การผลิตเอนไซม์ไลเปสโดย Yarrowia Lipolytica ในการหมักในสถานะของแข็งโดยใช้ผลพลอยได้ของผลไม้อเมซอนและกากถั่วเหลืองเป็นสารตั้งต้น ตอนที่ 2
Jun 30, 2023
2.5. น้ำมันปลาไฮโดรไลซิส
ไลเปสถูกนำมาใช้ในการไฮโดรไลซิสของกรดไขมันเพื่อให้ได้กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อน (PUFAs) [44,45] ข้อได้เปรียบหลักของการใช้ไลเปสในการผลิตกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนคือความจำเพาะของเอนไซม์และปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นภายใต้สภาวะอุณหภูมิปานกลาง ซึ่งช่วยรักษาโครงสร้างของ PUFAs [44] การใช้ไลเปสเป็นที่ต้องการมากกว่าวิธีการทางเคมี เนื่องจากให้กลีเซอไรด์ที่ให้ผลผลิตต่ำและมีความบริสุทธิ์ [46] บทบาทของไลเปสในการไฮโดรไลซิสแบบเลือกของกรดไขมันอิ่มตัว (SFAs) และกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงเดี่ยว (MUFAs) จากไตรเอซิลกลีเซอรอล (TAGs) คือการผลิตกลีเซอไรด์ที่อุดมไปด้วย PUFA หลักการของวิธีนี้คืออุปสรรค steric ที่เกิดจากการจัดเรียงโมเลกุลของพันธะคู่ carbon-cis ใน PUFA ที่ทำให้เกิดการพับของสายโซ่กรดไขมัน ดังนั้นตำแหน่งที่ใช้งานของเอนไซม์จึงไม่สามารถเข้าถึงพันธะเอสเทอร์ของกรดไขมันเหล่านี้ได้ด้วยโครงกลีเซอรอลของพวกมัน [47,48] ประโยชน์มากมายเกี่ยวข้องกับการใส่กรดไขมันในอาหาร เช่น พัฒนาการของเด็ก การป้องกันโรคหัวใจและหลอดเลือด มะเร็ง และความผิดปกติทางจิตต่างๆ (โรคซึมเศร้า โรคสมาธิสั้น โรคสมาธิสั้น) นอกเหนือจากศักยภาพในการต้านการอักเสบและความดันโลหิตสูง ควบคุม [49].
Glycoside ของ cistanche ยังสามารถเพิ่มการทำงานของ SOD ในเนื้อเยื่อหัวใจและตับ และลดปริมาณของ lipofuscin และ MDA ในแต่ละเนื้อเยื่อได้อย่างมีประสิทธิภาพ กำจัดอนุมูลออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาต่างๆ (OH-, H₂O₂ ฯลฯ) ได้อย่างมีประสิทธิภาพ และป้องกันความเสียหายของ DNA ที่เกิดขึ้น โดย OH-อนุมูล Cistanche phenylethanoid glycosides มีความสามารถในการกำจัดอนุมูลอิสระที่แข็งแกร่ง ความสามารถในการลดที่สูงกว่าวิตามินซี ปรับปรุงกิจกรรมของ SOD ในการระงับสเปิร์ม ลดปริมาณของ MDA และมีผลป้องกันบางอย่างต่อการทำงานของเยื่อหุ้มสเปิร์ม โพลีแซคคาไรด์ของ Cistanche สามารถเสริมการทำงานของ SOD และ GSH-Px ในเม็ดเลือดแดงและเนื้อเยื่อปอดของหนูทดลองที่ชราภาพซึ่งเกิดจาก D-galactose รวมทั้งลดปริมาณ MDA และคอลลาเจนในปอดและพลาสมา และเพิ่มเนื้อหาของอีลาสติน ส่งผลดีต่อ DPPH, ยืดเวลาการขาดออกซิเจนในหนูชรา, ปรับปรุงกิจกรรมของ SOD ในซีรั่ม, และชะลอการเสื่อมทางสรีรวิทยาของปอดในหนูชราทดลองที่มีความเสื่อมทางสัณฐานวิทยาของเซลล์, การทดลองแสดงให้เห็นว่า Cistanche มีความสามารถในการต้านอนุมูลอิสระที่ดี และมีศักยภาพในการเป็นยาป้องกันและรักษาโรคชราทางผิวหนัง ในขณะเดียวกัน echinacoside ใน Cistanche มีความสามารถที่สำคัญในการกำจัดอนุมูลอิสระ DPPH และมีความสามารถในการกำจัดชนิดของออกซิเจนที่ทำปฏิกิริยาและป้องกันการเสื่อมสลายของคอลลาเจนที่เกิดจากอนุมูลอิสระ และยังมีผลการซ่อมแซมที่ดีต่อความเสียหายของแอนไอออนจากอนุมูลอิสระของไทมีน
【สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
การผลิตสารสกัดเอนไซม์เพื่อใช้ในกระบวนการต่างๆ เช่น การไฮโดรไลซิสอาจเป็นงานที่มีค่าใช้จ่ายสูง ดังนั้นการวิจัยวัตถุดิบที่ลดต้นทุนการผลิตจึงเป็นทางเลือกที่น่าสนใจ การใช้ตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพที่เป็นของแข็งเป็นสิ่งที่พึงปรารถนา เนื่องจากตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพที่เป็นของแข็งนี้สามารถนำมาใช้ซ้ำได้ในปฏิกิริยาของเอนไซม์ นอกจากนี้ ยังมีความเสถียรในการเก็บรักษาที่ดีเยี่ยมที่อุณหภูมิห้อง โดยไม่มีค่าใช้จ่ายในการทำความเย็น และการขนส่งที่สะดวก [41] ยังไม่มีรายงานเกี่ยวกับการใช้ตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพที่เป็นของแข็งจาก Yarrowia lipolytica เพื่อผลิต PUFAS โดยเอนไซม์ไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลา ดังนั้น จึงมีการศึกษาการประยุกต์ใช้สารสกัดจากเอนไซม์อย่างหยาบและตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่เป็นของแข็งที่ผลิตโดยใช้เค้กน้ำมันแอนดิโรบาและกากถั่วเหลือง (50:50) เพื่อประเมินศักยภาพของการใช้เอนไซม์ในการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลาเพื่อผลิตกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนเพิ่มเติมในกระบวนการที่เหมาะสม (ภาพที่ 6) เป็นไปได้ที่จะสังเกตเห็นการไฮโดรไลซิส (DH) ในระดับสูงในเวลาที่เกิดปฏิกิริยาสั้นลงโดยใช้ตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพที่เป็นของแข็ง (63, 70.8, 72.5 และ 74.7 เปอร์เซ็นต์ ) มากกว่าสารสกัดจากเอนไซม์ (47.5, 61.5, 66.5 และ 74.8 เปอร์เซ็นต์ ) หลังจาก 24, 48, 72 ชั่วโมง และ 144 ชั่วโมง ตามลำดับ
