Glycosides ทั้งหมดจากลำต้นของ Cistanche Tubulosa บรรเทาพฤติกรรมที่คล้ายกับภาวะซึมเศร้า: ปฏิกิริยาแบบสองทิศทางของ Phytochemicals และ Gut Microbiota

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:ali.ma@wecistanche.com

หลี่ ฟาน และคณะ

บทคัดย่อ

พื้นหลัง: ในฐานะที่เป็นสมุนไพรปรับสภาพไตหยางที่ใช้บ่อยที่สุดในการแพทย์แผนจีน ลำต้นฉ่ำแห้งของCistanchetubulosa(Schenk) Wight (CT) ได้รับการแสดงว่ามีประสิทธิภาพในการรักษาภาวะซึมเศร้า อย่างไรก็ตาม ส่วนประกอบของยากล่อมประสาทและกลไกพื้นฐานของยาเหล่านี้ยังคงไม่ชัดเจน

วัตถุประสงค์: เพื่อสำรวจส่วนประกอบที่ใช้งานของ CT(Cistancheทูบูโลซ่า)ต่อต้านภาวะซึมเศร้าเช่นเดียวกับกลไกที่อาจเกิดขึ้น การออกแบบและวิธีการศึกษา: การทดสอบความสิ้นหวังตามพฤติกรรมถูกนำมาใช้เพื่อประเมินกิจกรรมยากล่อมประสาทของพอลิแซ็กคาไรด์ โอลิโกแซ็กคาไรด์ และเศษส่วนเสริมไกลโคไซด์ต่างๆ ที่แยกจาก CT เช่นเดียวกับสารเมตาโบไลต์ในลำไส้ทั่วไป ซึ่งรวมถึง 3-กรดไฮดรอกซีฟีนิลโพรพิโอนิก ({{2 }}HPP) และไฮดรอกซีไทโรซอล (HT) นอกจากนี้ ยังได้สำรวจผลกระทบของเศษส่วนออกฤทธิ์ทางชีวภาพและเมแทบอไลต์ต่อแบบจำลองความเครียดเล็กน้อยเรื้อรังที่คาดเดาไม่ได้ (CUMS) ด้วยการวิเคราะห์ทางเภสัชพลศาสตร์และการวิเคราะห์ทางชีวเคมีหลายรายการ การเปลี่ยนแปลงของเนื้อเยื่อวิทยาลำไส้ใหญ่และอุปสรรคในลำไส้สังเกตได้จากการวิเคราะห์การย้อมสีและการวิเคราะห์ทางอิมมูโนฮิสโตเคมี สำรวจคุณสมบัติของจุลินทรีย์ในลำไส้และเมแทบอลิซึมของทริปโตเฟน-ไคนูเรนีนโดยใช้การจัดลำดับ 16S rRNA และการซับแบบตะวันตกตามลำดับ

ผลลัพธ์: ทั้งหมดไกลโคไซด์(TG) บรรเทาพฤติกรรมที่คล้ายกับภาวะซึมเศร้าได้อย่างมากเมื่อเทียบกับเศษส่วนที่แยกจากกัน ซึ่งสะท้อนถึงผลกระทบที่เสริมฤทธิ์กันของ phenylethanoid และ iridoid glycosides ต่อการกระตุ้นการทำงานของแกน ใน 5-hydroxytryptamine (5-HT) และปัจจัย neurotrophic ที่ได้รับจากสมองในฮิบโปแคมปัส นอกจากนี้ TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)บรรเทาการอักเสบระดับต่ำในลำไส้และลำไส้หยุดชะงัก และความอุดมสมบูรณ์ของแบคทีเรียหลายจำพวกมีความสัมพันธ์อย่างมากกับแกน HPA และการอักเสบในหนู CUMS การแสดงออกของอินโดลีเอมีน 2, 3-ไดออกซีเจเนส 1 (IDO1) อย่างต่อเนื่องในลำไส้ใหญ่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญหลังจาก TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)การบริหารพร้อมกับการปราบปรามการเผาผลาญทริปโตเฟน - ไคนูเรนีน ในทางกลับกัน HT ยังออกฤทธิ์ยากล่อมประสาทโดยทำให้การทำงานของแกน HPA ดีขึ้น การปลดปล่อยไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ และการเผาผลาญของทริปโตเฟน-ไคนูเรนีน ในขณะที่มันไม่สามารถปรับจุลินทรีย์ในลำไส้ที่บกพร่องในลักษณะเดียวกับ TG ได้เป็นส่วนใหญ่ น่าแปลกที่ TG และ HT เหนือกว่า fluoxetine สามารถปรับปรุงความผิดปกติของแกน hypothalamic-pituitary-gonadal และเมแทบอลิซึมของนิวคลีโอไทด์ตามวัฏจักรที่ผิดปกติได้

คีย์เวิร์ด: Cistanchetubulosa, ไกลโคไซด์ทั้งหมด, hydroxytyrosol, ภาวะซึมเศร้า, จุลินทรีย์ในลำไส้

Click to cistanche deserticola ma ผลิตภัณฑ์

บทนำ

อาการซึมเศร้าเป็นโรคทางจิตที่เรื้อรัง เกิดซ้ำ และอาจเป็นอันตรายถึงชีวิต ซึ่งส่งผลกระทบถึง 20 เปอร์เซ็นต์ของประชากรทั่วโลก (Nabavi et al., 2017) ในปัจจุบัน แม้ว่ายาแก้ซึมเศร้าจะได้รับการอนุมัติจำนวนมาก แต่ผลข้างเคียงก็ยังน่าเป็นห่วง โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การรักษาระยะยาวด้วย selective serotonin reuptake inhibitors (SSRIs) เช่น fluoxetine ซึ่งเป็นยาหลักในการรักษาโรคซึมเศร้า ปัญหาที่รุนแรงขึ้น เช่น การเสื่อมสมรรถภาพทางเพศเรื้อรัง (Bijlsma et al., 2014); สิ่งนี้ได้ดึงความสนใจเพิ่มขึ้นในการค้นพบยากล่อมประสาทชนิดใหม่จากสมุนไพรธรรมชาติ (Wang et al., 2019) ในทฤษฎีการแพทย์แผนจีน (TCM) การขาดไต-หยางส่งผลให้เกิดลักษณะการทำงานที่คล้ายกับอาการทางคลินิกของภาวะซึมเศร้า เช่น รู้สึกหดหู่ใจ หมดความสนใจ และอารมณ์อ่อนไหว (Yang et al., 2020) ส่งเสริมความคิด เพื่อบรรเทาพฤติกรรมที่คล้ายภาวะซึมเศร้าโดยปรับสภาพไตหยาง สมุนไพรบำรุงไตหยางหลายชนิดมีข้อได้เปรียบในการปรับปรุงสมรรถภาพทางเพศโดยบังเอิญ (Wu et al., 2015) การศึกษาดังกล่าวทำให้เราใส่ใจกับการประยุกต์ใช้ศักยภาพของCistanchesเฮอร์บาซึ่งเป็นสมุนไพรปรับสภาพไต-หยางที่ใช้บ่อยที่สุดใน TCM และมีประสิทธิภาพในการรักษาความผิดปกติทางเพศชาย (Wang et al., 2020) ในแง่ของการพัฒนายากล่อมประสาทCistanchesเฮอร์บาได้รับการบันทึกอย่างเป็นทางการว่าเป็นลำต้นฉ่ำแห้งของCistanchetubulosa(Schrenk) ไวท์ (CT) และCistancheทะเลทราย(YC Ma) ในตำรับยาจีน (Wang et al., 2017) ถูกนำมาใช้ในประเทศจีนและประเทศอื่นๆ ในเอเชียตะวันออกตั้งแต่ศตวรรษที่ 15 เพื่อรักษาสภาพต่างๆ เช่น ภาวะไต-หยางบกพร่อง ความอ่อนแอ และภาวะมีบุตรยากของสตรี การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ระบุว่าCistanchesHerba มีฤทธิ์ทางชีวภาพหลายอย่าง เช่น การเพิ่มภูมิคุ้มกัน การป้องกันระบบประสาท สารต้านอนุมูลอิสระ การต่อต้านริ้วรอย และฤทธิ์ต้านความเมื่อยล้า (Wang et al., 2017) คุณสมบัติป้องกันระบบประสาทของCistanchesเฮอร์บาแนะนำศักยภาพในการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับความรู้ความเข้าใจ เช่น โรคหลอดเลือดสมอง โรคซึมเศร้า และโรคอัลไซเมอร์ (Wang et al., 2020) ในการศึกษาก่อนหน้านี้ เราพบว่า CT(Cistancheทูบูโลซ่า)สารสกัดช่วยบรรเทาพฤติกรรมที่คล้ายกับภาวะซึมเศร้าของหนูที่มีความเครียดเล็กน้อยเรื้อรังที่คาดเดาไม่ได้ (CUMS) (Li et al., 2018) จนถึงปัจจุบัน การวิเคราะห์ทางเคมีของ CT(Cistancheทูบูโลซ่า)แสดงให้เห็นว่าองค์ประกอบหลักของมันประกอบด้วย phenylethanoid glycosides, iridoid glycosides, polysaccharides และ oligosaccharides (Jiang and Tu, 2009) อย่างไรก็ตาม ประเภทของสารประกอบที่มีบทบาทสำคัญในฤทธิ์ต้านอาการซึมเศร้ายังคงไม่ชัดเจน

