ไกลโคไซด์ทั้งหมดของ Cistanche Deserticola ส่งเสริมการฟื้นฟูการทำงานของระบบประสาทโดยการกระตุ้นการสร้างหลอดเลือดใหม่ทางระบบประสาทผ่านทางเดิน Nrf- 2/Keap-1 ใน MCAO/R Rats-Ⅰ

การแนะนำ

โรคหลอดเลือดสมองถือเป็นสาเหตุสำคัญของการเสียชีวิตและความพิการในโลก เกือบ 87% ของผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมองทั้งหมดเกิดจากโรคหลอดเลือดสมองตีบหรือขาดเลือด ปัจจุบันเป็นตัวแทนที่มีประสิทธิภาพสูงสุดและเป็นยาเดียวที่ได้รับการรับรองจาก FDAการรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบเป็นตัวกระตุ้นพลาสมิโนเจนของเนื้อเยื่อรีคอมบิแนนท์ อย่างไรก็ตาม ผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมองจำนวนมากไม่ตอบสนองต่อยานี้ เนื่องจากมีกรอบเวลาในการรักษาที่แคบ และมีความเสี่ยงร้ายแรงต่อภาวะแทรกซ้อนจากโรคเลือดออก ความท้าทายที่สำคัญของการรักษาลิ่มเลือดอุดตันคือการบาดเจ็บจากภาวะขาดเลือด/การกลับเป็นเลือดกลับคืน (I/R) ซึ่งถือเป็นสาเหตุหลักของการบาดเจ็บที่สมองและการทำลายการทำงาน การกลับคืนสู่สภาพเดิมหลังจากภาวะขาดเลือดในสมองเพิ่มความเสี่ยงของการตกเลือดในสมอง ในขณะเดียวกันก็นำไปสู่การบาดเจ็บของหลอดเลือดและทำให้เกิดสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยา (ROS) มากเกินไป ซึ่งสร้างความเสียหายให้กับอุปสรรคในเลือดและสมอง การศึกษาหลายชิ้นยืนยันว่าการหยุดชะงักของ BBB เป็นสาเหตุสำคัญของการเกิดโรคของโรคหลอดเลือดสมองตีบ

ถังเก็บน้ำธรรมชาติ TUBULOSA สำหรับการรักษาโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือด PHGS75% ECH 30% ACT 12%

BBB ประกอบด้วยเซลล์บุผนังหลอดเลือด เพอริไซต์ แอสโตรไซต์ เซลล์ประสาท และเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินเป็นส่วนใหญ่ ส่วนประกอบหลักของ BBB คือเซลล์บุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กในสมองซึ่งเชื่อมต่อกันด้วยจุดเชื่อมต่อที่แน่นหนา ดังนั้นจึงจำกัดโมเลกุลจากภายนอกเข้าไปในสมอง การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาของรอยต่อที่แน่น โดยเฉพาะ occludin, claudin -5 และ zonula occludens -1 (ZO-1) - ส่งผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อการทำงานของ BBB ในระหว่างจังหวะขาดเลือด โดยเฉพาะอย่างยิ่งความสามารถในการซึมผ่านของสิ่งกีดขวาง ในช่วง I/R ROS ที่มากเกินไปเป็นหนึ่งในปัจจัยหลักที่นำไปสู่ความเสียหายโดยตรงของเซลล์ประสาทในสมอง การผลิต ROS มากเกินไปนำไปสู่การเสื่อมสภาพของจุดเชื่อมต่อบางส่วนและการหยุดชะงักของ BBB ซึ่งส่งผลให้โมเลกุลจากภายนอกเข้าสู่สมองผ่านทาง BBB ทำให้เกิดความเสียหายต่อสมองมากขึ้น ดังนั้น การปกป้อง BBB ด้วยสารต่อต้านอนุมูลอิสระจึงถือเป็นวิธีที่มีศักยภาพในการป้องกันการบาดเจ็บจากการไหลกลับของเลือด

