ผลของสารสกัดน้ำ Cistanches Herba ต่อการสูญเสียกระดูกในหนูที่ตัดรังไข่
Mar 04, 2022
ติดต่อ: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com
Haidong Liang 1,*, Fang Yu 2, Zhihong Tong 1 และ Zaiguo Huang 3
1 Hands and feet microsurgery, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: tongzhih37@sina.cn
2 School of Medicine, Dalian University, Dalian 116033, China; E-Mail: yufangk7@sina.cn
3 Orthopedics Department, Dalian Municipal Central Hospital, Dalian 116033, China; E-Mail: huangzg41@sina.com
เชิงนามธรรม:เพื่อประเมินความสามารถของยาจีนโบราณ Cistanches Herba extract (CHE) เพื่อป้องกันการสูญเสียมวลกระดูกในหนูที่ได้รับการผ่าตัดรังไข่ (OVX) สารสกัด Cistanches Herba (CHE) ถูกฉีดเข้าช่องท้องให้กับหนู หนูเพศเมียได้รับการดมยาสลบด้วย pentobarbital sodium (40 มก. กก.-1, ip) และรังไข่ของพวกมันถูกกำจัดออกทั้งสองข้าง หนูในกลุ่มที่ทำการทดลองหลอกได้รับการดมยาสลบ ผ่าช่องท้อง และเย็บแผลโดยไม่ต้องถอดรังไข่ออก หลังจากพักฟื้นจากการผ่าตัด 1 สัปดาห์ หนู OVX ถูกสุ่มแบ่งออกเป็นสามกลุ่ม และรับการรักษาด้วยปากเปล่าด้วย H2O (กลุ่ม OVX) หรือ CHE (100 หรือ 200 มก.-1 ครั้งต่อวัน) เป็นเวลา 3 เดือน กลุ่มที่ดำเนินการหลอก (n=8) ได้รับการรักษาด้วยปากเปล่าด้วย H2O หลังจาก 3 เดือน ความหนาแน่นของมวลกระดูกในร่างกายทั้งหมด (BMD) ปริมาณแร่ธาตุในกระดูก (BMC) ดัชนีชีวกลศาสตร์ของกระดูก ระดับแร่ธาตุในเลือด และการทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระในเลือดถูกตรวจสอบในหนูทดลองที่ได้รับการผ่าตัดหลอก ผ่ารังไข่ และสารสกัดจาก Cistanches Herba ผลการศึกษาพบว่า การรักษาด้วยสารสกัด Cistanches Herba ช่วยเพิ่มความหนาแน่นของแร่ธาตุในกระดูก (BMD) ปริมาณแร่ธาตุในกระดูก (BMC) ปริมาณสูงสุด การกระจัดที่โหลดสูงสุด ความเค้นที่โหลดสูงสุด โหลดที่เบรกอัตโนมัติ การกระจัดที่เบรกอัตโนมัติ และความเครียดที่ auto break และกิจกรรมของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระในเลือด ลดระดับ Ca, Zn และ Cu ในเลือดเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม OVX การทดลองนี้แสดงให้เห็นว่าการให้สารสกัด Cistanches Herba กับหนูที่ตัดรังไข่ช่วยลดการสูญเสียมวลกระดูกและป้องกันโรคกระดูกพรุน
คำสำคัญ:การตัดรังไข่; หนู; กระดูก; สารต้านอนุมูลอิสระ ซิสตันเชส เฮอร์บา
1. บทนำ
โรคกระดูกพรุนเป็นโรคที่เกิดจากความชราซึ่งเกี่ยวข้องกับการสูญเสียมวลกระดูกซึ่งมักเกิดขึ้นโดยไม่มีอาการใดๆ จนกระทั่งการเสื่อมสภาพของโครงสร้างทางจุลภาคมีความสำคัญมากจนเกิดการแตกหักของกระดูกได้อย่างสม่ำเสมอ ณ จุดที่มวลกระดูกลดลงต่ำกว่าที่จำเป็นสำหรับความสมบูรณ์ของกระดูก โรคกระดูกพรุนมีความสำคัญอย่างยิ่งในการดูแลสุขภาพ แม้ว่ามวลจะลดลง แต่กระดูกก็เป็นเรื่องปกติในแง่ของการทำให้เป็นแร่ แต่ในทางจุลกายวิภาค ความหนาของคอร์เทกซ์และจำนวนและขนาดของ trabeculae ของกระดูกเนื้อหยาบที่ลดลง [1–3] จะลดลง
มีการศึกษาเกี่ยวกับโรคนี้เป็นจำนวนมากในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา ข้อมูลที่สะสมได้บ่งชี้ว่าการสูญเสียเอสโตรเจนในวัยหมดประจำเดือนเป็นสาเหตุหลักที่ทำให้เกิดโรคเนื่องจากฮอร์โมนนี้เป็นตัวควบคุมเชิงลบหลักของกิจกรรมของ osteoclast [4–6] และ osteoclasts เป็นเซลล์หลักที่รับผิดชอบในการเปลี่ยนแปลงกระดูกในโรคกระดูกพรุน [7].