การศึกษาจำนวนมากได้ยืนยันว่าการกระทำทางสรีรวิทยาของลำไส้ (โดยเฉพาะจุลินทรีย์ทั่วไป) มีบทบาทสำคัญในการพัฒนาของภาวะซึมเศร้าและสามารถควบคุม neuroendocrine ระบบประสาทอัตโนมัติและระบบภูมิคุ้มกัน (Yang et al., 2020) นอกจากนี้ ความสัมพันธ์ที่เชื่อมโยงเมแทบอลิซึมของทริปโตเฟน ไมโครไบโอตาในลำไส้ และภาวะซึมเศร้าได้ค่อยๆ ได้รับความสนใจอย่างมาก microbiota ในลำไส้ที่เปลี่ยนแปลงไปสามารถกระตุ้นวิถีของทริปโตเฟน-ไคนูเรนีน ต่อมาก็ลดความพร้อมใช้งานของทริปโตเฟนต่อพ่วงและในสมอง ซึ่งส่งผลให้ 5-ขาด HT (Agus et al., 2018) การศึกษาก่อนหน้านี้ของเราพบว่า phenylethanoid glycosides ใน CT(Cistancheทูบูโลซ่า)โดยทั่วไปจะมีการดูดซึมต่ำ และสามารถเผาผลาญได้อย่างรวดเร็วเป็น 3-กรดไฮดรอกซีฟีนิลโพรพิโอนิก (3-HPP) และไฮดรอกซีไทโรซอล (HT) โดยจุลินทรีย์ในลำไส้ (Li et al., 2016) นอกจากนี้ CT(Cistancheทูบูโลซ่า)มีการรายงานสารสกัดเพื่อฟื้นฟูสภาวะสมดุลของจุลินทรีย์ในลำไส้ในหนู CUMS (Li et al., 2018) จากการวิจัยดังกล่าว เราอนุมานได้ว่าปฏิกิริยาแบบสองทิศทางของไฟโตเคมิคอลและไมโครไบโอตาในลำไส้อาจควบคุมผลของยากล่อมประสาทของส่วนประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพจำเพาะของ CT(Cistancheทูบูโลซ่า). โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สารประกอบอาจถูกเปลี่ยนสภาพเป็นสารที่ดูดซึมได้ (เช่น 3-HPP และ HT) ในทางเดินอาหารโดยไมโครไบโอตาในลำไส้ และต่อมามีฤทธิ์ต้านอาการซึมเศร้า ในทางกลับกัน การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างจุลินทรีย์ในลำไส้ที่เกิดจากส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพสามารถมีบทบาทสำคัญในการทำงานของยากล่อมประสาทได้ในเวลาเดียวกัน

ในการศึกษานี้ เราใช้การทดสอบพฤติกรรมสิ้นหวังเพื่อประเมินกิจกรรมยากล่อมประสาทของพอลิแซ็กคาไรด์ โอลิโกแซ็กคาไรด์ และเศษส่วนเสริมไกลโคไซด์ที่หลากหลายซึ่งแยกจาก CT(Cistancheทูบูโลซ่า)สารสกัดที่เป็นน้ำ (CTE) และสารเมแทบอไลต์ทั่วไปโดยจุลินทรีย์ในลำไส้ (รวมถึง 3-HPP และ HT) ซึ่งเรายืนยันเพิ่มเติมในรูปแบบความเครียดที่ไม่รุนแรงเรื้อรังที่คาดเดาไม่ได้ (CUMS) ที่มีเภสัชพลศาสตร์และการวิเคราะห์ทางชีวเคมีหลายรายการ ต่อจากนั้น เราตรวจสอบว่ากลไกต่อต้านภาวะซึมเศร้าเกี่ยวข้องกับปฏิกิริยาแบบสองทิศทางของไฟโตเคมิคอลและไมโครไบโอตาในลำไส้หรือไม่

วัสดุและวิธีการ

วัสดุ

ซื้อมาตรฐานทั้งหมดที่ใช้ในการวิเคราะห์ทางเคมีจาก Durst (เสฉวน ประเทศจีน) 3-ซื้อ HPP, HT, fluoxetine และ imipramine จาก Aladdin (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ซื้อชุดตรวจปริมาณโปรตีน BCA จากเมือง Boster (อู่ฮั่น ประเทศจีน) Nanjing Jiancheng (หนานจิง ประเทศจีน) ให้ 5-HT, BDNF, tumor necrosis factor-alpha (TNF- ), interleukin-1beta (IL-1 ) และ interferon-gamma (IFN- ) ชุดทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) Corticosterone (CORT), adrenocorticotropic hormone (ACTH) และฮอร์โมน corticotrophin-releasing hormone (CRH) ELISA ถูกซื้อมาจาก MultiSciences (หางโจว ประเทศจีน) Cyclic adenosine monophosphate (cAMP), cyclic guanosine monophosphate (cGMP), testosterone (T) และ gonadotropin-releasing hormone (GnRH) ELISA ที่ซื้อมาจากเทคโนโลยีชีวภาพที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ชุดทริปโตเฟนและไคนูเรนีน ELISA ได้มาจากแอนติบอดีโมเลกุลขนาดเล็ก (บอร์กโดซ์ ประเทศฝรั่งเศส) แอนติบอดีปฐมภูมิ/ทุติยภูมิซึ่งรวมถึง zonula occludens 1 (ZO-1), indoleamine 2, 3-dioxygenase 1 (IDO1), -actin และ HRP ต่อต้านกระต่าย IgG ของแพะ (H plus L) ถูกซื้อจาก Proteintech (อู่ฮั่น ประเทศจีน). รีเอเจนต์อื่นๆ ทั้งหมดที่มีระดับการวิเคราะห์หรือความบริสุทธิ์สูงกว่าได้มาจากซัพพลายเออร์เชิงพาณิชย์

การเตรียมเศษส่วนต่าง ๆ แยกจาก CTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า)

CT(Cistancheทูบูโลซ่า)ถูกรวบรวมในเดือนพฤศจิกายน 2015 ในเมืองเหอเทียน ซินเจียง ประเทศจีน และรับรองความถูกต้องโดยศาสตราจารย์เสี่ยวโป ลี่ ตัวอย่างบัตรกำนัล (20151108) ถูกฝากไว้ที่ School of Pharmacy ที่ Shanghai Jiao Tong University

สกัดตัวอย่างที่บดแล้วสามครั้งด้วยน้ำกลั่น (1:10, w/v) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่ 80~90 ◦C เพื่อให้ได้ CTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า)(ผลผลิต 57.1 เปอร์เซ็นต์ ). CTE ถูกละลายในน้ำกลั่นแล้วค่อยๆ กวนด้วยเอทานอล (1:4, v/v) และวางไว้ที่ 4 ◦C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง จากนั้น ตะกอนและส่วนลอยเหนือตะกอนถูกรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 4000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 20 นาที พอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมด (TP; ผลผลิตคือ 5.7 เปอร์เซ็นต์ ) ได้มาจากการล้างด้วยเอทานอล 80 เปอร์เซ็นต์ และการทำให้โปรตีนลดลงด้วยรีเอเจนต์ Savage สามครั้งจากตะกอนที่เก็บรวบรวม ส่วนลอยเหนือตะกอนที่เหลือถูกโครมาโตกราฟีบนคอลัมน์เรซินพรุนขนาดเล็ก D101 และชะด้วยน้ำกลั่นและเอทานอล 40 เปอร์เซ็นต์ น้ำที่ชะและเศษส่วนของเอทานอล 40 เปอร์เซ็นต์มีโอลิโกแซ็กคาไรด์ทั้งหมด (TO; ผลผลิตเท่ากับ 35.1 เปอร์เซ็นต์ ) และทั้งหมดไกลโคไซด์(TG; ให้ผลผลิต 12.1 เปอร์เซ็นต์ ) ตามลำดับ TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)ถูกชะเพิ่มเติมด้วยน้ำกลั่นและเอทานอล 5 เปอร์เซ็นต์ , 10 เปอร์เซ็นต์ , และ 40 เปอร์เซ็นต์ ผ่าน D101 microporous resin อีกครั้ง และเศษส่วนที่ถูกชะของเอทานอล 5 เปอร์เซ็นต์ และ 40 เปอร์เซ็นต์ เป็นอิริดอยด์ไกลโคไซด์ทั้งหมด (TG-IrG; ผลผลิตคือ 2.7 เปอร์เซ็นต์ ) และ รวมฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ (TG-PhG; ผลผลิตเท่ากับ 8.7 เปอร์เซ็นต์ ) ตามลำดับ