นอกจากการพังทลายของ BBB แล้ว I/R ยังส่งผลให้เกิดการบาดเจ็บของหลอดเลือดและเส้นประสาทและการตายของเส้นประสาท ในระหว่างโรคหลอดเลือดสมอง การตายของเซลล์ประสาทที่เพิ่มขึ้นอาจเป็นผลมาจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และการศึกษาจำนวนมากแสดงให้เห็นว่า ROS ทำให้ความรุนแรงของโรคหลอดเลือดสมองรุนแรงขึ้นและความเสียหายทางระบบประสาท แม้ว่าการทดลองทางคลินิกจะไม่ได้รับผลลัพธ์ที่น่าพอใจ แต่การป้องกันระบบประสาทยังคงเป็นกลยุทธ์ที่น่าหวังในการรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบเฉียบพลัน ดังนั้นการค้นหายาป้องกันระบบประสาทที่มีประสิทธิภาพในการรักษาโรคหลอดเลือดสมองจึงเป็นประโยชน์สำหรับผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมอง

การแพทย์แผนจีน (TCM) ใช้มาตรการเพื่อแทรกแซงความไม่สมดุลภายในของร่างกาย เนื่องจากการเกิดโรคที่ซับซ้อนของโรคหลอดเลือดสมองตีบ ผลกระทบหลายปัจจัยของ TCM และองค์ประกอบออกฤทธิ์มีบทบาทสำคัญในการรักษาโรคหลอดเลือดสมองซิสแทนเช่Deserticola YC Ma ซึ่งแพร่หลายในพื้นที่แห้งแล้งหรือกึ่งแห้งแล้งทั่วมองโกเลียและทางตะวันตกเฉียงเหนือของประเทศจีน เป็นสมุนไพร TCM ที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษาโรคต่างๆ เช่น การหลงลืมและภาวะซึมเศร้า มาเป็นเวลากว่า 1000 ปีในประเทศจีน การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ระบุว่าสารสกัดหยาบจาก C. Deserticola มีฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาหลายอย่าง เช่นเสริมสร้างการทำงานของการเรียนรู้และความจำ การป้องกันระบบประสาท ภูมิคุ้มกัน สารต้านอนุมูลอิสระ การชะลอวัย และฤทธิ์ต้านความเหนื่อยล้า- การวิเคราะห์ทางเคมีของ C. Deserticola แสดงให้เห็นว่าองค์ประกอบหลักประกอบด้วยฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์, ไอริดอยด์ไกลโคไซด์, พอลิแซ็กคาไรด์ และโอลิโกแซ็กคาไรด์- อย่างไรก็ตาม ส่วนประกอบออกฤทธิ์ของ C. Deserticola สำหรับการปกป้องสมองยังไม่ชัดเจนนัก

คุณสมบัติในการปกป้องระบบประสาทของ C. Deserticola บ่งบอกถึงศักยภาพในการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับการรับรู้ เช่น โรคหลอดเลือดสมองและภาวะซึมเศร้า รวมถึงโรคอัลไซเมอร์ อย่างไรก็ตาม การวิจัยเกี่ยวกับผลกระทบของ C. Deserticola ต่อโรคหลอดเลือดสมอง รวมถึงส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์และกลไกการออกฤทธิ์ นั้นมีจำกัดมาก ในงานปัจจุบัน เราได้สำรวจผลการป้องกันของสารสกัด 3 ชนิดจาก C. Deserticola, glycosides ทั้งหมด (TGs, phenylethanoid glycosides และ glycosides อื่นๆ), polysaccharides (PSs) และ oligosaccharides (OSs) ต่อการบาดเจ็บของ I/R ในสมอง การค้นพบของเราอาจนำไปสู่การประยุกต์ใช้ทางคลินิกที่แม่นยำของ C. Deserticola และจัดหาตัวแทนที่เหมาะสมการบำบัดโรคหลอดเลือดสมองตีบ.

