ไนตริกออกไซด์ Synthase มีผลต่อไตอย่างไร ?

ติดต่อ: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

การศึกษาระดับโมเลกุลของความเป็นพิษของไดอะซินอนจากการแสดงออกของไนตริกออกไซด์ที่เหนี่ยวนำ (iNOS) ในเซลล์ตับและจุลพยาธิวิทยาของไตในหนู (Rattus norvegicus)

เชิงนามธรรม

ไดอะซินอนเป็นยาฆ่าแมลงออร์กาโนฟอสเฟตที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการกำจัดศัตรูพืช แต่มีความเป็นพิษสูงกว่ายาฆ่าแมลงชนิดอื่น ไดอะซินอนที่บริโภคเข้าไปโดยไม่ได้ตั้งใจมีผลต่อการเพิ่มขึ้นของออกซิเจนชนิดปฏิกิริยา (ROS) ในร่างกาย ชนิดของออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยา (ROS) จะกระตุ้นไซโตไคน์ที่มีการอักเสบซึ่งจะกระตุ้นให้เกิดการเหนี่ยวนำไนตริกออกไซด์ซินเทส(iNOS) ซึ่ง iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส) จะผลิตไนตริกออกไซด์(NO) เป็นสารอนุมูลอิสระ ROS ระดับสูงจะทำให้เซลล์เสียหาย การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาความเป็นพิษของไดอะซินอนต่อ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกของตับและไตจุลพยาธิวิทยาของหนู(Rattus norvegicus). หนูถูกแบ่งออกเป็น 4 กลุ่มซึ่งประกอบด้วยกลุ่มควบคุมเชิงลบและกลุ่มทดลองสามกลุ่มที่ได้รับไดอะซินอน 20 มก./กก. BW(P1), 40 มก./ กก. BW(P2) และ 60 มก./กก. BW (P3) พารามิเตอร์ที่พบในงานวิจัยนี้คือการแสดงออกของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)ในตับโดยใช้การย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมี จากนั้นวิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวตามด้วยการทดสอบทูคีย์ (a=0,05) และไตจุลพยาธิวิทยาที่สังเกตได้โดยใช้การย้อมสี Hematoxylin-Eosin และวิเคราะห์เชิงพรรณนาในเชิงคุณภาพ ผลการศึกษาพบว่าการให้ยาไดอะซินอนทางปากเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)นิพจน์ (p<0,001)in the="" liver="" and="" caused="" damage="" to="" the="">ไตคอร์เทกซ์ที่แสดงโดยการแทรกซึมของเซลล์อักเสบ การตายของไตเซลล์ท่อและการตกเลือดในช่องว่างระหว่างท่อ

คำสำคัญ:ไดอะซินอน, ออร์กาโนฟอสเฟต, iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออก,ไตจุลพยาธิวิทยา

