในการศึกษานี้ เราพบว่าแอกทีโอไซด์ป้องกันการแสดงออกของ c-Fos และ NFATc1 ที่เกิดจาก RANKL ที่ระดับ mRNA และโปรตีน JNK เป็นไคเนสต้นน้ำของ c-Jun ซึ่งจำเป็นสำหรับการแสดงออกของ NFATc1 และการสร้างกระดูกเพื่อตอบสนองต่อ RANKL [29] . การปิดกั้นวิถีของ JNK/c-Jun ด้วยตัวยับยั้ง JNK ลดการก่อรูปของเซลล์สร้างกระดูกที่เหนี่ยวนำโดย RANKL และการแสดงออกของ c-Fos และ NFATc1 [7] ผลลัพธ์และการค้นพบก่อนหน้านี้ของเราชี้ให้เห็นว่าการยับยั้งการส่งสัญญาณที่เป็นสื่อกลางของ JNK โดยแอคทีโอไซด์นั้นสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการป้องกัน c-Fos และ NFATc1 ที่เป็นสื่อกลาง RANKL
การแสดงออกซึ่งยับยั้งการสร้างความแตกต่างของ osteoclast ในแมคโครฟาจ ความแตกต่างในผลกระทบของแอคทีโอไซด์บน BMM และเซลล์ RAW264.7 อย่างน้อยก็ส่วนหนึ่งเนื่องจากความแตกต่างในความไวต่อการยับยั้ง JNK TNF-a สามารถกระตุ้นการสร้างกระดูกที่ไม่ขึ้นกับสัญญาณ RANKL-RANK [37] IL-1 เป็นตัวกลางในการทำลายกระดูกทางพยาธิวิทยาที่เกิดจากการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนหรือการอักเสบ[7] การรบกวนตัวรับ IL-1 แบบ I หรือการส่งสัญญาณ IL-1 สามารถย้อนกลับการสูญเสียกระดูกที่เกิดจากการตัดรังไข่ได้ [38] หรือโรคข้ออักเสบรูมาตอยด์ [39] การศึกษานี้แสดงให้เห็นถึงความสามารถของแอคทีโอไซด์เพื่อลดการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบ เช่น TNF-a, IL-1b และ IL-6 ในมาโครฟาจ Acteoside ถูกคิดว่าจะยับยั้งการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบโดยการยับยั้ง p38 ไคเนสและการส่งสัญญาณ ERK เนื่องจากการกระตุ้น ERK1/2, p38 MAPK หรือทั้งสองอย่างจำเป็นสำหรับการผลิตไซโตไคน์ที่เกิดจากไลโปโพลีแซคคาไรด์ในมาโครฟาจ [40,41] ลูทีโอลินซึ่งเป็นสารประกอบที่ทำให้เกิดการอักเสบได้รับรายงานเพื่อยับยั้งการผลิตสารสื่อกลางในการอักเสบโดยการยับยั้งการกระตุ้น p38 MAPK [42] ในการศึกษานี้ เรายังพบว่าแอกทีโอไซด์ลดการสูญเสียกระดูกในหนูที่ตัดรังไข่ด้วยหลักฐานจากแรงแตกหักสูงสุดที่ได้รับการฟื้นฟู ที่กึ่งกลางของกระดูกโคนขาขวาและการหายตัวไปของกระดูกเปลือกนอกที่เป็นโรคกระดูกพรุน การบริหารช่องปากด้วยแอคทีโอไซด์ควบคุมการเพิ่มขึ้นที่เกิดจากการตัดรังไข่ในระดับซีรั่ม IL-1b และ IL-6 ในซีรัม แต่ไม่ใช่ ALP ระดับแคลเซียม, TRAP และ OC ใน OVX ในซีรัมที่เพิ่มขึ้นยังถูกยับยั้งโดยการรักษาทางปากด้วยแอคทีโอไซด์ ซึ่งบ่งชี้ว่าแอกทีโอไซด์ช่วยลดการเปลี่ยนแปลงของไบโอมาร์คเกอร์ที่จำเพาะต่อการสร้างกระดูกและการสลายสลาย เนื่องจากโรคกระดูกพรุนมีลักษณะเฉพาะด้วยความหนาแน่นของมวลที่ลดลงและโครงสร้างไมโครของกระดูก trabecular ที่เสื่อมลง การสูญเสียกระดูก trabecular ที่เกิดจาก OVX