วัสดุและวิธีการ

เคมีภัณฑ์และรีเอเจนต์

ก้านของ Cistanche Deserticola ซื้อมาจากเมือง Alashan ประเทศมองโกเลียใน และระบุโดยผู้เขียนคนหนึ่ง (P.-F. Tu) TG, PS และ OS ได้จัดทำขึ้นตามวิธีการที่เรารายงานไว้ก่อนหน้านี้ การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ TG ดำเนินการโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ และโครมาโตกราฟีของมันแสดงในรูปที่ 1 ส่วนประกอบหลักของ TG คือ echinacoside, tubuloside A, acteoside, isoacteoside และ 2'-acetylacteoside; มีปริมาณ 163.05 มก./กรัม 4.125 มก./กรัม 41.66 มก./กรัม 22.655 มก./กรัม และ 12.045 มก./กรัม ตามลำดับ เนื้อหาของ PS และ OS คือ 69.42% และ 65.24% ตามลำดับตามที่กำหนดโดย HPLC และการวิเคราะห์กรดฟีนอล – ซัลฟิวริกตามลำดับ

TUBULOSA ถังบำบัดธรรมชาติสำหรับการรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบหรือขาดเลือด PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ข้อมูลอ้างอิงมาตรฐานของเอไคนาโคไซด์ (A0282), tubuloside A (A0942), แอกทีโอไซด์ (A0280), ไอโซแอคทีโอไซด์ (A0281) และ 2'- อะซิติแลคเตโอไซด์ (A0943) ถูกซื้อจากเทคโนโลยีชีวภาพ Chengdu Must ความบริสุทธิ์ทุกมาตรฐานมากกว่า 98% ชุดอุปกรณ์ Nissl Stain H&E ซื้อจาก Boster Edaravone (T0407-1) ​​ถูกซื้อจาก Target Mol (เซี่ยงไฮ้, จีน) ซื้อ MAP ต่อต้านหนูแรบบิท-2 (ab32454), Nrf-2 (ab31163), PDGFRb (ab32570), Keap-1 (ab66620) และ CD31 ต่อต้านหนูหนู (ab24590) จาก Abcam Inc. Rabbit anti-rat Claudin5 (BS1069), ZO-1 (BS9802M) และ Occludin (BS72035) ถูกซื้อจาก Bioworld Technology Cell Signaling Technology Inc. (บอสตัน, แมสซาชูเซตส์, สหรัฐอเมริกา) เป็นแหล่งที่มาของ Synapsin ที่ต่อต้านหนูกระต่าย-1 (SYN,5297T), PSD95 (3450T), a-Smooth Muscle Actin (a-SMA,19245T) GAPDH (HRP-60004) ถูกซื้อจาก Proteintech Group, Inc. แอนติบอดีทุติยภูมิจัดหาโดยเทคโนโลยีชีวภาพ Zhongshan Golden Bridge (ปักกิ่ง จีน) Hoechst 33258 ได้มาจาก Beyotime

สัตว์

หนู Sprague-Dawley (ตัวผู้ น้ำหนัก 250–300 กรัม) ได้มาจากเทคโนโลยีสัตว์ทดลองไวทัล ริเวอร์ และเลี้ยงในห้องปรับอากาศโดยใช้วงจรแสง/มืด 12 ชั่วโมง การทดลองในสัตว์ทั้งหมดดำเนินการโดยแนวทางการวิจัยสัตว์ ARRIVE และได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์ประจำสถาบันของศูนย์วิทยาศาสตร์สุขภาพมหาวิทยาลัยปักกิ่ง

โปรโตคอลการทดลองกับสัตว์

หนูอยู่ภายใต้ MCAO/R ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า (Wang et al., 2018) โดยสรุป มีการเปิดเผยหลอดเลือดแดงคาโรติดร่วมด้านซ้าย (CCA), หลอดเลือดแดงคาโรติดภายนอก (ECA) และหลอดเลือดแดงคาโรติดภายใน (ICA) และมีการสอดไหมเย็บไนลอน 3-0 จาก ECA เข้าไปใน ICA จนกระทั่งถึงตรงกลาง หลอดเลือดแดงในสมอง (MCA) หลังจากการบดเคี้ยว MCA เป็นเวลา 1.5 ชั่วโมง จะมีการจำลองการกลับคืนสู่สภาพเดิมโดยการเอาเส้นใยออก ในระหว่างการผ่าตัด รักษาอุณหภูมิร่างกายของหนูทุกตัวไว้ที่ 37.0 องศา ยา

