องค์ประกอบทางเคมีของใบ Cistanche

บทคัดย่อ: Cistancheใบถูกนำมาใช้เป็นยาแผนโบราณมานานแล้วรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบ, แน่นหน้าอก, และความดันโลหิตสูงและเป็นเครื่องดื่มเพื่อสุขภาพและเครื่องสำอางสำหรับต่อต้านริ้วรอย. การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อแยกสารประกอบออกจากสารสกัดเอทานอลให้ได้มากที่สุดของใบพลับเพื่อระบุสารประกอบที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพ มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของชั้นเอทิลอะซีเตตจากสารสกัดเอทานอลของใบพลับแสดงโดย2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay และโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงแบบออนไลน์-2,20 การวิเคราะห์ -casino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (HPLC-ABTS) ฟลาโวนอยด์ชนิดใหม่แคมเฟอรอล-3-O- -D-2"-coumaroylgalactoside (1) และสารประกอบธรรมชาติชนิดใหม่ kaempferol-3-O- -D-2"-เฟรูลอยด์กลูโคไซด์ (3) ถูกแยกออกจากชั้นเอทิลอะซีเตตพร้อมกับ 25 ก่อนหน้านี้สารประกอบที่รู้จัก ได้แก่สิบสี่ฟลาโวนอยด์, ไอโอโนน 1 ตัว, คูมาริน 2 ตัว, ไตรเทอร์พีนอยด์ 7 ชนิดและอะเซโทฟีโนนหนึ่งตัว การตีความข้อมูลสเปกโตรเมตริกและสเปกโทรสโกปีกำหนดโครงสร้าง. สารประกอบที่แยกได้ทั้งหมดได้รับการประเมินอย่างรวดเร็วโดยใช้ออนไลน์HPLC-ABTSการทดสอบ, และของเหล่านี้, สารประกอบ4–8, 11, 13, 15, และ16 แสดงให้เห็นอย่างชัดเจนฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ. เดอะปริมาณของสารประกอบเหล่านี้คือ {{0}}.3–0.65 เปอร์เซ็นต์ของสารสกัด

คำสำคัญ:ไดออสไพรอส คาคิ; ใบพลับ ฟลาโวนอยด์; สารต้านอนุมูลอิสระ

คลิกที่นี่เพื่อรับ Cistanche ที่อุดมไปด้วยฟลาโวนอยด์สำหรับเครื่องสำอางต่อต้านริ้วรอย

1. บทนำ

ไดออสไพรอส คาคิธันบ์ (ลูกพลับ) อยู่ในวงศ์ Ebenaceae และแพร่หลายจัดจำหน่ายในเกาหลี จีน และญี่ปุ่น ผลของมันกินสดหรือแห้งส่วนใบก็มีใช้เป็นยาแผนโบราณในการรักษาโรคหลอดเลือดสมองตีบ, โรคหลอดเลือดหัวใจตีบ, ความดันโลหิตสูง,หลอดเลือดและโรคติดเชื้อ [1]. นอกจากนี้ยังใช้ใบของมันเป็นเครื่องดื่มเพื่อสุขภาพและเครื่องสำอางเนื่องจากคุณสมบัติในการต่อต้านริ้วรอยและความสามารถในการช่วยป้องกันการสะสมของคอเลสเตอรอลและเมลานิน [1]. การวิจัยล่าสุดได้แนะนำว่าสารสกัดจากใบพลับมีคุณสมบัติทางชีวภาพที่หลากหลายรวมทั้งการกำจัดอนุมูล, การป้องกันระบบประสาท, การยับยั้งการเกิดลิ่มเลือด, การป้องกันหลอดเลือด,และแก้แพ้ [2–6]. การศึกษาทางพฤกษเคมีก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่ามีหลากหลายชนิดของฟลาโวนอยด์และเทอร์พีนอยด์เป็นองค์ประกอบหลัก [7] และแทนนินหลายชนิดมีรายงานเกี่ยวกับแนฟโทควิโนน คูมาริน ไอโอโนน และกรดไขมัน [8–12]. Reactive oxygen species (ROS) คือโมเลกุลปฏิกิริยาที่ผลิตขึ้นในระบบชีวภาพและความสมดุลระหว่างการสร้างและการกำจัด ROS นั้นถูกควบคุมอย่างดีในภาวะปกติสรีรวิทยาของเซลล์ [13]. อย่างไรก็ตาม การสร้าง ROS ที่มากเกินไปทำให้เกิดความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและในทางกลับกัน ความชราและโรคที่เกี่ยวข้องกับอายุ ได้แก่ มะเร็ง เบาหวาน และพาร์กินสันโรค [14]. ดังนั้นการค้นพบสารต้านอนุมูลอิสระ เช่น ฟลาโวนอยด์และสารประกอบฟีนอลอาจเป็นกลยุทธ์ที่มีแนวโน้มในการรักษาโรคเหล่านี้