การวิเคราะห์ทางเคมี

ประการแรก องค์ประกอบทางเคมีหลักของเศษส่วนต่างๆ ที่แยกจาก CTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า)ถูกแสดงคุณลักษณะโดย UPLC-QTOF-MS ประการที่สอง ปริมาณสัมพัทธ์ของคาร์โบไฮเดรตและไกลโคไซด์ทั้งหมดถูกกำหนดโดยวิธี UV-Vis ประการที่สาม ส่วนประกอบหลัก (echinacoside, verbascoside คือ verbascoside, 8-กรดเอพิโลแกนิก และกรด teniposide) ถูกหาปริมาณโดยวิธี HPLC ที่ผ่านการตรวจสอบความถูกต้อง พารามิเตอร์โดยละเอียดและการตรวจสอบวิธีการแสดงอยู่ในเอกสารประกอบ

การทดลองกับสัตว์

ตารางการทดลองสัตว์เฉพาะจะแสดงในรูปที่ 1 สัตว์ทดลองทั้งหมดถูกเลี้ยงและปรับสภาพเป็นเวลา 1 สัปดาห์ก่อนการทดลองในห้องปฏิบัติการ Animal Center ของ Shanghai Jiao Tong University (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ภายใต้อุณหภูมิห้องควบคุม (25 ± 2 ◦C; ความชื้นสัมพัทธ์ 55 ± 10 เปอร์เซ็นต์) โดยมีวัฏจักรมืดและสว่างเป็นเวลา 12: 12 ชั่วโมง การวิจัยนี้ดำเนินการตามแนวทางการดูแลและการใช้สัตว์ทดลองของ SJTU สิ่งอำนวยความสะดวกและระเบียบการเกี่ยวกับสัตว์ได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ของ SJTU (หมายเลข A2019008)

หนู ICR เพศผู้หนึ่งร้อยห้าสิบตัว (น้ำหนัก 18–20 ก. อายุ 6 สัปดาห์) ถูกซื้อจาก Shanghai Slack Biotechnology Company (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) และสุ่มแบ่งออกเป็น 10 กลุ่ม (n=15/กลุ่ม) อาสาสมัครและปริมาณสำหรับหนูที่สิ้นหวังในพฤติกรรมในแต่ละกลุ่มแสดงไว้ในตารางที่ 1 ปริมาณของ CTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า) และเศษส่วนที่แยกออกจากกันคำนวณโดยสูตรต่อไปนี้ ปริมาณการใช้=4.55 g/kg.d.bw × ผลผลิต ซึ่งกำหนดตามการคำนวณขนาดยาที่เทียบเท่ากับมนุษย์ 3 ครั้งตามพื้นที่ผิวกาย ปริมาณของยา imipramine ที่เป็นบวกและสารเมตาโบไลต์ในลำไส้ (3-HPP และ HT) ถูกกำหนดขึ้นตามการศึกษาก่อนหน้านี้ (Gupte et al., 2016; Pablos et al., 2019) ภายหลังการให้ยาในกระเพาะวันละครั้งเป็นเวลา 7 วัน การทดสอบแบบเปิด (OFT) การทดสอบการระงับส่วนท้าย (TST) และการทดสอบการว่ายน้ำแบบบังคับ (FST) ได้ดำเนินการในวันที่ 8, 9 และ 10 ตามลำดับ วิธีเฉพาะของการทดสอบพฤติกรรมมีอธิบายไว้ในเอกสารประกอบ

หนู Sprague-Dawley เพศผู้ 72 ตัว (น้ำหนัก 160–180 กรัม อายุ 6 สัปดาห์) ซื้อมาจาก Shanghai Slack Laboratory Animal Company (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ก่อนการทดลองอย่างเป็นทางการ หนูทุกตัวต้องผ่านการทดสอบความชอบซูโครส (SPT) หลังจากการฝึกอบรมที่เกี่ยวข้อง หนูถูกแบ่งออกเป็น 8 กลุ่ม (n=9/กลุ่ม) ตามความชอบซูโครสของพวกมัน (รูปที่ S1) เสริม อาสาสมัครและปริมาณของหนูในแต่ละกลุ่มแสดงไว้ในตารางที่ 1 ปริมาณถูกกำหนดขึ้นตามค่าสัมประสิทธิ์การแปลงระหว่างหนูและหนูตามขนาดที่มีประสิทธิภาพในหนูที่สิ้นหวังด้านพฤติกรรม และปริมาณของยาควบคุมเชิงบวก fluoxetine นั้นสอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้านี้ (Hou et al., 2017) ทุกกลุ่มได้รับความเครียดที่ไม่รุนแรงเรื้อรังที่คาดเดาไม่ได้ (CUMS) หลายชุด ยกเว้นกลุ่มควบคุม ความเครียดถูกนำมาใช้อย่างต่อเนื่องและสุ่มเป็นเวลา 4 สัปดาห์ (ดูตารางเสริม S1 สำหรับรายละเอียด) อาหารและน้ำมีให้โดยอิสระสำหรับหนูควบคุม ซึ่งยังคงไม่ถูกรบกวนในอีกห้องหนึ่ง ยกเว้นการทดสอบพฤติกรรม อาสาสมัครได้รับการฉีดเข้าช่องท้อง 1 ชั่วโมงก่อนขั้นตอน CUMS ตลอดระยะเวลา 4 สัปดาห์ หลังจาก 28 วันของความเครียดอย่างต่อเนื่องและการบริหารให้ยา OFT, SPT และ FST ถูกดำเนินการในวันที่ 29, 31 และ 33 ตามลำดับ วิธีการเฉพาะของการทดลองเชิงพฤติกรรมแสดงอยู่ในเอกสารประกอบ

การเก็บตัวอย่างและการวิเคราะห์ทางชีวเคมี

หลังจากการทดสอบพฤติกรรม หนูที่อดอาหารถูกวางยาสลบด้วย pentobarbital sodium และเก็บเลือดครบส่วนเพื่อให้ได้ตัวอย่างซีรัม หลังจากการให้เลือดไปเลี้ยงหัวใจด้วยน้ำเกลือ เนื้อหาของฮิปโปแคมปัส ลำไส้ใหญ่ และซีกัลถูกรวบรวมและเก็บไว้ใน -80 ◦C ส่วนปลายลำไส้ใหญ่ถูกเอาออกและตรึงในพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4 เปอร์เซ็นต์ ระดับของ CORT, CRH, ACTH, TNF- , IL-1 , IFN- , cAMP, cGMP, T, GnRH, ทริปโตเฟน และไคนูเรนีนในซีรัม 5-HT, BDNF และ TNF- ในฮิบโปแคมปัส และ TNF- และ IFN- ในลำไส้ใหญ่ถูกวัดตามคำแนะนำที่มาพร้อมกับชุดเครื่องมือ ELISA ที่สอดคล้องกัน

จุลพยาธิวิทยา อิมมูโนฮิสโตเคมี และการทดสอบแบบ Western blotting

Hematoxylin และ eosin (H&E) และการย้อมสี Alcian blue-periodic acid-Schiff (AB-PAS) ถูกใช้เพื่อสังเกตการเปลี่ยนแปลงทางพยาธิสภาพในเนื้อเยื่อลำไส้ใหญ่ นอกจากนี้ การประเมินอิมมูโนฮิสโตเคมีของส่วนเหล่านี้ได้ดำเนินการเพื่อสังเกตการแสดงออกของโปรตีน ZO-1 ในเซลล์เยื่อบุผิวลำไส้ใหญ่ (Ding et al., 2020) รายละเอียดเกี่ยวกับการเตรียมตัวอย่างและการทดสอบแบบ western-blotting เพื่อกำหนดการแสดงออกของโปรตีน IDO1 ในลำไส้ใหญ่และฮิบโปมีอธิบายไว้ในวัสดุเสริม

การวิเคราะห์โปรไฟล์เชิงองค์ประกอบของจุลินทรีย์ในลำไส้

การจัดลำดับปริมาณงานสูง 16S rRNA ดำเนินการโดย MajorBio Co., Ltd. (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) และวิธีการโดยละเอียดและการประมวลผลข้อมูลแสดงอยู่ในวัสดุเสริม

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM) การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียว (ANOVA) ใช้เพื่อเปรียบเทียบหลายกลุ่มโดยใช้ซอฟต์แวร์ SPSS 200 ความแตกต่างถือว่ามีนัยสำคัญที่ p < 0.05="">

ผลลัพธ์

การวิเคราะห์ทางเคมีของเศษส่วนต่างๆ ที่แยกจาก CTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า)