กระบวนการไฮโดรไลซิสของเอนไซม์ถูกนำมาใช้อย่างต่อเนื่องเพื่อให้ได้กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนเข้มข้น เกา et al. [50] ใช้ไลเปสในการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลาคอดและเนื้อหาของ EPA และ DHA ดีขึ้น 3.24-เท่า และ 1.98-เท่า ตามลำดับ อาร์ธี และคณะ [20] ใช้ไลเปสเข้มข้น (1,000 U/mL) ในการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลา และยังพบอัตราการไฮโดรไลซิสสูงกว่า 60 เปอร์เซ็นต์หลังจาก 72 ชั่วโมง ในงานนี้ ระดับการไฮโดรไลซิสที่ดีขึ้นทำได้โดยใช้สารสกัดเอนไซม์ไลเปสอย่างหยาบ (กล่าวคือ ไม่มีการทำให้บริสุทธิ์) เมื่อเปรียบเทียบเวลาไฮโดรไลซิสเดียวกัน ผู้เขียนคนอื่นได้ศึกษาการไฮโดรไลซิสของน้ำมันตับ Musteleus mustelus และน้ำมันแมวน้ำที่รายงาน 75 เปอร์เซ็นต์และ 70 เปอร์เซ็นต์ของการไฮโดรไลซิสหลังจาก 24 และ 9 ชั่วโมงของปฏิกิริยา ตามลำดับ [25,26]
มาร์ตินส์และคณะ [51] ใช้ไลเปสเชิงพาณิชย์จาก Burkholderia cepacia (Amano) สำหรับการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลาและหลังจากปฏิกิริยา 48 ชั่วโมง ได้รับ DHA 55.6 เปอร์เซ็นต์เมื่อเทียบกับปริมาณสูงสุดที่คำนวณได้ ในงานของเรา ในการศึกษาเบื้องต้น เราได้ 70.8 เปอร์เซ็นต์ของการไฮโดรไลซิสหลังจาก 48 ชั่วโมงของปฏิกิริยาโดยใช้ตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพที่เป็นของแข็ง
จนถึงตอนนี้ การค้นพบดังกล่าวได้ชี้ให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการใช้ผลพลอยได้เพื่อผลิตเอนไซม์ไลเปสในการหมักในสถานะของแข็ง เพื่อลดความเสียหายต่อสิ่งแวดล้อม การประเมินผลพลอยได้ และความคุ้มค่า นอกจากนี้ ผลลัพธ์ยังแสดงให้เห็นศักยภาพของเอนไซม์ไลเปสในการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลาเพื่อผลิตกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนเพิ่มเติมในกระบวนการที่เหมาะสม
แม้ว่าผลพลอยได้จากอุตสาหกรรมเกษตรต้นทุนต่ำจะมีมากมาย แต่การกำหนดและกำหนดมาตรฐานขององค์ประกอบ นอกเหนือจากการประมาณต้นทุนเพื่อให้ได้สารสกัดเอนไซม์และตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่เป็นของแข็งจากผลพลอยได้จากอุตสาหกรรมเกษตรต้นทุนต่ำยังคงเป็นความท้าทาย แต่ ขึ้นอยู่กับประเภทของผลพลอยได้ ฤดูกาล และปริมาณที่สร้างขึ้น ตลอดจนกระบวนการที่ใช้ และที่ตั้งทางภูมิศาสตร์ รวมถึงปัจจัยอื่นๆ ดังนั้น ปัญหาต่างๆ เช่น ความซับซ้อนของห่วงโซ่และต้นทุนด้านลอจิสติกส์ การใช้กระบวนการที่ซับซ้อนและมีค่าใช้จ่ายสูง การใช้พลังงานสูง และปัญหาด้านกฎระเบียบ และอื่นๆ จะต้องเอาชนะให้ได้ ในแง่นี้ การแปรรูปผลพลอยได้ต้องเอาชนะอุปสรรคหลายประการก่อนที่จะสามารถดำเนินการได้ในเชิงเศรษฐกิจ รวมถึงความจำเป็นในการแปรรูปวัตถุดิบจำนวนมาก ความสามารถในการแปรรูปวัตถุดิบที่ต่างกัน โลจิสติกส์แบบบูรณาการกับอุตสาหกรรมแปรรูปต่างๆ ประมวลผลในหน่วยประมวลผลเพื่อให้เกิดส่วนผสมที่มีมูลค่าสูง และอื่นๆ [52–55]
3. วัสดุและวิธีการ
3.1. วัสดุ
กากถั่วเหลืองซื้อจาก Caramuru Alimentos (Goiás ประเทศบราซิล) เค้กน้ำมัน Andiroba ที่ผลิตจากการสกัดน้ำมันจัดทำโดย Beraca Ingredientes Naturais (ปารา ประเทศบราซิล) พื้นผิวทั้งสองได้รับมาตรฐานเกี่ยวกับ granulometry (<1.18 mm) and properly stored under refrigeration in polypropylene packages until use. The fish oil was purchased from Mundo dos Óleos, and according to the manufacturer, it is extracted by cold pressing and filtration, obtained from raw material with guaranteed origin. All other chemicals used were of analytical grade and used as received without any further purification, being obtained from Tedia (acetone), Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA, glucose, azocasein, agar, yeast extract, ethanol, methanol), Vetec (Tween 80), Oxoid (peptone), Isofar (sodium hydroxide, gum Arabic), and Precision Plus Protein Kaleidoscope—Bio-rad (molecular mass markers, kDa).
