Glycosides ทั้งหมดของ Cistanche Deserticola ส่งเสริมการฟื้นฟูการทำงานของระบบประสาทโดยกระตุ้นการสร้างหลอดเลือดใหม่ผ่าน Nrf- 2/Keap-1 Pathway ในหนู MCAO/R
Feb 27, 2023
พื้นหลัง:
ยาจีนโบราณ Cistanche Deserticola มีรายงานว่าใช้ได้กับโรคหลอดเลือดหัวใจและหลอดเลือดสมอง อย่างไรก็ตาม ส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ในการป้องกันโรคหลอดเลือดสมองตีบยังไม่ชัดเจน เรามีวัตถุประสงค์เพื่อสำรวจองค์ประกอบที่ออกฤทธิ์ของ C. Deserticola ต่อโรคหลอดเลือดสมองตีบรวมถึงกลไกที่เป็นไปได้
วิธีการ:
เราตรวจสอบผลการป้องกันสมองของสารสกัดจาก C. Deserticola, Total glycosides (TGs), polysaccharides (PSs) และ oligosaccharides (OSs) ในแบบจำลองหนูของ Middle cerebral occlusion-reperfusion (MCAO/R) 2, 3, 5-การย้อมสีด้วย Triphenyltetrazolium chloride (TTC) ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินปริมาณของกล้ามเนื้อสมองตาย และการทดสอบ Evans blue ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินความสามารถในการซึมผ่านของสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมอง (BBB) จากนั้น นิพจน์ CD31, a-SMA, PDGFRb, SYN, PSD95, MAP-2, ZO-1, claudin-5, occludin, Keap-1 และ Nrf{{ 13}} ถูกวิเคราะห์โดยใช้ Western blotting หรืออิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ และกิจกรรม MDA, SOD, CAT และ GSH-Px ถูกวิเคราะห์โดยใช้ชุดอุปกรณ์
ผลลัพธ์:
การรักษา TGs ลดคะแนนการขาดดุลของระบบประสาทและปริมาณของกล้ามเนื้ออย่างน่าทึ่ง ส่งเสริมการสร้างเส้นเลือดใหม่และการเปลี่ยนแปลงของระบบประสาท และรักษาความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมองได้อย่างมีประสิทธิภาพเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจำลอง นอกจากนี้ TGs ยังช่วยลดระดับ MDA และเพิ่มกิจกรรมต้านอนุมูลอิสระ (SOD, CAT และ GSH-Px) ในสมองได้อย่างมีนัยสำคัญ ในขณะเดียวกัน TGs ลดการควบคุมการแสดงออกของ Keap-1 อย่างน่าทึ่งและอำนวยความสะดวกในการเคลื่อนย้ายนิวเคลียร์ของ Nrf-2 ในทางตรงกันข้าม ไม่พบผลการป้องกันสำหรับกลุ่ม PS และ OS
บทสรุป:
TGs เป็นส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์หลักของ C. Deserticola ต่อ MCAO/Rinduced cerebral injury และการป้องกันส่วนใหญ่จะผ่านทาง Nrf-2/Keap-1 pathway
คลิกผลิตภัณฑ์สารสกัดจากธรรมชาติ Cistanche Deserticola
การแนะนำ
โรคหลอดเลือดสมองถือเป็นสาเหตุการตายและความพิการที่สำคัญของโลก (Donnan et al., 2008) เกือบร้อยละ 87 ของผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมองทั้งหมดเกิดจากโรคหลอดเลือดสมองตีบ (Ovbiagele และ Nguyen-Huynh, 2011) ปัจจุบัน ยาที่มีประสิทธิภาพสูงสุดและเป็นยาเพียงชนิดเดียวที่ได้รับการอนุมัติจากองค์การอาหารและยาที่ใช้ในการรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบคือตัวกระตุ้นพลาสมิโนเจนของเนื้อเยื่อชนิดรีคอมบิแนนท์ อย่างไรก็ตาม ผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมองจำนวนมากไม่ตอบสนองต่อยานี้ เนื่องจากมีช่วงเวลาในการรักษาที่แคบและมีความเสี่ยงร้ายแรงต่อภาวะแทรกซ้อนจากภาวะเลือดออก (Lee et al., 2012; Schellinger and Kohrmann, 2014) ความท้าทายที่สำคัญของการรักษาด้วยการสลายลิ่มเลือดคือการบาดเจ็บจากภาวะขาดเลือด/การกลับเป็นซ้ำ (I/R) ซึ่งถือเป็นสาเหตุหลักของการบาดเจ็บของสมองและการทำลายการทำงาน การกลับคืนของเลือดหลังจากสมองขาดเลือดจะเพิ่มความเสี่ยงของการตกเลือดในสมอง ในขณะที่นำไปสู่การบาดเจ็บของเส้นประสาทและหลอดเลือด และสร้างสายพันธุ์ออกซิเจนที่มีปฏิกิริยามากเกินไป (ROS) ซึ่งทำลายสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมอง (Alluri et al., 2015) งานวิจัยหลายชิ้นยืนยันว่าการหยุดชะงักของ BBB เป็นสาเหตุหลักของการเกิดโรคของโรคหลอดเลือดสมองตีบ (Cao et al., 2016b)
BBB ประกอบด้วยเซลล์บุผนังหลอดเลือด เพอริไซต์ แอสโทรไซต์ เซลล์ประสาท และเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินเป็นส่วนใหญ่ ส่วนประกอบหลักของ BBB คือเซลล์บุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กในสมองที่เชื่อมต่อกันโดยทางแยกที่แน่น จึงจำกัดไม่ให้โมเลกุลภายนอกเข้าสู่สมอง การเปลี่ยนแปลงทางพยาธิวิทยาของทางแยกที่คับแคบ—โดยเฉพาะอย่างยิ่ง occludin, claudin-5 และ zonula occludens-1 (ZO-1)—ส่งผลกระทบอย่างมากต่อการทำงานของ BBB ระหว่างโรคหลอดเลือดสมองตีบ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการซึมผ่านของสิ่งกีดขวาง (Liu et al., 2014; Hu et al., 2018; Liu et al., 2019) ในช่วง I/R ROS ที่มากเกินไปเป็นหนึ่งในปัจจัยหลักที่นำไปสู่ความเสียหายโดยตรงของเซลล์ประสาทในสมอง (Ding et al., 2014) การผลิตมากเกินไปของ ROS นำไปสู่การเสื่อมสภาพของจุดเชื่อมต่อบางอย่างและการหยุดชะงักของ BBB ซึ่งส่งผลให้โมเลกุลจากภายนอกเข้าสู่สมองผ่านทาง BBB ซึ่งนำไปสู่การทำลายสมองให้รุนแรงขึ้น (Cheon et al., 2016; Zhang QY et al., 2017) ดังนั้นการป้องกัน BBB ด้วยสารต่อต้านอนุมูลอิสระจึงถือเป็นวิธีที่มีศักยภาพในการป้องกันการบาดเจ็บที่กลับเป็นซ้ำ
นอกจากการสลายของ BBB แล้ว I/R ยังส่งผลให้เกิดการบาดเจ็บของหลอดเลือดสมองและการตายของเซลล์ประสาท (Jung et al., 2010) ระหว่างเกิดโรคหลอดเลือดสมอง การตายของเซลล์ประสาทที่เพิ่มขึ้นอาจเป็นผลมาจากความเครียดออกซิเดชั่น (Chi et al., 2018) และการศึกษาจำนวนมากแสดงให้เห็นว่า ROS ทำให้ความรุนแรงของโรคหลอดเลือดสมองรุนแรงขึ้นและความเสียหายของระบบประสาท (Kondo et al., 1997; Crack et al., 2001; แคร็ก et al., 2549) แม้ว่าการทดลองทางคลินิกจะไม่ได้ผลลัพธ์ที่น่าพอใจ แต่การป้องกันระบบประสาทยังคงเป็นกลยุทธ์ที่มีแนวโน้มในการรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบเฉียบพลัน (Moretti et al., 2015) ดังนั้น การค้นหายาป้องกันระบบประสาทที่มีประสิทธิภาพในการรักษาโรคหลอดเลือดสมองจึงเป็นประโยชน์สำหรับผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมอง
การแพทย์แผนจีน (TCM) ใช้มาตรการเพื่อแทรกแซงความไม่สมดุลภายในของร่างกาย (Gaire, 2018) เนื่องจากการเกิดโรคที่ซับซ้อนของโรคหลอดเลือดสมองตีบ ผลกระทบหลายปัจจัยของ TCM และองค์ประกอบที่ทำงานอยู่มีบทบาทสำคัญในการรักษาโรคหลอดเลือดสมอง Cistanche Deserticola YC Ma ซึ่งแพร่หลายในพื้นที่แห้งแล้งหรือกึ่งแห้งแล้งทั่วมองโกเลียและภาคตะวันตกเฉียงเหนือของจีน เป็นสมุนไพรจีนที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษาโรคต่างๆ เช่น อาการหลงลืมและภาวะซึมเศร้ามานานกว่า 1,000 ปีในประเทศจีน . การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ระบุว่าสารสกัดหยาบจาก C. Deserticola มีฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาหลายประการ เช่น เสริมการเรียนรู้และความจำ ปกป้องระบบประสาท เสริมภูมิคุ้มกัน ต้านอนุมูลอิสระ ชะลอวัย และต้านความเมื่อยล้า (Ko and Leung, 2007; Wang et al. , 2012; Li et al., 2015). การวิเคราะห์ทางเคมีของ C. Deserticola แสดงให้เห็นว่าองค์ประกอบหลัก ได้แก่ phenylethanoid glycosides, iridoid glycosides, polysaccharides และ oligosaccharides (Jiang and Tu, 2009) อย่างไรก็ตาม ส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ของ C. Deserticola สำหรับการปกป้องสมองยังไม่ชัดเจนนัก
