การแข็งตัวของเลือด ตัวรับโปรตีเอส และโรคไตที่เป็นเบาหวาน: บทเรียนจากหนูที่ขาด ENOS

การสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ในบุผนังหลอดเลือดเป็นที่ทราบกันว่าความผิดปกติของ (eNOS) ทำให้การลุกลามและการพยากรณ์โรครุนแรงขึ้นโรคไตเบาหวาน(ดีเคดี). กลไกอย่างหนึ่งที่ทำให้บรรลุผลนี้คือระดับ eNOS ต่ำสัมพันธ์กับภาวะการแข็งตัวของเลือดมากเกินไป ซึ่งส่งเสริมการบาดเจ็บของไต ในน้ำตกที่แข็งตัวจากภายนอก ปัจจัยของเนื้อเยื่อ (ปัจจัย III) และปัจจัยการแข็งตัวของเลือดขั้นปลาย เช่น ปัจจัยออกฤทธิ์ X (FXa) จะทำให้การอักเสบรุนแรงขึ้นโดยการกระตุ้นของตัวรับที่กระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส (PAR) เมื่อเร็วๆ นี้ มีการแสดงให้เห็นว่าการขาดหรือลดการแสดงออกของ eNOS ในหนูที่เป็นโรคเบาหวาน ซึ่งเป็นแบบจำลองของ DKD ขั้นสูง จะเพิ่มระดับปัจจัยของเนื้อเยื่อไตและการแสดงออกของ PAR1 และ 2 ในไต นอกจากนี้การยับยั้งทางเภสัชกรรมหรือการลบล้างทางพันธุกรรมของปัจจัยการแข็งตัวของเลือดหรือ PARบรรเทาอาการอักเสบใน DKD ในหนูที่ไม่มี eNOS ในการทบทวนนี้ เราสรุปความสัมพันธ์ระหว่าง eNOS การแข็งตัวของเลือด และ PAR และเสนอทางเลือกการรักษาใหม่สำหรับการจัดการผู้ป่วย DKD

คำสำคัญ:เบาหวาน glomerulosclerosis; ปัจจัย Xa;การอักเสบ; ปัจจัยเนื้อเยื่อ

คลิกที่นี่เพื่อรับสารสกัดจากถังเก็บน้ำออร์แกนิกธรรมชาติที่มีเอไคนาโคไซด์ 25% และแอคทีโอไซด์ 9% สำหรับการทำงานของไต

การแนะนำ

จำนวนผู้ป่วยด้วยโรคไตเบาหวาน(DKD) กำลังเพิ่มขึ้นทั่วโลก (de Boer et al. 2011; Kainz et al. 2015; Ogurtsova et al. 2017) DKD เป็นหนึ่งในสาเหตุสำคัญของการเสียชีวิตในผู้ป่วยโรคแทรกซ้อนจากโรคเบาหวาน (Afkarian et al. 2013) นอกจากนี้ DKD มีความก้าวหน้าและเป็นสาเหตุหลักของโรคไตระยะสุดท้ายที่ต้องได้รับการบำบัดทดแทนไต (Gregg et al. 2014; Liyanage et al. 2015) ในญี่ปุ่น โรคไตจากเบาหวานมีสัดส่วนมากกว่า 39% ของผู้ป่วยฟอกไตรายใหม่ (Nitta et al. 2020) ดังนั้นการพัฒนาของการรักษาแบบใหม่จำเป็นต้องมีทางเลือกในการจัดการผู้ป่วยที่มี DKD

