จากภายนอก Wnt1 ป้องกันการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลันและการลุกลามของโรคไตเรื้อรังในภายหลัง

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

Xue Hong^1†, หยานนี่ โจว^2†, เต๋อตง วัง^3†, Fuping Lyu⁴, Tianjun Guan³, โหยวฮัว หลิว^1,5และเหลียงเซียงเสี่ยว^3*

¹ห้องปฏิบัติการหลักของการวิจัยความล้มเหลวของอวัยวะ, ศูนย์วิจัยทางคลินิกแห่งชาติของโรคไต, กองโรคไต, โรงพยาบาลหนานฟาง, มหาวิทยาลัยการแพทย์ภาคใต้, กวางโจว, จีน,²Department of Nephrology, XiamenHospital ร่วมกับ Beijing University of Chinese Medicine, Xiamen, China,³Department of Nephrology, ZhongshanHospital Affiliated to Xiamen University, เซียะเหมิน, จีน,⁴Department of Endocrinology and Diabetes, The First AffiliatedHospital of Xiamen University, เซี่ยเหมิน, จีน,⁵ภาควิชาพยาธิวิทยา University of Pittsburgh School of Medicine, Pittsburgh, PA, United States

การศึกษาแนะนำว่า Wnt/ -catenin agonists มีประโยชน์ในการรักษาการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน(อากิ); อย่างไรก็ตาม มันยังคงเข้าใจยากเกี่ยวกับบทบาทในการป้องกัน AKI และการลุกลามไปสู่โรคไตเรื้อรัง (CKD) ในการศึกษานี้ Wnt/ -cateninsignaling ของไตถูกกระตุ้นโดยการแสดงออกที่มากเกินไปของ Wnt1 จากภายนอกหรือถูกยับยั้งโดยการบริหารด้วย ICG-001 ซึ่งเป็นตัวยับยั้งโมเลกุลขนาดเล็กของการส่งสัญญาณ -catenin ก่อนที่หนูจะได้รับบาดเจ็บจากการขาดเลือด/การกลับเป็นเลือด (IRI) เพื่อกระตุ้น AKI และต่อมาCKD ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ Wnt1 ภายนอกร่างกายก่อนหนูที่ได้รับการป้องกันด้วย IR ต่อ AKI และขัดขวางการลุกลามของ AKI ไปสู่ ​​CKD ในหนู โดยพิสูจน์ได้จากการวิเคราะห์ทางชีวเคมีในเลือดและการตรวจเนื้อเยื่อไต ในทางตรงกันข้าม การรักษา ICG ก่อน -001 ก่อน IR ไม่มีผลต่อการส่งสัญญาณของ Wnt/ -catenin ของไต หรือความก้าวหน้าของ AKI ถึง CKD ในทางกลไก การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ก่อน IR ยับยั้งการแสดงออกของโปรตีน proapoptotic ในหนู AKI และลดการตอบสนองการอักเสบในหนู AKI และ CKD นอกจากนี้ อะพอพโทซิสที่ยับยั้ง Wnt1 จากภายนอกของเซลล์ในท่อที่เหนี่ยวนำโดยการบำบัดภาวะขาดออกซิเจน-รีออกซีเจเนชัน (H/R) ในหลอดทดลอง โดยสรุป การศึกษานี้แสดงหลักฐานที่สนับสนุนผลการป้องกันของการกระตุ้น Wnt/ -catenin ต่อ AKI ที่เกี่ยวข้องกับ IR และการลุกลามไปสู่ ​​CKD ในภายหลัง

คำสำคัญ: การบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน, โรคไตเรื้อรัง, Wnt1, -คาเทนิน, อาการบาดเจ็บที่กล้ามเนื้อขาดเลือดกลับคืนมา

การรักษาไตวายเฉียบพลัน(AKI): cistanche

การแนะนำ

การบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน (AKI)เป็นภาวะทางคลินิกอันเนื่องมาจากการสูญเสียการทำงานของไตอย่างรวดเร็วจากการบาดเจ็บต่างๆ เช่น ยา ขาดเลือด ภาวะติดเชื้อ และสารพิษ (Chawla and Kimmel, 2012; Scholz et al., 2021) AKI สัมพันธ์กับอุบัติการณ์สูงของการเจ็บป่วยและ การตาย รับผิดชอบต่อการเสียชีวิตประมาณ 2 ล้านคนในแต่ละปีทั่วโลก (Belayev and Palevsky, 2014). โดยเฉพาะอย่างยิ่ง AKI เป็นตัวทำนายอิสระที่เป็นที่รู้จักดีสำหรับการพัฒนาของโรคไตเรื้อรัง (CKD) หรือโรคไตวายเรื้อรังระยะสุดท้าย (ESRD) ซึ่งสร้างภาระทางเศรษฐกิจอย่างใหญ่หลวงต่อระบบการดูแลสุขภาพ (Leung et al., 2013; Belayev และ Palevsky, 2014; Kurzhagenet al., 2020) น่าเสียดายที่ไม่มียาที่มีประสิทธิภาพสำหรับการป้องกันและรักษา AKI