คุณสมบัติในการป้องกันระบบประสาทของ C. Deserticola บ่งบอกถึงศักยภาพในการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับความรู้ความเข้าใจ เช่น โรคหลอดเลือดสมองและภาวะซึมเศร้า รวมถึงโรคอัลไซเมอร์ (Wang et al., 2017) อย่างไรก็ตาม การวิจัยเกี่ยวกับผลกระทบของ C. Deserticola ต่อโรคหลอดเลือดสมอง รวมถึงส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์และกลไกการออกฤทธิ์ยังมีจำกัดมาก
ในงานปัจจุบัน เราได้สำรวจผลการป้องกันของสารสกัดสามชนิดจาก C. Deserticola, Total glycosides (TGs, phenylethanoid glycosides และ glycosides อื่นๆ), polysaccharides (PSs) และ oligosaccharides (OSs) ต่อการบาดเจ็บ I/R ของสมอง การค้นพบของเราอาจนำไปสู่การใช้ C. Deserticola ทางคลินิกอย่างแม่นยำและจัดหาตัวแทนผู้สมัครสำหรับการรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบ
วัสดุและวิธีการ
เคมีภัณฑ์และรีเอเจนต์
ลำต้นของ Cistanche Deserticola ถูกซื้อมาจาก Alashan, มองโกเลียใน และระบุโดยผู้เขียนคนหนึ่ง (P.-F. Tu) TGs, PSs และ OS ถูกเตรียมตามวิธีการที่เรารายงานไว้ก่อนหน้านี้ (Gao et al., 2015) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ TGs ดำเนินการโดยโครมาโตกราฟีของเหลวสมรรถนะสูง (HPLC) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Li et al, 2019) และโครมาโตแกรมของมันแสดงในรูปที่ 1 ส่วนประกอบหลักของ TGs คือ echinacoside, tubuloside A, acteoside, isoacteoside, และ 2'-อะซิติแลคทีโอไซด์; เนื้อหาของพวกเขาคือ 163.05 มก./ก. 4.125 มก./ก. 41.66 มก./ก. 22.655 มก./ก. และ 12.045 มก./ก. ตามลำดับ เนื้อหาของ PSs และ OS อยู่ที่ 69.42 เปอร์เซ็นต์ และ 65.24 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ตามที่กำหนดโดย HPLC และการวิเคราะห์กรดฟีนอล–ซัลฟิวริก ตามลำดับ (Zhang A. et al., 2018; Shi et al, 2019)
การอ้างอิงมาตรฐานของ echinacoside (A0282), tubuloside A (A0942), acteoside (A0280), isoacteoside (A0281) และ 2'- acetylacteoside (A0943) ถูกซื้อจาก Chengdu Must Biotechnology (มณฑลเสฉวน ประเทศจีน) ความบริสุทธิ์ของมาตรฐานทั้งหมดมีมากกว่า 98 เปอร์เซ็นต์ ชุด H&E ของ Nissl stain ซื้อมาจาก Boster (อู่ฮั่น ประเทศจีน) Edaravone (T0407-1) ถูกซื้อมาจาก Target Mol (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ซื้อแผนที่ป้องกันหนูกระต่าย-2 (ab32454), Nrf-2 (ab31163), PDGFRb (ab32570), Keap-1 (ab66620) และเมาส์ป้องกันหนู CD31 (ab24590) จาก Abcam Inc (เคมบริดจ์ แมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา) เครื่องป้องกันหนูกระต่าย Claudin5 (BS1069), ZO-1 (BS9802M) และ Occludin (BS72035) ถูกซื้อจาก Bioworld Technology (หนานจิง ประเทศจีน) Cell Signaling Technology Inc. (บอสตัน แมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา) เป็นแหล่งกำเนิดของกระต่ายต่อต้านหนู Synapsin-1 (SYN,5297T), PSD95 (3450T), a-Smooth Muscle Actin (a-SMA,19245T) GAPDH (HRP-60004) ซื้อมาจาก Proteintech Group, Inc. (ชิคาโก สหรัฐอเมริกา)
แอนติบอดีทุติยภูมิจัดทำโดย Zhongshan Golden Bridge Biotechnology (ปักกิ่ง, จีน) Hoechst 33258 ได้มาจาก Beyotime (มณฑลเจียงซู ประเทศจีน)
สัตว์
หนู Sprague-Dawley (เพศผู้ น้ำหนัก 250–300 กรัม) ได้มาจาก Vital River Laboratory Animal Technology (ปักกิ่ง ประเทศจีน) และตั้งอยู่ในห้องปรับอากาศที่มีรอบแสง/มืด 12 ชั่วโมง การทดลองในสัตว์ทั้งหมดดำเนินการโดยแนวทางการวิจัยในสัตว์ ARRIVE (Kilkenny et al., 2010; McGrath et al., 2010) และได้รับอนุมัติจาก Institutional Animal Care and Use Committee of Peking University Health Science Center (LA2019123)
โปรโตคอลการทดลองในสัตว์
หนูอยู่ภายใต้ MCAO/R ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า (Wang et al., 2018) โดยสังเขป หลอดเลือดแดงคาโรติดทั่วไปด้านซ้าย (CCA) หลอดเลือดแดงคาโรติดภายนอก (ECA) และหลอดเลือดแดงคาโรติดภายใน (ICA) ถูกเปิดออก และเย็บไนลอนโมโนฟิลาเมนท์ 3-0 เส้นจาก ECA เข้าไปใน ICA จนกระทั่งถึงตรงกลาง หลอดเลือดสมอง (MCA) หลังจากการอุด MCA 1.5 ชั่วโมง การไหลกลับถูกจำลองขึ้นโดยการถอดเส้นใยออก ในระหว่างขั้นตอนการผ่าตัด อุณหภูมิร่างกายของหนูทุกตัวอยู่ที่ 37.0 องศา
องค์การยา
หนูถูกสุ่มแยกออกเป็นหกกลุ่มโดยใช้ซอฟต์แวร์ SPSS เวอร์ชัน 22.0 ตามที่อธิบายไว้ (Jiang et al., 2014): กลุ่มปกติ (NOR); กลุ่มแบบจำลอง (MOD); กลุ่ม edaravone (ยาที่ให้ผลบวก, 6 มล./กก., EDI); กลุ่ม TGs (280 มก./กก., TGs); กลุ่ม PSs (280 มก./กก., PSs) และกลุ่ม OS (280 มก./กก., OSs) TGs, PSs และ OS ได้รับการจัดการวันละครั้งหลังจาก MCAO/R เป็นเวลา 14 วัน กลุ่ม NOR และ MOD ได้รับการรักษาด้วยน้ำเกลือ จำนวนสัตว์แสดงในตารางที่ 1
การวัดน้ำหนักและคะแนนการขาดดุลของระบบประสาทที่ปรับปรุงแล้ว (NSS)
น้ำหนักตัวถูกตรวจสอบในวันที่ 14 โดยใช้เครื่องชั่งดิจิตอล ADVENTURE™ (OHAUS, New Jersey, USA) มวลได้รับการประเมินตามวิธีที่อธิบายโดย FJ Wang (Wang et al., 2018) โดยมีการแก้ไขเล็กน้อย
2, 3, 5-การย้อมสีไตรเฟนิลเตตระโซเลียมคลอไรด์ (TTC)
วัดปริมาณกล้ามเนื้อตายตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Wang et al., 2015) โดยสังเขป สมองถูกแบ่งออกเป็นเจ็ดบล็อกโคโรนาลที่มีระยะห่างเท่าๆ กัน (2 มม.) ส่วนเหล่านี้ถูกย้อมด้วย 2 เปอร์เซ็นต์ TTC (Coolaber, Beijing, China) ที่อุณหภูมิ 37 องศา เป็นเวลา 15 นาที ปริมาตรเนื้อตาย ( เปอร์เซ็นต์ )=(ปริมาตรซีกโลกขาดเลือด ipsilateral −ปริมาตรซีกโลกขาดเลือดด้านตรงข้าม)/ปริมาตรซีกโลกขาดเลือดด้านตรงข้าม × 100
การย้อมสี Nissl และ H&E
หนูถูกดมยาสลบ จากนั้นสมองทั้งหมดจะถูกนำออกจากกะโหลกศีรษะอย่างรวดเร็วและแก้ไขโดยใช้พาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4 เปอร์เซ็นต์และฝังในขี้ผึ้งพาราฟิน และแบ่งเป็นชิ้นหนา 7 ไมโครเมตร ชิ้นส่วนถูกย้อมด้วย Nissl และ H&E ในการศึกษานี้ สุ่มจับฟิลด์สุ่ม 200 × 200 µm หกตัวอย่างในเนื้อเยื่อแต่ละชิ้นด้วยกล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง จำนวนร่างของ Nissl ถูกนับด้วยซอฟต์แวร์ IPP เวอร์ชัน 6.0 (Media Cybernetics, Bethesda, USA)
อีแวนส์ บลู แอสเซย์
หนูถูกฉีดด้วย EB 2 เปอร์เซ็นต์ (Coolaber Science & Technology Co., LTD) หลังจาก MCAO/R สองชั่วโมงต่อมา หนูได้รับการดมยาสลบ จากนั้นนำสมองทั้งหมดออกอย่างรวดเร็วและทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในอะซิโตน ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกวิเคราะห์ที่ 620 นาโนเมตรโดยเครื่องอ่านค่าการดูดกลืนแสง 800 TS (BioTek สหรัฐอเมริกา)
การวัดกิจกรรมของ Catalase (CAT), Superoxide Dismutase (SOD), Malondialdehyde (MDA) และ Glutathione Peroxidase (GSH-Px)
ตัวอย่างซีรัมทั้งหมดถูกหมุนเหวี่ยงที่ 4,000 × rpm เป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศา จากนั้นวิเคราะห์เพื่อตรวจหากิจกรรมของ MDA, CAT, SOD และ GSH-Px ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Jiangsu Meimian Industrial Co., จำกัด, ประเทศจีน).
