Cistanche และการรักษาโรคไต: ซาวน่ามีประโยชน์หรือเป็นอันตรายสำหรับโรคไต Polycystic ที่โดดเด่นใน autosomal หรือไม่? การตรวจสอบด้วยโมเดลเมาส์
Mar 14, 2022
Cistanche และการรักษาโรคไต: ซาวน่ามีประโยชน์หรือเป็นอันตรายต่อโรคไต Polycystic Autosomal Dominant หรือไม่? การตรวจด้วย Model Mouse
ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
เชิงนามธรรม
วิธีการและผลลัพธ์: หนู (หนู DBA/2FG-pcy เพศผู้) ถูกแบ่งออกเป็นสามกลุ่ม: กลุ่มควบคุม, TS: จ่ายหนูภายใต้ห้องซาวน่าเป็นเวลานานด้วยน้ำที่ให้ซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์ SW: หนู pcy ให้น้ำที่มีซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์ กลุ่ม TS ต้องเข้าห้องซาวน่าสองครั้งต่อสัปดาห์เป็นเวลาสี่สัปดาห์ กลุ่ม TS ได้รับและคงรักษาไว้ที่อุณหภูมิทางทวารหนักประมาณ 39{5}} องศา จนกว่าจะถูกนำออกจากอุปกรณ์รังสีอินฟราเรดแบบฟาร์อินฟราเรดอย่างระมัดระวัง หลังการรักษาในห้องซาวน่า 4 สัปดาห์ ระดับครีเอตินีนและยูเรีย-ไนโตรเจนในเลือด (BUN) ถูกกำหนดโดยวิธีเอนไซม์ วิเคราะห์โปรตีนช็อตด้วยความร้อน (HSP) หรือการเติบโตของเซลล์และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับขนาดโดย Western blotting กลุ่ม TS มีระดับครีเอตินินและ BUN สูงกว่ากลุ่มควบคุมและกลุ่มควบคุมเล็กน้อยเล็กน้อย อย่างไรก็ตาม ความแตกต่างไม่มีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตาม การขยายตัวของถุงน้ำในกลุ่ม TS ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม การแสดงออกของ HSP90 ลดลงเล็กน้อยในกลุ่ม TS และ SW เทียบกับกลุ่มควบคุม (p < 0.01="" หรือ="" p="">< 0.001="" เทียบกับกลุ่มควบคุม)="" เช่นเดียวกับการแสดงออกของ="" erk="" ซึ่งเชื่อมโยงกับการพัฒนาและการแพร่กระจายของซีสต์="" (p="">< 0.05,="" ts="" เทียบกับกลุ่มควบคุม)="" การแสดงออกของ="" hsp27="" และระดับฟอสโฟรีเลชันในกลุ่ม="" sw="" เทียบได้กับระดับของกลุ่มควบคุม="" อย่างไรก็ตาม="" กลุ่ม="" ts="" มีระดับ="" hsp27="" และ="" phosphorylation="" (ns)="" เพิ่มขึ้น="" การแสดงออกของ="" pro-caspase-3="" ในกลุ่ม="" ts="" ต่ำกว่าในกลุ่มควบคุมเล็กน้อย="" อย่างไรก็ตาม="" กิจกรรมของ="" caspase-3="">
สรุป: ผลการวิจัยของการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าการรักษาซาวน่าเป็นเวลา 4 สัปดาห์อาจทำให้เกิดภาวะขาดน้ำชั่วคราวและความผิดปกติของไตที่เกี่ยวข้อง และนำไปสู่ความเสี่ยงในการกระตุ้นการเจริญเติบโตของซีสต์ด้วยการแสดงออกของ Hsp27 ที่เพิ่มขึ้น นอกจากนี้ เราสรุปได้ว่าการป้องกันภาวะขาดน้ำและการเจริญเติบโตของซีสต์สามารถระงับได้ด้วยการดื่มน้ำในปริมาณที่เหมาะสมหลังการทำซาวน่าโดยตรง
Cistanchetubulosaป้องกันไตโรค, คลิกที่นี่เพื่อรับตัวอย่าง
คำสำคัญ:autosomal เด่น polycysticโรคไต, เซาว์น่า, ปริมาณน้ำ, Hsp90, Hsp27
โยชิฮิโร อิวาชิตะ, โคสุเกะ วาทารุ, อากิระ มาเอดะ, คาซึกิ สุกิโมโตะ, เซียวโกะ ยามาดะ, จุนอิจิ IIYAMA
1) ภาควิชาเวชศาสตร์ฟื้นฟู คณะวิทยาศาสตร์สุขภาพ Kumamoto Health Science University 325, Izumi-Cho, Kita-Ku, Kumamoto, Kumamoto 861-5598, Japan
2) แผนกเวชศาสตร์ฟื้นฟู โรงพยาบาลซากุระจิวจิ
3) ภาควิชาโรคไต บัณฑิตวิทยาลัยวิทยาศาสตร์การแพทย์มหาวิทยาลัยคุมาโมโตะ
4) กองวิทยาศาสตร์สุขภาพ บัณฑิตวิทยาลัยวิทยาศาสตร์สุขภาพคุมาโมโตะ
ฉัน บทนำ
autosomal เด่น polycysticไตโรค(ADPKD) เป็นโรคทางพันธุกรรมที่มีลักษณะการเจริญเติบโตของซีสต์จำนวนมากในทั้งสองอย่างไต. ADPKD ส่วนใหญ่เกิดจากการกลายพันธุ์ในยีน polycystic kidney disease 1 (PKD1) และ PKD2 ซึ่งเข้ารหัส polycystin 1 (PC1) และ PC2 ตามลำดับ ตลอดระยะเวลาหลายทศวรรษของโรคนี้ ผู้ป่วยจะพัฒนาซีสต์ของไตที่เต็มไปด้วยของเหลวขนาดใหญ่ ซึ่งส่งผลต่อการทำงานของไต ปัจจุบัน จำนวนผู้ป่วยโรค ADPKD ในญี่ปุ่นอยู่ที่ประมาณ 31 ราย000 คิดเป็นประมาณ 3-5 เปอร์เซ็นต์ของผู้ป่วยฟอกไตทั้งหมด1) ประมาณ 50 เปอร์เซ็นต์ของผู้ป่วยที่มี ADPKD จะเป็นโรคไตวายเรื้อรังระยะสุดท้ายเมื่ออายุ 602) Tolvaptan ซึ่งเป็นตัวต้าน vasopressin receptor 2 (V2) ได้รับการอนุมัติให้เป็นยารักษาโรคตัวแรกสำหรับ ADPKD และเริ่มใช้ทางคลินิกในเดือนพฤษภาคม 2014 ในญี่ปุ่น3) แม้ว่าจะเป็นยาที่มีประสิทธิภาพที่ช่วยลดอัตราการเติบโตของซีสต์ แต่ในปัจจุบันยังไม่มีวิธีรักษา ADPKD และไม่สามารถหยุดการสร้างซีสต์ในไต.