การบริหาร

หนูถูกสุ่มแยกออกเป็นหกกลุ่มโดยใช้ซอฟต์แวร์ SPSS เวอร์ชัน 220 ตามที่อธิบายไว้: กลุ่มปกติ (NOR); กลุ่มแบบจำลอง (MOD); กลุ่มอีดาราโวน (ยาที่ให้ผลบวก 6 มล./กก., EDI); กลุ่ม TG (280 มก./กก., TG); กลุ่ม PS (280 มก./กก., PS) และกลุ่ม OS (280 มก./กก., OS) TG, PS และ OS ได้รับการบริหารให้วันละครั้งหลังจาก MCAO/R เป็นเวลา 14 วัน กลุ่ม NOR และ MOD ได้รับการบำบัดด้วยน้ำเกลือปกติ จำนวนสัตว์แสดงไว้ในตารางที่ 1

การวัดน้ำหนักและคะแนนการขาดดุลทางระบบประสาทดัดแปลง (mNSS)

ติดตามน้ำหนักตัวในวันที่ 14 โดยใช้เครื่องชั่งน้ำหนักดิจิตอล ADVENTURE™ (OHAUS, นิวเจอร์ซีย์, สหรัฐอเมริกา) mNSS ได้รับการประเมินตามวิธีการที่ FJ Wang อธิบาย (Wang et al., 2018) พร้อมการแก้ไขเล็กน้อย

2, 3, 5-การย้อมสีไตรฟีนิลเตตราโซเลียม (TTC)

วัดปริมาตรกล้ามเนื้อตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ โดยสรุป สมองถูกแบ่งออกเป็นบล็อกโคโรนาลที่มีระยะห่างเท่ากันเจ็ดบล็อก (2 มม.) ส่วนเหล่านี้ถูกย้อมด้วย 2% TTC ที่ 37 องศา เป็นเวลา 15 นาที ปริมาตรของซีกโลกขาดเลือด (%)=(ปริมาตรของซีกโลกขาดเลือดขาดเลือดแบบ ipsilateral −ปริมาตรของซีกโลกขาดเลือดด้านตรงข้าม)/ปริมาตรของซีกโลกขาดเลือดด้านตรงข้าม × 100

การย้อมสี Nissl และ H&E

หนูได้รับการดมยาสลบ จากนั้นสมองทั้งหมดก็ถูกนำออกจากกะโหลกศีรษะอย่างรวดเร็วโดยใช้พาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4% ที่ฝังอยู่ในขี้ผึ้งพาราฟิน และแบ่งเป็นชิ้นที่มีความหนา 7 µm ส่วนต่างๆ เปื้อนด้วย Nissl และ H&E ในการศึกษานี้ มีการสุ่มจับช่องข้อมูลขนาด 200 × 200 µm จำนวน 6 ช่องในตัวอย่างเนื้อเยื่อแต่ละชิ้นด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง จำนวนศพของ Nissl ถูกนับด้วยซอฟต์แวร์ IPP เวอร์ชัน 6.0

อีแวนส์ บลู แอสเซย์

หนูถูกฉีดด้วย 2% EB หลังจาก MCAO/R สองชั่วโมงต่อมา หนูถูกวางยาสลบ จากนั้นสมองทั้งหมดก็ถูกเอาออกอย่างรวดเร็วและทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในอะซิโตน ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกวิเคราะห์ที่ 620 นาโนเมตรโดยเครื่องอ่านการดูดกลืนแสง 800 TS

การวัดกิจกรรมของคาตาเลส (CAT), ซูเปอร์ออกไซด์ดิสมิวเทส (SOD), มาลอนไดอัลดีไฮด์ (MDA) และกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส (GSH-Px)