การส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin มีบทบาทพื้นฐานในการสร้างเนื้อเยื่อ สภาวะสมดุลของเนื้อเยื่อ และการพัฒนาของโรคต่างๆ รวมถึงโรคไต (Soni, 2021) - Catenin มีบทบาทสองประการโดยทำหน้าที่เป็นทั้งโปรตีนโครงสร้างและตัวควบคุมการถอดรหัส (MacDonald et al.,2009) -catenin ที่จับกับเมมเบรนเป็นส่วนหนึ่งของสารเชิงซ้อนของการยึดเกาะและมีส่วนทำให้เกิดปฏิสัมพันธ์ระหว่างเซลล์กับเซลล์ ในขณะที่ cytosolic -catenin ถูกฟอสโฟรีเลตโดย glycogensynthase kinase-3 (GSK-3 ) และมีเป้าหมายสำหรับการแพร่หลายไปทั่วและการย่อยสลายโปรตีอาโซม อย่างไรก็ตาม การเสื่อมสภาพของ -catenin ดังกล่าวอาจได้รับการช่วยเหลือโดย Wnt ligands ซึ่งเป็นกลุ่มของไกลโคโปรตีนที่หลั่งออกมาซึ่งมีกิจกรรมทางชีววิทยาที่หลากหลาย การผูกมัดของ Wnt ทำให้ -catenin เสถียร ซึ่งย้ายเข้าไปในนิวเคลียสและทำหน้าที่เป็นปัจจัยการถอดรหัสสำหรับการสร้างลำดับเบส โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin ค่อนข้างเงียบในไตผู้ใหญ่ที่ไม่ได้รับบาดเจ็บ แต่ถูกกระตุ้นอีกครั้งในระหว่างการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลันและเรื้อรัง (Huffstater et al., 2020) การเปิดใช้งาน Wnt/ -catenin ในระยะเริ่มต้นของ AKI ช่วยลดอาการบาดเจ็บที่ไตและช่วยให้ฟื้นตัวได้ ของการทำงานของไต ในขณะที่การเปิดใช้งาน Wnt/ -catenin อย่างต่อเนื่องสามารถขับเคลื่อนความก้าวหน้าจาก AKI ไปยัง CKD (Xiao et al., 2016; Huffstater et al.,2020) ดังนั้น การส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin จึงเป็นดาบสองคมในการบาดเจ็บที่ไตและรับประกันความเข้าใจที่ดีขึ้น โดยเฉพาะอย่างยิ่ง มันยังเข้าใจยากเกี่ยวกับบทบาทของ Wnt/ -cateninactivation ในการป้องกัน AKI และความก้าวหน้าของ AKI-CKD ที่ตามมา

การบาดเจ็บที่ไต-การขาดเลือดกลับคืน (IRI) ถือเป็นสาเหตุสำคัญของ AKI ดังนั้น แบบจำลอง IRI ของสัตว์ในไตจึงถูกนำมาใช้ในการวิจัยความก้าวหน้าของ AKI และ AKI-CKD (Bonventre and Yang, 2011) ทั้งสองวิธีทางเภสัชวิทยาและทางพันธุกรรมถูกนำมาใช้เพื่ออธิบายบทบาทของการกระตุ้น Wnt/ -catenin ในแบบจำลอง IRI ของ AKI และ CKD ตามลำดับ สารยับยั้งลิเธียมและ GSK-3 มักใช้เพื่อกระตุ้น Wnt/ -cateninsignaling ทางเภสัชวิทยาในแบบจำลอง AKI พรีคลินิก แต่ควรสังเกตเกี่ยวกับผลกระทบที่ไม่ขึ้นกับ -catenin ของพวกมัน (Bao et al., 2014) การดัดแปลงทางพันธุกรรมของ GSK{{9 }} , -catenin หรือ Wnt ligands (Wnt1 และ Wnt9a) ถูกใช้เพื่ออธิบายบทบาทของการเปิดใช้งาน Wnt/ -catenin ใน AKI และ CKD (Bonventre andYang, 2011; Bao et al., 2014; Zhou et al., 2013, 2018; Liuet al., 2020). อย่างไรก็ตาม การศึกษาเกี่ยวกับบทบาทของ Wnt/ -cateninsignaling ในการป้องกัน AKI นั้นค่อนข้างจำกัด การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่ออธิบายบทบาทของ Wnt/ -catenin signaling ในการป้องกัน AKI และความก้าวหน้าที่ตามมาของ CKD

รูปที่ 1|การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อนที่ IR จะป้องกัน AKI และกระตุ้นการทำงานของไต -catenin ในหนู

(A)กลุ่มบำบัดด้วยเมาส์ หนูได้รับการรักษาด้วยพลาสมิด pcDNA3 (IRI บวก pcDNA3) หรือ PHA-Wnt1 (IRI บวก PHA-Wnt1) อย่างใดอย่างหนึ่งผ่านการฉีดหลอดเลือดดำหางตามอุทกพลศาสตร์ที่ 2 วันก่อน BIRI ระดับครีเอตินีนในเลือด(B)และระดับยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN)(C) ถูกวัด (D) ไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนของสัณฐานวิทยาของไตที่ 1 วันหลังจาก BIRI ส่วนของไตถูกย้อมด้วยกรด Periodic – Schiff พื้นที่ชนิดบรรจุกล่องจะขยายใหญ่ขึ้น ลูกศรบ่งชี้ท่อไต สเกลบาร์ 200 µm.(E, F)การวิเคราะห์ Western blot ของ active -catenin ในไตของหนูทดลอง *P < 0.05="" เทียบกับการควบคุม="" sham="" (n="5)" †="" p="">< 0.05="" เทียบกับ="" iri="" ที่ฉีดด้วย="" pcdna3="" plasmid="" (n="">

Cistanche ปรับปรุงการทำงานของไต

วัสดุและวิธีการ

การศึกษาสัตว์

หนู C57BL/6 เพศผู้ที่มีน้ำหนักประมาณ 22-25 กรัมถูกซื้อจาก Vital River Laboratory Animal Technology (ปักกิ่ง ประเทศจีน) และบำรุงรักษาในสถานเลี้ยงสัตว์ (อุณหภูมิ: 22 ± 2◦C ความชื้น: 60 ± 5 เปอร์เซ็นต์ , รอบมืด/แสง 12 ชม. ) ที่มหาวิทยาลัยเซาเทิร์นเมดิคัล (กวางโจว ประเทศจีน) กับน้ำและอาหารไม่จำกัด การศึกษาในสัตว์ทดลองได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมและสวัสดิภาพสัตว์แห่งมหาวิทยาลัยการแพทย์ภาคใต้ สัตว์ทั้งหมดได้รับการบำบัดตามคำแนะนำสำหรับการดูแลและการใช้สัตว์ทดลอง