ส่วนประกอบหลักมีลักษณะเฉพาะโดยใช้ UPLC-QTOF-MS (ตารางเสริม S2 และรูปที่ S2) และระบุองค์ประกอบทั้งหมด 21 รายการ ซึ่งรวมถึงองค์ประกอบฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ 16 รายการ องค์ประกอบของฟีนอลไกลโคไซด์ใน CTE 2 รายการ(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า), TG และ TG-PhG; และ 3 องค์ประกอบของอิริดอยด์ ไกลโคไซด์ใน CTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า), TG และ TG-IrG โดยรวมแล้วเนื้อหาสัมพัทธ์ของคาร์โบไฮเดรตทั้งหมดใน TP และ TO เท่ากับ 60.3 เปอร์เซ็นต์ และ 80.8 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ เนื้อหาที่เกี่ยวข้องของทั้งหมดไกลโคไซด์ใน TG เท่ากับ 87.7 เปอร์เซ็นต์ ในทำนองเดียวกัน ฟีนิลทานอยด์และอิริดอยด์ไกลโคไซด์คิดเป็น 86.7 เปอร์เซ็นต์ และ 53.4 เปอร์เซ็นต์ของ TG-PhG และ TG-IrG ตามลำดับ เนื้อหาของ echinacoside, verbascoside คือ verbascoside, 8-กรด epiloganic และกรด teniposide ในแต่ละส่วนจะแสดงในตารางที่ 2 และข้อมูลการตรวจสอบความถูกต้องของโครมาโตแกรมของ HPLC และวิธีการแสดงอยู่ในตารางเสริม S3 และรูปที่ S3

ผลของเศษส่วนต่าง ๆ ที่แยกจาก CTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า)และเมแทบอไลต์ทั่วไปโดยจุลินทรีย์ในลำไส้ในการทดสอบความสิ้นหวังทางพฤติกรรมในหนู

ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 2 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม หนูที่ได้รับยา imipramine (กลุ่มควบคุมเชิงบวก) 7 วันแสดงการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในระยะเวลาที่ไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ทั้งใน FST และ TST และไม่แสดงผลที่มีนัยสำคัญต่อระยะทางทั้งหมดที่เดินทางใน OFT . การเปลี่ยนแปลงที่คล้ายกันยังพบในCTE(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า), TG และ HT แสดงว่า CTE, TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT ออกฤทธิ์ยากล่อมประสาทและผลไม่เกี่ยวข้องกับความตื่นเต้นง่าย ดังนั้น TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT เป็นเศษส่วนออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่โดดเด่นซึ่งแยกจาก CTE และสารเมแทบอไลต์ทั่วไปโดยจุลินทรีย์ในลำไส้ตามลำดับ ที่น่าสนใจคือ ไม่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญในช่วงเวลาที่ไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ใน FST หลังจากการบริหาร TG-PhG และ TG-IrG เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม หรือใน TST หลังการให้ TG-PhG ซึ่งบ่งชี้ว่าอาจมีฟีนิลทานอยด์และอิริดอยด์ ไกลโคไซด์ มีความสำคัญในการทำงานของยากล่อมประสาทของ CTE

ผลกระทบทางเภสัชพลศาสตร์และการเปลี่ยนแปลงทางชีวเคมีของเศษส่วนเสริมไกลโคไซด์ที่แตกต่างกันและ HT ต่อหนู CUMS

ดังแสดงในตารางที่ 3 หนูที่อยู่ภายใต้กระบวนทัศน์ CUMS 28 วันแสดงการลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0001)="" ในการตั้งค่าซูโครสใน="" spt="" ระยะทางทั้งหมดที่เดินทาง="" และจำนวนการเลี้ยงใน="" oft="" รวมถึงการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.01)="" ของเวลาที่เคลื่อนที่ไม่ได้ทั้งหมดใน="" fst="" เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม="" ซึ่งบ่งชี้ถึงการเหนี่ยวนำของฟีโนไทป์ที่คล้ายกับภาวะซึมเศร้าในหนู="" cums="" การแสดงอาการซึมเศร้าถูกย้อนกลับในกลุ่ม="" flx="" (กลุ่มควบคุมที่เป็นบวก)="" ในทำนองเดียวกัน="" การรักษาด้วย="" cte,="" tg,="" tg-phg,="" tg-irg="" และ="" ht="" ส่งผลให้การตั้งค่าซูโครสกลับคืนสู่ระดับปกติในหนู="" cums="" ซึ่งเท่ากับ="" 102.7="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" 94.1="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" 89.8="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" 91.9="" เปอร์เซ็นต์="" และ="" 94.3="" เปอร์เซ็นต์ของ="" การควบคุมตามลำดับ="" อย่างต่อเนื่องในกลุ่ม="" fst,="" cte="" และ="" tg="" แสดงผลที่ชัดเจนที่สุด="" และเวลาที่ไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ถึง="" 103.3="" เปอร์เซ็นต์="" และ="" 93.4="" เปอร์เซ็นต์ของกลุ่มควบคุม="" ตามลำดับ="" ในขณะที่เวลาที่ไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ของกลุ่ม="" tg-phg,="" tg-irg="" และ="" ht="" เพียงถึงร้อยละ="" 62.1="" ร้อยละ="" 73.2="" และร้อยละ="" 69.9="" ของกลุ่มควบคุม="" การเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญที่คล้ายคลึงกัน="" (p="">< 0.05)="" ถูกสังเกตพบในระยะทางทั้งหมดที่เดินทางและจำนวนการเลี้ยงใน="" oft="" หลัง="">(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า)การบริหารให้ TG และ HT และการบำบัดด้วย TG-PhG และ TG-IrG มีแนวโน้มที่จะแก้ไขจำนวนการเลี้ยงในหนูแรท CUMS ผลการวิจัยพบว่า TG เป็นยาต้านอาการซึมเศร้าที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่โดดเด่นซึ่งแยกจาก CTE และฟีนิลทานอยด์และไอริดอยด์ไกลโคไซด์เป็นสิ่งที่ขาดไม่ได้ในการออกแรงต้านอาการซึมเศร้า นอกจากนี้ HT ยังแสดงให้เห็นว่าเป็นหนึ่งในสารออกฤทธิ์ของ TG in vivo

อย่างต่อเนื่อง ความทุกข์ทรมานจาก CUMS เพิ่มระดับของ CORT, CRF, ACTH, TNF- , IL-1 และ IFN- ในซีรัมและ TNF- ในฮิบโปแคมปัสของหนูได้อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม (p< 0.05),="" resulting="" in="" significant="" reductions="" (p="" <="" 0.05)="" in="" the="" levels="" of="" hippocampal="" 5-ht="" and="" bdnf="" (fig.="" 3).="" except="" for="" a="" non-significant="" difference="" in="" the="" level="" of="" hippocampal="" bdnf="" between="" flx="" and="" cums="" groups,="" the="" above-mentioned="" alterations="" in="" cums="" rats="" could="" be="" significantly="" reversed="" (p="" <="" 0.05)="" after="" administration="" of="" fluoxetine,="" cte="">(Cistancheสารสกัดทูบูโลซ่า), TG และ HT แสดงว่า CTE, TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT แสดงผลในทางที่ดีขึ้นต่อการกระตุ้นการทำงานเกินของแกน HPA การอักเสบที่รุนแรงของส่วนปลายและเส้นประสาท และข้อบกพร่องใน {{0}}HT และ BDNF ในทำนองเดียวกัน การรักษาด้วย TG-IrG และ TG PhG ช่วยลดระดับซีรัม CORT, TNF- , IFN- และ hippocampal TNF- ในซีรัม และเพิ่มระดับของ hippocampal 5-HT ในหนู CUMS (p <{8} }.05).="" การลดลงอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.05)="" ในระดับซีรัม="" crf="" และ="" acth="" ยังสังเกตพบในกลุ่ม="" tg-irg="" เมื่อเทียบกับกลุ่ม="" cums="" ที่น่าสนใจคือ="" ระดับซีรัม="" cort,="" tnf-="" ,="" acth="" และ="" crf="" ในกลุ่ม="" tg-phg="" และ="" tg-irg="" สูงกว่ากลุ่ม="" tg="" อย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.05)="" และระดับของ="" hippocampal="" 5-ht="" และ="" bdnf="" แสดงรูปแบบการแสดงออกที่ตรงกันข้าม="" (p="">< 0.05)="" ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าผลกระทบของ="" tg-phg="" และ="" tg-irg="" ต่อการอยู่ไม่นิ่งของแกน="" hpa="" การอักเสบของส่วนปลายและเส้นประสาท="" และการขาดแคลน="" 5-ht="" นั้นด้อยกว่า="" tg="" อย่างชัดเจน="" ซึ่งบ่งชี้ว่า="" phenylethanoid="" และ="" iridoid="" glycosides="" อาจออกแรง="">

