กลยุทธ์ที่ใช้ Aptamer เพื่อเพิ่มภูมิคุ้มกันบำบัดใน TNBC ตอนที่ 2

นอกจากนี้ แอพแทมเมอร์ยังทนต่อการดัดแปลงทางเคมีหลายอย่างที่ปรับปรุงประสิทธิภาพการกำหนดเป้าหมาย รายละเอียดทางเภสัชจลนศาสตร์ และความเสถียรในสภาพแวดล้อมทางชีวภาพ ซึ่งจำเป็นสำหรับการใช้งานในร่างกาย [47] ตามที่ได้ตรวจสอบอย่างกว้างขวางในที่อื่นๆ [27,48] การดัดแปลงที่ใช้มากที่สุดที่ใช้กับแอพทาเมอร์ ไม่ว่าจะในระหว่าง SELEX หรือหลัง SELEX เพื่อเพิ่มความต้านทานต่อนิวคลีเอส ได้แก่ (รูปที่ 3): การแทนที่หมู่ 2 0 -OH ของ ไรโบสที่มีหมู่ฟลูออโร เมทอกซี ไทออลหรืออะมิโน การจำกัดหรือการทำให้เป็นวัฏจักรของปลายโอลิโกนิวคลีโอไทด์ การแทนที่แกนฟอสโฟไดเอสเทอร์ด้วยแกนฟอสโฟโรไทโอเอต และการแนะนำของกรดนิวคลีอิกที่ถูกล็อค ยิ่งไปกว่านั้น L-aptamers ที่เรียกว่า spiegelmers สามารถสร้างขึ้นได้ซึ่งนิวคลีเอสไม่รู้จักเพราะพวกมันคืออิแนนทิโอเมอร์ของกรดนิวคลีอิกตามธรรมชาติ การดัดแปลงทางเคมียังนำไปใช้เพื่อเอาชนะการกรองไตอย่างรวดเร็วของแอปแทมเมอร์ขนาดเล็กด้วยการรวมโมเลกุลขนาดใหญ่เกินไปเข้าด้วยกัน เช่น พอลิเอทิลีนไกลคอล (PEG) หรือคอเลสเตอรอล ซึ่งจะเป็นการเพิ่มเวลาการไหลเวียนของพวกมันโดยไม่กระทบต่อการเข้าถึงเป้าหมาย วิธีการที่ซับซ้อนยังได้รับการพัฒนาเพื่อเชื่อม aptamers ทางเคมีกับการบำบัดแบบทุติยภูมิในการบำบัดแบบผสมผสาน และที่น่าสนใจคือมีการสำรวจกลยุทธ์ที่เป็นนวัตกรรมเพื่อแนะนำกลุ่มสารเคมีแปลกใหม่ในโมเลกุล aptamer เพื่อขยายการทำงานและเอาชนะการขาดความหลากหลายทางเคมีในกรดนิวคลีอิก [49] ].

นิวคลีเอสหมายถึงเอนไซม์ที่สามารถเร่งปฏิกิริยาไฮโดรไลซิสของ RNA หรือ DNA และมีหน้าที่ทางชีวภาพที่หลากหลาย ในระบบภูมิคุ้มกัน นิวคลีเอสเป็นเครื่องมือสำคัญในการจดจำและกำจัดการติดเชื้อไวรัส หลังจากที่ไวรัสเข้าสู่เซลล์ มันจะปล่อย RNA หรือ DNA เข้าไปในเซลล์ โมเลกุลของกรดนิวคลีอิกเหล่านี้จะถูกจดจำและไฮโดรไลซ์โดยนิวคลีเอสของเซลล์ที่ติดเชื้อ ซึ่งจะช่วยป้องกันการจำลองแบบของไวรัสและการแพร่กระจายของการติดเชื้อ

นอกจากนี้ นิวคลีเอสยังเกี่ยวข้องกับการควบคุมการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและแบบปรับตัว นิวคลีเอสสามารถควบคุมระดับการแสดงออกของยีนโดยควบคุมการย่อยสลายและความเสถียรของ RNA หรือ DNA ในเซลล์ภูมิคุ้มกัน นิวคลีเอสควบคุมการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน เช่น การตายของเซลล์ การนำเสนอแอนติเจน และการแยกความแตกต่างของทีเซลล์

โดยรวมแล้ว นิวคลีเอสมีบทบาทสำคัญในการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน รู้จักการติดเชื้อไวรัส ปรับการแสดงออกของยีน และปรับการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน ดังนั้นจึงมีกลไกหลายอย่างสำหรับผลกระทบต่อภูมิคุ้มกัน จากมุมมองนี้จำเป็นต้องให้ความสนใจกับการปรับปรุงภูมิคุ้มกัน Cistanche ช่วยเพิ่มภูมิคุ้มกัน Cistanche อุดมไปด้วยสารต้านอนุมูลอิสระหลายชนิด เช่น วิตามินซี วิตามินซี แคโรทีนอยด์ ฯลฯ ส่วนผสมเหล่านี้สามารถกำจัดอนุมูลอิสระ ลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่น และเพิ่มภูมิคุ้มกัน ความต้านทานของระบบภูมิคุ้มกัน

คลิกประโยชน์ของ cistanche tubulosa

อีกกลยุทธ์หนึ่งเพื่อปรับปรุงความสัมพันธ์ที่มีผลผูกพัน การเลือกเป้าหมาย และชีวปริมาณออกฤทธิ์ในร่างกายของแอปทาเมอร์ถูกแสดงโดยการสร้างแอปทาเมอร์ที่ปรับเปลี่ยนอัตราออกช้า (SOMAmers) สิ่งเหล่านี้คือ DNA aptamers ที่มีนิวคลีโอไทด์ที่ดัดแปลงทางเคมีซึ่งทำหน้าที่ที่ 5-ตำแหน่งของยูริดีนที่มีมอยอิตี ซึ่งไม่เพียงแต่สามารถมีส่วนร่วมในอันตรกิริยากับโปรตีนเป้าหมายเท่านั้น แต่ยังสร้างรูปแบบโครงสร้างทุติยภูมิและตติยภูมิที่แปลกใหม่ ซึ่งเพิ่มความสามารถในการเข้าถึงเป้าหมายอย่างมาก สำหรับแอพแทมเมอร์ [50].