Cistanche ปรับปรุงการทำงานของไต

1. บทนำ

รู้สึกว่าการใช้สารกำจัดศัตรูพืชเพื่อเพิ่มการผลิต โดยเฉพาะอย่างยิ่งเพื่อป้องกันศัตรูพืชและวัชพืช(Kusriani, 2012). อย่างไรก็ตาม การใช้สารกำจัดศัตรูพืชบ่อยครั้งอาจทำให้สารกำจัดศัตรูพืชเหล่านี้เป็นพิษต่อผู้บริโภค รวมทั้งสัตว์ทั้งทางการหายใจ ทางปาก และทางผิวหนัง (Ameriana, 2006) สารกำจัดศัตรูพืชชนิดหนึ่งที่ใช้กันทั่วไปคือไดอะซินอน ไดอะซินอนเป็นยาฆ่าแมลงออร์กาโนฟอสเฟตที่มีกลไกยับยั้งการทำงานของเอ็นไซม์ cholinesterase สารกำจัดศัตรูพืชเหล่านี้ยังมีผลกระทบต่อสิ่งมีชีวิตที่ไม่ใช่เป้าหมายน้อยกว่าและเป็นพิษต่อสัตว์มีกระดูกสันหลังมากกว่าเมื่อเทียบกับออร์กาโนคลอรีน(Luthfanto, 2014). โดยปกติสารกำจัดศัตรูพืชจะถูกทำให้เป็นกลางในตับโดยเซลล์ตับผ่านการล้างพิษ แต่สารประกอบเหล่านี้ยังสามารถก่อให้เกิดอนุมูลอิสระเนื่องจากเซลล์ถูกทำลาย การได้รับสารออร์กาโนฟอสเฟตที่เกิดขึ้นอย่างต่อเนื่องสามารถกระตุ้นความเสียหายของตับในฐานะอวัยวะที่มีบทบาทในกระบวนการล้างพิษ(Ginting, 2014). ออร์กาโนฟอสเฟตที่ได้รับการเผาผลาญในตับมีฤทธิ์ในการยับยั้งเอนไซม์ AChE การยับยั้งเอนไซม์นี้ส่งผลโดยตรงในการเพิ่มระดับ acetylcholine ในระบบประสาทและระบบประสาทและกล้ามเนื้อ การเพิ่มขึ้นของ AChE อาจทำให้ไอออนในเซลล์ไม่เสถียรและกระตุ้นการก่อตัวของ Reactive Oxygen Species (ROS) (Uchendu,2012) ROS ที่เพิ่มขึ้นจะกระตุ้นการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบ Naik และ Vishva (2011) ระบุว่า ROS มีผลต่อการถอดรหัสของ proinflammatory cytokines โดยที่ ROS ในระดับสูงจะตามมาด้วย cytokines ที่ทำให้เกิดการอักเสบในระดับสูง เช่นเดียวกับหากการผลิต ROS ถูกยับยั้งโดยสารยับยั้งจะส่งผลต่อการลดลงของการผลิตของ proinflammatory cytokines ดังกล่าว เป็น IL-6 และ TNF การผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบที่เพิ่มขึ้นจะทำให้เกิด iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)และสร้าง NO ในปริมาณที่มากเกินไป (Aktan, 2004)

ดิไตเป็นอวัยวะหลักที่รักษาสมดุลของ Extra Cellular Fluid (ECF) โดยทำหน้าที่ในการขับถ่ายและการเผาผลาญ (Curthoys, 2014). การขับถ่ายหรือการกำจัดผลการเผาผลาญของซีโนไบโอติกที่ดำเนินการในไต. ดิไตความเสียหายสามารถลดระดับการขับสารเคมีได้โดยไม่เพิ่มความเป็นพิษของสารพิษ(Gupta, 2012). สภาวะความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันจะเริ่มต้นกระบวนการลิพิดเปอร์ออกซิเดชันโดยนำไฮโดรเจนไอออนจากพันธะโพลีไม่อิ่มตัวเชิงซ้อน (PUFA) เพื่อสร้างโมเลกุลที่เสถียรยิ่งขึ้น กระบวนการทำลายพันธะบน PUFA อาจทำให้เซลล์หรือเนื้อเยื่อตายได้ (Sharma et al..2003)

การศึกษานี้ดำเนินการเพื่อตรวจสอบความเป็นพิษของไดอะซินอนต่อ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกของตับและจุลพยาธิวิทยาไตของหนู

ไนตริกออกไซด์ซินเทสมีผลต่อการทำงานของไต

2. วัสดุและวิธีการ

2.1. โมเดลสัตว์และการออกแบบทดลอง

หนู 20 ตัว (Rattus norvegicus) แบ่งออกเป็น 4 กลุ่มคือ กลุ่มควบคุมเชิงลบ (หนูที่มีสุขภาพดี) กลุ่ม P1, P2 และ P3 ถูกบริหารให้ด้วยไดอะซินอนเป็นเวลา 8 สัปดาห์โดยใช้ท่อให้อาหารที่มีขนาดยา 20 มก./กก. BW, 40 มก./กก. BW และ 60 มก./กก. BW ตามลำดับ ไดอะโซเนียม 600EC ถูกผสมกับน้ำกลั่นจนมีไดอะโซเนียม 5 มก. ใน 1 มล.(Baconi et al., 2013)

