ความแตกต่างของส่วนประกอบทางเคมีและกิจกรรมทางชีวภาพของชิ้นผลิตภัณฑ์ดิบและผลิตภัณฑ์แปรรูปไวน์จาก Cistanche Deserticola

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

Ying Zhang, Yuewu Wang, Song Yang, Yunfeng Xiao, Haibin Guan, Xin Yue, Xiaoqin Wang และเซียงกรีหลี่

Abstraกะรัต

เป็นยาสมุนไพรจีนที่มีชื่อเสียงCistanche deserticolaได้ถูกนำมาใช้ในการรักษาโรคไต (คลิกเพื่อดูผลิตภัณฑ์ที่เกี่ยวข้อง)ในประเทศจีนเป็นเวลาหลายพันปี ทั้งวัตถุดิบของCistanche deserticolaslices (RCD) และผลิตภัณฑ์ Wine Steam-Processed Product (WSCD) ถูกนำมาใช้ทางคลินิกเพื่อผลลัพธ์ที่แตกต่างกัน ในการศึกษานี้ อิทธิพลของกระบวนการนึ่งด้วยไวน์ (SPW) จากCistanche deserticolaได้ทำการศึกษาองค์ประกอบทางเคมีและผลกระทบทางชีวภาพ การวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA) และการวิเคราะห์เชิงปริมาณถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาความแตกต่างในองค์ประกอบทางเคมี ยังได้ศึกษาผลของการบำรุงไตเพื่อเปรียบเทียบความแตกต่างระหว่าง RCD และ WSCD ผลลัพธ์ PCA ระบุว่าสามารถแยกความแตกต่างได้อย่างชัดเจนใน RCD และ WSCD ผลการวิเคราะห์เชิงปริมาณพบว่า WSCD มีพอลิแซ็กคาไรด์รวม, PhGs ทั้งหมด, ไอโซแอคทีโอไซด์ และออสมันธุไซด์บีในปริมาณที่สูงกว่า RCD ในขณะที่มีเนื้อหาเท่ากับ 2? -acetylacteoside และ acteoside ลดลงหลังจาก SPW การเปรียบเทียบ RCD และ WSCD กับกิจกรรมทางชีววิทยาพบว่าทั้งคู่สามารถฟื้นฟูระดับฮอร์โมนเพศในรูปแบบของภาวะขาดไต-หยางและปรับปรุงผลการต้านอนุมูลอิสระ Te WSCD ช่วยเพิ่มน้ำหนักอวัยวะภายในของไตและถุงน้ำเชื้อได้ดีกว่ามาก ผลการวิจัยพบว่า SPW เปลี่ยนองค์ประกอบทางเคมีและเพิ่มกิจกรรมทางชีวภาพ

AKA: ราชาแห่ง Cistanche--Dr.You

บทนำ

Cistanche deserticolaเป็นยาจีนโบราณทั่วไปและมักใช้เป็นยาชูกำลังในประเทศจีนและญี่ปุ่นมาหลายปีแล้ว หรือที่เรียกกันทั่วไปว่า "โสมทะเลทราย"Cistanche deserticolaได้รับการบันทึกเป็นระดับสูงสุดเป็นครั้งแรกใน "Shennong's Herbal Classic of Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)" เมื่อประมาณ 100 ปีก่อนคริสตกาล และใช้รักษาโรคต่างๆ ได้แก่ ภาวะไตบกพร่อง, ความอ่อนแอ, ภาวะมีบุตรยากของสตรี, ตกขาวผิดปกติ, โรคเมโตรฮาเจียมาก (คนผิวขาว) , อาการหนาวในเอวและหัวเข่า และอาการท้องผูกเรื้อรังในผู้สูงอายุ [1]. จนถึงตอนนี้ มีการแยกองค์ประกอบหลักหลายอย่าง เช่น พอลิแซ็กคาไรด์ [2, 3], ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ (PhGs) [1, 4], อิริดอยด์ [1] และลิกนานอยด์ [1, 5] ในหมู่พวกเขา PhGs และพอลิแซ็กคาไรด์เป็นส่วนประกอบหลักที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพในCistanche deserticola[6–9]. การทดลองทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ได้พิสูจน์แล้วว่าCistanche deserticolaสามารถเพิ่มการผลิตฮอร์โมนเทสโทสเตอโรนและปกป้องสเปิร์ม กระตุ้นการเพิ่มจำนวนเซลล์และเพิ่มอัตราการรอดชีวิตของเซลล์ แสดงกิจกรรมที่ทำเครื่องหมายไว้สำหรับศักยภาพทางเพศ ปรับปรุงความจำ ต่อต้านริ้วรอย กำจัดอนุมูลอิสระ และป้องกันระบบประสาท [10]

เพื่อลดความเป็นพิษและ/หรือเพิ่มประสิทธิภาพ สมุนไพรจีนโบราณส่วนใหญ่ควรได้รับการประมวลผลก่อนใบสั่งยา ขั้นตอนกระบวนการดั้งเดิม ได้แก่ การทำความสะอาด กระบวนการน้ำ (การบดในน้ำ การนึ่ง และการคั่ว) และกระบวนการฟรี (การกวนด้วยไวน์ น้ำส้มสายชู เกลือ หรือน้ำผึ้ง) [14] ในระหว่างกระบวนการ ส่วนประกอบทางเคมีอาจมีการเปลี่ยนแปลง: เนื้อหาสัมพัทธ์ของส่วนประกอบบางอย่างอาจมีการเปลี่ยนแปลงหรือส่วนประกอบใหม่อาจเกิดขึ้น [15] Te กระบวนการของCistanche deserticolaมีประวัติอันยาวนานและCistanche deserticolaควรแปรรูปโดยการแช่ไวน์ข้าวนึ่งตามที่อธิบายไว้ในตำรับยาจีน (ฉบับ พ.ศ. 2558) [16] SPW ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีอิทธิพลต่อผลกระทบต่อเส้นเมอริเดียนของไตตามทฤษฎีการแพทย์แผนจีน (TCM) [17] WSCD ได้รับการบันทึกครั้งแรกใน "ตำรา Lei Gongs ว่าด้วยการเตรียมและการเดือดของ Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun)" ในราชวงศ์เหนือและใต้ของจีน WSCD ควรใช้ในการรักษาภาวะไตบกพร่องและปกป้องน้ำอสุจิตามที่บันทึกไว้ใน "Taiping Shenghui Fang" ในราชวงศ์ซ่งของจีน อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีการศึกษาเปรียบเทียบองค์ประกอบทางเคมีระหว่าง RCD และ WSCD

การตรวจสอบทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่บ่งชี้ว่า WSCD สามารถบำรุงไตให้แข็งแรงโดยการกระตุ้นแกน hypothalamus-pituitary-gonad ที่มีองศาต่างกัน และถูกนำมาใช้ในการรักษาภาวะไตบกพร่อง เช่น ภาวะไต-หยางบกพร่อง [18] อย่างไรก็ตาม จนถึงขณะนี้ ความแตกต่างในกิจกรรมทางชีวภาพระหว่าง RCD และ WSCD ยังไม่ได้รับการวิจัย เมื่อเร็ว ๆ นี้ เพื่ออำนวยความสะดวกในการวิจัยเชิงทดลอง แบบจำลองสัตว์ที่บกพร่องของไต-หยาง ได้ถูกทำซ้ำโดยการฉีดสารไฮโดรคอร์ติโซนในปริมาณสูงในหนู ซึ่งในหนูจะแสดงอาการคล้ายกับที่อธิบายไว้ในภาวะขาด TCM ของไต-หยาง [19, 20] . หนูที่เป็นโรคไต-หยางมักมีอาการบางอย่าง เช่น น้ำหนักลด การบริโภคอาหารลดลง ความอ่อนแอ การดื่มน้ำเพิ่มขึ้น และกิจกรรมลดลง จากแบบจำลองของสัตว์นี้ ความแตกต่างในการบำรุง-ผลต่อไตระหว่าง RCD และ WSCD ถูกตรวจพบและแม้กระทั่งเปิดเผยสาระสำคัญทางวิทยาศาสตร์ของกระบวนการแบบจีนโบราณ

Cistanche deserticola

2. วัสดุและวิธีการ

2.1 วัสดุและเคมีภัณฑ์

สารมาตรฐานเช่น acteoside, isoacteoside, echinacoside, cistanoside A และ 2? - ซื้อ acetylacteoside จาก Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) Cistanoside F, cistanoside C, osmanthuside B และ tubuloside B ถูกซื้อจาก Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (เฉิงตู ประเทศจีน) ความบริสุทธิ์ของมาตรฐานทั้งหมดไม่น้อยกว่าร้อยละ 98 เมทานอลเกรด HPLC และอะซิโตไนไทรล์ซื้อจาก Aladdin Chemistry Inc. (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน) ได้รับน้ำปราศจากไอออนโดยใช้ระบบน้ำรีเอเจนต์ MilliQ50 SP (เบดฟอร์ด รัฐแมสซาชูเซตส์ สหรัฐอเมริกา) สำหรับการเตรียมตัวอย่างและโซลูชันแบบเคลื่อนที่ ตัวทำละลายอินทรีย์อื่นๆ ทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษานี้เป็นเกรดวิเคราะห์และซื้อจาก Shanghai Chemical Co. Ltd (เซี่ยงไฮ้ ประเทศจีน)

2.2 การเก็บตัวอย่าง

ดิบทั้งหมดCistanche deserticola(ตัวอย่าง 7 ชุด) ถูกเก็บรวบรวมโดยมหาวิทยาลัยการแพทย์มองโกเลียในจากมองโกเลียในและจังหวัดหนิงเซี่ย ทั้งหมดถูกระบุว่าเป็นcistancheทะเลทรายYC Maโดย Xiao qin Wang ศาสตราจารย์ภาควิชาเภสัชศาสตร์ในมหาวิทยาลัยการแพทย์มองโกเลียใน ตัวอย่างบัตรกำนัลถูกฝากไว้ที่ School of Pharmacy, Inner Mongolia Medical University หลังจากเก็บช่อดอกของCistanche deserticolaนำออก ก้านถูกตัดและทำให้แห้งที่อุณหภูมิห้องด้วยอากาศ จากนั้นจึงแบ่งชิ้นแบบสุ่มออกเป็นสองกลุ่มในแต่ละชุด: หนึ่งคือ RCD และอีกส่วนหนึ่งใช้สำหรับการเตรียม WSCD

WSCD ถูกเตรียมในห้องปฏิบัติการตามตำรับยาจีน (ฉบับปี 2015) [16] ซึ่งหมายความว่า RCD ที่หั่นแล้วแช่ในไวน์ข้าวด้วยภาชนะปิดสนิทเป็นเวลา 6 ชั่วโมงจนนุ่ม นึ่งในอ่างน้ำอีก 12 ชั่วโมงจนกระทั่ง พื้นผิวกลายเป็นสีดำและแห้งที่อุณหภูมิห้องด้วยอากาศ

2.3 การวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA)

การวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA) เป็นเทคนิคที่ซับซ้อนซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการลดขนาดของปัญหาหลายตัวแปร มันลดมิติของชุดข้อมูลดั้งเดิมโดยอธิบายความสัมพันธ์ระหว่างตัวแปรจำนวนมากในแง่ของปัจจัยพื้นฐานจำนวนน้อยกว่าโดยไม่สูญเสียข้อมูลอย่างมีนัยสำคัญ ในการศึกษานี้ ความแตกต่างระหว่าง RCD และ WSCD ดำเนินการโดย PCA ที่ไม่ได้รับการดูแลโดยใช้ซอฟต์แวร์ SIMCA 130 ตามพื้นที่พีคสัมพัทธ์ในโครมาโตกราฟี HPLC ด้วยความช่วยเหลือของ PCA พบว่าอิทธิพลของสารเคมีหลักต่อการจำแนกประเภทในกลุ่มตัวอย่างต่างๆ ถูกค้นพบ