จนถึงปัจจุบัน แอปทาเมอร์ที่ได้รับการดัดแปลงทางเคมีอย่างครอบคลุมหนึ่งรายการ (ชื่อ Macugen) ซึ่งมีเป้าหมายที่ไอโซฟอร์ม 165 ของปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือด ได้รับการอนุมัติสำหรับการรักษาจอประสาทตาเสื่อมที่เกี่ยวข้องกับอายุ และแอปทาเมอร์ 11 รายการกำลังอยู่ในการทดลองทางคลินิกสำหรับการรักษาโรคต่างๆ ในมนุษย์ [51,52]. ในบรรดาพวกมันนั้น แอพทาเมอร์ที่ต่อต้านนิวคลีโอลิน AS1411 และแอนติ-สโตรมัล เซลล์-มาแฟกเตอร์ 1 NOX-A12 แอพทาเมอร์ได้เสร็จสิ้นการทดลองทางคลินิกระยะที่ 2 สำหรับการรักษาโรคมะเร็งแล้ว ยิ่งไปกว่านั้น สารต่อต้านโปรตีนไทโรซีนไคเนส-7 Sgc8 DNA aptamer ซึ่งติดป้าย 68 Ga อยู่ในระยะเริ่มต้นที่ 1 สำหรับการประเมินค่าการวินิจฉัยในผู้ป่วยลำไส้ใหญ่และทวารหนัก (ClinicalTrials.gov Identifier: NCT03385148)

3. กลยุทธ์ภูมิคุ้มกันตาม Aptamer สำหรับการรักษา TNBC

การกลายพันธุ์ทางพันธุกรรมและอีพิเจเนติกส์ในเซลล์มะเร็งนำไปสู่การมีแอนติเจนที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอกจำนวนมาก ซึ่ง IS ยอมรับว่าไม่ใช่ตัวเอง ดังนั้นจึงทำลายเซลล์กลายพันธุ์ อย่างไรก็ตาม เป็นที่ทราบกันดีว่าเซลล์มะเร็งมีวิวัฒนาการหลายกลไกเพื่อหลบหนีจากการทำลายภูมิคุ้มกันและเปลี่ยนแปลงสภาพแวดล้อมจุลภาคโดยรอบให้เอื้ออำนวย ส่งผลให้เกิดการเติบโตของเนื้องอก การบุกรุก และการแพร่กระจาย (53 55]

เป้าหมายของการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันมะเร็งคือการเพิ่มหรือฟื้นฟูความสามารถของ IS ในการตรวจจับและทำลายเซลล์มะเร็งโดยการเอาชนะกลไกที่เนื้องอกหลบเลี่ยงและยับยั้งการตอบสนองของภูมิคุ้มกัน ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมากลยุทธ์ที่ใช้แอพทาเมอร์ที่โดดเด่นได้รับการพัฒนาเพื่อฟื้นฟู Is สู่สภาวะต้านมะเร็งใน TNBC ตามที่กล่าวไว้ด้านล่าง หลักฐานที่เพิ่มขึ้นแสดงให้เห็นความสามารถของแอพทาเมอร์ในการกระตุ้นการทำงานของพิษต่อเซลล์ของเซลล์ภูมิคุ้มกัน ปิดกั้นด่านตรวจภูมิคุ้มกัน หรือรับเซลล์ภูมิคุ้มกันไปยังเซลล์มะเร็ง (รูปที่ 4)

3.1. เซลล์เม็ดเลือดขาวแทรกซึมเนื้องอก

เซลล์ภูมิคุ้มกันประเภทหลักในสภาพแวดล้อมจุลภาคของ TNBC คือ TIL และการมีอยู่ของพวกมันมีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับผลลัพธ์การรอดชีวิตที่ดีขึ้นในผู้ป่วยที่มีเนื้องอกในระยะเริ่มต้นที่ไม่ได้รับการรักษา [56] TIL รวมถึง CD3 บวก T เซลล์ทั้งหมด ซึ่งอาจส่งเสริมการทำลายเนื้องอก (CD8 บวกกับ T เซลล์ที่เป็นพิษต่อเซลล์) และการตอบสนองของสารต้านเนื้องอก (CD4 บวกกับ T-helper 1) หรือจำกัดการตอบสนองของภูมิคุ้มกันต้านเนื้องอก (CD4 บวกกับ T-helper 2 ซึ่งรวมถึง Forkhead box P3 ( FOXP3), CD4 บวกเรกูลาทีรีทีเซลล์)

เมื่อเร็ว ๆ นี้ Zhao et al. เสนอกลยุทธ์ดั้งเดิมที่ใช้ประโยชน์จากความสามารถในการกำหนดเป้าหมายของแอพทาเมอร์เพื่อสร้าง "ทีลิมโฟไซต์ที่เป็นพิษต่อเซลล์มาก" เพื่อเพิ่มการตอบสนองของยาต้านมะเร็งในการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันมะเร็ง [59] พวกเขาสร้างอนุภาคนาโนที่เป็นโลหะที่ย่อยสลายด้วยกรดและสารอินทรีย์และไลโซโซมที่กำหนดเป้าหมายด้วยไลโซโซมซึ่งบรรจุด้วยเพอร์ฟอรินและแกรนไซม์ B ซึ่งเป็นสารพิษต้านเนื้องอกสองตัวที่มีอยู่ในไลโซโซมของ CD8 บวกทีเซลล์ และทำงานร่วมกับแอปทาเมอร์ที่กำหนดเป้าหมายตัวรับ CD63 บนไลโซโซม Ca2 plus ถูกฝากไว้บนแพลตฟอร์มนาโนเพื่อปรับปรุงความเข้ากันได้ทางชีวภาพและความเสถียร และกิจกรรมของสารพิษที่มีศักยภาพ ผู้เขียนประสบความสำเร็จในการใช้แพลตฟอร์มที่แนะนำโดย aptamer (ชื่อ LYS-NPs) เพื่อเพิ่มปริมาณสารที่เป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์ CD8 และ T ของไลโซโซม

เมื่อทดสอบในเมาส์รุ่น TNBC 4T1 ทีเซลล์จะเปิดใช้งานล่วงหน้าด้วยแอนติเจนจำเพาะ 4T1-ที่ผ่านการประมวลผลและรวมตัวกันใหม่โดย LYS-NPs และปล่อยเนื้อหา lysosomal เข้าสู่ไซแนปส์ทางภูมิคุ้มกัน ซึ่งกระตุ้นปฏิกิริยาต่อต้านเนื้องอกที่รุนแรง (รูปที่ 4) การบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันที่ใช้แอปแทมเมอร์นั้นมีศักยภาพที่ดีในการเอาชนะความท้าทายที่สำคัญในการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันของทีเซลล์สำหรับเนื้องอกที่เป็นก้อน ซึ่งส่วนใหญ่แสดงโดยสัญญาณกดภูมิคุ้มกันที่แรง ซึ่งกระตุ้นการกระตุ้นการทำงานของทีเซลล์ต่ำ และการสังเคราะห์และการปล่อยโปรตีนที่เป็นพิษต่อเซลล์ลดลง [60]