และการเปลี่ยนแปลงพารามิเตอร์ทางสัณฐานวิทยาจึงถูกยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญโดยการบริหารช่องปากด้วยแอคทีโอไซด์ การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าแอคทีโอไซด์อาจใช้เป็นสารต้านการฟื้นตัวในการรักษาโรคกระดูกพรุนโดยการย้อนกลับการกระตุ้นการสร้างกระดูกพรุนที่ไม่สมดุล อย่างไรก็ตาม เซลล์สร้างกระดูกเป็นปัจจัยหลักในการสร้างกระดูกใหม่ ดังนั้น จึงจำเป็นต้องมีสารที่สามารถเพิ่มจำนวนเซลล์สร้างกระดูกหรือความแตกต่างเพื่อเพิ่มการสร้างกระดูก [30] ในทางตรงกันข้าม เราพบว่าแอกทีโอไซด์ไม่ส่งผลต่อการสร้างความแตกต่างของออสติโอบลาสต์หรือการทำให้เป็นแร่ในเซลล์ไขกระดูกที่ได้รับการรักษาด้วย DAG เมื่อนำมารวมกัน ผลลัพธ์ของเราแนะนำว่าแอกทีโอไซด์มีฤทธิ์ต้านการสลายแต่ไม่ส่งผลโดยตรงต่อการสร้างกระดูก จำเป็นต้องมีการทดลองที่มีรายละเอียดมากขึ้นในการวิเคราะห์พารามิเตอร์เฉพาะของกระดูกในร่างกายและในหลอดทดลองเพื่อชี้แจงว่าแอกทีโอไซด์มีประโยชน์ต่อการสร้างกระดูกหรือไม่ , c-Fos และ NFATc1 ข้อมูลแนะนำกลไกที่เป็นไปได้สองอย่างซึ่งแอกทีโอไซด์มีประโยชน์เหล่านี้ ความเป็นไปได้อย่างหนึ่งก็คือแอคทีโอไซด์
ยับยั้งการสร้าง osteoclastogenesis เนื่องจากมีศักยภาพในการต้านอนุมูลอิสระ การศึกษาจำนวนมากได้แสดงให้เห็นว่าการผลิต ROS ที่อาศัยตัวรับอาจทำหน้าที่เป็นสื่อกลางในการส่งสัญญาณดาวน์สตรีม[43–45] ไคเนสและปัจจัยการถอดรหัสบางอย่างมีความไวต่อสถานะรีดอกซ์ของเซลล์ ซึ่งส่งผลต่อเหตุการณ์ต่างๆ ของเซลล์ RANKL กระตุ้นการผลิต ROS ซึ่งเป็นสื่อกลางในการตอบสนองของเซลล์ที่เกิดจาก RANKL สำหรับการสร้างความแตกต่างของ osteoclast [24] การปรับสภาพด้วยสารต้านอนุมูลอิสระ เช่น N-acetyl cysteine และ glutathione ช่วยป้องกันการสร้าง ROS ที่เป็นสื่อกลาง RANKL ซึ่งบ่งชี้ว่าสารต้านอนุมูลอิสระลดการสูญเสียมวลกระดูกโดยลดการสืบพันธุ์ที่เกิดจาก RANKL [24] สอดคล้องกับข้อค้นพบเหล่านี้ การศึกษาในปัจจุบันพบว่าแอคทีโอไซด์ลดทอน ROS ภายในเซลล์ที่ผลิตใน BMM ในระหว่างการสร้างความแตกต่างของ osteoclast ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา การสังเกตนี้ชี้ให้เห็นว่าการยับยั้ง osteoclastogenesis อย่างน้อยก็ส่วนหนึ่งเนื่องมาจากศักยภาพในการต้านอนุมูลอิสระของแอคทีโอไซด์ นอกจากนี้เรายังแนะนำว่าแอกทีโอไซด์อาจควบคุมCa2 ควบคู่ไปกับการไหลเข้า ดังนั้นจึงไปยับยั้งการสร้างกระดูก เมื่อเร็ว ๆ นี้ Acteoside ได้รับการรายงานเพื่อยับยั้งการแพ้ประเภทที่ 1 โดยการปรับลด/NFAT และสัญญาณ JNK ในเซลล์เบสโซฟิลิก [46] ตัวรับ thecalcium-sensing receptor มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับระเบียบของ osteoclastogenesis [47] ความสัมพันธ์นี้แสดงให้เห็นว่าช่องแคลเซียมเกี่ยวข้องกับแอคทีโอไซด์-เหนี่ยวนำให้เกิดการยับยั้งการสร้างความแตกต่างและการสร้าง osteoclast อย่างไรก็ตาม จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อสำรวจกลไกที่แน่นอนโดยที่แอกทีโอไซด์ทำหน้าที่เป็นสารต้านการดูดซับผ่านการปรับค่า Ca2 บวกกับสภาวะสมดุล