การวิเคราะห์การซับแบบตะวันตก
เนื้อเยื่อสมอง (100 มก.) ที่เก็บได้จากหนูแต่ละตัวถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันและถูกสลายใน RIPA lysis buffer จากนั้นวิเคราะห์เพื่อตรวจหาความเข้มข้นของโปรตีนโดยใช้ชุด BCA (Beijing TransGen Biotech Co., Ltd.) โปรตีนทั้งหมดของเนื้อเยื่อถูกโหลดบนเจล SDS-PAGE 10 เปอร์เซ็นต์และถ่ายโอนไปยังเมมเบรนไนโตรเซลลูโลส เมมเบรนถูกปิดกั้นโดยใช้นมพร่องมันเนย 5 เปอร์เซ็นต์ จากนั้นบ่มข้ามคืนด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิที่อุณหภูมิ 4 องศา จากนั้นเมมเบรนจะถูกบ่มด้วยแอนติบอดีทุติยภูมิ การวิเคราะห์ Western blot วิเคราะห์โดยใช้ Kodak Digital Imaging System (5200 Multi, Tanon, China)
การวิเคราะห์อิมมูโนฟลูออเรสเซนต์
ทำการย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์สำหรับ CD31, a-SMA, ZO-1, claudin5, occludin, PDGFRb, SYN, PSD95, MAP-2, Nrf-2 และ Keap-1 แอนติบอดีปฐมภูมิต้าน Nrf-2, CD31, a-SMA, ZO-1, claudin5, occludin, PDGFRb, SYN, PSD95, MAP-2 และ Keap-1 ถูกเจือจางเป็น 1 :200 และ 1:100 ตามลำดับ แอนติบอดีทุติยภูมิของ Alexa Flur 488 mouse anti-rabbit IgG และ rhodamine (TRITC) แพะ anti-rabbit IgG ถูกเจือจางเป็น 1:200 นิวเคลียสถูกย้อมด้วย Hoechst 33258 รูปภาพถูกบันทึกโดยใช้ Vectra® Polaris™ Automated Quantitative Pathology Imaging System (PerkinElmer, USA) การแสดงออกของโปรตีนได้รับการวิเคราะห์โดยใช้ซอฟต์แวร์ IPP เวอร์ชัน 6.0
การวิเคราะห์ทางสถิติ
ข้อมูลทั้งหมดถูกอธิบายว่าเป็นค่าเฉลี่ย ± SD ซอฟต์แวร์ SPSS เวอร์ชัน 22.0 ถูกดำเนินการสำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ ใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวเมื่อเปรียบเทียบกลุ่มต่างๆ P < 0.05 ถือเป็นความแตกต่างทางสถิติ
ผลลัพธ์
TGs เพิ่มน้ำหนักตัวและลดความเสียหายของสมองในหนู MCAO/R
หลังจากรักษาด้วย TGs, PSs, Oss และ EDI เป็นเวลา 14 วัน น้ำหนักตัว การขาดดุลทางระบบประสาท และปริมาณกล้ามเนื้อตายของหนู I/R ได้รับการประเมิน ผลการวิจัยพบว่าน้ำหนักตัวในกลุ่ม MOD ลดลงอย่างมาก ในขณะที่น้ำหนักที่ลดลงในกลุ่ม TGs, PSs และ EDI เพิ่มขึ้น (รูปที่ 2A) คะแนนการขาดดุลของระบบประสาทลดลงอย่างมากโดย EDI และ TG (รูปที่ 2B) ชิ้นเนื้อสมองของหนูกลุ่ม NOR มีสีแดงเข้มและไม่มีกล้ามเนื้อตาย ในขณะที่หนูกลุ่ม MOD มีเนื้อสมองส่วน ipsilateral ขนาดใหญ่ หลังการรักษา TGs ปริมาณกล้ามเนื้อลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 2C, D) การรักษา PSs และ OS ไม่แสดงผลกระทบที่ชัดเจนต่อดัชนีข้างต้น ข้อมูลข้างต้นแสดงให้เห็นว่า TGs สามารถบรรเทาการบาดเจ็บทางสมองที่เกิดจาก I/R ได้อย่างชัดเจน แต่ PSs และ OS ไม่สามารถทำได้
TGs ช่วยแก้ไขความเสียหายทางจุลพยาธิวิทยาในหนู MCAO/R
ในการตรวจสอบผลกระทบบางอย่างของการรักษา TGs, PSs และ OS ต่อความเสียหายทางจุลพยาธิวิทยา การย้อมสี H&E ได้ทำขึ้นเพื่อเปิดเผยความเสียหายทางพยาธิวิทยา โครงสร้างทางจุลกายวิภาคของสมองในกลุ่ม NOR ถูกจัดเรียงอย่างสม่ำเสมอ การเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาในกลุ่ม TGs นั้นน้อยกว่าในกลุ่ม MOD อย่างไรก็ตาม กลุ่มการรักษา PSs และ OSs ไม่พบการแก้ไขการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาที่มีนัยสำคัญ (รูปที่ 3)
TGs ลดทอนการบาดเจ็บของเส้นประสาทหลังจาก I/Rinduced หนู
การย้อมสี Nissl แสดงให้เห็นการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาของเซลล์ประสาทในเงามัวของพื้นที่ขาดเลือด ดังแสดงในรูปที่ 4 เซลล์ประสาทปกติมีนิวเคลียสที่ชัดเจนและโครงสร้างที่สมบูรณ์ ในกลุ่ม MOD เซลล์ประสาทได้ขยายช่องว่างระหว่างเซลล์ ร่างกายที่สวยงามหายไป หดลง และเปรอะเปื้อนอย่างล้ำลึก อย่างไรก็ตาม การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้แทบไม่พบในกลุ่ม EDI, TG และ PS ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า TGs และ PSs สามารถลดทอนการบาดเจ็บของเซลล์ประสาทที่เกิดจากการขาดเลือด/การกลับคืนสู่เลือดได้อย่างมีนัยสำคัญ
TGs ลดทอน BBB Disruption หลังจาก I/RTreated Rats
การทดสอบ Evans blue เป็นวิธีการแบบดั้งเดิมสำหรับการวิจัยการเปลี่ยนแปลงของการซึมผ่านของ BBB ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า Evans blue เพิ่มขึ้นในกลุ่ม MOD ขณะที่ Evans blue ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในหนูที่ได้รับ TGs และ EDI นอกจากนี้ ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มบำบัด PSs และ OS (รูปที่ 5) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า TG สามารถลดทอนการหยุดชะงักของ BBB ได้อย่างมาก
TGs ส่งเสริมการกำเนิดหลอดเลือดในหนูที่ได้รับบาดเจ็บ I/R
การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้แสดงให้เห็นว่าการสร้างเส้นเลือดใหม่มีบทบาทสำคัญในการฟื้นฟูการทำงานของระบบประสาทและผลลัพธ์ในการพยากรณ์โรคหลังจากโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือดเฉียบพลัน (Yuen et al., 2015) ในการประเมินผลของ TGs, PSs และ OS ต่อการสร้างเส้นเลือดใหม่ CD31 และ a-SMA ถูกใช้เพื่อหาปริมาณของจำนวนเส้นเลือดฝอย การย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์แสดงให้เห็นว่ากลุ่ม MOD ทำให้การแสดงออกของ CD31 (รูปที่ 6A, B) และ aSMA (รูปที่ 6C, D) ลดลงอย่างน่าทึ่งในเงามัวของพื้นที่ขาดเลือดของหนู I/R เมื่อเปรียบเทียบกับหนูปกติ ผลลัพธ์นี้แสดงให้เห็นว่า I/R อาจทำให้หลอดเลือดเสียหายในเงามัวของเยื่อหุ้มสมองของซีกโลกที่ขาดเลือด อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วย TGs และ EDI เพิ่มความหนาแน่นของหลอดเลือดฝอย การสร้างเส้นเลือดใหม่ และการสร้างหลอดเลือดอย่างน่าทึ่งตามที่ระบุโดยการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ CD31 และ a-SMA ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า TG สามารถส่งเสริมการกำเนิดหลอดเลือดในเงามัวที่ขาดเลือดของหนู I/R แต่ PSs และ OS ไม่สามารถทำได้
TGs เพิ่มการแสดงออกของโปรตีนชุมทางแน่นในหนูที่ได้รับบาดเจ็บ I/R
การหยุดชะงักของ BBB สามารถเพิ่มปริมาณน้ำในสมองและเนื้อเยื่อบวม ซึ่งนำไปสู่การบาดเจ็บของสมอง โปรตีนที่แยกแน่นเป็นองค์ประกอบโครงสร้างที่สำคัญของ BBB (Tenreiro et al., 2016; Jiang et al., 2018) เพื่อทดสอบว่าการรักษา TGs, PSs และ OS หลังจากโรคหลอดเลือดสมองอาจส่งผลต่อความสมบูรณ์ของ BBB หรือไม่ การแสดงออกของ ZO-1, claudin-5 และ occludin ถูกดำเนินการโดยการวิเคราะห์อิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ ผลลัพธ์ระบุว่าการแสดงออกของ claudin-5, occludin และ ZO-1 ลดลงอย่างเห็นได้ชัดในกลุ่ม MOD อย่างไรก็ตาม, พวกเขาเพิ่มขึ้นอย่างมากหลังจาก 14 วันของการบริหาร. กลุ่ม PSs และ OSs ไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของโปรตีนเหล่านี้ (รูปที่ 7) ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่า TGs สามารถควบคุมการแสดงออกของโปรตีนที่เชื่อมต่อกันแน่นและรักษาความสมบูรณ์ของ BBB หลังจากได้รับบาดเจ็บจาก I/R
TGs เพิ่มการครอบคลุมของ Pericyte บนเส้นเลือดฝอยในหนูที่ได้รับบาดเจ็บจาก I/R
การครอบคลุม Pericyte บนเส้นเลือดฝอยมีบทบาทสำคัญในการรักษาความสมบูรณ์ของ BBB (Armulik et al., 2010; Daneman et al., 2010) ดังนั้นเราจึงทดสอบว่าความครอบคลุมของเพริไซตี้สามารถเพิ่มได้ด้วยการรักษา TGs, PSs และ OS หรือไม่ ผลการวิเคราะห์ความเข้มของอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์แสดงให้เห็นว่าทั้งการแสดงออกของ PDGFRb และ CD31 ลดลงอย่างมากในกลุ่ม MOD การบริหาร TGs ให้กับหนู I/R ฟื้นตัวอย่างมีนัยสำคัญหรือแม้กระทั่งเพิ่มความเข้มของการแสดงออกของ PDGFRb และ CD31 แต่ไม่พบความแตกต่างในกลุ่มบำบัด PSs และ OS (รูปที่ 8) ดังนั้น การรักษา TGs จึงสามารถเพิ่มความครอบคลุมของเพริไซท์ได้อย่างมีนัยสำคัญ การค้นพบนี้ยืนยันเพิ่มเติมว่า TG สามารถรักษาความสมบูรณ์ของ BBB หลังจาก I/R
TGs ส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงระบบประสาทในหนูที่ได้รับบาดเจ็บจาก I/R