3.2. ด่านตรวจภูมิคุ้มกัน - เซลล์ที่แสดงออก

กลุ่มของ Alatrash รายงานว่าการแสดงออกของยีน PD-L1 ในผู้ป่วย TNBC นั้นสูงกว่าในผู้ที่ไม่ใช่ TNBC อย่างมีนัยสำคัญ (19] PD-L1 ซึ่งเป็นหนึ่งในจุดตรวจภูมิคุ้มกันที่เกี่ยวข้องกับเซลล์เนื้องอกที่สำคัญแสดงออกในเซลล์ภูมิคุ้มกันที่หลากหลาย , เช่น มาโครฟาจ, ทีเซลล์ที่ถูกกระตุ้น, บีเซลล์ และในเซลล์เนื้องอกที่เป็นของแข็งจำนวนมาก รวมถึงเซลล์ BC ตัวรับของมันคือ PD ของโปรตีนทรานส์เมมเบรน-1 แสดงออกบนผิวเมมเบรนของ TILs, เซลล์ NK, มาโครฟาจ เซลล์เดนไดรต์ และโมโนไซต์ [61] การจับกันระหว่าง PD-L1 และ PD-1 ทำให้เกิดการยับยั้งของ CD8 บวก TILs เปลี่ยนเป็นรูปแบบที่ไม่ก่อให้เกิดปฏิกิริยา และเป็นผลให้เกิดการหลีกเลี่ยงจากภูมิคุ้มกันของมะเร็ง

ยิ่งไปกว่านั้น แกน PD-1/PD-L1 ปรับเปลี่ยนเส้นทางการส่งสัญญาณการเพิ่มจำนวนและการอยู่รอดภายในเซลล์เนื้องอก เช่น PI3K/AKT, MAPK และ JAK/STAT [62] และที่สำคัญมาก ใน TNBC การเปิดใช้งาน ของแกนนี้ส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงของเยื่อบุผิว – mesenchymal (EMT) ซึ่งเป็นฟีโนไทป์ที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอกที่ก้าวร้าวและแพร่กระจายสูง [63]

ขณะนี้มีการสำรวจแนวทางต่างๆ ที่ใช้ aptamer-based ใน TNBC เพื่อย้อนกลับผลกระทบ PD-1/PD-L1 (รูปที่ 5)

รูปที่ 5 การแสดงแผนผังของกลยุทธ์ที่ใช้ aptamer เพื่อบล็อกแกน PD-1/PD-L1 ใน TNBC (a) อนุภาคนาโนที่ตกแต่งโดย TNBC aptamer ที่โหลดด้วย anti-PD-L1 siRNA; (b) ไลโปโซมที่ตกแต่งโดยแอนติ-CD44 และแอนติ PD-L1 ที่โหลดด้วยทั้งด็อกโซรูบิซินและแอนติ-IDO1 siRNA; (c) แอปทาเมอร์ antiPD-L1 ที่ควบกับพาคลิทาเซล; (d) แอปทาเมอร์ต้าน EGFR ที่เชื่อมโยงอย่างโควาเลนต์กับ anti-PD-L1 หรือ anti-CTLA-4 mAbs (ดูรายละเอียดในข้อความ) สร้างด้วย BioRender.com (เข้าถึงเมื่อ 2 มีนาคม 2566)

ในบริบทนี้ กลุ่มของเราตรวจสอบเป็นครั้งแรก การรวมกันระหว่าง anti-PD-L1 mAb กับตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตที่ต้านเกล็ดเลือด (PDGFR) ชื่อ Gint4.T ใน TNBC [64] Gint4.T เป็น RNA aptamer 20 -fluoropyrimidines (20F-Py) ที่ต้านทานต่อนิวคลีเอส ซึ่งจับกับและยับยั้ง PDGFR ที่แสดงบนพื้นผิวของเซลล์มะเร็งของมนุษย์ที่แตกต่างกัน รวมถึงเซลล์ TNBC [65] และส่วนประกอบ TNBC TME รวมถึง สเต็มเซลล์มีเซนไคมอล [66] และทีเซลล์ [64] ที่น่าสนใจคือ เมื่อฉีดเข้าเส้นเลือดดำในหนูที่สังเคราะห์ยีน TNBC 4T1 แอปทาเมอร์จะเสริมฤทธิ์ของ antiPD-L1 mAbs อย่างมากในการยับยั้งการเจริญเติบโตของเนื้องอกและการแพร่กระจายของเนื้อร้ายในปอดโดยออกฤทธิ์กับทั้งเซลล์เนื้องอกและส่วนประกอบของ TME [64]

นอกจากนี้ การปิดกั้นร่วมกันของ PDGFR และ PD-L1 ทำให้เกิดการพร่องของเซลล์ FOXP3 บวกกับ Treg และการเพิ่มขึ้นของเซลล์ CD8 บวกกับ T และแกรนไซม์ B อย่างสม่ำเสมอมากกว่าการรักษาด้วยวิธีเดียว ผลลัพธ์เหล่านี้เป็นรากฐานในการสร้างอิมมูโนคอนจูเกตที่มีความจำเพาะแบบคู่ซึ่งประกอบด้วยแอนติบอดีต่อต้าน PD-L1 ที่เชื่อมต่ออย่างโควาเลนต์กับ Gint4.T แอปทาเมอร์ ดังนั้น จึงปรับประสิทธิผลของการรักษาแบบผสมผสานให้เหมาะสมที่สุด โครงสร้างที่มีความจำเพาะแบบคู่ที่ได้มาโดยการเชื่อมโยงตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังชั้นนอก (EGFR) 20F-Py RNA aptamer อย่างโควาเลนต์กับตัวปรับภูมิคุ้มกันที่ต่อต้าน PD-L1 (10_12) [67] หรือสารต้าน CTLA-4 (อิพิลิมูแมบ) [68] mAbs ถูกสร้างขึ้นโดย Passariello และคณะ และได้รับการพิสูจน์แล้วว่าสามารถคงการทำงานทางชีวภาพของมอยอิตีของผู้ปกครองทั้งสองได้ ดังนั้น จึงออกแรงมีฤทธิ์ที่เป็นพิษต่อเซลล์ต่อเซลล์ BC