โรคกระดูกพรุนในวัยหมดประจำเดือนเป็นโรคกระดูกเมแทบอลิซึมที่พบบ่อยที่สุด โดยมีลักษณะเฉพาะโดยการสูญเสียเนื้อเยื่อกระดูกที่มีแร่ธาตุอย่างรวดเร็ว การหยุดชะงักของโครงสร้างกระดูก trabecular ของกระดูก และการเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติผลึกของแร่ธาตุที่สะสมซึ่งส่งผลให้โครงสร้างล้มเหลว (แตกหัก) ของ บริเวณที่มีกระดูกเป็นชิ้นๆ เช่น กระดูกสันหลัง สะโพก และปลายแขน [8–11] การขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนถือเป็นปัจจัยสำคัญของการสูญเสียกระดูกในสตรีวัยหมดประจำเดือน หนูและสุนัขที่ตัดรังไข่ได้ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางในแบบจำลองโรคกระดูกพรุน ในปี พ.ศ. 2539 มีรายงานผลของ ibandronate ต่อสุนัขที่ตัดรังไข่ [12]
Cistanches Herba (CH) พืชโฮโลปาราซิติกของ Cistanche deserticola YC Ma จัดเป็นสารปรับสภาพในยาแผนโบราณแบบตะวันออก และมักใช้รักษาอาการหลงลืม สูญเสียการได้ยิน ภาวะมีบุตรยาก และท้องผูกเรื้อรัง CH มีกิจกรรมทางเภสัชวิทยาต่างๆ รวมทั้งฤทธิ์ต้านการแข็งตัวของเลือด ต้านการอักเสบ และกระตุ้นภูมิคุ้มกัน [13,14] การศึกษาก่อนหน้านี้ได้รายงานว่า Cistanches Herba สามารถนำเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มกระดูก (BMSCs) ไปสู่การสร้างเซลล์สร้างกระดูก ซึ่งมีแนวโน้มที่ดีในการรักษาโรคกระดูกพรุนและการแตกหักของกระดูก [15] เฉินและคณะ [16] รายงานว่า พอลิแซ็กคาไรด์ Cistanches Herba อาจส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงของวัฏจักรเซลล์ไขกระดูกและการฟื้นตัวของการทำงานของเม็ดเลือดในไขกระดูกหนูโลหิตจางหดหู่ เร่งการสร้างเม็ดเลือดในสายพันธุ์ rubrum และสายพันธุ์มาโครนิวเคลียส
ในการศึกษานี้ ความหนาแน่นของมวลกระดูก (BMD) ปริมาณแร่ธาตุในกระดูก (BMC) ดัชนีชีวกลศาสตร์ของกระดูก ระดับแร่ธาตุในเลือด และกิจกรรมของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระในเลือดถูกตรวจสอบในหนูทดลองที่ทำศัลยกรรมหลอก ผ่าตัดรังไข่ และ Cistanches Herba ให้หนูทดลองเพื่อศึกษาผลของการรักษา ด้วยสารสกัด Cistanches Herba ด้านคุณภาพกระดูก
ยาจีนโบราณ Cistanches Herba extract (CHE)
2. วัสดุและวิธีการ
2.1. การเตรียมสารสกัดจาก Cistanches Herba Aqueous
Cistanches Herba ถูกเก็บรวบรวมจากทะเลทรายในลีก alxa ของเขตปกครองตนเอง Nei Monggol (มองโกเลียใน) ในปี 2010
สกัดก้านแห้งของ Cistanches Herba ด้วยน้ำกลั่นที่ 100 องศาเป็นเวลา 2 ชั่วโมง สารละลายถูกหมุนเหวี่ยงที่ 4000 รอบ/นาที เป็นเวลา 10 นาที สารตกค้างถูกกำจัดออกโดยการกรอง และสิ่งกรองที่รวมกันถูกระเหยโดยการให้ความร้อนเพื่อให้ได้ความเข้มข้นที่ต้องการ (2.1 ก. สารสกัดที่เทียบเท่าพืชแห้ง/มล.) ผลผลิตที่ได้คือ 13.7 เปอร์เซ็นต์ (w/w) สารสกัดที่เป็นน้ำถูกเก็บไว้ที่ 2-8 องศา
2.2. สัตว์
หนู Wistar เพศเมียสามสิบสองตัวอายุ 3 เดือนที่มีน้ำหนักระหว่าง 240 ถึง 270 กรัมในช่วงเริ่มต้นของการทดลองถูกนำมาใช้สำหรับการศึกษา พวกเขาได้รับการบำรุงรักษาภายใต้สภาวะห้องปฏิบัติการมาตรฐานด้วยวงจรแสงและความมืด 12 ชั่วโมงโดยสามารถเข้าถึงอาหารหนูในห้องปฏิบัติการมาตรฐานและน้ำประปาได้ฟรี
2.3. การทดลองกับสัตว์.