ระบบในการเกิดโรค DKD ความสามารถในการแข็งตัวของเลือดมากเกินไปเกี่ยวข้องกับ DKD (Goldberg 2009; Domingueti et al. 2016) ระดับไฟบริโนเจนในเลือดที่เพิ่มขึ้นแสดงให้เห็นว่าสัมพันธ์กับอัตราการกรองของไตโดยประมาณที่ต่ำ ภาวะโปรตีนในปัสสาวะสูง และการบาดเจ็บทางเนื้อเยื่อวิทยาอย่างรุนแรง และเป็นตัวทำนายการลุกลามของโรคไตระยะสุดท้าย (Dalla Vestra et al. 2005; Pan et อัล 2018; Zhang และคณะ 2018) การศึกษาบางชิ้นแสดงให้เห็นความสัมพันธ์ระหว่างระดับของ D-dimer ผลิตภัณฑ์จากการย่อยสลายไฟบริน และความผิดปกติของไตใน DKD (Domingueti et al. 2018; Pan et al. 2018) ความสามารถในการแข็งตัวของเลือดมากเกินไปใน DKD อาจถูกกำหนดโดยปัจจัยหลายประการ ตัวอย่างเช่น ระบบ renin-angiotensin-aldosterone จะกระตุ้นปัจจัยเนื้อเยื่อ (TF, factor III) และเพิ่มเหตุการณ์ลิ่มเลือดอุดตัน (Dielis et al. 2005) มิฉะนั้นภาวะน้ำตาลในเลือดสูง ภาวะไขมันในเลือดผิดปกติ การอักเสบ หรือความผิดปกติของเยื่อบุผนังหลอดเลือดจะเกี่ยวข้องกับภาวะที่เกิดลิ่มเลือดอุดตันภายใต้การเกิดโรค DKD (Goldberg 2009)

ความผิดปกติของเยื่อบุผนังหลอดเลือดมีอยู่ใน DKD ที่ลุกลามไปสู่ภาวะแทรกซ้อนของหลอดเลือดขนาดเล็ก (Goldberg 2009; Nakagawa et al. 2011) การผลิตไนตริกออกไซด์ซินเธส (eNOS) ที่บกพร่องหรือกิจกรรมของ eNOS ลดลง (เช่น eNOS phosphorylation ที่บกพร่อง) เป็นจุดเด่นของความผิดปกติของ endothelial endothelial ใน DKD (Nakagawa et al. 2011; Cheng et al. 2012) เราได้แสดงให้เห็นว่าการสูญเสียการแสดงออกของ eNOS นั้นเชื่อมโยงกับระดับความสูงในระดับ TF และกิจกรรมของระบบการแข็งตัวภายนอก (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a) ซึ่งเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับเหตุการณ์ลิ่มเลือดอุดตันใน ผู้ป่วยที่มีไตเรื้อรัง โรคต่างๆ (Kolachalama และคณะ 2018)

นอกจากความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นของเหตุการณ์ลิ่มเลือดอุดตันแล้ว โปรตีเอสของการแข็งตัวของเลือด เช่น ปัจจัยที่ออกฤทธิ์ FVII (FVIIa), ปัจจัยที่ออกฤทธิ์ (FXa) และทรอมบิน ซึ่งมีอยู่ในน้ำตกที่แข็งตัวของเลือดจากภายนอก จะเป็นสื่อกลางในการบาดเจ็บของเนื้อเยื่อผ่านตัวรับที่กระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส ( PAR) - กลไกที่ขึ้นอยู่กับ (Madhusudhan et al. 2016; Posma et al. 2019) ในการทบทวนนี้ เราสรุปผลการค้นพบที่ได้รับจากหนูเบาหวานที่ขาด eNOS และหารือเกี่ยวกับความสัมพันธ์ระหว่างวิถีการแข็งตัวของเลือด-PAR ระดับ eNOS และการเกิดโรค DKD.