การบำบัดด้วยความร้อน ซึ่งรวมถึงการบำบัดด้วยบัลนีโอเทอราพี (BT) และสปาบำบัด (ST) มีการใช้กันอย่างแพร่หลายทั่วโลกในรูปแบบกายภาพบำบัดหรือการบำบัดทางเลือก ในการตั้งค่าทางคลินิก วัตถุประสงค์หลักของการบำบัดด้วยความร้อนคือการบรรลุผลการรักษาที่มีประสิทธิภาพโดยไม่ทำลายเนื้อเยื่อปกติ การทบทวนอย่างเป็นระบบเมื่อเร็วๆ นี้พบว่า BT และ ST ช่วยบรรเทาอาการปวดอย่างมีนัยสำคัญและคุณภาพชีวิตที่ดีขึ้นในโรคเรื้อรังของระบบกล้ามเนื้อและกระดูกหรือเนื้อเยื่อเกี่ยวพัน4) การกระตุ้นด้วยความร้อนทำให้เกิดโปรตีนช็อตจากความร้อน (Hsps) ที่จำเป็นต่อการอยู่รอดของเซลล์ผ่านหน้าที่ของพวกมันในฐานะผู้ดูแลโปรตีน บทบาทของ Hsps ต่อสุขภาพไตและโรคมีความแปรปรวน การเหนี่ยวนำ Hsps อาจเป็นประโยชน์หรือเป็นอันตรายต่อไต ขึ้นอยู่กับ Hsps ชนิดเซลล์ และบริบทเฉพาะเจาะจง 5) ในเนื้อเยื่อไต Hsps เป็นส่วนสำคัญของระบบการป้องกันภายในเซลล์ ซึ่งกระตุ้นโดยความเครียดของเซลล์ประเภทต่างๆ Hsps ต่างๆ ภายในเซลล์ทำให้โครงสร้างของเซลล์เสถียรและเพิ่มความต้านทานของเซลล์ต่อการตายของเซลล์และเนื้อร้าย6), 7) ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา มีรายงานว่า Hsps มีบทบาทสำคัญใน ADPKD ดังนั้นจึงเป็นเป้าหมายในการรักษา8), 9) ดังนั้นเราจึงมุ่งที่จะศึกษาผลกระทบของซาวน่าต่อสัตว์จำลอง ADPKD เมื่อภาระความร้อนที่ทำให้อุณหภูมิทางทวารหนักสูงขึ้นประมาณ 2 องศาและคงอุณหภูมิไว้ประมาณ 30 นาทีซ้ำแล้วซ้ำอีก
II วัสดุและวิธีการ
1 autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD) รุ่น mouse
ขั้นตอนสำหรับสัตว์ทั้งหมดดำเนินการตามแนวทางการดูแลและการใช้สัตว์ทดลองที่ได้รับอนุมัติจากมหาวิทยาลัยวิทยาศาสตร์สุขภาพคุมาโมโตะ (ฉบับที่ {{0}} หนู DBA/2FG-pcy (pcy) ตัวผู้10), 11) (อายุ 8 สัปดาห์, n=12) (Kyudo, Kumamoto, Japan) ที่มีน้ำหนักตัวเริ่มต้น 20.9±0.7 g ถูกใช้เป็นหนูรุ่น ADPKD การทดลอง. หนูเมาส์ DBA เพศผู้ (8 สัปดาห์, n=3) ถูกใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงสำหรับแบบจำลองหนูเมาส์ ADPKD รูปที่ 1 แสดงลักษณะที่ปรากฏและไตที่ถูกตัดออกเป็นตัวอย่างทั่วไปของหนูเมาส์ pcy (รูปที่ 1A, B) สัตว์ทั้งหมดถูกเลี้ยงไว้ภายใต้การควบคุมความชื้นและอุณหภูมิด้วยวัฏจักรแสง/ความมืด 12:12-ชม. และได้รับการเข้าถึงอย่างอิสระสำหรับเชาเชาและน้ำประปามาตรฐาน
หนูเมาส์ 9 ตัว (อายุ 8 สัปดาห์) ถูกสุ่มแบ่งออกเป็นกลุ่มควบคุมสามกลุ่มต่อไปนี้: หนู pcy เป็นกลุ่มควบคุม (n=3) กลุ่ม TS: หนู pcy ที่ได้รับการกระตุ้นด้วยความร้อนอย่างเป็นระบบซ้ำๆ (n {{3} }); และกลุ่ม SW: หนูเมาส์ pcy ที่จัดหาน้ำที่มีซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์ (n=3) หนูเมาส์ในกลุ่ม TS ถูกจัดให้มีน้ำที่มีซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์ในชั่วข้ามคืน ตามการกระตุ้นด้วยความร้อนอย่างเป็นระบบเพื่อป้องกันการคายน้ำ ในการศึกษาก่อนหน้านี้ เราพบว่าการสูญเสียน้ำหนักตัวประมาณ 3－4 เปอร์เซ็นต์หลังจากการกระตุ้นความร้อนอย่างเป็นระบบ12) เมื่อให้น้ำซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์แก่หนูทดลอง ปริมาณน้ำที่บริโภคเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญจาก 5.6 ± 0.6 มล. เป็น 7.4 ± 0.7 มล. (p < 0.001="" ,="" รูปที่="" 1c).="" ปริมาณน้ำซูโครสในชั่วข้ามคืน="" 4%="" เป็นปริมาณของเหลวที่บริโภคสูงเทียบเท่ากับ="" 14="" ±="" 7="" เปอร์เซ็นต์ของน้ำหนักตัว="" กลุ่ม="" sw="" ใช้น้ำข้ามคืนด้วยความถี่เดียวกับกลุ่ม="">
รูปที่ 1 A: เมาส์ DBA (Lt) และเมาส์ 2FG-pcy (Rt) B: ไตของ DBA (Lt) หรือ 2FG-pcy (Rt), แถบมาตราส่วน=1 ซม. C: ปริมาณน้ำที่บริโภคหรือน้ำซูโครส 4% ข้ามคืนหลังจากซาวน่าให้หนูทดลองเมื่ออายุ 8 สัปดาห์ ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD น=3 ＊＊＊ p < 0.001="" (การวิเคราะห์ทางสถิติใช้="" t-test="">
2. การกระตุ้นความร้อนอย่างเป็นระบบ (ซาวน่า)