เป็นส่วนหนึ่งของโครงการต่อเนื่องเพื่อค้นหาสารประกอบที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพ [15]ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของสารสกัดเอทานอล (EtOH) และตัวทำละลายจากลูกพลับใบไม้ได้รับการประเมินโดยใช้ 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay และออนไลน์ที่มีประสิทธิภาพสูงโครมาโตกราฟีของเหลว-2,20 -casino-bis (3-เอทิลเบนโซไทอาโซลีน-6-กรดซัลโฟนิก)การวิเคราะห์ (HPLC-ABTS) การศึกษาทางพฤกษเคมีในใบพลับนำไปสู่การแยกของฟลาโวนอยด์ใหม่หนึ่งชนิด (1) สารประกอบธรรมชาติใหม่หนึ่งชนิด (3) และ25 ก่อนหน้านี้สารประกอบที่รู้จัก การประยุกต์ใช้วิธีการทางสเปกโทรสโกปีและสเปกโทรเมตริกกำหนดลักษณะโครงสร้าง. สารประกอบที่แยกได้ทั้งหมดได้รับการคัดเลือกอย่างรวดเร็วสำหรับพวกมันผลการต้านอนุมูลอิสระโดยใช้ HPLC-ABTS ออนไลน์ นอกจากนี้ การวิเคราะห์เชิงปริมาณของสารประกอบที่แยกได้ทั้งหมดได้ดำเนินการในการศึกษานี้

2. ผลลัพธ์และการอภิปราย

2.1. ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของใบพลับ

ประเมินฤทธิ์ต้านออกซิเดชันของสารสกัดเอทานอล (EtOH) จากใบพลับเพื่อตรวจคัดกรองเบื้องต้นผ่าน DPPH (รูปที่1ก). 0.125 มก./มล. ของสารสกัดสามารถกำจัดอนุมูล DPPH ได้ประมาณ 80 เปอร์เซ็นต์ ในขณะที่แอสคอร์บิก 0.025 มก./มล.กรดประกอบด้วย 94 เปอร์เซ็นต์ของอนุมูล การทดสอบ HPLC-ABTS แบบออนไลน์ดำเนินการอย่างรวดเร็วมั่นใจในความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์เหล่านี้ (รูปที่1ง). กรด Gallic และ Trolox ถูกใช้ภายในมาตรฐาน. โครมาโตแกรมที่ 734 นาโนเมตร (จุดสูงสุดเชิงลบ) แนะนำว่าโดยประมาณเก้าองค์ประกอบสามารถมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ กรดแกลลิกและโทรลอกซ์ (6-ไฮดรอกซี- 2,5,7,8-เตตระเมทิลโครแมน-2-คาร์บอกซิลิกกรด) ถูกใช้เป็นมาตรฐานภายในเพื่อให้แน่ใจว่าความน่าเชื่อถือของผลลัพธ์ สรุปได้ว่าจุดสูงสุดเหล่านี้ส่วนใหญ่เป็นอนุพันธ์ของฟลาโวนอยด์เช่น ฟลาโวนอยด์ไกลโคไซด์และฟลาวานอล โดยอิงจากการวิเคราะห์การทำซ้ำที่ดำเนินการโดยเปรียบเทียบรังสีอัลตราไวโอเลต (UV) และแมสสเปกตรัมของสารประกอบกับเอกสารเผยแพร่ข้อมูล. การแยกส่วนโดยใช้ไบโอแอสเซย์ชี้ว่าสารประกอบต้านออกซิเดชันเหล่านี้คือมีมากในชั้นเอทิลอะซิเตต (EtOAc) ในขณะที่น้ำ (H2O) ชั้นอ่อนแอกิจกรรม (รูปที่1B,C). 

