ผลกระทบของการจัดการอาหารของสาหร่ายโพลีแซคคาไรด์ต่อการเจริญเติบโต ความอุดมสมบูรณ์ของจุลินทรีย์ และการเจริญเติบโตและการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกันของกุ้งขาวแปซิฟิก (Litopenaeus Vannamei)

เชิงนามธรรม:

งานนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลกระทบของการเสริมอาหารโพลีแซคคาไรด์ที่สกัดจากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล Sargassum dentifolium ต่อดัชนีการเจริญเติบโต การใช้อาหาร องค์ประกอบทางชีวเคมี ความอุดมสมบูรณ์ของจุลินทรีย์ การแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตและภูมิคุ้มกัน และยีนความเครียดของกุ้งขาวแปซิฟิก Litopenaeus แวนนาไม. สุ่มแจกลูกกุ้งระยะหลังวัยทั้งหมด 360 ตัวในตู้กระจก 12-ตัว (ตัวละ 40 ลิตร) ที่ความหนาแน่นของกุ้ง 30 ตัวที่มีน้ำหนักเริ่มต้น ของ (0.0017 ± 0.001 ก.)

ในระหว่างการทดลอง {{0}}วัน ลูกกุ้งทั้งหมดได้รับอาหารตามลำดับที่ร้อยละ 10 ของน้ำหนักตัวทั้งหมด สามครั้งต่อวัน มีการเตรียมอาหารทดลอง 3 ชนิดที่มีระดับโพลีแซคคาไรด์ในสาหร่ายทะเล (SWP) ที่แตกต่างกัน อาหารควบคุมพื้นฐานไม่มีระดับโพลีแซคคาไรด์ (SWP0 ) ในขณะที่ SWP1, SWP2 และ SWP3 มีโพลีแซ็กคาไรด์ที่ความเข้มข้น 1, 2 และ 3 g kg−1 อาหารตามลำดับ อาหารที่เสริมด้วยระดับโพลีแซคคาไรด์แสดงให้เห็นว่าน้ำหนักที่เพิ่มขึ้นและอัตราการรอดชีวิตดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ เมื่อเทียบกับอาหารควบคุม องค์ประกอบทางชีวเคมีทั่วร่างกายและปริมาณจุลินทรีย์ (จำนวนรวมของแบคทีเรียเฮเทอโรโทรฟิกและ Vibrio spp.) ของ L. vannamei แสดงความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างอาหารที่ได้รับโพลีแซคคาไรด์เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม

ในตอนท้ายของการทดลองการให้อาหาร การเสริมอาหารในระดับโพลีแซคคาไรด์ช่วยเพิ่มการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโต (ปัจจัยการเจริญเติบโตที่คล้ายอินซูลิน (IGF-I, IGF-II)) ยีนที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกัน ( -Glucan-binding protein ( - Bgp), Prophenoloxidase (ProPO), Lysozyme (Lys) และ Crustin) และยีนความเครียด (Superoxide dismutase (SOD) และ Glutathione peroxidase (GPx) ในเนื้อเยื่อของกล้ามเนื้อของ L. vannamei อย่างไรก็ตาม การศึกษาในปัจจุบันสรุปว่าการรวม อัตรา 2 g kg–1 ของโพลีแซคคาไรด์ในฐานะสารเติมแต่งในอาหารช่วยเพิ่มทั้งน้ำหนักที่เพิ่มขึ้นและอัตราการรอดชีวิตของ L. vannamei ในขณะที่ระดับการรวมตัวที่ 3 g kg–1 ช่วยลดความอุดมสมบูรณ์ของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค และเพิ่มการเจริญเติบโต-, ภูมิคุ้มกัน- และการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับความเครียดของ L. vannamei

คำสำคัญ: Sargassum dentifolium; อาหารเสริม; อุตสาหกรรมกุ้ง การเจริญเติบโต; ยีนที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโต ยีนที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกัน ยีนความเครียด

ซูเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเตส (superoxide dismutase, SOD) เป็นเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระภายในเซลล์ที่สามารถเปลี่ยนอนุมูลซูเปอร์ออกไซด์ที่เป็นอันตรายให้เป็นออกซิเจนและไฮดรอกไซด์ไอออนที่ไม่เป็นอันตรายต่อเซลล์ ภูมิคุ้มกันคือความสามารถของร่างกายในการรับรู้และโจมตีเชื้อโรคแปลกปลอมและเซลล์ที่ผิดปกติ

การศึกษาแสดงให้เห็นว่าทั้งเซลล์ T และ B ในระบบภูมิคุ้มกันต้องการกระบวนการเผาผลาญออกซิเดชันเพื่อรักษาการทำงานปกติ อย่างไรก็ตาม การเผาผลาญออกซิเดชั่นที่มากเกินไปจะสร้างอนุมูลอิสระจำนวนมาก ส่งผลให้เซลล์ถูกทำลายจากอนุมูลอิสระและการทำงานของภูมิคุ้มกันลดลง SOD สามารถกำจัดอนุมูลอิสระซุปเปอร์ออกไซด์ส่วนเกิน ปกป้องเซลล์จากความเสียหายจากอนุมูลอิสระ และปรับปรุงภูมิคุ้มกัน นอกจากนี้ การศึกษายังพบว่า SOD ยังสามารถทำหน้าที่เป็นโมเลกุลส่งสัญญาณเพื่อส่งข้อมูลระหว่างเซลล์และควบคุมกระบวนการทางชีววิทยาที่สำคัญ เช่น การเจริญเติบโต ความแตกต่าง และการทำงานของเซลล์ภูมิคุ้มกัน ดังนั้นจึงมีความสัมพันธ์ใกล้ชิดระหว่าง SOD และภูมิคุ้มกัน

จากมุมมองนี้เราต้องให้ความสำคัญกับการปรับปรุงภูมิคุ้มกันในชีวิตของเรา จากการค้นพบของเรา Cistanche สามารถปรับปรุงภูมิคุ้มกันได้อย่างมาก Cistanche มีส่วนประกอบทางชีวภาพที่หลากหลาย เช่น โพลีแซคคาไรด์ เห็ดสองชนิด Huang Li เป็นต้น ส่วนผสมเหล่านี้สามารถกระตุ้นเซลล์ต่างๆ ของระบบภูมิคุ้มกันและเพิ่มกิจกรรมภูมิคุ้มกันได้

คลิก ประโยชน์ต่อสุขภาพของ cistanche

1. บทนำ

อุตสาหกรรมการเพาะเลี้ยงกุ้งเติบโตอย่างรวดเร็วและกลายเป็นภาคการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำที่สำคัญที่สุดและเป็นผู้นำ [1,2] แม้ว่าอุตสาหกรรมกุ้งจะพัฒนาอย่างรวดเร็ว แต่ความท้าทายที่เกษตรกรต้องเผชิญคือการได้รับอัตราการเจริญเติบโตที่เพิ่มขึ้น อาหารราคาถูก และลดการระบาดของโรค [3,4] นอกจากนี้ การบริโภคกุ้งของโลกเพิ่มขึ้นในช่วง 10 ปีที่ผ่านมา ทำให้ผู้เชี่ยวชาญด้านโภชนาการต้องรวมสารจำนวนมากที่ได้จากการเกษตรในอาหารสัตว์น้ำ [1,5,6] กุ้งขาวแปซิฟิค (Litopenaeus vannamei) เลี้ยงบ่อยที่สุดในโลก โดยประสบความสำเร็จมากกว่าร้อยละ 70 ของการเลี้ยงกุ้งทั่วโลก [7,8] เพื่อรักษาอุตสาหกรรมกุ้งทั่วโลก มีหลายประเด็นที่ต้องได้รับการแก้ไข เช่น คุณภาพน้ำที่ไม่ดี การอยู่รอดต่ำ และการปรับปรุงอุตสาหกรรมอาหาร [9–14] นอกจากนี้ การเปลี่ยนแปลงสภาพภูมิอากาศและผลกระทบทางลบของมลภาวะต่อสิ่งแวดล้อมเป็นปัญหาสำคัญที่จำกัดความยั่งยืนของการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ การประมง ระบบนิเวศทางน้ำ และสัตว์น้ำจนถึงปัจจุบัน [15–20]

ดังนั้น อาหารกุ้งจึงได้รับการขยายโดยใช้หลายกลยุทธ์เพื่อรับมือกับการพัฒนาระดับโลกในภาคการเลี้ยงกุ้ง [10,21] หนึ่งในกลยุทธ์พื้นฐานที่สุดคือการเสริมสารเติมแต่งอาหาร ซึ่งมีความสำคัญมากสำหรับกุ้งหลายสายพันธุ์ในฐานะตัวกระตุ้นการเจริญเติบโต ตัวกระตุ้นภูมิคุ้มกัน และแนวทางทางเลือกในการต้านทานโรค [22,23] พืชน้ำ (สาหร่ายขนาดเล็กและสาหร่ายทะเล) ยังคงใช้กันอย่างแพร่หลายในหลายภาคส่วนที่สำคัญ เช่น สารเติมแต่งอาหารสัตว์น้ำ [24] สารเร่งการเจริญเติบโตของพืช [25] การบำบัดด้วยพืช [26–30] อาหารเสริมสำหรับมนุษย์ [31,32] เภสัชภัณฑ์ [33,34] สารเครื่องสำอาง [35,36] กิจกรรมต้านจุลชีพ [37,38] และพลังงานชีวภาพ [39,40]