กลยุทธ์ทางเลือกในการต่อต้าน PD-L1 mAbs สำหรับการกำหนดเป้าหมาย PD-L1 แสดงโดยการยับยั้ง PD-L1 ผ่านการทำให้เงียบของยีน ซึ่งมีศักยภาพในการเอาชนะอุปสรรคที่เกิดซ้ำบางประการของการรักษาโดยใช้ mAbs เช่น เวลาและค่าใช้จ่าย - การบริโภค ศักยภาพในการสร้างภูมิคุ้มกันและความคงตัวต่ำ ยิ่งกว่านั้น กลยุทธ์นี้ยอมให้ปิดกั้นบทบาทโปรทูโมริจีนิกภายในของไซโตพลาสซึม PD-L1 [69] ที่แอนติบอดีไม่สามารถเข้าถึงได้แทน ความเป็นไปได้ในการสังเคราะห์แอปทาเมอร์ที่กำหนดเป้าหมายเซลล์มะเร็งด้วยกลุ่มการทำงานที่ส่วนปลายสุดของพวกมัน ซึ่งช่วยให้การผันคำกริยาเป็นพาหะนาโนเป็นวิธีการที่โดดเด่นในการส่งมอบ โดยเฉพาะไปยังเนื้องอก RNA (siRNA) ขนาดเล็กที่รบกวนการบรรทุกซึ่งบรรจุอยู่ในเวกเตอร์นาโน จึงเอาชนะช่องโหว่ของ siRNAs ต่อ nucleases และไม่สามารถเข้าสู่เซลล์เป้าหมายได้ เมื่อเร็ว ๆ นี้ อนุภาคนาโนที่มีฐานเป็นโพลี(แลคติก-โค-ไกลโคลิก)-บล็อก-PEG (PLGAb-PEG) ได้รับการโหลดด้วย siRNA ต่อต้าน PD-L1 และตกแต่งด้วย 20F-Py RNA aptamer ที่สามารถผูกและแทรกเข้าไปในเซลล์ TNBC โดยเฉพาะ [70,71].

ผลลัพธ์ของเวกเตอร์นาโนที่คอนจูเกตจากแอปทาเมอร์ เมื่อบ่มเซลล์ TNBC เป็นเวลา 90 นาที ส่ง siRNA ไปยังเซลล์เป้าหมายอย่างมีประสิทธิภาพ ซึ่งมีความสามารถในการยับยั้งการแสดงออกของ PD-L1 เกือบสมบูรณ์ [72] โดยเฉพาะอย่างยิ่ง nanocarriers ที่ตกแต่งโดย aptamer เสนอความเป็นไปได้ในการเชื่อมโยงลิแกนด์ที่แตกต่างกันกับพื้นผิวของ NPs ซึ่งจะเป็นการเพิ่มความเฉพาะเจาะจงของการกำหนดเป้าหมายและเพื่อห่อหุ้มใน NPs การรักษาที่หลากหลาย ดังนั้นจึงช่วยให้สามารถรักษาแบบผสมผสานที่มีประสิทธิภาพ ตัวอย่างเช่น การบริหารร่วมกันของซิสพลาติน [40] และ siPD-L1 [72] โดยอนุภาคนาโนโพลิเมอร์ PLGA ซึ่งเราติดตั้งด้วยเครื่อง aptamers TNBC อาจไม่เพียงส่งเสริมการลดผลข้างเคียงที่เป็นพิษ แต่ยังต่อต้านผลกระทบด้านลบที่รายงานของซิสพลาติน การบริหารเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพของ PD-L1 บวกกับเซลล์ TNBC ที่หลบเลี่ยงภูมิคุ้มกัน [73]

ในเรื่องนี้ Kim และคณะ ได้เตรียมระบบนาโนมัลติฟังก์ชั่นที่มีตัวจับดีเอ็นเอสองตัวที่เชื่อมต่อกันบนพื้นผิวภายนอกของไลโปโซมและการรักษาที่แตกต่างกันสองแบบภายในเวกเตอร์นาโนสำหรับการบำบัดด้วยเคมีบำบัดแบบเสริมฤทธิ์กันใน TNBC [74] โดยเฉพาะอย่างยิ่ง พวกมันใช้สำหรับการกำหนดเป้าหมายเซลล์ TNBC แอนติ-CD44 [75] และแอนติ-PD-L1 [76] ที่เลือกไว้ก่อนหน้านี้ DNA aptamers แต่ละตัวดัดแปลงด้วยไทออลและผันโควาเลนต์กับกลุ่มมาเลอิไมด์ของไมเซลล์ PEGylated-DSPE โดยไทออล–มาเลอิไมด์ เคมี. ไลโปโซมขนาดนาโนเต็มไปด้วยทั้งด็อกโซรูบิซินและไซอาร์เอ็นเอที่รบกวนการแสดงออกของ IDO1 ซึ่งเป็นโปรตีนที่สนับสนุน TME ที่กดภูมิคุ้มกัน และได้รับการควบคุมโดยการรักษาด้วยด็อกโซรูบิซิน เมื่อฉีดเข้าเส้นเลือดดำเข้าไปในหนูที่ปลูกถ่ายเนื้องอก TNBC 4T1 นาโนเวกเตอร์จะลดการเจริญเติบโตของเนื้องอกอย่างมากและยับยั้งการก่อตัวของการแพร่กระจายโดยการรวมการเหนี่ยวนำการตายของเซลล์ภูมิคุ้มกันที่กำหนดเป้าหมายเซลล์มะเร็งและการย้อนกลับของการกดภูมิคุ้มกัน [74]

เมื่อเร็ว ๆ นี้ PD-L1 aptamers ที่แตกต่างกันได้ถูกสร้างขึ้นและทดสอบเป็นตัวต้านแบบสแตนด์อะโลน คอนจูเกตที่มีความจำเพาะแบบคู่ และสารนำส่งของการรักษาโรคในแบบจำลองหนูที่เป็นเนื้องอกในปอด ตับ และลำไส้ใหญ่ ซึ่งคล้ายกับแอนติบอดีต่อต้าน PD-L1 ที่รบกวน แกน PD-1/PD-L1 โดยการปิดกั้น PD-L1 (ตารางที่ 2) แอพทาเมอร์หนึ่งตัวชื่อ XQ-P3 ถูกสร้างขึ้นโดยการเลือกเชิงบวกบน PD-L1 ที่แสดงเซลล์ MDA-MB{17}} มากเกินไปโดยใช้เซลล์ที่น่าพิศวงของ PD-L1 สำหรับการเลือกซ้ำ [77] แม้ว่าจะยังไม่ได้ทดสอบในร่างกาย แต่ดูเหมือนว่าจะมีประสิทธิภาพสูงในการเพาะเลี้ยงร่วมของเซลล์ TNBC MDA-MB-231 และเซลล์ Jurkat ภูมิคุ้มกันโดยการปิดกั้นปฏิสัมพันธ์กับ PD-1 และฟื้นฟูการทำงานของทีเซลล์ นอกจากนี้ คอนจูเกตของแอปทาเมอร์-พาคลิทาเซล XP-Q3 แสดงประสิทธิภาพต้านการเพิ่มจำนวนในเซลล์ TNBC ที่แสดงออกมากเกินไปของ PD-L1 [77]