วิถีทางของตัวรับที่กระตุ้นการทำงานของเนื้อเยื่อ/โปรตีเอส

Tissue Factor (TF) หรือที่เรียกว่า factor III เป็นโปรตีนจากเมมเบรนขนาด 47 kDa ที่มีปฏิกิริยากับ factor VII (FVII) (Grover และ Mackman 2018) สารเชิงซ้อน TF/FVIIa เป็นตัวกระตุ้นของน้ำตกที่แข็งตัวจากภายนอกและกระตุ้นการกระตุ้นของ FX และ FIX FXa และโคแฟกเตอร์ V (FVa) ที่ถูกกระตุ้นจะสร้างสารเชิงซ้อนที่เกิดจากการเกิดลิ่มเลือดอุดตันซึ่งสร้างลิ่มเลือด ในที่สุด thrombin จะแปลงไฟบริโนเจนเป็นไฟบริน ส่งผลให้เกิดการก่อตัวของลิ่มเลือดอุดตัน (Grover and Mackman 2018) TF แสดงออกทั้งในเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดและไฟโบรบลาสต์ที่ไม่ได้เกิด ภายใต้สภาวะการอักเสบ การแสดงออกของมันจะเกิดขึ้นในเซลล์บุผนังหลอดเลือดหรือเซลล์หมุนเวียน เช่น โมโนไซต์ (Østerud และ Bjørklid 2006)

รีเซพเตอร์ที่กระตุ้นโปรตีเอส (PAR) เป็นสมาชิกของซูเปอร์แฟมิลีของรีเซพเตอร์ที่ควบคู่กับ G-โปรตีน ซึ่งประกอบรวมด้วยโปรตีน PAR สี่โปรตีน (PAR1-4) PAR ผ่านการแตกแยกโดยโปรตีเอสที่ปลายปลาย N และถูกกระตุ้นเมื่อจับกับปลาย N ใหม่ซึ่งประกอบด้วยลิแกนด์ที่ถูกโยง สมาชิกของ PAR ทั้งสี่ (PAR{6}}) ถูกกระตุ้นโดยโปรตีเอสของการแข็งตัวจำเพาะ: สารเชิงซ้อน TF และ FVIIa กระตุ้น PAR2, แฟกเตอร์ Xa กระตุ้นทั้ง PAR1 และ PAR2 และทรอมบินกระตุ้น PAR1, PAR3 และ PAR4 (Camerer และคณะ 2000; Coughlin 2005; Rothmeier และ Ruf 2012; Zhao และคณะ 2014) ความสัมพันธ์ระหว่าง TF, โปรตีเอสของการแข็งตัวและ PAR แสดงในรูปที่ 1

เป็นที่ทราบกันว่า PAR มีการแสดงออกอย่างกว้างขวางในเซลล์ไตและเกี่ยวข้องกับพยาธิสรีรวิทยาของการบาดเจ็บที่ไต ทั้ง PAR1 และ PAR2 แสดงออกในเซลล์บุผนังหลอดเลือดของไต เซลล์ mesangial และเซลล์ท่อไตที่ได้มาจากมนุษย์หรือหนู; PAR2, PAR3 และ PAR4 ถูกแสดงออกในพอดไซต์ของมนุษย์ PAR1, PAR3 และ PAR4 แสดงในเซลล์พ็อดไซต์ของหนู (Tanaka et al. 2005; Vesey et al. 2005; Madhusudhan et al. 2012; Dong et al. 2015; Madhusudhan et al. 2016)

แม้ว่าผลกระทบที่เป็นอันตรายหรือการป้องกันของ PARs ก็ตามอาการบาดเจ็บที่ไตได้รับการสาธิตแล้ว ข้อมูลที่สะสมชี้ให้เห็นว่า PARs ทำให้การอักเสบรุนแรงขึ้นโดยการกระตุ้นการผลิตไซโตไคน์และคีโมไคน์ (Rothmeier และ Ruf 2012; Isermann 2017; Posma et al. 2019) สอดคล้องกับการค้นพบนี้ ตัวดำเนินการ PAR1 และ PAR2 ส่งเสริมการแสดงออกของตัวกลางในการอักเสบ เช่น โมโนไซต์เคมีโมแทกติกโปรตีน 1 (MCP1) และตัวยับยั้งแอคติเวเตอร์พลาสมิโนเจน-1 (PAI-1) ​​และโมเลกุลโปรไฟโบรติกในเยื่อบุผนังหลอดเลือด , mesangial และเซลล์ท่อไต (Vesey et al. 2005; Vesey et al. 2013; Ellinghaus et al. 2016; Waasdorp et al. 2016; Oe et al. 2019) ในการศึกษา ในสัตว์ทดลอง การขาด PAR1 หรือการมีอยู่ของสารยับยั้ง PAR1 ช่วยลดการอักเสบในรูปแบบของภาวะไตอักเสบจากเสี้ยววงเดือนหรือการบาดเจ็บที่ไตจากการอุดกั้น (Cunningham et al. 2000; Waasdorp et al. 2019; Lok et al. 2020) ในทำนองเดียวกัน ผลการรักษาของการยับยั้ง PAR2 ในการบาดเจ็บที่ไตก็มาพร้อมกับลดการอักเสบในไต (Hayashi et al. 2016; Du et al. 2017; Han et al. 2019; Watanabe et al. 2019)

