Xinjiang Cistanche Deserticola Polysaccharides มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ

เชิงนามธรรม

ศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของ Cistanche Deserticola Polysaccharide ในหลอดทดลอง โดยใช้กรดแอสคอร์บิกเป็นตัวควบคุม โดยนำปฏิกิริยาคล้ายเฟนตันมาผลิตอนุมูลไฮดรอกซิล ปฏิกิริยาออโตซิเดชันของโดปามีนเพื่อสร้างอนุมูลไอออนซูเปอร์ออกไซด์ ปฏิกิริยาของโซเดียมไฮโปคลอไรต์กับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เพื่อผลิตออกซิเจนเดี่ยว อนุมูลไดฟีนิลบิทเทอร์ไฮดราซีนเป็นแบบจำลองการทดลอง ผลของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola ต่ออนุมูลไอออนซูเปอร์ออกไซด์ อนุมูลไฮดรอกซิล DPPH · อนุมูลอิสระ (อนุมูลอิสระไดฟีนิลขม ไฮดราซีน) ผลการขับของออกซิเจนเสื้อกล้าม ผลการวิจัยพบว่าโพลีแซ็กคาไรด์จาก Cistanche Deserticola มีผลในการไล่อนุมูลอิสระข้างต้นอย่างชัดเจน และผลในการไล่ออกมีความสัมพันธ์เชิงบวกกับความเข้มข้นของโพลีแซ็กคาไรด์

คำหลัก :ซิสตานซ์เขาทูบูลโอซา โพลีแซคฮาไรด์; อนุมูลอิสระ

1. บทนำ

ร่างกายผลิตอนุมูลอิสระออกซิเจนปฏิกิริยาต่างๆ (ROS) อย่างต่อเนื่องในกระบวนการเมแทบอลิซึมของกิจกรรมชีวิตซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ระดับกลางของปฏิกิริยาออกซิเดชัน-รีดิวซ์ของเมแทบอลิซึมแบบแอโรบิกผลการวิจัยพบว่าอนุมูลอิสระส่วนเกินจะโจมตีโมเลกุลขนาดใหญ่ของชีวิตและออร์แกเนลล์ต่างๆ ทำให้เกิดความเสียหายต่างๆ ในระดับโมเลกุล ระดับเซลล์ เนื้อเยื่อ และอวัยวะ เร่งกระบวนการชราของร่างกายและทำให้เกิดโรคต่างๆ เช่น ภาวะลิ่มเลือดอุดตัน เบาหวาน หลอดเลือดแข็งตัว เนื้องอก ฯลฯ. [1]. เนื่องจากความเป็นพิษของสารต้านอนุมูลอิสระที่สังเคราะห์ทางเคมีต่อร่างกายมนุษย์ การค้นหาสารต้านอนุมูลอิสระจากธรรมชาติที่มีประสิทธิภาพสูงและมีความเป็นพิษต่ำที่สามารถกำจัดอนุมูลอิสระของออกซิเจนจึงกลายเป็นหัวข้อวิจัยที่กำลังได้รับความนิยมในสาขาการแพทย์ อาหาร วิศวกรรมเคมี และสาขาอื่นๆ ใน ปีที่ผ่านมา

ซิสตานเช่ เดซินิโกลา(ยคม.)เป็นยาแผนโบราณของจีนที่หายากและเป็นที่รู้จักในชื่อ "โสมทะเลทราย" [2]. Cistanche Deserticola มาโพลีแซ็กคาไรด์เป็นหนึ่งในส่วนประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพหลักของ Cistanche Deserticolaแต่ไม่มีรายงานว่า Cistanche Deserticola Polysaccharide มีฤทธิ์ในการขจัดอนุมูลอิสระหรือไม่ ในบทความนี้ พิจารณาผลการกำจัดของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola ต่ออนุมูลไอออนซูเปอร์ออกไซด์ อนุมูลไฮดรอกซิล อนุมูลอิสระ DPPH และออกซิเจนสายเดี่ยว ถูกกำหนดโดยการวิเคราะห์สเปกตรัม เพื่อประเมินฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารดังกล่าวและเป็นพื้นฐานทางวิทยาศาสตร์สำหรับการพัฒนาและการใช้ประโยชน์เต็มรูปแบบของ ทรัพยากรธรรมชาตินี้

cistanche สมุนไพรจีน

2. ส่วนทดลอง

2.1 เครื่องมือและรีเอเจนต์

เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่มองเห็นด้วยรังสี UV-2401 (ชิมาดสุ ญี่ปุ่น); LumatLB9507 เครื่องวัดความสว่างหลอดความไวสูงพิเศษ (เยอรมนี