3.2. สภาวะการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์และหัวเชื้อ
Yarrowia lipolytica IMUFRJ50682 ซึ่งแยกได้จากปากแม่น้ำใน Guanabara Bay, Rio de Janeiro, Brazil [56] ถูกเพาะที่อุณหภูมิ 28 ◦C ในอาหารเลี้ยงเชื้อ YPD—agar (w/v: สารสกัดจากยีสต์ 1 เปอร์เซ็นต์ ; peptone 2 เปอร์เซ็นต์ ; กลูโคส 2 เปอร์เซ็นต์ ; วุ้น ร้อยละ 3 ). เซลล์ถูกเลี้ยงในอาหารเหลวที่มีสารสกัดจากยีสต์ 1 เปอร์เซ็นต์ (w/v), เปปโทน 2 เปอร์เซ็นต์ (w/v) และกลูโคส 2 เปอร์เซ็นต์ (w/v) เป็นเวลา 72 ชั่วโมง 160 รอบต่อนาทีที่ 28 ◦ซ
3.3. การวิเคราะห์ลักษณะผลพลอยได้จากอุตสาหกรรมเกษตร
องค์ประกอบทางกายภาพและเคมีของกากถั่วเหลืองและเค้กน้ำมันแอนิโรบาถูกกำหนดในแง่ของความชื้น โปรตีน คาร์โบไฮเดรต ขี้เถ้า สารสกัดอีเทอร์ เส้นใยที่ไม่ละลายน้ำ และปริมาณเส้นใยที่ละลายน้ำได้ ตามวิธีการที่รายงานโดยสมาคมนักเคมีวิเคราะห์อย่างเป็นทางการ (AOAC) ) [57]. นอกจากนี้ เนื่องจากการผลิตเอนไซม์ไลเปสโดย Y. lipolytica ได้รับผลกระทบจากการเติมอากาศ [58] ความพรุนของเบดใน SSF ได้รับการประเมินตามสมการ (1) โดยที่ ε คือความพรุน (แสดงใน m3 air·m−3 เบด); ρdrysolid คือความหนาแน่นปรากฏของตัวอย่างแห้ง (kg·m−3 ); และ ρwetsolid คือความหนาแน่นของตัวอย่างหลังจากเติมน้ำ (kg·m−3 ) [58]
3.4. การผลิตเอนไซม์ไลเปสโดย SSF
เมทริกซ์ของแข็งที่มีกากถั่วเหลืองและเค้กน้ำมันแอนิโรบาถูกเตรียมก่อนการฉีดวัคซีนในเครื่องปฏิกรณ์แบบถาดที่มีสัดส่วนของสารตั้งต้นต่างกัน และนึ่งฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 ◦C เป็นเวลา 20 นาที พารามิเตอร์กระบวนการคงที่ที่ใช้สำหรับการผลิตเอนไซม์ไลเปสคือความชื้น 55 เปอร์เซ็นต์ และความเข้มข้นของหัวเชื้อที่ 0.71 มก. มวลชีวภาพแห้ง/g สารตั้งต้น [24] เครื่องปฏิกรณ์ถูกบ่มในห้อง Biochemical Oxygen Demand (BOD) ที่อุณหภูมิ 28 ◦C และตัวอย่างที่เสียสละ (เช่น เครื่องปฏิกรณ์แบบถาดเดียวสำหรับเวลาตัวอย่าง) ถูกนำมาตลอดการหมักเพื่อการวิเคราะห์
SSF ได้รับการประเมินโดยใช้เค้กน้ำมัน andiroba และกากถั่วเหลืองผสมกัน ({{0}}:1{{10}}0; 25:75; 50:50; 75 :25 และ 100:0) ที่เวลาต่างกัน (0, 12, 24, 32 และ 48 ชม.) หลังจากนั้น การเสริมเมทริกซ์ของแข็งที่มีเค้กน้ำมันแอนดิโรบาและกากถั่วเหลือง (50:50) ได้รับการประเมินโดยการเติมน้ำมันถั่วเหลือง 1.5 (เปอร์เซ็นต์น้ำหนัก/ปริมาตร) เมื่อเวลาผ่านไป (0, 12, 14, 20, 24, 28, 48, และ 72 ชั่วโมง) เพื่อให้กิจกรรมการสลายไขมันเพิ่มขึ้น นอกจากนี้ยังทดสอบการมีอยู่ของ Tween 80 (0.001 เปอร์เซ็นต์ w/v) ในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีน้ำมันถั่วเหลือง 1.5 ( เปอร์เซ็นต์ w/v) การหมักถูกตรวจสอบโดยการกำหนดกิจกรรมของไลเปสและโปรตีเอส ตลอดจนความชื้นและค่า pH (อธิบายไว้ในส่วนย่อย "3.6 การวิเคราะห์เชิงวิเคราะห์")
3.5. การสกัดด้วยเอนไซม์และการผลิตตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่เป็นของแข็ง
การสกัดด้วยเอนไซม์ดำเนินการโดยการเติมโพแทสเซียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 50 มิลลิโมลาร์ pH 7.0 50 มล. ในถังปฏิกรณ์ชีวภาพตามด้วยการบ่มที่อุณหภูมิ 37 ◦ซ 200 รอบต่อนาที เป็นเวลา 20 นาที ต่อจากนั้น วัสดุหมักที่แขวนลอยอยู่ในบัฟเฟอร์ถูกกดโดยใช้เครื่องบดที่มีการจ้องมองและหมุนเหวี่ยงที่ 3,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 5 นาที ตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพที่เป็นของแข็งได้จากการทำให้แห้งโดยเยือกแข็งของมวลทั้งหมดที่ได้รับเมื่อสิ้นสุดกระบวนการหมักเป็นเวลา 72 ชั่วโมง และเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 7 เดือนเพื่อตรวจสอบความคงตัวของเอนไซม์
3.6. การกำหนดเชิงวิเคราะห์
3.6.1. กิจกรรมของเอนไซม์ไลเปส
กิจกรรมของเอนไซม์ไลเปสดำเนินการโดยใช้วิธีการที่เสนอโดย Freire et al [59]. ตัวกลางของปฏิกิริยาถูกทำให้เป็นอิมัลชันในโฮโมจีไนเซอร์ Ultra Turrax (IKA) โดยใช้น้ำมันมะกอก 5 เปอร์เซ็นต์ (w/v) และกัมอารบิก 5 เปอร์เซ็นต์ (w/v) ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 100 mM (pH 7.0) สารสกัดเอนไซม์ (1 มล.) หรือ 0.5 กรัมของตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพที่เป็นของแข็งถูกเติมลงในของผสมปฏิกิริยา 19 มล. และบ่มเป็นเวลา 20 นาที, 200 รอบต่อนาทีที่ 37 ◦ซ ปฏิกิริยาถูกขัดจังหวะด้วยการเติมสารละลายอะซีโตน-เอทานอล 20 มล. และกรดไขมันอิสระถูกไทเทรตในเครื่องไทเทรตอัตโนมัติ (Metrohm 916—Ti-Touch) โดยใช้สารละลาย NaOH 0.04 โมล/ลิตร หนึ่งหน่วยของกิจกรรมไลเปส (U) ถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่ผลิตกรดไขมัน 1 ไมโครโมลต่อนาทีภายใต้เงื่อนไขการทดสอบ
3.6.2. กิจกรรมโปรติเอส