ตามที่รายงานในปี 2018 การผลิตสาหร่ายทะเลทั่วโลก (การจับและเพาะเลี้ยงตามธรรมชาติ) อยู่ที่ประมาณ 34.4 ล้านตัน โดยมีมูลค่าทางอุตสาหกรรมประมาณ 13.3 พันล้านเหรียญสหรัฐ [41] การผลิตนี้มาจากประมาณ 35 ประเทศ ในขณะที่ผู้ผลิตรายใหญ่ที่สุดซึ่งผลิตได้มากกว่าร้อยละ 99 คือจีน [42] สาหร่ายทะเลมีโปรตีน ไฟเบอร์ วิตามิน กรดไขมัน แร่ธาตุ เม็ดสี และสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพหลายชนิดในระดับสูง [43–46]

ในบรรดาตระกูลสาหร่ายทะเล สาหร่ายทะเลสีน้ำตาลเป็นที่รู้จักกันว่าเป็นแหล่งของน้ำตาลสูง ซึ่งสามารถปกป้องสิ่งมีชีวิตในน้ำจากผลกระทบที่เป็นอันตรายหลายประการ ในขณะที่โพลีแซ็กคาไรด์ของพวกมันถูกใช้เป็นสารเติมแต่งอาหารสำหรับปลานิล [47] และปลานิลแดง [2] อย่างต่อเนื่อง เอกสารที่มีอยู่ได้แสดงให้เห็นว่าพอลิแซ็กคาไรด์ที่สกัดจากสาหร่ายทะเลสามารถส่งเสริมภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด และเพิ่มความต้านทานต่อการติดเชื้อก่อโรคของกุ้ง [48–50] เนื่องจากองค์ประกอบและโครงสร้างของพอลิแซ็กคาไรด์ (ระดับการแตกแขนง องค์ประกอบย่อย ซัลเฟต และประเภทของการเชื่อมโยง ) ซึ่งแตกต่างจากพืชบนบกค่อนข้างมาก [51,52] Sargassum dentiform สาหร่ายสีน้ำตาลพบว่ามีโพลีแซคคาไรด์มากมายซึ่งเป็นทรัพยากรที่อุดมสมบูรณ์ในอียิปต์ ได้รับการยืนยันว่ามีคุณสมบัติทางเภสัชวิทยาหลายประการ เช่น ต้านเนื้องอก ต้านออกซิเดชัน สร้างเม็ดเลือด กระตุ้นภูมิคุ้มกัน และการป้องกันระบบทางเดินอาหาร ในขณะที่มีรายงานว่าการบริหารอาหารเพื่อปรับปรุงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่ไม่เฉพาะเจาะจงในปลา [2]

แม้จะมีความสำคัญของสารเติมแต่งอาหารที่ใช้กับกุ้งขาวแปซิฟิก แต่ก็ยังไม่ค่อยมีใครรู้เกี่ยวกับการใช้สารโพลีแซคคาไรด์ที่เตรียมจากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาลในอุตสาหกรรมสารเติมแต่งอาหารกุ้ง [53,54] สารกระตุ้นภูมิคุ้มกันมีความสำคัญในฐานะสารสังเคราะห์ที่ช่วยเพิ่มความสามารถของระบบภูมิคุ้มกันในการต่อสู้กับการติดเชื้อและโรคต่างๆ โดยกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน แบคทีเรียและผลิตภัณฑ์จากแบคทีเรีย คาร์โบไฮเดรตเชิงซ้อน ปัจจัยด้านอาหาร สารสกัดจากสัตว์ ไซโตไคน์ เลคติน สารสกัดจากพืช และยาสังเคราะห์ เช่น เลวามิโซล คือตัวอย่างทั้งหมดของสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันที่มีอยู่ในปัจจุบัน [55] ยาปฏิชีวนะในอาหารของปลาที่เลี้ยงและสัตว์ที่มีเปลือกแข็งมักถูกใช้เพื่อควบคุมการติดเชื้อโรค รวมทั้งปรับปรุงทั้งการอยู่รอดและการเจริญเติบโต อย่างไรก็ตาม ได้รับการวิพากษ์วิจารณ์อย่างกว้างขวางเนื่องจากเชื้อดื้อยาและการสะสมของสารเคมีในเนื้อเยื่อของสัตว์น้ำซึ่งอาจเป็นอันตรายต่อสุขภาพของประชาชนได้ อีกทางเลือกหนึ่ง สารกระตุ้นภูมิคุ้มกันตามธรรมชาติ เช่น โปรไบโอติกและพรีไบโอติก โดยทั่วไปแนะนำให้ใช้ในอาหารสัตว์เพื่อส่งเสริมการเจริญเติบโตและการตอบสนองของภูมิคุ้มกันอย่างมีประสิทธิภาพ และควบคุมโรคต่างๆ ในสัตว์น้ำ [56]

ผลกระตุ้นของสารกระตุ้นภูมิคุ้มกัน เช่น กลูแคน ไคโตซาน นิวคลีโอไทด์ ลิโพโพลีแซคคาไรด์ (LPS) โซเดียมอัลจิเนต และโพลีแซ็กคาไรด์อื่น ๆ เป็นเรื่องของการทำงานหลายอย่างกับปลาและกุ้ง [55,57]

เมื่อเร็ว ๆ นี้ มีการให้ความสนใจเป็นพิเศษกับการใช้พรีไบโอติกเพื่อเป็นทางเลือกตามธรรมชาติแทนยาปฏิชีวนะและสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันในการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ พอลิแซ็กคาไรด์เชิงหน้าที่เป็นส่วนประกอบที่ย่อยไม่ได้เนื่องจากมีความเชื่อมโยง -1, 3 หรือ -1, 4 มีรายงานว่าการบริโภคสารโพลีแซคคาไรด์เชิงฟังก์ชันสามารถปรับปรุงการเจริญเติบโตและเพิ่มการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันและต้านทานโรคของสัตว์น้ำ [58] จากการศึกษาก่อนหน้านี้ อาหารที่มีพอลิแซ็กคาไรด์บางชนิด รวมทั้งพืชสมุนไพรและพอลิแซ็กคาไรด์ที่ได้จากทะเล อาจช่วยเพิ่มอัตราการเติบโตในส่วนของระบบภูมิคุ้มกันและสภาวะทางเดินอาหารในปลาและกุ้ง [59–61]

ความต้านทานโรคเชื่อมโยงกับการเพิ่มขึ้นของการตอบสนองของเซลล์และร่างกาย รวมถึง phagocytosis, กิจกรรมการฆ่าเชื้อแบคทีเรีย, กิจกรรม phenoloxidase (PO), การระเบิดของทางเดินหายใจ, superoxide dismutase (SOD) และกิจกรรมของ lysozyme ในกุ้งกุลาดำ [62] ข้อมูลที่จำเป็นเกี่ยวกับการกระตุ้นและควบคุมระบบภูมิคุ้มกันถูกเปิดเผยโดยการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกันในกุ้ง [63] โปรตีนการจดจำรูปแบบ (PRPs) ซึ่งจับกับโมเลกุลบนพื้นผิวของจุลินทรีย์ เป็นสื่อกลางในการตรวจหาสิ่งมีชีวิตที่บุกรุกเป็นขั้นตอนสำคัญในการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของกุ้ง [64]

การรับรู้ PRP ของเชื้อโรคที่บุกรุกเป็นขั้นตอนขั้นกลางที่สำคัญในการเปิดใช้งานระบบ prophenoloxidase activating system (ProPO) [65] โปรตีนการรับรู้เปปติโดไกลแคน [66], เลคตินชนิด C [67], -โปรตีนที่จับกับกลูแคน ( -Bgps) [68] และไลโปโพลีแซคคาไรด์ (LPS) และโปรตีนจับกลูแคน 1,3- (1,{{11 }}Lgp) [69] ทั้งหมดได้รับการอธิบายว่าเป็น PRP ในระบบ ProPO กลไกการเปิดใช้งาน Prophenoloxidase (ProPO) ซึ่งกระตุ้นโดย PRPs ที่จับกับส่วนประกอบของผนังเซลล์ของจุลินทรีย์ เป็นที่ทราบกันดีว่ากระตุ้นระบบภูมิคุ้มกันของโฮสต์ [70] ความเครียดกระตุ้นปฏิกิริยาไกลโคไลติกซึ่งจะเพิ่มการบริโภค O2 และเพิ่มการปลดปล่อยชนิดออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยา (ROS) (เช่น ไฮดรอกซิลแรดิคัล ไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ และซูเปอร์ออกไซด์แอนไอออน) [71] อย่างไรก็ตาม ROS สามารถขจัดความเครียดได้ การเพิ่มขึ้นของ ROS จะทำให้เกิดการทำลายอย่างรุนแรง

