ส่วนที่ 2 การเลือกปฏิบัติทางเคมีและทางพันธุกรรมของ Cistanches Herba จาก UPLC-QTOF/MS และบาร์โค้ดของ DNA

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

OPLS-DA และการระบุเครื่องหมาย เพื่อระบุตัวบ่งชี้ทางเคมีที่อาจเกิดขึ้นสำหรับการเลือกปฏิบัติของทั้งสองสปีชีส์ S-plot ของ OPLS-DA ถูกสร้างขึ้น (รูปที่ 3) ในแผนภาพ S แต่ละจุดแสดงถึงคู่ไอออน tR–m/z หนึ่งคู่ แกน X และ Y แสดงถึงการมีส่วนร่วมและความเชื่อมั่นของไอออนตามลำดับ ยิ่งระยะห่างที่คู่ไอออน tR–m/z ชี้จากศูนย์มากเท่าใด การมีส่วนร่วม/ความมั่นใจของไอคอนนี้ก็ยิ่งมากขึ้นตามความแตกต่างระหว่างสองกลุ่ม ดังนั้น tR–m/z ion ที่ชี้ไปที่ปลายทั้งสองของ 'S' แสดงถึงเครื่องหมายแสดงลักษณะเฉพาะที่มีความมั่นใจสูงสุดในแต่ละกลุ่ม ผลลัพธ์ของ OPLS-DA พบว่า UPLC-QTOF/MS สามารถใช้เพื่อแยกแยะCistanche ทะเลทรายจากCistanche tubulosa(รูปที่ 3). มีการกำหนดเครื่องหมายที่น่าเชื่อถือและมีนัยสำคัญทั้งหมดหกรายการเพื่ออำนวยความสะดวกในการเลือกปฏิบัติของกลุ่มเหล่านี้ (ตารางที่ 3) การระบุตัวตนของเครื่องหมายที่มีศักยภาพสามตัวได้รับมอบหมายอย่างไม่แน่นอน ส่วนประกอบที่มีความสัมพันธ์กับไอออนทั้งสามนี้ถูกระบุอย่างคร่าวๆ เป็นไอโซเมอร์ของแคมป์นีโอไซด์ II, ซิสตาโนไซด์ C และซิสตาโนไซด์ A สารประกอบเครื่องหมาย a, b และ c สามารถใช้เพื่อแยกความแตกต่างของพืชทั้งสองชนิดได้ เนื่องจากความเข้มข้นของไอออนของ a และ b ในCistanche ทะเลทรายสูงกว่าในCistanche tubulosa(รูปที่ 4A, 4B) และเครื่องหมาย c สามารถตรวจพบได้ในCistanche tubulosaแต่ไม่ใช่ในCistanche ทะเลทราย(รูปที่ 4C).

บาร์โค้ด DNA: ข้อมูลลำดับและประสิทธิภาพการระบุตัวตน

ข้อมูลลำดับถูกแสดงในตารางที่ 4 ระยะห่างทางพันธุกรรมเฉลี่ยของ psbA-trnH (0.1732) มากกว่าอีกสองบริเวณ (00740 , 0.1197) อย่างมีนัยสำคัญ ปริมาณ GC เฉลี่ยของ psbA-trnH (20.64 เปอร์เซ็นต์ ) น้อยกว่าอีกสองภูมิภาค (55.00 เปอร์เซ็นต์ , 55.00 เปอร์เซ็นต์ ) แม้ว่าจะไม่ได้รับอัตราความสำเร็จของ ITS และ ITS2 ในการศึกษานี้ แต่ภูมิภาค psbA-trnH ทำงานได้ดีในการขยายและจัดลำดับ PCR (100 เปอร์เซ็นต์, 87.23 เปอร์เซ็นต์) ประสิทธิภาพการระบุตัวตนทำได้โดยการวิเคราะห์ BLAST1 และวิธีการวัดระยะทางที่ใกล้ที่สุด และสะท้อนถึงอัตราความสำเร็จของบาร์โค้ดเป็นหลัก ขอบเขต psbA-trnH นั้นสูงกว่าบาร์โค้ดอีกสองตัวอย่างชัดเจนในด้านประสิทธิภาพการระบุตัวตนโดยอิงจากสองวิธี การขาดแคลนลำดับน่าจะเป็นสาเหตุที่ภูมิภาค ITS มีประสิทธิภาพการระบุตัวตน 100 เปอร์เซ็นต์ตามวิธี BLAST1 และ 0 ตามวิธีระยะทางใกล้ที่สุด