มีการอธิบายการเหนี่ยวนำของ AKI และ CKD ในหนูในการศึกษาก่อนหน้านี้ของเรา (Xiao et al., 2016; Zhou et al.,2018) ภาวะขาดเลือดขาดเลือด/การบาดเจ็บที่ไตในระดับทวิภาคี (BIRI) มีการใช้กันอย่างแพร่หลายเพื่อกระตุ้นให้เกิด AKI ในหนูทดลอง ในขณะที่เพิ่มอัตราการเสียชีวิตระหว่างการพัฒนาของ AKI toCKD ดังนั้นจึงใช้ unilateral renal ischemia/reperfusioninjury (UIRI) สำหรับการวิจัยเกี่ยวกับความก้าวหน้าของ AKI ถึง CKD โดยสังเขป ทำแผลที่ช่องท้องตรงกลางในหนูเมาส์ภายใต้การดมยาสลบ และตัดขั้วไตซ้ายทวิภาคีเป็นเวลา 30 นาทีโดยใช้ที่หนีบไมโครหลอดเลือด (หมายเลขสินค้า 18051-35; Fine ScienceTools, Cambridge, สหราชอาณาจักร) ในระหว่างการผ่าตัด อุณหภูมิของร่างกายจะอยู่ที่ประมาณ 37–38◦C โดยใช้ระบบทำความร้อนที่ควบคุมอุณหภูมิ

เพื่อประเมินผลการป้องกันของการกระตุ้น Wnt/ -catenin บน AKI หนูเมาส์ถูกฉีดด้วยเฮแมกกลูตินิน (HA) 1 มก./กก. ที่แท็กเวกเตอร์การแสดงออกของ Wnt1 (PHA-Wnt1 เทคโนโลยีชีวภาพตอนเหนือ) หรือเวกเตอร์เปล่า (pcDNA3) 2 วันก่อน BIRI โดยใช้อุทกพลศาสตร์- เทคนิคการถ่ายโอนยีนตามรายงานก่อนหน้านี้ (Xiao et al., 2016) เก็บเลือดและเนื้อเยื่อไต 1 วันหลังจาก BIRI ของไต

เพื่อประเมินผลของการกระตุ้น Wnt/ -catenin ในระยะเริ่มต้นต่อความก้าวหน้าของ AKI ถึง CKD หนูทดลองได้รับการฉีดหลอดเลือดดำหางตามอุทกพลศาสตร์ทุกวันของการแสดงออกของ Wnt1 ที่ 1 มก./กก. หรือการฉีด ICG ในช่องท้องทุกวัน-001({{4 }}, Chembest, Shanghai, China) ที่ 5 มก./กก. เป็นเวลา 3 วันก่อน UIRI เก็บเลือดและเนื้อเยื่อไต 11 วันหลังจาก UIRI ในการศึกษาเบื้องต้นของเรา การฉีด Wnt1 2 วันอาจทำให้เกิดการแสดงออกของ Wnt1 ในหนู AKI (ไม่แสดงข้อมูล) ควรสังเกตว่า 3 วันของการฉีด Wnt1 ถูกเลือกเพื่อให้แน่ใจว่าและขยายการแสดงออกของ Wnt1 ระหว่างความก้าวหน้าของ AKI ถึง CKD

การบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน (AKI) เป็นภาวะทางคลินิกเนื่องจากการสูญเสียการทำงานของไตอย่างรวดเร็ว

การเพาะเลี้ยงเซลล์และการรักษา

สายเซลล์เยื่อบุผิวท่อใกล้เคียงของมนุษย์ (HKC-8) จัดหาโดย Dr. L. Racusen ที่ Johns Hopkins University (บัลติมอร์ รัฐแมริแลนด์ สหรัฐอเมริกา) การเพาะเลี้ยงเซลล์ถูกดำเนินการตามที่บรรยายไว้ก่อนหน้านี้ (Zhou et al., 2013) เซลล์ HKC-8 ถูกบำบัดด้วยลูกผสมของมนุษย์ Wnt1 (SRP4754; Sigma-Aldrich, St.Louis, MO, United States) ที่ 100 ng/mL หรือ ICG-001 (847591-62-2, Chembest, Shanghai , ประเทศจีน) ที่ 10 µM เป็นเวลา 4 ชั่วโมง เซลล์ถูกบ่มในเวิร์กสเตชันที่ขาดออกซิเจน (X3-CK, Biospherix) ที่ 1 เปอร์เซ็นต์ pO2 เป็นเวลา 48 ชั่วโมง ถัดไป เซลล์ถูกเติมออกซิเจนอีกครั้งเป็นเวลา 2 ชั่วโมงก่อนการรวบรวมสำหรับการวิเคราะห์ต่างๆ

รูปที่ 2|การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อนที่ IR จะลดการตายของเซลล์แบบท่อและการกระตุ้น NF-κBในหนู AKI

(A) ไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนแสดงเซลล์บวก TUNEL ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุไว้ ลูกศรบ่งบอกถึงการย้อมสีในเชิงบวก สเกลบาร์ 100 µm.(B)การนำเสนอแบบกราฟิกแสดง TUNEL-positive cellsper high power field (HPF) ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุ(C–F)การวิเคราะห์ Western blot ที่เป็นตัวแทนแสดงการแสดงออกของไตของ FasL, p53 และ Bax ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุไว้ *P < 0.05="" เทียบกับการควบคุม="" sham;="" †="" p="">< 0.05="" เทียบกับ="" iri="" ที่ฉีดด้วย="" pcdna="" plasmids="" (n="">(G) ตัวแทน Western blot ของโปรตีน p65 andp-p65 ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุไว้

การทดสอบอะพอพโทซิส

เซลล์ถูกทริปซิไนซ์ รวบรวม และล้างด้วยการย้อมสี PBS.PE Annexin V ถูกดำเนินการตามระเบียบวิธีของผู้ผลิต วิเคราะห์ไซโตเมตริกด้วยโฟลว์ไซโตมิเตอร์ (BD FACSCanto II, ซานโฮเซ, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) เพื่อวัดอัตราการตายของเซลล์โดยการตรวจหาปริมาณสัมพัทธ์ของ PE Annexin V positive และ 7-AAD negativecells การทดสอบแต่ละครั้งดำเนินการเป็นสามเท่า