ความหลากหลายของไนตริกออกไซด์สังเคราะห์บุผนังหลอดเลือดใน DKD

การสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ในบุผนังหลอดเลือด(eNOS) เป็นหนึ่งในสามไอโซฟอร์มของ NOS และมีส่วนช่วยในการผลิต NO ในเอ็นโดทีเลียมของหลอดเลือด (Walford และ Loscalzo 2003) NOS ที่ผลิตโดย eNOS ในเยื่อบุหลอดเลือดมีบทบาทสำคัญในการควบคุมการผ่อนคลายของหลอดเลือด ต้านการอักเสบ และป้องกันการเกิดลิ่มเลือดอุดตัน (Walford และ Loscalzo 2003) การแสดงออก eNOS ที่บกพร่องนั้นสัมพันธ์กับการพัฒนาของ DKD การวิเคราะห์เมตาที่ดำเนินการเมื่อเร็วๆ นี้ในมนุษย์ได้เปิดเผยว่า G894T (rs1799983), C-786T (rs2070744) และอินตรอน 4b/4a ​​(rs869109213) ในยีน eNOS (NOS3) มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับ การพัฒนา DKD (Dellamea et al. 2014; Zhang et al. 2015; Dong et al. 2018) จากตัวแปรเหล่านี้ บทบาทของความหลากหลาย G894T (Glu298Asp) ในฟังก์ชัน eNOS นั้นมีความโดดเด่นเป็นอย่างดี การผลิตที่ลดลงของการสะสม NO หรือไนไตรต์ถูกระบุในเซลล์ CHO ที่ถูกทรานส์เฟกด้วย 298Asp เมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ที่มี 298Glu (Noiri et al. 2002) โดยรวมแล้ว ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าการผลิต NO ที่ลดลงโดยความผิดปกติของ eNOS นั้นมีความสำคัญต่อการลุกลามของ DKD ในมนุษย์

หนูที่เป็นโรคเบาหวานที่ขาด eNOS เป็นตัวอย่างของโรคไตจากเบาหวานในมนุษย์

การสร้างแบบจำลองพรีคลินิกที่เชื่อถือได้ซึ่งคล้ายกับ DKD ของมนุษย์เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการศึกษาทางเลือกการรักษาแบบใหม่ จากหลักฐานที่แสดงให้เห็นถึงความสัมพันธ์ระหว่าง eNOS polymorphism และ DKD การศึกษาจำนวนหนึ่งได้แสดงให้เห็นว่าโมเดล eNOS ที่น่าพิศวงประเภท I และประเภท II DM เป็นแบบจำลองที่ประสบความสำเร็จบางส่วนในการเลียนแบบ DKD ของมนุษย์ (Brosius et al. 2009; Azushima et อัล. 2018). มันแสดงให้เห็นว่าหนูที่เป็นเบาหวานที่เกิดจากสเตรปโตโซโตซินที่ไม่มี eNOS จะพัฒนาภาวะอัลบูมินูเรียอย่างรุนแรง การขยายตัวของเยื่อหุ้มสมอง ความหนาของเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของไต และภาวะไฮยาลิโนซิสของหลอดเลือด ซึ่งคล้ายกับ DKD ของมนุษย์ (Nakagawa et al. 2007) ในทำนองเดียวกัน หนูที่เป็นเบาหวานชนิดที่ 2 (db/db) ที่ไม่มี eNOS แสดงให้เห็นภาวะไตวายเฉียบพลันและภาวะอัลบูมินูเรียอย่างรุนแรง (Zhao et al. 2006)

