ความแตกต่างในองค์ประกอบและประสิทธิภาพทางยาของผลิตภัณฑ์ดิบและผลิตภัณฑ์แปรรูปด้วยไอน้ำไวน์จาก Cistanches Herba

เชิงนามธรรม:

วัตถุประสงค์เพื่อเปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลงองค์ประกอบทางเคมีและประสิทธิภาพทางยาของ Roucongrong (Cistanches Herba) ก่อนและหลังการแปรรูป เพื่อชี้แจงหลักการของการตุ๋นด้วยไวน์

วิธีการ LC-MS ถูกนำไปใช้เพื่อระบุประเภทขององค์ประกอบทางเคมีก่อนและหลังการผสม Cistanches Herba รวมกับการวิเคราะห์ทางสถิติหลายตัวแปรเพื่อค้นหาองค์ประกอบที่แตกต่างกันก่อนและหลังการตุ๋นกับไวน์ ความแตกต่างของประสิทธิภาพได้รับการพิสูจน์โดยแบบจำลองหนูของการขาดคอร์ติโซนไตหยางที่เติมไฮโดรเจน

ผลลัพธ์มีการระบุส่วนประกอบทางเคมีทั้งหมด 45 รายการตัวอย่าง Cistanches Herba- สารประกอบมีส่วนทำให้เกิดความแตกต่างระหว่างCistanches Herba และ Cistanches Herba ตุ๋นไวน์เป็นเอชินาโคไซด์, เวอร์บาสโคไซด์, ไอโซแอคทีโอไซด์และทูบูโลไซด์บี; สารสกัดฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ทั้งหมดจาก Cistanches Herba มีผลในการปรับปรุงแบบจำลองหนูที่มีภาวะขาดไตได้ดีกว่า Cistanches Herba ที่ตุ๋นในไวน์ สรุป องค์ประกอบของ Cistanche เปลี่ยนไปหลังจากตุ๋นกับไวน์ และมีผลดีต่อภาวะขาดหยางในไตมากขึ้น ส่วนผสมของการเปลี่ยนแปลงจาก Cistanches Herbato ที่ตุ๋นไวน์ Cistanches Herba อาจเป็นส่วนผสมออกฤทธิ์ที่เสริมสร้างไตและสนับสนุนหยาง

คำสำคัญ: ซิแทนเชส เฮอร์บา; Cistanches Herba ตุ๋นไวน์;การขาดไตหยาง;เอชินาโคไซด์;เวอร์บาสโคไซด์- ไอโซแอคทีโอไซด์;ทูบูโลไซด์ บี

ขายสมุนไพร CISTANCHE คุณภาพสูง

บริการสนับสนุนของ Wecistanche

อีเมล:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/โทรศัพท์:+86 15292862950

เป็นที่รู้จักในชื่อ "โสม" และส่วนใหญ่จำหน่ายในมองโกเลียใน หนิงเซี่ย (อาซูฉี) กานซู (ฉางหม่า) ซินเจียง และภูมิภาคอื่น ๆ [1] Cistanche มีรสอุ่น มีรสหวานและเค็ม เข้าสู่เส้นลมปราณของไตและลำไส้ใหญ่ มีฤทธิ์ในการบำรุงตับและไต ให้ประโยชน์ต่อแก่นแท้และเลือด ทำให้ลำไส้ชุ่มชื้น และบรรเทาอาการท้องผูก สามารถใช้รักษาอาการขาดหยางในไต ความอ่อนแอและภาวะมีบุตรยาก ปวดเอวและเข่า กล้ามเนื้อและกระดูกอ่อนแรง ลำไส้แห้ง และท้องผูก [2] การวิจัยสมัยใหม่แสดงให้เห็นว่าลำต้นที่มีเนื้อและมีใบเกล็ดของ Cistanche ส่วนใหญ่มีส่วนประกอบทางเคมีหลายชนิด เช่น ฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์, ไซโคลเพนเทนอีเทอร์เทอร์พีน และไกลโคไซด์, ลิกแนน, น้ำตาล ฯลฯ [3] และมีผลทางเภสัชวิทยาหลายอย่าง เช่นต่อต้านริ้วรอย,สารต้านอนุมูลอิสระ,ต่อต้านภาวะสมองเสื่อม,ต่อต้านความเมื่อยล้าและทำให้ลำไส้ชุ่มชื้นและบรรเทาอาการท้องผูก [4]