ดังนั้นการกำจัด ROS ที่มากเกินไปอย่างรวดเร็วจึงมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทำงานที่เหมาะสมของเซลล์ สิ่งนี้ทำได้โดยการเพิ่มการแสดงออกของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ [72] ซุปเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเทส (SOD) เป็นเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระที่อาศัยซูเปอร์ออกไซด์แอนไอออน อนุมูลซุปเปอร์ออกไซด์จะถูกล้างพิษด้วย SOD โดยถูกเปลี่ยนเป็นออกซิเจนและไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ซึ่งต่อมาจะเปลี่ยนเป็น H2O และ O2 โดย catalase และป้อนเข้าสู่เซลล์ในรูปของคอมโพสิตที่ปลอดภัย [73,74]

ยีน CuZnSOD ของทองแดง-สังกะสี ซูเปอร์ออกไซด์ ดิสมิวเตส และยีนภูมิคุ้มกันอื่นๆ ยังเกี่ยวข้องกับการสร้างภูมิคุ้มกันโดยอ้อมของ Crustin ที่มีลักษณะคล้ายกุ้ง ซึ่งจำเป็นต่อการสร้างภูมิคุ้มกันต่อการติดเชื้อ [75,76] ใน L. vannamei สารสกัดจากโสม Panax polysaccharide ช่วยลดการอักเสบ กระตุ้นการทำงานของเอนไซม์ภูมิคุ้มกัน และปรับเปลี่ยนการแสดงออกของยีนภูมิคุ้มกัน [77] ยีนจำนวนมากควบคุมลักษณะการพัฒนา รวมถึงฮอร์โมนการเจริญเติบโต (GH) และปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลิน (IGF-I และ IGF-II) [78] การเจริญเติบโตอย่างรวดเร็วของการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ L. vannamei จำเป็นต้องมีการสร้างสายพันธุกรรมอย่างรวดเร็ว [79] เท่าที่ทราบ เราไม่ค่อยมีใครทราบเกี่ยวกับอิทธิพลของการเสริมสารโพลีแซคคาไรด์ในอาหารของ Sargassum dentifolium ต่อการเจริญเติบโตของกุ้ง ภูมิคุ้มกัน และการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับความเครียด ดังนั้น การศึกษานี้จึงทำขึ้นเพื่อประเมินผลของการให้โพลีแซคคาไรด์ที่ได้จากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล (S. centifolia) ในอาหารต่อการเจริญเติบโต การใช้อาหาร ส่วนประกอบของร่างกาย ชุมชนจุลินทรีย์ และการเจริญเติบโต ภูมิคุ้มกัน และการแสดงออกของยีนความเครียดของขาขาว กุ้ง Litopenaeus vannamei.

2. วัสดุและวิธีการ

2.1. สาหร่ายทะเลสีน้ำตาล Sargassum centifolia

สาหร่ายสีน้ำตาล S. dentiform เก็บมาจากอ่าว Abu-Qir เมืองอเล็กซานเดรีย ประเทศอียิปต์ (31.3000 N และ 30.1667 E) [2] เอพิไฟต์ถูกนำออกจากตัวอย่างที่ได้รับ ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า [80] ก่อนใช้งาน ตัวอย่างจะถูกล้าง ทำความสะอาด ผึ่งลมให้เป็นผง และเก็บในถุงพลาสติกที่อุณหภูมิห้อง [29] ขั้นตอนที่ระบุโดย [81] ใช้เพื่อสกัดโพลีแซคคาไรด์จากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล S. dentifolium

2.2. การตรวจสอบคุณภาพน้ำ

ตลอดการทดลองให้อาหาร เราตรวจสอบให้แน่ใจว่าระดับของ NH3 − (mg L−1 ), NO2 − (mg L−1 ), NO3 − (mg L−1 ), ความเป็นด่าง (mg L−1 ) และ PO4 − (มก. L−1 ) อยู่ในช่วงที่แนะนำสำหรับกุ้ง [82] และแนวทางของ APHA [83] นอกจากนี้ การวัดอุณหภูมิ (◦C) ความเค็ม (ppt) และค่า pH ทุกวันในเวลา 13.00 น. เทอร์โมมิเตอร์แขวนที่ความลึก 30 ซม. ใช้เพื่ออ่านค่าอุณหภูมิของน้ำได้อย่างแม่นยำ และเครื่องวัดค่า pH และ เครื่องวัดการหักเหของแสง (Orion, Ipswich, MA, USA) ถูกนำมาใช้เพื่ออ่านค่าความเป็นกรดและด่างของน้ำอย่างแม่นยำทุกวันที่ 9.00 ชั่วโมง

2.3. กุ้งขาวแปซิฟิก (Litopenaeus vannamei)

2.3.1. การทดลองสัตว์

โรงเพาะฟักเอกชนแห่งหนึ่งจัดหาลูกกุ้งขาวแวนนาไมระยะหลัง (PLs) ให้กับ Invertebrates Laboratory, Aquaculture Division, Suez-Branch of NIOF, Egypt จากนั้น PLs ได้รับการปรับสภาพเป็นเวลา 15 วันในถังไฟเบอร์กลาส 500-L สองถังภายใต้สภาวะควบคุม (28.0 ± 1.0 ◦C และความเค็ม 29 ± 3.0 ppt ) คณะกรรมการวิจัยของ NIOF ประเทศอียิปต์ได้อนุมัติการออกแบบการทดลองและการปฏิบัติตามมาตรฐานทางจริยธรรมของการจัดการกุ้ง

2.3.2. การออกแบบการทดลองและสิ่งอำนวยความสะดวก

การทดลองให้อาหารในปัจจุบันดำเนินการโดยใช้การออกแบบแบบสุ่มทั้งหมด โดยมีสามเท่า รวม 360 PLs (น้ำหนักเริ่มต้น 0.0017 ± 0.001 กรัม) ถูกเลี้ยงไว้ที่ความหนาแน่นของกุ้ง 30 ตัวใน 12 แก้ว ตู้ปลา (แต่ละตู้มีความจุ 40 ลิตร) สำหรับ 90-การทดลองให้อาหารแต่ละวัน PLs ได้รับ 10 เปอร์เซ็นต์ของน้ำหนักตัวกุ้งทั้งหมด 3 ครั้งต่อวัน (เวลา 6:00 น., 12:00 น. และ 18:00 น.) ตู้ปลาแต่ละตู้ถูกกำจัดของเสียและอาหารที่ยังไม่ได้กินทุกเช้า และทำความสะอาดด้วยกาลักน้ำ และร้อยละ 10 ของปริมาณน้ำถูกแทนที่ด้วยน้ำทะเลสด เติมออกซิเจน และกรองทุกวัน [82]

2.3.3. อาหารทดลอง

ให้อาหารกุ้งสี่ชนิด: SWP{{0}}: อาหารกุ้งเพื่อการค้า (Aller-Aqua ประเทศอียิปต์ เป็นอาหารควบคุมพื้นฐาน โปรตีนดิบ 40 เปอร์เซ็นต์ และไขมันดิบ 9 เปอร์เซ็นต์) อาหารทดลองที่เหลืออีกสามชนิด (SWP1, SWP2 และ SWP3) เป็นอาหารกุ้งเชิงพาณิชย์ที่เสริมด้วย S. dentifolium polysaccharide 1, 2 และ 3 g kg−1 ตามลำดับ การเพิ่มระดับโพลีแซคคาไรด์ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดย Abdelrhman et al [2]. โดยสังเขป อาหารกุ้งเชิงพาณิชย์จะถูกบดและแบ่งออกเป็นสามส่วนเท่าๆ กัน แต่ละระดับของโพลีแซคคาไรด์ (1, 2 และ 3 g kg−1 ) ถูกละลายในน้ำกลั่นแล้วฉีดพ่นบนผิวอาหารจนกว่าจะดูดซึมได้เต็มที่ และฉีดพ่นน้ำกลั่นในปริมาณที่เพียงพอบนอาหารควบคุม (SWP0) ที่ไม่มีโพลีแซคคาไรด์ [84]. น้ำมันดอกทานตะวัน (5 มล. กก.−1 ) ถูกฉีดพ่นบนอาหารเพื่อให้ครอบคลุมสารละลายโพลีแซคคาไรด์ [85] สุดท้าย อาหารถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันและอัดเป็นเม็ดอีกครั้ง ผึ่งลมให้แห้ง วางในถุงกระดาษแก้ว และแช่เย็นที่อุณหภูมิ 4 ◦ซ ​​จนกว่าจะใช้