โดยสรุป การค้นพบปัจจุบันของเราแสดงให้เห็นว่าแอกทีโอไซด์ยับยั้งการสร้างความแตกต่างของออสติโอพลาสต์ที่เกิดจาก RANKL จาก BMM และมาโครฟาจ RAW264.7 และยับยั้งการสลายของกระดูกโดยเซลล์สร้างกระดูกที่โตเต็มที่แอคทีโอไซด์ยังป้องกันการกระตุ้นที่เหนี่ยวนำโดย RANKL ของ MAPK ที่รู้จักกันดีสามตัวและปัจจัยการถอดรหัส เช่น NF-kB, c-Fos และ NFATc1 ตลอดจนการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบ เช่น TNF-a, IL-1b, และอิลลินอยส์-6 นอกจากนี้ การให้ Acteoside ทางปากช่วยลดภาวะกระดูกพรุนที่เกิดจากการตัดรังไข่ แม้ว่าจะไม่ส่งผลต่อการสร้างกระดูกจากเซลล์ไขกระดูกก็ตาม โดยรวมแล้ว การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าด้าน CTE มีบทบาทที่เป็นประโยชน์ในการลดการก่อตัวของเซลล์สร้างกระดูกและกิจกรรมในฐานะสารต้านการดูดซับที่มีศักยภาพ
ข้อมูลสนับสนุน
รูปที่ S1 โครงสร้างทางเคมีของแอกทีโอไซด์
(TIF) รูป S2แอคทีโอไซด์ป้องกันการก่อตัวของหลุมที่เกิดจาก RANKL ใน BMM BMM ถูกปรับสภาพก่อนด้วยขนาดยาที่ระบุของแอคทีโอไซด์เป็นเวลา 2 ชั่วโมงในแผ่นหลุมที่เคลือบด้วย24-หลุมและกระตุ้นด้วย 50 ng/ml M-CSF และ 100 ng/ml RANKL เป็นเวลา 7 วัน สังเกตการก่อตัวของหลุมภายใต้กล้องจุลทรรศน์ออปติก B, BMMs ถูกเพาะเลี้ยงด้วย M-CSF และ RANKL ต่อหน้าที่หลากหลายแอคทีโอไซด์ความเข้มข้น ({{0}}–20 มิลลิโมลาร์) และ 7 วันต่อมา พื้นที่ที่ถูกดูดซับถูกหาปริมาณจากการทดลองอิสระ 3 การทดลองและแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของกลุ่มควบคุม (n=4 ต่อ การทดลอง). *p,0.05, **p,0.01 และ ***p,0.001 เทียบกับเซลล์ที่เพาะเลี้ยงด้วย M-CSF และอันดับ
รูปที่ S3 แอกทีโอไซด์ลดการผลิตของไซโตไคน์ที่มีการอักเสบในเซลล์ RAW264.7 ที่กระตุ้นด้วย RANKL
เซลล์ถูกปรับสภาพก่อนด้วยความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้น (0–10 มิลลิโมลาร์) ของแอคทีโอไซด์เป็นเวลา 2 ชั่วโมง ตามด้วยการกระตุ้นด้วย 100 ng/ml RANKL เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ระดับของ TNF-a, IL-1b และ IL-6 ถูกกำหนดหาโดยใช้ชุดเครื่องมือ ELISA ***p,0.001 เทียบกับเซลล์ที่ไม่มี RANKL และแอกทีโอไซด์ #p,0.05 และ ##p,0.01 เทียบกับเซลล์ที่ถูกกระตุ้นด้วย RANKL เท่านั้น
ผลงานของผู้เขียน
คิดและออกแบบการทดลอง: S-YL J-CL. ทำการทดลอง: S-YL K-SL S-HK SHY วิเคราะห์ข้อมูล: K-SL S-YL J-CL. รีเอเจนต์/วัสดุ/เครื่องมือวิเคราะห์ที่สนับสนุน: S-YL SHY J-CL เขียนบทความ: S-YL SHY J-CL.