2.4 การเตรียมตัวอย่าง

2.4.1 การเตรียมสารสกัดสำหรับสัตว์

RCD และ WSCD ถูกเลือกจากตัวอย่างที่รวบรวมและเตรียมตามที่บรรยายไว้ในส่วนที่ 2.2

RCD ที่ตากแห้งและหั่นเป็นชิ้นโดยใช้เครื่องบดเป็นผง (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.) ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ 1.0 กก. และแช่ในเอทานอล 50 เปอร์เซ็นต์เป็นเวลา 30 นาที และอัตราส่วนของพืช /เอทานอลที่ใช้คือ 1/10(w/w) จากนั้น มันถูกสกัดภายใต้กรดไหลย้อนสองครั้งเป็นเวลา 1 ชั่วโมงในแต่ละครั้ง สารสกัดทั้งสองถูกรวมกันและกรอง และเอทานอลถูกนำกลับคืนมาภายใต้ความดันที่ลดลงที่ 60∘ C.Te สารสกัดหยาบทั้งหมดของ PhGs ถูกทำให้แห้งในสุญญากาศที่ 60∘ C และทำให้บริสุทธิ์ด้วยเรซินที่มีรูพรุนขนาดใหญ่ สุดท้าย ได้รับสารสกัด PhGs ของ RCD และชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ สารสกัด PhGs ของ WSCD ได้มาตามขั้นตอนเดียวกันข้างต้น

ตะกอนจากการสกัด PhGs ถูกทำให้แห้งในอากาศและต้มสองครั้งเป็นเวลา 1.5 ชั่วโมงในแต่ละครั้งด้วยน้ำ 20 เท่า สารสกัดทั้งสองถูกรวมกันและหมุนเหวี่ยงที่ 4000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาที และส่วนลอยเหนือตะกอนถูกทำให้เข้มข้นและตกตะกอนด้วยเอทานอล 95 เปอร์เซ็นต์ หลังจากการปั่นเหวี่ยง ตะกอนถูกทำให้แห้งในสุญญากาศที่ 60∘ C ในที่สุด ได้สารสกัดโพลีแซ็กคาไรด์ของ RCD และชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ

สารสกัดพอลิแซ็กคาไรด์ของ WSCD ได้รับตามขั้นตอนเดียวกันข้างต้น

สารสกัด PhGs และพอลิแซ็กคาไรด์ของ RCD และ WSCD ถูกผสมสารแขวนลอยในน้ำตามลำดับ เมื่อหนูได้รับการรักษาด้วยปากเปล่า

2.4.2. ตัวอย่างการเตรียมการสำหรับการกำหนด PhGs

สารสกัด PhGs ในส่วน 2.4.1 ถูกชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำเป็น 0.15 ก. และสกัดโดย Ultrasonication ด้วยสารละลายเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ในน้ำ 50 มล. เป็นเวลา 40 นาที หลังจากเย็นตัวลง การลดน้ำหนักจะถูกเติมด้วยเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ ตัวอย่างและตัวทำละลายทั้งหมดถูกกรองผ่านเมมเบรน 0.45 ไมโครเมตรก่อนทำการวิเคราะห์ เนื้อหาของ PhG สี่ตัวใน RCD และ WSCD ถูกกำหนดหาโดยใช้ HPLC และ PhG ทั้งหมดถูกกำหนดหาโดยใช้ UV spectrophotometry

2.5. สภาพโครมาโตกราฟีของ HPLC และการกำหนด PhGs สี่ตัว

การแยกโครมาโตกราฟีดำเนินการในระบบ HPLC UltiMate 3000 (Thermo Fisher Scientific, USA) ซึ่งติดตั้งเครื่องสูบน้ำแบบไล่ระดับสองระดับ ช่องคอลัมน์ และเครื่องตรวจจับ DAD . ข้อมูลถูกรวบรวมและประมวลผลโดยใช้ระบบข้อมูลโครมาโตกราฟีของ ChromeLeon ตัวอย่างถูกแยกออกจากกันบน Agilent Zorbax SB-C18 (250mm×4.6 mm, 5 ?m) ด้วยเสาป้องกัน C18 (4.6mm×12.5 mm, 5 ?m) เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยอะซิโตไนไทรล์ (A) และ 0.1 เปอร์เซ็นต์ของสารละลายกรดฟอสฟอริก (B) ที่อัตราการไหล 1 มล./นาที การชะแบบเกรเดียนต์มีดังนี้: เริ่มต้น 0–13 นาที , เปลี่ยนเชิงเส้นจาก AB (5:95, v/v) เป็น AB (15:85, v/v); 13–25 นาที เปลี่ยนเป็น AB (20:80, v/v); 25–43 นาที เปลี่ยนเชิงเส้นเป็น AB (25:75, v/v) ความยาวคลื่นของเครื่องตรวจจับถูกตรวจสอบที่ 330 นาโนเมตร อุณหภูมิของคอลัมน์ถูกตั้งไว้ที่ 30∘ C และปริมาตรของตัวอย่างที่ฉีดคือ 10 ลิตร [21] สารละลาย Te stock ที่มีสี่มาตรฐานอ้างอิงถูกเตรียมโดยการละลายมาตรฐานอ้างอิงใน 50 เปอร์เซ็นต์ของเมทานอลจนถึงความเข้มข้นสุดท้ายที่ 0.20 มก./มล. สำหรับ 2-acetylacteoside, 0.20 มก./มล. สำหรับแอกทิโอไซด์, 0.05 มก./มล. สำหรับ osmanthuside B, และ 0.10 มก./มล. สำหรับไอโซแอคทีโอไซด์ จากนั้น สารละลายถูกเจือจางให้มีความเข้มข้นต่างกันห้าระดับด้วยการทำซ้ำสามครั้งเพื่อสร้างกราฟการปรับเทียบ ปริมาณตัวอย่างแสดงเป็นกรัม/กก. ของน้ำหนักดิบ

2.6. การกำหนด PhGs ทั้งหมด

PhGs ทั้งหมดถูกกำหนดหาโดยใช้วิธี UV spectrophotometry ที่ความยาวคลื่น 330nm ใน UV1000 spectrophotometer (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.) สารละลายสต็อกเตรียมโดยการละลายมาตรฐานอิชินาโคไซด์ในเมทานอล 50 เปอร์เซ็นต์ จนถึงความเข้มข้นสุดท้ายที่ 0.10 มก./มล. จากนั้นเจือจางเป็นความเข้มข้นต่างกัน 5 ระดับด้วยการทำซ้ำ 3 ครั้งเพื่อสร้างกราฟการปรับเทียบ