2.4. ทดสอบพารามิเตอร์

2.4.1. ประสิทธิภาพการเติบโต

2.4.2. การวิเคราะห์องค์ประกอบทางชีวเคมี

ทั้งอาหารทดลองและกุ้งได้รับการวิเคราะห์ใกล้เคียงเพื่อประเมินปริมาณสารชีวเคมีตามหลักเกณฑ์ของ AOAC [86] ซึ่งจัดทำขึ้นตามรายละเอียดในบทความก่อนหน้า [87] ในการประเมินส่วนประกอบทั้งหมดของร่างกาย (วัตถุแห้ง ไขมันดิบ โปรตีนดิบ และเถ้าดิบ) สุ่มจับกุ้ง 5 ตัวจากการทำซ้ำแต่ละครั้งหลังจากการให้อาหารเสร็จสิ้น จากนั้นกุ้งจะถูกบด ปั่นจนเนียน และเก็บไว้ที่ −20 ◦C เพื่อการตรวจสอบเพิ่มเติม

2.4.3. ชุมชนจุลินทรีย์

แนวทาง APHA [83] ถูกนำมาใช้เพื่อกำหนดความสมบูรณ์ของชุมชนจุลินทรีย์ นำตัวอย่างน้ำ (1 มล.) และลำไส้ของกุ้ง (1 กรัม) จากแต่ละซ้ำ (กุ้ง 3 ตัวต่อการทำซ้ำ n=9) เมื่อการทดลองเสร็จสิ้น แต่ละตัวอย่าง (ลำไส้และน้ำ) ได้รับการฉีดวัคซีนด้วยน้ำกลั่นที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้ว 9 มล. ลงบนจานของ Trypticase soy agar (TSA) และ Thio-sulphate-Citrate-Bile salts (TCBS) [88] เพลตของ TSA และ TCBS ถูกบ่มที่ 37 ◦ซ ในขณะที่เพลต TCBS ถูกบ่มที่ 28 ◦ซ หน่วยการสร้างโคโลนีต่อมิลลิลิตรถูกใช้เพื่อหาปริมาณของแบคทีเรียเฮเทอโร-โทรฟิกและโคโลนีวิบริโอที่มีอยู่หลังจาก 24 ชั่วโมง (CFU mL−1 ) [89]

2.4.4. การสกัด RNA และการสังเคราะห์ cDNA สำหรับการแสดงออกของยีน

กล้ามเนื้อท้องของกุ้งตัวอย่างเพิ่มขึ้นสามเท่าจากการทำซ้ำแต่ละครั้งถูกตัดออกโดยตรงด้วยเครื่องมือผ่าที่ผ่านการฆ่าเชื้ออย่างสมบูรณ์ภายใต้สภาวะเย็น ก่อนทำการศึกษาการแสดงออกของยีน กล้ามเนื้อส่วนหนึ่งถูกแช่แข็งที่อุณหภูมิ −80 ◦C รีเอเจนต์ TRIzol (easyRED, iNtRON Biotechnology) ถูกนำมาใช้เพื่อสกัด RNA ทั้งหมดจากส่วนท้องของกุ้งเมื่อสิ้นสุดการทดลองตามคำแนะนำของผู้ผลิต การใช้ระบบ NanoDrop (Bio-Drop) อัตราส่วนความหนาแน่นเชิงแสง (OD) ของความบริสุทธิ์ของ RNA ถูกกำหนดขึ้น และใช้ 1 ng L−1 ของ RNA สำหรับการสังเคราะห์ cDNA ในแต่ละปฏิกิริยาเมื่ออัตราส่วนอยู่ในอุดมคติ (A260/A{{ 5}}.8).

ในการกำหนดคุณภาพของ RNA จะใช้อัตราส่วน OD 260/280 นาโนเมตร RNA ทั้งหมดที่ได้รับการประมวลผลด้วย DNase I (NEB, USA) ถูกใช้เป็นแม่แบบในชุด reverse transcriptase (เม็ดบีด RT-PCR, เอนไซม์, Daejeon, เกาหลี) เพื่อสร้าง cDNA สายแรก ปฏิกิริยาดำเนินการโดยใช้การขยาย PCR (โดยใช้ผลิตภัณฑ์ของอเมริกา ซึ่งเป็น Applied Biosystems Veriti 96-Well Thermal Cycler) และดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต Real-Time PCR (Bico, Thermo-Fisher) ดำเนินการภายใต้เงื่อนไข cDNA ต่อไปนี้เพื่อตรวจหาผลิตภัณฑ์ที่มีลักษณะเฉพาะและแตกต่าง: หลังจากการเสียสภาพธรรมชาติเริ่มต้นที่ 95 ◦C เป็นเวลา 15 นาที โปรตีนจะถูกตรวจสอบ 40 รอบตามเงื่อนไขต่อไปนี้: 95 ◦C เป็นเวลา 10 วินาที, 58–62 ◦C เป็นเวลา 20 วินาที และ 72 ◦C เป็นเวลา 30 วินาที และสุดท้าย หลังจากรอบสุดท้าย อุณหภูมิเพิ่มขึ้นจาก 58–62 ◦C เป็น 95 ◦C โดยเพิ่มขึ้นทีละ 0.5 ◦C ไพรเมอร์ที่ใช้ในการตรวจสอบยีนที่คล้ายกันแสดงอยู่ในตารางที่ 1

ยีนการดูแลทำความสะอาด ( -actin) ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินการแสดงออกของยีนเป้าหมายหรือการเปลี่ยนแปลงแบบพับ [90] เมื่อใช้วิธี 2∆∆Ct เพื่อทำให้ปริมาณเกณฑ์วิกฤติ (Ct) ของยีนเป้าหมายเป็นปกติด้วยปริมาณของ -actin ค่าที่ได้จะเผยให้เห็นความแตกต่าง n เท่าเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม [91]

2.5. การวิเคราะห์ทางสถิติ

ในการประเมินคุณภาพน้ำ การเจริญเติบโต ดัชนีการใช้อาหารสัตว์ การวิเคราะห์องค์ประกอบของร่างกาย ชุมชนจุลินทรีย์ และภูมิคุ้มกันและการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโต การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียวถูกนำมาใช้เพื่อระบุความแตกต่างที่มีนัยสำคัญ (p < 0.{{6 }}5) ในความหมายสำหรับแต่ละตัวแปรระหว่างการบำบัดด้วยโพลีแซคคาไรด์ (SWP1, SWP2 และ SWP0) และกลุ่มควบคุม (SWP0) การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้ GraphPad Prism เวอร์ชัน 9 เพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างการรักษา การทดสอบของ Tukey ถูกนำมาใช้ ก่อนดำเนินการวิเคราะห์ทางสถิติ ข้อมูลทั้งหมดได้รับการตรวจสอบสำหรับค่าปกติของการแจกแจงและความสม่ำเสมอของความแปรปรวน ก่อนการวิเคราะห์ ข้อมูลทั้งหมด (เปอร์เซ็นต์) ถูกเปลี่ยนรูปด้วยอาร์คซิน [92] อย่างไรก็ตาม เพื่ออำนวยความสะดวกในการเปรียบเทียบ ข้อมูลถูกนำเสนอเป็นแบบไม่มีการแปลง

3.2. ประสิทธิภาพการเติบโตและดัชนีการใช้สารอาหาร

ตารางที่ 3 แสดงให้เห็นถึงผลกระทบของการเสริมอาหารโพลีแซคคาไรด์ต่อการเจริญเติบโต การรอดตาย และการใช้อาหารของกุ้ง เมื่อเปรียบเทียบกับ SWP0 ตารางที่ 3 แสดงว่า SWP1, SWP2 และ SWP3 แสดงให้เห็นอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.{{10}}5) ใน WG ยิ่งไปกว่านั้น SWP1 และ SWP2 แสดงการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05) ใน SR ในขณะที่ SWP3 แสดงการลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05) เมื่อเทียบกับ SWP0 ในทางกลับกัน ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05) ใน SGR หรือ FCR ในอาหารเสริม (SWP0, SWP1, SWP2 และ SWP3) ดังแสดงในตารางที่ 3

3.4. ชุมชนจุลินทรีย์

ตารางที่ 5 แสดงผลของอาหารทดลองที่เสริมด้วยโพลีแซคคาไรด์ที่มีความเข้มข้นต่างกัน (SWP1, SWP2 และ SWP3) เมื่อเปรียบเทียบกับ SWP0 ต่อจำนวน THB และ TVC ทั้งในน้ำและลำไส้ของกุ้ง ข้อมูลแสดงให้เห็นว่าปริมาณจุลินทรีย์ (บาทและ TVC) มีอยู่มากมายในลำไส้มากกว่าในน้ำ เมื่อเทียบกับ SWP0 ทั้งจำนวน THB และ TVC ในน้ำและลำไส้ค่อยๆ ลดลงเมื่อระดับโพลีแซคคาไรด์เพิ่มขึ้น (ตารางที่ 5)

3.5. การเจริญเติบโต ภูมิคุ้มกัน และการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับความเครียด

ในตอนท้ายของการทดลอง การเสริมโพลีแซคคาไรด์ในอาหารช่วยเพิ่มการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกัน การเจริญเติบโต และความเครียดในเนื้อเยื่อกล้ามเนื้อของ L. vannamei เกี่ยวกับการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโต (IGF-I และ IGF-II) การแสดงออกของยีนเหล่านี้ได้รับการควบคุมอย่างมาก (p < 0.05) ในการบำบัดด้วยความเข้มข้นของโพลีแซคคาไรด์ที่แตกต่างกันเมื่อเปรียบเทียบ ไปยังส่วนควบคุม (SWP{{10}}) การแสดงออกเพิ่มขึ้นใน SWP3 และพบว่าสูงกว่า SWP0 โดยมีการเปลี่ยนแปลงประมาณ 12 และ 11-เท่า ตามลำดับ (รูปที่ 1A, B) การแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกัน (Bgp, ProPO, Crustin และ Lys) ได้รับการควบคุมอย่างชัดเจนในการรักษา SWP3 โดยที่การเปลี่ยนแปลงของรอยพับคือ 9.3, 12.4, 10.5 และ 8.8 ตามลำดับ ซึ่งสูงกว่า SWP0 (รูปที่ 1C –ฉ).

เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม (SWPo) ยีน ProPO แสดงระดับการแสดงออกสูงสุดในทุกความเข้มข้นของการรักษา สำหรับยีน Crusfin มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างการบำบัดด้วย SWP3 และกลุ่มควบคุม ในขณะที่ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่าง SWP และ SWP และกลุ่มควบคุม นอกจากนี้ การแสดงออกของยีนความเครียด (SOD และ GPx) ใน SWP; เพิ่มขึ้นอย่างมากถึง 5.2- และ 6.9-เท่า ตามลำดับ สัมพันธ์กับส่วนควบคุม (รูปที่ 1G, H) อย่างไรก็ตาม มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05) ในการแสดงออกของยีน SOD ในทุกการรักษาเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมที่มี SWP เพิ่มขึ้น การรักษา ในขณะเดียวกัน มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.05) ในการแสดงออกของยีนของ GPx ระหว่าง SWP และ SWP การรักษาที่สัมพันธ์กับ SWP กลุ่มควบคุม แต่ไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญระหว่างการรักษา SWP และ SWP

4. การอภิปราย

พอลิแซ็กคาไรด์จากสาหร่ายทะเลได้รับการยอมรับว่าเป็นโมเลกุลเชิงรุกที่มีมูลค่าสูงซึ่งช่วยปรับปรุงประสิทธิภาพการเจริญเติบโต เพิ่มการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน และมีประโยชน์ต่อสุขภาพมากมายสำหรับสิ่งมีชีวิตที่เพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ [2,54,93–97] ในการศึกษาครั้งนี้ เราตั้งสมมติฐานว่าการให้สารโพลีแซคคาไรด์ที่ได้จากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล (Sargassum centifolia) ในอาหารช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการเจริญเติบโต การใช้อาหาร ส่วนประกอบของร่างกาย ชุมชนจุลินทรีย์ และการเจริญเติบโต ภูมิคุ้มกัน และการแสดงออกของยีนความเครียดของกุ้งขาว L .แวนนาไม. การทดลองให้อาหารในปัจจุบันแสดงให้เห็นว่าการเพิ่มน้ำหนักของ L. vannamei นั้นดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเพิ่มระดับโพลีแซคคาไรด์ในอาหารเชิงพาณิชย์เมื่อเปรียบเทียบกับอาหารควบคุม การค้นพบนี้ขนานไปกับการศึกษาก่อนหน้านี้ที่ดำเนินการกับกุ้งและปลาชนิดต่างๆ

ตัวอย่างเช่น Lee และคณะ [98] รายงานว่าสารสกัดด้วยน้ำร้อนของสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล Sargassum horneri ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการเจริญเติบโต กระตุ้นภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด และเพิ่มการแสดงออกของยีนภูมิคุ้มกันของกุ้ง L. vannamei อย่างมีนัยสำคัญ และแนะนำว่าระดับการรวมในอุดมคติคือ 5 g kg–1 นอกจากนี้ การศึกษาโดย Liu et al. [99] ศึกษาผลกระทบของระดับการรวมที่แตกต่างกัน (0, 1, 2 และ 3 g kg–1) ของโพลีแซคคาไรด์ที่สกัดจากสาหร่ายทะเลสีเขียว (Enteromorpha) ในอาหารของกุ้งแชบ๊วย F. merguiensis และสรุปได้ว่า 1 g kg–1 ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพการเจริญเติบโตอย่างมีนัยสำคัญ ปรับปรุงภูมิคุ้มกันที่ไม่จำเพาะเจาะจง และปรับการทำงานของลำไส้ของ F. merguiensis ในขณะที่ Abdulrahman et al. [2] ศึกษาผลของอัตราการรวมอาหารที่แตกต่างกัน (0, 10, 20 และ 30 g kg–1) ของโพลีแซคคาไรด์ที่ได้จากสาหร่ายสีน้ำตาล S. dentalium ต่อปลานิลแดงลูกผสม และสรุปได้ว่า 30 g ระดับ กก.–1 บรรลุผลการเจริญเติบโตที่มีนัยสำคัญสูงสุด FCR และดัชนีทางโลหิตวิทยา อย่างไรก็ตาม ความไม่สอดคล้องกันของระดับการรวมในการศึกษาเหล่านี้อาจเกิดจากน้ำหนักเริ่มต้นที่แตกต่างกัน ชนิดของสาหร่าย สายพันธุ์ (สายพันธุ์ปลาและกุ้ง) อายุ ฯลฯ

จุลินทรีย์ในลำไส้ที่อุดมสมบูรณ์ตอบสนองอย่างรวดเร็วต่อความผันแปรของการบริโภคอาหาร องค์ประกอบ และส่วนประกอบต่างๆ ดังนั้นจึงมีผลกระทบอย่างมากต่อประโยชน์ต่อสุขภาพของสิ่งมีชีวิตในน้ำทั้งหมด เช่น การบริโภคอาหาร การย่อยอาหาร การใช้สารอาหาร การดูดซึม และการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน [22,87,100,101] ในปัจจุบัน การประเมินความต้านทานโรคมีความสำคัญในอุตสาหกรรมการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ กิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระในเลือดและปัจจัยภูมิคุ้มกันเป็นตัวบ่งชี้สถานะสุขภาพที่ดีสำหรับการตรวจสอบการตอบสนองของภูมิคุ้มกันและความต้านทานโรคใน L. vannamei เช่น white spot syndrome virus (WSSV) [ 49] และ Vibrio alginolyticus [102] Reactive oxygen species (ROS) คือโมเลกุลที่ทำปฏิกิริยาเคมีซึ่งประกอบด้วยออกซิเจน เช่น ออกซิเจนไอออนและเปอร์ออกไซด์ ปริมาณ ROS ที่มากเกินไปอาจส่งผลต่อโครงสร้างและความเสถียรของโปรตีนที่ทำหน้าที่ กรดไขมันไม่อิ่มตัว และกรดนิวคลีอิก ก่อให้เกิดความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันต่อระบบภูมิคุ้มกันของสิ่งมีชีวิต และเพิ่มความไวต่อเชื้อโรคในกุ้ง [73] ดังนั้น สุขภาพของสิ่งมีชีวิตในน้ำจึงขึ้นอยู่กับความสมดุลระหว่างการผลิต ROS และเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ เช่น SOD และ GPx ซึ่งช่วยปกป้องเซลล์สัตว์จากอนุมูลอิสระ การค้นพบในปัจจุบันแสดงให้เห็นว่าสารโพลีแซคคาไรด์ในอาหารที่ได้จากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล (S. centifolia) ช่วยปรับปรุงการทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ รวมทั้ง SOD และ GPx ได้อย่างมีประสิทธิภาพ ในทำนองเดียวกัน กิจกรรม SOD และ GPx ของสัตว์จำพวกครัสเตเชียนต่างๆ เพิ่มขึ้นหลังจากให้อาหารที่เสริมด้วยโพลีแซคคาไรด์ Angelica sinensis ในกุ้งขาว [60] และ -glucan [103] และโพลีแซคคาไรด์ Rhodiola rosea ในกุ้งเครย์ฟิชสีแดง [104]

งานปัจจุบันรายงานว่า เมื่อเทียบกับ SWP{{0}} ค่า THB และ TVC ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p > 0.05) เมื่อเพิ่มระดับการรวมของโพลีแซคคาไรด์ (SWP1, SWP2 และ SWP3) ผลลัพธ์เหล่านี้สอดคล้องกับที่รายงานในการศึกษาโดย Mansour และคณะ [87] ที่พบว่าระดับที่เพิ่มขึ้นของแอสตาแซนธินที่สกัดจากไซยาโนแบคทีเรียสายพันธุ์ Arthrospira platensis NIOF17/003 ในอาหาร L. vannamei อย่างมีนัยสำคัญ (p > 0.05) ลดปริมาณ THB และ TVC อย่างไรก็ตาม กลไกการออกฤทธิ์ของสาหร่าย-โพลีแซคคาไรด์ส่งผลต่อความอุดมสมบูรณ์ของจุลินทรีย์อย่างไรนั้นยังไม่ชัดเจนและต้องมีการศึกษาเพิ่มเติม [87,101]