รูปที่ 1 ผลการกำจัด DPPH ของสารสกัด EtOH (A), ชั้น EtOAc (B) และชั้น H2O (C) ชั้น HhO ของใบพลับ: (D) โครมาโตแกรม ABTS-HPLC ออนไลน์ของสารสกัด EtOH

2.2. การตรวจสอบทางพฤกษเคมี

ในการระบุสารต้านอนุมูลอิสระเหล่านี้ โครมาโตกราฟีและสเปกโทรสโกปีต่างๆวิธีการได้ดำเนินการสำหรับการแยกและลักษณะโครงสร้างของสารประกอบ ฟลาโวนอยด์ใหม่ (1) และสารประกอบธรรมชาติชนิดใหม่ (3) ได้มาจากชั้นเอทิลอะซีเตตของสารสกัดเอทานอลร่วมกับสารประกอบ 25 ชนิดที่มีรายงานก่อนหน้านี้คือกระชายดำ-3-O- -2"-coumaroylglucoside (2) [16], (บวก )-คาเทชิน (4) [17], ไฮเปอร์โรไซด์(5) [17], ไอโซเควอซิทริน (6) [18], เควอซิทิน-3-O- -2"-แกลโลอิลกาแลคโตไซด์ (7) [19], เควอซิทิน-3-O- -2"-แกลลอยกลูโคไซด์ (8) [20], ไตรโฟลิน (9) [18], แอสทรากาลิน (10) [18], แคมเฟอรอล-3-O- - 2"-แกลโลอิลกาแลคโตไซด์ (11) [21], แคมเฟอรอล-3-O- -อะราบิโนไซด์ (12) [22], แคมเฟอรอล-3-O- - 2"-แกลลอยกลูโคไซด์ (13) [23], เควอซิทิน-3-O- -2"-coumaroylglucoside (14) [24], เควอซิติน(15) [15], กระชายดำ (16) [25], (6S,9S)-โรสโอไซด์ (17) [26], สโคโปเลติน (18) [27], อัมเบลลิเฟอโรน(19) [28], 1-(2,4-ไดไฮดรอกซี-6-เมทิลฟีนิล)เอทาโนน (20) [29], กรดบาร์บิเนอร์วิค (21) [30], กรดไดออสไพริก บี (22) [7], กรดโรทูเจนิก (23) [31], กรดโพโมลิก (24) [32] กรดเซียเรซิโนลิก(25) [33], กรดโอลีโนลิก (26) [25] และกรดเออร์โซลิก (27) [25] โดยใช้สเปกโทรสโกปีและข้อมูลทางสเปกโตรเมตริกและกายภาพเมื่อเปรียบเทียบกับข้อมูลที่เผยแพร่และยังมีความบางอีกด้วยการวิเคราะห์เลเยอร์โครมาโตกราฟี (TLC) (รูปที่2 และ3). ในบรรดาสารประกอบเหล่านี้2, 16, 17, 19, 20, และ24 เริ่มแรกถูกแยกออกจากง. คากิ. 