ความเข้มข้นของความร้อนในห้องซาวน่าถูกกำหนดโดยอ้างอิงจากการศึกษาก่อนหน้านี้13) อย่างไรก็ตาม อุณหภูมิทางทวารหนั กของหนู pcy บางตัวเกิน 42 องศาเนื่องจากปริมาตรของตัวมันเล็กเมื่อเทียบกับหนู DBA ปกติและหนู 129X1/SvJ ดังนั้นจึงพยายามเพิ่มอุณหภูมิทางทวารหนักขึ้น 1 องศา แต่เนื่องจากข้อจำกัดในการควบคุมระบบซาวน่าแห้งด้วยรังสีอินฟราเรดไกล (จัดทำโดยมหาวิทยาลัยคาโกชิมะ) อุณหภูมิทางทวารหนักจึงตั้งขึ้นเป็นประมาณ 39 องศา ไม่พบรายงานความถี่ในการเข้าซาวน่าสำหรับ ADPKD; ดังนั้นความถี่ในการซาวน่าที่มีประสิทธิภาพขั้นต่ำ (สองครั้งต่อสัปดาห์) จึงถูกจัดตั้งขึ้นในการศึกษาเกี่ยวกับความสัมพันธ์ระหว่างการอาบน้ำซาวน่ากับโรคหลอดเลือดหัวใจและสาเหตุอื่นๆ ของการตายโดย Laukkanen et al.14) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง หนูได้รับการรักษาในห้องซาวน่าที่ 43 องศาเป็นเวลาสิบนาที และต่อจากนั้นที่ 37 องศาเป็นเวลา 35 นาที เพื่อยกระดับอุณหภูมิทางทวารหนักจาก 37.1 ± 0.1 องศาเป็น 39.3 ± 0.3 องศาโดยใช้ ระบบซาวน่าแห้งด้วยรังสีอินฟราเรดไกล อุณหภูมิทางทวารหนักของหนูเมาส์ถูกรักษาไว้ที่ประมาณ 390 องศาจนกว่าพวกมันจะถูกนำออกจากอุปกรณ์ซาวน่า กลุ่ม TS ได้เข้าซาวน่าเป็นเวลาสี่สัปดาห์ สองครั้งต่อสัปดาห์
3. ขั้นตอนการวิเคราะห์
ข้อมูลทางสรีรวิทยาได้มาจากหนูทุกตัวเมื่อสิ้นสุดระยะเวลาการศึกษาสี่สัปดาห์ เก็บตัวอย่างปัสสาวะเป็นเวลา 24 ชั่วโมงในกรงเมตาบอลิซึม และกำหนดปริมาณของเหลวที่ได้รับ เก็บตัวอย่างเลือดจาก vena cava ที่ด้อยกว่า และวัดระดับของครีเอตินินในพลาสมาและยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN) โดยใช้เครื่องวิเคราะห์อัตโนมัติทางชีวเคมีของ Hitachi 7180 (Hitachi High-Technologies Corporation, Tokyo, Japan) ด้วย Aqua-auto Kainos CRE -II ชุดทดสอบหรือชุดทดสอบ UN-II (Kainos, Tokyo, Japan) โดยใช้วิธีเอนไซม์
4. การศึกษาทางจุลกายวิภาค
ไตได้รับการแก้ไขด้วยสารละลายบัฟเฟอร์พาราฟอร์มัลดีไฮด์ฟอสเฟต 4 เปอร์เซ็นต์และฝังในพาราฟิน ตัวอย่างไตถูกแบ่งส่วนเป็นช่วง 2-µm และย้อมด้วย hematoxylin และ eosin (H&E) และวัดปริมาณซีสต์ของ tubules ใน 2 ส่วน/เมาส์ (ไตขวา) โดยใช้ ImageJ (National Institutes of Health, Bethesda, Maryland, สหรัฐอเมริกา). พื้นที่ที่มีเนื้อเยื่อฉีกขาดและฟองอากาศที่ระบุด้วยกำลังขยายที่สูงขึ้น (× 40) ถูกแยกออกจากการวิเคราะห์ดังที่รายงานไว้ก่อนหน้านี้15)
5. ซับแบบตะวันตก
โซเดียม dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) และซับซับถูกดำเนินการโดยใช้ขั้นตอนมาตรฐาน อะลิควอตที่มีโปรตีน 15 ไมโครกรัมอยู่ภายใต้ SDS-PAGE ใช้แอนติบอดีที่ต่อต้านโปรตีนต่อไปนี้: Hsp27 (1:1,000, sc-9012, เทคโนโลยีชีวภาพของซานตาครูซ), ฟอสโฟ Hsp27 (1:1,000, #2401S, เซลล์ เทคโนโลยีการส่งสัญญาณ), Total-Akt (1:1,000, #9272, เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์), phospho-Akt (1:1,000, #9275, เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์), Erk1/ 2 (1:1,000, #9102, เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์), ฟอสโฟ-Erk1/2 (1:1,000, #9101, เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์), mTOR (1:1, 000, #2972, เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์), ฟอสโฟ-mTOR (1:1,000, #2971, เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์), caspase 3 (1:500, ab4051, Abcam, Cambridge, UK ), แคสเปสแยก-3 (1:1,000, #9661, เทคโนโลยีการส่งสัญญาณของเซลล์) และ -แอกติน (1:1,000, sc-130656, ซานต้า ครูซ ไบโอเทคโนโลยี) ตรวจพบรอยเปื้อนโดยใช้ระบบตรวจจับการซับแบบตะวันตกของ ECL Prime (GE Healthcare, UK) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ข้อมูลแสดงการหาปริมาณสัมพัทธ์เทียบกับ -แอกติน ซึ่งใช้เป็นตัวควบคุมภายใน
6. การวิเคราะห์ทางสถิติ
สำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ ข้อมูลระหว่างกลุ่ม TS และ SW ถูกเปรียบเทียบโดยใช้การทดสอบ Mann-Whitney U เปรียบเทียบกลุ่มโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) ตามด้วยการทดสอบของ Tukey เพื่อระบุความแตกต่าง ความแตกต่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่ p < 0.05="" ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน="" (sd)="" หรือค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย="" (sem)="" graphpad="" prism="" 6="" (ซอฟต์แวร์="" graphpad,="" ซานดิเอโก,="" แคลิฟอร์เนีย,="" สหรัฐอเมริกา)="">
III ผลลัพธ์
1 การเปลี่ยนแปลงในพารามิเตอร์ทั่วไปเนื่องจากการซาวน่าซ้ำ
ตารางที่ 1 สรุปข้อมูลทางสรีรวิทยาที่ได้รับที่จุดสิ้นสุดของการทดลอง พบว่าน้ำหนักตัวของกลุ่ม SW สูงกว่ากลุ่ม TS อย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05)="" การรับประทานอาหารและการดื่มน้ำประปาของทุกกลุ่มมีความคล้ายคลึงกัน="" (ns)="" การบริโภคน้ำที่มีซูโครส="" 4="" เปอร์เซ็นต์ไม่ส่งผลต่อระดับน้ำตาลในเลือดในกลุ่ม="" ts="" และ="" sw="" (ns="" เทียบกับกลุ่มควบคุม)="" ออสโมลาลิตีในปัสสาวะของกลุ่ม="" ts="" และ="" sw="">
ตารางที่ 1 ข้อมูลทางสรีรวิทยาเมื่อสิ้นสุดการทดลอง