หนูเพศเมียได้รับการดมยาสลบด้วย pentobarbital sodium (40 มก. กก.-1, ip) และรังไข่ของพวกมันถูกกำจัดออกทั้งสองข้าง หนูในกลุ่มที่ทำการทดลองหลอกได้รับการดมยาสลบ ผ่าช่องท้อง และเย็บแผลโดยไม่ต้องถอดรังไข่ออก หลังจากพักฟื้นจากการผ่าตัด 1 สัปดาห์ หนู OVX จะถูกสุ่มแบ่งออกเป็นสามกลุ่ม (n=8 ในแต่ละกลุ่ม) และรับการรักษาด้วย H2O (กลุ่ม OVX), สารสกัดจาก Cistanches Herba (CHE) (100 หรือ 200 มก. กก.) -1 ทุกวัน) เป็นเวลา 3 เดือน กลุ่มที่ดำเนินการหลอก (n=8) ได้รับการรักษาด้วยปากเปล่าด้วย H2O
ในวันสุดท้ายของการศึกษา สัตว์เหล่านี้ได้รับการชั่งน้ำหนักและเสียสละ และเก็บตัวอย่างเลือดพร้อมกัน กระดูกโคนขาถูกผ่าและแบ่งเนื้อเยื่ออ่อนเพื่อวัดการทดสอบทางชีวกลศาสตร์
การทดลองทั้งหมดดำเนินการตามโปรโตคอลการวิจัยที่กำหนดโดยคณะกรรมการดูแลสัตว์ของจีน
2.4. การวัดความหนาแน่นของกระดูก
ปริมาณแร่ธาตุกระดูกต้นขา (BMC) และความหนาแน่นของกระดูก (BMD) ถูกกำหนดหาโดยใช้ Hologic QDR{{0}}W DXA เครื่องมือนี้ได้รับการดัดแปลงสำหรับโหมดความละเอียดสูงพิเศษด้วยระยะห่างบรรทัด 0.0254 ซม. ความละเอียด 0.0127 ซม. และคอลลิเมเตอร์ขนาดเส้นผ่านศูนย์กลาง 0.9 ซม. กระดูกถูกวางไว้ในจานเพาะเชื้อ เพื่อจำลองความหนาแน่นของเนื้อเยื่ออ่อนรอบๆ กระดูก ให้เทน้ำประปารอบๆ กระดูกเพื่อให้ได้ความลึก 1 ซม. ผลลัพธ์จะได้รับสำหรับ BMC และสำหรับพื้นที่ที่วัดได้ BMD ของพื้นที่นี้คำนวณโดย BMC หารด้วยพื้นที่ นอกจากผลลัพธ์ของกระดูกโคนขาทั้งหมดแล้ว ยังได้วิเคราะห์ส่วนปลายและส่วนกลางของกระดูกโคนขาเป็นอนุภูมิภาค [17]
2.5. การทดสอบทางชีวกลศาสตร์ของกระดูก
กระดูกโคนขาถูกเก็บไว้ที่ 4 องศา จนกระทั่งกำหนดความแรงในการแตกหักโดยใช้ 5-kN Flexure Fixture ที่กำหนดค่าไว้สำหรับการทดสอบการดัดงอสามจุดและติดเข้ากับเครื่องทดสอบอเนกประสงค์ของ Instron รุ่น 4502 ที่ติดตั้ง 10- โหลดเซลล์ kN (Instron, Canton, MA, USA) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [18] ความเร็วของครอสเฮดคือ 50 มม./นาที และอัตราการสุ่มตัวอย่างข้อมูลคือ 10 ตัวอย่าง/วินาที โหลดสูงสุด ความเค้นที่โหลดสูงสุด โหลดที่ความล้มเหลว และความเค้นที่ความล้มเหลวถูกกำหนดในกระดูกโคนขาโดยใช้ซอฟต์แวร์ Series IX, v 8.0800 (Instron)
2.6. การวิเคราะห์ทางชีวเคมี
ระดับ Ca, Zn และ Cu ในเลือดถูกวัดโดยอะตอมมิกดูดกลืนสเปกโตรโฟโตเมตรี
ตามวิธีการของคิงและอาร์มสตรอง [19] ทดสอบฤทธิ์ของอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส (ALP) โดยใช้ไดโซเดียม ฟีนิล ฟอสเฟตเป็นสารตั้งต้น สีที่พัฒนาขึ้นจะถูกอ่านที่ 510 นาโนเมตรในเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ UV-vis หลังจาก 10 นาที กิจกรรมของ ALP แสดงเป็น IU/L
ความเข้มข้นของ malondialchehyche ในเลือด (MDA) ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการที่อธิบายโดย Jain et al [20] ตามปฏิกิริยาของ TBA โดยสังเขป 0.2 มล. เม็ดเม็ดเลือดแดงหรือส่วนลอยเหนือตะกอนที่ได้จากเนื้อเยื่อ 0.8 มล. บัฟเฟอร์ฟอสเฟต (pH 7.4), 0.025 มล. BHT และ { {19}}.5 มล. 30 เปอร์เซ็นต์ TCA ถูกเติมลงในหลอดและผสม หลังจากบ่ม 2 ชั่วโมงที่ -20 องศา ของผสมจะถูกหมุนเหวี่ยง (4000× g) เป็นเวลา 15 นาที หลังจากนี้ นำส่วนลอยเหนือตะกอน 1 มล. และเติมไปยังแต่ละหลอด จากนั้น 0.075 มล. ของ 0.1 โมลาร์ EDTA และ
เพิ่ม 0.25 มล. ของ 1 เปอร์เซ็นต์ TBA หลอดเหล่านี้ที่มีฝาเกลียวเคลือบเทฟลอนถูกบ่มที่อุณหภูมิ 90 องศาในอ่างน้ำเป็นเวลา 15 นาที และเย็นลงจนถึงอุณหภูมิห้อง ความหนาแน่นของแสงถูกวัดที่ 532 สำหรับความเข้มข้นของ MDA ในเลือด
กิจกรรมของกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส (GSH-Px) ถูกกำหนดตามวิธีการของ Lawrence และ Burk [21] ของผสมการสอบวิเคราะห์ประกอบด้วย 2.0 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 75 มิลลิโมลาร์ (pH 7.0), 50 ไมโครลิตรของ 60 มิลลิโมลาร์ กลูตาไธโอน {{15} }.1 มล. ของ 30 หน่วย/มล. กลูตาไธโอน รีดักเตส, 0.1 มล. ของ 15 mM EDTA, 0.1 มล. ของ NADPH 3 มล. และปริมาณที่เหมาะสมของส่วนลอยเหนือเนื้อเยื่อจนถึงปริมาตรสุดท้าย 3.0 มล. . ปฏิกิริยาเริ่มต้นโดยการเติม 0.1 มล. ของ 7.5 มิลลิโมลาร์ H2O2 อัตราการเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงระหว่างการแปลง NADPH เป็น NADP plus ถูกบันทึกด้วยสเปกโตรโฟโตเมตริกที่ 340 นาโนเมตร เป็นเวลา 3 นาที การออกฤทธิ์ของ GSH-Px สำหรับเนื้อเยื่อถูกแสดงออกเป็นไมโครโมลของ NADPH ที่ออกซิไดซ์เป็น NADP บวกกับโปรตีนขั้นต่ำ-1 มก.−1
กิจกรรมของซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตส (SOD) ถูกกำหนดในเลือดตามวิธีการของซันและคณะ [22]. หลักการของวิธีการนี้อาศัยการยับยั้งการรีดิวซ์ของไนโตรบลู เตตราโซเลียม (NBT) โดยใช้ระบบแซนทีน-แซนทีนออกซิเดสเป็นเครื่องกำเนิดซูเปอร์ออกไซด์ กิจกรรมได้รับการประเมินใน supernatant ของ 10000 g ของสารสกัดเมทานอล/คลอโรฟอร์ม (5/3, v/v) ของเนื้อเยื่อโฮโมจิเนต (10 เปอร์เซ็นต์) SOD หนึ่งหน่วยถูกกำหนดให้เป็นปริมาณเอนไซม์ที่ก่อให้เกิดการยับยั้งร้อยละ 50 ในอัตราการลด NBT
กิจกรรม catalase (CAT) ถูกวัดโดยใช้วิธีของ Abei [23] ซีรัมถูกเติมไปยังคิวเวตต์ที่มี 2.89 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 50 มิลลิโมล/ลิตร (pH 7.0) ปฏิกิริยาเริ่มต้นโดยการเติม 0.1 มล. ของ 30 มิลลิโมล/ลิตร H2O2 ที่เตรียมใหม่เพื่อให้ปริมาตรสุดท้ายเป็น 3.0 มล. ที่ 25 องศา อัตราการสลายตัวของ H2O2 ถูกวัดที่ 240 นาโนเมตร เป็นเวลา 5 นาทีบนสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ CAT หนึ่งหน่วย (U) ถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการย่อยสลาย H2O2 1 นาโนโมลต่อนาที ที่ 25 องศาและ pH 7.8
2.7. การวิเคราะห์ทางสถิติ
ผลการทดลองแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD สำหรับสัตว์แปดตัวในแต่ละกลุ่ม พารามิเตอร์ทางชีวเคมีได้รับการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวของความแปรปรวน ตามด้วยการทดสอบการเปรียบเทียบหลายรายการของ Dunnett (DMCT) ค่า P ของ<0.05 was="" considered="" statistically="">
3. ผลลัพธ์
สัตว์สองตัวหมดอายุในระหว่างการศึกษา ดังนั้น ตัวเลขสำหรับกลุ่มที่สรุปการศึกษาคือ 8 ในการควบคุมหลอก; 7 ในกลุ่ม OVX; 7 ในกลุ่ม CHE-treatment (100 มก. กก.-1 ต่อวัน) และ 8 ในกลุ่ม CHE-treatment (200 มก. กก.-1 ต่อวัน) สองวันหลังจากการผ่าตัด ปริมาณอาหารและน้ำของหนูที่ได้รับน้อยกว่าก่อนการผ่าตัดเล็กน้อย ไม่มีสัตว์ที่ได้รับความทุกข์ทรมานจากการติดเชื้อและ anabiosis ไม่พบอาการข้างเคียงที่เห็นได้ชัดทางคลินิกในหนู
ก่อนการผ่าตัด ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญ (p > {{0}}.01) ในน้ำหนักตัวของหนูระหว่างกลุ่ม น้ำหนักตัวของกลุ่ม OVX อย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.01)="" ต่ำกว่ากลุ่มหลอก="" (ตารางที่="" 1)="" การให้สารสกัด="" cistanches="" herba="" ในขนาด="" 100="" และ="" 200="" มก./กก.="" ต่อวันอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.05)="" ทำให้น้ำหนักตัวของหนูเพิ่มขึ้นในกลุ่มที่ได้รับ="" che="" (100="" และ="" 200="" มก./กก.="" ต่อวัน)="" ข้อมูลที่ได้จากสัตว์แสดงให้เห็นว่ามีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติระหว่าง="" bmd="" และ="" bmc="" ของกลุ่ม="" ovx="" และกลุ่มควบคุมหลอก="" (p="">< 0.01)="" ตามที่คาดไว้="" การใช้สารสกัด="" cistanches="" herba="" ในขนาด="" 200="" มก./กก.="" ทำให้="" bmd="" และ="" bmc="" ของกลุ่มที่ได้รับ="" che="" เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.05;="" p=""><>