TG และ HT ควบคุมแกน HPG และเมแทบอลิซึมของนิวคลีโอไทด์แบบวัฏจักรในหนู CUMS

วัดระดับของ T, GnRH, cAMP และ cGMP และอัตราส่วนของ cAMP และ cGMP (cAMP/cGMP) ในซีรัมที่อยู่ภายใต้ CUMS และผลลัพธ์แสดงในตารางที่ 4 ความเข้มข้นของ T, GnRH, cAMP และ cAMP/cGMP ในซีรัมลดลงอย่างมีนัยสำคัญ และระดับ cGMP เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p <0.05) ในกลุ่ม="" cums="" เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม="" ซึ่งบ่งชี้ว่าภายใต้="" cums="" ส่งผลให้มีการกดขี่ของแกน="" hpg="" และความผิดปกติของการเผาผลาญนิวคลีโอไทด์แบบวัฏจักร="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม="" cums="" ไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญในกลุ่ม="" flx="" น่าแปลกที่หลังจาก="">(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และการรักษาด้วย HT มีการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p < {{0}}.05)="" ในระดับซีรั่ม="" t,="" gnrh,="" camp="" และ="" camp/cgmp="" ในขณะที่ระดับ="" cgmp="" ในซีรัมลดลงอย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.05)="" ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า="">(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT ควบคุมแกน HPG และเมแทบอลิซึมของนิวคลีโอไทด์แบบวัฏจักรซึ่งเหนือกว่าการควบคุมฟลูอกซีตินในเชิงบวกอย่างชัดเจน

TG และ HT บรรเทาอาการอักเสบระดับต่ำในลำไส้และการหยุดชะงักของลำไส้ในหนู CUMS

การย้อมสี H&E ถูกใช้เพื่อประเมินความเสียหายทางสัณฐานวิทยาของลำไส้ใหญ่ และไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญในลำไส้ใหญ่ในกลุ่มการทดลอง (รูปที่ 4a) นอกจากนี้ ยังได้วิเคราะห์ผลกระทบของ TG และ HT ต่อการอักเสบในลำไส้และการหยุดชะงักของสิ่งกีดขวางในลำไส้ (รูปที่ 4b-d) เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม จำนวนเซลล์กุณโฑและความหนาของชั้นเมือกลดลงในกลุ่ม CUMS อย่างสม่ำเสมอ การแสดงออกของโปรตีนของ ZO-1 และระดับของ IFN- และ TNF- ในลำไส้ใหญ่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05)="" และเพิ่มขึ้น="" (p="">< 0.05)="" )="" ตามลำดับ="" ซึ่งชี้ให้เห็นว่าแม้ว่าจะไม่มีการสร้างความเสียหายทางเนื้อเยื่อที่เห็นได้ชัด="" แต่ภายใต้="" cums="" ส่งผลให้เกิดการอักเสบในระดับต่ำในลำไส้ใหญ่และการหยุดชะงักของสิ่งกีดขวางในลำไส้="" หลังจากฟลูออกซีทีน="">(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และการบำบัดด้วย HT จำนวนเซลล์กุณโฑและความหนาของชั้นเมือกเพิ่มขึ้น และระดับของ IFN- และ TNF- ในลำไส้ใหญ่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05)="" นอกจากนี้="" tg="" และ="" ht="" ยังเพิ่มการแสดงออกของโปรตีนของ="" zo-1="" อย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.05)="" จนถึงระดับที่ใกล้เคียงกับกลุ่มควบคุม="" ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า="">(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT สามารถบรรเทาการอักเสบระดับต่ำในลำไส้และลำไส้หยุดชะงักในหนู CUMS

ผลของ TG และ HT ต่อองค์ประกอบของจุลินทรีย์ในลำไส้

หลังจากลบลำดับที่ไม่มีเงื่อนไข ได้การอ่านที่มีประสิทธิภาพทั้งหมด 1,874,721 รายการ ผลลัพธ์ความหลากหลายอัลฟา (รูปที่ 5a) และความหลากหลายของเบต้า (รูปที่ 5b) แสดงให้เห็นว่าแม้ว่าความสมบูรณ์ (Chao) และความหลากหลาย (แชนนอน) ของจุลินทรีย์ในลำไส้ในเนื้อหา cecal จะไม่แตกต่างกัน แต่โครงสร้างโดยรวมของจุลินทรีย์ในลำไส้ใน แผนภาพการวิเคราะห์พิกัดหลัก (PCoA) แสดงให้เห็นความแตกต่างที่โดดเด่นระหว่างกลุ่มควบคุมและกลุ่ม CUMS นอกจากนี้ TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และการรักษาด้วย HT ช่วยเพิ่มความสมบูรณ์ของแบคทีเรียในหนู CUMS และทำให้เกิดความแตกต่างที่ชัดเจนในพล็อต PCoA เมื่อเปรียบเทียบกับหนู CUMS ซึ่งแสดงความคล้ายคลึงกันอย่างชัดเจนกับกลุ่มควบคุม โดยเฉพาะอย่างยิ่งเมื่อ TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)ถูกตรวจสอบ

การเปลี่ยนแปลงทางอนุกรมวิธานในจุลินทรีย์ยืนยันเพิ่มเติมว่า TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)มีผลบังคับอย่างมากต่อองค์ประกอบของจุลินทรีย์ในลำไส้ หลังจาก TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)การบริหาร ความอุดมสมบูรณ์ของแท็กซ่าที่เปลี่ยนแปลงส่วนใหญ่ในหนู CUMS ถูกย้อนกลับไปยังระดับที่คล้ายกับของกลุ่มควบคุม การลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (14.2 เปอร์เซ็นต์ , p < 0.05)="" และการตกแต่ง="" (53.6="" เปอร์เซ็นต์="" ,="">< 0.05)="" in="" the="" abundances="" of="" the="" phylum="" firmicutes="" and="" bacteroidetes="" were="" observed="" in="" the="" tg="">(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)กลุ่มเปรียบเทียบกับกลุ่ม CUMS (รูปที่ 5c) ตามลำดับ ในระดับครอบครัว (ตารางเสริม S4) อย่างสม่ำเสมอ TG ลดความอุดมสมบูรณ์ของ Ruminococcaceae (phylum Firmicutes) และ Peptococcaceae (phylum Firmicutes) ลง 33.9 เปอร์เซ็นต์ และ 82.9 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ เมื่อเทียบกับกลุ่ม CUMS (p <{6}} {0}}5).="" ในทางกลับกัน="" ความอุดมสมบูรณ์ของวงศ์="" erysipelotrichaceae="" (phylum="" firmicutes,="" 78.4="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" p="">< 0.05)="" และ="" muribaculaceae="" (ไฟลัม="" bacteroidetes,="" 77.3="" เปอร์เซ็นต์="" ,="" p="">< 0.05)="" กลับมีอยู่ในกลุ่ม="" tg="" อย่างสม่ำเสมอที่ระดับสกุล="" (รูปที่="" 5d),="" ความอุดมสมบูรณ์ของ="" anaerotruncus,="" harryflintia,="" ruminiclostri="" dium_9,="" ไม่จัดประเภท_f_ruminococcaceae="" (สมาชิกของตระกูล="" rumino-coccaceae)="" และ="" peptococcus="" (สมาชิกของวงศ์="" peptococcaceae)="" ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในขณะที่="" norank_f_erysipelotrichaceae,="" allo="" baculum,="" dubosiella="" (สมาชิกของวงศ์="" erysipelotrichaceae)="" และ="" norank_f{{24}="" }muribaculaceae="" (สมาชิกของวงศ์="" muribaculaceae)="" มีความอุดมสมบูรณ์ในกลุ่ม="" tg="" มากกว่าในกลุ่ม="" cums="">< 0.05).="" in="" addition,="" tg="" decreased="" the="" abundances="" of="" tyzzerella_3,="" acetatifactor,="" and="" norank_f_lachnospiraceae="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae="" (p="" <="" 0.05),="" although="" the="" abundance="" of="" the="" family="" lachnospiraceae="" was="" similar="" across="" all="" experimental="" groups.="" unlike="" tg,="" ht="" decreased="" the="" abundances="" of="" partially="" altered="" taxa="" induced="" by="" cums,="" including="" the="" family="" ruminococcaceae,="" 3="" genera="" (anaerotruncus,="" harryflintia,="" and="" ruminiclostridium_9)="" assigned="" to="" the="" family="" ruminococcaceae="" and="" 2="" genera="" (tyzzerella_3,="" acetatifactor)="" assigned="" to="" the="" family="" lachnospiraceae.="" additionally,="" converse="" variations="" were="" observed="" in="" the="" abundances="" of="" ruminococcaceae_ucg_013="" and="" streptococcus="" in="" the="" ht="" group.="" these="" results="" indicated="" that="" tg="" and="" ht="" exerted="" clear="" differences="" in="" the="" regulation="" of="" gut="" microbiota="" composition,="" and="" the="" effect="" of="" tg="" was="" superior="" to="" that="" of="" tg="" especially="" in="" altering="" the="" genera="" assigned="" to="" the="" family="" erysipelotrichaceae,="" peptococcaceae,="" and="">