เบิร์ทโฮลด์เทคโนโลยี); RE-52เครื่องระเหยแบบหมุน CS (โรงงานเครื่องมือทางชีวเคมีของเซี่ยงไฮ้ Yarong); อ่างน้ำอุณหภูมิแบบอิเล็กทรอนิกส์ HW-SY (โรงงานเครื่องมือ Jintan Xinhang); PHS-3เครื่องวัด pH C (Shanghai Precision Scientific Instrument Co., Ltd.); เตาอบแห้งสุญญากาศ DZF-6020 (Shanghai Yiheng Technology Co., Ltd.) Cistanche Deserticola: ซื้อจาก Kuitun Pharmaceutical Corporation Luminol (Sigma, USA), dopamine (China Institute for the Control of Pharmaceutical and Biological Products), FeSO4, EDTA, วิตามินซี, H2O2, NaClO, Na2CO3, NaHCO3 ฯลฯ ล้วนเป็นรีเอเจนต์เชิงวิเคราะห์ในประเทศ น้ำที่ใช้ทดลองคือน้ำกลั่นแบบแลกเปลี่ยนไอออน

2.2 วิธีการทดลอง

2.2.1 วิธีการสกัดของซิสตานเช่ เดซินิโกลาโพลีแซ็กคาไรด์

นำผง Cistanche Deserticola 30 กรัม ใส่ลงในขวดทรงกรวยขนาด 500 มล. จุ่มลงในปิโตรเลียมอีเทอร์ (60-90 องศา ) อีเทอร์ และสารละลายร้อนเอธานอล 80% (30 องศา ) เป็นเวลา 6 ชั่วโมงตามลำดับ จากนั้นสารตกค้างจะระเหยเพื่อทำให้ตัวทำละลายแห้ง แช่สารกรองที่ตกค้างในน้ำในอัตราส่วน 1 ∶ 10 เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ให้ความร้อนที่ 30 องศา และสกัดเป็นเวลา 100 นาที หลังจากการสกัดแล้ว ให้หมุนเหวี่ยงเพื่อให้ได้ส่วนลอยเหนือตะกอน หลังจากที่ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกทำให้เข้มข้นภายใต้ความดันที่ลดลง มันก็จะตกตะกอนด้วยเอทานอล 95% เป็น 3 เท่าของปริมาตร อนุญาตให้ยืนเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 4 องศา หลังจากการปั่นแยก มันจะถูกรวบรวมและตกตะกอน หลังจากการอบแห้งแบบสุญญากาศ สามารถรับโพลีแซ็กคาไรด์ดิบของ Cistanche Deserticola ได้ ชั่งน้ำหนักโพลีแซ็กคาไรด์ดิบ 1.00 กรัม ละลายด้วยน้ำ แล้วใส่ลงในขวดวัดปริมาตรขนาด 50 มล. เพื่อเตรียมพร้อม

โสมทะเลทราย-สารต้านอนุมูลอิสระ

คลิกที่นี่เพื่อดูผลิตภัณฑ์ผง Cistanche

【สอบถามเพิ่มเติม】 อีเมล:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.2.2 ทดสอบความสามารถในการไล่ของซิสตานเช่ เดซินิโกลาพอลิแซ็กคาไรด์เป็น O-2 · อนุมูลอิสระ