3.3. มาโครฟาจ

มาโครฟาจที่เกี่ยวข้องกับเนื้องอก (TAMs) เป็นหนึ่งในเซลล์ภูมิคุ้มกันที่มีมากที่สุดใน TME ของมะเร็งหลายชนิด และอาจทำหน้าที่ส่งเสริมหรือยับยั้งการตอบสนองของภูมิคุ้มกันต้านเนื้องอก [86,87] เนื่องจากความเป็นพลาสติกในระดับสูง พวกมันจึงเปลี่ยนไปเป็นสองฟีโนไทป์ที่หลากหลายเพื่อตอบสนองต่อสิ่งเร้าทางสิ่งแวดล้อมระดับจุลภาคต่างๆ: กระตุ้นแบบคลาสสิก, กระตุ้นการอักเสบ M1 และอีกทางเลือกหนึ่ง เปิดใช้งานต้านการอักเสบ M2 ซึ่งแสดงโปรไฟล์การแสดงออกที่แตกต่างกันไปยังเครื่องหมายบนผิวเซลล์และ การผลิตไซโตไคน์และเคโมไคน์ที่แตกต่างกัน แมคโครฟาจ M1 มักจะออกแรงต้านเนื้องอก ในขณะที่มาโครฟาจ M2 ส่งเสริมการลุกลามของเนื้องอก ในเนื้องอกที่ลุกลามส่วนใหญ่ ซึ่งรวมถึง TNBC, TAM มักจะมีลักษณะฟีโนไทป์คล้าย M2- ซึ่งสาเหตุหลักมาจากความล้มเหลวของการรักษาแบบเดิมและการรักษาแบบยับยั้งจุดตรวจภูมิคุ้มกัน ด้วยเหตุผลนี้ วิธีการรักษาด้วยภูมิคุ้มกันที่เป็นนวัตกรรมใหม่หลายอย่างมีเป้าหมายเพื่อกำหนดเป้าหมายและทำให้หมดสิ้นมาโครฟาจ M2 หรือตั้งโปรแกรมใหม่ให้เป็นฟีโนไทป์ที่ต้องการ [88,89]

ในการเลือกแอปแทมเมอร์ที่มุ่งเป้าไปที่มนุษย์ M2-เช่น macrophages วิธีแรกที่ใช้เซลล์ SELEX ถูกนำไปใช้กับ macrophages ของมนุษย์ที่ได้มาจาก monocytes ของผู้บริจาคหลายรายและโพลาไรซ์ไปยัง M2- เช่น phenotype [90] แม้ว่าตัวตรวจสอบ DNA ที่กำหนดเป้าหมาย M2- ที่ดีที่สุดที่มาจากการเลือกจะไม่สามารถแยกแยะเซลล์เป้าหมายจากสิ่งที่เหมือน M0- และ monocytes ที่ไม่แตกต่างกัน และยังจับที่ระดับต่ำกว่าถึง M1-เช่น มาโครฟาจได้แทรกเข้าไปใน CD14 บวกโมโนไซต์อย่างรวดเร็ว ดังนั้นจึงถือศักยภาพสำหรับการใช้งานการนำส่งยาที่มุ่งเป้าไปที่โมโนไซต์

แอปพลิเคชั่นที่โดดเด่นอีกอย่างของแอพทาเมอร์สำหรับการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันของเนื้องอกที่เป็นของแข็งประกอบด้วยความจำเพาะเจาะจงของมาโครฟาจ M1 ที่มีศักยภาพสำหรับเซลล์เนื้องอกโดยวิศวกรรมพวกมันด้วยแอพทาเมอร์ที่กำหนดเป้าหมายเซลล์มะเร็ง การบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันด้วยเซลล์ Chimeric antigen receptor T (CAR-T) ซึ่งใส่เซลล์ CAR-T ให้กับผู้ป่วย แสดงให้เห็นประสิทธิภาพที่ดีในการรักษามะเร็งเม็ดเลือดขาวและมะเร็งต่อมน้ำเหลืองบางชนิด แต่มีผลเพียงเล็กน้อยในก้อนเนื้องอกเนื่องจากความยากในการเจาะทะลุของเนื้องอก [91] . เนื่องจากความสามารถภายในของแมคโครฟาจในการเจาะเนื้อเยื่อเนื้องอก จึงมีการนำเสนอแนวทางต่างๆ เมื่อเร็ว ๆ นี้เพื่อดัดแปลงพันธุกรรมให้แสดง CARs chimeric (CAR-M) เพื่อกำหนดเป้าหมายเซลล์เนื้องอกและเริ่มต้นการตอบสนองต้านเนื้องอกที่เป็นเป้าหมาย [92] เพื่อเอาชนะข้อเสียที่สำคัญที่เกี่ยวข้องกับการบำบัดด้วย CAR-M แบบดั้งเดิม เช่น ความสามารถในการทำซ้ำต่ำของโปรตีนเชิงวิศวกรรมและปัญหาด้านความปลอดภัย Qian และคณะ เสนอแนวทาง CAR-M ใหม่ตามการใช้แอพทาเมอร์ [93]

สายพันธุ์เซลล์มาโครฟาจที่เสถียรของหนูชนิดหนึ่ง RAW 264.7 ได้รับการบ่มครั้งแรกด้วยรีเอเจนต์สำหรับติดฉลากเมตาบอลิซึมไกลโคโปรตีนที่มีเอไซด์และลิโพโพลีแซคคาไรด์เพื่อสร้างน้ำตาลอะซิโดบนผิวเซลล์ M1 จากนั้น เซลล์ M1 ถูกเชื่อมโดยปฏิกิริยาทางเคมีแบบคลิกกับทั้ง AS1411 aptamer ซึ่งจับกับนิวคลีโอลินที่แสดงออกบนเซลล์มะเร็งหลายเซลล์ และ PD-L1 aptamer สำหรับการกำหนดเป้าหมายเนื้องอกพร้อมกันและการปิดล้อมจุดตรวจสอบภูมิคุ้มกัน ที่สำคัญ ในร่างกาย การถ่ายภาพของหนูที่มี 4T1 TNBC และฉีดเข้าเส้นเลือดดำด้วยเซลล์ M1 ซึ่งทำงานด้วยฟลูออเรสเซนต์ aptamers แสดงการสะสมในเนื้องอกที่มากขึ้นเมื่อเทียบกับเซลล์ M1 ที่ไม่ได้แก้ไข นอกจากนี้ เมื่อทดสอบฤทธิ์ต้านเนื้องอก M1 ที่ได้รับการออกแบบทางวิศวกรรมโดยแอปทาเมอร์คู่ทำให้เกิดการลดลงอย่างมากในการเจริญเติบโตของเนื้องอกและการก่อตัวของการแพร่กระจาย ซึ่งมาพร้อมกับการตั้งโปรแกรมภูมิคุ้มกัน TME ใหม่ด้วยการแทรกซึมของทีเซลล์ในเนื้องอกที่เพิ่มขึ้นและความเป็นพิษต่อเซลล์ของทีเซลล์ที่เพิ่มขึ้น