4. การอภิปราย
โรคกระดูกพรุนเป็นหนึ่งในความผิดปกติที่พบบ่อยที่สุดที่เกี่ยวข้องกับการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนและอายุ วัยหมดประจำเดือนส่งผลให้มีการหมุนเวียนของกระดูกเพิ่มขึ้น ความไม่สมดุลระหว่างการสร้างกระดูกและการสลายของกระดูก และการสูญเสียมวลกระดูกสุทธิ การสูญเสียกระดูกที่เกิดจากการขาดฮอร์โมนเอสโตรเจนมีสาเหตุหลักมาจากการเพิ่มขึ้นของการสลายของกระดูก osteoclastic ทั้งในมนุษย์และสัตว์ทดลอง [24]
แม้ว่าโรคกระดูกพรุนจะส่งผลกระทบต่อทั้งชายและหญิงที่มีอายุมากกว่า แต่สตรีวัยหมดประจำเดือนก็เป็นจุดสนใจหลักของโรคกระดูกพรุน [25,26] การขาดฮอร์โมนเพศหญิงอย่างมากเป็นปัจจัยที่สำคัญที่สุดในการเกิดโรคกระดูกพรุนในสตรีวัยหมดประจำเดือน แบบจำลองหนู OVX มักใช้ในการวิจัยเกี่ยวกับโรคกระดูกพรุนในวัยหมดประจำเดือน [27,28] ซึ่งการตัดรังไข่ส่งผลให้มีการสลายของกระดูกมากเกินไปในช่วงเริ่มต้นและทำให้กระดูกสูญเสีย การผ่าตัด OVX ทำให้น้ำหนักตัวเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งอาจเป็นแนวทางในการประเมินความสำเร็จของการผ่าตัด [29] ในตอนท้ายของการศึกษานี้ น้ำหนักตัวของกลุ่ม OVX ลดลงอย่างเห็นได้ชัดเมื่อเทียบกับกลุ่มหลอกลวง และการรักษาด้วยสารสกัด Cistanches Herba ป้องกันการลดลงเหล่านี้ได้อย่างเต็มที่ เราคิดว่า OVX ทำให้เกิดความรู้สึกไม่สบายทางสรีรวิทยาอย่างรุนแรงซึ่งส่งผลต่อการบริโภคอาหารของหนู ต่อมาน้ำหนักตัวของกลุ่ม OVX ลดลงอย่างเห็นได้ชัด
ความหนาแน่นของแร่กระดูกได้รับการอธิบายว่าเป็นเพียงการวัดความแข็งแรงของกระดูกแทน [30]; อย่างไรก็ตาม คุณสมบัติของไมโครสถาปัตยกรรมเป็นตัวบ่งชี้ใหม่สำหรับการประเมินผลกระทบที่แท้จริงของการรักษาต่อคุณภาพของกระดูก trabecular แม้ว่ามวลกระดูกต่ำเป็นปัจจัยเสี่ยงหลักในการแตกหัก [31] การรักษาโครงสร้างกระดูก trabecular มีส่วนสำคัญต่อความแข็งแรงของกระดูกและอาจลดความเสี่ยงการแตกหักเกินกว่า BMD และ BMC ดังที่แสดงโดยการศึกษาจำนวนหนึ่งที่รายงานความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดระหว่างโครงสร้างจุลภาค คุณสมบัติและความแข็งแรงทางชีวกลศาสตร์ของกระดูก [32,33] ในงานนี้ พบว่า BMD และ BMC มีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มหลอกและตัดรังไข่ การรักษาด้วยสารสกัด Cistanches Herba ช่วยเพิ่ม BMD และ BMC ในหนู OVX ได้อย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้ การบริหารสารสกัด Cistanches Herba ยังคงเพิ่มปริมาณสูงสุดตามขนาดยาอย่างมีนัยสำคัญ การกระจัดที่โหลดสูงสุด ความเค้นที่โหลดสูงสุด โหลดที่จุดตัดอัตโนมัติ การกระจัดที่จุดหยุดอัตโนมัติ และความเค้นที่กลุ่มที่บำบัดด้วย CHE แบบแตกอัตโนมัติ เมื่อเทียบกับกลุ่ม OVX ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่ากระดูกโคนขาจากหนูที่เลี้ยงด้วยสารสกัดจาก Cistanches Herba มีภาระสูงกว่าเมื่อล้มเหลว และอาจต้านทานการแตกหักของความเครียดได้มากกว่า นอกจากนี้ หนูในกลุ่ม OVX มีระดับ Ca, Zn และ Cu ในเลือดสูงกว่าในกลุ่มหลอก การใช้สารสกัด Cistanches Herba ทำให้ระดับ Ca, Zn และ Cu ในเลือดลดลงในหนู OVX
ความคิดที่ว่าสถานะออกซิเดชันมีความสำคัญในโรคกระดูกพรุนนั้นสอดคล้องกับความสัมพันธ์ทางระบาดวิทยาที่รุนแรงระหว่างโรคกระดูกพรุนและหลอดเลือด ซึ่งเป็นโรคที่ความเครียดจากสารออกซิแดนท์มีบทบาทสำคัญ นอกจากนี้ เมื่อเร็ว ๆ นี้ พบว่ามีความสัมพันธ์ในสตรีระหว่างความเครียดจากออกซิเดชัน (วัดโดยไบโอมาร์คเกอร์ของความเครียดออกซิเดชัน 8-iso-PGF2- ) [34] ระดับสารต้านอนุมูลอิสระ [35] และ ความหนาแน่นของกระดูก การศึกษาทางคลินิกที่ตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างอาหารและ/หรืออาหารเสริมแอสคอร์เบตและมวลกระดูกในมนุษย์ยังชี้ให้เห็นถึงความเกี่ยวข้องกับมวลกระดูกที่เพิ่มขึ้นอีกด้วย [36]