ความสามารถในการขับของ Cistanche Deserticola Polysaccharide ถึง O{{0}} · ได้รับการทดสอบโดยการผลิตอนุมูลอิสระซูเปอร์ออกไซด์ (O-2 ·) จากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นของโดปามีน [3] เติมสารละลายบัฟเฟอร์คาร์บอเนต 3.0mL ของ {{10}.1mmol/LpH=10.12, น้ำ 3.0mL และ {{18 }}.5 มล. ของสารละลายตัวอย่างโพลีแซ็กคาไรด์ที่มีความเข้มข้นต่างกันในหลอดทดลองการทำให้แห้งพร้อมตะกรันตามลำดับ หลังจากอุ่นเครื่องในอ่างน้ำที่มีอุณหภูมิ 30 องศาเป็นเวลา 5 นาที ให้เติมโดปามีน 2.0 มิลลิโมล/ลิตร 1.0 มิลลิลิตรที่อุ่นไว้ในอ่างน้ำที่มีอุณหภูมิ 30 องศา ผสมและจับเวลาทันที โดยคงปฏิกิริยาไว้ที่ 30 องศา เป็นเวลา 5 นาที และหยุดปฏิกิริยาทันทีโดยหยด HCl 10 โมล/ลิตร 2 หยด ใช้สารละลายบัฟเฟอร์เป็นข้อมูลอ้างอิง วัดค่าการดูดกลืนแสง (ตัวอย่าง A) ที่ 221 นาโนเมตร แทนที่ตัวอย่าง (A ว่าง) ด้วยน้ำ 0.5 มล. ในกลุ่มว่าง และแทนที่ตัวอย่างด้วยกรดแอสคอร์บิก 0.5 มล. ในกลุ่มควบคุม วัดแต่ละตัวอย่างสามครั้งแบบขนาน แล้วหาค่าเฉลี่ย O-2 · อัตราการกวาดล้าง (%)=(A ว่าง - ตัวอย่าง)/A ว่าง × 100%

2.2.3 ทดสอบความสามารถในการไล่ของซิสตานเช่ เดซินิโกลาพอลิแซ็กคาไรด์เป็น · OH อนุมูลอิสระ

Dสมุนไพร cistanche มีชีวิต—สารต้านอนุมูลอิสระ

ระบบ EDTA-Fe (Ⅱ) - เมทิลีนบลู - H2O2 ใช้เพื่อทดสอบความสามารถในการกำจัดของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola บนอนุมูลไฮดรอกซิล หลักการคือ EDTA-Fe (Ⅱ) ทำปฏิกิริยากับไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์เพื่อสร้างอนุมูลอิสระ · OH ซึ่งช่วยลดค่าการดูดกลืนสูงสุดของสารละลายเมทิลีนบลูที่ 660 นาโนเมตร

เติมสารละลาย LFeSO4 5 มิลลิโมล/ลิตร 1.0มิลลิลิตร, สารละลาย LEDTA 5 มิลลิโมล/ลิตร 1.2 มล., 2.0มิลลิลิตรของ 0.03mol/L NaH2PO{ {12}}สารละลายบัฟเฟอร์ Na2HPO4 (pH=7.4) และสารละลายไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 20มิลลิโมล/ลิตร 1.3 มล. ลงในชุดหลอดทดลองที่มีสต็อปเปอร์ขนาด 10 มล. เขย่าขวดให้เข้ากัน เติมสารละลายเมทิลีนบลู 0.7 มล. 0.2 มิลลิโมล/ลิตร จากนั้นเติมสารละลายที่จะทดสอบ 1.0 มล. และวิตามินซี 1.0 ที่มีความเข้มข้นต่างกันตามลำดับ เจือจางเป็น 1000 มล. กับน้ำ ผสมให้เข้ากัน เก็บที่อุณหภูมิ 37 องศาเป็นเวลา 30 นาที และวัดค่าการดูดกลืนแสงของสารละลายแต่ละชนิดที่ 660 นาโนเมตร กลุ่มเปล่าแทนที่สารละลายตัวอย่างด้วยน้ำ ตัวอย่างแต่ละตัวอย่างจะต้องวัดแบบขนานสามครั้ง และจะต้องนำค่าเฉลี่ยมา · อัตราการขจัดอนุมูลอิสระของตัวอย่าง (%)=[(A2-A1)/(A0-A1) × ในสูตร 100%: การดูดกลืนแสง A0 -- มูลค่าของท่อที่ไม่เสียหาย A1 - ค่าการดูดกลืนแสงของท่อที่เสียหาย A2 -- ค่าโฟโตเมตริกหลังจากเพิ่มตัวอย่าง

2.2.4 การทดสอบ DPPH · ความสามารถในการไล่ของซิสตานเช่ เดซินิโกลาโพลีแซ็กคาไรด์

ใช้สารละลายโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola Polysaccharide ขนาด {{0}.1 มล. แล้วเติมลงในสารละลาย 5.0mLDPPH · ผสมให้เข้ากันอย่างรวดเร็ว และยืนเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง

ตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงการดูดกลืนแสงที่ความยาวคลื่น 517 นาโนเมตร [4] ตัวอย่างแต่ละตัวอย่างจะต้องวัดแบบขนานสามครั้ง และจะต้องนำค่าเฉลี่ยมา อัตราการกวาดล้างตัวอย่างของ DPPH · (%)=1 - [(AB)/A0] × ในสูตร 100%: A0 -- ค่าการดูดกลืนแสงของ DPPH · (1.9mLDPPH ·+0.1mL50% เอทานอล) โดยไม่มีตัวอย่าง; เอ - ค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่างหลังจากทำปฏิกิริยากับ DPPH ·; B -- ค่าการดูดกลืนแสงของตัวอย่างเปล่า (ตัวอย่าง 0.1 มล.+1.9 มล. เอทานอล 50%)

2.2.5ซิสตานเช่ เดซินิโกลาการทดสอบออกซิเจน 1O2 ของเสื้อกล้ามไล่โพลีแซ็กคาไรด์

ออกซิเจนแบบเส้นเดี่ยว (1O2) เกิดจากปฏิกิริยาทางเคมีของ NaClO และ H2O2 ที่ 37 องศา [5] สารละลายที่ใช้ในการกำหนดหา 1O2 คือสารละลาย NaClO 100 μ L2.8 มิลลิโมล/ลิตร, สารละลาย 400 μ L5 มิลลิโมล/LNaOH, สารละลาย 300 μ L10 มิลลิโมล/LH2O2, สารละลาย 50 μ L1 มิลลิโมล/ลูมินอล ในระหว่างการทำปฏิกิริยา สารละลายของปฏิกิริยาจะถูกเติมลงในสารละลายตัวอย่าง และเครื่องมือเคมีเรืองแสงจะบันทึกกระบวนการของปฏิกิริยาในเวลาเดียวกันโดยอัตโนมัติ ใช้ NaClO-H2O2-NaOH-ลูมินอลเป็นตัวควบคุมเปล่า เริ่มปฏิกิริยา และเติมสารละลายปฏิกิริยาลงในหลอดตัวอย่างจากขวดเก็บของอุปกรณ์เคมีเรืองแสงตามปริมาณที่กำหนดโดยขั้นตอน จากนั้น ความเข้มของเคมีเรืองแสงของส่วนผสมปฏิกิริยาจะถูกบันทึกไว้ในกระดาษบันทึกทุกๆ 5 วินาที แต่ละตัวอย่างจะถูกวัดแบบขนานสามครั้ง และนำค่าเฉลี่ยมา

อัตราการกวาดล้างคำนวณตามสูตรต่อไปนี้: อัตราการกวาดล้าง (%)=(ควบคุมความเข้มของการส่องสว่าง - ความเข้มการส่องสว่างของตัวอย่าง)/ควบคุมความเข้มของการส่องสว่าง × 100%

3 ผลลัพธ์และการอภิปราย

3.1 ผลการกำจัดของซิสตานเช่ เดซินิโกลาพอลิแซ็กคาไรด์บน O-2 ·

ประโยชน์ของ cistanche tubulosa—อันติโอซีแดนท์

คุณสมบัติทางเคมีของ O-2 · มีฤทธิ์อยู่ ซึ่งสามารถทำให้กรดไขมันบนแผ่นชีวะผลิตเปอร์ออกไซด์และทำลายเซลล์ได้ [6] ในบทความนี้ ใช้วิธีการโดปามีนเพื่อกำหนดความสามารถในการขับของ O-2 · ความสามารถในการขับของ Cistanche Deserticola ถึง O-2 · แสดงในรูปที่ 1 ผลการทดลองพบว่าโพลีแซ็กคาไรด์ของ Cistanche Deserticola สามารถยับยั้ง O-2 · ที่เกิดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันของโดปามีนได้โดยอัตโนมัติ และเพิ่มขึ้นตามการเพิ่มขึ้นของ ความเข้มข้นภายในช่วงความเข้มข้นที่วัดได้ (0-8มก./มล.) แต่ความสามารถในการขับออกต่ำกว่ากรดแอสคอร์บิก