กิจกรรมของโปรตีเอสถูกหาปริมาณตามวิธีการของ Charney และ Tomarelli [60] สารสกัดเอนไซม์ (0.5 มล.) ถูกเติมใน 0.5 มล. ของ 0.5 เปอร์เซ็นต์ (w/v) สารละลายอะโซเคซีนที่เตรียมด้วย 50 มิลลิโมลาร์ อะซิเตตบัฟเฟอร์ (pH) และบ่ม ที่อุณหภูมิ 32 ◦C เป็นเวลา 40 นาที ปฏิกิริยาหยุดลงโดยการเติมสารละลายกรดไตรคลอโรอะซิติก 15 เปอร์เซ็นต์ (w/v) 0.5 มล. และตัวอย่างถูกปั่นแยกที่ 3000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาที สารลอยเหนือตะกอน (100 µL) ถูกเติมใน 96-จานไมโครไทเทอร์ที่มีโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ 5 โมลาร์ 100 µL และวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 428 นาโนเมตรในเครื่องอ่านเพลตไมโครไทเทอร์ (SpectraMax, Molecular Devices) หนึ่งหน่วยกิจกรรมถูกกำหนดให้เป็นปริมาณของเอนไซม์ที่สามารถส่งเสริมการดูดกลืนแสงที่เพิ่มขึ้นแบบรวมต่อนาที
3.6.3. ปริมาณความชื้นและค่า pH
ตรวจสอบปริมาณความชื้นโดยใช้เครื่องชั่งสำหรับวิเคราะห์ความชื้น (AND MX-50) วัดค่า pH ด้วยเครื่องวัดค่า pH (TECNAL รุ่น TR-107 PT100 ประเทศบราซิล)
3.7. SDS-PAGE
อิเล็กโตรโฟรีซิสดำเนินการตามวิธีที่รายงานโดยแหลมมลิ [61] ในเจลโพลีอะคริลาไมด์ (การซ้อน 5 เปอร์เซ็นต์, การแยก 15 เปอร์เซ็นต์, ความหนา 0.75 มม.) ตัวอย่างถูกผสมในอัตราส่วน (1:4) จากส่วนผสมของเค้กน้ำมันแอนดิโรบาและถั่วเหลือง (50:50) กับบัฟเฟอร์ตัวอย่างที่มี -mercaptoethanol ให้ความร้อนที่ 95 ◦C เป็นเวลา 5 นาที แล้วทาบนเจล อิเล็กโทรโฟรีซิสดำเนินการที่ 150 V เป็นเวลา 30 นาที (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) และพบเจลโดยใช้ Coomassie Blue R-250 ใช้เครื่องหมายโปรตีนมาตรฐาน (Bio-rad, Hercules, CA, USA) ที่มีน้ำหนักโมเลกุลตั้งแต่ 10 ถึง 250 kDa
3.8. การไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลา: การประยุกต์ใช้ที่เป็นไปได้
ระดับของไฮโดรไลซิส (DH) ของน้ำมันปลาวัดได้โดยการชั่งน้ำหนักน้ำมันปลา 1 กรัมและเติมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7 จำนวน 25 มล.0 เพื่อตรวจสอบศักยภาพของการใช้เอนไซม์ในการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลา จากนั้น 5 มล. ของสารสกัดเอนไซม์ (37 U) ในขวดสีเหลืองอำพันถูกกวนเป็นเวลา 168 ชั่วโมง ปฏิกิริยาหยุดลงด้วยอะซีโตน 20 มล. และกรดไขมันอิสระถูกไทเทรตในเครื่องไตเตรทอัตโนมัติด้วย KOH เมทานอล 0.1 โมลาร์ ปฏิกิริยาว่างเปล่าได้มาจากการเติมเอนไซม์เมื่อสิ้นสุดปฏิกิริยาเท่านั้น
ระดับของการไฮโดรไลซิส (DH) ถูกคำนวณตามสมการ (2):
โดยที่ As คือค่าความเป็นกรดของตัวอย่าง Aa คือความเป็นกรดจากการย่อยสลายอัตโนมัติ Si คือดัชนีสะพอนนิฟิเคชัน
3.9. การวิเคราะห์ทางสถิติ
การทดลองทั้งหมดทำซ้ำสามครั้ง ในการจำลองแบบแต่ละครั้ง การวิเคราะห์ได้ดำเนินการเป็นสามเท่า ผลลัพธ์สอดคล้องกับค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน วิเคราะห์ข้อมูลโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) ในขณะที่ใช้การทดสอบของ Tukey (p < 0.05) เพื่อทดสอบความแตกต่างระหว่างค่าเฉลี่ยโดยใช้ Sisvar 5.6
4. ข้อสรุป
สื่อการหมักที่ได้รับหลังจากผสมเค้กน้ำมันแอนดิโรบาและกากถั่วเหลืองมีประสิทธิภาพมากในการผลิตเอนไซม์ไลเปส เมทริกซ์การหมักที่เลือกคือส่วนผสมของเค้กน้ำมัน andiroba และกากถั่วเหลืองในอัตราส่วน 50:50 ทำให้เกิด 63.70 U·g −1 ของกิจกรรมการสลายไขมัน กิจกรรมการสลายไขมันสูงสุดได้รับ (82.52 U·g −1 ) หลังจากใช้เค้กน้ำมัน andiroba และกากถั่วเหลืองในอัตราส่วน 50:50 หลังจากเสริมด้วย Tween 80 (0.001 เปอร์เซ็นต์ ) และน้ำมันถั่วเหลือง (1.5 เปอร์เซ็นต์ ) ในการวิเคราะห์อิเล็กโทรฟอเรติก ตรวจพบแถบของโปรตีนที่รายงานในเอกสารแล้วว่าเป็น YL Lip2 (37 และ 40 kDa) การใช้ไลเปสก่อนหน้านี้ในการไฮโดรไลซิสของน้ำมันทำให้ไฮโดรไลซิสได้ถึง 63 เปอร์เซ็นต์หลังจาก 24 ชั่วโมง การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่ามีความเป็นไปได้ที่จะผลิตเอนไซม์ไลเปสโดยใช้ผลพลอยได้จากภูมิภาคอเมซอนรวมกับกากถั่วเหลือง และนำไปใช้กับกระบวนการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลาเพื่อผลิตกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนเพิ่มเติมในกระบวนการที่เหมาะสม
ผลงานของผู้เขียน:การสร้างแนวคิด, BDR, ACL และ MAZC; วิธีการ ASSC, JCSS, FVdN, CECdS, BDR, ACL และ MAZC; การวิเคราะห์อย่างเป็นทางการ ASSC, JCSS และ FVdN; การสืบสวน, ASSC, JCSS และ FVdN; ทรัพยากร, ASSC, JCSS และ FVdN; การจัดการข้อมูล ASSC, JCSS และ FVdN; การเขียน—การเตรียมร่างต้นฉบับ ASSC, JCSS, FVdN และ CECdS; การเขียน—การตรวจทานและการแก้ไข BDR, CECdS, ACL และ MAZC; การกำกับดูแล, BDR, CECdSACL และ MAZC; การบริหารโครงการ BDR, ACL และ MAZC; การได้มาซึ่งเงินทุน BDR ACL และ MAZC ผู้เขียนทุกคนได้อ่านและยอมรับต้นฉบับฉบับที่เผยแพร่แล้ว
กิตติกรรมประกาศ: ผู้เขียนรับทราบ Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior—Brasil (CAPES—รหัสการเงิน 001); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico (CNPq); และ Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro (FAPERJ)
อ้างอิง