Creatinine และ Blood Urea NitrogenAssay

ระดับครีเอตินีนในซีรัมและปัสสาวะ ตลอดจนระดับยูรียานิโตรเจนในเลือด (BUN) ถูกวัดโดยใช้เครื่องวิเคราะห์ชีวเคมีอัตโนมัติ (AU480, Beckman-Coulter Inc., Brea,CA, United States)

มิญชวิทยาและการย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมิคอล

ส่วนของไตและการย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Liu et al., 2020) แอนติบอดีปฐมภูมิรวมถึงกระต่าย polyclonal anti–Wnt1 (ab15251; Abcam, Inc.), กระต่าย polyclonal anti- -catenin (ab15180; Abcam, Inc.) .) และกระต่ายโพลีโคลนัลแอนติ-ไฟโบรเนกติน(F3648; Sigma-Aldrich)

การวิเคราะห์ Western Blot

การวิเคราะห์ Western blot ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Zhou et al., 2019) แอนติบอดีปฐมภูมิรวมถึง rabbitpolyclonal anti-fibronectin (F3648; Sigma-Aldrich), mousemonoclonal anti- -catenin antibody (610154; BD TransductionLaboratories), โมโนโคลนัลต้านหนูเมาส์- -SMA แอนติบอดี (A2547;Sigma-Aldrich), กระต่าย polyclonal anti-Wnt1 (ab15251; Abcam), mouse anti- -tubulin (T9026; Sigma-Aldrich), mouse anti PAI-1 แอนติบอดี (AF3828; R&D Systems), anti-active -catenin(#05 –665; EMD Millipore), anti-Fas ligand (FasL) (SC -6237;Santa Cruz, CA, United States), p53 (#2524S; CST), Bax (SC 20067; Santa Cruz), p65 ( #8242S; CST), p-p65 (#3033S; CST), PCNA (#2586S; CST)

การแยก RNA และการวิเคราะห์ qPCR

การแยก RNA ทั้งหมดและ qPCR ถูกดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ระดับ mRNA ของยีนต่างๆ ถูกทำให้เป็นมาตรฐานด้วย -แอกติน ลำดับไพรเมอร์ของยีนแสดงอยู่ในตารางเสริม 1

รูปที่ 3|การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อนที่ IR จะป้องกันความก้าวหน้าของ AKI เป็น CKD ในหนู

(A)กลุ่มบำบัดด้วยเมาส์ หนูเมาส์ถูกฉีดเข้าเส้นเลือดที่หางตามอุทกพลศาสตร์ 1 มก./กก. pcDNA3 (IRI บวก pcDNA3) หรือพลาสมิด PHA-Wnt1 (IRI บวก PHA-Wnt1) หรือฉีดเข้าช่องท้องด้วย ICG 5 มก./กก.-001 ที่ 3 วันก่อน UIRI . เก็บเลือดและเนื้อเยื่อ 11 วันหลังจาก UIRI ระดับครีเอตินีนในเลือด(B) และระดับยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN)(C) ถูกวัด(D) ไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนของสัณฐานวิทยาของไตที่ 11 วันหลังจาก UIRI ส่วนของไตอยู่ภายใต้การย้อมสีกรดเป็นระยะ-ชิฟฟ์ พื้นที่ชนิดบรรจุกล่องจะขยายใหญ่ขึ้น ลูกศรบ่งชี้ท่อไต แถบมาตราส่วน 100 µm *P < 0.05;="" **ป="">< 0.01.="" น="">

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM ข้อมูลได้รับการวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้ซอฟต์แวร์ Sigma Stat (Jandel ScientificSoftware, San Rafael, CA, United States) เปรียบเทียบระหว่างกลุ่มโดยใช้ ANOVA ทางเดียว ตามด้วยการทดสอบ Student–Newman–Keuls P < 0.05="">

ประโยชน์ของสมุนไพร CISTANCHE KIDNEY

ผลลัพธ์

ในร่างกาย การแสดงออกของ Wnt1 ภายนอกก่อน IR ป้องกันการบาดเจ็บของไตเฉียบพลันและกระตุ้นการทำงานของไต -Catenin ในหนู

เพื่อตรวจสอบบทบาทของการกระตุ้น Wnt/ -catenin ในการป้องกัน AKI หนูเมาส์ถูกบริหารให้ด้วยเวกเตอร์การแสดงออก HA-taggedWnt1 (PHA-Wnt1) หรือเวคเตอร์เปล่า (pcDNA3) ผ่านการฉีดหลอดเลือดดำหางแบบอุทกพลศาสตร์ที่ 2 วันก่อน BIRI(รูปที่ 1A). ระดับครีเอตินีนและ BUN ในซีรัม ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้อาการบาดเจ็บของไต 2 ตัว เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในหนู 1 วันหลัง BIRI ซึ่งบ่งชี้ว่ามี AKI (รูปที่ 1B, C) อย่างต่อเนื่อง รอยโรคทางสัณฐานวิทยาของไตที่เด่นชัด เช่น การบาดเจ็บที่บริเวณข้อต่อของคอร์ติโคเมดูลารี สังเกตในหนู AKI(ภาพที่ 1D). โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ใน biomarkers การบาดเจ็บของไตในซีรัมและรอยโรคทางสัณฐานวิทยาในหนู AKI ลดลงอย่างเห็นได้ชัดโดย Wnt1 จากภายนอก blotanalyses ตะวันตกเปิดเผยว่า Wnt1 จากภายนอกส่งเสริมการแสดงออกของไต -catenin ในหนู AKI(รูปที่ 1E, F). เมื่อนำมารวมกัน การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าการรักษา Wnt1 ภายนอกล่วงหน้าจะกระตุ้นการทำงานของไต - catenin และป้องกัน AKI ในหนูทดลอง

การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อนที่ IR จะลดการตายของเซลล์แบบท่อและยับยั้งการกระตุ้นด้วยนิวเคลียสแฟกเตอร์-คัปปา บี

เพื่อสำรวจว่าการควบคุมอะพอพโทซิสเป็นกลไกภายใต้ผลการป้องกันของ Wnt1 จากภายนอกต่อ AKI หรือไม่ การย้อมสี TUNEL ได้ดำเนินการเพื่อระบุการตายของเซลล์ในเนื้อเยื่อไตของหนู AKI เมื่อเทียบกับหนูหนู Sham IRI ได้เพิ่มอัตราการตายอย่างรวดเร็วเช่นเดียวกับระดับของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์เช่น FasL, p53 และ Bax, inkidneys ของหนู(ภาพที่ 2A–F). การเปลี่ยนแปลงดังกล่าวในไตของหนู AKI ลดลงอย่างเห็นได้ชัดโดยการแสดงออกภายในร่างกายของ Wnt1 จากภายนอกก่อน IR Nuclear factor-kappa B (NF κB) โดยเฉพาะอย่างยิ่งรูปแบบเฮเทอโรไดเมอร์ p65/p50 มีบทบาทสำคัญในการควบคุมการตอบสนองต่อการอักเสบในไตของหนู AKI การวิเคราะห์ Western blot พบว่าทั้ง p65 และรูปแบบ phosphorylated (p-p65) นั้นเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในไตของหนูหลังจาก IRI ในขณะที่การเปลี่ยนแปลงดังกล่าวได้รับการป้องกันโดย Wnt1 จากภายนอก(รูปที่ 2G). การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าการแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อน IR ช่วยป้องกันการตายของเซลล์และยับยั้งการกระตุ้น NF-κBในไตของหนู AKI

รูปที่ 4|การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อนที่ IR จะควบคุมภายในร่างกาย Wnt1 และ -catenin ในไตของหนูหลังจากความก้าวหน้าของ AKI-CKD

(A)ไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนแสดงการแสดงออกของโปรตีน Wnt และ -catenin ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุไว้ สเกลบาร์ 50 µm.(B–E)blotanalyses แบบตะวันตกที่เป็นตัวแทนของระดับโปรตีน Wnt1, -catenin และ active -catenin ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุไว้(F) การแสดงออกของ mRNA ของ TGF- ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุไว้*P < 0.05;="" **ป="">< 0.01.="" น="">

In vivo Expression of Exogenous Wnt1Before IR Prevents the Progress of Acute Kidney Injury to Chronic KidneyDisease การแสดงออกภายนอกร่างกาย

ต่อไปเราจะตรวจสอบว่าการเปิดใช้งาน Wnt/ -cateninbefore IR สามารถป้องกันความก้าวหน้าของ AKI เป็น CKD ได้หรือไม่ แสดงในรูปที่ 3Aหนูเมาส์ได้รับการฉีด hydrodynamictail vein ของพลาสมิดการแสดงออกของ Wnt1 (PHA-Wnt1) หรือการฉีด ICG ในช่องท้อง -001 ที่ 3 วันก่อน UIRI ทั้งระดับครีเอตินินในเลือดและ BUN เพิ่มขึ้นในหนูที่ 11 วันหลังจาก UIRI(รูปที่ 3B, C). นอกจากนี้ การย้อมสี Masson Trichrome ยังเผยให้เห็นการสะสมของคอลลาเจนที่เด่นชัดและรอยโรคไฟโบรติกในหนูเมาส์ 11 วันหลังจาก UIRI(รูป 3D). การสังเกตเหล่านี้บ่งชี้ถึงความก้าวหน้าของ AKI ถึง CKD ในหนูหลังจาก UIRI โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การเปลี่ยนแปลงที่สังเกตได้ของตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของการบาดเจ็บที่ไตในซีรัมและการเกิดพังผืดของไตในหนูเมาส์ CKD เกือบจะป้องกันได้โดยสมบูรณ์โดยการบำบัด Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 ดังนั้น การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อนที่ IR จะป้องกันการลุกลามของ AKI เป็น CKD ในหนูเมาส์

ในร่างกาย การแสดงออกของ Wnt1 ภายนอกก่อน IR Down-Regulates ภายนอก Wnt1 และ -Catenin ในไต

เรายังตรวจสอบผลของ Wnt1 ภายนอกที่ส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin ในไตของหนูเมาส์ CKD ดังแสดงในรูปที่ 4A การย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีเปิดเผยว่าทั้ง Wnt1 ภายนอกและ -catenin ได้รับการควบคุมอย่างเด่นชัดในไตของหนูเมาส์ที่ 11 วันหลังจาก IRI ระดับโปรตีนของพวกมันลดลงอย่างมากโดยการบำบัดล่วงหน้าของ Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 การวิเคราะห์ Western blot ยืนยันผลการยับยั้งของ Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 การแสดงออกที่เกิดขึ้นเองภายในของ Wnt1, -catenin และไตที่ใช้งาน -cateninin ของหนู CKD (รูปที่ 4B–E) เส้นทางการส่งสัญญาณ Wnt/ -cateninand TGF- crosstalk ในการเกิดพังผืดของไต การแสดงออกของ mRNA ของ TGF- ถูกเหนี่ยวนำในไตของหนูเมาส์ CKD และการเหนี่ยวนำดังกล่าวลดลงโดย Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 (รูปที่ 4F) ดังนั้น การรักษาล่วงหน้าของ Wnt1 จากภายนอกจะยับยั้ง Wnt/ -cateninsignaling ของไตภายในร่างกายในหนูเมาส์ CKD

รูปที่ 5|การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 จากภายนอกก่อนที่ IR จะปรับลดยีนเป้าหมายของไต Wnt/ -catenin ในหนูเมาส์หลังจากความก้าวหน้าของ AKI-CKD