อ้างอิง
1 Rho J, Takami M, Choi Y (2004) Osteoimmunology: ปฏิสัมพันธ์ของระบบภูมิคุ้มกันและโครงกระดูก โมเลกุลและเซลล์ 17: 1–9.
2. Del Fattore A, Capannolo M, Rucci N (2010) ไขกระดูกและไขกระดูก: อวัยวะเดียวกัน จดหมายเหตุของชีวเคมี ชีวฟิสิกส์ 503: 28–34
3. Rachner TD, Khosla S, Hofbauer LC (2011) โรคกระดูกพรุน: ปัจจุบันและอนาคต มีดหมอ 377: 1276–1287
4. Sturge J, Caley MP, Waxman J (2011) การแพร่กระจายของกระดูกในมะเร็งต่อมลูกหมาก: กลยุทธ์การรักษาที่เกิดขึ้นใหม่ ธรรมชาติทบทวนมะเร็งวิทยาคลินิก 8: 357–368
5. Goltzman D (2002) การค้นพบ ยา และความผิดปกติของโครงกระดูก บทวิจารณ์ธรรมชาติDrug Discovery 1: 784–796
6. Rodan GA, Martin TJ (2002) แนวทางการรักษาโรคกระดูก วิทยาศาสตร์289: 1508–1514
7. Lee JH, Jin H, Shim HE, Kim HN, Ha H และอื่น ๆ (2010) Epigallocatechin-3-gallate ยับยั้ง osteoclastogenesis โดยลดการแสดงออกของ c-Fos และระงับสัญญาณนิวเคลียร์แฟคเตอร์-kappaB เภสัชวิทยาระดับโมเลกุล 77: 17–25
8. Kim HN, Lee JH, Jin WJ, Ko S, Jung K, และคณะ (2012) MS-275 ซึ่งเป็นสารยับยั้งเบนซาไมด์ฮิสโตนดีอะซิติเลส ช่วยป้องกันการสร้างกระดูกพรุนโดยควบคุมการแสดงออกของ Fos และยับยั้งการสูญเสียมวลกระดูกในหนูทดลอง วารสารเภสัชวิทยาแห่งยุโรป 691: 69–76
9. Kim T, Ha H, Shim KS, Cho WK, Ma JY (2013) ฤทธิ์ต้านโรคกระดูกพรุนของ Yijung-tang ในแบบจำลองหนูที่ตัดรังไข่โดยอาศัยการยับยั้งการสร้างความแตกต่างของ osteoclast วารสารชาติพันธุ์วิทยา 146: 83–89.