ยีนหลายตัวที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันเป็นจุดสนใจของการตรวจสอบในปัจจุบัน ในการรักษา SWP3 การแสดงออกของยีนควบคุมสูงขึ้นอย่างเห็นได้ชัด ผลลัพธ์แสดงให้เห็นการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นด้วยการรักษาเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (SWP0) ซึ่งบ่งชี้ว่าโพลีแซคคาไรด์สามารถปรับปรุงสถานะภูมิคุ้มกันของกุ้งผ่านผนังเซลล์ของจุลินทรีย์ที่ประกอบด้วยเพปทิโดไกลแคน ไลโปโพลีแซคคาไรด์ (LPS) และ -1 , 3-กลูแคน ซึ่งสามารถกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของกุ้งโดยกระตุ้นกลไกการป้องกันหลักที่ไม่จำเพาะเจาะจง [22,87,105,106]

Prophenoloxidase เป็นเอนไซม์ที่สำคัญในการสร้างภูมิคุ้มกันของร่างกายสัตว์ไม่มีกระดูกสันหลังที่ส่งเสริมการสร้างเม็ดสีเพื่อกำจัดเชื้อโรคที่รุกราน [107] และเชื่อมโยงกับการสร้างหนังกำพร้าและการรักษาบาดแผล [108] สัตว์ไม่มีกระดูกสันหลังมีระบบจดจำตัวเองที่เรียกว่า ProPO activation system ซึ่งอาจตรวจจับและตอบสนองต่อผู้บุกรุกโดยใช้เปปทิโดไกลแคนหรือลิโพโพลีแซคคาไรด์จากแบคทีเรียและ -1, 3-กลูแคนจากเชื้อรา [109] การแสดงออกของ mRNA ของยีน ProPO นั้นแสดงให้เห็นว่าสูงขึ้นอย่างมากในทุกการรักษาเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม และการแสดงออกนี้พบว่ามีมากที่สุดในบรรดายีนที่ทำการตรวจสอบทั้งหมด เนื่องจากปริมาณโพลีแซคคาไรด์ในสาหร่ายทะเลเพิ่มขึ้น (อาหาร 3 g kg–1) . การให้อาหารกุ้ง P. monodon ที่มีโพลีแซคคาไรด์ฟูคอยแดนจากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล S. wightii เพิ่มการแสดงออกของยีน ProPO [110] ผลิตภัณฑ์เสริมอาหารอื่นๆ บางชนิดที่ได้จากสาหร่ายขนาดเล็กและสาหร่ายทะเลช่วยยกระดับระบบ ProPO ของกุ้งและปรับปรุงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกาย การค้นพบของเราสอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้านี้เกี่ยวกับ L. vannamei [22,87]

ครัสตินถูกกำหนดให้เป็นส่วนหนึ่งของระบบภูมิคุ้มกันโดยกำเนิด [111] เป็นโปรตีนที่พบในเม็ดเฮโมไซต์ของสัตว์จำพวกครัสเตเชียน และมีประสิทธิภาพในการต่อต้านจุลินทรีย์หลายชนิด ในการศึกษานี้ การรับประทานอาหารเสริมของโพลีแซคคาไรด์ที่สกัดแล้วจะเพิ่มการแสดงออกของยีนครัสติน และมีความแตกต่างที่ชัดเจนระหว่างการรักษาทั้งสามแบบ การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของระดับ Crustin mRNA ใน Marsupenaeus japonicus ได้รับการสังเกตหลังจากการให้ peptidoglycan [112] ยีนครัสตินถูกควบคุม (p < 0.05) ในกุ้งขาวแปซิฟิก L. vannamei ที่ได้รับแอสตาแซนธินเสริม [87,113] ในฐานะที่เป็นโปรตีนที่พบในยูคาริโอตและโปรคาริโอต ไลโซไซม์มีมานานแล้วและถือว่าเป็นหนึ่งในโปรตีนต้านแบคทีเรียที่รู้จักเร็วที่สุด [114] ภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดที่ไม่จำเพาะขึ้นอยู่กับความสามารถในการทำลายการเชื่อมโยง b -1,4 ไกลโคซิดิกระหว่างกรด N-acetylmuramic และ N-acetylglucosamine ใน peptidoglycan ผนังเซลล์ของแบคทีเรีย [115]

ในการตรวจสอบปัจจุบัน การแสดงออกของยีน Ly แสดงให้เห็นว่าในกลุ่มการรักษา (SWP1, SWP2 และ SWP3) มากกว่าในกลุ่มควบคุม (SWP0) มาก การตรวจสอบการถอดเสียงอีกครั้งโดยใช้สปีชีส์ที่เผชิญกับความท้าทายด้านสิ่งแวดล้อมก็ทำให้เกิดการค้นพบที่คล้ายกัน [116,117] การค้นพบนี้แสดงให้เห็นว่าไลโซไซม์เป็นส่วนสำคัญของกลไกการป้องกันแบคทีเรียของกุ้ง และกระตุ้นด้วยสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันหลายชนิด เอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ catalase และ glutathione peroxidase จะเปลี่ยนไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เป็นออกซิเจนและน้ำ ในขณะที่ SOD ซึ่งเป็นหนึ่งในยีนความเครียด มีส่วนร่วมในการกำจัดซูเปอร์ออกไซด์แอนไอออนโดยเปลี่ยนให้เป็นไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์และน้ำ [118] ดังนั้น เอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระเหล่านี้จึงให้การป้องกันตนเองหลังเซลล์เม็ดเลือดขาวของสัตว์ที่หายใจด้วยออกซิเจน ดังนั้นจึงช่วยรักษาสุขภาพและความมีชีวิตของสิ่งมีชีวิต [119,120] เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม การแสดงออกของยีน SOD นั้นสูงขึ้นในสภาวะการทดลองทั้งสาม และงานวิจัยก่อนหน้านี้ [22,87,113,116] ระบุว่าสารเติมแต่งอาหารเพิ่มการแสดงออกของยีน SOD ซึ่งเกี่ยวข้องกับระบบเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระใน L .แวนนาไม.

ในระบบป้องกันกลูตาไธโอน GPx มีหน้าที่ในการลดไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เป็นน้ำ [117,121] ในการตรวจสอบของเราพบว่าการแสดงออกของ GPx นั้นสูงกว่าในการบำบัด SWP3 ซึ่งใช้โพลีแซคคาไรด์จากสาหร่ายที่มีความเข้มข้นสูงกว่า ดังนั้น ยีนความเครียดทั้งสองในการศึกษานี้จึงถูกควบคุมอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม และกิจกรรมของ SOD และ GPx เพิ่มขึ้นพร้อมกับการเพิ่มขึ้นของซุปเปอร์ออกไซด์แอนไอออน (O2 −) และไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (H2O2) ซึ่งอาจบ่งชี้ถึงการเพิ่มขึ้นของ กิจกรรมของ NADPH-oxidase และการผลิตมวลของ reactive oxygen species (ROS) ที่สามารถใช้เป็นกลไกป้องกันการติดเชื้อจุลินทรีย์ [73,122] การวิจัยล่าสุดได้ประเมินการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการสร้างภูมิคุ้มกันในกุ้ง [123,124] และได้มุ่งเน้นไปที่วิธีเพิ่มการป้องกันตามธรรมชาติของกุ้ง

ฮอร์โมนเปปไทด์ที่มีลักษณะคล้ายอินซูลิน (IGF) มีสองประเภท ได้แก่ IGF-I และ IGF-II; นอกจากนี้ยังมีตัวรับที่ผิวเซลล์และโปรตีนจับที่ไหลเวียน IGF-II เช่น IGFI มีบทบาทในการเผาผลาญโปรตีน การแยกเซลล์ การเพิ่มจำนวนเซลล์ และการเจริญเติบโตของร่างกาย จากการค้นพบของการศึกษาในปัจจุบัน ดูเหมือนว่าการสกัดโพลีแซคคาไรด์จากสาหร่ายทะเลอาจเพิ่มการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตในระดับ mRNA ดังนั้นจึงช่วยเพิ่มความสามารถในการเติบโตทางอ้อม การศึกษาอื่น ๆ ที่ตรวจสอบผลกระทบของการใช้แหล่งคาร์บอนต่าง ๆ เพื่อกระตุ้นการแสดงออกของยีน IGF-I และ IGF-II เผยให้เห็นผลลัพธ์ที่คล้ายคลึงกัน [123] นอกจากนี้ การใช้อนุภาคนาโนของสาหร่ายสีเขียว, T. sawicica และ A. platensis เป็นอาหารเสริมสำหรับ L. vannamei ช่วยเพิ่มการแสดงออกของยีนทั้งสองอย่างมากและการเจริญเติบโตที่ดีขึ้น [22,100]