ได้รับสารประกอบ 1 ในรูปของผงสีเหลือง ซึ่งสูตรโมเลกุลถูกสร้างขึ้นเป็น C3olO3 ตามข้อมูลแมสสเปกโตรเมตรี (HRMS) ที่มีความละเอียดสูง สเปกตรัมแสดงแถบการดูดกลืนแสงที่ 207 และ 315 นาโนเมตร ซึ่งบ่งชี้ว่าสารประกอบ 1 มีแกนหลักฟลาโวนอล ข้อมูล 'H นิวเคลียร์แมกเนติกเรโซแนนซ์ (NMR) (ตารางที่ 1รูปที่ S1) แสดงรูปแบบทั่วไปของฟลาโวนอลไกลโคไซด์ coumaroylated โดยแสดงสัญญาณประเภท AA'BB' สองชุด ({{10}}{{11 }} (2H, d, J= 8.5 Hz, H-2' และ H-6 ),6.87 (2H, d, J{{20}} .5 HzH-3' และ H-5')) ในวงแหวน B ของ kaempferol เช่นเดียวกับสัญญาณ (0 7.45 (2H, d, J=8 5 HzH-2 และ H{{3{{104}}}}"), 6.81 (2H, d, J=8.5 Hz, H-3 และ H-5 เปอร์เซ็นต์ ) ในวงแหวนอะโรมาติกของหมู่ coumaroyl สองสัญญาณคู่ (8H 7.65 (1H, d, J=15.5 Hz, H-7"") และ 6.35 (1Hd, J=16.0 Hz, H-8") ถูกสังเกต ซึ่งบ่งชี้โปรตอนทรานส์-โอเลฟินิกของกลุ่มประเทศ นอกจากนี้ สัญญาณโปรตอนแบบอะโนเมอริก (0H 5.57 (1H, d, J=8.0 Hz, H-1) ถูกพบในบริเวณน้ำตาลซึ่งบ่งบอกถึงการมีอยู่ของกลุ่มน้ำตาลไซคลิกที่มีการกำหนดค่า B 13C และการปรับปรุงที่ไม่มีการบิดเบือนโดยโพลาไรเซชันถ่ายโอนข้อมูล NMR (Iable 1รูปที่ S2) แสดง 30 เรโซแนนซ์ซึ่งประกอบรวมด้วยทรานส์-โอเลฟินิกคาร์บอน 2 คาร์บอน, คาร์บอนอะโรมาติก 10 คาร์บอน, และคาร์บอนกลูโคซิล มอยอิตี 6 คาร์บอน และคาร์บอนที่ไม่โปรตอน 10 คาร์บอนซึ่งรวมถึงคาร์บอนิลคาร์บอน 2 คาร์บอน โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การเปลี่ยนแปลงทางเคมีที่ C-2, C-3 และ C-4 (8c 158.1, 134.9 และ 179.2) เป็นสัญญาณที่มีลักษณะเฉพาะของฟลาโวนอล3-0-ไกลโคไซด์ นอกจากนี้ สัญญาณคาร์บอนิลคาร์บอนที่ C-1" (8c 168.7) และสัญญาณคาร์บอนทรานส์โอเลฟินิกสองตัวที่ C-2'" และ C-3"(6 146.9 , 115.2) เป็นการเปลี่ยนแปลงทางเคมีโดยทั่วไปของหมู่คูมาโรอิล สัญญาณคาร์บอนอโนเมอริกที่ C-1(6C 100.4) และสัญญาณอื่นๆ สำหรับไกลโคซิล มอยอิตีจาก C-2" ถึง C-6" ' (6c74.3, 73.4, 70.5, 77.4 และ 62.0) ถูกสังเกต ข้อมูล NMR หนึ่งมิติ (1D) เหล่านี้ซ้อนทับได้กับข้อมูลของ kaempferol-3-0-B-2"-coumaroylglucoside (2) (16] อย่างไรก็ตาม การเปรียบเทียบข้อมูล 13C NMR อย่างรอบคอบระหว่างสารประกอบทั้งสองชี้ให้เห็นว่าสารประกอบ 1 มีกาแลคโตมอยอิตีซึ่งแสดงให้เห็นเพิ่มเติมโดยข้อมูล NMR ของ NuclearOverhauser Enhancement Spectroscopy (NOESY) (รูปที่ S6) ในขณะที่ความสัมพันธ์ NOES ระหว่าง H-2 และ H-4 ถูกสังเกตในสารประกอบ 2 ไม่มีความสัมพันธ์ระหว่างโปรตอนเหล่านี้ในสารประกอบ 1 โดยทั่วไป การตีความข้อมูล 13C NMR และ NOESYNMR เป็นวิธีการที่มีประสิทธิภาพในการหาชนิดของไกลโคซิล มอยอิตี ตำแหน่งของกาแลคโตสมอยอิตีนั้นอนุมานได้ว่าอยู่ที่ C{120}} ตามการเปลี่ยนแปลงของดาวน์ฟิลด์ของ C-2และ C{122}} ตามหลักฐานเพิ่มเติมโดยสหสัมพันธ์พหุพันธะเฮเทอโรนิวเคลียร์ (HMBC ระหว่าง H{ {123}}" และ C-3 (รูปที่ S5) ตำแหน่งของกลุ่มคูมาโรอิลแสดงให้เห็นว่าอยู่ที่ C-2" ตามการเปลี่ยนแปลงของดาวน์ฟิลด์ (0 5.36 (1H, dd, J=10.0, 8.0 Hz, H{ {134}}")) และความสัมพันธ์ HMBC ระหว่าง H-2' และ C-1 เป็นผลให้โครงสร้างของสารประกอบ 1 ถูกกำหนดเป็น kaempferol-3-0-B-2"-coumaroylgalactoside แม้ว่าก่อนหน้านี้สารประกอบ 2 จะถูกแยกได้จากแหล่งต่างๆ รวมถึง Ouercus suber (16] และ Alliumporrum (34) สารประกอบ 1 ถูกแยกออกและแสดงลักษณะทางโครงสร้างเป็นครั้งแรก