10. Nakanishi A, Litsuka N, Tsukamoto J (2013) น้ำมันปลายับยั้งการสลายของกระดูกโดยการยับยั้ง osteoclastogenesis โดยการแสดงออกที่ลดลงของ M-CSF, PU.1, MITF และ RANK ในหนูที่ตัดรังไข่ รายงานการแพทย์ระดับโมเลกุล 7:1896–1903
11. Bar-Shavit Z (2007) osteoclast: เซลล์สร้างกระดูกที่สร้างเม็ดเลือดหลายนิวเคลียสและดูดซับกระดูก วารสารชีวเคมีของเซลล์ 102: 1130–1139
12. Takahashi N, Maeda K, Ishihara A, Uehara S, Kobayashi Y (2011) กลไกการกำกับดูแลของ osteoclastogenesis โดยสัญญาณ RANKL และ Wnt พรมแดนในชีววิทยาศาสตร์ 16: 21–30
13. Jules J, Zhang P, Ashley JW, Wei S, Shi Z และอื่น ๆ (2012) พื้นฐานระดับโมเลกุลของความต้องการของตัวกระตุ้นรีเซพเตอร์ของการส่งสัญญาณนิวเคลียร์แฟคเตอร์-kB สำหรับอินเตอร์ลิวคิน 1-ไกล่เกลี่ย osteoclastogenesis วารสารเคมีชีวภาพ 287: 15728–15738
14. Li C, Yang Z, Li Z, Ma Y, Zhang L, และคณะ (2011) กรด Maslinic ยับยั้งการสร้าง osteoclastogenesis และป้องกันการสูญเสียกระดูกที่เกิดจากรังไข่โดยการควบคุมเส้นทางการส่งสัญญาณ NF-kB และ MAPK ที่อาศัยอันดับ วารสารการวิจัยกระดูกและแร่ธาตุ 26: 644–656
15. Tomoda M, Miyamoto H, Shimizu N (1994) ลักษณะโครงสร้างและกิจกรรมต่อต้านการเสริมของ rehmannan SA ซึ่งเป็นโพลีแซ็กคาไรด์จากรากของ Rehmannia glutinosa แถลงการณ์ทางเคมีและเภสัชกรรม (โตเกียว) 42: 1666–1668
16. Kim H, Lee E, Lee S, Shin T, Kim Y และอื่น ๆ (1998) ผลของ Rehmannia glutinosa ต่อปฏิกิริยาการแพ้แบบทันที วารสารนานาชาติด้านภูมิคุ้มกันวิทยา 20: 231–240.
17. Schapoval EE, Vargas MR, Chaves CG, Bridi R, Zuanazzi JA และอื่น ๆ (1998)ฤทธิ์ต้านการอักเสบและ antinociceptive ของสารสกัดและสารประกอบที่แยกได้จาก Stachytarpheta cayennensis วารสารชาติพันธุ์วิทยา 60:53–59.
18. Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Tani T, Namba T และอื่น ๆ (1998) กิจกรรมป้องกันตับของ phenylethanoids จากCistanche deserticola. Planta Medica 64: 120–125
19. Chun JC, Kim JC, Hwang IT, Kim SE (2002) Acteoside จาก Rehmannia gluten ลบล้างกิจกรรมพาราควอตใน Cucumis sativus ชีวเคมีและสรีรวิทยาของสารกำจัดศัตรูพืช 72: 153–159
20. Kim SS, Son YO, Chun JC, Kim SE, Chung GH และอื่น ๆ (2005) คุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระของสารออกฤทธิ์ที่ทำให้บริสุทธิ์จากใบของ Rehmannia glutinosa ที่ทนต่อพาราควอต รายงานรีดอกซ์ 10: 311–318
21. Son YO, Lee SA, Kim SS, Jang YS, Chun JC และอื่น ๆ (2011) Acteoside ยับยั้งการสร้างเมลาโนเจเนซิสในเซลล์ B16F10 ผ่านการกระตุ้น ERK และการปรับลดไทโรซิเนส วารสารเภสัชและเภสัชวิทยา 63: 1309–1319
22. Yu JY, Lee SY, Son YO, Shi X, Park SS และอื่น ๆ (2012) การมีอยู่อย่างต่อเนื่องของ H2O2 ทำให้เกิดการยับยั้งการเจริญเติบโตที่ขึ้นอยู่กับไมโตคอนเดรีย, MAPK และแคสเปสและความเป็นพิษต่อเซลล์ในไฟโบรบลาสต์ของมนุษย์ พิษวิทยาในหลอดทดลอง 26: 561–570.