จากการศึกษาจำนวนมาก การกำเนิดของระบบประสาทหลังจากเกิดโรคหลอดเลือดสมองสามารถปรับปรุงการฟื้นตัวของการทำงานได้อย่างมีนัยสำคัญ (Grefkes and Ward, 2014; Zhang et al., 2019) Synaptophysin (SYN), โปรตีน Postynaptic Density 95 (PSD-95) และโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ microtubule 2 (MAP-2) เป็นเครื่องหมายเพื่อตรวจสอบความเป็นพลาสติกของเซลล์ประสาทในเงามัวของเยื่อหุ้มสมองขาดเลือด ในการประเมินผลของการรักษา TGs, PSs และ OS ต่อการสร้างเซลล์ประสาทในหนูที่ได้รับบาดเจ็บ I/R ได้ทำการทำอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์และ Western blot สำหรับการแสดงออกของ SYN, PSD95 และ MAP-2 ดังที่แสดงในรูปที่ 9 และ 10 ระดับการแสดงออกของ SYN, PSD95 และ MAP-2 ในหนู I/R หลังจาก 14 วันของการกลับเป็นซ้ำลดลงเมื่อเทียบกับหนู NOR ในขณะที่การรักษา TGs และ PSs อาจเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ควบคุมระดับการแสดงออกของพวกเขา กลุ่ม OS ไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่ม MOD ข้อมูลระบุว่าการรักษา TGs และ PSs สามารถส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงของระบบประสาทได้อย่างมากหลังจากการบาดเจ็บ I/R
TGs Alter Nrf-2 และ Keap-1 นิพจน์ใน I/R Injured Rats
ความเครียดออกซิเดชันเป็นกลไกหลักที่ทำให้เกิดโรคในการบาดเจ็บ I/R (Ya et al., 2018; Yu et al., 2018) การศึกษายืนยันว่า Nrf-2 เป็นสารควบคุมหลักของการตอบสนองต่อการต้านอนุมูลอิสระ (Thompson et al., 2015) ในการตรวจสอบ Nrf-2 และ Keap-1 ซึ่งเป็นสื่อกลางในการตอบสนองออกซิเดชันหลังจากได้รับบาดเจ็บจาก I/R เราได้ประเมินการแสดงออกของไซโตพลาสซึมและการเคลื่อนย้ายทางนิวเคลียร์ของ Keap-1 ในขณะเดียวกัน การแสดงออกของ Nrf-2 ในเนื้อเยื่อสมองของหนูที่ได้รับบาดเจ็บ I/R ก็ถูกวิเคราะห์ด้วยเช่นกัน (รูปที่ 10 และ 11) จากการวิเคราะห์อิมมูโนฟลูออเรสเซนต์พบว่า Nrf-2 ส่วนใหญ่อยู่ในไซโตพลาสซึมในกลุ่ม NOR ในกลุ่ม TGs การแสดงออกของ Nrf-2 ในการโลคัลไลเซชันของไซโตพลาสซึมถูกลดการควบคุมลง แต่มีการควบคุมเพิ่มขึ้นในนิวเคลียส และสังเกตการแสดงออกของ Keap-1 ที่ลดลงด้วย ข้อมูลแสดงให้เห็นว่าการป้องกันสมองของ TG อาจเชื่อมโยงกับการปรับ Nrf-2 และ Keap-1
TGs ลดความเครียดออกซิเดชันของเนื้อเยื่อสมองในหนูที่ได้รับบาดเจ็บจาก I/R
เพื่อยืนยันผลการต้านอนุมูลอิสระของ TGs กิจกรรมของ SOD, CAT, GSH-Px และ MDA ได้รับการประเมินในหนูที่ได้รับบาดเจ็บ I/R ในรูปที่ 12 เนื้อหาของ MDA เพิ่มขึ้นอย่างชัดเจนในกลุ่ม MOD และในขณะเดียวกัน กิจกรรมของ SOD, CAT และ GSH-Px ก็ลดลงเมื่อเทียบกับหนูปกติ ในทางกลับกัน การรักษา TGs ทำให้เนื้อหาของ MDA ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ และเพิ่มกิจกรรมของ SOD, CAT และ GSH-Px ผลลัพธ์เหล่านี้ยืนยันเพิ่มเติมถึงฤทธิ์ต้านออกซิเดชั่นของ TGs
การอภิปราย
การศึกษาหลายชิ้นชี้ให้เห็นว่า TCM C. Deserticola มีกิจกรรมทางชีวภาพมากมาย เช่น เพิ่มความสามารถในการเรียนรู้ ความจำ และภูมิคุ้มกัน (Dong et al., 2007; Jiang and Tu, 2009; Wang et al., 2017; Xia et al., 2561). อย่างไรก็ตาม ส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ของ C. Deserticola สำหรับการป้องกันระบบประสาทยังไม่ชัดเจน งานปัจจุบันมีเป้าหมายเพื่อคัดกรองส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์จาก C. Deserticola กับโรคหลอดเลือดสมองตีบในแบบจำลอง MCAO/R สารสกัดสามชนิดจาก C. Deserticola (TGs, PSs และ OSs) ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินผลกระทบต่อหนู MCAO/R รวมถึงกลไกที่เป็นไปได้ โรคหลอดเลือดสมองเป็นโรคหลอดเลือดสมองเฉียบพลันที่พบบ่อย การศึกษาทางระบาดวิทยาแสดงให้เห็นว่าโรคหลอดเลือดสมองพบได้บ่อยในผู้ชายมากกว่าผู้หญิง (Sealy-Jefferson et al., 2012; Guzik and Bushnell, 2017)
ดังนั้น ในการทดลองของเรา จึงมีการนำหนูตัวผู้มาใช้ในการทดสอบ ผลลัพธ์ของเราพิสูจน์แล้วว่าการเหนี่ยวนำ I/R เร่งความเครียดออกซิเดชันและปริมาตรของกล้ามเนื้อ ทำลาย BBB และนำไปสู่การบาดเจ็บของเส้นประสาทและหลอดเลือดสมอง หลังจากการคัดกรองพบว่า TGs ลดปริมาณของกล้ามเนื้อหัวใจตายและส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงของระบบประสาทและการสร้างเส้นเลือดใหม่ ยิ่งไปกว่านั้น TGs ถูกสังเกตเพื่อรักษาความสมบูรณ์ของ BBB หลังจากได้รับบาดเจ็บจาก I/R ในทางตรงกันข้าม PSs และ OS ไม่สามารถบรรเทาการบาดเจ็บของ I/R ได้อย่างมีนัยสำคัญ ดังนั้น TG จึงถือเป็นส่วนออกฤทธิ์หลักของ C. Deserticola สำหรับการป้องกันระบบประสาท โดยอาจผ่านการส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงของระบบประสาท การสร้างเส้นเลือดใหม่ และความสมบูรณ์ของ BBB ผ่านการเปิดใช้งานวิถี Nrf2/Keap-1
หลักฐานที่เพิ่มขึ้นบ่งชี้ว่าการสร้างการไหลเวียนหลักประกันที่มีประสิทธิภาพมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการหลีกเลี่ยงการก่อตัวของเนื้อตายและเงามัวที่ขาดเลือด และเป็นการรักษาที่สำคัญในระยะเริ่มต้นของโรคหลอดเลือดสมองตีบ (ElAli, 2016; Iwasawa et al., 2016) การเพิ่มจำนวนของเซลล์บุผนังหลอดเลือดและเซลล์กล้ามเนื้อเรียบหลังจากกล้ามเนื้อขาดเลือดเป็นตัวกำหนดการสร้างการไหลเวียนของหลักประกัน
อย่างไรก็ตาม แบบจำลองภาวะขาดเลือดมีปรากฏการณ์ทั่วไป กล่าวคือ ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันมีอยู่อย่างกว้างขวางในจุลภาคของสมอง ข้อมูลการศึกษาแสดงให้เห็นว่าสารต้านอนุมูลอิสระจำนวนมากสามารถรบกวนการทำงานของ BBB และคุณสมบัติของการสร้างเส้นเลือดใหม่ (Mentor and Fisher, 2017) CD31 และ a-SMA เป็นเครื่องหมายของเซลล์บุผนังหลอดเลือดและเซลล์กล้ามเนื้อเรียบตามลำดับ (Saboor et al., 2016) ในการตรวจสอบผลของการเพิ่มจำนวนเซลล์ที่กล่าวถึงข้างต้นของสารสกัดจาก C. Deserticola เราตรวจสอบการแสดงออกของ CD31 และ a-SMA ในเงามัวของสมองขาดเลือดที่เป็นเนื้อเดียวกัน ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่า TG ได้ปรับปรุงการแสดงออกของ CD31 และ a-SMA อย่างโดดเด่น อย่างไรก็ตาม ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่ม PS และระบบปฏิบัติการ ดังนั้นเราจึงสรุปได้ว่า TGs อาจลดความเสียหายของสมองโดยการส่งเสริมการสร้างเส้นเลือดใหม่ผ่านการเพิ่มการแสดงออกของ CD31 และ a-SMA ในขณะที่ PSs และ OSs ไม่ได้ให้การป้องกันจากความเสียหายของสมอง ผลลัพธ์เหล่านี้ยืนยันเพิ่มเติมว่ามีเพียง TG เท่านั้นที่สามารถป้องกันการบาดเจ็บของ I/R ในสมองได้
โรคหลอดเลือดสมองตีบตันอาจเป็นผลมาจากภาวะสมองขาดเลือดที่เกิดจากความบกพร่องของสภาพเซลล์ประสาทหรือการเปลี่ยนแปลงของพื้นที่สมอง ผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมองส่วนใหญ่มีอาการขาดดุลทางระบบประสาท การกระตุ้นการสร้างเซลล์ประสาทเป็นกลยุทธ์ที่มีแนวโน้มสำหรับผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมองในการปรับปรุงการทำงานของระบบประสาท (Cramer and Chopp, 2000) การสร้างเซลล์ประสาทมีส่วนร่วมโดยตรงในการฟื้นฟูการทำงานของระบบประสาทหลังจากการบาดเจ็บของสมอง I/R (Zhang et al., 2019) การวิจัยก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า TG สามารถปรับปรุงอัตราการรอดชีวิตของเซลล์พีระมิดของฮิปโปแคมปัสและกระตุ้นการสร้างเซลล์ประสาท (Lian et al., 2017) ความเครียดออกซิเดชันทำให้เกิดการสูญเสียเซลล์ประสาทในระหว่างเกิดโรคต่างๆ เช่น พาร์กินสัน โรคหลอดเลือดสมอง เป็นต้น (Duan and Si, 2019; Singh et al., 2019) Nrf-2 ถ่ายทอดยีนจำนวนมากที่เกี่ยวข้องกับการป้องกันเซลล์ประสาทในบริเวณโปรโมเตอร์ ซึ่งส่วนใหญ่รวมถึง SOD, MDA, CAT และ glutamyl cysteine ligases เป็นต้น (Satoh et al., 2006) โปรตีน SYN, PSD-95 และ MAP-2 ซึ่งเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการก่อตัวของไซแนปติกและการส่งผ่านสื่อประสาท ถือเป็นเครื่องหมายของความเป็นพลาสติกของเซลล์ประสาทในการวิจัยบริเวณเงามัวที่ขาดเลือด หลังจากการศึกษา เราพบว่าการรักษาด้วย TGs สามารถเพิ่มการแสดงออกของ PSD95, SYN และ MAP ได้อย่างมีนัยสำคัญ-2 ซึ่งบ่งชี้ว่าการป้องกันสมองของ TGs มีความสัมพันธ์กับความเป็นพลาสติกของเซลล์ประสาทที่เพิ่มขึ้นในช่วง I/R อย่างไรก็ตาม น่าเสียดายที่ไม่มีความแตกต่างที่ชัดเจนระหว่าง PS และกลุ่มระบบปฏิบัติการ ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า TG สามารถเพิ่มความยืดหยุ่นของระบบประสาทหลังจากได้รับบาดเจ็บจาก I/R ในสมอง