5. สรุปผลการวิจัย

อาหารกุ้งได้ขยายตัวไปทั่วโลกโดยใช้หลายกลยุทธ์ในการจัดการกับการพัฒนาในการเพาะเลี้ยงกุ้งขาวแวนนาไมแปซิฟิก แม้ว่าสารเติมแต่งอาหารสัตว์จะมีความสำคัญสำหรับ L. vannamei แต่ไม่ค่อยมีใครรู้เกี่ยวกับการใช้โพลีแซคคาไรด์ที่เตรียมจากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาลในอุตสาหกรรมสารเติมแต่งอาหารสัตว์ L. vannamei ในงานปัจจุบัน อัตราการรวม 2 g kg–1 ของโพลีแซคคาไรด์ ซึ่งเป็นโมเลกุลเชิงรุกมูลค่าสูงที่เตรียมจากสาหร่ายทะเลสีน้ำตาล Sargassum dentiform เนื่องจากการบริหารสารเติมแต่งอาหารช่วยเพิ่มน้ำหนักขั้นสุดท้ายและอัตราการรอดชีวิตของกุ้งขาวแปซิฟิก L. vannamei ในขณะที่ระดับการรวมตัวที่ 3 g kg–1 ช่วยลดความอุดมสมบูรณ์ของจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรค ยิ่งกว่านั้น ยังช่วยเพิ่มภูมิคุ้มกันและการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับความเครียดของ L. vannamei อย่างไรก็ตาม ควรมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อให้เกิดประโยชน์สูงสุดจากพอลิแซ็กคาไรด์ที่เตรียมจากสาหร่ายทะเลเพื่อใช้เป็นสารเติมแต่งแก่กุ้งขาวแวนนาไมแปซิฟิก

ผลงานของผู้เขียน:

การสร้างแนวคิด EMA, ZZS และ MA; วิธีการ EMA, ZZS และ MA; ซอฟต์แวร์, EMA, ZZS และ MA; การตรวจสอบ EMA, ZZS, MA และ EE-H.; การวิเคราะห์อย่างเป็นทางการ EMA, ZZS และ MA; การสอบสวน, EMA, ZZS, MA และ EE-H.; ทรัพยากร EMA, ZZS และ MA; การจัดการข้อมูล EMA, ZZS และ MA; การเขียน—การเตรียมร่างต้นฉบับ, EMA, ZZS และ MA; การเขียน—ตรวจทานและแก้ไข EMA, ZZS, MA, ASA-S และ EE-H.; การสร้างภาพ, EMA, ZZS, MA และ EE-H.; การกำกับดูแล, ZZS, MA และ EE-H.; การบริหารโครงการ EMA; การได้มาซึ่งเงินทุน, EMA, ZZS, MA และ ASA-S ผู้เขียนทุกคนได้อ่านและยอมรับต้นฉบับฉบับที่จัดพิมพ์แล้ว

เงินทุน:

งานวิจัยนี้ไม่ได้รับทุนสนับสนุนจากภายนอก

คำชี้แจงของคณะกรรมการพิจารณาสถาบัน:

การปฏิบัติตามมาตรฐานทางจริยธรรมในการตั้งค่าการทดลองและการจัดการกุ้งได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการวิจัยของ NIOF ประเทศอียิปต์ หมายเลขอนุมัติ: NIOF/AQ3/1/22/R/012 เมื่อวันที่ 22 มกราคม 2021

คำแถลงความยินยอมที่ได้รับการบอกกล่าว: ไม่สามารถใช้ได้

คำชี้แจงความพร้อมใช้งานของข้อมูล: ไม่สามารถใช้ได้

กิตติกรรมประกาศ: การเข้าถึงงานนี้ได้รับการสนับสนุนบางส่วนโดย AL Hail Aquaculture Unit, Department of Marine Science and Fisheries, College of Agriculture and Marine Science, Sultan Qaboos University, Oman

ความขัดแย้งทางผลประโยชน์: ผู้เขียนประกาศว่าไม่มีความขัดแย้งทางผลประโยชน์

อ้างอิง

1. อับบาส EM; อาลี เอฟเอส ; เดซูกี้ มก. ; Ashour ม.; เอล-ชาเฟย, อ.; มาตี, MM; Sharawy, ZZ Novel Comprehensive Molecular and Ecological Study แนะนำกุ้งโคลนชายฝั่ง (Solenocera crassicornis) ที่อ่าวสุเอซ ประเทศอียิปต์ เจ.มาร์.วิทย์. อังกฤษ 2020, 9, 9. [CrossRef]

2. อับเดลราห์มาน; Ashour ม.; อัล-ซาฮาบี, แมสซาชูเซตส์; Sharawy, แซซซา; นาซมี, เอช.; ซากิ, แมสซาชูเซตส์; อาเหม็ด, นิวแฮมป์เชียร์; อาเหม็ด อาร์ ; เอล-ฮารูน, อี.; Van Doan, H. ผลของโพลีแซคคาไรด์ที่ได้จากสาหร่ายขนาดใหญ่สีน้ำตาล Sargassum dentalium ต่อประสิทธิภาพการเจริญเติบโต ชีวเคมีในซีรั่ม มิญชวิทยาทางเดินอาหาร และกิจกรรมของเอนไซม์ของปลานิลแดงลูกผสม อควา ตัวแทน 2022, 25, 101212 [CrossRef]

3. โกดา เอ.; สอาด, อ.; ฮานาฟี ม.; Sharawy, Z.; El-Haroun, E. ผลกระทบทางอาหารของแหนแดงร่วมกับเอนไซม์ย่อยอาหารจากภายนอก (Digestin™) ต่อการเจริญเติบโตและการใช้สารอาหารของกุ้งน้ำจืด Macrobrachium rosenbergii (de Man 1879) เจ โอเชียนอล ลิมนอล 2018, 36, 1434–1441. [ครอสรีฟ]

4. ชาราวี่, ZZ; อับบาส EM; อับเดลคาเล็ค เอ็นเค ; Ashry โอเอ ; อับดุล ฟัตตาห์, ลอสแอนเจลิส; เอล-ซอว์วี, แมสซาชูเซตส์; เฮลาล MF; El-Haroun, E. ผลกระทบของแหล่งคาร์บอนอินทรีย์และความหนาแน่นของการปล่อยต่อดัชนีการเจริญเติบโต จุลินทรีย์ในน้ำ และการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกันของตัวอ่อน Litopenaeus vannamei ในการเพาะเลี้ยงแบบเข้มข้น การเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ พ.ศ. 2565, 546, 737397. [CrossRef]

5. Gillett, R. การศึกษาระดับโลกเกี่ยวกับการประมงกุ้ง FAO ฟิชเทค ป๊า 2551, 475, 25–29.

6. อาเหม็ด น.; ทอมป์สัน เอส; Glaser, M. ผลผลิตการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำทั่วโลก ความยั่งยืนของสิ่งแวดล้อม และการปรับตัวต่อการเปลี่ยนแปลงสภาพภูมิอากาศ สิ่งแวดล้อม. จัดการ 2019, 63, 159–172. [ครอสรีฟ] [PubMed]

7. ลุคแวมบี, บี; นิโคลัส อาร์; จาง ดี.; ยาง ว.; จู้ เจ; Zheng, Z. การเปลี่ยนแปลงอย่างต่อเนื่องของชุมชนสาหร่ายขนาดเล็กเพื่อตอบสนองต่อโปรไบโอติกเชิงพาณิชย์ในระบบเพาะเลี้ยงกุ้งเข้มข้น (Litopenaeus vannamei Boone) การเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ 2019, 511, 734257. [CrossRef]

8. หลี่ อี; ซู, ซี; วัง, X.; วัง ส.; Zhao, Q.; จาง ม.; ฉิน เจจี ; Chen, L. Gut microbiota และการปรับเปลี่ยนเพื่อการเลี้ยงกุ้งขาว Litopenaeus vannamei ที่ดีต่อสุขภาพ รายได้ปลา วิทย์ อควา 2018, 26, 381–399. [ครอสรีฟ]

9. สตีเวนส์ ซี; ครอฟต์, ดี.; พอล จี; Tyler, C. ความเครียดและสวัสดิภาพของปลาสวยงาม: เรียนรู้อะไรจากการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำได้บ้าง? เจ. ฟิชไบโอล. 2560, 91, 409–428. [ครอสรีฟ]

10. El-Sayed, AFM การใช้เทคโนโลยีไบโอฟลอคในการเพาะเลี้ยงกุ้ง: การทบทวนอย่างครอบคลุม โดยเน้นที่ทศวรรษที่ผ่านมา รายได้ Aquac 2021, 13, 676–705. [ครอสรีฟ]