2. ผลของการทำซาวน่าซ้ำๆ ต่อการทำงานของไตและการขยายตัวของซีสต์ ตารางที่ 2 สรุปพารามิเตอร์การทำงานของไต ระดับครีเอตินินในพลาสมาหรือระดับยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN) ในกลุ่ม TS สูงกว่ากลุ่มควบคุมเล็กน้อย ในทางตรงกันข้าม การขยายตัวของซีสต์ในกลุ่ม TS ถูกยับยั้งเล็กน้อยเมื่อเทียบกับในกลุ่มควบคุม มีการขยายตัวของ tubules ที่คล้ายคลึงกันในทุกกลุ่มเมื่อสิ้นสุดการทดลอง การขยายตัวของซีสต์ที่เป็นตัวแทนของ tubules แสดงไว้ในรูปที่ 2
ตารางที่ 2 การทำงานของไตเมื่อสิ้นสุดการทดสอบ
3. การแสดงออกและฟอสโฟรีเลชั่นของ Hsps ในไตโดยการทำซาวน่าซ้ำๆ
เราทำการวิเคราะห์ Western blot ของ Hsps เพื่อกำหนดภาระความร้อนในไต (รูปที่ 3A) ตามที่เรารายงานไว้ก่อนหน้านี้13) กลุ่ม TS แสดงการแสดงออกของ Hsp27 เพิ่มขึ้นประมาณ 3.08-เท่า และการแสดงออกของ Hsp27 ที่มีฟอสโฟรีเลตเพิ่มขึ้นประมาณ 1.95-เท่า เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ไม่พบการเพิ่มขึ้นดังกล่าวในกลุ่ม SW เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม (รูปที่ 3A, D, E) อย่างไรก็ตาม การแสดงออกของ Hsp9{{10}} ในกลุ่ม TS และ SW ลดลงประมาณ 0.61-เท่าและ 0.51-เท่า ตามลำดับ เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (รูปที่ . 3A, C). Phosphorylated Hsp90 ถูกแสดงออกในทำนองเดียวกันในทุกกลุ่ม (รูปที่ 3A, B)
4. การแสดงออกของการเจริญเติบโตของเซลล์และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับขนาดในไต
ก่อนหน้านี้มีรายงานว่า Hsp90 ซึ่งเกี่ยวข้องกับการสร้างซีสต์และการเติบโตของ ADPKD มีการแสดงออกมากเกินไปในซีสต์ไตที่เกี่ยวข้องกับ PKD ของมนุษย์และในหนู 8) หลังจากการยืนยันการแสดงออกของ Hsp90 ที่ลดลงในไตในกลุ่ม TS และ WS เรายืนยันการแสดงออกของการเติบโตของเซลล์และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับขนาด16) การเปิดใช้งานเครือข่าย PI3K/ Akt/mTOR มากเกินไปเป็นเหตุการณ์ที่ทำให้เกิดโรคที่รู้จักกันดีซึ่งนำไปสู่การแพร่กระจายมากเกินไป ในโรคไต polycystic mTOR cascade ส่งเสริมการเจริญเติบโตของซีสต์โดยการเพิ่มการแพร่กระจาย ขนาด และการเผาผลาญของเซลล์เยื่อบุผิวท่อไต15), 17) การแสดงออกของ Erk1/2 ซึ่งเกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณของการเพิ่มจำนวนเซลล์เยื่อบุผิวซีสต์18) ลดลงในกลุ่ม TS และ SW เมื่อเปรียบเทียบกับในกลุ่มควบคุม (P < 0.05,="" ts="" เทียบกับกลุ่มควบคุม;="" รูปที่="" 4a,="" d="" ,="" อี).="" อย่างไรก็ตาม="" ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของ="" akt="" และ="" mtor="" (รูปที่="" 4a,="" b,="" c,="" f,="">
รูปที่ 2 A: photomicrographs ที่เป็นตัวแทน (×2.5) ของส่วนไตที่ย้อมด้วย HE แถบมาตราส่วน: 300 μm B: สังเกตปริมาณการขยายตัวของถุงน้ำในหลอดอาหารในทุกกลุ่ม ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM n=3 สำหรับแต่ละกลุ่ม
รูปที่ 3 การแสดงออกของ Hsps ในไตทั้งหมด การแสดงออกของ Hsp90 ของกลุ่ม TS หรือกลุ่ม SW ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่ม PKD (AC) ฟอสฟอรีเลชั่นของ Hsp27 มีแนวโน้มที่จะเพิ่มขึ้นโดยการทำซาวน่าซ้ำๆ แต่ไม่พบในการดื่มน้ำซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์ที่เติม (A, D, E) ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM n=3 สำหรับแต่ละกลุ่ม
5. ผลของซาวน่าหรือน้ำซูโครสร้อยละ 4 ต่อวิถีการตายของเซลล์
แคสเปสถูกแสดงออกเป็นสารตั้งต้นที่ไม่ได้ใช้งานภายในเซลล์ และพวกมันถูกกระตุ้นเพื่อตอบสนองต่อสิ่งเร้าการตายของเซลล์ที่หลากหลาย การกระตุ้นเกี่ยวข้องกับไดเมอไรเซชันและบ่อยครั้งโอลิโกเมอไรเซชันของโปรแคสเปส ตามด้วยการตัดแยกเป็นยูนิตย่อยขนาดเล็กและยูนิตย่อยขนาดใหญ่19) แคสเปสที่เปิดใช้งานจะแยกสารตั้งต้นเป้าหมายที่เฉพาะเจาะจงและนำไปสู่การตายของเซลล์ มีสองวิธีในการตรวจจับการกระตุ้นของแคสเปส วิธีหนึ่งคือการใช้แอนติบอดี และอีกวิธีหนึ่งคือการใช้สารตั้งต้นของแคสเปส ในวิธีการใช้แอนติบอดี มันสามารถตรวจพบได้โดยปริมาณของสารตั้งต้นที่ยังไม่ได้ล้างและ/หรือแคสเปสที่ผ่า Caspase3 ซึ่งเป็นหนึ่งในเอฟเฟกต์ caspases เป็นตัวควบคุมหลักของการตายของเซลล์ แคสเปสที่กระตุ้น-3สามารถแยกโปรตีนโครงสร้างและโปรตีนควบคุมได้หลายตัว ซึ่งมีความสำคัญต่อการอยู่รอดและการบำรุงรักษาของเซลล์ เพื่อประเมินว่าการตายของเซลล์อะพอพโทซิสได้รับผลกระทบจากการอบซาวน่าหรือไม่ เราวัดปริมาณการแสดงออกของโปรแคสเปส3 และแคสเปส3 ที่แยกออกโดยวิธีเวสเทิร์นบล็อตติง รูปที่ 5 แสดงให้เห็นว่ามีกิจกรรม caspase3 เพิ่มขึ้นเล็กน้อยในกลุ่ม TS และ SW เมื่อเทียบกับในกลุ่มควบคุม