อีกทางหนึ่งคือ Chen และคณะ เสนอตัวตรวจสอบทรงกลมแบบโพลีวาเลนต์ (PSAs) เป็นกลยุทธ์วิศวกรรมแมคโครฟาจ [94] PSAs ถูกสร้างขึ้นผ่านการทำงานของอนุภาคนาโนทองคำด้วยทั้ง AS1411 aptamer ที่ดัดแปลงด้วย thiol และตัวเชื่อมโยง DNA ที่ประกอบกลุ่มการทำงานที่ปลายสุดฟรีสำหรับทำปฏิกิริยากับแท็ก azide ที่สร้างขึ้นบน M0 macrophages ผ่านเมแทบอลิซึมที่กล่าวถึงข้างต้น ปฏิกิริยาการติดฉลากและคลิก biorthogonal (รูปที่ 6) การเปลี่ยนแปลงฟีโนไทป์ของแมคโครฟาจที่ไม่มีโพลาไรซ์ทางวิศวกรรมในชนิดย่อย M1 ถูกเปิดใช้งานโดยรังสีเอกซ์ ในหลอดทดลอง และได้รับการยืนยันในหนูที่มีการปลูกถ่ายซีโนกราฟของเนื้องอก 4T1 ทำให้เกิดการฆ่าเฉพาะเนื้องอกที่มีศักยภาพโดยไม่มีสัญญาณของความเป็นพิษต่อระบบ

3.4. เซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติ

เซลล์ NK เป็นเซลล์เม็ดเลือดขาวที่เป็นพิษต่อเซลล์ที่เป็นของ IS โดยกำเนิด สามารถผลิตไซโตไคน์และคีโมไคน์ที่อักเสบได้ พวกมันถูกเรียกว่า "แนวป้องกันด่านแรก" เพราะแตกต่างจากทีลิมโฟไซต์ตรงที่พวกมันไม่แสดงตัวรับทีเซลล์ที่จำเพาะต่อแอนติเจน แต่ทำหน้าที่ต่อต้านเซลล์กลายพันธุ์โดยปราศจากการแพ้หรือการขยายตัวของโคลน [95] การบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันแบบรับเลี้ยงด้วยเซลล์ NK ล้มเหลวในการแสดงประสิทธิภาพในการรักษาเนื้องอกที่เป็นของแข็ง ส่วนหนึ่งเป็นผลมาจาก TME ที่กดภูมิคุ้มกันและการขาดความจำเพาะของเซลล์ NK ต่อเนื้องอก [96]

ดังนั้น ในแนวทางการปรับปรุงประสิทธิภาพการรักษามะเร็งเซลล์ NK ความพยายามอย่างยิ่งยวดจึงมุ่งเน้นไปที่การมอบความจำเพาะของมะเร็งผ่านการแสดงออกของ CAR หรือการผันคำกริยาของลิแกนด์ที่กำหนดเป้าหมายเนื้องอก [97] Zu และเพื่อนร่วมงานสำรวจ aptamers เป็นสารที่กำหนดเป้าหมายมะเร็งโดยการเชื่อมโยง aptamer ที่สามารถจดจำตัวรับ CD30 อย่างจำเพาะบนเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองกับพื้นผิวของสายเซลล์เชิงพาณิชย์ NK หรือเซลล์ NK ที่ได้รับจากผู้บริจาคที่มีสุขภาพดีสามคน [98] ก่อนหน้านี้ แอปทาเมอร์ชนิด DNA นี้ถูกเลือกโดยกลุ่มเดียวกันผ่านวิธี SELEX แบบไฮบริด ซึ่งในขั้นตอนของการเลือกบนเซลล์ CD30 บวกกับเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองตามมาด้วยขั้นตอนการเลือกบนโปรตีนรีคอมบิแนนท์ CD30 [99] แอปแทมเมอร์ถูกดัดแปลงที่ปลาย 30 เส้นด้วยสายโซ่ไฮโดรคาร์บอน C18 สองเท่าของ lipophilic เพื่อยึดเข้ากับเยื่อหุ้มเซลล์ NK ซึ่งถูกนำทางไปยังเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองโดยเฉพาะเพื่อฆ่าพวกมัน [98] ไม่นานมานี้ ผู้เขียนคนเดียวกันใช้วิธีเดียวกันนี้ใน TNBC โดยติด ​​DNA aptamer ที่สามารถจับกับโปรตีนที่ยังไม่รู้จักที่แสดงบนเซลล์ TNBC กับพื้นผิวของเซลล์ NK เซลล์ NK ที่ออกแบบโดย Aptamer ยับยั้งการแพร่กระจายของเนื้อร้ายในปอดจากเซลล์ MDA-MB-231 ที่ฉีดเข้าเส้นเลือดดำในหนูโดยไม่มีความเป็นพิษต่อเนื้อเยื่อปกติ [100]