(A, B) mRNAexpression ของ PAI-1 และ MMP-7 ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุไว้(C–E)การวิเคราะห์ Western blot ที่เป็นตัวแทนของ PAI-1 และระดับโปรตีน Klotho(F)mRNA การแสดงออกของ Klotho *P < {{0}}.05;="" **ป="">< 0.01.="" น="">

In vivo Expression of Exogenous Wnt1Before IR Downregulates RenalWnt/ -Catenin Target Genes in Mice การแสดงออกภายนอกร่างกาย

เมื่อเปรียบเทียบกับหนูทดลอง การแสดงออกของ mRNA ของ PAI-1และ MMP-7 ซึ่งเป็นเป้าหมายปลายทางโดยตรงสองเป้าหมายของ Wnt/ -cateninsignaling ได้รับการควบคุมอย่างมีนัยสำคัญในไตของหนูเมาส์ 11 วันหลังจาก UIRI(รูปที่ 5A, B). การบำบัดล่วงหน้าของ Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 ยับยั้งการแสดงออกของ PAI-1 และ MMP-7 mRNA ในหนูเมาส์ CKD การวิเคราะห์ Western blot แสดงให้เห็นว่าระดับโปรตีน PAI-1 เพิ่มขึ้นในไตของหนูเมาส์ CKD ซึ่งถูกยกเลิกโดยการปรับสภาพของ Wnt1 ภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001(รูปที่ 5C, D). Klotho เป็นศัตรูตัวฉกาจ Wnt โดยการผูกมัดและการแยกตัวของแกนด์ เมื่อเทียบกับหนู Sham ทั้ง mRNA และระดับโปรตีนของ Klotho ลดลงในไตของหนูที่ 11 วันหลังจาก UIR(รูปที่ 5E, F). การบำบัดล่วงหน้าของ Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 เกือบจะฟื้นฟู Klotho mRNA และการแสดงออกของโปรตีนในไตของหนูเมาส์ CKD เกือบทั้งหมด การค้นพบนี้ชี้แนะเพิ่มเติมถึงผลการยับยั้งของ Wnt1 จากภายนอกต่ออวัยวะภายในที่ส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin ของหนูที่เป็นโรค CKD

การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ก่อน IR ช่วยลดการเกิดพังผืดของไตในหนูหลังจากการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน - ความก้าวหน้าของโรคไตเรื้อรัง

ต่อไปเราจะตรวจสอบผลของการกระตุ้น Wnt/ -catenin ก่อน IR ต่อยีนเมทริกซ์ของไตและรอยโรคไฟโบรติกในหนูเมาส์ CKD เมื่อเปรียบเทียบกับหนูทดลอง การแสดงออกของ mRNA ของไฟโบรเนกติน (FN) คอลลาเจน I คอลลาเจน III และ -SMA ได้รับการเหนี่ยวนำอย่างชัดเจนใน ไตของหนูที่ 11 วันหลังจาก UIR(ภาพที่ 6A–D). การเปลี่ยนแปลงดังกล่าวลดลงโดยการบำบัดล่วงหน้าของ Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 การวิเคราะห์ Western blot แสดงให้เห็นว่าระดับโปรตีนของ FN และ -SMA เพิ่มขึ้นในไตของหนูเมาส์ CKD และการเปลี่ยนแปลงดังกล่าวถูกยกเลิกโดยการบำบัดล่วงหน้าของ Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001(รูปที่ 6E–G). ผลของ Wnt1 และ ICG จากภายนอก-001ต่อการแสดงออกของ FNprotein ในหนูเมาส์ CKD ถูกตรวจสอบความถูกต้องโดยการสร้างภูมิคุ้มกันในไตด้วยแอนติบอดี FN(ภาพที่ 6H). การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าการรักษา Wnt1 จากภายนอกก่อนจะป้องกันการสร้างไตวายในหนู CKD ที่เกิดจาก IR

รูปที่ 6|การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 จากภายนอกก่อน IR ช่วยลดการเกิดพังผืดของไตในหนูหลังการลุกลามของ AKI-CKD

(A–D)การแสดงออกของ mRNA ของไฟโบรเนกติน คอลลาเจน I คอลลาเจน III และ -SMA(E–G)ตัวแทนการวิเคราะห์ Western blot ของระดับโปรตีน fibronectin และ -SMA-SMA(H)การสร้างภูมิคุ้มกันของส่วนไตของไฟโบรเนกติน *P < {{0}}.05;="" **p="">< 0.01;="" †พี="">< 0.05="" น="5." สเกลบาร์="" 50="">

ในร่างกาย การแสดงออกของ Wnt1 ภายนอก ก่อน IR ลดทอนการอักเสบของไตหลังการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน - ความก้าวหน้าของโรคไตเรื้อรัง

เมื่อเปรียบเทียบกับหนูทดลอง การแสดงออกของ mRNA ของยีนที่ทำให้เกิดการอักเสบ เช่น IL-1, IL-6 และ TNF- ถูกควบคุมอย่างมีนัยสำคัญในไตของหนูเมาส์ที่ 11 วันหลัง UIR(รูปที่ 7A–C). การเปลี่ยนแปลงดังกล่าวเกือบจะถูกยกเลิกโดยสมบูรณ์โดยการบำบัด Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 การวิเคราะห์ Western blot พบว่าระดับโปรตีนของทั้ง P65 และรูปแบบฟอสโฟรีเลต (p-p65) นั้นเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในไตของหนูที่ 11 วัน หลังจาก UIRI ระบุการเปิดใช้งานการส่งสัญญาณ NF-κBในหนู CKD(ภาพที่ 7D–F). โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การบำบัดล่วงหน้าของ Wnt1 จากภายนอก แต่ไม่ใช่ ICG-001 ลดระดับโปรตีน p65 และ p-p65 ในไตของหนูเมาส์ CKD อย่างมีนัยสำคัญ การค้นพบนี้บ่งชี้ว่าการบำบัดล่วงหน้าของ Wnt1 ภายนอกช่วยป้องกันการตอบสนองต่อการอักเสบของไตในหนูเมาส์ CKD