11. อันห์, NTN; ชาโย เอฟเอ ; เนเวจัน, น.; Van Hoa, N. ผลกระทบของความหนาแน่นของการเลี้ยงและอัตราการให้อาหารต่อคุณภาพน้ำ ประสิทธิภาพการให้อาหาร และประสิทธิภาพของกุ้งขาว Litopenaeus vannamei ในระบบผสมผสานกับองุ่นทะเล Caulerpa lentillifera เจ แอพเพิล ไฟคอล 2021, 33, 3331–3345. [ครอสรีฟ]

12. เอเมเรนเซียโน่, MG; รอมเบนโซ่, เอเอ็นเอ ; วิเอร่า, FdN ; มาร์ตินส์ แม่; โคแมน จีเจ ; เจือง, ฮ.; โนเบิล, TH; Simon, CJ Intensification of Penaeid Shrimp Culture: An Applied Review of Advances in Production Systems, Nutrition and Breeding. สัตว์ 2022, 12, 236 [CrossRef] [PubMed]

13.มันซูร์,เอที; Ashry โอเอ ; Ashour ม.; อัลซัคฟี, AS; รอมฎอน, ม.จ.; Sharawy, ZZ การเพิ่มประสิทธิภาพของระดับโปรตีนในอาหารและแหล่งคาร์บอนต่อคุณค่าทางโภชนาการของ bio floc ความอุดมสมบูรณ์ของแบคทีเรีย และการเจริญเติบโตของกุ้งขาว (Litopenaeus vannamei) วัยหนุ่มสาว ชีวิต 2022, 12, 888 [CrossRef] [PubMed]

14. มันซูร์, เอที; Ashry โอเอ ; เอล-Neweshy, MS; อัลซัคฟี, AS; Dighiesh, เอชเอส ; Ashour ม.; เคลานี มิสซิสซิปปี ; เอล-ซอว์วี, แมสซาชูเซตส์; มาบรุก MM; Abbas, EM ผลของผลพลอยได้ทางการเกษตรในฐานะแหล่งคาร์บอนในระบบที่อิงกับไบโอฟลอคต่อประสิทธิภาพการเจริญเติบโต, กิจกรรมของเอนไซม์ย่อยอาหาร, จุลพยาธิวิทยาของตับอ่อน, และปริมาณแบคทีเรียในลำไส้ของ Litopenaeus vannamei Post Larvae เจ.มาร์.วิทย์. อังกฤษ 2022, 10, 1333 [CrossRef]

15. ไอเบอร์ บีที; Kasan, NA ความก้าวหน้าล่าสุดในการจัดการน้ำเสียจากการเพาะเลี้ยงกุ้ง เฮลิยอน 2021, 7, e08283. [ครอสรีฟ] [PubMed]

16. ซากิ แมสซาชูเซตส์; Ashour ม.; Heneash, เอเอ็มเอ็ม; มาบรุก MM; อัลพรอล, AE; ไครี หือ; นูร์, AM; มันซูร์ เอที; ฮัสซาเนียน ฮาวาย; เกเบอร์, อ.; และอื่น ๆ การประยุกต์ใช้ที่เป็นไปได้ของไซยาโนแบคทีเรียพื้นเมืองที่แยกได้ (Arthrospira platensis NIOF17/003) สำหรับการผลิตไบโอดีเซลและการใช้ประโยชน์จากผลพลอยได้ในการผลิตโรติเฟอร์ในทะเล (Brachionus plicatilis) ความยั่งยืน 2021, 13, 1769 [CrossRef]

17. อาบีชา ร.; กฤษนี, มข.; Sukhdhane, K.; เวอร์มา, อ.; บราห์มัน, ม.; Chadha, N. การพัฒนาอย่างยั่งยืนของการเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำที่ยืดหยุ่นต่อสภาพอากาศและการประมงตามวัฒนธรรมผ่านการปรับตัวของความเครียดจากสิ่งมีชีวิต: การทบทวน เจ.วอเตอร์คลิม. เปลี่ยนแปลง 2022, 13, 2671–2689 [ครอสรีฟ]

18. อัลพรอล, AE; Ashour ม.; มันซูร์ เอที; อัลซาห์รานี โอม ; มาห์มูด เอส เอฟ ; Gharib, SM การประเมินคุณภาพน้ำและโครงสร้างแพลงก์ตอนพืชของแปดหาดอเล็กซานเดรีย, ทะเลเมดิเตอร์เรเนียนตะวันออกเฉียงใต้, อียิปต์ เจ.มาร์.วิทย์. อังกฤษ 2021, 9, 1328 [CrossRef]

19. เมทวอลลี่, AS; เอล-นักการ์ ฮาวาย; เอล-Damhougy, KA; บาชาร์ แม่; Ashour ม.; Abo-Taleb การวิเคราะห์ HAH GC-MS ของส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพในสารสกัดหยาบ 6 ชนิดจากปะการังอ่อน (Sinularia maxim) ที่รวบรวมจาก Ras Mohamed อ่าว Aqaba ทะเลแดง ประเทศอียิปต์ อียิปต์. เจ อควอท ไบโอล ปลา. 2020, 24, 425–434. [ครอสรีฟ]

20. มากูซ, เอฟไอ; เอสซา, แมสซาชูเซตส์; สสาร, ม.; Tageldein Mansour, อ.; อัลคาฟาฟี ม.; Ashour, M. พลวัตของประชากร, ความดกของไข่และองค์ประกอบของกรดไขมันของ Oithona nana (Cyclopoida, Copepoda), เลี้ยงด้วยอาหารที่แตกต่างกัน สัตว์ 2021, 11, 1188 [CrossRef]

21. เคสเซลริง เจ; กรูเบอร์ ซี; สแตนเดน บี; Wein, S. ผลของสารเติมแต่งอาหารพืชต่อการเจริญเติบโตและภูมิคุ้มกันของกุ้งขาวแวนนาไม Litopenaeus vannamei ที่เลี้ยงด้วยอาหารปลาป่นต่ำ เจ เวิลด์ อควา สังคม พ.ศ. 2564, 52, 303–315. [ครอสรีฟ]

22. ชาราวี, ZZ; Ashour ม.; ลาบีน่า, อ.; อัลซัคฟี, AS; Mensour, AT; Abbas, E. ผลของอนุภาคนาโน Arthrospira platensis ในอาหารต่อประสิทธิภาพการเจริญเติบโต การใช้อาหาร และการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเจริญเติบโตของกุ้งขาวแปซิฟิก Litopenaeus vannamei การเพาะเลี้ยงสัตว์น้ำ พ.ศ. 2565, 551, 737905. [CrossRef]

23. เชเซญ่า, CE; จาซินโต อีซี ; กอนซาเลซ, อัล ; วิลลาซานเต้, FV ; คาสโตร, RMM; โอชัว, น.; มอนเตส, เร; รามิเรซ, ดีที ; ออร์ติซ เอซีเอส ; Campa-Córdova, AI การเสริมอาหารของ Debaryomyces hansenii ช่วยเพิ่มอัตราการรอดชีวิต สารต้านอนุมูลอิสระ และการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในกุ้งวัยอ่อน Penaeus vannamei ที่ท้าทายด้วย Vibrio parahaemolyticus ทรอป. ซับทรอป ระบบนิเวศเกษตร 2021, 24, 2. [CrossRef]

24. มันซูร์, เอที; Ashour ม.; อัลพรอล, AE; Alsaqufi, AS พืชน้ำและสัตว์น้ำในบริบทของความยั่งยืน: เทคนิคการเพาะปลูก การบูรณาการ และการปฏิวัติสีน้ำเงิน ความยั่งยืน 2022, 14, 3257 [CrossRef]

25. ฮัสซัน เอสเอ็ม; Ashour ม.; โซลิมาน เอเอเอฟ ; ฮัสซาเนียน ฮาวาย; อัลซานี่ ดับบลิวเอฟ ; เกเบอร์, อ.; Elshobary, ME ศักยภาพของสารสกัดสาหร่ายเชิงพาณิชย์ใหม่ในการกระตุ้นคุณสมบัติทางพืชไร่และพืชไร่ของ Eruca vesicaria (L.) Cav. ความยั่งยืน 2021, 13, 4485 [CrossRef]

26. เอสซ่า ด.; อาโบเชดี้, อ.; ไครี่, เอช.; อโบโมรา, AE-F.; Elshobary, M. ศักยภาพในการเพาะเลี้ยงสาหร่ายขนาดเล็กที่มีน้ำมัน halophilic ในน้ำเสียจากโรงงานอุตสาหกรรม อียิปต์. เจ. บอต. 2018, 58, 205–216. [ครอสรีฟ]

27. มันซูร์, เอที; อัลพรอล, AE; Abualnaja, KM; เอล-เบลตากิ, เอชเอส; รอมฎอน, KMA; Ashour, M. Dried Brown Seaweed's Phytoremediation Potential is Phytoremediation Potential for Methylene Blue dyed from aquatic Environments. โพลิเมอร์ 2022, 14, 1375 [CrossRef]

For more information:1950477648nn@gmail.com