เพื่อเพิ่มความจำเพาะของเนื้องอกของเซลล์ NK ในเนื้องอกที่เป็นของแข็ง เซลล์ NK ที่ติดตั้งอุปกรณ์ aptamer คู่ถูกสร้างขึ้นโดยใช้ทั้ง aptamer ที่กำหนดเป้าหมายเซลล์มะเร็งเซลล์ตับและ aptamer AptPD-L1 [81] เซลล์ NK ที่ถูกทำวิศวกรรมซึ่งเป็นผลลัพธ์นั้นมีประสิทธิภาพมากกว่าเซลล์ที่ไม่ได้เชื่อมต่อหรือเชื่อมต่อกันด้วยแอปแทมเมอร์เพียงหนึ่งในสองตัวในการยับยั้งการเจริญเติบโตของมะเร็งเซลล์ตับในหนูเมาส์ที่ถ่ายโอนแบบรับเลี้ยงบุตรบุญธรรม ข้อจำกัดอีกประการหนึ่งของประสิทธิภาพของการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันด้วยเซลล์ NK คือการแทรกซึมเข้าไปในเนื้องอกที่เป็นของแข็งไม่เพียงพอ เป็นอีกครั้งที่ aptamers ได้พิสูจน์แล้วว่าเป็นเครื่องมือที่ยอดเยี่ยมในการเอาชนะปัญหานี้ กลุ่มของ Hock สร้างคอนจูเกตแบบ aptamer ที่มีความจำเพาะแบบคู่ซึ่งสามารถจับกับ c-Met ซึ่งเป็นรีเซพเตอร์ที่แสดงออกอย่างสูงในเซลล์เนื้องอกหลายเซลล์พร้อมกัน และกับ Fcg receptor III (CD16a) ซึ่งเป็นโปรตีนที่แสดงออกบนเซลล์ NK [101] คอนจูเกตประกอบด้วย c-Met และ CD16a DNA aptamers ที่มีความเฉพาะเจาะจงสูง 2 ตัวที่ถูกหลอมรวมโดยตัวเชื่อมโยงที่แตกต่างกัน โดยรักษาระยะห่างที่เหมาะสม ∼65 Å สำหรับการจับกับรีเซพเตอร์สองตัวพร้อมกัน คอนจูเกตสามารถเลียนแบบความเป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์ที่ขึ้นกับแอนติบอดีได้อย่างมีประสิทธิภาพโดยการสรรหาเซลล์ NK เข้ากับเซลล์มะเร็ง ต่อมา ตัวตรวจสอบ CD16 ตัวเดียวกันถูกหลอมรวมเข้ากับตัวตรวจสอบดีเอ็นเอ PD-L1 เพื่อสร้างโครงสร้างที่สามารถรับเซลล์ NK เข้ากับ PD-L1 และเซลล์เนื้องอกและทำให้แกนภูมิคุ้มกัน PD-1/PD-L1 บกพร่องโดยการกระตุ้น TIL ต้านเซลล์เนื้องอกในหนูที่มีเนื้องอก [82] วิธีนี้มีไว้โดยเฉพาะสำหรับก้อนเนื้องอกที่มีระดับ PD-L1 สูง เช่น TNBC

4. ข้อสรุป

การศึกษาล่าสุดที่กล่าวถึงในที่นี้แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนถึงศักยภาพที่ยอดเยี่ยมของโอลิโกนิวคลีโอไทด์แอปทาเมอร์ในการขยาย IS ของเราเพื่อต่อสู้กับมะเร็ง แอปทาเมอร์สามารถใช้เป็นสารต้านมะเร็งในลักษณะเดียวกับ mAbs แต่มีราคาถูกกว่า ผลิตได้รวดเร็วกว่าและมีความสามารถในการทำซ้ำมากกว่า และก่อภูมิคุ้มกันน้อยกว่าแอนติบอดี อย่างไรก็ตาม ต้องตระหนักว่าการมาถึงของผู้ตรวจรักษาในคลินิกนั้นช้ากว่าที่คาดไว้ ในความเป็นจริง แม้ว่า SELEX ตัวแรก [25,26] จะผ่านไปแล้วกว่า 30 ปี แต่ปัจจุบันมีเพียง aptamers สามตัวเท่านั้นที่อยู่ในการทดลองทางคลินิกสำหรับการรักษาโรคมะเร็ง [51]

การชะลอตัวนี้ส่วนใหญ่เกิดจากความท้าทายบางอย่างที่จำกัดประสิทธิภาพของแอพแทมเมอร์ในผู้ป่วย เช่น ความเสถียรที่ไม่แน่นอนและครึ่งชีวิต โดยเฉพาะอย่างยิ่งในสภาพแวดล้อมจุลภาคที่ซับซ้อนและมีการพัฒนาอย่างต่อเนื่องซึ่งล้อมรอบเนื้องอก อย่างไรก็ตาม กลยุทธ์ที่น่าอัศจรรย์ที่ได้รับการพัฒนาในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมาเพื่อเอาชนะปัญหาข้อจำกัดที่กล่าวถึงข้างต้น และความคืบหน้าล่าสุดในการค้นพบและการปรับเปลี่ยนแอปทาเมอร์เพื่อปรับให้เข้ากับการใช้งานที่ต้องการ ทำให้มีเหตุผลที่จะโต้แย้งว่าการใช้แอปทาเมอร์ในทางปฏิบัติจะเกิดขึ้นในไม่ช้า ตระหนักถึงมะเร็งเช่น TNBC ซึ่งต้องการทางเลือกการรักษาใหม่อย่างเร่งด่วน

ผลงานของผู้เขียน:

แนวคิด, LC; การเขียน—การเตรียมร่างต้นฉบับ LC; การเขียน— ตรวจทานและแก้ไข LA, Ad, RN, MF, SC และ LC ผู้เขียนทุกคนได้อ่านและยอมรับต้นฉบับฉบับที่เผยแพร่แล้ว

เงินทุน:

งานวิจัยนี้ได้รับทุนสนับสนุนจาก Fondazione AIRC per la Ricerca sul Cancro, IG 23052, LCLA ได้รับการสนับสนุนจากสมาคม AIRC สำหรับอิตาลี

คำชี้แจงของคณะกรรมการพิจารณาสถาบัน:

ไม่สามารถใช้ได้.

คำชี้แจงความพร้อมใช้งานของข้อมูล:

ไม่สามารถใช้ได้.

กิตติกรรมประกาศ:

เรารู้สึกขอบคุณ A. Caliento สำหรับการสนทนาที่ลึกซึ้ง

ผลประโยชน์ทับซ้อน:

ผู้เขียนประกาศว่าไม่มีความขัดแย้งทางผลประโยชน์

อ้างอิง

1. บุ๋ม ร.; ทรูโด ม.; พริทชาร์ด KI; ฮันนา ดับบลิวเอ็ม; คาห์น ฮ่องกง ; ซอว์กา แคลิฟอร์เนีย ; ลิคลีย์, แอลเอ; รอว์ลินสัน, อี.; อาทิตย์, ป.; Narod, SA มะเร็งเต้านมลบสามเท่า: ลักษณะทางคลินิกและรูปแบบการเกิดซ้ำ คลิน. มะเร็ง Res 2550, 13, 4429–4434. [ครอสรีฟ]

2. เดราคชาน เอฟ.; Reis-Filho, JS Pathogenesis ของมะเร็งเต้านม Triple-Negative แอนนู พระอาจารย์ปฐล. 2022, 17, 181–204. [ครอสรีฟ]