หนูถูกปรับสภาพให้เคยชินเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ก่อนได้รับการรักษา เงื่อนไขและการจัดการสัตว์ทั้งหมดดำเนินการตามระเบียบการที่ได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการการผ่านพิธีการทางจริยธรรมของมหาวิทยาลัย Brawijaya (หมายเลข: 732-KEP-UB)

2.2.การเตรียมและการสังเกตจุลพยาธิวิทยาของไต

การเตรียมตัวของไตจุลพยาธิวิทยาประกอบด้วยขั้นตอนต่อไปนี้: การตรึง, การคายน้ำ, การล้าง, การฝัง, การแบ่งส่วน, การเกาะติดกับวัตถุแก้วตาม Muntiha (2001) ข้อสังเกตของไตจุลพยาธิวิทยาได้ดำเนินการโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบส่องกล้องสองตาที่มีกำลังขยายของกล้องจุลทรรศน์ 100x ตามด้วย 400x การสังเกตได้กระทำบน glomerulus ของไตและท่อไต

2.3.การวิเคราะห์การแสดงออกของ iNOS (Nitric Oxide Synthase) ต่อตับ

iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)วิเคราะห์การแสดงออกของตับด้วยวิธีอิมมูโนฮิสโตเคมีโดยใช้การต่อต้าน iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส) เป็นแอนติบอดีปฐมภูมิและ IgG ต่อต้านกระต่ายที่ติดฉลากไบโอตินเป็นแอนติบอดีทุติยภูมิ การวัดค่าของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกของตับดำเนินการโดยใช้ซอฟต์แวร์ Immunoratio ผลลัพธ์ของพื้นที่เปอร์เซ็นต์การแสดงออกของ iNOS ถูกวิเคราะห์เชิงปริมาณโดยใช้การทดสอบการวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) และตามด้วยการทดสอบทูคีย์

3. ผลลัพธ์และการอภิปราย

3.1.การวิเคราะห์การแสดงออกของ iNOS (Nitric Oxide Synthase) บนตับ

เพื่อวิเคราะห์การแสดงออกของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)ในเซลล์ตับด้วยวิธีอิมมูโนฮิสโตเคมี การแสดงออกของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)สามารถแสดงเป็นสีน้ำตาลในเซลล์ตับ ซึ่งสามารถเห็นได้ใน รูปที่ 1

รูปที่ 1. iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกของตับ

(1) กลุ่มควบคุมเชิงลบ (K-) (2)P1(กระตุ้นด้วยไดอะซินอน 20 มก./กก. BW. (3) P2 (เหนี่ยวนำด้วยไดอะซินอน 40 มก./กก. BW)

(4) P3 (เหนี่ยวนำด้วยไดอะซินอน 60 มก./กก. BW วงกลมสีขาวแสดงพื้นที่ของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออก.

ผลอิมมูโนฮิสโตเคมีวิเคราะห์ในเชิงคุณภาพและพบว่ามีความเข้มของสีน้ำตาลเพิ่มขึ้น (รูปที่ 1) ผลลัพธ์นี้บ่งชี้ว่ามีการเพิ่มขึ้นของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)ระดับการแสดงออกในกลุ่มบำบัดเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม

เพื่อวัดระดับของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกในเซลล์ตับใช้ซอฟต์แวร์อิมมูโนรีแอคชั่น ผลการวิเคราะห์เชิงปริมาณของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกในตับของหนูสามารถเห็นได้ในตารางที่ 1 และสรุปได้ว่ามีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ (p<0.001) between="" the="" treatment="" groups="" compared="" to="" the="" negative="" control="" group="" (k-).="" in="" the="" negative="" control="" group="" that="" was="" the="" group="" without="" diazinon="" organophosphate="" induction,="" the="" average="" percentage="" area="" of=""> (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)เพศเท่ากับ 1.340 ±0.092 เปอร์เซ็นต์ ในกลุ่มการรักษา 1(P1) ซึ่งเป็นกลุ่มที่เกิดจากไดอะซินอนออร์กาโนฟอสเฟตในขนาด 20 มก./กก. BW ซึ่งเป็นเปอร์เซ็นต์เฉลี่ยของพื้นที่ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกคือ 4.184±1.041 เปอร์เซ็นต์ กลุ่มบำบัดที่ 2 (P2) เป็นกลุ่มที่เกิดจากไดอะซินอนออร์กาโนฟอสเฟตในขนาด 40 มก. / กก. BW และค่าเฉลี่ยของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกคือ 7.496±0.997 เปอร์เซ็นต์ กลุ่มบำบัดที่ 3 (P3) เป็นกลุ่มที่ชักนำโดยไดอะซินอนออร์กาโนฟอสเฟตในขนาดยา 60 มก./กก. BW และค่าเฉลี่ยของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)นิพจน์คือ 11.604 ± 0864

ในกลุ่มควบคุมเชิงลบพบว่า iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)การแสดงออกในระดับต่ำ (1,340 ± 0.092 เปอร์เซ็นต์ ) McNaughton et al.(2002) พบว่า iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)ถูกแสดงออกในภาวะ acini ตับปกติ การแพร่กระจายของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)ในตับปกติจะแสดงบริเวณรอบ ๆ พอร์ทัลด้วยการแสดงออกที่แข็งแกร่งที่สุดและความเข้มลดลงตาม acini ของตับ ตาม Kubes (2000) iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)สามารถให้ผลการรักษาหากมีการควบคุมในปริมาณและตำแหน่งที่เหมาะสม iNOS มีบทบาทเชิงบวกรวมถึงการรักษาของผิวหนังและเยื่อบุลำไส้ ต่อสู้กับแบคทีเรียบางชนิด ศักยภาพในการควบคุมการเพิ่มจำนวนทีเซลล์และการสร้างความแตกต่างและควบคุมการจัดหาเม็ดโลหิตขาว .

กลุ่มบำบัดแสดงพื้นที่ร้อยละของ iNOS . เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (ไนตริกออกไซด์ซินเทส) (p<0,001). diazinon="" such="" as="" organophosphate="" in="" general="" will="" be="" metabolized="" which="" mainly="" takes="" place="" in="" the="" liver.="" the="" metabolism="" that="" occurs="" in="" phase="" 1="" metabolism="" is="" an="" oxidation="" process,="" where="" organophosphate="" will="" be="" broken="" down="" into="" oxon-organophosphate="" metabolites="" and="" free="" sulfur="" ions="" with="" the="" help="" of="" cytochrome="" enzymes(cyp)(gupta,="" 2009).="" metabolites="" from="" phase="" 1="" metabolism="" are="" free="" radicals,="" unstable="" substances="" that="" have="" no="" electron="" pairs.="" free="" radicals="" will="" produce="" reactive="" oxygen="" species="" (ros)such="" as="" superoxide,="" hydroxyl="" radicals,="" and="" hydrogen="" peroxide="" through="" interactions="" with="" other="" molecules.="" free="" radicals="" react="" with="" phospholipids="" from="" the="" plasma="" membrane,="" endoplasmic="" reticulum="" membrane,="" or="" mitochondrial="" membrane="" and="" cause="" cell="" death="" (gupta,="" 2012).="" organophosphate="" pesticides="" can="" also="" cause="" oxidative="" stress(mishra,="" 2013).="" this="" oxidative="" stress="" condition="" is="" caused="" by="" diethyl="" as="" an="" organophosphate="" free="" radical(diazinon)that="" is="" capable="" to="" produce="" large="" amounts="" of="" ros.="" oxidative="" stress="" is="" an="" impaired="" balance="" between="" prooxidants="" and="" antioxidants="" that="" causes="" potential="" damage="" (uchendu="" et="" al.,="">