การวิจัยเกี่ยวกับภาพในผู้ป่วยโรคหลอดเลือดสมองแสดงให้เห็นว่าความผิดปกติของ BBB สามารถพิจารณาได้ว่าเป็นคุณลักษณะที่โดดเด่นของสมองที่ขาดเลือด (Bang et al., 2007) TJs ซึ่งประกอบด้วยโปรตีนไซโตพลาสซึม โปรตีนทรานส์เมมเบรน และโมเลกุลยึดเกาะทางแยกระหว่างเซลล์บุผนังหลอดเลือดของหลอดเลือดฝอย มีความสำคัญมากในการรักษาความสมบูรณ์ของ BBB (Ye et al., 2019) ในบรรดาโปรตีนเหล่านี้ ZO-1, claudin-5 และ occludin เป็นโปรตีนที่สำคัญที่สุดใน TJ หลักฐานที่เพิ่มขึ้นบ่งชี้ว่าการซึมผ่านที่เพิ่มขึ้นของ BBB ที่เกิดจากภาวะขาดเลือดโดยทั่วไปมีความสัมพันธ์กับการเปลี่ยนแปลงของ ZO-1, claudin-5 และ occludin (Cao et al., 2016a; Page et al., 2016; Yu et al., 2017; Liu et al., 2018)
ในงานนี้ ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าแม้ว่า TGs จะสามารถเพิ่มการแสดงออกของ ZO-1, claudin-5 และโปรตีน occludin ในเนื้อเยื่อสมองที่เกิดจาก MCAO ได้อย่างมีนัยสำคัญ แต่ทั้ง PSs และ OSs ไม่ได้ทำเช่นนั้น BBB ประกอบด้วยเซลล์บุผนังหลอดเลือดในสมองและมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับเพอริไซตี (Nyul-Toth et al., 2016) Pericytes มีความสำคัญต่อความสมบูรณ์ของ BBB (Bell et al., 2010) โรคหลอดเลือดสมองขาดเลือดกระตุ้นให้เซลล์เยื่อบุโพรงมดลูกตายและหลุดออกจากเซลล์บุผนังหลอดเลือดในระยะเฉียบพลัน ซึ่งทำให้หลอดเลือดขนาดเล็กไม่เสถียรและเปลี่ยนแปลงคุณสมบัติของ BBB (Zechariah et al., 2013) ข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่า TG สามารถเพิ่มการครอบคลุมของเพริไซท์ในหลอดเลือดฝอย และเพิ่มระดับการแสดงออกของ ZO-1, claudin-5 และ occludin ปรากฏการณ์เหล่านี้พิสูจน์ให้เห็นว่า TG สามารถปกป้องความสมบูรณ์ของ BBB ได้อย่างมีประสิทธิภาพหลังจากการบาดเจ็บของ I/R ในสมอง โดยสรุป TG อาจทำให้การบาดเจ็บของสมองลดลงได้หลายวิธี เช่น การส่งเสริมการสร้างเส้นเลือดใหม่ การปรับปรุงความเป็นพลาสติกของเซลล์ประสาท และรักษาความสมบูรณ์ของ BBB
จากนั้นเราตรวจสอบเส้นทางการส่งสัญญาณเพื่อสำรวจกลไกพื้นฐานในการปกป้องสมองของ TG กระบวนการของการบาดเจ็บ I/R มีหลายปัจจัย ดังนั้นกลไกหลายอย่างจึงเกี่ยวข้องกับการเกิดโรค ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันเป็นปัจจัยเสี่ยงพื้นฐานที่ทำให้เกิดการบาดเจ็บของสมองที่เกิดจาก I/R (สุดา et al., 2013) เช่น ความเสียหายของโครงสร้าง BBB ความผิดปกติของหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือด และการบาดเจ็บของเส้นประสาทขาดเลือดซ้ำเติม (Xiong et al., 2015; Caglayan et al., 2019; Priestley et al., 2019)
ดังนั้นความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันจึงกลายเป็นเป้าหมายการรักษาที่น่าสนใจในการบาดเจ็บของสมองที่เกิดจาก I/R เอนไซม์ระยะที่ 2 ซึ่งอาศัยปัจจัยนิวเคลียร์ E2-ปัจจัยที่เกี่ยวข้อง-2 (Nrf-2) ถือเป็นวิธีการสำคัญที่เซลล์ประสาทป้องกันตัวเองจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน (ซูซูกิและยามาโมโตะ , 2558; Ya et al., 2561). หลักฐานที่เพิ่มขึ้นบ่งชี้ว่าการเปิดใช้งาน Nrf-2 ระหว่าง I/R เป็นเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้สำหรับการป้องกันระบบประสาท (Ding et al., 2015; Zhang R. et al., 2017) Nrf-2 เป็นตัวควบคุมที่สำคัญของการป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระภายในร่างกาย โดยทำหน้าที่ไกล่เกลี่ยระดับของ heme oxygenase 1 (H2O-1) และเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระอื่นๆ เช่น NAD(P)H quinone oxidoreductase 1 (NQO1) SOD, CAT, GSH และ MDA (Siow et al., 2007; Ding et al., 2014) นอกจากนี้ Nrf-2 ยังมีบทบาทควบคุมที่สำคัญในการสร้างเส้นเลือดใหม่ การศึกษาปัจจุบันแสดงให้เห็นว่า Nrf-2 สามารถเพิ่มประสิทธิภาพและเปิดใช้งานได้อย่างมีนัยสำคัญในกระบวนการพัฒนาของหลอดเลือด (Wei et al., 2013)
ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (Jiang and Tu, 2009) สาร TG ประกอบด้วยสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจำนวนมาก เช่น echinacoside, tubuloside A, acteoside, isoacteoside และ 2'-acetylacteoside และบางส่วนแสดงการทำงานของการป้องกันระบบประสาทหลังจากการบาดเจ็บของ I/R ในสมอง ( Peng et al., 2016) Echinacoside มีผลทางเภสัชวิทยามากมาย เช่น การต้านออกซิเดชัน การต่อต้านการชราภาพ การป้องกันระบบประสาท การป้องกันการอักเสบ การส่งเสริมการเกิด cicatrization การป้องกันตับ การส่งเสริมการสร้างกระดูก และกิจกรรมต่อต้านเนื้องอก (Yu et al., 2016; Li et al., 2018; Zhang Y. et al., 2018; Ji et al., 2019; Xu et al., 2019)
เมื่อเร็ว ๆ นี้ echinacoside ได้รับการระบุว่าเป็นสารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพในระบบประสาทส่วนกลาง (Lu et al., 2016) Echinacoside สามารถลดเนื้อหา MDA และปรับปรุงกิจกรรมของ SOD และ GSHPx ในการบาดเจ็บของสมองขาดเลือด และการวิเคราะห์ระดับโมเลกุลเชื่อมต่อแสดงว่า echinacoside อาจจับกับ Keap-1 ซึ่งนำไปสู่การเคลื่อนย้ายนิวเคลียร์ Nrf-2 (Li et al., 2018). การศึกษา Xia แสดงให้เห็นว่าแอคทีโอไซด์สามารถลดปริมาณกล้ามเนื้อและปริมาณน้ำในสมองเพื่อปรับปรุงการขาดดุลทางระบบประสาทในหนู MCAO/R โดยการลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน (Xia et al., 2018) การศึกษาอื่นๆ แสดงให้เห็นว่า isoacteoside สามารถเพิ่มกิจกรรมของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระในเซลล์, SOD และ CAT ในเซลล์ V2- ที่ผ่านการบำบัดด้วย H2O79-4 (Chae et al., 2005) จากรายงานข้างต้นของสารประกอบออกฤทธิ์ที่มีอยู่ใน TGs มีความเป็นไปได้ที่จะสรุปได้ว่า TGs สามารถป้องกันโรคหลอดเลือดสมองตีบตันได้ผ่านทางเส้นทางการต้านออกซิเดชัน
ฉันรายงานผลการป้องกันระบบประสาทของฟีนิลเลทานอยด์ไกลโคไซด์ (PhGs) ต่อ H2O2-ที่เหนี่ยวนำให้เกิดอะพอพโทซิสบนเซลล์ PC12 ผ่านทางวิถี Nrf2/ARE (Li et al., 2018) PhGs เหล่านี้ถูกยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญโดยการกระตุ้นการเคลื่อนย้ายนิวเคลียส Nrf2 และการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของ H2O-1, NQO1, หน่วยย่อยตัวเร่งปฏิกิริยากลูตาเมต-ซิสเตอีนลิเกส (GCLC) และหน่วยย่อยตัวดัดแปลงกลูตาเมต-ซิสเตอีนลิเกส (GCLM) (Li et al., 2018 ; Gong et al., 2019).
ดังนั้น การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าวิถี Nrf-2/ARE มีบทบาทสำคัญในผลการป้องกันเซลล์ประสาทที่มี PhGs เป็นสื่อกลาง ในทำนองเดียวกัน ในการศึกษานี้ เราพบว่า TG สามารถลดระดับของ MDA และเพิ่มระดับของ SOD, CAT และ GSH-Px ในหนู I/R ในขณะเดียวกัน TG สามารถเพิ่มการควบคุมการแสดงออกของ Nrf2 ในนิวเคลียส ลดการควบคุมการแสดงออกที่เกี่ยวข้องในไซโตพลาสซึม และลดการแสดงออกของ Keap-1 ลงอย่างมาก ดังนั้น เส้นทาง Nrf-2/Keap-1 จึงอาจเกี่ยวข้องกับผลกระทบของการป้องกันระบบประสาทที่เป็นสื่อกลางของ TG การตรวจสอบความถูกต้องเพิ่มเติมของเส้นทางนี้จะดำเนินการในการเพาะเลี้ยงเซลล์ในหลอดทดลองด้วยแบบจำลองการบาดเจ็บจากการขาดออกซิเจน-กลูโคส/การเติมออกซิเจนซ้ำในอนาคต ยิ่งไปกว่านั้น สารสกัด C. Deserticola ยังได้รับการจัดการในการศึกษาของเราเป็นเวลา 14 วันอย่างต่อเนื่อง เนื่องจากการสร้างเซลล์ประสาทในผู้ใหญ่จะส่งผลต่อการตีความผลการป้องกันระบบประสาทในช่วง 14 วันของการกลับคืนสู่สภาพเดิม จึงไม่สามารถแยกการสร้างเซลล์ประสาทออกจากการออกแบบการทดลองปัจจุบันของเราในการสำรวจผลการป้องกันระบบประสาทของ CT นี่คือข้อจำกัดของการวิจัยของเรา
โดยสรุปแล้ว TGs จาก C. Deserticola นั้นสามารถเพิ่มการสร้างเส้นเลือดใหม่และการสร้างเซลล์ประสาท รวมทั้งรักษาความสมบูรณ์ของ BBB ในหนูที่บาดเจ็บ I/R แต่ไม่ใช่ PSs และ OS ผลกระทบอาจใช้สื่อกลางโดยการเปิดใช้งานเส้นทาง Nrf-2/Keap-1
คำชี้แจงความพร้อมใช้งานของข้อมูล
ข้อมูลดิบที่สนับสนุนข้อสรุปของบทความนี้จะมีให้โดยผู้เขียนโดยไม่มีการสงวนไว้สำหรับนักวิจัยที่มีคุณสมบัติเหมาะสม
คำแถลงด้านจริยธรรม
งานนี้ดำเนินการตามแนวทางสำหรับการทดลองในสัตว์ของมหาวิทยาลัยปักกิ่ง โปรโตคอลการศึกษาได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์ประจำสถาบันที่ศูนย์วิทยาศาสตร์สุขภาพมหาวิทยาลัยปักกิ่ง (LA2019123)
ผลงานของผู้เขียน
YJ, KZ และ PT ออกแบบการวิจัย FW ได้ทำการวิจัย FW และ RL วิเคราะห์ข้อมูล FW, RL และ JC เขียนต้นฉบับและการวิเคราะห์ HPLC JC, KZ, YJ และ PT แก้ไขต้นฉบับ
เงินทุน
การศึกษานี้ได้รับการสนับสนุนโดย National Key Research and Development Project (2017YFC1702400, 2019YFC1711000), National Natural Science Foundation of China (81773932) และ National Key Technology R&D Program "New Drug Innovation" of China (2018ZX09711001-008-003 ).