ตัวอย่างซีรั่มทั้งหมดถูกปั่นเหวี่ยงที่ 4,000 × รอบต่อนาทีเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศา จากนั้นวิเคราะห์เพื่อตรวจจับกิจกรรมของ MDA, CAT, SOD และ GSH-Px ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

การวิเคราะห์การซับแบบตะวันตก

เนื้อเยื่อสมอง (100 มก.) ที่รวบรวมจากหนูแต่ละตัวถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันและไลซ์ในบัฟเฟอร์ไลซิส RIPA จากนั้นวิเคราะห์เพื่อตรวจจับความเข้มข้นของโปรตีนโดยใช้ชุด BCA โปรตีนทั้งหมดของเนื้อเยื่อถูกโหลดบนเจล SDS-PAGE 10% และถ่ายโอนไปยังเมมเบรนไนโตรเซลลูโลส เมมเบรนถูกปิดกั้นโดยใช้นมพร่องมันเนย 5% จากนั้นบ่มข้ามคืนด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิที่ 4 องศา จากนั้นเมมเบรนถูกบ่มด้วยแอนติบอดีทุติยภูมิ การวิเคราะห์เวสเทิร์นบล็อตได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ Kodak Digital Imaging System

การวิเคราะห์อิมมูโนฟลูออเรสเซนต์

การย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์สำหรับ CD31, a-SMA, ZO-1, claudin5, occludin, PDGFRb, SYN, PSD95, MAP-2, Nrf-2 และ Keap-1 ถูกดำเนินการ แอนติบอดีปฐมภูมิต่อ Nrf-2, CD31, a-SMA, ZO-1, claudin5, occludin, PDGFRb, SYN, PSD95, MAP-2 และ Keap-1 ถูกเจือจางเป็น 1 :200 และ 1:100 ตามลำดับ แอนติบอดีทุติยภูมิของ IgG ต่อต้านกระต่ายของหนู Alexa Flur 488 และ IgG ต่อต้านกระต่ายของแพะโรดามีน (TRITC) ถูกเจือจางทั้งคู่เป็น 1:200 นิวเคลียสถูกย้อมด้วย Hoechst 33258 ภาพถูกจับโดยใช้ Vectra® Polaris ™ Automated Quantitative Pathology Imaging System (PerkinElmer, USA) การแสดงออกของโปรตีนถูกวิเคราะห์โดยใช้ซอฟต์แวร์ IPP เวอร์ชัน 6.0 การวิเคราะห์ทางสถิติ

ข้อมูลทั้งหมดถูกอธิบายว่าเป็นค่าเฉลี่ย ± SD ซอฟต์แวร์ SPSS เวอร์ชัน 22.0 ดำเนินการเพื่อการวิเคราะห์ทางสถิติ การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียวถูกนำมาใช้เมื่อเปรียบเทียบกลุ่มต่างๆ P < 0.05 ถือเป็นความแตกต่างทางสถิติ

ถังเก็บน้ำธรรมชาติ TUBULOSA สำหรับป้องกันโรคขาดเลือด PHGS75% ECH 30% ACT 12%

ผลลัพธ์

TGs เพิ่มน้ำหนักตัวและลดความเสียหายของสมองในหนู MCAO/R

หลังจาก 14 วันของการรักษาด้วย TG, PSs, Oss และ EDI น้ำหนักตัว การขาดดุลทางระบบประสาท และปริมาตรกล้ามเนื้อหัวใจตายของหนู I/R ได้รับการประเมิน ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าน้ำหนักตัวในกลุ่ม MOD ลดลงอย่างมาก ในขณะที่น้ำหนักที่ลดลงในกลุ่ม TG, PS และ EDI เพิ่มขึ้น (รูปที่ 2A) คะแนนการขาดดุลทางระบบประสาทลดลงอย่างมากโดย EDI และ TG (รูปที่ 2B) ชิ้นสมองในหนูกลุ่ม NOR มีสีแดงเข้มและไม่มีภาวะกล้ามเนื้อหัวใจตาย ในขณะที่หนูของกลุ่ม MOD แสดงภาวะสมองตายขนาดใหญ่ใน ipsilateral หลังการบำบัดด้วย TG ปริมาตรของกล้ามเนื้อหัวใจตายลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 2C, D) การรักษา PS และ OS ไม่แสดงผลกระทบที่ชัดเจนต่อดัชนีข้างต้น ข้อมูลข้างต้นแสดงให้เห็นว่า TG สามารถบรรเทาอาการบาดเจ็บที่สมองที่เกิดจาก I/R ได้อย่างเห็นได้ชัด แต่ PS และระบบปฏิบัติการไม่สามารถทำได้