ROS ที่เพิ่มขึ้นจะกระตุ้นการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบ ชนิดออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยาจะส่งผลต่อการถอดรหัสของโปรอินเฟริติกไซโตไคน์ โดยที่ ROS ระดับสูงจะตามมาด้วยไซโตไคน์ที่มีการอักเสบในระดับสูง ในทำนองเดียวกัน หากการผลิต ROS ถูกยับยั้งด้วยสารยับยั้งก็จะส่งผลต่อการลดลงของการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบ เช่น IL{{0 }} และ TNF (Naik and Vishva, 2012) Dunlop et al.(2014) และ Pahan et al.(2000) ระบุว่า TNF- และ IL-1 มีบทบาทในการเพิ่มการแสดงออกของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)ในเนื้อเยื่อโดยการกระตุ้น Nappar Kappa B(NF-kB) ซึ่ง NF-kB เข้าสู่นิวเคลียสและจับกับบริเวณโปรโมเตอร์ของ iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส). การผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบที่เพิ่มขึ้นจะทำให้เกิด iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)และก่อให้เกิด .ในปริมาณที่มากเกินไปไนตริกออกไซด์(อ.) (อัคตาน, 2547).

3.2.การวิเคราะห์จุลพยาธิวิทยาของไต

ผลการวิจัยนี้เกี่ยวกับผลของความเป็นพิษของไดอะซินอนต่อไตลักษณะทางจุลพยาธิวิทยาโดยใช้การย้อมสี Hematoxylin-Eosin (HE) แสดงในภาพที่ 2 ภาพเนื้อเยื่อวิทยาของเยื่อหุ้มสมองไตของหนูในกลุ่มควบคุมเชิงลบ (K-) แสดงให้เห็นว่ามีภาวะปกติและไม่พบความผิดปกติ สิ่งนี้ได้รับการพิสูจน์โดยการปรากฏตัวของคลังข้อมูลของไต, ท่อหดเกร็งส่วนปลายและส่วนปลายที่มีชั้นของเซลล์เยื่อบุผิวทรงลูกบาศก์(รูปที่ 2(1))

ภาพทางจุลพยาธิวิทยาของเยื่อหุ้มไตของหนูในกลุ่ม P1 แสดงให้เห็นความผิดปกติ โดยมีลักษณะเฉพาะคือมีเซลล์ที่ผ่านการคาร์ริโอไลซิสและการเจริญเติบโตมากเกินไป เซลล์คาริโอไลซิสมีลักษณะเฉพาะด้วยการหายไปของนิวเคลียสของเซลล์ ในขณะที่เซลล์เยื่อบุผิวที่มีการเจริญมากเกินไปนั้นมีลักษณะเฉพาะของขนาดเซลล์ที่ขยายใหญ่ขึ้นเพื่อให้โครงสร้างของท่อไตดูไม่ปกติ เม็ดเลือดแดงในช่องว่างระหว่างท่อสามารถเห็นได้ในภาพนี้ซึ่งบ่งชี้ว่ามีเลือดออก (ภาพที่ 2 (2) ภาพจุลพยาธิวิทยาในกลุ่ม P2 แสดงความผิดปกติคล้ายกับกลุ่ม P1 ความผิดปกติที่สามารถสังเกตได้ในเยื่อหุ้มสมองของไต ของหนู P2 รวมถึงการปรากฏตัวของเซลล์ที่ผ่านคาริโอไลซิส, การเจริญเติบโตของเซลล์มากเกินไป และการตกเลือด นอกจากนี้ โครงสร้างของไตหลอดมีลักษณะไม่สม่ำเสมอเมื่อเทียบกับกลุ่ม K (รูปที่ 2(3)) ภาพจุลพยาธิวิทยาของเยื่อหุ้มสมองไตของหนูในกลุ่ม P3 แสดงให้เห็นความผิดปกติดังที่เห็นในภาพจุลพยาธิวิทยาของเยื่อหุ้มสมองไตในหนู Pl และ P2 มีลักษณะเป็นเซลล์ที่โตมากเกินไป คาร์ริโอไลซิส และเม็ดเลือดแดงในช่องว่างระหว่างท่อ (ตกเลือด) ). นอกจากนี้ยังสามารถสังเกตการมีอยู่ของการแทรกซึมของเซลล์อักเสบในเนื้อเยื่อ (รูปที่ 2(4))