อ้างอิง
Alluri, H. , Anasooya Shaji, C. , Davis, ML และ Tarakan, B. (2015) การขาดออกซิเจนกลูโคสและการให้ออกซิเจนใหม่เป็นแบบจำลองการบาดเจ็บในหลอดทดลองที่ขาดเลือดไปกลับเพื่อศึกษาความผิดปกติของสิ่งกีดขวางเลือดและสมอง เจ วิส ประสบการณ์ 99, e52699. ดอย: 10.3791/52699
Armulik, A., Genove, G., Mae, M., Nisancioglu, MH, Wallgard, E., Niaudet, C., et al. (2553). Pericytes ควบคุมสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมอง ธรรมชาติ 468 (7323), 557–561. ดอย: 10.1038/nature09522
Bang, OY, Buck, BH, Saver, JL, Alger, JR, Yoon, SR, Starkman, S. และอื่นๆ (2550). การทำนายการเปลี่ยนแปลงของเลือดออกหลังการบำบัดด้วยคลื่นแม่เหล็กไฟฟ้า T2*-permeability magnetic resonance แอน เซลล์ประสาท 62 (2), 170– 176. ดอย: 10.1002/ana.21174
Bell, RD, Winkler, EA, Sagare, AP, Singh, I., LaRue, B., Deane, R., และคณะ (2553). Pericytes ควบคุมการทำงานของระบบประสาทและหลอดเลือดที่สำคัญและฟีโนไทป์ของเซลล์ประสาทในสมองของผู้ใหญ่และในช่วงอายุของสมอง เซลล์ประสาท 68 (3), 409–427. ดอย: 10.1016/j.neuron.2010.09.043
Caglayan, B., Kilic, E., Dalay, A., Altunay, S., Tuzcu, M., Erten, F., และคณะ (2562). Allyl isothiocyanate ลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและการอักเสบโดยการปรับวิถี Nrf2/HO-1 และ NF-kappaB ในการบาดเจ็บที่สมองในหนู โมล ไบโอล ตัวแทน 46 (1), 241–250 ดอย: 10.1007/วินาที11033-018-4465-4
Cao, G., Jiang, N., Hu, Y., Zhang, Y., Wang, G., Yin, M., et al. (2559ก). Ruscogenin ลดทอนการทำงานของสิ่งกีดขวางเลือดและสมองที่เกิดจากสมองขาดเลือดโดยการยับยั้งการกระตุ้น TXNIP / NLRP3 inflammasome และเส้นทาง MAPK ภายใน เจ โมล วิทย์ 17(9), 1–17. ดอย: 10.3390/ijms17091418
Cao, G., Ye, X., Xu, Y., Yin, M., Chen, H., Kou, J., et al. (2559ข). การฉีดผง YiQiFuMai ช่วยแก้ไขความผิดปกติของสิ่งกีดขวางของเลือดและสมองและอาการบวมน้ำของสมองหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมองขาดเลือดและกลับคืนสู่เลือดโฟกัสในหนู ยาเสพติด การพัฒนา เธอ 10, 315–325. ดอย: 10.2147/dddt.S96818
Chae, S., Kim, JS, Kang, KA, Bu, HD, Lee, Y., Seo, YR และอื่นๆ (2548). ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของ isoacteoside จาก Clerodendron trichotomum เจทอกซิคอล. สิ่งแวดล้อม. สุขภาพ ก 68 (5), 389–400. ดอย: 10.1080/15287390590900750
Cheon, SY, Cho, KJ, Kim, SY, Kam, EH, Lee, JE และ Koo, BN (2016) การปิดกั้นของไคเนสที่ควบคุมสัญญาณ apoptosis 1 ลดทอนการทำงานของเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีนเนส 9 ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดในสมองและการตายของเซลล์ที่ตามมาในเซลล์ประสาทหลังจากได้รับบาดเจ็บจากการขาดเลือด ด้านหน้า. เซลล์ประสาท. 10, 213. ดอย: 10.3389/fncel.2016.00213
Chi, H. , Chang, HY และ Sang, TK (2018) กลไกการตายของเซลล์ประสาทในโรคที่เกิดจากความเสื่อมของระบบประสาทที่สำคัญ ภายใน เจ โมล วิทย์ 19 (10), 1–18. ดอย: 10.3390/ ijms19103082
Crack, PJ, Taylor, JM, Flentjar, NJ, de Haan, J., Hertzog, P., Iannello, RC และอื่นๆ (2544). ขนาดของกล้ามเนื้อเพิ่มขึ้นและการตายของเซลล์ที่เลวร้ายยิ่งขึ้นในสมองของหนูที่น่าพิศวงของกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส-1 (Gpx-1) เพื่อตอบสนองต่อการขาดเลือด/การบาดเจ็บที่กลับเป็นซ้ำ เจ. ประสาทเคมี. 78(6), 1389–1399. ดอย: 10.1046/ญ.1471- 4159.2001.00535.x
แคร็ก, PJ, Taylor, JM, Ali, U., Mansell, A. และ Hertzog, PJ (2006) การมีส่วนร่วมที่เป็นไปได้ของ NF-kappaB ในการตายของเซลล์ประสาทในหนูที่น่าพิศวงของกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส-1 เพื่อตอบสนองต่อการบาดเจ็บที่ขาดเลือดกลับคืน โรคหลอดเลือดสมอง 37 (6), 1533–1538. ดอย: 10.1161/01.Str.0000221708.17159.64
Cramer, SC และ Chopp, M. (2000) การฟื้นตัวเป็นการสรุปถึงความเป็นมา เทรนด์ Neurosci 23(6), 265–271. ดอย: 10.1016/วินาที0166-2236(00)01562-9
Daneman, R., Zhou, L., Kebede, AA และ Barres, BA (2010) Pericytes เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมองระหว่างการกำเนิดตัวอ่อน ธรรมชาติ 468 (7323), 562–566. ดอย: 10.1038/nature09513
Ding, Y., Chen, M., Wang, M., Wang, M., Zhang, T., Park, J., et al. (2557). การป้องกันระบบประสาทโดยกรด acetyl-11-keto-beta-Boswellic ในการบาดเจ็บของสมองขาดเลือด เกี่ยวข้องกับวิถีการป้องกัน Nrf2/HO-1 วิทย์ ตัวแทน 4, 7002. ดอย: 10.1038/srep07002
Ding, Y. , Chen, M. , Wang, M. , Li, Y. และ Wen, A. (2015) หลังการรักษาด้วย 11- keto-beta-boswellic acid ช่วยแก้ไขการบาดเจ็บของสมองขาดเลือดและเลือดกลับคืน: Nrf2/HO{6}} pathway เป็นกลไกที่เป็นไปได้ โมล นิวโรบิล 52 (3), 1430–1439. ดอย: 10.1007/วินาที12035-014-8929-9
Dong, Q. , Yao, J. , Fang, JN และ Ding, K. (2007) ลักษณะโครงสร้างและกิจกรรมทางภูมิคุ้มกันของพอลิแซ็กคาไรด์ที่สกัดได้ด้วยน้ำเย็น 2 ชนิดจาก Cistanche Deserticola YC Ma คาร์โบไฮเดรต ความละเอียด 342 (10), 1343–1349. ดอย: 10.1016/j.carres.2007.03.017
Donnan, GA, Fisher, M., Macleod, M. และ Davis, SM (2008) จังหวะ. มีดหมอ 371 (9624), 1612–1623. ดอย: 10.1016/วินาที0140-6736(08)60694-7
Duan, Q. และ Si, E. (2019). MicroRNA-25 ซ้ำเติม Abeta1-42-ทำให้เกิดการบาดเจ็บของเซลล์ประสาทฮิปโปแคมปัสในโรคอัลไซเมอร์โดยลดการควบคุม KLF2 ผ่านทางเส้นทางการส่งสัญญาณ Nrf2 ในแบบจำลองเมาส์ เจ เซลล์ ไบโอเคม. 120 (9), 15891–15905. ดอย: 10.1002/jcb.28861
เอลอาลี, อ. (2559). นัยของการส่งสัญญาณหน่วยประสาทและหลอดเลือดในการควบคุมความสมดุลระหว่างการบาดเจ็บและการซ่อมแซมภายหลังจากโรคหลอดเลือดสมองตีบ การฟื้นฟูระบบประสาท ความละเอียด 11(6), 914–915. ดอย: 10.4103/1673-5374.184485
แกร์, BP (2018). ยาสมุนไพรในโรคหลอดเลือดสมองตีบ: ความท้าทายและโอกาส คาง. เจ อินทิเกรต แพทย์ 24(4), 243–246. ดอย: 10.1007/วินาที11655-018-2828-2
Gao, Y., Jiang, Y., Dai, F., Han, Z., Liu, H., Bao, Z. และอื่นๆ (2558). การศึกษาส่วนประกอบของยาระบายใน Cistanche Deserticola YC Ma. ม็อด คาง. แพทย์ 17 (04), 19–22 บวก 26. ดอย: 10.13313/j.issn.1673-4890.2015.4.003
Gong, X., Xu, Y., Ren, K., Bai, X., Zhang, C. และ Li, M. (2019) Phenylethanoid glycosides จาก Paraboea martini ปกป้องเซลล์ pheochromocytoma ของหนู (PC12) จากการบาดเจ็บของเซลล์ที่เกิดจากไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ ชีววิทยาศาสตร์ เทคโนโลยีชีวภาพ ชีวเคมี 83(12), 2202–2212. ดอย: 10.1080/09168451.2019.1654359
Grefkes, C. และ Ward, NS (2014) การปรับโครงสร้างเยื่อหุ้มสมองหลังเกิดโรคหลอดเลือดสมอง: มากน้อยเพียงใดและมีประโยชน์อย่างไร? นักประสาทวิทยาศาสตร์ 20 (1), 56–70. ดอย: 10.1177/ 1073858413491147
Guzik, A. และ Bushnell, C. (2017) ระบาดวิทยาโรคหลอดเลือดสมองและการจัดการปัจจัยเสี่ยง Continuum (Minneap Minn) 23 (1, โรคหลอดเลือดสมอง), 15– 39. doi: 10.1212/con.0000000000000416
Hu, S., Wu, Y., Zhao, B., Hu, H., Zhu, B., Sun, Z., et al. (2561). Panax notoginseng Saponins ปกป้องเซลล์บุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กในสมองจากการกีดกันออกซิเจน-กลูโคส/ความผิดปกติของสิ่งกีดขวางที่เกิดจากการกลับคืนสู่เลือดผ่านการกระตุ้นเส้นทางการส่งสัญญาณสารต้านอนุมูลอิสระ PI3K/Akt/Nrf2 โมเลกุล 23 (11), 1–17. ดอย: 10.3390/molecules23112781
Iwasawa, E. , Ichijo, M. , Ishibashi, S. และ Yokota, T. (2016) การพัฒนาอย่างเฉียบพลันของการไหลเวียนของหลักประกันและแนวโน้มการรักษาในโรคหลอดเลือดสมองตีบ การฟื้นฟูระบบประสาท ความละเอียด 11(3), 368–371. ดอย: 10.4103/1673-5374.179033
Ji, S., Li, S., Zhao, X., Kang, N., Cao, K., Zhu, Y., et al. (2562). บทบาทในการป้องกันฟีนิลเอธานอยด์ไกลโคไซด์, Torenoside B และ Savatiside A ในโรคอัลไซเมอร์ ประสบการณ์ เธอ แพทย์ 17(5), 3755–3767. ดอย: 10.3892/item.2019.7355
Jiang, Y. และ Tu, PF (2009) การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีในสายพันธุ์ Cistanche เจ. โครมาโตกร์. 1216 (11), 1970–1979. ดอย: 10.1016/ j.chroma.2008.07.031