TF ที่สูงขึ้นในหนูเบาหวานที่ขาด eNOS

NO ยับยั้งการสร้างลิ่มเลือดและการรวมตัวของเกล็ดเลือด (Walford และ Loscalzo 2003) เนื่องจากการก่อตัวของลิ่มเลือดในไตถูกพบในหนูเบาหวานที่ขาด eNOS (Nakagawa et al. 2007) การแสดงออกของ eNOS ที่บกพร่องจึงน่าจะเกี่ยวข้องกับการเพิ่มขึ้นของการแข็งตัวของเลือดที่ขึ้นกับ TF ความสัมพันธ์ระหว่าง eNOS และ TF ใน DKD ได้รับการแก้ไขแล้วในรายงานก่อนหน้าของเรา (Li et al. 2010; Wang et al. 2011a; Oe et al. 2016) (รูปที่ 2)

การแสดงออกของ eNOS ที่ลดลงหรือขาดจะเพิ่มกิจกรรมของไตในหนูอาคิตะที่เป็นเบาหวาน เรากำหนดลักษณะการแสดงออกของ TF ในหนูที่เป็นเบาหวานอาคิตะ (Ins2Akita/+) ซึ่งเป็นแบบจำลองของประเภท I DM โดยมีระดับการแสดงออกที่หลากหลายของ eNOS (eNOS+/+, eNOS+/- และ eNOS-/-) (Wang และคณะ 2011a) เราพบว่าความรุนแรงของ DKD มีความสัมพันธ์กับการแสดงออกของ eNOS ที่ลดลง การขับถ่ายอัลบูมินในปัสสาวะ ภาวะไตวาย และอัตราการกรองไตลดลงจะรุนแรงขึ้นตามลำดับต่อไปนี้: eNOS+/+; Ins2Akita/+ < eNOS+/-; Ins2Akita/+ < eNOS-/-; อินส์ทูอาคิตะ/+. สิ่งที่น่าสนใจคือการแสดงออกและกิจกรรมของไต TF เพิ่มขึ้นใน eNOS+/-; Ins2Akita/+ และ eNOS-/-; หนู Ins2Akita/+ เปรียบเทียบกับหนูใน eNOS+/+; หนู Ins2Akita/+ การสะสมไฟบรินของไตก็น่าทึ่งเช่นกันใน eNOS+/-; Ins2 อาคิตะ/+ และ eNOS-/-; หนู Ins2 Akita/+ นอกจากนี้ การแสดงออกของ Tf mRNA ของไตมีความสัมพันธ์กับความรุนแรงของโรค การขับถ่ายของอัลบูมินในปัสสาวะ และไตอักเสบการแสดงออกของไซโตไคน์