รูปที่ 4 การแสดงออกของการเจริญเติบโตของเซลล์และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับขนาดในไตทั้งหมด กลุ่ม TS มีการแสดงออกที่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญของ Erk1/2 เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (A, D, E) Akt และ mTOR เป็นนิพจน์ที่คล้ายกันในทุกกลุ่ม (AC, F, G) แสดงข้อมูลหมายถึง ± SEM n=3 สำหรับแต่ละกลุ่ม ＊ p <>
IV อภิปราย
ในการศึกษานี้ เราตรวจสอบผลของการแทรกแซงซาวน่าซ้ำในแบบจำลองเมาส์ PKD ภาระความร้อนที่ใช้ในการทดลองนี้ขึ้นอยู่กับการตั้งค่าอุณหภูมิที่ใช้ในการวิจัยขั้นพื้นฐานเกี่ยวกับการบำบัดด้วยซาวน่า ซึ่งแสดงให้เห็นว่ามีผลชัดเจนต่อระบบหัวใจและหลอดเลือดในมนุษย์20), 21) มีความแปรปรวนบางอย่างระหว่างบุคคลโดยคำนึงถึง24-การรับประทานอาหารหรือการดื่มน้ำ แต่ไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญ อย่างไรก็ตาม น้ำหนักตัวและการเพิ่มของน้ำหนักเมื่อสิ้นสุดการทดลองในกลุ่ม TS นั้นต่ำกว่าในกลุ่ม SW อย่างมีนัยสำคัญ นอกจากนี้ ระดับครีเอตินีนและ BUN ในกลุ่ม TS ยังสูงกว่ากลุ่มควบคุมและกลุ่ม SW เล็กน้อย แม้ว่าความแตกต่างจะไม่มีนัยสำคัญ การทดลองเบื้องต้นยืนยันว่าหนูไม่กินน้ำประปาในปริมาณที่เพียงพอหลังการทำซาวน่า แต่จะกินน้ำซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์อย่างแข็งขัน ดังนั้นเราจึงให้น้ำซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์แก่หนูเพื่อป้องกันการขาดน้ำจากห้องซาวน่า อย่างไรก็ตาม กิจกรรมของหนูทดลองลดลงทันทีหลังการรักษาในห้องซาวน่า และไม่พบพฤติกรรมการดื่มอย่างกระฉับกระเฉง ห้องซาวน่าจึงอาจทำให้ร่างกายทำงานหนักเกินไปจนกว่าหนูจะเคยชินกับความร้อนอย่างเต็มที่ ยิ่งไปกว่านั้น พวกเขาไม่ได้รับปริมาณของเหลวที่จำเป็นเสมอไปหลังการซาวน่า และการคายน้ำในระยะสั้นหลังจากซาวน่าอาจนำไปสู่ความผิดปกติของไต
รูปที่ 5 การแสดงออกของ procaspase-3/cleaved caspase-3 ในไตทั้งหมด ระดับการแสดงออกของ pro-caspase3 ซึ่งเป็นสารตั้งต้นที่ไม่ใช้งานและ caspase3 แยกซึ่งเป็นดัชนีการเปิดใช้งานถูกตรวจพบโดย western blotting (A) การแสดงออกของ pro-caspase-3 ในกลุ่ม TS มีแนวโน้มลดลงเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (p=0.01, B) อย่างไรก็ตาม ไม่พบความแตกต่างในทุกกลุ่มในกิจกรรมของแคสเปส-3 (C, D) แสดงข้อมูลหมายถึง ± SEM n=3 สำหรับแต่ละกลุ่ม
เป็นที่ทราบกันดีว่าวิถีการถ่ายโอนสัญญาณและปัจจัยการถอดรหัสหลายอย่างมีการเปลี่ยนแปลงในไตเรื้อรังเมื่อเทียบกับไตปกติ Hsp90 ซึ่งเป็นโปรตีนช็อตจากความร้อนที่สำคัญและมีมากในเซลล์ แสดงออกอย่างมากในเซลล์ ADPKD; การเจริญเติบโตของซีสต์ลดลงโดยการลดการทำงานของ Hsp90 ด้วยตัวยับยั้ง Hsp90 STA-2842 8) เกี่ยวกับการบำบัดด้วยความร้อน (การบำบัดด้วย WAON) และการแสดงออกของ Hsp90 ได้รับการยืนยันแล้วว่า Hsp90 ได้รับการควบคุมผ่านการกระตุ้นวิถี Akt/eNOS/NO 22) อย่างไรก็ตาม ดังที่แสดงในรูปที่ 3C กลุ่ม TS และ SW แสดงการแสดงออกของ Hsp90 ที่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม และการแสดงออกของ Erk ซึ่งเกี่ยวข้องกับการสร้างซีสต์และการเพิ่มจำนวนก็ลดลงด้วย23)
Vasopressin เป็นปัจจัยสำคัญที่ส่งผลต่อการเติบโตของซีสต์ใน ADPKD24) Hypertonicity ของของเหลวนอกเซลล์ที่เกิดจากการขาดน้ำเล็กน้อยทำให้มีการหลั่ง vasopressin เพิ่มขึ้น25), 26) แม้ว่าผลของการดื่มน้ำที่เพิ่มขึ้นต่อความก้าวหน้าของ ADPKD ยังไม่ได้รับการอธิบายอย่างชัดเจน แต่การดื่มน้ำอย่างต่อเนื่องโดยการบริโภคน้ำที่เพิ่มขึ้นนั้นคาดว่าจะเป็นประโยชน์ต่อผู้ป่วยบางรายที่เป็นโรค PKD โดยการจำกัดผลที่เป็นอันตรายของ vasopressin ต่อการเจริญเติบโตของถุงน้ำในไต27) อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีรายงานใดๆ เกี่ยวกับผลกระทบของการบริโภคน้ำซูโครสต่อ ADPKD แม้ว่าการพูดคุยระหว่างฟรุกโตส (จากน้ำฟรุกโตส 10 เปอร์เซ็นต์) และวาโซเพรสซินจะแสดงให้เห็นถึงการขยายโรคไตที่เกิดจากภาวะขาดน้ำ 28) มีความเป็นไปได้ต่ำที่ปริมาณน้ำซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์จะทำให้เกิดความเสียหายต่อไตมากขึ้น โดยพิจารณาจากอัตราการเพิ่มของน้ำหนักและระดับน้ำตาลในเลือดต่ำในกลุ่ม SW ที่แสดงในตารางที่ 1 นอกจากนี้ ดังแสดงในรูปที่ 1 น้ำซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์ ปริมาณการบริโภคสูงกว่าน้ำประปาอย่างมีนัยสำคัญ และค่าออสโมลาลิตีของปัสสาวะต่ำทั้งในกลุ่ม TS และ SW ซึ่งบ่งชี้ว่าการดื่มน้ำในปริมาณมากเป็นมาตรการที่มีประสิทธิภาพ การบริโภคน้ำซูโครส 4% หลังจากซาวน่าไม่ใช่ปัจจัยที่ทำให้การทำงานของไตแย่ลง และปริมาณน้ำที่กระตุ้นอาจส่งผลให้การแสดงออกของ Hsp90 ลดลง ไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญในการเจริญเติบโตของซีสต์หลังจากการแทรกแซงซาวน่าเป็นเวลา 4-สัปดาห์ แต่การแทรกแซงในระยะยาวอาจแสดงผลที่ชัดเจนมากขึ้น