เนื่องจาก MDA มีปฏิกิริยาต่อหมู่อะมิโนสูง จึงยับยั้งการสังเคราะห์กรดนิวคลีอิกและโปรตีน และยังปิดการทำงานของเอนไซม์อีกด้วย [37,38] ดังนั้น การลดลงของเอ็นไซม์ต้านอนุมูลอิสระที่โคนขาที่สังเกตได้หลังจาก OVX อาจเกิดจากลิพิดเปอร์ออกซิเดชันที่เพิ่มขึ้น เอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระมีส่วนเกี่ยวข้องกับระบบป้องกันเนื้อเยื่อที่เกิดจากอนุมูลอิสระหรือความเสียหายของเซลล์ พวกมันเผาผลาญอนุมูลอิสระหรือตัวกลางออกซิเจนปฏิกิริยาไปเป็นผลิตภัณฑ์ที่ไม่ใช่อนุมูลอิสระ เอนไซม์เหล่านี้รวมถึงตระกูลของเอนไซม์ที่ขึ้นกับกลูตาไธโอน [39] ในการศึกษานี้ เรารายงานการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในระดับของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ กล่าวคือ SOD, GSH-Px, CAT ในเลือดของหนูที่ตัดรังไข่ การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าการขาดฮอร์โมนในรังไข่มีความสัมพันธ์กับความล้มเหลวในการต่อสู้กับความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน การใช้ Cistanches Herba สกัด SOD, GSH-Px และกิจกรรม CAT ของเลือดที่เพิ่มขึ้นโดยขึ้นกับขนาดยาอย่างมีนัยสำคัญในหนู OVX ผลลัพธ์เหล่านี้ดูเหมือนจะบ่งชี้ถึงผลการป้องกันที่ดีขึ้นของสารสกัด Cistanches Herba ต่อความเครียดที่เกิดจากออกซิเดชันระหว่าง OVX
โดยสรุป สารสกัด Cistanches Herba มีประสิทธิภาพในการป้องกันการสูญเสียมวลกระดูกที่เกิดจากการขาดฮอร์โมนในรังไข่ โดยดูจากค่า BMD ของกระดูกโคนขา ค่า BMC และระดับ Ca, Zn และ Cu ในเลือด เนื่องจากโรคกระดูกพรุนมีความเกี่ยวข้องกับความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน การศึกษาในลักษณะนี้จึงเป็นเครื่องยืนยันถึงความสำคัญของคุณค่าการรักษาของสารต้านอนุมูลอิสระ เราคิดว่าสารสกัด Cistanches Herba ช่วยเพิ่มคุณภาพของกระดูกได้ส่วนหนึ่งโดยการเพิ่มการทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระของหนู OVX และลดองค์ประกอบของแร่ธาตุในกระดูก
สารสกัดจากสมุนไพร Cistanches Herba ป้องกันการสูญเสียมวลกระดูก
อ้างอิง
1. Canalis, E.; Giustina, A.; Bilezikian, JP กลไกของการรักษา anabolic สำหรับโรคกระดูกพรุน น. อังกฤษ. เจ เมด 2550, 357, 905–916.
2. Heaney, RP; เรคเกอร์, อาร์อาร์; Saville, PD วัยหมดประจำเดือนเปลี่ยนแปลงในการเปลี่ยนแปลงกระดูก เจแล็บ. คลินิก เมดิ. 2521, 92, 964–970.
3. แมคนามารา LM; เอเดอร์วีน, AGH; ลียง, CG; ราคา, ค.; เชฟเฟอร์ MB; Weinans, H.; Prendergast, PJ Strength ของเนื้อเยื่อกระดูกเชิงกรานจากหนูปกติ ตัดรังไข่ และให้ยารักษาตลอดอายุขัย กระดูก 2006, 39, 392–400
4. คอมป์สตัน การบำบัดทดแทนฮอร์โมน JE คลินิก รูมาตอล 1997, 11, 583–596.
5. Meiner, SE โรคกระดูกพรุนในแนวนอนที่กำลังขยายตัว: ตัวเลือกการรักษาในปัจจุบัน โฆษณา พยาบาลวิชาชีพ 1999, 7, 26–31.
6. อูบิน เจ; Bonnelye, E. Osteoprotegerin และแกนด์ของมัน: กระบวนทัศน์ใหม่สำหรับการควบคุม osteoclastogenesis และการสลายของกระดูก โรคกระดูกพรุน อินเตอร์ 2000, 11, 905–913.
7. Roodman, GD ความก้าวหน้าทางชีววิทยากระดูก: The osteoclast เอนโดร. รายได้ 1996, 17, 308–332.
8. เกาลัด CH, III. การรักษาด้วยยา: Calcitonin, bisphosphonates และ anabolic steroids ในโรคกระดูกพรุน: สาเหตุ การวินิจฉัย และการจัดการ; Riggs, BL, Melton, LJ, III, Eds.; ลิปพินคอตต์-เรเวน: ฟิลาเดลเฟีย รัฐเพนซิลเวเนีย สหรัฐอเมริกา ปี 2538
9. กวน Q.-M.; วู, ว.; หลี่ Y.-X.; ไค, Q.-R. ความแปรปรวนของปริมาณอิคาริอินและฟลาโวนอยด์ของสายพันธุ์ Barrenwort เจ เมด พืช Res. 2010, 4, 1176–1181.
10. ตู่ XG; แพน HZ; จาง CY; จาง HY; หลิว HM; เฉิน จี; Zeng, XY สารสกัดจาก Zingiber officinale ปรับภูมิคุ้มกันที่เกิดจากรังสีเอกซ์ในหนูทดลอง เจ เมด พืช Res. 2010, 4, 1647–1655.