3. ลู, JY; อัลวาเรซ โซโต, อ.; Anampa, JD ภูมิทัศน์ของการบำบัดอย่างเป็นระบบสำหรับมะเร็งเต้านมระยะเริ่มต้นที่เป็นลบสามเท่า ความคิดเห็นของผู้เชี่ยวชาญ เภสัชกร 2022, 23, 1291–1303 [ครอสรีฟ]

4. เลห์มันน์, BD; บาวเออร์, จา; เฉิน เอ็กซ์; แซนเดอร์ส, เมน; จักรวารธี AB; อายร์, ย.; Pietenpol, JA การระบุชนิดย่อยของมะเร็งเต้านมชนิดผลลบสามเท่าของมนุษย์และแบบจำลองพรีคลินิกสำหรับการเลือกการรักษาที่ตรงเป้าหมาย เจ. คลิน. ตรวจสอบ 2554, 121, 2750–2767. [ครอสรีฟ]

5. เลห์มันน์, BD; โยวาโนวิช บี; เฉิน เอ็กซ์; เอสตราดา, เอ็มวี; จอห์นสัน เคเอ็น; อายร์, ย.; โมเสส, เอชแอล; แซนเดอร์ส, เมน; Pietenpol, JA การปรับแต่งชนิดย่อยของมะเร็งเต้านมที่เป็นลบสามเท่า: ผลกระทบสำหรับการเลือกยาเคมีบำบัด Neoadjuvant กรุณาหนึ่ง 2016, 11, e0157368 [ครอสรีฟ]

6. เบอร์สไตน์ แมริแลนด์; ซิมเมลซอน, อ.; Poage จีเอ็ม; โควิงตัน เคอาร์; Contraras, ก.; Fuqua, SA; โหด, มิชิแกน; ออสบอร์น ซีเค; ฮิลเซนเบค สิงคโปร์ ; ช้าง เจ.ซี. ; และอื่น ๆ การวิเคราะห์จีโนมที่ครอบคลุมระบุชนิดย่อยใหม่และเป้าหมายของมะเร็งเต้านมแบบทริปเปิลเนกาทีฟ คลิน. มะเร็ง Res 2015, 21, 1688–1698. [ครอสรีฟ]

7. ปาร์ค JH; อัน, JH; Kim, SB เราจะปฏิบัติต่อมะเร็งเต้านมที่เป็นลบสามเท่าระยะแรก (TNBC) ได้อย่างไร: จากมาตรฐานปัจจุบันไปจนถึงกลยุทธ์ภูมิคุ้มกันโมเลกุลที่จะเกิดขึ้น ESMO Open 2018, 3, e000357. [ครอสรีฟ]

8. หลี่ เอส; เบ้า ซี; หวาง, ล.; Wei, JF กลยุทธ์การรักษาปัจจุบันสำหรับมะเร็งเต้านมระยะแพร่กระจาย Triple-Negative: จากมุมมองของเภสัชกร เจ. คลิน. ยา 2022, 11, 6021 [CrossRef]

9. มิสซิสเค; Kratz, F. ข้อ จำกัด ของเคมีบำบัดมะเร็งทั่วไป ในการนำส่งยาด้านเนื้องอกวิทยา: จากการวิจัยขั้นพื้นฐานไปจนถึงการรักษาโรคมะเร็ง; Kratz, F., Senter, P., Steinhagen, H., Eds.; John Wiley & Sons, Ltd.: Hoboken, NJ, USA, 2011; เล่ม 1 หน้า 1–31

10. เฟอร์รารี ป.; สกาเทน่า, ซี; กิลลี, ม.; บาร์กาน่า, I.; Lorenzini, G.; Nicolini, A. กลไกระดับโมเลกุล, ตัวบ่งชี้ทางชีวภาพและการบำบัดที่เกิดขึ้นใหม่สำหรับ TNBC ที่ดื้อต่อยาเคมีบำบัด ภายใน เจ โมล วิทย์ 2022, 23, 1665 [CrossRef]

11.กอนซาเลซ-อังกูโล่ AM; ทิมส์, KM; หลิว ส.; เฉิน เอช; ลิตตัน, เจ.เค.; พอตเตอร์ เจ; แลงช์เบอรี เจเอส ; Stemke-Hale, K.; เฮนเนสซี่ บีที ; อรุณ, บีเค; และอื่น ๆ อุบัติการณ์และผลลัพธ์ของการกลายพันธุ์ของ BRCA ในผู้ป่วยมะเร็งเต้านมที่ตัวรับสามตัวที่ไม่ได้รับการคัดเลือก คลิน. มะเร็ง Res 2554, 17, 1082–1089. [ครอสรีฟ]

12. ร็อบสัน เอ็ม; อิ่ม SA; Senkus, E.; ซู, บี; ดอมเชก เอสเอ็ม; มาสุดะ, น.; เดลาโลจ เอส; หลี่ ว.; ตุง, น.; อาร์มสตรอง ก.; และอื่น ๆ Olaparib สำหรับมะเร็งเต้านมในระยะแพร่กระจายในผู้ป่วยที่มีการกลายพันธุ์ BRCA ของ Germline เอ็น อังกฤษ เจ เมด 2560, 377, 523–533. [ครอสรีฟ] [PubMed]

13. ไอเคสดัล, เอชพี; อีนเดสตาด เอส; เอลซาวารี อ.; Llop-Guevara, A.; กิลเย, บี; บลิกซ์ อีเอส ; Espelid, H.; ลุนด์เกรน เอส; ไกส์เลอร์ เจ; Vagstad, G.; และอื่น ๆ Olaparib monotherapy เป็นการรักษาหลักในมะเร็งเต้านมชนิดผลลบสามเท่าที่ไม่ได้เลือก แอน ออนคอล. 2021, 32, 240–249. [ครอสรีฟ] [PubMed]

14. ลิตตัน เจ.เค.; รูโก เอชเอส ; Ettl เจ; เฮอร์วิตซ์ SA; กอนซาลเวส เอ; ลี เคเอช ; Fehrenbacher, L.; Yerushalmi, ร.; มีนา แอลเอ ; มาร์ติน ม.; และอื่น ๆ Talazoparib ในผู้ป่วยมะเร็งเต้านมขั้นสูงและการกลายพันธุ์ BRCA ของ Germline เอ็น อังกฤษ เจ เมด 2018, 379, 753–763. [ครอสรีฟ]

15. เคียง, MY; วู, วาย.; บาดาร์ ฉ.; Vadgama, JV การตอบสนองของเซลล์มะเร็งเต้านมต่อสารยับยั้ง PARP นั้นไม่ขึ้นกับสถานะ BRCA เจ. คลิน. ยา 2020, 9, 940 [CrossRef] [PubMed]

For more information:1950477648nn@gmail.com