ไดอะซินอนออร์กาโนฟอสเฟตที่ให้กับหนูทางปากจะถูกย่อยโดยทางเดินอาหารซึ่งจะถูกดูดซึมโดยลำไส้โดยเฉพาะโดยลำไส้เล็กส่วนต้น เมแทบอลิซึมของออร์กาโนฟอสเฟตส่วนใหญ่เกิดขึ้นในตับ แต่ในระดับที่น้อยกว่าเมแทบอลิซึมก็เกิดขึ้นในฝ่ามือและลำไส้ ออร์กาโนฟอสเฟตจะเข้าสู่กระบวนการเผาผลาญในระยะที่ 1 ซึ่งเป็นกระบวนการออกซิเดชัน โดยที่ออร์กาโนฟอสเฟตจะถูกย่อยสลายเป็นสารออกซอน-ออร์กาโนฟอสเฟตและไอออนของกำมะถันอิสระด้วยความช่วยเหลือของเอนไซม์ไซโตโครม (CYP) (Gupta, 2009; Elersek และ Metka 2011) สารเมตาบอไลต์ออกซอน-ออร์กาโนฟอสเฟตจะเข้าสู่กระแสเลือดและไปที่ตับเพื่อเผาผลาญต่อไป ในตับ สารเมแทบอไลต์ของออกซอน-ออร์กาโนฟอสเฟตจะถูกไฮโดรไลซ์ด้วยความช่วยเหลือของเอนไซม์คาร์บอกซิเลสเตอเรส (CE) และพาราออกโซเนส (PON) ที่แยกออกเป็นไดอัลคิลฟอสเฟต และออกจากกลุ่ม จากนั้นไดอัลคิลฟอสฟาเตสจะถูกเร่งปฏิกิริยาด้วยเอ็นไซม์ในการเผาผลาญระยะที่ 2 ซึ่งจะผลิตโมเลกุลที่ชอบน้ำและสามารถขับออกทางปัสสาวะได้ในขณะที่เหลือกลุ่ม (ในรูปของไดเอทิล) ที่สามารถทำให้เกิดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในร่างกายได้ ไดเอทิลเป็นโมเลกุลที่มีปฏิกิริยาไวมาก และทำปฏิกิริยากับกลุ่มไฮดรอกซิลเรดิคัล (-OH) เพื่อสร้างอนุมูลอิสระใหม่ (Elersek และ Metka, 2011) อนุมูลอิสระจำนวนมากในร่างกายไม่สามารถทำให้เป็นกลางโดยสารต้านอนุมูลอิสระภายในร่างกาย ส่งผลให้เกิดความไม่สมดุลระหว่างอนุมูลอิสระและสารต้านอนุมูลอิสระที่ทำให้เกิดความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน(Caramori and Papi, 2004) ความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันนี้เกิดขึ้นเนื่องจากไดเอทิลไฮดรอกซิลในฐานะอนุมูลอิสระจากออร์กาโนฟอสเฟตไดอะซินอนสามารถผลิต ROS จำนวนมากได้ (Uchendu et al., 2012) ROS ที่เพิ่มขึ้นจะทำให้เกิดสภาวะความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและเริ่มกระบวนการลิปิดเปอร์ออกซิเดชันโดยนำไฮโดรเจนไอออนจากกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อน (PUFA) มาสร้างโมเลกุลที่เสถียรมากขึ้น กระบวนการทำลายพันธะของ PUFA สามารถทำให้เกิดเนื้อร้ายของเซลล์หรือเนื้อเยื่อ (Sharma et al.,2003)