11. Paschalis, EP; เบตต์, F.; ดิคาร์โล อี.; Mendelsohn, R.; Boskey, AL FTIR การวิเคราะห์ด้วยกล้องจุลทรรศน์ของเนื้อเยื่ออุ้งเชิงกรานของมนุษย์จากกระดูกพรุนที่ไม่ได้รับการรักษา แคลซิฟ ทิชชู่ อินเตอร์ 1997, 61, 487–492.
12. Motoie, H.; Kanoh, H.; โอกาตะ เอส.; คาวามูกิ, K.; ชิกามะ, เอช.; Fujikura, T. การป้องกันการสูญเสียมวลกระดูกโดย bisphosphonate YM175 ในสุนัขที่ตัดรังไข่ด้วยแคลเซียมในอาหาร ญ. เจ. ฟาร์มาคอล. 2539, 71, 239–246.
13. หลิน LW; Hsieh มอนแทนา; ไจ่, เอฟเอช; วัง WH; Wu, CR ฤทธิ์ต้านอาการเจ็บปวดและการอักเสบที่เกิดจาก Cistanche Deserticola ในสัตว์ฟันแทะ เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 2002, 83, 177–182.
14. วู XM; เกา XM; จิม, KW; Tu, PF อะราบิโนกาแลคแทนที่แยกได้จากลำต้นของ Cistanche deserticola ทำให้เกิดการแพร่กระจายของเซลล์เม็ดเลือดขาวที่เพาะเลี้ยง อินเตอร์ เจ. ไบโอล. แมคโครโมล 2548, 37, 278–282.
15. เซง เจซี; แฟน YG; หลิว เจอาร์; เซง วายอาร์; ยี่, CZ; Liang Y. การศึกษาเชิงทดลองเกี่ยวกับการสร้างความแตกต่างของทิศทางของเซลล์ต้นกำเนิดจากเยื่อหุ้มเซลล์ (BMSCs) กับเซลล์สร้างกระดูกซึ่งนำโดยซิสแทนเชเดซิโกลาที่มีซีรัม Zhongguo Gu Shang 2010, 23, 606–608.
16. เฉิน Z.-W.; Zhu, B.-D.; Xu H.-Y. การศึกษาทดลองของ polysaccharides cistanche ที่มีชีวิตในทะเลทรายต่อการสร้างเม็ดเลือดที่มีการควบคุมในหนูที่เป็นโรคโลหิตจางจากไขกระดูก คาง. โค้ง. ตราด. คาง. เมดิ. 2550, 25, 1473–1474.
17. แพรกษา, ก.; อ๋อ เจเค; เฉิน, ม.-ม.; คาสโตร-มากาน่า, M.; เหลียง, CT; Aloia, JF ผลของโกรทฮอร์โมนและเทสโทสเตอโรนต่อการสร้างกระดูกคอร์เทกซ์และความหนาแน่นของกระดูกในหนูที่ตัดรังไข่ในวัยชรา กระดูก 1999, 24, 491–497
18. McClung, เจพี; สตาห์ล CH; มาร์ชิเตลลี, แอลเจ; โมราเลส-มาร์ติเนซ, N.; มากิน, กม.; หนุ่มเอเจ; Scrimgeour, AG ผลของไฟเตสในอาหารต่อการเพิ่มของน้ำหนักตัว องค์ประกอบของร่างกาย และชีวกลศาสตร์ของกระดูกในหนูที่กำลังเติบโตที่ได้รับอาหารที่มีสังกะสีต่ำ เจ. นุ. ไบโอเคมี. 2549, 170, 190–196.
19. คิง อีเจ; Armstrong, AR วิธีที่สะดวกสำหรับการพิจารณากิจกรรมของเซรั่มและน้ำดีฟอสฟาเตส สามารถ. เมดิ. รศ. จ. 1934, 31, 376–381.
20. เชน เอสเค; McVie, อาร์.; ดูเอตต์ เจ.; Herbst, JJ Erythrocyte membrane lipid peroxidation และ glycosylated hemoglobin ในผู้ป่วยเบาหวาน โรคเบาหวาน 1989, 38, 1539–1543
21. ลอว์เรนซ์ RA; Burk, RF Glutathione peroxidase ออกฤทธิ์ในตับหนูที่ขาดซีลีเนียม ไบโอเคมี. ชีวฟิสิกส์ ความละเอียด คอมมูนิตี้ 2519, 71, 952–958.
22. ซัน, วาย.; โอเบอร์ลีย์, LW; Ying, L. วิธีง่ายๆสำหรับการทดสอบทางคลินิกของ superoxide dismutase คลินิก เคมี. 2531, 34, 497–500.
23. Abei, H. Catalase ในหลอดทดลอง วิธีการ เอนไซม์. 2531, 10, 121–126.
24. Mozaffari, Z.; อาซาร์เนีย, ม.; Abdolhamid Angaji, S. การประเมินความเป็นพิษของสารสกัดน้ำใบ Trigonella foenum-graecum ต่อการพัฒนาเนื้อเยื่อกระดูกยาวในทารกในครรภ์ของหนู เจ เมด พืช Res. 2010, 4, 1148–1155.
25. บวนกามิโน เอ็มซีเอ; Sikon, อลาบาม่า; เชน, A.; Thacker, HL การศึกษาเชิงสังเกตเกี่ยวกับการปฏิบัติตามแนวทางการรักษาภาวะกระดูกพรุน J. Women's Health 2009, 18, 873–881.
26. ชมิตต์ มินนิโซตา; ชมิตต์ เจ.; Dören, M. บทบาทของการออกกำลังกายในการป้องกันโรคกระดูกพรุนในสตรีวัยหมดประจำเดือน—การปรับปรุง มาตูริทัส 2009, 63, 34–38.