สารประกอบ3 ถูกแยกออกมาเป็นผงสีเหลืองและได้สูตรโมเลกุลเป็นค31H28O14 โดยการวิเคราะห์ข้อมูล HRMS สเปกตรัมรังสียูวีแสดงรังสียูวีการดูดซึมที่ 210 และ 327 นาโนเมตร เนื่องจากอะไกลโคนชนิดเดียวกันกับสารประกอบ1 และ2. เดอะ1H ข้อมูล NMR (ตาราง1, รูปที่ S10) คล้ายกับของสารประกอบ2แต่ประสม3 มีหมู่เฟรูลอยล์แทนที่จะเป็นหมู่คูมาโรอิล ดังที่เห็นได้จากการมีอยู่ของแอนกลุ่มเมทอกซีเพิ่มเติม (δH 3.91 (3H, s, 3000 -อคส3)). นอกจากนี้ โปรตอนที่เป็นอะโนเมอริกสัญญาณ (δH 5.64 (1H, d, J {{0}}.0 เฮิร์ตซ์, H-100 )) ถูกสังเกต ซึ่งบ่งชี้ว่าการเชื่อมโยงไกลโคซิลเป็น-การกำหนดค่าและสัญญาณเปลี่ยนสนาม (5.03 (1H, t,J = 8.5 เฮิร์ตซ์, H-200 )) ถูกแสดงในพื้นที่น้ำตาลเช่นเดียวกับสารประกอบ1. เดอะ13ข้อมูล C NMR (ตาราง1, รูปS11) แสดง 31 resonances ประกอบด้วย 2ทรานส์- คาร์บอนโอเลฟินิก คาร์บอนสิบในสี่ส่วนคาร์บอนอะโรมาติก 10 คาร์บอนกลูโคซิล มอยอิตี 6 คาร์บอน และคาร์บอนเมทอกซี 1 คาร์บอน และ non-protonated 10 อะตอมคาร์บอน ซึ่งรวมถึงคาร์บอนิลคาร์บอนสองตัวที่สอดคล้องกับเคมเฟอรอล, เฟรูลอยล์,และกลุ่มกลูโคส โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สัญญาณคาร์บอนจาก C-200 ถึง C-600 (δC 75.8, 76.3, 71.5, 78.8 และ 62.5) แนะนำการมีอยู่ของกลูโคสมอยอิตี ตำแหน่งของกลูโคสมอยอิตีและกลุ่มเฟอร์รูลอยล์ถูกกำหนดโดยความสัมพันธ์ HMBC ระยะยาวระหว่าง H-100 และC-3 (δC 134.8) และ H-200 และค-1000 (δC 168.4) (รูปที่ S14) ตำแหน่งที่รับเพิ่มกลุ่ม methoxy ถูกกำหนดโดยความสัมพันธ์ที่สำคัญระหว่าง 3000 -อคส3 และค-3000 (δC 149.4). ผลลัพธ์ข้างต้นได้เสนอโครงสร้างของสารประกอบ3 เป็น kaempferol-3-O- - 2"-เฟรูโลอิล กลูโคไซด์ เท่าที่ทราบ สารประกอบ3 ได้รับรายงานว่าเป็นเพียงผลิตภัณฑ์จากการไฮโดรไลซิสของ 3-O- -(2-O-เฟรูโลอิล)-กลูโคซิล-7,40 -di-O- -กลูโคซิล แคมเฟอรอล, แยกได้จากAllium tuberosum[35]. ดังนั้นโครงสร้างของ3 ถูกอธิบายว่าเป็นของใหม่สารประกอบธรรมชาติ