TGs เยียวยาความเสียหายทางจุลพยาธิวิทยาในหนู MCAO/R

เพื่อตรวจสอบผลกระทบบางประการของการรักษา TG, PS และ OS ต่อความเสียหายทางจุลพยาธิวิทยา การย้อมสี H&E ได้ทำขึ้นเพื่อเปิดเผยความเสียหายทางพยาธิวิทยา มีการจัดโครงสร้างทางจุลพยาธิวิทยาของสมองในกลุ่ม NOR อย่างสม่ำเสมอ การเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาในกลุ่ม TGs น้อยกว่ากลุ่ม MOD อย่างไรก็ตาม กลุ่มการรักษา PS และ OS ไม่พบการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาที่มีนัยสำคัญ (รูปที่ 3)

TGs ลดทอนการบาดเจ็บของเส้นประสาทหลังจากหนูที่ถูกกระตุ้นด้วย I/R

การย้อมสี Nissl แสดงให้เห็นการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาของเซลล์ประสาทในเงามัวของบริเวณที่ขาดเลือด ดังแสดงในรูปที่ 4 เซลล์ประสาทปกติมีนิวเคลียสที่ชัดเจนและมีโครงสร้างที่สมบูรณ์ ในกลุ่ม MOD เซลล์ประสาทได้ขยายช่องว่างระหว่างเซลล์ ศพของนิสเซิลหายไป หดตัว และมีคราบฝังลึก อย่างไรก็ตาม การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ไม่ค่อยพบเห็นในกลุ่ม EDI, TG และ PS ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า TG และ PS สามารถทำได้อย่างมีนัยสำคัญลดอาการบาดเจ็บของเส้นประสาทที่เกิดจากการขาดเลือด/การกลับคืนสู่สภาพเดิม.

TGs ลดการหยุดชะงักของ BBB หลังจากหนูที่ได้รับ I/R

Evans blue assay เป็นวิธีการดั้งเดิมสำหรับการวิจัยการเปลี่ยนแปลงความสามารถในการซึมผ่านของ BBB ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า Evans blue เพิ่มขึ้นในกลุ่ม MOD ในขณะที่ Evans blue ลดลงอย่างมีนัยสำคัญใน TGs และหนูที่ได้รับ EDI ยิ่งไปกว่านั้น ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มการบำบัด PS และ OS (รูปที่ 5) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า TG สามารถลดการหยุดชะงักของ BBB ได้อย่างมาก