รูปที่ 7|การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 จากภายนอกก่อนที่ IR จะลดการอักเสบของไตในหนูหลังจากความก้าวหน้าของ AKI-CKD

(A–C) การแสดงออกของ mRNA ของ IL-1, IL-6,และ TNF- ในไตของหนูเมาส์ (D–F)ตัวแทนการวิเคราะห์ Western blot ของระดับโปรตีน p65 และ p-p65 *P < 0.05;="" **ป="">< 0.01.="" น="">

จากภายนอก Wnt1 ปกป้องเซลล์ท่อจากการตายแบบอะพอพโทซิสที่เกิดจากการขาดออกซิเจน-การเกิดปฏิกิริยาออกซิเจนในหลอดทดลอง

เพื่อระบุบทบาทของ Wnt1 ใน AKI เพิ่มเติม เราได้สร้างแบบจำลองเซลล์ท่อของ HKC-8 ของ AKI โดยใช้การบำบัดด้วยออกซิเจนในเลือดต่ำ (H/R) โฟลว์ไซโตเมทรีถูกใช้เพื่อตรวจหาอะพอพโทซิสและเผยให้เห็นการเพิ่มขึ้นของอัตราการตายของเซลล์ HCK 8 หลังการบำบัดด้วย H/R(รูปที่ 8A, B). Wnt1 จากภายนอกลดลงอย่างเห็นได้ชัดในเซลล์ HCK-8 หลังการรักษาด้วย H/R การวิเคราะห์ Western blot พบว่าการรักษาด้วย H/R เพิ่มระดับของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์ เช่น FasL,p54, Bax และ Parp อย่างมีนัยสำคัญ{{4} } ใน HCK-8 เซลล์(รูปที่ 8C–G). การเปลี่ยนแปลงดังกล่าวถูกทำให้ลดลงโดย Wnt1 จากภายนอก ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า Wnt1 จากภายนอกสามารถป้องกันอะพอพโทซิสที่เกิดจาก H/R ในเซลล์ท่อได้

รูปที่ 8|จากภายนอก Wnt1 ปกป้องเซลล์ท่อจากการตายของเซลล์ที่เกิดจากการขาดออกซิเจน-รีออกซิเจเนชัน (H/R) ในหลอดทดลอง

(A)การวิเคราะห์ FACS ที่เป็นตัวแทนแสดงให้เห็นว่า Wnt1 ยับยั้งการตายของเซลล์ที่เกิดจากการขาดออกซิเจน/รีออกซิเจเนชัน (H/R) เซลล์ HKC-8 ถูกแสดงออกล่วงหน้าด้วย Wnt1 จากภายนอก ตามด้วยสภาวะที่ไม่มีออกซิเจนในการบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมง และจากนั้นเติมออกซิเจนอีกครั้งเป็นเวลา 2 ชั่วโมง(B) กราฟิกการนำเสนอแสดงเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ apoptotic ในกลุ่มต่างๆ ตามที่ระบุ เซลล์บวก Annexin V ที่ติดฉลากด้วย PE ถูกนับโดยโฟลว์ไซโตเมทรี *P < 0.05="" เทียบกับการควบคุม;="" †p="">< 0.05="" เทียบกับ="" h/r="" (n="">(C) โบลทาวิเคราะห์แบบตะวันตกที่เป็นตัวแทนแสดงการแสดงออกของโปรตีนของ FasL, p53, Bax และ Parp-1 ในเซลล์ HKC-8(D–G)การนำเสนอแบบกราฟิกแสดงจำนวนสัมพัทธ์ของ FasL, p53, Bax และ Parp-1 ในเซลล์ HKC-8 *P < 0.05="" เทียบกับการควบคุม;="" †p="">< 0.05="" เทียบกับ="" h/r="" (n="">

อภิปรายผล

แม้ว่า AKI จะมีอุบัติการณ์เพิ่มขึ้นและเป็นปัจจัยเสี่ยงหลักในการลุกลามไปสู่ ​​CKD แต่ก็ไม่มีวิธีการรักษาที่มีประสิทธิภาพสำหรับการป้องกันและรักษา AKI สถานการณ์ต่างๆ เช่น การผ่าตัดหัวใจ การสะสมของสารในท่อ และการให้ยาที่เป็นพิษต่อไต อาจนำไปสู่การพัฒนาของ AKI (Mas-Font et al., 2017) สิ่งนี้ชี้ให้เห็นถึงความจำเป็นในการป้องกันมาตรการของ AKI

แม้ว่าการศึกษาจำนวนมากสนับสนุนผลประโยชน์ของการกระตุ้น Wnt/ -catenin ในการเกิดโรคของ AKI แต่ก็ยังเข้าใจยากเกี่ยวกับผลการป้องกันของ Wnt/ -catenin agonistson AKI การค้นพบใหม่อย่างหนึ่งในการศึกษาปัจจุบันคือในการแสดงออกของร่างกายของ Wnt1 ภายนอกก่อนที่ IR สามารถป้องกันหนูกับ AKI และป้องกันความก้าวหน้าของ AKI ถึง CKD ในการแสดงออกของร่างกายของ Wnt1 จากภายนอกที่ 2 วันก่อนการทำงานของไตทวิภาคี IR สามารถกระตุ้นการทำงานของไต - catenin ซึ่งนำไปสู่การตายของเซลล์ไตที่ลดลงและการอักเสบในหนู AKI (1 วันหลัง IR) นอกจากนี้ การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 จากภายนอก 3 วันก่อนการยับยั้ง IR ข้างเดียวของไต Wnt/ -cateninsignaling ภายนอกและป้องกันการพัฒนาของการเกิดพังผืดของไตในหนูเมาส์ CKD (11 วันหลังจาก IR) ในทางตรงกันข้าม การแสดงออกในร่างกายของ Wnt1 ภายนอกที่ 5 วันหลังจากแสดง IR ของไตเพื่อกระตุ้นการกระตุ้น -catenin และเร่ง AKI ไปสู่การลุกลามของ CKD (Xiao et al., 2016) การศึกษาเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าระยะเวลาของตัวเร่งปฏิกิริยา Wnt/ -catenin เป็นปัจจัยสำคัญเมื่อใช้สำหรับการป้องกันและรักษา AKI