ความผิดปกติที่เกิดขึ้นในไตเยื่อบุผิวท่อเนื่องจากการสัมผัสโดยตรงของเยื่อบุผิวกับสารพิษของไดอะซินอนและในไตท่อมีกระบวนการดูดกลับและเสริมในกระบวนการสร้างปัสสาวะ(Mescher, 2010). สารพิษของไดอะซินอนที่ยังคงอยู่ในหลอดเลือดจะถูกสัมผัสโดยตรงกับ endothelium ทำให้เกิดการหยุดชะงักของการซึมผ่านของเยื่อหุ้มหลอดเลือด การตกเลือดในช่องว่างระหว่างท่อเกิดจากการหยุดชะงักของการซึมผ่านของเยื่อหุ้มหลอดเลือด (เส้นเลือดฝอยในช่องท้อง) เพื่อให้เม็ดเลือดแดงสามารถเข้าสู่เนื้อเยื่อได้ (Djumadi et al.,2008) การบาดเจ็บที่เซลล์บุผนังหลอดเลือดทำให้เกิดปฏิกิริยาการอักเสบ ส่งผลให้เกิดการสะสมของมาโครฟาจและเกล็ดเลือดทั้งภายนอกและภายในหลอดเลือดแดง การปรากฏตัวของการแทรกซึมของเซลล์อักเสบในเนื้อเยื่อที่เสียหายบ่งชี้ว่าสารจากไดอะซินอนทำให้เกิดความเป็นพิษต่อไต(Khudair et al., 2017).

จากผลของลักษณะทางจุลพยาธิวิทยา เยื่อหุ้มไตในกลุ่มที่ได้รับการรักษามีความผิดปกติเมื่อเทียบกับกลุ่ม K เป็นที่ทราบกันดีว่ากลุ่ม P1 ที่มีขนาดยาต่ำสุด 20 มก./กก. BW ได้แสดงความเสียหายของไตเซลล์หลอดเปรียบเทียบกับกลุ่ม K

Cistanche ปรับปรุงการทำงานของไต

4. บทสรุป

การให้ไดอะซินอนที่มีขนาดต่ำสุด 20 มก./กก. BW แสดงให้เห็นว่าเป็นพิษในหนูตามที่ระบุโดยการเพิ่มขึ้นของ iNOS อย่างมีนัยสำคัญ (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)นิพจน์ (p<0.001)and showed="" the="" damage="" of="" the="" renal="" cortex="" in="" the="" form="" of="" renal="" tubular="" cell="" necrosis,="" hemorrhage,="" and="" renal="" tubular="" cell="">

5. การอ้างอิง

[1] Aktan, F 2004 iNOS (ไนตริกออกไซด์ซินเทส)-Mediated Nitric Oxide Production และ It's Regulation. วิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต,75:639-653.

[2] Ameriana, M. 2006. Perilaku Petani Sayuran dalam Menggunakan Pestisida Kimia.J. Hort.18(1):95-106,2008.

[3] Arthur,CGและ EHJohn.1997.Fisiologi Kedokteran.EGC.Edisi9.1997.

[4] Aulanni'am, A. Rosdiana และ NL Rahmah.2012 ศักยภาพของ Sargassum ซ้ำซ้อนสารสกัดจาก Bory ในการรักษาโรคลำไส้อักเสบจากสารสกัดใน Rattus norvegicusJournal of Life Sciences 6:144-154

[5] Caramori, G.and A. Papi.2004.สารต้านอนุมูลอิสระในสารประกอบออร์กาโนฟอสฟอรัสเป็นพิษ IntJ Pharm Bio Sci,59 (2): 170-173.

[6] Cox, C.2000.Diazinon: Toxicology.Journal of Pesticide Reform/ Summer 20(2).