สารประกอบ11 ถูกแยกออกเป็นผงสีเหลือง เดอะ1H ข้อมูล NMR (รูปที่ S19)แสดงชุดของ AA0 บี บี0 - ประเภทสัญญาณ (δH 8.06 (2H, d, J {{0}}.0 เฮิร์ตซ์, H-20 , H-60 ), 6.87 (2H, d, J {{0}}.0 เฮิร์ต, H-30, H-50 )) ในวงแหวน B ของกระชายดำและสัญญาณเสื้อกล้ามที่δH 7.02 (2H, s, H-3000 , H-7000 ) ของแกลลอยล์มอยอิตีในบริเวณอะโรมาติก ซึ่งเป็นสัญญาณลักษณะเฉพาะของฟลาโวนอลที่จัดสรรไว้ สัญญาณโปรตอนแบบอะโนเมอริก (δH 5.78 (1H, d, J {{0}}.0 เฮิร์ตซ์, H-100 )) บ่งชี้ว่าการเชื่อมโยงไกลโคซิลคือ a-การกำหนดค่า. นอกจากนี้ดาวน์ฟิลด์สัญญาณโปรตอนที่เลื่อน (5.27 (1H, t,J = 9.5 เฮิร์ตซ์, H-200 )) แนะนำว่ากลุ่มแกลลอยด์ติดที่หมู่ไฮดรอกซิลของ C-200 เนื่องจากการเปลี่ยนแปลงนี้อาจเกิดจากอิทธิพลของแอนไอโซทรอปิกของO-แกลลอยด์ มอยอิตี [21]. เดอะ13ข้อมูล C NMR (รูปที่ S20)แสดงผล 26 resonances ซึ่งบ่งชี้ถึงการจัดสรรฟลาโวนอลไกลโคไซด์ สัญญาณคาร์บอนจากค-200 ถึง C-600 (δC 71.1, 72.7, 68.2, 76.0 และ 60.1) บ่งชี้ว่ามีกาแลคโตสความเหนียว ดังนั้นโครงสร้างของสารประกอบ11 ได้รับการยืนยันว่าเป็น kaempferol-3-O- -200 - แกลโลอิลกาแลคโตไซด์ แม้ว่าจะประสม11 ก่อนหน้านี้ถูกแยกออกจากแหล่งต่างๆรวมทั้งง. คากิ[21,36], เพียง1มีการรายงานข้อมูล H NMR และ MS ก่อนหน้านี้ ดังนั้น,เดอะ13มีการรายงานข้อมูล C NMR เป็นครั้งแรกในการศึกษานี้