หลังจากเคี่ยวกับไวน์แล้ว Cistanche จะช่วยบำรุงไตและเสริมหยางของ Cistanche หลักการประมวลผลไม่ได้รับการอธิบายอย่างชัดเจน ฟาน ย่านัน และคณะ [5-7] ศึกษาผลของ Cistanche ต่อการถ่ายอุจจาระของหนู การทำงานของระบบภูมิคุ้มกัน สารสื่อประสาทในลำไส้ และการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องก่อนและหลังการประมวลผล ดาและคณะ ใช้อิทธิพลของฟีนิลเอธานอลไกลโคไซด์ก่อนและหลังการประมวลผลเพื่ออธิบายหลักการประมวลผล จางเชา และคณะ [8] ใช้การเปลี่ยนแปลงเนื้อหาของฟีนิลเอทานอลไกลโคไซด์ก่อนและหลังการประมวลผลเพื่ออธิบายหลักการประมวลผล จาง ซูหยุน และคณะ [9] ใช้การเปลี่ยนแปลงในเนื้อหาของเบทาอีนก่อนและหลังการประมวลผลเพื่ออธิบายผลกระทบของการประมวลผลต่อ Cistanche วรรณกรรมที่มีอยู่เกี่ยวกับการประมวลผลของ Cistanche มุ่งเน้นไปที่เภสัชวิทยาเป็นหลัก และการวิจัยเกี่ยวกับส่วนประกอบยังมุ่งเน้นไปที่การเปลี่ยนแปลงในเนื้อหาของส่วนประกอบเฉพาะ โดยขาดการศึกษาอย่างเป็นระบบเกี่ยวกับความแตกต่างของส่วนประกอบ การทดลองนี้ใช้เทคโนโลยีโครมาโทกราฟี-แมสสเปกโตรเมทรีของเหลว (LC-MS) ร่วมกับการวิเคราะห์ทางสถิติหลายตัวแปรเพื่อระบุองค์ประกอบทางเคมีใน Cistanche เพื่อค้นหาเครื่องหมายความแตกต่างระหว่าง Cistanche ดิบและผลิตภัณฑ์ตุ๋นไวน์ และเพื่อศึกษาความแตกต่างในประสิทธิภาพของ Cistanche ดิบและผลิตภัณฑ์ตุ๋นไวน์ผ่านแบบจำลองหนูของการขาดยางไตที่เกิดจากไฮโดรคอร์ติโซน เพื่ออธิบายพื้นฐานที่เป็นสาระสำคัญของCistanche ช่วยบำรุงไตและส่งเสริมหยางและหลักการประมวลผลของ Cistanche ตุ๋นไวน์

ขายสมุนไพร CISTANCHE คุณภาพสูง

1 วัสดุ

1.1 เครื่องมือ

Ultimate 3000 UPLC-LTQ Orbitrap XL สนามไฟฟ้าสถิตดักจับไอออนที่มีความละเอียดสูง (Thermo Fisher Scientific, สหรัฐอเมริกา), เวิร์กสเตชัน Theraio Xcaliber; เครื่องชั่งอิเล็กทรอนิกส์ BT125D 1/100000 (ระบบเครื่องมือ Sartorius ประเทศเยอรมนี); เครื่องทำความสะอาดอัลตราโซนิก CNC KQ500DE (Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.); เครื่องกระจายความเร็วสูง XHF-D (Guangzhou Hu Ruiming Instrument Co., Ltd.); เครื่องอ่านไมโครเพลท Multiskan FC (Thermo Scientific); เครื่องหมุนเหวี่ยงความเร็วสูง HC-3518 (Anhui Zhongke Zhongjia Scientific Instrument Co., Ltd.); BW-YLS-1เครื่องบันทึกกิจกรรมอาสาสมัครหนูมัลติฟังก์ชั่น B (Shanghai Ruanlong Technology Development Co., Ltd.)

1.2 ยาเสพติด

เมทานอลเกรดแมสสเปกโตรเมตรี (ฟิชเชอร์); กรดฟอร์มิกเกรดแมสสเปกโตรเมทรี (เศษส่วนมวล 99%, ซิกมาอัลดริช); น้ำ (น้ำกลั่นของวัตสัน); ยา Jinkui Shenqi (Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd. โรงงานผลิตยา, หมายเลขชุด 1701653); เกลือโซเดียมไฮโดรคอร์ติโซนซัคซิเนต (Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., หมายเลขแบทช์ 011705067); ชุดซุปเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเตส (SOD) (หมายเลขชุด 20170115) และชุด malondialdehyde (MDA) (หมายเลขชุด 20170117) ถูกซื้อจาก Nanjing Jiancheng Biotechnology Co., Ltd.; ตรวจสอบฮอร์โมนเทสโทสเทอโรน (T) และเอสตราไดออล (E2) ที่ศูนย์ตรวจสอบคุณภาพชิงเต่า Kechuang และครีเอตินีน (CREA) และยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN) ถูกกำหนดที่ศูนย์วิเคราะห์และทดสอบของมหาวิทยาลัยการแพทย์มองโกเลียใน