2.7. การหาปริมาณพอลิแซ็กคาไรด์

การหาปริมาณพอลิแซ็กคาไรด์โดยใช้วิธีกรดฟีนอล-ซัลฟิวริก 1 มิลลิลิตรของสารละลายตัวอย่างถูกใส่ลงในหลอดทดลองขนาด 20 มิลลิลิตรที่มีจุกแก้ว และ 1 มิลลิลิตรของสารละลายฟีนอลร้อยละ 6 และกรดซัลฟิวริกเข้มข้น 5 มิลลิลิตรถูกเติมและเขย่าเป็นเวลา 5 นาที ของผสมถูกถ่ายโอนไปยังอ่างน้ำเดือดเป็นเวลา 10 นาทีและถูกทำให้เย็นลงจนถึงอุณหภูมิห้องเพื่อตรวจจับรังสีอัลตราไวโอเลต การดูดกลืนแสงอัลตราไวโอเลตถูกเฝ้าติดตามที่ 480 นาโนเมตรในเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ UV1000 มาตรฐานอ้างอิงของแอนไฮดรัสดี-กลูโคสถูกชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำและละลายในน้ำกลั่นจนถึงความเข้มข้นสุดท้ายที่ 0.10 มก./มล. จากนั้น สารละลายถูกเจือจางให้มีความเข้มข้นต่างกันห้าระดับด้วยการทำซ้ำสามครั้งเพื่อสร้างกราฟการปรับเทียบ

2.8. การทดลองกับสัตว์

2.8.1. สัตว์และที่อยู่อาศัย.

หนู SD เพศผู้ที่มีวุฒิภาวะทางเพศ (180-200 ก.) ถูกซื้อจากฟาร์มสัตว์ทดลอง Xinglong (ปักกิ่ง) (อายุ: 6 สัปดาห์) และใบอนุญาตสำหรับสัตว์ในห้องปฏิบัติการคือ SCXK (จิง):2016-0003 ขั้นตอนสำหรับสัตว์ทั้งหมดได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการวิจัยสัตว์มหาวิทยาลัยการแพทย์มองโกเลียใน และดำเนินการตามแนวทางของสถาบันสุขภาพแห่งชาติเกี่ยวกับหลักการดูแลสัตว์ (2004) สัตว์ทั้งหมดถูกเลี้ยงไว้ในระบบกั้นที่มีอุณหภูมิ 21–23 องศาและความชื้นสัมพัทธ์ 40–65 เปอร์เซ็นต์ และรอบมืด/สว่าง 12 ชั่วโมง หนูได้รับอาหารและน้ำโดยอิสระและปรับให้เข้ากับสภาพแวดล้อมข้างต้นเป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์

2.8.2. ปริมาณและการสุ่มตัวอย่าง

หนูถูกย้ายไปยังกรงเมตาบอลิซึมของแต่ละคน และสุ่มแบ่งออกเป็น 6 กลุ่ม (?=10 ในแต่ละกลุ่ม) พวกเขาได้รับการฉีดเข้ากล้ามของไฮโดรคอร์ติโซนโซเดียมซัคซิเนต 15 มก./กก. (ซื้อจาก Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd. เทียนจิน ประเทศจีน) เป็นเวลา 2 สัปดาห์ ยกเว้นกลุ่มที่ 1 ซึ่งฉีดด้วยน้ำเกลือทางสรีรวิทยาในปริมาณเท่ากัน ในวันที่ 14 มีการรวบรวมน้ำหนักตัว การบริโภคอาหาร การดื่มน้ำ ปริมาณปัสสาวะ และกิจกรรมที่เกิดขึ้นเองภายใน 5 นาที เพื่อให้แน่ใจว่าแบบจำลองการขาดหยางของไตทำสำเร็จหรือไม่ ตั้งแต่วันที่ 15 มีการบำบัด 6 กลุ่มดังนี้ กลุ่มที่ 1 และกลุ่มที่ 2 (กลุ่มแบบจำลอง, M) ได้รับการบำบัดด้วยน้ำกลั่นในปริมาณที่เท่ากัน กลุ่มที่ 3 (สารสกัดจาก PhGs ของกลุ่ม RCD, PR) ได้รับการรักษาด้วย {{12 }}.42 g/kg PhGs สกัดของ RCD ซึ่งเท่ากับประมาณ 1.8 g/kg ของวัตถุดิบCistanche deserticolaและกลุ่มอื่นๆ เหมือนกัน กลุ่มที่ 4 (สารสกัด PhG ของกลุ่ม WSCD, PW) ได้รับการบำบัดด้วยขนาดยา 0.49 ก./กก. สารสกัด PhGs ของ WSCD กลุ่มที่ 5 (สารสกัดพอลิแซ็กคาไรด์ของกลุ่ม RCD, SR) คือ ที่บำบัดด้วยสารสกัดพอลิแซ็กคาไรด์ของ RCD 0.18 ก./กก. และกลุ่มที่ 6 ถูกบำบัดด้วยขนาดยา 022 ก./กก. (สารสกัดพอลิแซ็กคาไรด์ของ วสท. หนูทุกตัวได้รับการรักษาโดยการให้น้ำย่อยในกระเพาะต่อวัน หลังจากการรักษาเป็นเวลา 1 เดือน หนูถูกปฏิเสธอาหารเป็นเวลา 12 ชั่วโมงก่อนการเก็บเลือด ในวันรุ่งขึ้น หนูทุกตัวถูกวางยาสลบและทำการสังเวย ในระหว่างการทดสอบ หนูถูกชั่งน้ำหนักสัปดาห์ละครั้งเพื่อปรับขนาดยาและชั่งน้ำหนักอีกครั้งก่อนจะทำการสังเวย ตัวอย่างเลือดถูกเก็บในหลอดเอพเพนดอร์ฟที่มีสารละลาย EDTA-2Na 10 เปอร์เซ็นต์ ซีรั่มถูกแยกออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 2000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 15 นาที และเก็บไว้ที่ -80 องศา สำหรับการใช้งานต่อไป นอกจากนี้ ไต อัณฑะ ท่อน้ำอสุจิ ต่อมลูกหมาก และถุงน้ำเชื้อจะถูกลบออกและชั่งน้ำหนักอย่างรวดเร็ว หลังจากการชั่งน้ำหนัก ลูกอัณฑะถูกแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวเพื่อตรวจวัด SOD และ MDA