Jiang, T., Yu, JT, Zhu, XC, Wang, HF, Tan, MS, Cao, L. และอื่นๆ (2557). การปรับสภาพล่วงหน้าของเมตฟอร์มินแบบเฉียบพลันช่วยให้มีการป้องกันระบบประสาทต่อการขาดเลือดในสมองโฟกัสโดยการเปิดใช้งานล่วงหน้าของ autophagy ที่ขึ้นกับ AMPK บร. เจ. ฟาร์มาคอล. 171 (13), 3146–3157. ดอย: 10.1111/bph.12655
Jiang, X., Andjelkovic, AV, Zhu, L., Yang, T., Bennett, MVL, Chen, J. และคณะ (2561). ความผิดปกติของสิ่งกีดขวางเลือดและสมองและการฟื้นตัวหลังจากโรคหลอดเลือดสมองตีบ โปรแกรม นิวโรบิล 163-164, 144–171. ดอย: 10.1016/j.pneurobio.2017.10.001
Jung, JE, Kim, GS, Chen, H., Maier, CM, Narasimhan, P., Song, YS และคณะ (2553). การไหลเวียนกลับและความผิดปกติของหลอดเลือดในโรคหลอดเลือดสมอง: จากกลไกพื้นฐานไปจนถึงกลยุทธ์ที่เป็นไปได้สำหรับการป้องกันระบบประสาท โมล นิวโรบิล 41 (2-3), 172–179. ดอย: 10.1007/วินาที12035-010-8102-z
Kilkenny, C., Browne, WJ, Cuthill, IC, Emerson, M. และ Altman, DG (2010) การปรับปรุงการรายงานการวิจัยทางชีววิทยาศาสตร์: แนวทาง ARRIVE สำหรับการรายงานการวิจัยในสัตว์ PLoS ไบโอล 8(6),e1000412. ดอย: 10.1371/วารสาร. bio.1000412
โก, KM และ Leung, HY (2007). การเพิ่มความสามารถในการสร้าง ATP ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ และกิจกรรมภูมิคุ้มกันโดยสมุนไพรจีนหยางและหยิน คาง. แพทย์ 2, 3. ดอย: 10.1186/1749-8546-2-3
Kondo, T., Reaume, AG, Huang, TT, Carlson, E., Murakami, K., Chen, SF และอื่นๆ (2540). การลดลงของกิจกรรม CuZn-superoxide dismutase ทำให้การบาดเจ็บของเซลล์ประสาทรุนแรงขึ้นและการก่อตัวของอาการบวมน้ำหลังจากขาดเลือดในสมองโฟกัสชั่วคราว เจ. ประสาท. 17(11), 4180–4189. ดอย: 10.1523/JNEUROSCI.17-11-04180
Lee, M., Saver, JL, Alger, JR, Hao, Q., Starkman, S., Ali, LK และอื่นๆ (2555). ความผิดปกติในการซึมผ่านของสิ่งกีดขวางของเลือดและสมองในจังหวะขาดเลือดไหลเวียนหลัง: ความถี่และความสัมพันธ์กับการเปลี่ยนแปลงของเลือดออก เจ. นิวรอล. วิทย์ 313 (1-2), 142–146. ดอย: 10.1016/j.jns.2011.08.048
Li, N., Wang, J., Ma, J., Gu, Z., Jiang, C., Yu, L., et al. (2558). ผลการป้องกันระบบประสาทของการรักษาด้วยสมุนไพรทางไกลต่อผู้ป่วยโรคอัลไซเมอร์ระดับปานกลาง Evid-Based Complement Altern. แพทย์ 2015, 103985. ดอย: 10.1155/2015/103985
Li, M., Xu, T., Zhou, F., Wang, M., Song, H., Xiao, X., et al. (2561). ผลการป้องกันระบบประสาทของ phenylethanoid glycosides สี่ตัวต่อการตายแบบอะพอพโทซิสที่เหนี่ยวนำให้เกิด H(2)O(2) บนเซลล์ PC12 ผ่านทางวิถี Nrf2/ARE ภายใน เจ โมล วิทย์ 19 (4), 1–17. ดอย: 10.3390/ijms19041135
Li, R. , Zhao, M. , Tu, P. และ Jiang, Y. (2019) การวิเคราะห์ฟีนิลเอธานอยด์ไกลโคไซด์ 5 ชนิดพร้อมกันใน Cistanches Herba โดยใช้การวิเคราะห์เชิงปริมาณขององค์ประกอบหลายส่วนด้วยเครื่องหมายเดียว เจ ชิน ฟาร์มา วิทย์ 28 (08), 537–546. ดอย: 10.5246/jcps.2019.08.051
Lian, J., Wang, L., Zhao, F., Lin, S., Yan, X., Jia, J. และคณะ (2560). ผลของไกลโคไซด์ของซิสแทนช์ต่อความเป็นพลาสติกทางสัณฐานวิทยาซินแนปติกในหนูเมาส์ที่เร่งการชราภาพ J. Baotou Medl Co. 33 (08), 78–80. ดอย: 10.16833/j.cnki.jbmc.2017.08.036
Liu, Y. , Wang, D. , Wang, H. , Qu, Y. , Xiao, X. และ Zhu, Y. (2014) ผลการป้องกันของ HET0016 ต่ออาการบวมน้ำของสมองและความผิดปกติของสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมองหลังภาวะสมองขาดเลือด/การกลับคืนของเลือดในสมอง ความละเอียดของสมอง 1544, 45–53. ดอย: 10.1016/ j.brainres.2013.11.031
Liu, P., Zhang, R., Liu, D., Wang, J., Yuan, C., Zhao, X., และคณะ (2561). การตรวจสอบระยะเวลาของการซึมผ่านของสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมองและการเปลี่ยนแปลงของโปรตีนบริเวณรอยต่อแน่นในแบบจำลองหนูที่มีภาวะขาดเลือดโฟกัสถาวร เจ. ฟิสิโอล. วิทย์ 68 (2), 121– 127. ดอย: 10.1007/วินาที12576-016-0516-6
Liu, S. , Chang, L. และ Wei, C. (2019) เส้นทางโซนิคเม่นเป็นสื่อกลางในการป้องกันแคปซูล Tongxinluo จากการหยุดชะงักของสิ่งกีดขวางเลือดและสมองหลังจากโรคหลอดเลือดสมองตีบในหนู เบสิคคลินิค. ฟาร์มาคอล สารพิษ 124 (6), 660– 669. ดอย: 10.1111/bcpt.13186
Lu, CW, Lin, TY, Huang, SK และ Wang, SJ (2016) Echinacoside ยับยั้งการปล่อยกลูตาเมตโดยการยับยั้งการป้อน Ca(2 บวก ) ที่ขึ้นกับแรงดันไฟฟ้าและโปรตีนไคเนส C ในขั้วประสาทสมองของหนู ภายใน เจ โมล วิทย์ 17(7), 1–13. ดอย: 10.3390/ijms17071006
McGrath, JC, Drummond, GB, McLachlan, EM, Kilkenny, C. และ Wainwright, CL (2010) แนวทางการรายงานการทดลองที่เกี่ยวข้องกับสัตว์: แนวทาง ARRIVE บร. เจ. ฟาร์มาคอล. 160 (7), 1573–1576. ดอย: 10.1111/ญ.1476-5381.2010.00873.x
Mentor, S. และ Fisher, D. (2017) สารต้านอนุมูลอิสระที่ก้าวร้าวลดความเครียดบั่นทอนการสร้างเส้นเลือดใหม่ของเซลล์บุผนังหลอดเลือดในสมองและการทำงานของสิ่งกีดขวางเลือดและสมอง สกุลเงิน Neurovasc ความละเอียด 14(1), 71–81. ดอย: 10.2174/1567202613666161129113950
Moretti, A., Ferrari, F. และ Villa, RF (2015) การป้องกันระบบประสาทสำหรับโรคหลอดเลือดสมองตีบ: สถานะปัจจุบันและความท้าทาย ฟาร์มาคอล เธอ 146, 23–34. ดอย: 10.1016/j.pharmthera.2014.09.003
Nyul-Toth, A., Suciu, M., Molnar, J., Fazakas, C., Hasko, J., Herman, H., และคณะ (2559). ความแตกต่างในโครงสร้างโมเลกุลของสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมองในเปลือกสมองและสารสีขาว: การศึกษาในซิลิโก ในหลอดทดลอง และนอกร่างกาย เช้า. เจ. ฟิสิโอล. วงเวียนหัวใจ ฟิสิโอล 310 (11), H1702–H1714. ดอย: 10.1152/ajpheart.00774.2015
Ovbiagele, B. และ Nguyen-Huynh, MN (2011) ระบาดวิทยาโรคหลอดเลือดสมอง: การพัฒนาความเข้าใจของเราเกี่ยวกับกลไกของโรคและการรักษา การบำบัดด้วยระบบประสาท 8 (3), 319–329. ดอย: 10.1007/วินาที13311-011-0053-1
Page, S., Munsell, A. และ Al-Ahmad, AJ (2016) ภาวะสมองขาดออกซิเจน/ขาดเลือดเลือกขัดขวางคอมเพล็กซ์ที่แยกแน่นในเซลล์บุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กที่ได้จากสเต็มเซลล์ในสมองมนุษย์ Fluids Barriers CNS 13 (1), 16. ดอย: 10.1186/ วินาที12987-016-0042-1
Peng, F. , Chen, J. , Wang, X. , Xu, C. , Liu, T. และ Xu, R. (2016) การเปลี่ยนแปลงของระดับฟีนิลเอธานอยด์ไกลโคไซด์ ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ และลักษณะคุณภาพอื่นๆ ในชิ้นซิสแทนช์ เดสริโคลา โดยกระบวนการอบไอน้ำ เคมี ฟาร์มา วัว. (โตเกียว) 64 (7), 1024–1030. ดอย: 10.1248/CPB.c16-00033
Priestley, JRC, Fink, KE, McCord, JM และ Lombard, JH (2019) การเปิดใช้งาน NRF2 ด้วย Protandim จะลดทอนการทำงานของหลอดเลือดที่เกิดจากเกลือและการทำให้หลอดเลือดแข็งตัวลดลง จุลภาค, 26(7), e12575. ดอย: 10.1111/misc.12575
Saboor, F., Reckmann, AN, Tomczyk, CU, Peters, DM, Weissmann, N., Kaschtanow, A., และคณะ (2559). เซลล์ผนังหลอดเลือดที่แสดงออกของเนสตินเป็นตัวขับเคลื่อนการพัฒนาของความดันโลหิตสูงในปอด เออ หายใจ ญ. 47 (3), 876–888. ดอย: 10.1183/13993003.00574-2015
Satoh, T., Okamoto, SI, Cui, J., Watanabe, Y., Furuta, K., Suzuki, M., และคณะ (2549). การเปิดใช้งานเส้นทาง Keap1 / Nrf2 สำหรับการป้องกันระบบประสาทโดยตัวเหนี่ยวนำเฟส II อิเล็กโทรฟิลิก [การแก้ไขอิเล็กโทรฟิลลิก] โพรซี นัทล. อคาเดมี วิทย์ สหรัฐอเมริกา 103 (3), 768–773 ดอย: 10.1073/pnas.0505723102
Schellinger, PD และ Kohrmann, M. (2014) มีการสร้างกรอบเวลา 4.5-ชั่วโมงสำหรับการสลายลิ่มเลือดในหลอดเลือดดำด้วยตัวกระตุ้นพลาสมิโนเจนชนิดเนื้อเยื่อรีคอมบิแนนท์ จังหวะ 45 (3), 912–913. ดอย: 10.1161/ strokeaha.113.002700
Sealy-Jefferson, S., Wing, JJ, Sanchez, BN, Brown, DL, Meurer, WJ, Smith, MA และอื่นๆ (2555). ความแตกต่างทางเพศเฉพาะอายุและชาติพันธุ์ในความเสี่ยงต่อโรคหลอดเลือดสมอง เกนด์เมด. 9 (2), 121–128. ดอย: 10.1016/j.genm.2012.02.002
Shi, Z., Wu, Y., Zhu, Y., Cui, Wang, M., Yin, H., et al. (2562). การหาปริมาณเบทาอีน แมนนิทอล ฟรุกโตส กลูโคส และซูโครสใน Cistanches Herba โดย HPLC-ELSD ม็อด คาง. แพทย์ 32 (6), 1–11. ดอย: 10.13313/ j.issn.1673-4890.20190320006
Singh, D., Reeta, KH, Sharma, U., Jagannathan, NR, Dinda, AK และ Gupta, YK (2019) ผลการป้องกันระบบประสาทของ monomethyl fumarate ต่อการบาดเจ็บของ ischemia-reperfusion ในหนู: บทบาทของ Nrf2/HO1 pathway ในบริเวณ peri-infarct ประสาทเคมี ภายใน 126, 96–108. ดอย: 10.1016/j.neuint.2019.03.010