1.3 สัตว์

หนู SD เพศผู้ 100 ตัว น้ำหนัก 180-200 กรัม ถูกซื้อจากฟาร์มสัตว์ทดลอง Xinglong ในเขต Haidian ปักกิ่ง หมายเลขใบอนุญาต: SCXK (ปักกิ่ง) 2016-0003 การทดลองกับสัตว์นี้ได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมของมหาวิทยาลัยการแพทย์แผนจีนปักกิ่ง เลขที่จริยธรรม: BUCM-4-2022091301-3095

1.4 ตัวอย่าง

Cistanche Deserticola จำนวน 6 รุ่นได้รับการระบุว่าเป็นของแท้โดยศาสตราจารย์ Li Xiangri จาก School of Chinese Medicine มหาวิทยาลัย Beijing University of Chinese Medicine และได้มาจากลำต้นเนื้อแห้งพร้อมใบเกล็ดของ Cistanche Deserticola YC Ma ซึ่งเป็นพืชในวงศ์ Orobanchaceae ข้อมูลโดยละเอียดเกี่ยวกับตัวอย่างแสดงไว้ในตารางที่ 1

ตารางที่ 1 เอกสารข้อมูลตัวอย่าง Cistanches Herba

2 วิธีการ

2.1 การเตรียมตัวอย่าง

2.1.1 การเตรียมวัตถุดิบ นำ Cistanche Deserticola ที่สะอาด นำมาทำให้นิ่ม หั่นเป็นชิ้นหนาๆ แล้วตากให้แห้ง

2.1.2 การเตรียมผลิตภัณฑ์ตุ๋นไวน์

นำ Cistanche Deserticola ชิ้น 100 กรัม เติมไวน์ข้าว 30 มล. ผสมให้เข้ากัน และเคี่ยวจนไวน์ดูดซึม ตุ๋นในน้ำเป็นเวลา 12 ชั่วโมง นำออกมาพักให้เย็นเล็กน้อย แล้วเช็ดให้แห้ง ดูรูปที่ 1 สำหรับตัวอย่าง Cistanche Deserticola ดิบและ Cistanche Deserticola ตุ๋นไวน์

2.2 การศึกษาความแตกต่างของส่วนประกอบของ Cistanche Deserticola ก่อนและหลังการตุ๋นในไวน์

2.2.1 การเตรียมสารละลาย

นำผงตัวอย่างแห้งประมาณ {{0}.2 กรัม (ผ่านตะแกรงตาข่าย 65-) ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ ใส่ในขวดวัดปริมาตรสีน้ำตาลขนาด 50 มล. เติมเมทานอล 50% 25 มล. สารละลายน้ำ ปิดฝาให้แน่น ชั่งน้ำหนักมวล แช่ 30 นาที อัลตราโซนิกบำบัด 40 นาที (กำลัง 250 W ความถี่ 35 kHz) เย็น ชั่งน้ำหนักอีกครั้ง เติมสารละลายน้ำเมทานอล 50% เพื่อชดเชยมวลที่หายไป เขย่า ปล่อยให้ยืน กรองส่วนลอยเหนือตะกอนผ่านเมมเบรนกรองที่มีรูพรุนขนาดเล็ก 0.22 ไมโครเมตร แล้วใส่สิ่งที่กรองลงในขวดที่มีเฟสของเหลวสีน้ำตาลเพื่อให้ได้สารละลาย

ขายสมุนไพร CISTANCHE คุณภาพสูง

2.2.2 เงื่อนไขโครมาโตกราฟี

Waters ACQUITY UPLCTM BEH C18 คอลัมน์โครมาโตกราฟี (100 มม.×2.1 มม., 1.7 ไมโครเมตร) อุณหภูมิคอลัมน์ 35 องศา ; อุณหภูมิห้องเก็บตัวอย่าง 10 องศา ปริมาตรการฉีดตัวอย่าง 3 ไมโครลิตร เมทานอล (A)-0.1% สารละลายน้ำที่เป็นกรดฟอร์มิก (B) เป็นเฟสเคลื่อนที่ การชะแบบไล่ระดับ: 0-4 นาที 10%{ {13}}% เมทานอล; 4-18 นาที, 26%-40% เมทานอล; 18-24 นาที, 40%-100% เมทานอล; 24-28 นาที เมทานอล 100% อัตราการไหลของปริมาตรคือ 0.3 มล./นาที และความยาวคลื่นการตรวจจับคือ 330 นาโนเมตร