การแสดงออกของ Hsp27 ในกลุ่ม SW มีความคล้ายคลึงกับนิพจน์ในกลุ่มควบคุม แต่เพิ่มขึ้นในกลุ่ม TS หน้าที่หลักของ Hsp27 คือการป้องกันการตายของเซลล์ 29) เรายังรายงานด้วยว่าการกระทำของ Hsp27 นี้เป็นหนึ่งในกลไกที่เป็นรากฐานของผลกระทบต่อเซลล์ประสาทของการกระตุ้นด้วยความร้อนอย่างทั่วร่างกายอย่างไม่รุนแรงซ้ำๆ ต่อโมเดลโรคไตเรื้อรังในหนูเมาส์13) การตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิสที่ผิดปกติที่สังเกตพบในเซลล์เยื่อบุผิวที่มีซิสต์และเซลล์เยื่อบุผิวแบบท่อที่ไม่ใช่ซีสต์ รวมทั้งในเซลล์ภายในโกลเมอรูไล เชื่อว่ามีส่วนในการขยายซีสต์ใน PKD29 ของมนุษย์ -31) อะพอพโทซิสของ ADPKD มีบทบาทสำคัญในการพัฒนาของโรคอย่างไม่ต้องสงสัย แต่การตายของเซลล์ไม่ได้เป็นเพียงตัวขับเคลื่อนเดียวของการเกิด cystogenesis สิ่งที่เชื่อว่าจะทำให้เกิดโรคคือการกระทำเสริมกันของการตายของเซลล์, การเพิ่มจำนวนเซลล์ชดเชย, และออโตฟาจีที่ถูกรบกวน32), 33) ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา Yanda et al.34) ได้แสดงให้เห็นว่า Hsp27 ที่อธิบายข้างต้น มีบทบาทต่อต้าน apoptotic และเกี่ยวข้องกับการเติบโตของซีสต์ใน ADPKD Hsp27 ที่เกิดจากความร้อนอาจไม่จำเป็นต้องเกี่ยวข้องกับการป้องกันไตใน ADPKD
ข้อจำกัดของการศึกษานี้คือไม่สามารถจัดหาขนาดตัวอย่างที่เพียงพอได้เนื่องจากแบบจำลองเมาส์ ADPKD มีราคาสูง ดังนั้นจึงไม่สามารถรับผลการทดสอบที่ชัดเจนได้ อย่างไรก็ตาม การค้นพบของเราบ่งชี้ถึงความเป็นไปได้ของความเสียหายของไต แม้ว่าจะมีการแทรกแซงซาวน่าระยะสั้นในการศึกษานี้ มีข้อจำกัดเกี่ยวกับความสามารถในการทำซ้ำของผลลัพธ์เหล่านี้ในมนุษย์เนื่องจากข้อมูลเหล่านี้ได้มาจากหนูทดลองรุ่น PKD อย่างไรก็ตาม เพื่อป้องกันความเสียหายของไตจากซาวน่า การดื่มน้ำทันทีหลังจากซาวน่าถือว่ามีประโยชน์แม้ในสถานการณ์ทางคลินิก
รูปที่ 6 แสดงผลการศึกษา ใน ADPKD กิจกรรมของเส้นทาง MEK/ERK (รูปที่ 6 เส้นทึบ: ทางเดินที่เคลื่อนไหว) ที่เกิดจากความเข้มข้นของ Ca2 ในเซลล์บวกต่ำกว่า (รูปที่ 6 เส้นประ: เส้นทางลดลง) ต่อการกลายพันธุ์ของยีน PKD และเป็นผลจาก cAMP ผ่านทาง vasopressin receptor 2 ทั้งสองวิถีของการเพิ่มจำนวนเซลล์โดยวิถี B-Raf/MEK/ERK (รูปที่ 6 เส้นทึบ: วิถีทางที่แอ็คทีฟ) มีความเกี่ยวข้องกัน35) การกลายพันธุ์ในยีน PKD (PKD1 และ PKD2) ขัดขวาง Ca2 ภายในเซลล์บวกกับกฎระเบียบ เซลล์เยื่อบุผิวที่แยกได้จากซีสต์ไต ADPKD ของมนุษย์มีระดับ Ca2 ภายในเซลล์ต่ำกว่าเซลล์ในเนื้อเยื่อไตปกติ การหยุดชะงักของ Ca2 ภายในเซลล์บวกสภาวะสมดุลและการส่งสัญญาณ Ca2 plus ช่วยลด Akt และเปิดใช้งานเส้นทาง MEK/ERK ทาง 36) Arginine vasopressin กระตุ้นตัวรับ vasopressin V2 และเพิ่มการสังเคราะห์แคมป์37) ในเซลล์ PKD ค่ายเปิดใช้งานเส้นทาง B-Raf/MEK/ERK และส่งผลต่อการเติบโตของซีสต์38) 39)
รูปที่ 6 แผนผังแสดงผลกระทบของห้องซาวน่าและ/หรือน้ำดื่มต่อการเจริญเติบโตของซีสต์หรือการตายของเซลล์ ใน ADPKD เป็นที่ทราบกันดีว่าวิถีของการเพิ่มจำนวนเซลล์รวมถึงวิถีของ MEK/ERK (เส้นทึบ: วิถีที่เคลื่อนไหว) โดยมี Ca2 ภายในเซลล์ที่ลดลงบวกกับความเข้มข้น (เส้นประ: วิถีที่ลดลง) เนื่องจากการกลายพันธุ์ในยีน PKD และ B-Raf/MEK / ทางเดิน ERK เป็นผลจากแคมป์ผ่านตัวรับวาโซเพรสซิน 2 (เส้นทึบ: ทางเดินที่ใช้งาน)35) ช่วงการรับความร้อนของกลุ่ม TS (ห่างกัน 2 ถึง 3 วัน) และปริมาณน้ำที่สูงของกลุ่ม SW (ความถี่และระยะเวลาในการดื่มน้ำซูโครส 4 เปอร์เซ็นต์เท่ากับในกลุ่ม TS) ในการทดลองนี้ไม่เพียงพอ ที่จะมีผลต่อการส่งสัญญาณของเซลล์ PKD
ในการทดลองนี้ กำหนดช่วงการรับความร้อนของกลุ่ม TS เป็น 2 ถึง 3 วัน และดำเนินการปริมาณน้ำจำนวนมากสำหรับกลุ่ม SW ที่ความถี่และเวลาเดียวกันกับกลุ่ม TS การศึกษาก่อนหน้านี้ระบุว่าการให้ความร้อนที่เพียงพอเพียงครั้งเดียวช่วยเพิ่มการแสดงออกของ Hsp ในเนื้อเยื่อไต อย่างไรก็ตาม จาก 8 ชั่วโมงถึง 24 ชั่วโมง มันถึงจุดสูงสุดและกลับสู่เส้นฐานที่ 72 ชั่วโมง40) การดื่มน้ำปริมาณมากจะลดการแสดงออกของตัวรับ V2 ในเนื้อเยื่อไตของ PKD และยับยั้งเส้นทาง B-Raf/MEK/ERK27) โปรโตคอลการโหลดความร้อนและน้ำในการทดลองนี้ไม่เพียงพอที่จะได้รับผลที่ชัดเจนสำหรับ ADPKD