Siow, RC, Ishii, T. และ Mann, GE (2550) การปรับการแสดงออกของยีนสารต้านอนุมูลอิสระโดย 4-hydroxynonenal: atheroprotective role ของเส้นทางการถอดรหัส Nrf2/ARE รีดอกซ์ ตัวแทน 12 (1), 11–15 ดอย: 10.1179/ 135100007x162167
สุดะ, S. , Katsura, K. , Kanamaru, T. , Saito, M. และ Katayama, Y. (2013) กรดวาลโพรอิกช่วยลดการบาดเจ็บของการขาดเลือดและการกลับเป็นซ้ำในสมองหนูผ่านการยับยั้งความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและการอักเสบ เออ เจ. ฟาร์มาคอล. 707 (1-3), 26–31. ดอย: 10.1016/j.ejphar.2013.03.020
Suzuki, T. และ Yamamoto, M. (2015). พื้นฐานระดับโมเลกุลของระบบ Keap1-Nrf2 ฟรี Radic ไบโอล แพทย์ 88 (พอยต์ B), 93–100. ดอย: 10.1016/j.freeradbiomed.2015.06.006
Tenreiro, MM, Ferreira, R., Bernardino, L., และ Brito, MA (2016) การตอบสนองระดับเซลล์ของสิ่งกีดขวางเลือดสมองต่อการบาดเจ็บ: ตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่เป็นไปได้และเป้าหมายการรักษาสำหรับการฟื้นฟูสมอง นิวโรบิล โรค 91, 262–273. ดอย: 10.1016/j.nbd.2016.03.014
Thompson, JW, Narayanan, SV, Koronowski, KB, Morris-Blanco, K., Dave, KR และ Perez-Pinzon, MA (2015) เส้นทางการส่งสัญญาณที่นำไปสู่การป้องกันเซลล์ประสาทไมโทคอนเดรียขาดเลือด เจ. ไบโอเอเนอร์ก. ไบโอเมมเบรน 47 (1-2), 101–110. ดอย: 10.1007/วินาที10863-014-9574-8
Wang, T. , Zhang, X. และ Xie, W. (2012) Cistanche Deserticola YC Ma,"โสมทะเลทราย": บทวิจารณ์ เช้า. เจ ชิน แพทย์ 40 (6), 1123–1141. ดอย: 10.1142/s0192415x12500838
Wang, X., Wang, S., Wang, J., Guo, H., Dong, Z., Chai, L., et al. (2558). ผลการป้องกันระบบประสาทของ xueshuantong สำหรับการฉีด (lyophilized) ในแบบจำลองภาวะขาดเลือดในสมองของหนูชั่วคราวและถาวร Evid-Based Complement Altern. แพทย์ 2015, 134685. ดอย: 10.1155/2015/134685
Wang, D., Wang, H. และ Gu, L. (2017). ยากล่อมประสาทและกิจกรรมการปรับปรุงความรู้ความเข้าใจของสมุนไพรจีนโบราณ cistanche Evid-Based Complement Altern. แพทย์ 2017, 3925903. ดอย: 10.1155/2017/3925903
Wang, FJ, Wang, SX, Chai, LJ, Zhang, Y., Guo, H. และ Hu, LM (2018) การฉีด Xueshuantong (lyophilized) ร่วมกับการฉีด salvianolic lyophilized ช่วยป้องกันการขาดเลือดในสมองโฟกัส / การบาดเจ็บ reperfusion ในหนูผ่านการลดทอนของความเครียดออกซิเดชัน แอคต้าฟาร์มาคอล. บาป. 39 (6), 998–1011. ดอย: 10.1038/aps.2017.128Wei, Y., Gong, J., Thimmulappa, RK, Kosmider, B., Biswal, S. และ Duh, EJ (2013) Nrf2 ทำหน้าที่ควบคุมเซลล์อย่างอิสระใน endothelium เพื่อควบคุมการสร้างเซลล์ส่วนปลายและการแตกแขนงของหลอดเลือด โพรซี นัทล. อคาเดมี วิทย์ สหรัฐอเมริกา 110 (41), E3910–E3918 ดอย: 10.1073/pnas.1309276110
Xia, D. , Zhang, Z. และ Zhao, Y. (2018) Acteoside ลดความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นและการตายของเซลล์ประสาทในหนูที่มีการบาดเจ็บที่สมองขาดเลือดและเลือดกลับ ไบโอล ฟาร์มา วัว. 41(11), 1645–1651. ดอย: 10.1248/bob.b18-00210
Xiong, W., MacColl Garfinkel, AE, Li, Y., Benowitz, LI และ Cepko, CL (2015) NRF2 ส่งเสริมการอยู่รอดของเซลล์ประสาทในการเสื่อมสภาพของเส้นประสาทและความเสียหายของเส้นประสาทเฉียบพลัน เจ. คลิน. ลงทุน. 125 (4), 1433–1445. ดอย: 10.1172/jci79735
Xu, HT, Zhang, CG, He, YQ, Shi, SS, Wang, YL และ Chou, GX (2019) Phenylethanoid glycosides จาก Schnabelia centifolia (Benth.) PDCantino ส่งเสริมการเพิ่มจำนวนของเซลล์สร้างกระดูก พฤกษเคมี 164, 111–121. ดอย: 10.1016/j.phytochem.2019.05.003
Ya, BL, Liu, Q., Li, HF, Cheng, HJ, Yu, T., Chen, L. และอื่นๆ (2561). กรดยูริกช่วยป้องกันภาวะสมองขาดเลือดโฟกัส/ภาวะเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากการกลับเป็นซ้ำผ่านการกระตุ้น Nrf2 และควบคุมการแสดงออกของปัจจัยทางประสาท ออกไซด์ แพทย์ เซลล์ Longev 2018, 6069150. ดอย: 10.1155/2018/6069150
Ye, ZY, Xing, HY, Wang, B., Liu, M. และ Lv, PY (2019) DL-3-บิวทิลพทาไลด์ช่วยปกป้องสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมองจากการบาดเจ็บของการขาดเลือด/การขาดออกซิเจนผ่านการควบคุมโปรตีนที่แยกจากกันแน่น คาง. แพทย์ J. (อังกฤษ) 132 (11), 1344–1353. ดอย: 10.1097/ซม.9.0000000000000232
Yu, Q. , Li, X. และ Cao, X. (2016) ผลการป้องกันหัวใจของสารสกัดที่อุดมด้วย phenylethanoid glycoside จาก Cistanche Deserticola ในกล้ามเนื้อหัวใจขาดเลือดที่เกิดจากการขาดเลือดซ้ำในหนูแรท แอน วาส. กระชาก 34, 234–242. ดอย: 10.1016/j.avsg.2016.04.002
Yu, N., Wang, Z., Chen, Y., Yang, J., Lu, X., Guo, Y., et al. (2560). ผลกระทบของการเจาะเลือดที่มือสิบสองจุด Jing-well ต่อภาวะสมองบวมที่เกิดจากภาวะขาดเลือดในสมองส่วนกลางอย่างถาวรผ่านการปกป้องรอยต่อที่แน่นหนาของสิ่งกีดขวางระหว่างเลือดและสมอง BMC เสริมทางเลือก แพทย์ 17 (1), 470. ดอย: 10.1186/วินาที12906-017-1979-6
Yu, W. , Gao, D. , Jin, W. , Liu, S. และ Qi, S. (2018) Propofol ป้องกันความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นโดยการลดการสะสมของ succinate ขาดเลือดในการบาดเจ็บที่สมองขาดเลือดและเลือดกลับโฟกัส ประสาทเคมี ความละเอียด 43 (2), 420–429. ดอย: 10.1007/ วินาที11064-017-2437-z
Yuen, CM, Chung, SY, Tsai, TH, Sung, PH, Huang, TH, Chen, YL และอื่นๆ (2558). คลื่นกระแทกภายนอกร่างกายช่วยลดปริมาณของกล้ามเนื้อสมองได้อย่างมีประสิทธิภาพและปรับปรุงการทำงานของระบบประสาทในหนูหลังจากเกิดโรคหลอดเลือดสมองขาดเลือดเฉียบพลัน เช้า. เจ. ทรานสเล. ความละเอียด 7(6), 976–994.
Zechariah, A., ElAli, A., Doeppner, TR, Jin, F., Hasan, MR, Helfrich, I., และคณะ (2556). ปัจจัยการเจริญเติบโตของหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือดส่งเสริมการครอบคลุมของ pericyte ของเส้นเลือดฝอยในสมอง, ปรับปรุงการไหลเวียนของเลือดในสมองในช่วงที่สมองขาดเลือดโฟกัส, และรักษาเงามัวเมตาบอลิซึม โรคหลอดเลือดสมอง 44 (6), 1690–1697. ดอย: 10.1161/strokeaha.111.000240
Zhang, QY, Wang, ZJ, Sun, DM, Wang, Y., Xu, P., Wu, WJ และอื่นๆ (2560). ผลการรักษาแบบใหม่ของการดำรงตำแหน่งต่อโรคหลอดเลือดสมองตีบ: กลไกใหม่ของความสมบูรณ์ของ BBB ออกไซด์ แพทย์ Cell Longev 2017, 7150376 ดอย: 10.1155/2017/7150376
Zhang, R. , Xu, M. , Wang, Y. , Xie, F. , Zhang, G. , และ Qin, X. (2017) Nrf2-เป็นเป้าหมายการรักษาที่มีแนวโน้มในการป้องกันความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในโรคหลอดเลือดสมอง โมล นิวโรบิล 54(8), 6006–6017. ดอย: 10.1007/วินาที12035-016-0111-0
Zhang, A., Yang, X., Li, Q., Yang, Y., Zhao, G., Wang, B., et al. (2561). กิจกรรมกระตุ้นภูมิคุ้มกันของพอลิแซ็กคาไรด์ที่สกัดได้ด้วยน้ำจาก Cistanche Deserticola เป็นพืชเสริมในหลอดทดลองและในร่างกาย กรุณาหนึ่ง 13 (1), e0191356. ดอย: 10.1371/journal.pone.0191356
Zhang, Y., Wang, K., Chen, H., He, R., Cai, R., Li, J. และคณะ (2561). ลิกแนนต้านการอักเสบและฟีนิลเอทานอยด์ไกลโคไซด์จากรากของ Isodon terricolous (D.Don) Kudo พฤกษเคมี 153, 36–47. ดอย: 10.1016/ j.phytochem.2018.05.017
Zhang, K., Zhang, Q., Deng, J., Li, J., Li, J., Wen, L., et al. (2562). เส้นทางการส่งสัญญาณ ALK5 ไกล่เกลี่ยการสร้างเซลล์ประสาทและการฟื้นตัวของการทำงานหลังจากสมองขาดเลือด/การกลับคืนของเลือดในหนูผ่าน Gadd45b โรคการตายของเซลล์ 10 (5), 360. ดอย: 10.1038/วินาที41419-019-1596-z
ขัดผลประโยชน์:
ผู้เขียนประกาศว่าการวิจัยดำเนินการโดยไม่มีความสัมพันธ์ทางการค้าหรือการเงินที่อาจตีความได้ว่าเป็นผลประโยชน์ทับซ้อนที่อาจเกิดขึ้น
บรรณาธิการการจัดการประกาศความเกี่ยวข้องร่วมกันแม้ว่าจะไม่มีการทำงานร่วมกันอื่น ๆ กับผู้เขียน KZ และ YJ ในขณะที่ตรวจสอบ
ลิขสิทธิ์ © 2020 Wang, Li, Tu, Chen, Zeng and Jiang. นี่เป็นบทความแบบเปิดที่เผยแพร่ภายใต้เงื่อนไขของ Creative Commons Attribution License (CC BY) อนุญาตให้ใช้ แจกจ่าย หรือทำซ้ำในฟอรัมอื่น โดยต้องให้เครดิตผู้เขียนต้นฉบับและเจ้าของลิขสิทธิ์ และสิ่งพิมพ์ต้นฉบับในวารสารนี้ได้รับการอ้างอิงโดยแนวปฏิบัติทางวิชาการที่เป็นที่ยอมรับ ไม่อนุญาตให้ใช้ แจกจ่าย หรือทำซ้ำซึ่งไม่เป็นไปตามข้อกำหนดเหล่านี้
For more information:1950477648nn@gmail.com