2.2.3 สภาวะแมสสเปกโตรเมตรี

ใช้แหล่งกำเนิดไอออนไนซ์ด้วยไฟฟ้า (ESI) การสแกนโหมดไอออนลบ อุณหภูมิของเส้นเลือดฝอยอยู่ที่ 350 องศา อัตราการไหลของปริมาตรก๊าซของปลอกอยู่ที่ 30 arb อัตราการไหลของปริมาตรก๊าซเสริมคือ 10 arb แรงดันสเปรย์คือ 3

KV, แรงดันไฟฟ้าของเส้นเลือดฝอยคือ −35 V, แรงดันไฟฟ้าของเลนส์หลอดคือ −110 V, ช่วงการสแกนคือ m/z 100-1 000, ระบบรวบรวมข้อมูลคือ Xcalibur 2.1

2.2.4 การวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA)

หลังจากได้รับเมทริกซ์สองมิติของคู่ข้อมูลเวลาเก็บรักษามวลที่แม่นยำ แผงหน้าปัดจะแสดงข้อมูลเวลาการเก็บรักษาที่ถูกต้องที่นำเข้าโดยอัตโนมัติทั้งหมด และวิธีการ PCA ของโมดูลสถิติแบบขยายจะถูกใช้สำหรับการวิเคราะห์

2.2.5 การวิเคราะห์จำแนกกำลังสองน้อยที่สุดบางส่วนตั้งฉาก (OPLS-DA) LCMS ผสมผสานการแยกโครมาโตกราฟีของเหลวในระดับสูงเข้ากับความไวสูงของแมสสเปกโตรเมทรี ข้อมูลที่รวบรวมมีขนาดค่อนข้างใหญ่ และจำเป็นต้องมีการวิเคราะห์ทางสถิติหลายตัวแปรเพื่อประมวลผลข้อมูล OPLS-DA แบ่งข้อมูลออกเป็นสองกลุ่มและใช้แบบจำลองทางสถิติที่ได้รับการดูแลเพื่อให้ได้สเปกตรัมมุมฉากจำนวนมาก ซึ่งแสดงให้เห็นความแตกต่างระหว่างตัวอย่างทั้งสองกลุ่มอย่างชัดเจน ในรูปแบบ S-Plot รูปเพิ่มเติม แต่ละจุดแทนคู่ข้อมูลเวลาคงมวลที่แม่นยำ แกน X แทนตัวแปร ยิ่งจุดข้อมูลอยู่ห่างจากจุดศูนย์มากเท่าใด การมีส่วนร่วมของจุดต่อความแตกต่างของตัวอย่างก็จะยิ่งมากขึ้นเท่านั้น ; แกน Y แสดงถึงความสัมพันธ์ระหว่างตัวอย่างในกลุ่มตัวอย่างเดียวกัน ยิ่งคู่ข้อมูลมวลที่แม่นยำและเวลาเก็บรักษายิ่งอยู่ห่างจากจุดศูนย์มากเท่าใด ความสัมพันธ์ก็จะยิ่งแข็งแกร่งมากขึ้นเท่านั้น ดังนั้น คู่ข้อมูลเวลากักเก็บที่แม่นยำของมวลที่ปลายทั้งสองของเส้นโค้งรูปตัว S จึงแสดงถึงไอออนลักษณะเฉพาะที่เชื่อถือได้มากที่สุดจากกลุ่มตัวอย่างแต่ละกลุ่ม

ขายสมุนไพร CISTANCHE คุณภาพสูง

2.2.6 การวิเคราะห์โครงสร้างแมสสเปกโตรเมตรี

หลังจากได้รับไอออนที่มีลักษณะเฉพาะแล้ว การจับคู่องค์ประกอบขององค์ประกอบและสารประกอบจะดำเนินการโดยการคำนวณมวลโมเลกุลสัมพัทธ์ที่แม่นยำ และรวมฐานข้อมูลที่มีอยู่และเอกสารที่เกี่ยวข้องเพื่อระบุส่วนประกอบที่แตกต่างกัน

2.3 ศึกษาความแตกต่างในประสิทธิภาพก่อนและหลังการตุ๋นกับไวน์

2.3.1 การเตรียมสารสกัด Cistanche Deserticola

Cistanche Deserticola (ชุดหมายเลข 160901) และผง Cistanche Deserticola ที่ตุ๋นไวน์ที่สอดคล้องกันถูกสกัดตามเงื่อนไขภายใต้ "2.2.1" กรองหลังการรักษาด้วยอัลตราโซนิก ทำซ้ำสองครั้ง น้ำกรองถูกรวม ทำให้เข้มข้นโดยการกลั่นสุญญากาศ และแช่แข็ง- แห้ง.