บทสรุป V
ผลของการทดลองเหล่านี้ได้รับการแนะนำว่าภาระความร้อนในร่างกายที่เกิดจากซาวน่ามีความเสี่ยงต่อภาวะขาดน้ำชั่วคราวและความผิดปกติของไตที่เกี่ยวข้อง และอาจกระตุ้นการสร้างซีสต์และการเพิ่มจำนวนด้วยการแสดงออกของ Hsp27 ที่เพิ่มขึ้น ในทางกลับกัน หากดื่มน้ำในปริมาณที่เหมาะสมทันทีหลังจากซาวน่า อาจป้องกันภาวะขาดน้ำและยับยั้งการเติบโตของซีสต์ได้ จากผลการศึกษานี้ ปัจจัยสามประการต่อไปนี้ถือว่ามีความสำคัญสำหรับห้องซาวน่าสำหรับ ADPKD 1. ควรตรวจสอบความผันผวนของปริมาณอาหารและน้ำหนักอย่างสม่ำเสมอ 2. ความสูงของอุณหภูมิร่างกายแกน และเวลาการเก็บรักษาของอุณหภูมิร่างกายแกนสูง ควรเป็นในลักษณะที่ภาระความร้อนไม่สูงพอที่จะทำให้ความแข็งแรงทางกายภาพหมด 3. ควรดื่มน้ำในปริมาณที่เพียงพอทันทีหลังจากซาวน่า โดยทำตามขั้นตอนเหล่านี้ คาดว่าการบำบัดด้วยซาวน่าสามารถช่วยยับยั้งการลุกลามของ ADPKD และลดการทำงานของไตที่ลดลงเนื่องจากภาระความร้อน
การรับทราบ
งานนี้ได้รับการสนับสนุนส่วนหนึ่งโดยทุนวิจัยจากกระทรวงศึกษาธิการ วัฒนธรรม กีฬา วิทยาศาสตร์ และเทคโนโลยีของญี่ปุ่น (18K10699)
ขัดผลประโยชน์
ผู้เขียนไม่มีการประกาศความขัดแย้งทางผลประโยชน์ทางการเงินหรืออย่างอื่น
อ้างอิง
1）Higashihara E, Nutahara K, Kojima M, et al: ความชุกและการพยากรณ์โรคของไตของโรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal ที่ได้รับการวินิจฉัยในญี่ปุ่น เนฟรอน 1998; 80: 421-427.
2) Chebib FT, Torres VE: โรคไต polycystic ที่โดดเด่นใน autosomal: หลักสูตรแกนกลาง 2016 Am J Kidney Dis 2016; 67: 792-810.
3）Blair HA: Tolvaptan: การทบทวนโรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal ยาเสพติด 2019; 79: 303-313.
4）Kamioka H, Nobuoka S, Iiyama J: ภาพรวมของการทบทวนอย่างเป็นระบบด้วยการวิเคราะห์เมตาจากการทดลองแบบสุ่มที่มีกลุ่มควบคุมของการบำบัดด้วยการบำบัดด้วยการบำบัดด้วยการบำบัดด้วยการบำบัดด้วยการบำบัดด้วยการบำบัดด้วยสปาตั้งแต่ปี 2000 ถึง 2019 Int J Gen Med 2020; 13: 429-442.
5）Sreedharan R, Van Why SK: โปรตีนช็อตความร้อนในไต Pediatr Nephrol 2016; 31: 1561-1570.
6) Chebotareva N, Bobkova I, Shilov E: โปรตีนช็อกจากความร้อนและโรคไต: มุมมองของการรักษาด้วย HSP พี่เลี้ยงความเครียดของเซลล์ 2017; 22: 319-343.
7) Samali A, Cotter TG: โปรตีนช็อตด้วยความร้อนช่วยเพิ่มความต้านทานต่อการตายของเซลล์ Exp เซลล์ Res 1996; 223: 163-170.
8) Seeger-Nukpezah T, Proia DA, Egleston BL, et al: การยับยั้ง HSP90 พี่เลี้ยงช่วยชะลอการเติบโตของซีสต์ในรูปแบบเมาส์ของโรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal Proc Natl Acad Sci สหรัฐอเมริกา 2013; 110: 12786-12791.
9) Smithline ZB, Nikonova AS, Hensley HH, et al: การยับยั้งโปรตีนช็อกความร้อน 90 (HSP90) จำกัดการสร้างซีสต์ในตับที่เกิดจากการลบ Pkd1 แบบมีเงื่อนไขในหนูทดลอง PLOS หนึ่ง 2014; 9: e114403.
10） Takahashi H, Calvet JP, Dittemore-Hoover D, et al: แบบจำลองทางพันธุกรรมของโรคไต polycystic แบบค่อยเป็นค่อยไปในหนูเมาส์ J Am Soc Nephrol 1991; 1: 980-989.
11）Nagao S, Kurita M, Yoshihara D, Yamaguchi T: แบบจำลองสัตว์สำหรับโรคไต polycystic ของมนุษย์ ประสบการณ์ Anim 2012; 61: 477-488.
12）Wataru K, Iwashita Y, Nakamura T, Iiyama J: ผลของการกระตุ้นด้วยความร้อนต่อหนูแบบจำลองการบาดเจ็บจากการขาดเลือดขาดเลือด- reperfusion วารสารญี่ปุ่นของตัวแทน Electrophysical 2018; 25: 34-41.
13）Iwashita Y, Kuwabara T, Hayata M, et al: การบำบัดด้วยความร้อนแบบระบบที่ไม่รุนแรงช่วยแก้ไขความผิดปกติของไตในรูปแบบหนูของโรคไตเรื้อรัง Am J Physiol ไต Physiol 2016; 310: ฉ1206-1215.
14）Laukkanen T, Khan H, Zaccardi F, Laukkanen JA: ความสัมพันธ์ระหว่างการอาบน้ำซาวน่ากับเหตุการณ์การเสียชีวิตจากโรคหัวใจและหลอดเลือดและการเสียชีวิตจากทุกสาเหตุ JAMA Intern Med 2015; 175: 542-548.
15） Holditch SJ, Brown CN, Atwood DJ, et al: การศึกษาสารยับยั้งไซโรลิมัสและ mTOR kinase ในรูปแบบเมาส์ hypomorphic Pkd1 ของโรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal Am J Physiol ไต Physiol 2019; 317: ฉ187-f196.
16） Distefano G, Boca M, Rowe I, et al: Polycystin-1 ควบคุมฟอสโฟรีเลชั่นที่ขึ้นกับไคเนสที่ควบคุมสัญญาณภายนอกเซลล์ของ tuberin เพื่อควบคุมขนาดเซลล์ผ่าน mTOR และเอฟเฟกต์ดาวน์สตรีม S6K และ 4EBP1 โมล เซลล์ ไบโอล 2009; 29: 2359-2371.