2.9. การวิเคราะห์ผลของฮอร์โมนและสารต้านอนุมูลอิสระ

ระดับฮอร์โมนเทสโทสเตอโรน (T) และเอสตราไดออล (E2) ถูกกำหนดในศูนย์ตรวจสอบคุณภาพ Qingdao Kechuang โดยวิธีภูมิคุ้มกันด้วยรังสีและสี ชั่งน้ำหนักลูกอัณฑะที่แช่แข็งและผสมกับน้ำเกลือทางสรีรวิทยาเย็น (W/W) 20 เท่า โฮโมจีเนตของลูกอัณฑะที่ได้มาโดยเนื้อเยื่อที่เป็นเนื้อเดียวกันในอ่างน้ำแข็งถูกหมุนเหวี่ยงเพื่อให้ได้ส่วนลอยเหนือตะกอน เนื้อหาของ SOD และ MDA ของลูกอัณฑะถูกกำหนดโดยชุด SOD และ MDA ตามคำแนะนำ

2.10. การวิเคราะห์ทางสถิติ.

ความสำคัญของความแตกต่างระหว่างกลุ่มต่างๆ ถูกเปรียบเทียบโดยการทดสอบ ANOVA แบบทางเดียว ตามด้วยการทดสอบของ Schefe โดยมีขีดจำกัดที่มีนัยสำคัญเท่ากับ 005 โดยใช้ซอฟต์แวร์ SPSS 25.0 ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน (SD)

(n=3).

Cistanche deserticolaสารสกัด

3. ผลลัพธ์

3.1. การวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงของ PhGs หลังจาก SPW โดยใช้ PCA

เพื่อเปรียบเทียบการเปลี่ยนแปลงของ PhGs หลังจาก SPW พีคโครมาโตกราฟี 9 พีคถูกเลือกเป็นพีคที่มีลักษณะเฉพาะและถูกระบุ โครงสร้างของพวกเขาแสดงไว้ในรูปที่ 1 พื้นที่พีคสัมพัทธ์ซึ่งคำนวณสำหรับการแสดงออกเชิงปริมาณ โครมาโตแกรมของ HPLC ดังแสดงในรูปที่ 2 ระบุว่าเนื้อหาสัมพัทธ์ของ PhG หลักมีการเปลี่ยนแปลงระหว่าง SPW วิเคราะห์ PCA บนพื้นที่พีคสัมพัทธ์ของส่วนประกอบ 9 อย่างสำหรับการเลือกปฏิบัติของกลุ่มตัวอย่างต่างๆ RCD และ WSCD อยู่ไกลกันในแผนภาพคะแนน (รูปที่ 3(a)) ซึ่งบ่งชี้ว่าตัวอย่างถูกจำแนกเป็นสองกลุ่ม จึงมีความเชื่อกันว่าเนื้อหาขององค์ประกอบทางเคมีต่างกัน เพื่อค้นหาเครื่องหมายทางเคมีที่เป็นไปได้เพิ่มเติมสำหรับการเลือกปฏิบัติ ได้ทำการวิเคราะห์ทางสถิติเพิ่มเติมเพื่อสร้างการโหลด Biplot (รูปที่ 3(b)) จุดสูงสุด 2, 3, 4, 6 และ 7 จะลดลงหลังจาก SPW ขณะที่ Peaks 5, 8 และ 9 จะเพิ่มขึ้น และทั้งหมดนี้เป็นองค์ประกอบที่สำคัญที่สุดในการแยกแยะ RCD และ WSCD เนื้อหาสัมพัทธ์ของพีค 1 ไม่ได้แปรผันมากนักหลังจาก SPW

3.2. ปริมาณ Te ของ Total Polysaccharides และ PhGs เปลี่ยนแปลงหลังจาก SPW

ดังแสดงในรูปที่ 3(b) ส่วนประกอบ 8 รายการ (5, 8 และ 9 เพิ่มขึ้นและ 2, 3, 4, 6 และ 7 ลดลง) มีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสำคัญและมีผลกระทบสำคัญต่อการจัดกลุ่มตัวอย่าง ในหมู่พวกเขา isoacteoside และ Osmanthuside B เพิ่มขึ้นมากที่สุดในขณะที่ 2? -acetylacteoside และ acteoside ลดลงมากที่สุด ดังนั้นเนื้อหาของ isoacteoside, Osmanthuside B, 2? -อะซีติแลคติโอไซด์และแอกทิโอไซด์ถูกกำหนดหาโดย HPLC ดังที่แสดงในรูปที่ 1 พีค 4 คือแอกทิโอไซด์ พีค 5 คือไอโซแอกทีโอไซด์ พีค 7 คือ 2? -acetylacteoside และ peak 8 คือ osmanthuside B.Te Total PhGs ใน RCD และ WSCD โดยใช้วิธี UV และหา polysaccharides ทั้งหมดโดยใช้วิธี phenol-sulfuric acid ผลลัพธ์ถูกแสดงไว้ในตารางที่ 1 isoacteoside, Osmanthuside B , พอลิแซ็กคาไรด์และ PhGs ทั้งหมดใน WSCD เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับ RCD 2? -acetylacteoside และ acteoside ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ

3.3. มีการสร้างแบบจำลองการขาดไต-หยางที่เกิดจาก Te Hydrocortisone

เมื่อเทียบกับกลุ่มปกติ หลังจากฉีดไฮโดรคอร์ติโซนโซเดียมซัคซิเนต 15 มก./กก. เข้ากล้ามเนื้อเป็นเวลา 2 สัปดาห์ น้ำหนักตัว การบริโภคอาหาร และกิจกรรมที่เกิดขึ้นเองลดลงอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05), and="" the="" water="" intake="" and="" urine="" volume="" were="" increased;="" the="" results="" were="" shown="" in="" table="" 2.te="" t="" and="" e2="" levels="" in="" the="" serum="" of="" the="" model="" group="" were="" lower="" than="" the="" normal="" group="" as="" shown="" in="" figure="" 4.="" from="" the="" above,="" the="" kidney-yang="" deficiency="" model="" was="" successfully="">