27. เลโลวาส พีพี; แซนโทส TT; โทมา เซาท์อีสต์; เนื้อเพลง GP; Dontasi, IA หนูทดลองเป็นสัตว์ทดลองเพื่อการวิจัยโรคกระดูกพรุน คอมพ์ เมดิ. 2551, 58, 424–430.
28. เอ็นแคนโก DM; โพห์ล CH; ฟาน วิค, PWJ; Kock, JLF ยาต้านการอักเสบที่ไม่ใช่สเตียรอยด์ (NSAIDs) ยับยั้งการเจริญเติบโตของเชื้อโรคยีสต์ อาฟร์ เจ. ไมโครไบโอล. ความละเอียด 2011, 5, 1123–1125.
29. Fazliana, M.; นาไซมูน WMW; Gu, HF; Ostenson สารสกัดจาก CG Labisia pumila ควบคุมน้ำหนักตัวและ adipokines ในหนูที่ตัดรังไข่ มาตูริทัส 2009, 62, 91–97
30. บูริน ส.; อัมมาน, พี.; บองชูร์, เจพี; Rizzoli, R. การฟื้นตัวของความหนาแน่นและความแข็งแรงของกระดูกหน้าแข้งส่วนต้น แต่ไม่ใช่โครงสร้างกระดูกแบบแคนเซิล หลังจากการรักษาด้วยยาบิสฟอสโฟเนตในระยะยาวหรือการบำบัดด้วยโมดูเลเตอร์ตัวรับเอสโตรเจนแบบเลือกเฟ้นในหนูที่มีอายุมาก กระดูก 2002, 30, 195–200
31. โบราห์ บี.; ดูเฟรน, TE; Chmielewski, เพนซิลเวเนีย; กรอส, จีเจ; เพรงเกอร์ เอ็มซี; Phipps, RJ Risedronate รักษาสถาปัตยกรรม trabecular และเพิ่มความแข็งแรงของกระดูกในกระดูกของ minipigs ที่ตัดรังไข่โดยวัดโดยการตรวจเอกซเรย์ไมโครคอมพิวเตอร์สามมิติ เจ. โบน ไมเนอร์. ความละเอียด 2545, 17, 1139–1147.
32. มุลเลอร์, อาร์.; ฮันนัน, ม.; สมิธ, ซิกเนเจอร์; Bauss, F. Intermittent ibandronate ช่วยรักษาคุณภาพของกระดูกและความแข็งแรงของกระดูกในกระดูกสันหลังส่วนเอวหลังการรักษา 16 เดือนในลิงแสมที่ตัดรังไข่ เจ. โบน ไมเนอร์. ความละเอียด 2004, 19, 1787–1796.
33. เลน NE; คูเมอร์ เจแอล; Majumdar, S.; ข่าน, ม.; ลอตซ์ เจ.; สตีเวนส์ RE; ไคลน์อาร์.; Phelps, KV ผลของเอสโตรเจนคอนจูเกตสังเคราะห์ a (Cenestin) ต่อโครงสร้างและความแข็งแรงของกระดูก trabecular ในแบบจำลองหนูที่ตัดรังไข่ โรคกระดูกพรุน 2545, 13, 816–823.
34. Basu, S.; มิคาเอลสัน, เค; โอลอฟสัน, เอช.; Johansson, S.; Melhus, H. ความสัมพันธ์ระหว่างความเครียดออกซิเดชันและความหนาแน่นของกระดูก ไบโอเคมี. ชีวฟิสิกส์ ความละเอียด คอมมูนิตี้ 2001, 288, 275–279.
35. แม็กจิโอ, ดี.; บาราบานี, ม.; Pierandrei, M.; Cristina Polidori, M.; Catani, ม.; เมค็อกซี, พี.; Senin, U.; แปซิฟิค, อาร์.; Cherubini, A. การลดลงของสารต้านอนุมูลอิสระในพลาสมาในสตรีที่เป็นโรคกระดูกพรุนสูงอายุ: ผลการศึกษาแบบภาคตัดขวาง เจ. คลิน. เอ็นโดครินอล เมตาบ 2546, 88, 1523–1527.
36. มอร์ตัน ดีเจ; บาร์เร็ตต์-คอนเนอร์ เอล; ชไนเดอร์ การใช้อาหารเสริมวิตามินซี DL และความหนาแน่นของกระดูกในสตรีวัยหมดประจำเดือน เจ. โบน ไมเนอร์. ความละเอียด 2001, 16, 135–140.
37. นก RP; Draper, HH ผลของ malonaldehyde และ acetaldehyde ต่อเซลล์ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่เพาะเลี้ยง: สัณฐานวิทยาการเจริญเติบโตและการสังเคราะห์โมเลกุลขนาดใหญ่ เจ. สิ่งแวดล้อม. สุขภาพ 1980, 6, 811–823
38. Abdelhalim, MAK อิทธิพลที่อาจเกิดขึ้นของความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากอาหารที่มีคอเลสเตอรอลสูงต่อองค์ประกอบและคุณสมบัติของเซลล์เม็ดเลือดแดงในกระต่าย อาฟร์ เจ. ไมโครไบโอล. ความละเอียด 2010, 4, 836–843.
39. Chauriere, J.; Ferrari-Illiou, R. สารต้านอนุมูลอิสระภายในเซลล์ตั้งแต่กลไกทางเคมีไปจนถึงกลไกทางชีวเคมี เคมีอาหาร. ท็อกซิคอล 2542, 37, 949–962.