อาหารที่มีไขมันสูงและการขาด eNOS ช่วยเพิ่ม TF ในหนูที่เป็นเบาหวาน

การศึกษาจำนวนมากแสดงให้เห็นถึงความเชื่อมโยงระหว่างโรคอ้วนและการเกิดลิ่มเลือดอุดตัน (Samad และ Ruf 2013) ตัวอย่างเช่น การควบคุมวิถี TLR4-NF-kB ภายใต้สภาวะโรคเมตาบอลิซึมจะเพิ่มระดับ TF (Lv et al. 2009; Owens et al. 2012; Rogero and Calder 2018) นอกจากนี้กรดไขมันอิ่มตัวปาล์มเมตยังกระตุ้นให้ฮิสโตน H3 ปล่อยผ่านกลไกที่ขึ้นกับวิถีทางของ ROS และ JNK และฮิสโตนนอกเซลล์ ซึ่งเพิ่มการแสดงออกของ TF ในโมโนไซต์ (Shrestha et al. 2013) การศึกษาก่อนหน้าของเรามุ่งเน้นไปที่ความสัมพันธ์ระหว่างการแข็งตัวของเลือด eNOS และภาวะไขมันผิดปกติ แสดงให้เห็นถึงผลรวมของการขาด eNOS และการรับประทานอาหารที่มีไขมันสูงต่อการแสดงออกของ TF (Li et al. 2010) ในการศึกษา หนู eNOS-null ได้รับการรักษาด้วย STZ ขนาดต่ำเพื่อพัฒนา DM และได้รับอาหารที่มีไขมันสูง การขาดการแสดงออกของ eNOS ช่วยเพิ่มการขับถ่ายอัลบูมินในปัสสาวะและการบาดเจ็บทางเนื้อเยื่อวิทยา ซึ่งรุนแรงยิ่งขึ้นอีกจากการรับประทานอาหารที่มีไขมันสูง การแสดงออกและกิจกรรมของ TF เพิ่มขึ้นในไตของหนูเนื่องจากขาดการแสดงออกของ eNOS และอาหารที่มีไขมันสูงในลักษณะเสริมฤทธิ์กัน สิ่งที่น่าสนใจคือการเพิ่มขึ้นของระดับของ immunoreactive TF นั้นแสดงให้เห็นโดยการทดลอง colocalization ด้วยเครื่องหมาย glomerular monocyte/macrophage

การทำให้แอนติบอดีเป็นกลางต่อ TF ช่วยบรรเทาอาการอักเสบในไตเบาหวานในหนู eNOS-Knockout

การเพิ่มขึ้นของการแข็งตัวของเลือดที่ขึ้นกับ TF สัมพันธ์กับการอักเสบที่เพิ่มขึ้น (Witkowski et al. 2016) การยับยั้งระบบการแข็งตัวของเลือดที่ขึ้นกับ TF ได้รับการแก้ไขโรคอักเสบเช่น ภาวะติดเชื้อที่เกิดจาก LPS (Pawlinski et al. 2010) เพื่ออธิบายความเชื่อมโยงเชิงสาเหตุระหว่างการอักเสบและ TF ใน DKD เราได้ตรวจสอบผลระยะสั้นของการทำให้แอนติบอดีต่อต้าน TF ต่อการอักเสบของไตที่เป็นเบาหวานในหนูที่ขาด eNOS (Li et al. 2010) ผลการศึกษาพบว่าการให้แอนติบอดีต่อต้าน TF ช่วยลดระดับการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบและการเกิดพังผืดของไตลงอย่างเห็นได้ชัด เช่น Tnfa, Ccl2, Tgfb และ Col4 mRNA ในไตของหนูสี่วันหลังจากการทำให้ TF เป็นกลาง

การแข็งตัวของสารยับยั้ง FXa ช่วยบรรเทาอาการบาดเจ็บของไตในหนูที่เป็นเบาหวานที่ขาด eNOS

การแข็งตัวของเลือด FXa ซึ่งอยู่ท้ายน้ำของ TF/VIIa ยังก่อให้เกิดการอักเสบผ่านวิถีทางที่ขึ้นกับ PAR บทบาทของมันใน DKD ได้รับการแสดงให้เห็นในแบบจำลองสัตว์หลายชนิด ซูมิและคณะ (2011) แสดงให้เห็นว่า Fondaparinux ซึ่งเป็นสารยับยั้ง FXa, ลดระดับโปรตีนในปัสสาวะ, การเจริญเติบโตของไตมากเกินไป และการสะสมของไฟบรินในหนู db/ db กลุ่มของเราแสดงให้เห็นผลการรักษาของการยับยั้ง FXa ในหนู DKD ที่ขาด eNOS (Oe et al. 2016) เอดอกซาบัน (50 มก./กก./วัน) ซึ่งเป็นสารยับยั้ง FXa แบบรับประทานถูกบริหารให้กับ eNOS-/-; หนูทดลอง Ins2Akita/+ เป็นเวลาสามเดือน และผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าการบาดเจ็บทางเนื้อเยื่อวิทยาดีขึ้น เช่น การแพร่กระจายของเมทริกซ์เยื่อเมสันเจียล ระดับการแสดงออกของยีนอักเสบในไตลดลงโดย edoxaban (ตารางที่ 1) FXa เปิดใช้งานทั้ง PAR1 และ PAR2 เพื่ออธิบายกลไกของการบาดเจ็บที่ไตโดยอาศัย FXa เราได้แสดงให้เห็นว่าผลต้านการอักเสบของสารยับยั้ง FXa นั้นคล้ายคลึงกับผลที่พบในหนู PAR2-/- และหนู PAR2-/- ที่มีสารยับยั้ง FXa . การค้นพบเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า FXa น่าจะทำให้เกิดอาการอักเสบผ่านกลไกที่ขึ้นกับ PAR{17}} ใน DKD ในทางตรงกันข้าม edoxaban ไม่ได้ปรับปรุงการบาดเจ็บของไตใน eNOS+/+; หนู Ins2Akita/+ แนะนำว่าผลการรักษาของการยับยั้ง FXa มีความสัมพันธ์กับความสามารถในการแข็งตัวของเลือดมากเกินไปที่ขึ้นกับ eNOS ในหนูที่เป็นเบาหวานชนิดที่ 1