2.3.2 การจัดกลุ่มการทดลองในสัตว์ทดลองและการให้ยา

รูปที่ 1 Cistanches Herba A และ Cistanches Herba B ที่ตุ๋นไวน์

(1) การจัดกลุ่ม: หนูได้รับน้ำและอาหารฟรี หลังจากการให้อาหารแบบปรับตัวเป็นเวลา 1 สัปดาห์ พวกเขาจะถูกสุ่มแบ่งออกเป็น 5 กลุ่ม (ตารางที่ 2) โดยมีหนู 10 ตัวในแต่ละกลุ่ม ได้แก่ กลุ่มปกติ กลุ่มแบบจำลอง กลุ่ม Cistanche Deserticola ดิบ (PR) กลุ่ม Cistanche Deserticola ตุ๋นไวน์ (PW) และกลุ่มควบคุมเชิงบวก Jinkui Shenqi Pill (JK) (2) การสร้างแบบจำลอง: ยกเว้นกลุ่มปกติ อีกสี่กลุ่มทั้งหมดถูกฉีดด้วยการฉีดไฮโดรคอร์ติโซน โซเดียม ซัคซิเนต ในขนาด 20 มก./กก. เป็นเวลา 14 วันติดต่อกัน กลุ่มปกติฉีดน้ำเกลือปริมาณเท่ากัน สังเกตสภาพทั่วไปของหนูในแต่ละกลุ่มเพื่อดูว่าพวกมันแสดงอาการหรือไม่ เช่น กลัวความหนาว ชอบความอบอุ่น แขนขาเย็น ปัสสาวะใสและยาว ม้วนงอและโค้งหลัง ผมหมองคล้ำและยุ่งเหยิง และภาวะซึมเศร้าทางจิต ในเวลาเดียวกัน น้ำหนักตัว จำนวนกิจกรรมที่เกิดขึ้นเอง การรับประทานอาหาร ปริมาณน้ำ ปัสสาวะที่ออก และตัวชี้วัดอื่นๆ ของหนูในแต่ละกลุ่ม

(3) การบริหารให้: ปริมาณของหนูคำนวณตามปริมาณทางคลินิกของ Jinkui Shenqi Pills และ Cistanche Deserticola ปริมาณยาของกลุ่ม Cistanche Deserticola แต่ละกลุ่มคือ 1.80 กรัม/กิโลกรัม ในแง่ของปริมาณยาดิบ ปริมาณเฉพาะแสดงอยู่ในตารางที่ 2 สารสกัดแต่ละชนิดของ Cistanche Deserticola และ Jinkui Shenqi Pills ถูกเตรียมเป็นสารละลายที่มีความเข้มข้นระดับหนึ่งด้วยน้ำปราศจากไอออน สารละลายถูกบริหารให้ในกระเพาะอาหารทุกวันด้วยปริมาตรในกระเพาะอาหาร 10 มล./กก. เป็นเวลา 30 วันติดต่อกัน กลุ่มปกติและกลุ่มแบบจำลองได้รับการบริหารทางลำไส้ด้วยน้ำปราศจากไอออนในปริมาณเท่ากันทุกวัน วัดน้ำหนักตัวทุกสัปดาห์ และปริมาตรในกระเพาะอาหารถูกปรับตามน้ำหนักตัวของหนู หลังจากการบริหารให้ หนูถูกอดอาหารเป็นเวลา 12 ชั่วโมง หลังจากการดมยาสลบเพนโทบาร์บาร์บิทัล เลือดจะถูกเก็บจากเอออร์ตาในช่องท้องเพื่อตรวจหาดัชนีซีรั่ม ไต อัณฑะ ท่อน้ำอสุจิ ถุงน้ำเชื้อ และต่อมลูกหมากถูกเอาออกเพื่อการตรวจจับดัชนีที่เกี่ยวข้อง