3.4. ผลกระทบของสารสกัดต่อน้ำหนักเฉลี่ยของอวัยวะภายในและดัชนี

หนูทั้งหมดและอวัยวะภายในของพวกมันถูกชั่งน้ำหนัก จากนั้นจึงคำนวณดัชนีอวัยวะภายในโดยเฉลี่ย เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม N กลุ่ม M มี sig ลดน้ำหนักอวัยวะภายในของไต ถุงน้ำเชื้อ หลอดน้ำอสุจิ และลูกอัณฑะในทันที ซึ่งบ่งชี้ว่าแบบจำลองการขาดยางไตและหยางที่เกิดจากไฮโดรคอร์ติโซนนั้นประสบความสำเร็จ เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม M น้ำหนักของอวัยวะภายในที่สังเกตได้ทั้งหมดเพิ่มขึ้นในกลุ่ม PW และ SR กลุ่ม PR มีน้ำหนักของลูกอัณฑะ ถุงน้ำอสุจิ และต่อมลูกหมากเพิ่มขึ้น และกลุ่ม SW มีน้ำหนักของไต ลูกอัณฑะ น้ำอสุจิเพิ่มขึ้น และถุงน้ำเชื้อ เมื่อเทียบกับกลุ่ม PR กลุ่ม PW จะดีกว่าในไต ถุงน้ำเชื้อ และต่อมลูกหมาก ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่ม SR และ SW ในน้ำหนักของลูกอัณฑะ หลอดน้ำอสุจิ ถุงน้ำเชื้อ และต่อมลูกหมาก ผลลัพธ์ถูกแสดงในตารางที่ 3

เมื่อเทียบกับกลุ่ม N ดัชนีอวัยวะภายในของไต อัณฑะ หลอดน้ำอสุจิ และถุงน้ำเชื้อลดลงในกลุ่ม M เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม M กลุ่ม PW และ SR ได้เพิ่มดัชนีของไต อัณฑะ ต่อมลูกหมาก และถุงน้ำเชื้อ กลุ่ม PR ได้เพิ่มดัชนีของลูกอัณฑะ ต่อมลูกหมาก และถุงน้ำเชื้อ และกลุ่ม SW มี เพิ่มดัชนีของไต, ลูกอัณฑะและถุงน้ำเชื้อ เมื่อเทียบกับกลุ่ม PR กลุ่ม PW จะดีกว่าในไต ถุงน้ำเชื้อ และต่อมลูกหมาก กลุ่ม Te SW และ SR มีดัชนีไต, ลูกอัณฑะ, ถุงน้ำเชื้อและท่อน้ำอสุจิใกล้เคียงกัน ผลลัพธ์ถูกแสดงในตารางที่ 4

3.5. ผลกระทบของสารสกัดต่อระดับฮอร์โมน (T และ E₂)

ดังแสดงในรูปที่ 4 เมื่อเทียบกับกลุ่ม M ระดับของ T และ E2 ในกลุ่มบำบัดทั้งหมด (PW, PR, SW และ SR) เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (P<0.05). however,="" the="" pw="" group="" was="" better="" than="" pr="" group="" in="" the="" level="" t="" and="" e2.="" te="" sr="" and="" sw="" groups="" had="" no="" significant="">

3.6. Te ผลกระทบของสารสกัดต่อผลของสารต้านอนุมูลอิสระ

SOD เป็นเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระที่สำคัญ MDA เป็นผลิตภัณฑ์ของ lipid peroxidation ซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ถึงระดับความเสียหายของสารออกซิไดซ์ เนื้อหาของ SOD และ MDA สะท้อนถึงขอบเขตของความสามารถในการออกซิแดนท์และสารต้านอนุมูลอิสระ ดังแสดงในรูปที่ 5 เมื่อเทียบกับกลุ่ม M ผลของสารต้านอนุมูลอิสระในกลุ่มการรักษาทั้งหมด (PW, PR, SW และ SR) ได้รับการปรับปรุง กลุ่ม SW มีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระมากที่สุด

Cistanche deserticola

4. การอภิปราย

ก่อนการใช้งานทางคลินิก วัสดุดิบควรอยู่ภายใต้เทคนิคกระบวนการแบบจีนโบราณ การนึ่งเป็นหนึ่งในวิธีการแปรรูปแบบดั้งเดิมสำหรับสมุนไพรจีนบางชนิด ซึ่งให้สีดำที่เกิดจากปฏิกิริยา Maillard [22] เพิ่มปริมาณของส่วนประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพบางอย่าง [23] และกิจกรรมทางเภสัชวิทยา WSCD เป็นหนึ่งในผลิตภัณฑ์ในกระบวนการที่ดีกว่าในแง่ของการบำรุงไต เมื่อเทียบกับ RCD ตามที่ระบุไว้ในเภสัชตำรับจีนฉบับปี 2015 ในการศึกษานี้ ผล PCA ระบุว่า SPW ต้องเปลี่ยนโปรไฟล์ทางเคมีของ RCD ยิ่งไปกว่านั้น 8 องค์ประกอบใน PhGs ได้เปลี่ยนแปลงไปอย่างมาก PhGs ทั้งหมด พอลิแซ็กคาไรด์ทั้งหมด ไอโซแอคทีโอไซด์ และออสมันธุไซด์ บี เพิ่มขึ้นมากที่สุด ในขณะที่ 2? -acetylacteoside และ acteoside ลดลงหลังจาก SPW ผลการวิจัยพบว่า SPW สามารถเปลี่ยนแปลงองค์ประกอบทางเคมีของ RCD ได้ ปริมาณเทของ PhGs ที่มีกลูโคราโนซิลมอยอิตีไตรแทนที่ 1,3,4- (เช่น แอกทิโอไซด์, 2? -อะซิติแลคติโอไซด์ และซิสตาโนไซด์ C) ลดลงใน WSCD อย่างไรก็ตาม ความเข้มข้นของไอโซเมอร์ของพวกมันด้วย 1,3,{{13 }} กลูโคราโนซิล มอยอิตีไตรแทนที่ (เช่น ไอโซแอคทีโอไซด์และทูบูโลไซด์บี) เพิ่มขึ้น ซึ่งบ่งชี้ว่าการเปลี่ยนแปลงขององค์ประกอบทางเคมีอาจเกิดขึ้นระหว่าง SPW และปฏิกิริยาไฮโดรไลซิสจะเป็นหนึ่งในสาเหตุ เส้นทางการเปลี่ยนแปลงที่เสนอแสดงไว้ในรูปที่ 6 การเพิ่มขึ้นของโพลีแซคคาไรด์ Te หลังจากรายงาน SPW ในโสม [24]