ปัจจัยการแข็งตัวอื่น ๆ ใน DKD

เนื่องจากทรอมบินมุ่งเป้าไปที่ PAR1 ซึ่งจะทำให้หลอดเลือดอักเสบลุกลาม (Chen และ Dorling 2009) ทรอมบินจึงมีแนวโน้มที่จะทำให้ DKD รุนแรงขึ้น อย่างไรก็ตาม บทบาทในการป้องกันหรือเป็นอันตรายของทรอมบินในการเกิดโรค DKD ได้แสดงให้เห็นแล้ว thrombin ขนาดต่ำ (50 pM) ป้องกันได้ ในขณะที่ thrombin ขนาดสูง (20 nM) ทำให้รุนแรงขึ้น การตายของเซลล์ที่เกิดจากกลูโคสใน podocytes (Wang et al. 2011b) ควรมีการศึกษาผลของสารยับยั้งทรอมบิน เช่น dabigatran ต่อหนูที่เป็นเบาหวานที่ไม่มี eNOS ในอนาคต

ไฟบริโนเจนเกี่ยวข้องกับสถานะการอักเสบต่างๆ สิ่งที่น่าสนใจคือ การลดลงบางส่วนหรือการไม่มีไฟบริโนเจนเป็นประโยชน์ต่อแบบจำลองภาวะขาดเลือดกลับคืนของไตหรือการเกิดพังผืดในไตที่อุดกั้น (Sörensen et al. 2011; Craciun et al. 2014) เนื่องจากการสะสมของไฟบรินในไตเพิ่มขึ้นในหนูเบาหวานที่ไม่มี eNOS (Nakagawa et al. 2007; Li et al. 2010; Wang et al. 2011a) การชี้แจงบทบาทของมันในการเกิดโรค DKD สมควรได้รับการวิจัยเพิ่มเติม