3.2 ผลการไล่ของซิสตานเช่ เดซินิโกลาพอลิแซ็กคาไรด์ · OH

·OH เป็นหนึ่งในอนุมูลอิสระที่ออกฤทธิ์มากที่สุดในสายพันธุ์ออกซิเจนที่ออกฤทธิ์ สามารถทำปฏิกิริยากับโมเลกุลขนาดใหญ่ทางชีววิทยาในเซลล์ที่มีชีวิตได้เกือบทุกชนิด และอาจนำไปสู่กระบวนการทางชีวเคมี เช่น การเกิด lipid peroxidation, การเกิดปฏิกิริยาโพลีเมอไรเซชันของโปรตีน และการเกิด depolymerization การแตกของกรดนิวคลีอิก เป็นต้น ในเนื้อเยื่อของร่างกาย ทำให้เกิดโรคของเนื้อเยื่อและเซลล์ นำไปสู่การเกิด โรคต่างๆและเร่งความชราของร่างกาย [7] ความสามารถในการไล่โพลีแซ็กคาไรด์ของ Cistanche Deserticola ถึง · OH แสดงไว้ในรูปที่ 2 ผลการทดลองพบว่าโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola มีผลดีต่อ · OH และจะเพิ่มขึ้นตามความเข้มข้นที่เพิ่มขึ้น

3.3 ความสามารถในการขับของ Cistanche Deserticola Polysaccharide ถึง DPPH ·

DPPH · (อนุมูลอิสระไดฟีนิลขมขื่นไฮดราซีน) เป็นอนุมูลอิสระที่เสถียร ซึ่งมีสีม่วงในตัวทำละลายอินทรีย์และมีการดูดซึมที่แข็งแกร่งใกล้ 517 นาโนเมตร หลังจากเติมสารต้านอนุมูลอิสระแล้ว อนุมูลอิสระบางส่วนจะถูกกำจัดออกไป ซึ่งจะทำให้การดูดซึมอ่อนลง ซึ่งสามารถใช้เพื่อประเมินฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารนี้ได้ [8] ดูรูปที่ 3 สำหรับ DPPH · ความสามารถในการกำจัดของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าความสามารถในการกำจัดของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola บน DPPH · มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับความเข้มข้นของมัน และความสามารถในการขับออกนั้นมากกว่าความสามารถในการกำจัดของกรดแอสคอร์บิก

3.4 ความสามารถในการกำจัดของ Cistanche Deserticola Polysaccharide ถึง 1O2

ออกซิเจนแบบบรรทัดเดียวเป็นออกซิเจนโมเลกุลที่น่าตื่นเต้นพร้อมคุณสมบัติทางเคมีที่ออกฤทธิ์ เนื่องจากอิเล็กตรอนที่ไม่ได้รับการจับคู่มีแนวโน้มที่จะจับคู่ อนุมูลอิสระจึงแสดงคุณสมบัติทางเคมีที่แอคทีฟมากกว่า [9] ความสามารถในการขับของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola ถึง 1O2 แสดงไว้ในรูปที่ 4 ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าความสามารถในการขับของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola ถึง 1O2 ต่ำกว่าความสามารถในการขับของกรดแอสคอร์บิกในช่วง 0-4.0 มก. /มล. และความสามารถในการขับของโพลีแซคคาไรด์ Cistanche Deserticola สูงกว่ากรดแอสคอร์บิกเมื่อความเข้มข้นมากกว่า 40มก./มล.

4. บทสรุป

การศึกษาฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของโพลีแซ็กคาไรด์ Cistanche Deserticola ในหลอดทดลอง ได้รับการศึกษาอย่างละเอียดผ่านระบบอนุมูลอิสระที่ปราศจากออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยาต่างๆจากผลการทดลอง จะเห็นได้ว่าภายในช่วงความเข้มข้นของการทดลอง สารสกัดโพลีแซ็กคาไรด์ของ Cistanche Deserticola มีผลในการไล่ออกต่อ O-2 ·, · OH, DPPH · และ 1O2 และผลการไล่ออกจะแตกต่างกันออกไป ระบบผลปรากฏว่าCistanche Deserticola Polysaccharide เป็นสารต้านอนุมูลอิสระจากธรรมชาติภายนอกที่มีประสิทธิภาพ ซึ่งคุ้มค่ากับการวิจัย การพัฒนา และการใช้ประโยชน์อย่างครอบคลุมเพิ่มเติม.

ซิสแทนเช่ ทูบูโลซ่า 200มก—อันติโอซีแดนท์