การวิเคราะห์สหสัมพันธ์ของจุลินทรีย์ที่เปลี่ยนแปลงซึ่งได้รับผลกระทบจาก TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT, ฮอร์โมนที่เกี่ยวข้องกับแกน HPA, ไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ, 5-HT และ BDNF

เพื่อชี้แจงความสัมพันธ์ระหว่างการเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบของจุลินทรีย์ในลำไส้ที่ได้รับผลกระทบจาก TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT และลักษณะที่เกี่ยวข้องกับภาวะซึมเศร้าที่สอดคล้องกัน ทำการวิเคราะห์สหสัมพันธ์ของสเปียร์แมน ดังที่แสดงในรูปที่ 6 ระดับของ 5-HT และ BDNF ในฮิบโปมีความสัมพันธ์ทางบวกอย่างมีนัยสำคัญกับ norank_f_Muribaculaceae มิฉะนั้น สามารถระบุความสัมพันธ์ที่ชัดเจนระหว่างสกุลจุลินทรีย์ที่เปลี่ยนแปลงกับฮอร์โมนที่เกี่ยวข้องกับแกน HPA โดยเฉพาะอย่างยิ่ง Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae, norank_f_ Erysipelotrichacea และ Peptococcus มีความสัมพันธ์อย่างมากกับการทำงานของแกน HPA ซีรั่ม CORT, CRF และ ACTH มีความสัมพันธ์เชิงลบกับ Dubosiella, norank_f_Muribaculaceae และ norank_f_Erysipelotrichacea และความสัมพันธ์เชิงบวกกับ Peptococcus นอกจากนี้ Dubosiella และ norank_f_ Erysipelotrichacea แสดงความสัมพันธ์เชิงลบกับ colonic IFN- และ hippocampal TNF- ในขณะที่ความสัมพันธ์ที่คล้ายกันมีอยู่ใน Allobaculum, Harryfinita และ serum และ hippocampal TNF- เช่นเดียวกับใน norank _f_Lachnospiracea และซีรั่ม IFN- และ TNF- ในทางตรงกันข้าม Peptococcus มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับ colonic TNF- และ serum TNF- ในทำนองเดียวกัน norank_f_Muribaculaceae มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับ IFN- และ TNF- ในซีรัม ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าจุลชีพที่เปลี่ยนแปลง โดยเฉพาะอย่างยิ่งบางสกุลที่เป็นของวงศ์ Erysipelotrichaceae, Peptococcaceae และ Muribaculaceae ซึ่งได้รับผลกระทบโดยเฉพาะจาก TG แสดงให้เห็นความสัมพันธ์ที่แข็งแกร่งกับฮอร์โมนที่เกี่ยวข้องกับแกน HPA และโปรอักเสบไซโตไคน์พร้อมๆ กัน ซึ่งแสดงให้เห็นถึงบทบาทที่สำคัญ ของจุลินทรีย์ในลำไส้ในการควบคุมการทำงานของแกน HPA และการอักเสบ

TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT ยับยั้งเมแทบอลิซึมของทริปโตเฟน-ไคนูเรนีนในหนู CUMS

ผลกระทบของTG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และค่า HT ในระดับทริปโตเฟนและไคนูเรนีนในซีรัมของหนูแรท ตลอดจนการแสดงออกของ IDO1 ในลำไส้ใหญ่และฮิบโปแคมปัส ดังแสดงในรูปที่ 7 และรูปที่ 8 เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม ระดับของทริปโตเฟนในซีรัมลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม CUMS ตรงกันข้ามกับระดับของไคนูเรนีนและอัตราส่วนของไคนูเรนีนต่อทริปโตเฟนที่เพิ่มขึ้น (Kyn /Trp) และการแสดงออกของโปรตีน IDO1 ในลำไส้ใหญ่และฮิปโปแคมปัส เมื่อเทียบกับกลุ่ม CUMS เซรั่ม Kyn/Trp ในกลุ่ม FLX ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (p< 0.05).="" tg="">(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และการรักษาด้วย HT ส่งผลให้ระดับทริปโตเฟนในซีรัมในหนู CUMS เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p < {0}}.05)="" และระดับของซีรัม="" kynurenine="" และ="" kyn/trp="" ลดลง="" (p="">< 0.05)="" นอกจากนี้="" tg="" ยังยับยั้งการแสดงออกของโปรตีน="" ido1="" ในลำไส้ใหญ่ของหนู="" cums="" อย่างมีนัยสำคัญ="" (p="">< 0.05)="" ในขณะที่ความแตกต่างที่ไม่มีนัยสำคัญในการแสดงออกของโปรตีน="" ido1="" ในฮิบโปถูกสังเกตระหว่างกลุ่ม="" cums="" และ="" tg="" อย่างไรก็ตาม="" ผลของ="" ht="" ต่อการแสดงออกของโปรตีน="" ido1="" ในลำไส้ใหญ่และฮิปโปแคมปัสนั้นตรงกันข้ามกับผลของ="" tg="" ซึ่งบ่งชี้ว่า="" tg="" และ="" ht="" ยับยั้งเมแทบอลิซึมของทริปโตเฟน-ไคนูเรนีน="" โดยลดการแสดงออกของ="" ido1="" ในลำไส้ใหญ่และฮิบโปแคมปัสของหนู="" cums="" ตามลำดับ="">

การอภิปราย

ในการศึกษานี้ ใช้แบบจำลองสัตว์สองแบบเพื่อคัดกรองสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพใน CT(Cistancheทูบูโลซ่า)ที่บรรเทาพฤติกรรมซึมเศร้าได้เป็นครั้งแรก TP และ TO เป็นส่วนผสมที่ไม่มีประสิทธิภาพมากที่สุดใน CTE ในขณะที่ TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)แสดงศักยภาพสูงสุดในการรักษาภาวะซึมเศร้า การศึกษาก่อนหน้านี้เกี่ยวกับ CT(Cistancheทูบูโลซ่า), เช่นเดียวกับCistancheพืชส่วนใหญ่มุ่งเน้นไปที่ฤทธิ์ทางชีวภาพของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ที่มีเนื้อหาสูงสุดและละเลยความสำคัญของอิริดอยด์ไกลโคไซด์และส่วนผสมอื่น ๆ ที่มีน้อย น่าสนใจ การศึกษาของเราแสดงให้เห็นว่าไกลโคไซด์ฟีนิลทานอยด์และอิริดอยด์มีผลเสริมฤทธิ์กันในการไม่อยู่นิ่งของแกน HPA การอักเสบอย่างรุนแรงที่บริเวณรอบข้างและเส้นประสาท และข้อบกพร่องในฮิปโปแคมปัส 5-HT และ BDNF ซึ่งอาจเป็นเหตุผลสำคัญสำหรับยากล่อมประสาทที่ได้เปรียบ ผลกระทบของTG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด). ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำเพิ่มเติมถึงลักษณะหลายองค์ประกอบและหลายเป้าหมายของยาสมุนไพร และเตือนเราว่าส่วนประกอบที่มีระดับต่ำกว่า แม้แต่ส่วนผสมตามรอยก็อาจมีบทบาทสำคัญในผลทางเภสัชวิทยา

ความเครียดเรื้อรังทำให้เกิดสมาธิสั้นของแกน HPA ซึ่งกระตุ้นให้เกิดภาวะซึมเศร้า เช่นเดียวกับการปราบปรามของแกน HPG ผ่านการปลดปล่อย GnRH ที่ลดลงและ/หรือความไวของต่อมใต้สมองของ GnRH (Kirby et al., 2009) ในขณะเดียวกัน cAMP และ cGMP เป็นศูนย์กลางระดับกลางที่สำคัญซึ่งอาศัยสารสื่อประสาทและฮอร์โมนหลายชนิดเพื่อสร้างผลกระทบทางสรีรวิทยา (Siawrys et al., 2002) การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้แสดงให้เห็นอย่างสม่ำเสมอว่าการเกิดภาวะไต-หยางบกพร่องมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับความผิดปกติของแกนต่อมใต้สมองส่วนไฮโปทาลามัส-ต่อมใต้สมอง (Zhang et al., 2019) ในกลุ่มอาการขาดยางไต-หยาง พบว่ามีการลดระดับซีรัมแคมป์และแคมป์/cGMP อย่างเห็นได้ชัด ในการศึกษานี้ เราพบว่า TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)สามารถยับยั้งระดับซีรั่ม CORT, CRF และ ACTH และเพิ่มปริมาณ T และ GnRH ในซีรัมในหนู CUMS ซึ่งบ่งชี้การฟื้นตัวของความผิดปกติของแกน HPA และ HPG หลังการให้ยา TG นอกจากนี้ TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)ย้อนกลับการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในระดับของ serum cAMP/cGMP ในหนูที่ได้รับ CUMS ดังนั้นกลไกพื้นฐานที่เป็นไปได้ของ CT(Cistancheทูบูโลซ่า) ในการรักษาภาวะซึมเศร้าและภาวะขาดยางในไตอาจมีความคล้ายคลึงกันบางส่วนและควรได้รับการสำรวจเพิ่มเติม นอกจากนี้ การผลิตความต้องการทางเพศและพฤติกรรมเป็นกระบวนการสะท้อนประสาทที่ซับซ้อน ฮอร์โมนเพศเป็นแหล่งสำคัญของความตื่นเต้นทางเพศจากส่วนกลาง และการขาดฮอร์โมนเพศอาจทำให้ความต้องการทางเพศลดลงหรือเสื่อมสมรรถภาพทางเพศ (Holloway and Wylie, 2015) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง 5-HT ที่มากเกินไปจะยับยั้งการปลดปล่อย GnRH ซึ่งเป็นสาเหตุสำคัญของการเสื่อมสมรรถภาพทางเพศเรื้อรังหลังการรักษาด้วย SSRIs ในระยะยาว (Prasad et al., 2015) ในการศึกษาของเรา fluoxetine (ตัวแทนของ SSRIs) ไม่ได้ผลในความผิดปกติของแกน HPG อย่างไรก็ตาม แม้ว่า TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)ปรับปรุงระดับของ 5-HT ในฮิบโปแคมปัสอย่างมีนัยสำคัญ การเปลี่ยนแปลงที่คล้ายกันในระดับ T และ GnRH ในซีรัมยังสังเกตพบ ดังนั้นจึงเป็นการบรรเทาการกดขี่ของแกน HPG ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นถึงข้อได้เปรียบที่ชัดเจนของ CT(Cistancheทูบูโลซ่า) ในการรักษาภาวะซึมเศร้าและต้องมีการศึกษากลไกภายในที่รับผิดชอบต่อผลกระทบเหล่านี้ต่อไป