การแสดงออกของ PAR1 และ PAR2 ในหนูเบาหวานที่ขาด eNOS

การแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ PARs สัมพันธ์กับการบาดเจ็บของไต เราและคนอื่นๆ ได้แสดงให้เห็นว่าระดับการแสดงออกของ Par1 และ/หรือ Par2 mRNA เพิ่มขึ้นในแบบจำลองสัตว์ที่เป็นโรคไตจากเบาหวาน การบาดเจ็บที่ไตที่เกิดจาก ADE 9 ครั้ง การเกิดพังผืดของไตอุดกั้น และการบาดเจ็บของไตที่เกิดจากซิสพลาติน (Chung et al. 2013; Hayashi และคณะ 2016; Oe และคณะ 2016; วาตานาเบะ และคณะ 2019) นอกจากนี้ ระดับโปรตีน PAR2 ของไตยังเพิ่มขึ้นในหนู db/db ซึ่งเป็นแบบจำลองของ DM ประเภท II (Sumi et al. 2011) เราแสดงให้เห็นถึงความสัมพันธ์ระหว่างการแสดงออกของ PAR และการขาด eNOS ในหนูที่เป็นเบาหวาน (Oe et al. 2016) ระดับการแสดงออกของ Par1 mRNA สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน eNOS - / -; หนู Ins2Akita/+ มากกว่าใน eNOS−/−; หนู Ins2Akita/+ และไม่ใช่ DM ในทำนองเดียวกันการแสดงออกของ Par2 นั้นสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน eNOS - / -; หนู Ins2Akita/+ มากกว่าหนูที่ไม่ใช่ DM ในทางตรงกันข้าม ระดับ Par4 mRNA ไม่ได้แตกต่างกันระหว่างจีโนไทป์ การขาด eNOS จะทำให้การอักเสบใน DKD รุนแรงขึ้น (Wang et al. 2011a) เนื่องจากไซโตไคน์ที่มีการอักเสบโปรมีรายงานว่าเพิ่ม PARs (Nystedt et al. 1996) การอักเสบที่เพิ่มขึ้นที่เกิดจากการขาด eNOS จึงน่าจะทำให้เกิดการแสดงออกของ Pars ของไตใน DKD โดยรวมแล้ว ผลการศึกษาของเราชี้ให้เห็นว่าระดับการแสดงออกของ PAR1 และ PAR2 ซึ่งคล้ายกับกรณีของ TF เพิ่มขึ้นในไตที่เป็นเบาหวานเมื่อ eNOS ขาด (รูปที่ 2)

การลบ PAR2 ช่วยลดอาการบาดเจ็บไตจากเบาหวานในหนูที่มี eNOS ลดลง

เราและคนอื่น ๆ ได้กล่าวถึงบทบาทของ PAR2 ใน DKD ในการศึกษาก่อนหน้านี้ การลบ Par2 ไม่ส่งผลกระทบต่อการบาดเจ็บของไตในหนู Akita ชนิดป่าที่เป็นเบาหวาน (Ins2Akita/+) ด้วย eNOS (Oe et al. 2016) นอกจากนี้ หนูที่เป็นเบาหวานที่เกิดจาก STZ ที่ไม่มี PAR2 แสดงให้เห็นว่ามีอัลบูมินูเรียลดลงเมื่อเปรียบเทียบกับหนูที่เป็นเบาหวานชนิดป่า แต่มีการขยายตัวของ mesangial เพิ่มขึ้น (Waasdorp et al. 2017) โดยรวมแล้ว ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าไม่มีผลการรักษาของการยับยั้ง PAR2 ต่อการบาดเจ็บของไตใน DKD รุ่นแรกและไม่รุนแรง ในทางตรงกันข้าม เราได้แสดงให้เห็นผลกระทบของการขาด PAR2 ต่อ DKD ในหนูอาคิตะที่เป็นเบาหวาน โดยมีการแสดงออกของ eNOS ที่ลดลง (eNOS+/-; Ins2Akita/+) (Oe et al. 2016) การขาด PAR2 ช่วยลดระดับการขับถ่ายอัลบูมินในปัสสาวะ การขยายตัวของเยื่อเมือก และความหนาของ GBM ลงอย่างมีนัยสำคัญ ระดับการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบและการเกิดพังผืด รวมถึง Tnfa, Tgfb และ Col4 ก็ลดลงในไตของหนูเช่นกัน การค้นพบเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า PAR2 ก่อให้เกิดโรคไม่ได้เกิดขึ้นในระยะแรก แต่เป็นอาการบาดเจ็บที่ไตของผู้ป่วยเบาหวานขั้นสูงที่เกิดจากการขาด eNOS (ตารางที่ 1)

บริการสนับสนุนของ Wecistanche - ผู้ส่งออก cistanche ที่ใหญ่ที่สุดในประเทศจีน:

อีเมล:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/โทรศัพท์:+86 15292862950

เลือกซื้อรายละเอียดข้อมูลจำเพาะเพิ่มเติม:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-ร้านค้า