Cistanche deserticolaได้รับการบันทึกไว้เพื่อกระตุ้นไตและย้อนกลับการลดระดับฮอร์โมนเพศชายและมีผลต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ต้านการอักเสบ [25] และ PhGs และ polysaccharides เป็นส่วนประกอบทางชีวภาพหลักสองอย่างในCistanche deserticola. ในฐานะที่เป็น PhGs isoacteoside และ Osmanthuside B มีข้อบกพร่องในการต่อต้านอนุมูลอิสระและต้านการอักเสบ [26, 27] ดังนั้น จึงทำการศึกษาเปรียบเทียบผลทางเภสัชวิทยาในระดับฮอร์โมนเทสโทสเตอโรนและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของ RCD และ WSCD ในรูปแบบของการขาดสารไต-หยางที่เกิดจากสารไฮโดรคอร์ติโซน ต่อมไร้ท่อถูกรบกวนและระดับของฮอร์โมนเพศในเลือดลดลงอย่างมาก ในการศึกษานี้ ผลการวิเคราะห์ฮอร์โมนเพศพบว่าทั้ง RCD และ WSCD สามารถเพิ่มระดับของ T และ E2 ได้อย่างมีนัยสำคัญ และทั้ง PhGs และ polysaccharides แสดงให้เห็นถึงการปรับปรุงของฮอร์โมนเพศ Te WSCD ดีกว่า RCD โดยเฉพาะอย่างยิ่งในกลุ่มสกัด PhGs ผลลัพธ์ของดัชนีอวัยวะภายในแสดงให้เห็นว่าทั้ง PhGs และพอลิแซ็กคาไรด์สามารถปรับปรุงตุ้มน้ำหนักอวัยวะภายในและดัชนีน้ำหนักของพวกมันได้ ในกลุ่มสารสกัดจาก PhGs WSCD ดีกว่า RCD ในการเพิ่มน้ำหนักและดัชนีของไตและถุงน้ำเชื้อ นอกจากนี้,Cistanche deserticolaมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระอย่างมีนัยสำคัญ โดยเฉพาะกลุ่มสารสกัดโพลีแซคคาไรด์ที่มี WSCD ตามที่กล่าวไว้ข้างต้น ทั้ง RCD และ WSCD สามารถปรับปรุงกลุ่มอาการขาดยางของไตและหยางได้ อย่างไรก็ตาม WSCD นั้นดีกว่า RCD ในการเพิ่มระดับของ T, E2, น้ำหนัก และดัชนีของหลอดน้ำอสุจิและอัณฑะ ผลการศึกษาผลทางเภสัชวิทยาระบุว่า SPW ได้เปลี่ยนองค์ประกอบทางเคมีของ PhGs และเพิ่มเนื้อหาของโพลีแซ็กคาไรด์ ซึ่งจะเพิ่มระดับฮอร์โมนเพศและเพิ่มประสิทธิภาพในการต้านอนุมูลอิสระ

5. สรุป

การศึกษาครั้งนี้เป็นการค้นพบการเปลี่ยนแปลงของ PhGs โพลีแซ็กคาไรด์รวม และผลทางเภสัชวิทยาใน RCD และ WSCD ต่อหนูแรทที่ขาดไตและหยาง โดยเฉพาะอย่างยิ่งระดับฮอร์โมนและฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่ากระบวนการของสมุนไพรจีนโบราณอาจเปลี่ยนแปลงองค์ประกอบทางเคมีของสมุนไพรและส่งผลต่อฤทธิ์ทางชีวภาพของสมุนไพร นอกจากนี้ยังสนับสนุนให้มีการกำหนดผลิตภัณฑ์ดิบและผลิตภัณฑ์แปรรูปในคลินิกแตกต่างกัน

แคปซูล cistanche

อ้างอิง

[1] Y. Jiang และ P.-F. ตู "การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีในCistancheสปีชีส์" Journal of Chromatography A, vol. 1216, no. 11, pp. 1970–1979, 2009.

[2] W. Zhao, H. Yan, Z.-Y. เหลียง, ย.-เจ. จาง และ X.-Q. เจียว "การวิเคราะห์โครงสร้างของพอลิแซ็กคาไรด์ที่ละลายน้ำได้ SPA ที่แยกได้จากลำต้นของCistancheทะเลทรายหม่า," Chemical Journal of Chinese Universities, vol. 26, no. 3, pp. 461–463, 2005.

[3] Q. ดง, เจ. เหยา, เจ.-น. Fang และ K. Ding "การกำหนดลักษณะโครงสร้างและฤทธิ์ทางภูมิคุ้มกันของพอลิแซ็กคาไรด์ที่สกัดได้ในน้ำเย็น 2 ชนิดจากCistancheทะเลทรายYC Ma," Carbohydrate Research, vol. 342, no. 10, pp. 1343–1349, 2007.

[4] X.-M. Wu และ P.-F. ตู "การแยกตัวและลักษณะพิเศษของ ?- (1?→6)-กลูแคนจากCistancheทะเลทราย," Journal of Asian Natural Products Research, vol. 7, no. 6, pp. 823–828, 2005.

[5] B. Koˇs´ıkov´a, A. Ebringerov´a, and R. Naran, "ลักษณะเฉพาะของเศษส่วนลิกนิน-คาร์โบไฮเดรตที่แยกได้จากปรสิตไม้Cistanche Deserticola YC Ma.," Holzforschung, vol. 53, no. 1, pp. 33–38, 1999.

[6] G. Sheng, X. Pu, L. Lei, P. Tu และ C. Li, "Tubuloside B จากCistancheซัลซ่าช่วยเซลล์ประสาท PC12 จาก 1-methyl-4- phenylpyridinium ion-induced apoptosis and oxidative stress" Planta Medica, vol. 68, no. 11, pp. 966–970, 2002

[7] ม.เติ้ง, เจ.-วาย. จ้าว X.-D. จู, P.-F. Tu, Y. Jiang และ Z.-B. Li, "ผลการป้องกันของ tubuloside B ต่อการตายของเซลล์ประสาทที่เกิดจาก TNF alpha" Acta Pharmacologica Sinica, vol. 25 ไม่ 10, pp. 1276–1284, 2004.