หลักฐานที่เพิ่มขึ้นแสดงให้เห็นว่าลำไส้เป็นเป้าหมายที่เป็นไปได้สำหรับการรักษาโรคเรื้อรังโดยใช้สารประกอบธรรมชาติที่มีการดูดซึมต่ำ (Zhou et al., 2020) การวิจัยล่าสุด (Wei et al., 2019) ระบุว่าการรักษาด้วย CUMS ทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงของจุลินทรีย์ในอุจจาระและความผิดปกติของลำไส้ ซึ่งเอื้อต่อการบุกรุกของแบคทีเรียในเยื่อบุลำไส้และทำให้ปฏิกิริยาการอักเสบรุนแรงขึ้นในลำไส้ใหญ่ สอดคล้องกับรายงานฉบับนั้น ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่า 4 สัปดาห์ของการสัมผัส CUMS ทำให้เกิดการลดลงของจำนวนเซลล์กุณโฑและความหนาของชั้นเมือกในลำไส้ใหญ่ของหนูอย่างกว้างขวาง รวมถึงการเริ่มมีอาการของการหยุดชะงักของลำไส้ที่แสดงโดยการซึมผ่านของลำไส้ที่เพิ่มขึ้น ซึ่งถูกกำหนดโดย การวัดโปรตีน ZO-1 นอกจากนี้ การแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของปัจจัยที่ทำให้เกิดการอักเสบ (เช่น TNF- และ IFN- ) ถูกสังเกตพบในลำไส้ใหญ่ ดังนั้น การค้นพบนี้บ่งชี้ว่าแม้ว่าจะไม่มีการสร้างความเสียหายทางเนื้อเยื่อที่เห็นได้ชัด แต่การรักษาด้วย CUMS ได้เริ่มการอักเสบของลำไส้ใหญ่และการหยุดชะงักของลำไส้ การศึกษาก่อนหน้านี้ได้รายงานว่า CT ออกแรงเพิ่มประสิทธิภาพในการป้องกันโรคลำไส้ใหญ่อักเสบจาก DSS ในหนู (Jia et al., 2014) ไม่สอดคล้องกัน TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)นอกจากนี้ยังแสดงเพื่อบรรเทาการอักเสบระดับต่ำในลำไส้และการหยุดชะงักของอุปสรรคในลำไส้ของหนู CUMS ซึ่งเน้นย้ำศักยภาพในการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของลำไส้ใหญ่

การศึกษาอย่างกว้างขวางยังแสดงให้เห็นว่าความสัมพันธ์ที่เชื่อมโยงจุลินทรีย์ในลำไส้ แกน HPA และการอักเสบมีความซับซ้อนและมีบทบาทสำคัญในการพัฒนาภาวะซึมเศร้า (Misiak, et al., 2020) การเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบของจุลินทรีย์ในลำไส้อาจนำไปสู่การปลดปล่อยไซโตไคน์ที่เพิ่มขึ้นและการสังเคราะห์โมเลกุลที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพขนาดเล็ก (Du et al., 2020) ไซโตไคน์บางชนิด (เช่น TNF- ) อาจผ่านอุปสรรคเลือดและสมองและเป็นตัวกระตุ้นที่มีศักยภาพของแกน HPA (Misiak et al., 2020) ในทางกลับกัน การกระตุ้นมากเกินไปของแกน HPA สามารถนำไปสู่โรค dysbiosis ของจุลินทรีย์ในลำไส้ การอักเสบเรื้อรังในลำไส้ใหญ่ และการเปลี่ยนแปลงการซึมผ่านของลำไส้ (Misiak et al., 2020) สอดคล้องกับการศึกษาก่อนหน้านี้ การปรับเปลี่ยนจุลินทรีย์ในลำไส้ด้วยยา TG มีแนวโน้มว่าจะส่งผลต่อการบรรเทาภาวะซึมเศร้า เราสังเกตว่า TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)ย้อนกลับปริมาณจุลชีพอนุกรมวิธานที่มีอยู่มากมายในระดับต่างๆ ในหนูที่ได้รับ CUMS ให้อยู่ในระดับที่ใกล้เคียงกับกลุ่มควบคุม โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สกุลหลักที่เปลี่ยนแปลงไปของวงศ์ Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae และ Muribaculaceae มีความสัมพันธ์อย่างมากกับแกน HPA และการอักเสบ สอดคล้องกับผลลัพธ์ของเรา ครอบครัว Peptococcaceae, Erysipelotrichaceae และ Muribaculaceae ได้รับรายงานว่ามีบทบาทสำคัญในการรักษาความสมบูรณ์ของเยื่อเมือกและการเกิดการอักเสบ (Kankoush, 2015; Borton et al., 2017; Zhang et al., 2020) ดังนั้นเราจึงคาดการณ์ว่า TG สามารถลดความอุดมสมบูรณ์ของบางสกุลที่กำหนดให้กับตระกูล Erysipelotrichacea, Peptococcaceae และ Muribaculaceae ได้ ต่อมาบรรเทาการอักเสบระดับต่ำในลำไส้ใหญ่, สมาธิสั้นของแกน HPA และการหยุดชะงักของความสมบูรณ์ของเยื่อเมือก ที่น่าสนใจในการศึกษาของเรา มีสกุลเดียวที่ชื่อหรือ ank_f_Muribaculaceae มีความสัมพันธ์กับ 5-HT และ BDNF ในฮิบโปแคมปัส กลไกเฉพาะของความสัมพันธ์ยังไม่ชัดเจนและจำเป็นต้องได้รับการตรวจสอบเพิ่มเติม มิฉะนั้น ผลการวิจัยยังชี้ให้เห็นว่าเป็นเรื่องยากมากสำหรับสกุลที่เปลี่ยนแปลงส่วนใหญ่ที่เกิดจาก TG ที่จะส่งผลกระทบโดยตรงต่อระดับของ 5-HT ในฮิบโปแคมปัส เพื่ออธิบายว่าการเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบของจุลินทรีย์ในลำไส้มีอิทธิพลต่อระดับของฮิปโปแคมปัส 5-HT หลังการรักษาด้วย TG อย่างไร ความสัมพันธ์ที่ซับซ้อนซึ่งเชื่อมโยงกับการเผาผลาญของทริปโตเฟน แกน HPA ไซโตไคน์ที่มีการอักเสบ และ 5-HT ดึงดูดความสนใจของเรา ทริปโตเฟนเป็นกรดอะมิโนจำเป็นสำหรับมนุษย์และน้อยกว่า 1 เปอร์เซ็นต์ถูกใช้ในการสังเคราะห์โปรตีน โดยส่วนใหญ่ (มากกว่า 90 เปอร์เซ็นต์) จะถูกแปลงโดย IDO1 และทริปโตเฟน 2,3-ไดออกซีเจเนส 2 (TDO2) เป็นไคนูเรนีน และประมาณ ร้อยละ 5 ถูกขับเคลื่อนโดยทริปโตเฟนไฮดรอกซีเลสไปตามเส้นทางเซโรโทนิน (Duan, et al. 2018) ระดับของ 5-HT ในสมองส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับความพร้อมของทริปโตเฟนต่อพ่วง เนื่องจากทริปโตเฟนถูกขนส่งเข้าสู่สมองผ่านตัวขนส่งกรดอะมิโนที่เป็นกลาง (Duan et al., 2018) IDO1 เอนไซม์จำกัดอัตราในขั้นตอนแรกของวิถีไคนูเรนีน ถูกเหนี่ยวนำโดยหลักโดย IFN- และไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบอื่นๆ เช่น IL-1 และ TNF- (Kennedy et al., 2017) ซึ่งแสดงให้เห็นว่ามีความเกี่ยวข้องกับจุลินทรีย์ในลำไส้ในการศึกษาของเรา ตามที่รายงาน ทริปโตเฟนจำนวนมากขึ้นจะถูกเผาผลาญผ่านวิถีคีนูเรนีน ดังนั้นจึงลดการแปลงทริปโตเฟนเป็น 5-HT และเชื่อมโยงกับ 5-HT ที่ลดลงซึ่งมักพบในภาวะซึมเศร้า (O'Mahony et al., 2558). ดังนั้น ระดับทริปโตเฟนที่ต่ำกว่าและ Kyn/Trp ที่สูงขึ้นจึงเป็นเรื่องปกติและตรงกับความเสี่ยงที่เพิ่มขึ้นของอารมณ์ซึมเศร้า หลังการให้ยา TG การแสดงออกที่มากเกินไปของ IDO1 ในลำไส้ใหญ่ถูกยับยั้ง ส่งผลให้ระดับทริปโตเฟนในซีรัมเพิ่มขึ้นและ Kyn/Trp ในซีรัมลดลง ซึ่งเผยให้เห็นถึงความเชื่อมโยงระหว่าง microbiota ในลำไส้และฮิบโปแคมปัส 5-ระดับ HT ที่ได้รับผลกระทบจาก TG ในขณะเดียวกัน BDNF ซึ่งเป็นสมาชิกในครอบครัวของนิวโรโทรฟิน มีความจำเป็นสำหรับการสร้างความแตกต่างของเซลล์ การอยู่รอดของเซลล์ประสาท การสร้างไซแนปส์ และกระบวนการสร้างเส้นใยประสาทในภาวะซึมเศร้า (Greenberg et al., 2009) การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้แสดงให้เห็นว่า BDNF มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการทำงานของเยื่อเมือกในลำไส้และ microbiota ในลำไส้ (Maqsood and Stone, 2016) เช่นเดียวกัน การเปลี่ยนแปลงในจุลินทรีย์ในลำไส้ได้รับรายงานว่ามีศักยภาพในการเพิ่มระดับของการแสดงออกของ BDNF และส่งผลต่อการพัฒนาพฤติกรรมที่คล้ายกับภาวะซึมเศร้า (Du et al., 2020) อย่างไรก็ตาม เช่นเดียวกับการแปรผัน HT 5-HT เป็นไปไม่ได้อย่างยิ่งที่สกุลที่เปลี่ยนแปลงส่วนใหญ่ที่เกิดจาก TG ในการศึกษาของเราจะส่งผลกระทบโดยตรงต่อระดับของ BDNF ในฮิบโป และการเชื่อมต่อและกลไกภายในของโมเลกุลจำเป็นต้องได้รับการตรวจสอบเพิ่มเติม