[7] Curthoys, NPand WM Orson.2014. ฟังก์ชั่นท่อใกล้เคียงและการตอบสนองต่อกรด สมาคมโรคไตแห่งอเมริกา วารสารทางคลินิกของ American Society of Nephrology 9:1627-1638

[8] Djumadi, H., dan H. Sugiyono.2008. Pengaruh Pemberian Insektisida Diazinon dan Kurkumin Kunyit(Curcuma domestica) Per-Oral terhadap Perubahan Struktur Histologis Duodenum Mencit (Mus musculus).Jurnal Penelitian Sains & Teknologi,Vol.9(1):62-83.

[9] Dunlop, K. , G.Kiranjot, K. Crystal, I.Julijana, D.Rupinder, D.Jean-Francois, ACKim, J. Amish, PJ McNamara และ PJ Robert 2014. Hypercapnia ในการรักษาป้องกันการสูดดมไนตริกออกไซด์-Induced Right-Ventricular Systolic Dysfunction ในหนูเด็กและเยาวชน Elsevier Inc. ฟรี Radical Biology and Medicine 9: 35-49

[10] Elersek,T.and F.Metka.2011.สารกำจัดศัตรูพืช: ผลกระทบของการได้รับสารกำจัดศัตรูพืชInTech Europe ริเยกา.

[11] Frazier,SK, CSJohn,CHGordon,B.Graham, B.Roger, N.Shinji, N.Akiyoshi, D.Beate และ B. Axel.2012 รอยโรคที่เกิดจากการเพิ่มจำนวนและไม่ลุกลามของระบบทางเดินปัสสาวะของหนูและหนู พยาธิวิทยาทางพิษวิทยา, 40:14S-86S

[12] Georgievskii, V.1., BNannenkov และ VTSamokhin.2013. โภชนาการเชิงวัสดุของสัตว์: การศึกษาด้านวิทยาศาสตร์การเกษตรและอาหาร. Butterworths & Co.(Publishers)Ltd.ลอนดอน 160-161.

[13] Gupta, RC2012.Veterinary Toxicology Second Edition.Elsevier inc. วอลแทม สหรัฐอเมริกา

[14]Hubrecht,R. และ J.Kirkwood. 2010.The UFAW: คู่มือการดูแลและการจัดการห้องปฏิบัติการและสัตว์วิจัยอื่น ๆ. สหพันธ์มหาวิทยาลัยเพื่อสวัสดิภาพสัตว์ สหราชอาณาจักร.

[15]Khudair, ZW, ASHanan และ KE Manal.2017. การเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาที่กระตุ้นในอวัยวะภายในของหนูขาวหลังจากได้รับสาร Diazinon.Bas..Vet.Res 1(2)

[16] Kubes, P.2000.Inducible Nitric Oxide Synthase: สิ่งดีๆเล็กๆ น้อยๆ ในตัวเราทุกคน http://dx.doi.org/10.1136/gut.47.1.6 [24 กรกฎาคม 2019].

[17] McNaughton, L. , P.Lakshmi, AMMaria, K. Norm, M. Irvin, M. Redwan, H. Outayba และ WR Marek.2002 การกระจายของไนตริกออกไซด์ซินเทสในตับมนุษย์ปกติและตับแข็ง การดำเนินการของ National Academy of Science Vol.99, No.26 17161-17166

[18] Mescher, AL2010. Histology พื้นฐานของ Junqueira: Text &Atlas 12 Edition. The McGraw-Hill Companies, Inc. สหรัฐอเมริกา

[19] Mishra, BP 2013. สถานะสารต้านอนุมูลอิสระและความเครียดออกซิเดชันในการเป็นพิษของสารกำจัดศัตรูพืชออร์กาโนฟอสเฟตIOSR.Journal of Dental and Medical Sciences (IOSR-JDMS)e-ISSN:2279-0853, p-ISSN:2279-0861 .เล่มที่ 7 ฉบับที่ 6 (พ.ค.-มิ.ย. 2556) ภ.พ. 20-24