1. เซอร์ร่า, JL; โรดริเกซ, เอเอ็มดีซี ; Freitas, RA; ไมเรลเลส, AJdA; ดาร์เน็ต เอชเอช ; Silva, LHMd แหล่งทางเลือกของน้ำมันและไขมันจากพืชอเมซอน: กรดไขมัน, เครื่องมือเมทิล, แคโรทีนอยด์ทั้งหมด และองค์ประกอบทางเคมี ความละเอียดของอาหาร ภายใน 2019, 116, 12–19. [ครอสรีฟ] [PubMed]
2. เพนิโด ซี; คอนเต้, เอฟพี ; ชากัส, มิสซิสซิปปี; โรดริเกซ แคลิฟอร์เนีย ; เปเรร่า, เจเอฟ ; Henriques, MG ฤทธิ์ต้านการอักเสบของ tetranortriterpenoids ธรรมชาติที่แยกได้จาก Carapa guianensis Aublet ต่อโรคข้ออักเสบที่เกิดจากไซโมซานในหนู อักเสบ ความละเอียด 2549, 55, 457–464. [ครอสรีฟ] [PubMed]
3. เพนิโด ซี; คอสตา, แคลิฟอร์เนีย; เพนนาฟอร์เต อาร์เจ ; คอสตา MF; เปเรร่า, เจเอฟ ; เซียนนี่ เอซี ; Henriques, MG ฤทธิ์ต้านการแพ้ของ tetranortriterpenoids ธรรมชาติที่แยกได้จาก Carapa guianensis Aublet ต่อการซึมผ่านของหลอดเลือดและภาวะ hyperalgesia ที่เกิดจากสารก่อภูมิแพ้ อักเสบ ความละเอียด 2548, 54, 295–303. [ครอสรีฟ]
4. ซานโตส, คิป; เบนจามิม เจเคเอฟ ; คอสต้า, KAD; รีส, เอเอส ; ซูซ่า ปินเฮโร่, WB ; Santos, AS เทคนิคเมแทบอโลมิกส์ที่ใช้ในการตรวจสอบกรดฟีนอลจากผลพลอยได้จากอุตสาหกรรมเกษตรของ Carapa guianensis Aubl อาหรับ. เจ เคม 2021, 14, 103421 [CrossRef]
5. ลอเรนโซ, JNP; เฟอร์เรร่า, แอลเอ็มเอ็ม; มาร์ตินส์ จีซี; Nascimento, DG Produção, Biometria de Frutos e Sementes e Extração do Óleo de Andiroba (Carapa Guianensis Aublet; Sob Manejo Comunitário em Parintins, AM: Brasília, Brazil, 2017; p. 36.
6. อินทรีย์ S. Óleo de Andiroba
7. โคนาบ โบเลทิม ดา โซซิโอไบโอไดเวอร์ซิเดด; Conab: บราซิเลีย บราซิล 2017; เล่ม 1 หน้า 67.
8. ซูซ่า ซีอาร์; ลิมา หยวน; อาเซเวโด, ซีพี; รอสซี่, LMB Andiroba (Carapa guianensis Aubl.); Embrapa Amazônia Ocidental: บราซิเลีย, บราซิล, 2549; 21 น.
9. โอลิเวร่า เอฟ.; ซูซา, CE; เพกลาต์, วีรอล; ซัลกาโด เจเอ็ม ; ริเบโร, BD; โคลโญ่, MAZ ; Venâncio, ก.; Belo, I. การเพิ่มประสิทธิภาพการผลิตไลเปสโดย Aspergillus ibericus จากเค้กน้ำมันและการประยุกต์ใช้ในปฏิกิริยาเอสเทอริฟิเคชัน ผลิตภัณฑ์ชีวภาพอาหาร. กระบวนการ. 2560, 102, 268–277. [ครอสรีฟ]
10. Pandey, A. การหมักแบบโซลิดสเตต ชีวเคมี อังกฤษ ญ. 2546, 13, 81–84. [ครอสรีฟ]
11. Martínez, O.; ซานเชซ, อ.; ฟอนต์, X.; Barrena, R. การปรับปรุงการผลิตทางชีวภาพของสารประกอบกลิ่นหอมที่มีมูลค่าเพิ่มผ่านการหมักชานอ้อยและกากน้ำตาลในสถานะของแข็ง: กลยุทธ์การดำเนินงานและการขยายขนาดของกระบวนการ ไบโอเรสซอร์. เทคโนโลยี 2018, 263, 136–144. [ครอสรีฟ] [PubMed]
12. อโน, ท.; จิน, ยิม; มิซูโมโตะ เอส; เราะห์มาน, MS; โอคุโนะ เค; Shoda, M. การหมักในสถานะของแข็งของยาปฏิชีวนะ lipopeptide iturin A โดยใช้ระบบปฏิกรณ์การหมักในสถานะของแข็งแบบใหม่ เจ. เอ็นไวรอน. วิทย์ 2552, 21 (ภาคผนวก S1), S162–S165. [ครอสรีฟ]
13. วานเดนเบิร์ก, LPS; คาร์ป เอสจี; โอลิเวร่า, พีแซด; คาร์วัลโญ่, เจซี ; โรดริเกซ ซี; Soccol, CR บทที่ 18—การหมักในสถานะของแข็งสำหรับการผลิตกรดอินทรีย์ ในการพัฒนาเทคโนโลยีชีวภาพและวิศวกรรมชีวภาพในปัจจุบัน Pandey, A., Larroche, C., Soccol, CR, Eds.; เอลส์เวียร์: อัมสเตอร์ดัม เนเธอร์แลนด์ 2018; หน้า 415–434.
14.ศาลา อ.; วิตโทน เอส; บาร์เรนา อาร์; ซานเชซ, อ.; Artola, A. สแกนของเสียจากอุตสาหกรรมเกษตรเพื่อเป็นสารตั้งต้นสำหรับการผลิตยาฆ่าแมลงจากเชื้อรา: การใช้ Beauveria bassiana และ Trichoderma harzianum ในการหมักแบบโซลิดสเตต เจ. เอ็นไวรอน. จัดการ 2021, 295, 113113 [CrossRef] [PubMed]
15. บานัท ไอเอ็ม; Carboué, Q.; Saucedo-Castañeda, G.; de Jesús Cázares-Marinero, J. สารลดแรงตึงผิวทางชีวภาพ: การผลิตสารเคมีชนิดพิเศษที่เป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อมและการผลิตที่มีศักยภาพโดยใช้เทคโนโลยีการหมักแบบ Solid-State (SSF) ไบโอเรสซอร์. เทคโนโลยี 2021, 320, 124222 [CrossRef] [PubMed]
16. เปเรร่า อาแอส; ซานตาอานา, GCF; Amaral, PFF ของเสียจากอุตสาหกรรมเกษตรจากมะม่วงสำหรับการผลิตเอนไซม์ไลเปสจาก Yarrowia lipolytica และศักยภาพของของแข็งหมักในฐานะตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพ ผลิตภัณฑ์ชีวภาพอาหาร. กระบวนการ. 2019, 115, 68–77. [ครอสรีฟ]
17. บรีกิด้า, AIS; อมาราล, PFF; โคลโญ่, MAZ ; Gonçalves, LRB Lipase จาก Yarrowia lipolytica: การผลิต ลักษณะเฉพาะ และการประยุกต์ใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาชีวภาพทางอุตสาหกรรม เจ โมล คาตาล. บี เอ็นไซม์ 2557, 101, 148–158. [ครอสรีฟ]
18. เทรเชล เอช.; โอลิเวร่า, ด.; มาซุตติ, แมสซาชูเซตส์; ดิ ลูชโช, ม.; Oliveira, JV บทวิจารณ์เกี่ยวกับการผลิตจุลินทรีย์ไลเปส เทคโนโลยีไบโอโพรเซสของอาหาร. 2553, 3, 182–196. [ครอสรีฟ]
19. เมธา, อ.; กูเลเรีย เอส; ชาร์มา อาร์; คุปตะ ร. 6—ไลเปสและการประยุกต์ใช้โดยเน้นในอุตสาหกรรมอาหาร ในเทคโนโลยีชีวภาพจุลินทรีย์ในอาหารและสุขภาพ; เรย์ อาร์ซี เอ็ด; สื่อวิชาการ: Cambridge, MA, USA, 2021; หน้า 143–164.