2.3. กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของสารประกอบที่แยกได้

สารประกอบที่แยกได้ทั้งหมดได้รับการประเมินฤทธิ์ต้านออกซิเดชั่นของพวกมันโดยใช้ Rapid onสายการวิเคราะห์ HPLC-ABTS เพื่อกำหนดว่าสารประกอบใดมีส่วนในการต้านอนุมูลอิสระผลของใบพลับ สารประกอบ4–8, 11, 13, 15, และ16 แสดงฤทธิ์ต้านออกซิเดชั่นกิจกรรมที่สร้างสรรค์ (รูปที่4). สารประกอบเหล่านี้ส่วนใหญ่เป็น kaempferol และ quercetinอนุพันธ์ แต่อนุพันธ์บางตัว (1–3, 9, 10, 12, และ14) ไม่แสดงกิจกรรม เดอะความสัมพันธ์ของโครงสร้างและกิจกรรมไม่ได้ถูกกำหนดอย่างสมบูรณ์ แต่ถูกเปิดเผยบางส่วน ในโดยเฉพาะอย่างยิ่ง เควอซิทินและแคมเฟอรอลที่มีแกลลอยล์ มอยอิตี (7, 8, 11, และ13) พบว่ามีกิจกรรมที่มีศักยภาพ แต่ผู้ที่มี coumaroyl หรือ feruloyl moieties (1–3 และ16) ไม่ได้แสดงกิจกรรมใดๆ

รูปที่ 4กิจกรรมการกำจัดอย่างรุนแรงของสารประกอบที่แยกได้ (4–8, 11, 13, 15, และ16) ได้รับการประเมินโดยออนไลน์การทดสอบ HPLC-ABTS

2.4. การวิเคราะห์เชิงปริมาณของสารประกอบที่แยกได้

การวิเคราะห์เชิงปริมาณของสารประกอบที่แยกได้ทั้งหมดในสารสกัดที่ละลายได้ของ EtOAcมีการดำเนินการเพื่อยืนยันว่าสามารถมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของใบพลับได้เกิดจากสารออกฤทธิ์เหล่านี้ วิธี HPLC เฉพาะที่มีการตรวจจับอาร์เรย์ไดโอดและเครื่องตรวจจับการกระเจิงของแสงระเหยได้รับการพัฒนาขึ้นเพื่อการตรวจวัดพร้อมกันจาก 27 สารประกอบ สารไตรเทอร์พีนอยด์ที่แยกได้ทั้งหมดมีประมาณร้อยละ 5.9 ของสารสกัดและของเหล่านี้ ได้แก่ กรดเซียเรซิโนลิก (25), กรดโอลีโนลิก (26) และเออร์โซลิกกรด (27) คิดเป็นสัดส่วนที่มีนัยสำคัญดังที่รายงานในการศึกษาก่อนหน้านี้ [7]. เดอะปริมาณฟลาโวนอยด์ประมาณร้อยละ 5.4 และในจำนวนนี้เป็นสารออกฤทธิ์คิดเป็นร้อยละ 3.2 (ตาราง2). โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เนื้อหาของ kaempferol-3-O- -200 -galloylgalactoside(9), แคมเฟอรอล-3-O- -2"-แกลลอยกลูโคไซด์ (10), ไอโซเคอร์ซิทริน (13) และเควอซิติน-3-O- -2"- แกลลอยด์กลูโคไซด์ (15) มากกว่า 0.3 เปอร์เซ็นต์ ตรวจสอบวิธีการวิเคราะห์โดยใช้ขั้นตอนการตรวจสอบอย่างง่ายเพื่อให้แน่ใจว่ามีความเกี่ยวข้องของวิธีการซึ่งแสดงให้เห็นว่าเพียงพอความเฉพาะเจาะจง ความเป็นเชิงเส้น ความเที่ยงตรง และความเที่ยงตรง

สอบถามเพิ่มเติม:

อีเมล:wallence.suen@wecistanche.com Whatsapp plus 86 15292862950