17） Margaria JP, Campa CC, De Santis MC, et al: วิถี PI3K/Akt/mTOR ในโรคไต polycystic: ปฏิสัมพันธ์ที่ซับซ้อนกับ polycystins และ primary cilium สัญญาณมือถือ 2020; 66: 109468.
18） Yamaguchi T, Reif GA, Calvet JP, Wallace DP: Sorafenib ยับยั้งการกระตุ้น ERK ที่ขึ้นกับ cAMP การเพิ่มจำนวนเซลล์ และการเติบโตของซีสต์ในหลอดทดลองของเซลล์เยื่อบุผิว ADPKD cyst ของมนุษย์ Am J Physiol ไต Physiol 2010; 299: ฉ944-951.
19）Shi Y: การเปิดใช้งาน Caspase: ทบทวนแบบจำลองระยะใกล้ที่เหนี่ยวนำ เซลล์ 2004; 117: 855-858.
20）Tei C, Horikiri Y, Park JC, et al: การปรับปรุงระบบไหลเวียนโลหิตแบบเฉียบพลันโดยการขยายหลอดเลือดด้วยความร้อนในภาวะหัวใจล้มเหลว การไหลเวียน 2538; 91: 2582-2590.
21）Ikeda Y, Biro S, Kamogawa Y, et al: การบำบัดด้วยความร้อนซ้ำจะควบคุมการแสดงออกของการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ที่บุผนังหลอดเลือดในหลอดเลือดแดงในหนูแฮมสเตอร์สีทองของซีเรีย Jpn Circ J 2001; 65: 434-438.
22）Miyauchi T, Miyata M, Ikeda Y, et al: การบำบัดด้วย Waon ควบคุม Hsp90 และนำไปสู่การสร้างเส้นเลือดใหม่ผ่านวิถีการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ของ Akt-endothelial ในภาวะขาดเลือดขาดเลือดของหนูหลัง เซอร์เจ 2012; 76: 1712-1721.
23）Dou F, Yuan LD, Zhu JJ: โปรตีนช็อตด้วยความร้อน 90 ควบคุมกิจกรรม ERK โดยอ้อมโดยส่งผลต่อการเผาผลาญโปรตีน Raf Acta Biochim Biophys Sin (เซี่ยงไฮ้) 2005; 37: 501-505.
24） Wang X, Wu Y, Ward CJ, et al: Vasopressin ควบคุมการเจริญเติบโตของซีสต์ในโรคไต polycystic โดยตรง เจ แอม ซ็อก เนโฟรล 2008; 19: 102-108.
25）Bouby N, Fernandes S: ภาวะขาดน้ำเล็กน้อย วาโซเพรสซิน และไต: การศึกษาในสัตว์และมนุษย์ Eur J Clin Nutr 2003; 57 (เสริม) 2: S39-46.
26）Montain SJ, Laird JE, Latzka WA, Sawka MN: การตอบสนองของ Aldosterone และ vasopressin ในความร้อน: ระดับความชุ่มชื้นและผลกระทบของความเข้มข้นของการออกกำลังกาย Med Sci Sports Exerc 1997; 29: 661-668.
27）Nagao S, Nishii K, Katsuyama M, et al: การบริโภคน้ำที่เพิ่มขึ้นช่วยลดความก้าวหน้าของโรคไต polycystic ในหนู PCK เจ แอม ซ็อก เนโฟรล 2549; 17: 2220-2227.
28）García-Arroyo FE, Tapia E, Blas-Marron MG, et al: Vasopressin ไกล่เกลี่ยความเสียหายของไตที่เกิดจากฟรุกโตส rehydration ในหนูที่ขาดน้ำซ้ำๆ Int J จิตเวชศาสตร์ 2017; 13: 961-975.
29）Wang X, Chen M, Zhou J, Zhang X: HSP27, 70 and 90, โปรตีนต่อต้านเซลล์มะเร็ง, ในการรักษาโรคมะเร็งทางคลินิก (รีวิว) Int J Oncol 2014; 45: 18-30.
30）Woo D: การตายของเซลล์และการสูญเสียเนื้อเยื่อไตในโรคไต polycystic N Engl J Med 1995; 333: 18-25.
31）Goilav B: Apoptosis ในโรคไต polycystic. Biochim Biophys Acta 2011; 1812: 1272-1280.
32）Peintner L, Borner C: บทบาทของการตายของเซลล์ในการพัฒนาของโรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal (ADPKD) ความละเอียดของเนื้อเยื่อเซลล์ 2017; 369: 27-39.
33）Nowak KL, Edelstein CL: Apoptosis และ autophagy ในโรคไต polycystic (PKD) สัญญาณมือถือ 2020; 68: 109518.
34）Yanda MK, Liu Q, Cebotaru L: กลยุทธ์ที่เป็นไปได้ในการลดซีสต์ในโรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal ด้วยตัวแก้ไข CFTR เจ จิตเวช เคมี 2018; 293: 11513-11526.
35） Mohieldin AM, Upadhyay VS, Ong ACM, Nauli S: โรคไต polycystic ที่โดดเด่นของ autosomal: พยาธิสรีรวิทยาและการรักษา, Marciano P, Lanza DM (eds), Nova Science Publishers, Inc., 2013; หน้า 1-32.
36） Yamaguchi T, Hempson SJ, Reif GA, et al: แคลเซียมช่วยฟื้นฟูฟีโนไทป์ของการเพิ่มจำนวนตามปกติในเซลล์เยื่อบุผิวโรคไต polycystic ของมนุษย์ เจ แอม ซ็อก เนโฟรล 2549; 17: 178-187.
37）Inoue T, Noguchi H, Tomita K: ผลกระทบทางสรีรวิทยาของ vasopressin และ atrial natriuretic peptide ในท่อรวบรวม โรคหัวใจและหลอดเลือด Res 2001; 51: 470-480.
38） Yamaguchi T, Wallace DP, Magenheimer BS, et al: การจำกัดแคลเซียมช่วยให้เปิดใช้งานแคมป์ของเส้นทาง B-Raf/ ERK โดยเปลี่ยนเซลล์เป็นฟีโนไทป์ที่กระตุ้นการเติบโตที่ขึ้นกับค่าย เจ จิตเวช เคมี 2004; 279: 40419-40430.
39） Calvet JP: การยับยั้ง MEK ถือเป็นสัญญาสำหรับโรคไต polycystic เจ แอม ซ็อก เนโฟรล 2549; 17: 1498- 1500.
40） Redaelli CA, Wagner M, Kulli C, et al: Hyperthermia กระตุ้นการแสดงออกของ HSP สัมพันธ์กับความสามารถในการให้ isograft ไตของหนูที่ได้รับการปรับปรุงและการอยู่รอดในไตที่เก็บเกี่ยวจากผู้บริจาคที่ไม่หัวใจเต้น Transpl Int 2001; 14: 351-360.