20. อาร์ธี ม.; ศราวนันท์ ป.; Ayyadurai, N.; โกธามัน เอ็มเค ; Kamini, NR กระบวนการสองขั้นตอนสำหรับการผลิตโอเมก้า 3-ความเข้มข้นของกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนจากน้ำมันปลาซาร์ดีนโดยใช้ Cryptococcus sp. MTCC 5455 ไลเปส เจ โมล คาตาล. บี เอ็นไซม์ 2559, 125, 25–33. [ครอสรีฟ]
21. นาสซิเมนโต้, FV; คาสโตร, AM; เซคจิ, เออาร์ ; Coelho, MAZ ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการเสริมสื่อในการหมักแบบโซลิดสเตตของเปลือกถั่วเหลืองโดย Yarrowia lipolytica: ผลกระทบต่อการผลิตไลเปสในถาดและเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพแบบเบดหุ้มฉนวน ชีวเคมี อังกฤษ J. 2021, 166, 107866. [CrossRef]
22. การขาย, JCS; คาสโตร, AM; ริเบโร, BD; Coelho, MAZ การเสริมเปลือกแตงโมเป็นตัวเพิ่มการผลิตไลเปสและเอสเทอเรสโดย Yarrowia lipolytica ในการหมักในสถานะของแข็ง และศักยภาพในการใช้เป็นตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพในปฏิกิริยาดีโพลิเมอร์ไรเซชันของโพลี(เอทิลีนเทเรฟทาเลต) (PET) ไบโอแคทาล. ไบโอทรานส์ฟอร์ม 2563, 38, 457–468. [ครอสรีฟ]
23. อากีเอราส, ECG; เดอ บาร์รอส, DSN; เฟร์นันเดซ-ลาฟูเอนเต้, อาร์; Freire, DMG การผลิตไลเปสในกากเมล็ดฝ้ายและการใช้ของแข็งหมักเป็นตัวเร่งปฏิกิริยาทางชีวภาพในปฏิกิริยาเอสเทอริฟิเคชันและทรานส์เอสเทอริฟิเคชัน ต่ออายุ. พลังงาน 2019, 130, 574–581. [ครอสรีฟ]
24. ซูซ่า, CEC; ฟาเรียส, แมสซาชูเซตส์; ริเบโร, BD; Coelho, MAZ การเพิ่มมูลค่าให้กับผลิตภัณฑ์ร่วมอุตสาหกรรมเกษตรจากการสกัดน้ำมันคาโนลาและน้ำมันถั่วเหลืองผ่านการผลิตเอนไซม์ไลเปสโดยใช้ Yarrowia lipolytica ในการหมักแบบ Solid-State การประเมินค่าชีวมวลของเสีย 2017, 8, 1163–1176 [ครอสรีฟ]
25. เขา, เอช.; ลี่, วาย.; จาง แอล; ดิง, ซี; Shi, G. ความเข้าใจและการประยุกต์ใช้การควบคุมไนโตรเจนของ Bacillus: มุมมองทางชีววิทยาสังเคราะห์ เจ แอดวา ความละเอียด 2022; ในการกด [ครอสรีฟ]
26. อัลเมด้า AF; Taulk-Tornisielo, SM ; Carmona, EC อิทธิพลของแหล่งคาร์บอนและไนโตรเจนต่อการผลิตไลเปสโดยสายพันธุ์ Candida Viswanathan ที่แยกได้ใหม่ แอน ไมโครไบโอล. 2013, 63, 1225–1234. [ครอสรีฟ]
27. อ.สาลีฮู; อลัม, MZ; อับดุลคาริม มิชิแกน; Salleh, HM การผลิตเอนไซม์ไลเปส: ข้อมูลเชิงลึกในการใช้ประโยชน์จากวัสดุเหลือใช้ทางการเกษตรที่นำกลับมาใช้ใหม่ได้ ทรัพยากร อนุรักษ์. รีไซเคิล 2555, 58, 36–44. [ครอสรีฟ]
28. หลิว เอ็กซ์; หยู เอ็กซ์; เขา ก.; เซีย, เจ; เขาเจ; เติ้ง ย.; Xu, N.; Qiu, Z.; วัง, X.; Zhao, P. การหมักแบบหม้อเดียวสำหรับการผลิตอีริทริทอลจากธัญพืชกลั่นโดยการปลูกร่วมกันของ Yarrowia lipolytica และ Trichoderma reesei ไบโอเรสซอร์. เทคโนโลยี 2022, 351, 127053 [CrossRef] [PubMed]
29. วัง, ว.; เหว่ย เอช.; อัลลอหุตา, ม.; เฉิน เอ็กซ์; ไฮแมน, ดี.; จอห์นสัน ดีเค; จาง ม.; Himmel, ME การแสดงออกที่แตกต่างกันของเอนไซม์ไซลาเนสในยีสต์ที่มีไขมัน Yarrowia lipolytica กรุณาหนึ่ง 2014, 9, e111443 [ครอสรีฟ] [PubMed]
30. นาสซิเมนโต้, FVd; เลมส์ เอซี ; คาสโตร, เอเอ็มดี; เซคจิ, เออาร์ ; Zarur Coelho, MA มุมมองวิวัฒนาการชั่วคราวของการผลิตเอนไซม์ไลเปสโดย Yarrowia lipolytica ในการหมักแบบ Solid-State กระบวนการ 2022, 10, 381 [CrossRef]
31. แมนดารี ว.; เนมา อ.; Devarai, SK Sequential optimization และการผลิตไลเปสขนาดใหญ่โดยใช้สารผสมไตรสารตั้งต้นจาก Aspergillus niger MTCC 872 โดยการหมักแบบโซลิดสเตต กระบวนการไบโอเคมี 2563, 89, 46–54. [ครอสรีฟ]
32. มาลา เจจี; เอ็ดวิโนลิเวอร์ NG; คามินี NR; Puvanakrishnan, R. การหมักในสถานะของแข็งผสมสารตั้งต้นสำหรับการผลิตและการสกัดเอนไซม์ไลเปสจาก Aspergillus niger MTCC 2594. J. Gen. Appl. ไมโครไบโอล. 2550, 53, 247–253. [ครอสรีฟ]
33. บาร์ธ จี; เกลลาร์ดิน, C. Yarrowia lipolytica. ในยีสต์ที่ไม่ธรรมดาในเทคโนโลยีชีวภาพ; Wolf, K., เอ็ด; สปริงเกอร์: นิวยอร์ก นิวยอร์ก สหรัฐอเมริกา 2539; หน้า 313–388.