การศึกษาแนะนำว่าการเปิดใช้งาน Wnt/ -cateninsignaling อย่างต่อเนื่องสามารถขับเคลื่อนความก้าวหน้าของ AKI ไปสู่ ​​CKD ได้ ICG 001 เลือกยับยั้งการส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin/CREB binding protein (CBP) และขณะนี้อยู่ในการทดลองทางคลินิกสำหรับมะเร็งชนิดต่างๆ ก่อนหน้านี้เราแสดงให้เห็นแล้วว่าการให้ ICG-011ที่ 5 วันหลังจาก IR ได้ฟื้นฟูการทำงานของไตและขัดขวางการลุกลามของ AKI ไปเป็น CKD ตามหลักฐานจากการเกิดพังผืดที่ไตลดลง (Xiao et al., 2016) นอกจากนี้ การบริหาร ICG-001 เริ่ม 3 วันหลังจากอุดกั้นท่อไตข้างเดียว (UUO) เพื่อลดทอนรอยโรคไฟโบรติกในไตในแบบจำลอง UUO ของ CKDmice (Hao et al., 2011) อย่างไรก็ตาม การศึกษาในปัจจุบันพบว่าการรักษา ICG ล่วงหน้า-001 ที่ 3 วันก่อน IR ไม่มีผลกระทบต่อไต Wnt/ -catenin การส่งสัญญาณหรือการลุกลามของ AKI toCKD สิ่งนี้ไม่น่าแปลกใจเพราะ Wnt/ -การส่งสัญญาณ catenin แสดงออกที่ระดับต่ำมากในไตผู้ใหญ่ที่ไม่ได้รับบาดเจ็บ (Tanet al., 2014) อย่างไรก็ตาม ผลการวิจัยของเราชี้ให้เห็นว่าระยะเวลาและระยะเวลาของการบริหาร ICG-001 มีความสำคัญต่อการพิจารณาผลการรักษา

กลไกที่เป็นรากฐานของผลการป้องกันของ Wnt/ -catenin อาจเกี่ยวข้องกับการปรับกระบวนการตายแบบอะพอพโทซิสและวิถีการอยู่รอด การระเหยทางพันธุกรรมของ tubule -catenin ส่งเสริมการตายของเซลล์ท่อหลังจากการรักษาด้วย IRI หรือการรักษาด้วยกรดโฟลิก ในขณะที่การกระตุ้นของ Wnt/ -catenin ยับยั้งโปรตีนโปรอะพอพโทซิส (Wang et al. ,2009; Zhou และคณะ, 2012). ในการศึกษานี้ Wnt1 จากภายนอกสามารถยับยั้งการตายของเซลล์ tubular ได้อย่างชัดเจนในแบบจำลอง IRImouse ทั้งสองแบบของแบบจำลองเซลล์ที่เกิดจาก AKI และ H/R ของ AKI สิ่งนี้ชี้ให้เห็นว่าการตายของเซลล์อาจเป็นกลไกที่มีศักยภาพภายใต้ผลการป้องกันของ Wnt1 จากภายนอกต่อ AKI และ AKI ไปสู่การลุกลามของ CKD การศึกษาในปัจจุบันยังแสดงให้เห็นถึงผลการยับยั้งของ Wnt1 จากภายนอกต่อการกระตุ้น NF-κB ทั้งใน AKI และ CKD ซึ่งบ่งชี้ถึงการปราบปรามการตอบสนองต่อการอักเสบ อย่างไรก็ตาม ควรสังเกตว่า การอักเสบที่ลดลงเป็นผลรองต่อการป้องกันหรือรูปแบบการป้องกันที่เป็นสื่อกลางโดย Wnt1 จากภายนอก ยังคงต้องพิจารณา จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่ออธิบายกลไกที่แน่นอนสำหรับการป้องกัน Wnt1- จากภายนอกกับ AKI และการป้องกันความก้าวหน้าของ AKI ถึง CKD

ใช้ตัวปรับ Wnt/ -catenin เพื่อป้องกันและรักษา AKI และ CKD

บทสรุป

โดยสรุป การศึกษานี้ให้หลักฐานสนับสนุนผลการป้องกันของการกระตุ้น Wnt/ -catenin ต่อ AKI และ CKD ที่เกี่ยวข้องกับ IR แม้ว่าจำเป็นต้องมีการทำงานมากขึ้นเพื่อชี้แจงกลไกที่แน่นอนโดยที่ Wnt1 ภายนอกป้องกัน AKI และ CKD เมื่อพิจารณาถึงบทบาทคู่ของการส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin ใน AKI และ CKD การศึกษาในปัจจุบันเน้นถึงความสำคัญของการกำหนดเวลาเมื่อใช้ตัวปรับ Wnt/ -catenin เพื่อป้องกันและบำบัด AKI การศึกษาในอนาคตโดยใช้วิธีการทางเภสัชวิทยาและพันธุกรรมที่มากขึ้น ตลอดจนระยะเวลาและระยะเวลาในการรักษาที่เหมาะสมจะต้องตรวจสอบผลของ Wnt/ -cateninagonists ในการป้องกันและรักษา AKI

จาก: จากภายนอก Wnt1 ป้องกันการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลันและการลุกลามของโรคไตเรื้อรังที่ตามมา, Xue Hong^1†, หยานนี่ โจว^2†, เต๋อตง วัง^3†, Fuping Lyu⁴, Tianjun Guan³, โหยวฮัว หลิว^1,5และเหลียงเซียงเสี่ยว^{3 *}

ด้านหน้า. Physiol., 08 พฤศจิกายน 2564|https://doi.org/10.3389/fphys.2021.745816