ในทางตรงกันข้าม HT ซึ่งเป็นจุลินทรีย์ในลำไส้ของสาร TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด), ยังแสดงผลยากล่อมประสาทในการศึกษานี้, ซึ่งสอดคล้องกับกิจกรรมการป้องกันระบบประสาทที่ได้เปรียบ (Hu et al., 2014). ที่น่าเป็นห่วง HT ยังสามารถลดไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ ฮอร์โมนที่เกี่ยวข้องกับแกน HPA และ HPG และความเข้มข้นของฮิปโปแคมปัส 5-HT ให้อยู่ในระดับที่ใกล้เคียงกับการควบคุมในหนู CUMS ในขณะที่จุลินทรีย์ที่เปลี่ยนแปลงส่วนใหญ่ได้รับผลกระทบ โดย HT มีความสัมพันธ์ที่อ่อนแอกับดัชนีทางสรีรวิทยาข้างต้น ซึ่งบ่งชี้ว่า microbiota ในลำไส้อาจไม่ใช่เป้าหมายของฤทธิ์ต้านอาการซึมเศร้าของ HT นอกจากนี้ HT ยังยับยั้งการแสดงออกของ IDO1 ที่มากเกินไปในฮิบโปแคมปัส แต่ไม่ใช่ในลำไส้ใหญ่ ควบคู่ไปกับระดับทริปโตเฟนในซีรัมที่เพิ่มขึ้น การเกิดขึ้นของความแตกต่างที่ชัดเจนระหว่างTG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT อาจเกิดจากการดูดซึม HT เข้าสู่กระแสเลือดที่ดีเยี่ยมและความสามารถของ HT ในการข้ามอุปสรรคของเลือดและสมอง (Robles-Almazan et al., 2018) ซึ่งยังบ่งชี้ว่าความสามารถในการเผาผลาญที่แข็งแกร่งของจุลินทรีย์ในลำไส้คือ สำคัญอย่างยิ่งในกิจกรรมยากล่อมประสาทของ TG นอกเหนือจากการทำงานทางสรีรวิทยา ดังนั้นเราจึงได้พิสูจน์เบื้องต้นแล้วว่าปฏิกิริยาแบบสองทิศทางของไฟโตเคมิคอลและไมโครไบโอตาในลำไส้มีบทบาทสำคัญในการรักษาภาวะซึมเศร้าด้วยการบริหาร TG (ดังแสดงในรูปที่ 9)

บทสรุป

สรุป TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)มีหน้าที่หลักในการออกฤทธิ์ยากล่อมประสาทของ CT(Cistancheทูบูโลซ่า)สะท้อนให้เห็นในผลเสริมฤทธิ์กันของฟีนิลทานอยด์และอิริดอยด์ไกลโคไซด์ต่อการกระตุ้นไฮเปอร์แอคติเวทของแกน HPA การอักเสบบริเวณรอบข้างและเส้นประสาทอย่างรุนแรง และข้อบกพร่องใน 5-HT และ BDNF ในฮิบโปแคมปัส นอกจากนี้ ศักยภาพของกลไกระดับโมเลกุลของฤทธิ์ต้านอาการซึมเศร้าของ TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)ทำได้โดยการทำงานร่วมกันแบบสองทิศทางของไฟโตเคมิคอลและจุลินทรีย์ในลำไส้ นอกจากนี้ การแก้ไขแกน HPG ที่ถูกกดทับและความผิดปกติของไซคลิกนิวคลีโอไทด์โดย TG(ไกลโคไซด์ทั้งหมด)และ HT ซึ่งไม่ได้รับการควบคุมโดยการรักษาด้วย SSRIs ที่แสดงโดย fluoxetine แสดงให้เห็นถึงข้อดีที่ชัดเจนของ CT ในการรักษาภาวะซึมเศร้า การปรับดังกล่าวแสดงถึงกลยุทธ์ที่มีแนวโน้มในการรักษาภาวะซึมเศร้าโดยใช้CT(Cistancheทูบูโลซ่า) และยาสมุนไพรพื้นบ้านที่คล้ายคลึงกัน

ผลงานของผู้เขียน

XL, YP และ LF ออกแบบการทดลองและวิเคราะห์ข้อมูล LF และ JW ทำการทดลองและวิเคราะห์ข้อมูล LF และ XL ร่างต้นฉบับ PM มีส่วนในการทดลองกับสัตว์ทดลองและการทดสอบตัวอย่าง และ LZ มีส่วนในการวิเคราะห์องค์ประกอบของจุลินทรีย์ในลำไส้ ข้อมูลทั้งหมดถูกสร้างขึ้นภายในบริษัท และไม่มีการใช้โรงงานกระดาษ ผู้เขียนทุกคนตกลงที่จะรับผิดชอบงานทุกด้านเพื่อให้มั่นใจในความสมบูรณ์และความถูกต้อง

การประกาศผลประโยชน์ที่แข่งขันกัน

ผู้เขียนประกาศว่าไม่มีความขัดแย้งทางผลประโยชน์

รับทราบ

งานนี้ได้รับการสนับสนุนโดยทุนจากโครงการวิจัยและพัฒนาหลักแห่งชาติ (2017YFC1702400)

วัสดุเสริม

เนื้อหาเพิ่มเติมที่เกี่ยวข้องกับบทความนี้สามารถพบได้ในเวอร์ชันออนไลน์ที่ doi:10.1016/j.phymed.2021.153471

จาก: 'ไกลโคไซด์ทั้งหมด จากต้นกำเนิดของCistanchetubulosaบรรเทาพฤติกรรมที่คล้ายภาวะซึมเศร้า: ปฏิสัมพันธ์แบบสองทิศทางของไฟโตเคมิคอลและจุลินทรีย์ในลำไส้โดยหลี่ ฟาน และคณะ

---ไฟโตเมดิซีน 83 (2021) 153471/ https://doi.org/10.1016/j.phymed.2021.153471