34. มอฟทาห์, โอเอ; Grbavˇci´c, S.; ซูชา, ม.; Lukovi'c, N.; เบซบราดิก้า, ด.; Kneževi´c-Jugovi´c, Z. การเพิ่มมูลค่าให้กับเค้กน้ำมันในฐานะของเสียจากอุตสาหกรรมแปรรูปน้ำมัน: การผลิตไลเปสและโปรตีเอสโดย Candida ใช้ในการหมักในสถานะของแข็ง แอป ชีวเคมี เทคโนโลยีชีวภาพ 2555, 166, 348–364. [ครอสรีฟ]
35. คอนเตซินี, เอฟเจ; ดาซิลวา วีซี; Maciel, อาร์เอฟ; เดอลิมา อาร์เจ; บาร์รอส เอฟเอฟ ; de Oliveira Carvalho, P. การวิเคราะห์พื้นผิวการตอบสนองสำหรับการผลิตเอนไซม์ไลเปส enantioselective จาก Aspergillus niger โดยการหมักแบบโซลิดสเตต เจ.ไมโครไบโอล. 2552, 47, 563–571. [ครอสรีฟ]
36. ริโก, อี.; นิโนว์ เจแอล ; ดิ ลูชโช, ม.; โอลิเวร่า, JV; โปลโลนี, AE; เรโมนัตโต, D.; อาร์เตอร์ เอฟ.; Vardanega, อาร์; โอลิเวร่า, ด.; Treichel, H. การผลิตไลเปสโดยการหมักกากถั่วเหลืองที่เป็นของแข็งด้วยอาหารเสริมต่างๆ LWT วิทย์อาหาร. เทคโนโลยี 2553, 43, 1132–1137. [ครอสรีฟ]
37. ซัน, ซิสวาย; Xu, Y. การหมักแบบโซลิดสเตตสำหรับการผลิต 'ไลเปสสังเคราะห์ทั้งเซลล์' จาก Rhizopus chinensis และการระบุเอนไซม์ที่ใช้งานได้ กระบวนการไบโอเคมี 2551, 43, 219–224. [ครอสรีฟ]
38. ฟาเรียส, แมสซาชูเซตส์; วาโลนี อีเอ; คาสโตร, AM; Coelho การผลิต MAZ Lipase โดย Yarrowia Lipolytica ในการหมักแบบ Solid State โดยใช้กากอุตสาหกรรมเกษตรที่แตกต่างกัน เคมี อังกฤษ ทรานส์ 2557, 38, 301–306.
39. สีดู ป.; ชาร์มา อาร์; สนธิ, เอสเค; Gupta, JK การผลิตเอนไซม์อัลคาไลน์ไลเปสนอกเซลล์โดย Bacillus sp. ชนิดใหม่ โฟเลียไมโครไบโอล. 2541, 43, 51–54. [ครอสรีฟ]
40. คอร์โซ จี; Revah, S. การผลิตและลักษณะของไลเปสจาก Yarrowia lipolytica 681. Bioresour. เทคโนโลยี 2542, 70, 173–180. [ครอสรีฟ]
41. ซูซ่า, CEC; ริเบโร, BD; Coelho, MAZ Characterization and Application of Yarrowia lipolytica Lipase ที่ได้จากการหมัก SolidState ในการสังเคราะห์เอสเทอร์ต่างๆ ที่ใช้ในอุตสาหกรรมอาหาร แอป ชีวเคมี เทคโนโลยีชีวภาพ 2019, 189, 933–959. [ครอสรีฟ]
42. ฟิกเกอร์ส ป.; Fudalej, F.; ดัลล์, MTL; คาซาเรโกลา เอส; เกลลาร์ดิน, ซี; ธนนาถ พี; Nicaud, JM การระบุและลักษณะของยีน LIP7 และ LIP8 ที่เข้ารหัสไลเปสไตรเอซิลกลีเซอรอลนอกเซลล์สองตัวในยีสต์ Yarrowia lipolytica พันธุกรรมของเชื้อรา ไบโอล 2548, 42, 264–274. [ครอสรีฟ]
43. เฉิง, ย.-ฮ.; เซียว, FS-H.; เวิน, ช.-ม.; อู๋, C.-Y.; ไดบัส, อ.; ยู,วาย.-เอช. การหมักกากถั่วเหลืองแบบผสมโดยโปรตีเอสและโปรไบโอติกและผลต่อการเจริญเติบโตและการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในไก่เนื้อ เจ แอพเพิล อนิเม. ความละเอียด 2019, 47, 339–348. [ครอสรีฟ]
44. Chakraborty, K.; Paul Raj, R. การคัดเลือกกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อน n−3 ชนิดที่มีความยาวสายโซ่ C18–C20 acyl จากน้ำมันปลาซาร์ดีนโดยใช้ Pseudomonas fluorescens MTCC 2421 lipase เคมีอาหาร. 2552, 114, 142–150. [ครอสรีฟ]
45. ซาไร, Z.; เอ็ดเดเฮช, อ.; ริกาโน เอฟ; โอเทริ ม.; Micalizzi, G.; ดูโก พี; มอนเดลโล, แอล; Cacciola, F. คุณลักษณะเฉพาะของโมโนเอซิลกลีเซอรอลและไดเอซิลกลีเซอรอลที่อุดมด้วยกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนที่ผลิตโดยการไฮโดรไลซิสของน้ำมันตับมัสเตลัสมัสเตลัสที่เร่งปฏิกิริยาโดยเอนไซม์ไลเปสของแบคทีเรียตรึง เจ. โครมาโตกร์. 2020, 1613, 460692. [CrossRef]
46. หยาง เจ; เพลง, X.; วัง, ล.; Cui, Q. การวิเคราะห์ที่ครอบคลุมของการเปลี่ยนแปลงการเผาผลาญใน Schizochytrium sp. สายพันธุ์ที่มีปริมาณ DHA ต่างกัน เจ. โครมาโตกร์. B 2020, 1160, 122193. [CrossRef]
47. หยาง ซี; จิน ว.; เฉิง เอ็กซ์; ดง, Z.; ช้าง ม.; Wang, X. การเสริมสมรรถนะทางเอนไซม์ของกลีเซอไรด์ของกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อน n-3 โดยการไฮโดรไลซิสแบบเลือก เคมีอาหาร. 2021, 346, 128743. [CrossRef]