23. Lu J, Yu JY, Lim SS, Son YO, Kim DH และอื่น ๆ (2013) กลไกระดับเซลล์ของผลกระทบที่เป็นพิษต่อเซลล์ของซีราเลโนนเมแทบอไลต์ a-zearalenone และ b-zearalenone บนมาโครฟาจ RAW264.7 พิษวิทยา ในหลอดทดลอง 27: 1007–1017
24. Ha H, Kwak HB, Lee SW, Jin HM, Kim HM, et al. (2004) ชนิดของออกซิเจนที่มีปฏิกิริยาเป็นสื่อกลางในการส่งสัญญาณ RANK ในเซลล์สร้างกระดูก การวิจัยเซลล์ทดลอง301: 119–127
25. Cho ES, Kim MK, Son YO, Lee KS, Park SM และอื่น ๆ (2012) ผลของ rosiglitazone ต่อการสร้างความแตกต่างของ osteoblastic การสร้าง osteoclast และการสลายของกระดูก โมเลกุลและเซลล์ 33: 173–181
26. Son YO, Jang YS, Heo JS, Chung WT, Choi KC และอื่น ๆ (2009) ปัจจัยกระตุ้นการตายของเซลล์ตาย (Apoptosis) มีบทบาทสำคัญในการตายของเซลล์ไพนอติกที่ไม่ขึ้นกับแคสเปสในเซลล์ที่สัมผัสกับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ อะพอพโทซิส 14: 796–808
27. Kook SH, Jeon YM, Park S, Lee JC (2013) ไฟโบรบลาสต์ปริทันต์ปรับการงอกขยายและการสร้างความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิดจากตัวอ่อนผ่านการผลิตปัจจัยการเจริญเติบโตของไฟโบรบลาสต์ วารสารปริทันตวิทยาในสื่อ
28. Qi W, Yan YB, Lei W, Wu ZX, Zhang Y, และคณะ (2012) การป้องกันโรคกระดูกพรุนเมื่อเลิกใช้ในหนูโดยใช้สารสกัด Cordyceps Sinensis โรคกระดูกพรุนนานาชาติ 23:2347–2357
29. Ikeda F, Nishimura R, Matsubara T, Tanaka S, Inoue J และอื่น ๆ (2004) บทบาทที่สำคัญของการส่งสัญญาณ c-Jun ในกฎระเบียบของตระกูล NFAT และ RANKL- ควบคุมการสร้างความแตกต่างของ osteoclast วารสารการสืบสวนทางคลินิก 114: 475–484.
30. Tsai HY, Lin HY, Fong YC, Wu JB, Chen YF และอื่น ๆ (2008) Paeonol ยับยั้งการสร้าง osteoclastogenesis ที่เกิดจาก RANKL โดยการยับยั้งเส้นทาง ERK, p38 และ NF-kappa B วารสารเภสัชวิทยาแห่งยุโรป 588: 124–133
31. Kim JH, Kim K, Jin HM, เพลงที่ 1, Youn BU, et al. (2009) Silibinin ยับยั้งการสร้างความแตกต่างของ osteoblast ซึ่งเป็นสื่อกลางโดยสมาชิกในครอบครัว TNF โมเลกุลและเซลล์ 28: 201–207.