TGs ส่งเสริมการสร้างเส้นเลือดใหม่ในหนูที่ได้รับบาดเจ็บ I/R

การศึกษาล่าสุดแสดงให้เห็นว่าการสร้างเส้นเลือดใหม่มีบทบาทสำคัญในการฟื้นฟูการทำงานของระบบประสาทและผลลัพธ์การพยากรณ์โรคหลังโรคหลอดเลือดสมองตีบเฉียบพลัน (Yuen et al., 2015) เพื่อประเมินผลกระทบของ TG, PS และ OS ต่อการสร้างเส้นเลือดใหม่, CD31 และ a-SMA ถูกนำมาใช้เพื่อหาปริมาณของจำนวนแคปิลลารี การย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์แสดงให้เห็นว่ากลุ่ม MOD ทำให้การแสดงออกของ CD31 (รูปที่ 6A, B) และ a-SMA (รูปที่ 6C, D) ลดลงอย่างเห็นได้ชัดในเงามัวของพื้นที่ขาดเลือดของหนู I / R เมื่อเปรียบเทียบกับหนูปกติ . ผลลัพธ์นี้แสดงให้เห็นว่า I/R อาจทำให้เกิดความเสียหายของหลอดเลือดในเยื่อหุ้มสมองบางส่วนในซีกโลกขาดเลือด อย่างไรก็ตาม การบำบัดด้วย TG และ EDI เพิ่มความหนาแน่นของเส้นเลือดฝอย การสร้างเส้นเลือดใหม่และการสร้างเส้นเลือดใหม่อย่างน่าทึ่ง ตามที่ระบุโดยการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ CD31 และ a-SMA ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า TG สามารถส่งเสริมการสร้างเส้นเลือดใหม่ในเงามัวขาดเลือดของหนู I/R ได้ แต่ PS และ OS ไม่สามารถทำได้

TGs เพิ่มการแสดงออกของโปรตีนที่แยกแน่นในหนูที่ได้รับบาดเจ็บจาก I/R

การหยุดชะงักของ BBB อาจทำให้ปริมาณน้ำในสมองเพิ่มขึ้นและการบวมของเนื้อเยื่อ นำไปสู่การบาดเจ็บที่สมอง โปรตีนที่จุดเชื่อมต่อแน่นเป็นส่วนประกอบทางโครงสร้างที่สำคัญของ BBB เพื่อทดสอบว่าการรักษา TG, PS และ OS หลังจากโรคหลอดเลือดสมองอาจส่งผลต่อความสมบูรณ์ของ BBB หรือไม่ การแสดงออกของ ZO-1, claudin-5 และ occludin ดำเนินการโดยการวิเคราะห์อิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ ผลลัพธ์บ่งชี้ว่าการแสดงออกของคลอดิน-5, ออคคลูดิน และ ZO-1 ลดลงอย่างเห็นได้ชัดในกลุ่ม MOD อย่างไรก็ตาม เพิ่มขึ้นอย่างมากหลังจาก 14 วันของการบริหาร กลุ่ม PS และ OS แสดงไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญในการแสดงออกของโปรตีนเหล่านี้ (รูปที่ 7) ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่า TG สามารถควบคุมการแสดงออกของโปรตีนที่จุดเชื่อมต่อแน่นและอาจรักษาความสมบูรณ์ของ BBB หลังจากได้รับบาดเจ็บจาก I/R

TGs เพิ่มความครอบคลุมของเพอริไซต์บนเส้นเลือดฝอยในหนูที่ได้รับบาดเจ็บจาก I/R

การครอบคลุมของเพอริไซต์บนเส้นเลือดฝอยมีบทบาทสำคัญในการรักษาความสมบูรณ์ของ BBB ดังนั้นเราจึงทดสอบว่าสามารถเพิ่มความครอบคลุมของเพอริไซต์โดยการรักษา TG, PS และ OS ได้หรือไม่ ผลการวิเคราะห์ความเข้มของอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์แสดงให้เห็นว่าทั้งการแสดงออกของ PDGFRb และ CD31 ลดลงอย่างมากในกลุ่ม MOD การบริหารให้ TG ให้กับหนู I/R ฟื้นตัวอย่างมีนัยสำคัญหรือแม้กระทั่งเพิ่มความเข้มของการแสดงออกของ PDGFRb และ CD31 แต่ไม่พบความแตกต่างในกลุ่มการบำบัด PS และ OS (รูปที่ 8) ดังนั้นการรักษา TG สามารถเพิ่มความครอบคลุมของเพอริไซต์ได้อย่างมีนัยสำคัญ การค้นพบเหล่านี้ยืนยันเพิ่มเติมว่า TG สามารถรักษาความสมบูรณ์ของ BBB ได้หลังจาก I/R

ถังเก็บน้ำธรรมชาติ TUBULOSA สำหรับการป้องกันโรคหลอดเลือดสมองตีบ PHGS75% ECH 30% ACT 12%