48. โอคาดะ ท.; มอร์ริสซีย์ มอนแทนา การผลิตกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อน n-3 จากน้ำมันปลาซาร์ดีนโดยเอนไซม์ Candida rugosa lipase ที่ตรึง วิทย์อาหารเจ. 2008, 73, C146–C150. [ครอสรีฟ]
49. รีดิเกอร์ นอร์ทดาโคตา; ออทแมน, RA; ซู, ม.; Moghadasian, MH การทบทวนอย่างเป็นระบบเกี่ยวกับบทบาทของกรดไขมัน n-3 ต่อสุขภาพและโรค แยม. อาหาร. รศ. 2552, 109, 668–679. [ครอสรีฟ] [PubMed]
50. เกา, เค; ชู ว.; อาทิตย์, เจ; Mao, X. การระบุอัลคาไลน์ไลเปสที่สามารถเสริมประสิทธิภาพของ EPA ได้ดีกว่า DHA เนื่องจากการเลือกกรดไขมันและการเลือกซ้ำ เคมีอาหาร. 2020, 330, 127225. [CrossRef]
51. มาร์ตินส์ เพนซิลเวเนีย; โทรโบ-มาเซดา, แอล; ลิมา, เอฟเอ ; de Morais Júnior, WG; เดอ มาร์โก, เจแอล ; สลัม, ทีเอฟซี; Guisán, JM Omega-3 การผลิตโดยการไฮโดรไลซิสของน้ำมันปลาโดยใช้ไลเปสจาก Burkholderia gladioli BRM58833 ตรึงและทำให้เสถียรด้วยเทคนิคการตรึงภายหลัง ชีวเคมี ชีวฟิสิกส์ ตัวแทน 2022, 29, 101193 [CrossRef] [PubMed]
52. เลมส์, เอซี; Egea, MB; โอลิเวร่า ฟิลโญ่, JGd ; Gautério, GV ; ริเบโร, BD; Coelho, MAZ แนวทางทางชีวภาพสำหรับการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากผลพลอยได้จากอุตสาหกรรมเกษตร: บทวิจารณ์ ด้านหน้า. ไบโอเอ็ง. เทคโนโลยีชีวภาพ 2022, 9, 1–18. [ครอสรีฟ] [PubMed]
53. เลมส์, เอซี; ศาลา, ล.; แร่ JDC; บราก้า, ARC ; Egea, MB; Fernandes, KF การทบทวนความก้าวหน้าล่าสุดในเปปไทด์ที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่เข้ารหัสจากของเสียที่อุดมด้วยโปรตีน ภายใน เจ โมล วิทย์ 2016, 17, 950 [CrossRef]
54. เลมส์, เอซี; โคลโญ่, MAZ ; Gautério, GV ; พอลล่า แอลซี; ฟิลโญ่, JGdO; Egea, MB บทที่ 11—ของเสียจากอุตสาหกรรมและผลพลอยได้: แหล่งที่มาของอาหารที่มีประโยชน์ สารอาหาร และโพลิเมอร์ชีวภาพ ในพอลิเมอร์ชีวภาพในผลิตภัณฑ์เสริมอาหารและอาหารเพื่อสุขภาพ; ราชสมาคมเคมี: ลอนดอน สหราชอาณาจักร 2023; หน้า 329–360.
55. ปินตาโด, เมน; Teixeira, JA Valorização de subprodutos da indústria alimentar: Obtenção de ingredientes de valor acrescentado. โบล ไบโอเทคนอล 2015, 1, 10–12.
56. แฮกเลอร์, แอน; Mendonça-Hagler, LC ยีสต์จากน้ำทะเลและปากแม่น้ำที่มีมลพิษในระดับต่างๆ ในรัฐริโอ เดอ จาเนโร ประเทศบราซิล แอป สิ่งแวดล้อม. ไมโครไบโอล. 2524, 41, 173–178. [ครอสรีฟ]
57. กอ.รมน. วิธีการวิเคราะห์อย่างเป็นทางการของ AOAC International; สมาคมนักเคมีวิเคราะห์อย่างเป็นทางการ: วอชิงตัน ดี.ซี. สหรัฐอเมริกา 2538
58. คาสโตร เอเอ็มดี; Castilho, LdR; Freire, DMG การศึกษาคุณสมบัติของบาบาสซู คาโนลา เมล็ดละหุ่ง และกากทานตะวันเพื่อใช้เป็นวัตถุดิบสำหรับกระบวนการหมัก Ind. ผลิตภัณฑ์พืชผล 2559, 83, 140–148. [ครอสรีฟ]
59. เฟรร์, DM; เทเลส, EM; บอน อีพี; Sant' Anna, GL, Jr. การผลิตเอนไซม์ไลเปสโดย Penicillium ถูกจำกัดในถังหมักขนาดตั้งโต๊ะ: ผลกระทบของสารอาหารคาร์บอนและไนโตรเจน การกวน และการเติมอากาศ แอป ชีวเคมี เทคโนโลยีชีวภาพ 2540, 63–65, 409–421. [ครอสรีฟ]
60. ชาร์นีย์ เจ; Tomarelli, RM วิธีการวัดสีสำหรับการตรวจหากิจกรรมการสลายโปรตีนของน้ำในลำไส้เล็กส่วนต้น เจ. ไบโอล. เคมี 2490, 171, 501–505. [ครอสรีฟ] [PubMed]
61. แหลมมลี สหราชอาณาจักร ความแตกแยกของโปรตีนโครงสร้างระหว่างการประกอบของหัวหน้าแบคทีเรีย T4 ธรรมชาติ 1970, 227, 680–685. [ครอสรีฟ] [PubMed]
ข้อจำกัดความรับผิดชอบ/หมายเหตุของผู้จัดพิมพ์:ถ้อยแถลง ความคิดเห็น และข้อมูลที่มีอยู่ในสิ่งพิมพ์ทั้งหมดเป็นเพียงของผู้แต่งและผู้ร่วมให้ข้อมูลเท่านั้น ไม่ใช่ของ MDPI และ/หรือบรรณาธิการ MDPI และ/หรือบรรณาธิการขอปฏิเสธความรับผิดชอบต่อการบาดเจ็บต่อบุคคลหรือทรัพย์สินอันเป็นผลมาจากแนวคิด วิธีการ คำสั่ง หรือผลิตภัณฑ์ใดๆ ที่อ้างถึงในเนื้อหา
【สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】