32. Napetschnig J, Wu H (2013) พื้นฐานระดับโมเลกุลของการส่งสัญญาณ NF-kB การทบทวนชีวฟิสิกส์ประจำปี 42: 443–468
33. Franzoso G, Carlson L, Xing L, Poljak L, Shores EW และอื่น ๆ (1997) ข้อกำหนดสำหรับ NF-kappaB ในการพัฒนา osteoclast และ B-cell ยีนและการพัฒนา11: 3482–3496
34. Iotsova V, Caamano J, Loy J, Yang Y, Lewin A และอื่น ๆ (1997) โรคกระดูกพรุนในหนูที่ไม่มี NF-kappaB1 และ NF-kappaB2 เวชศาสตร์ธรรมชาติ 3: 1285–1289
35. Teitelbaum SL (2004) อันดับ c-Jun ในการพัฒนา osteoclast วารสารการสืบสวนทางคลินิก 114: 463–465
36. Takayanagi H (2005) ความเข้าใจเชิงกลไกเกี่ยวกับความแตกต่างของ osteoclast ใน osteoimmunology วารสารการแพทย์ระดับโมเลกุล (Berl) 83: 170–179
37. Cho ES, Lee KS, Son YO, Jang YS, Lee SY และอื่น ๆ (2010) แรงอัดทางกลช่วยเพิ่มการสร้าง osteoclastogenesis โดยแมคโครฟาจของไขกระดูกผ่านการกระตุ้นการส่งสัญญาณด้วย c-Fms วารสารชีวเคมีของเซลล์ 111: 1260–1269
38. Lorenzo JA, Naprta A, Rao Y, Alander C, Glaccum M และอื่น ๆ (1998) หนูที่ขาดตัวรับ interleukin-1 ชนิดที่ 1 จะไม่สูญเสียมวลกระดูกหลังการตัดรังไข่ วิทยาต่อมไร้ท่อ 139: 3022–3025
39. Abramson SB, Amin A (2002) การปิดกั้นผลกระทบของ IL-1 ในโรคข้ออักเสบรูมาตอยด์ช่วยปกป้องกระดูกและกระดูกอ่อน โรคข้อ (อ็อกซ์ฟอร์ด) 41: 972–980
40. Hwang JM, Yu JY, Jang YO, Kim BT, Hwang KJ, และคณะ (2010) สารประกอบกรดฟีนอลฟีนอลยูเรียยับยั้งการผลิตไนตริกออกไซด์และโปรอักเสบไซโตไคน์ที่เกิดจากไลโปโพลีแซคคาไรด์ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ ภูมิคุ้มกันระหว่างประเทศ 10: 526–532
41. Fang M, Lee SY, Park SM, Choi KC, Lee YJ และอื่น ๆ (2011) ศักยภาพในการต้านการอักเสบของ Phaseolus calcaratus Roxburgh ยาตะวันออกบนมาโครฟาจดิบ 264.7 ที่จำลองด้วย LPS วารสารเภสัชและเภสัชวิทยา 63:120–128.
42. Lee JW, Ahn JY, Hasegawa S, Cha BY, Yonezawa T และอื่น ๆ (2009) ผลการยับยั้งของลูโอลินต่อการสร้างความแตกต่างและหน้าที่ของ osteoclast เทคโนโลยีเซลล์ 61:125–134.
43. Cosentino-Gomes D, Rocco-Machado N, Meyer-Fernandes JR (2012) การส่งสัญญาณของเซลล์ผ่านการเกิดออกซิเดชันและการกระตุ้นโปรตีนไคเนสซี วารสารนานาชาติวิทยาศาสตร์โมเลกุล 13: 10697–10721
44. Lee JC, Son YO, Pratheeshkumar P, Shi X (2012) ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและการเกิดมะเร็งของโลหะ ฟรี Radical Biology and Medicine 53: 742–757
45. Nguyen Ngoc TD, Son YO, Lim SS, Shi X, Kim JG และอื่น ๆ (2012) โซเดียมฟลูออไรด์ทำให้เกิดอะพอพโทซิสในเซลล์ต้นกำเนิดจากตัวอ่อนของเมาส์ผ่านวิถีทางที่อาศัย ROS และแคสเปสและ JNK พิษวิทยาและเภสัชวิทยาประยุกต์ 259: 329–337
46 Motojima H, Villareal MO, Iijima R, Han J, Isoda H (2013) Acteoside ยับยั้งการแพ้ประเภทที่ 1 ผ่านการควบคุม Ca/NFAT และ JNK MAPK เส้นทางการส่งสัญญาณในเซลล์ basophilic วารสารยาธรรมชาติในสื่อ
47. Caudrillier A, Hurtel-Lemaire AS, Wattel A, Cournarie F, Godin C และอื่น ๆ (2010) สตรอนเทียมราเนเลตลดตัวกระตุ้นตัวรับของนิวเคลียสแฟคเตอร์-kB ลิแกนด์ที่ทำให้เกิดความแตกต่างของ osteoclastic ในหลอดทดลอง: การมีส่วนร่วมของตัวรับที่สัมผัสแคลเซียม เภสัชวิทยาระดับโมเลกุล 78: 569–576