[8] X. Geng, L. Song, X. Pu และ P. Tu, "ผลทางประสาทของ phenylethanoid glycosides จากCistanchesซัลซ่าต้าน 1- methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP) ที่เหนี่ยวนำให้เกิดความเป็นพิษของโดปามีนในหนู C57," Biological & Pharmaceutical Bulletin, vol. 27 , ฉบับที่ 6, หน้า 797–801, 2004.

[9] H. Chen, FC Jing, CL Li, PF Tu, QS Zheng และ ZH Wang "Echinacoside ช่วยป้องกันระดับเซลล์นอกเซลล์ของ striatal ของสารสื่อประสาทโมโนเอมีนจากการลดลงใน 6- หนูแผลไฮดรอกซีโดปามีน" Journal of Ethnopharmacology, ฉบับ 114 หมายเลข 3, หน้า 285–289, 2550.

[10] J. Pan, C. Yuan, C. Lin, Z. Jia และ R. Zheng "กิจกรรมทางเภสัชวิทยาและกลไกของ phenylpropanoid glycosides ตามธรรมชาติ" Die Pharmazie, vol. 58 หมายเลข 11, หน้า 767–775, 2546.

[11] G. Fu, H. Pang และ YH Wong, "phenylethanoid glycosides ที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติ: โอกาสในการนำไปสู่การบำบัดแบบใหม่" Current Medicinal Chemistry, vol. 15 ไม่ 25, pp. 2592–2613, 2008.

[12] X.-W. วัง, X.-F. Wang และ L.-Y. Wu, "การปรับปรุงการจำหนูของ phenylethanoid glycosides ของCistancheทะเลทราย," Chinese Pharmacological Bulletin, no. 19, pp. 41-42, 2002.

[13] เจ.-เอ็กซ์. Xie และ C.-F. วู "ผลของสารสกัดเอธานอลของCistancheทะเลทรายเกี่ยวกับเนื้อหาของสารสื่อประสาทโมโนเอมีนในสมองของหนู" Chinese Traditional and Herbal Drugs, no. 24, pp. 417– 419, 1993.

[14] H. Wu และ C.-J. Hu, วินัยกระบวนการแพทย์แผนจีน, People's Medical Publishing House, Beijing, China, 2012.

[15] ZZ Zhao, ZT Liang, K. Chan et al., "ปัญหาเฉพาะในการกำหนดมาตรฐานของ Chinese materia medica: processing" Planta Medica, vol. 76 หมายเลข 17, pp. 1975–1986, 2010.

[16] Chinese Pharmacopoeia Commission, Pharmacopoeia of the People's Republic of China 2015, ฉบับที่. IV, ตำรับยาแห่งสาธารณรัฐประชาชนจีน, ปักกิ่ง, จีน, 2015.

[17] เจ.-เอ็ม. Chen, Enlightening Primer of Materia Medical, สำนักพิมพ์หนังสือแพทย์แผนจีนโบราณ, ปักกิ่ง, จีน, 2552

[18] บ.-ร. Li และ Y.-C. เธอ, "ผลของการปรับสียาไตต่อแกน hypothalamus-pituitary-gonad (HPG)" Journal of Traditional Chinese Medicine, no. 7, หน้า 63–65, 1984.

[19] M. Chen, L. Zhao และ W. Jia "การศึกษาเมตาโบโนมิกเกี่ยวกับโปรไฟล์ทางชีวเคมีของแบบจำลองสัตว์ที่เกิดจากไฮโดรคอร์ติโซน" Journal of Proteome Research, vol. 4 ไม่ 6, หน้า 2391–2396, 2005.

[20] Q. Chen และ N.-Y. Yi, "Te animal models and drugs for Yindefciency and Yang-deficiency" ใน Experimental Methodology of Pharmacological Research in Traditional Chinese Medicine, People's Health Publishing House, Beijing, China, 1993.

[21] Z.-G. แม่ Z.-L. Yang, P. Li และ C.-H. Li, "การกำหนด phenylethanoid glycosides แปดชนิดพร้อมกันในสกุลต่างๆCistancheโดยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง" Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, vol. 31, no. 18, pp. 2838–2850, 2008.

[22] Z. Liu, Z. Chao, Y. Liu, Z. Song และ A. Lu "ปฏิกิริยา Maillard เกี่ยวข้องกับกระบวนการนึ่งของรากของ Polygonum multiform" Planta Medica, vol. 75 ไม่ 1, หน้า 84–88, 2552.

[23] ว.-ต. Chang, YH Choi, R. Van Der Heijden, et al., "การประมวลผลแบบดั้งเดิมส่งผลกระทบอย่างมากต่อองค์ประกอบของเมตาโบไลต์โดยการไฮโดรไลซิสในราก Rehmannia glutinosa" Chemical & Pharmaceutical Bulletin, vol. 59 เลขที่ 5, หน้า 546–552, 2011.

(24) ย.จิน, ย.-เจ. คิม, เจ.-เอ็น. Jeon et al., "ผลของโสมขาว, แดงและดำต่อคุณสมบัติทางเคมีกายภาพและ ginsenosides," Plant Foods for Human Nutrition, vol. 70, ไม่ 2, หน้า 141–145, 2015.

[25] ต.วัง, X.-Y. Zhang และ W.-Y. เสี่ย"CistancheทะเลทรายYC Ma, 'desert Ginseng': A review," American Journal of Chinese Medicine, vol. 40, no. 6, pp. 1123–1141, 2012.

[26] ส.-ย. น้ำ, H.-Y. คิม, M.-S. Yoou et al., "ฤทธิ์ต้านการอักเสบของ isoacteoside จาก Abeliophyllum distichum," Immunopharmacology and Immunotoxicology, vol. 2 37, ไม่ 3, น. 258–264, 2558.

[27] S. Chae, JS Kim, KA Kang, et al., "กิจกรรมต้านอนุมูลอิสระของ isoacteoside จาก Clerodendron trichotomum" Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. Current Issues, vol. 68 หมายเลข 5, หน้า 389–400, 2005.