การวิเคราะห์ความแตกต่างทางพันธุกรรมโดยใช้พารามิเตอร์ 6 ตัว

หกพารามิเตอร์ถูกใช้เพื่อวิเคราะห์ความแปรผันเฉพาะภายในและความแตกต่างระหว่างกันโดยใช้บาร์โค้ดสามชนิด (ตารางที่ 5) ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญระหว่างความแปรผันระหว่างและเฉพาะภายในบ่งชี้ถึงประโยชน์ของบาร์โค้ดดีเอ็นเอ ในที่นี้ ระยะทางระหว่างความจำเพาะขั้นต่ำของบาร์โค้ดสามตัวนั้นสูงกว่าระยะทางในความจำเพาะสูงสุดทั้งหมด นอกจากนี้ บริเวณ psbA-trnH มีระยะทางภายในจำเพาะสูงสุดที่ใหญ่กว่าและระยะห่างระหว่างความจำเพาะเฉลี่ยมากกว่าบาร์โค้ดอีก 2 ตัวที่บ่งชี้ว่าบริเวณ psbA-trnH ทำงานได้ดีในการเลือกปฏิบัติของแหล่งกำเนิดสองชนิดของ Cistanches Herba

การวิเคราะห์ช่องว่างบาร์โค้ดเพื่อระบุ

Cistanche ทะเลทรายและCistanche tubulosaช่องว่างบาร์โค้ดนำเสนอความผันแปรที่โดดเด่นของระหว่างสายพันธุ์และสายพันธุ์ภายใน และแสดงให้เห็นถึงการแจกแจงแบบแยกส่วนและไม่ทับซ้อนกันระหว่างตัวอย่างภายในและระหว่างตัวอย่าง ในการศึกษานี้ (รูปที่ 5) ช่วงระยะทางถูกกำหนดเป็น 0–0.45 เนื่องจากระยะห่าง K2P มากที่สุดของ psbA-trnH ระหว่างCistanche ทะเลทรายและCistanche tubulosaใกล้เคียงกับ 0.45 บาร์โค้ดทั้งสามแสดงช่องว่างที่ชัดเจนในการแจกแจงรูปแบบเฉพาะภายในและระหว่างกัน นอกจากนี้ ช่องว่างของ psbA-trnH นั้นใหญ่กว่าบาร์โค้ดอีกสองตัวอย่างมีนัยสำคัญ ดังนั้น พื้นที่ psbA-trnH อาจเป็นบาร์โค้ดในอุดมคติสำหรับการเลือกปฏิบัติสองแหล่งกำเนิดของCistanchesเฮิร์บา.

ต้นไม้เพื่อนบ้านเข้าร่วม (NJ)

ต้นไม้นิวเจอร์ซีย์แสดงให้เห็นถึงความสัมพันธ์ระหว่างสปีชีส์และอำนวยความสะดวกในการกำหนดกลุ่มของพวกมัน ในการศึกษานี้ แผนผัง NJ ของบาร์โค้ดสามชนิดถูกสร้างขึ้นโดยใช้แบบจำลอง K2P (รูปที่ 6) ผลการวิจัยพบว่าต้นกำเนิดของ Cistanches Herba สองจุดรวมกันเป็นสองกลุ่มแยกกัน ดังนั้นต้นไม้นิวเจอร์ซีจึงแยกความแตกต่างอย่างชัดเจนระหว่างCistanche ทะเลทรายและCistanche tubulosa.

อภิปรายและข้อสรุป

Cistanches Herba เป็นยาสำคัญที่มักใช้ในการบำรุงชุมชนเอเชีย [38] อย่างไรก็ตาม ต้นกำเนิดทั้งสองของCistanchesเฮอร์บา, Cistanche ทะเลทรายและCistanche tubulosaมีองค์ประกอบทางเคมีและกิจกรรมทางเภสัชวิทยาที่แตกต่างกันตามลำดับ ต้นกำเนิดทั้งสองต่างกันในการใช้งานทางคลินิกและตลาดสินค้าโภคภัณฑ์ การจำแนกประเภทของ Cistanche นั้นสับสนและมีสารทดแทนจำนวนมากและสิ่งปลอมปนหลั่งไหลเข้ามาในตลาดเนื่องจากการขาดแคลนทรัพยากรและสภาพแวดล้อมที่เติบโตเป็นพิเศษสำหรับ Cistanches Herba สกุล Cistanche ได้รับการยอมรับให้รวมสี่สายพันธุ์และหนึ่งตัวแปร:Cistanche ทะเลทราย, Cistanche tubulosa, Cistanche sinensis, Cistanche ซัลซ่า, และCistancheซัลซ่าวาร์ อัลบิฟลอรา [39]. นักวิจัยในญี่ปุ่นมองว่าต้นกำเนิดของCistanchesHerba asCistanche ซัลซ่า[40–43] ขณะที่มันถูกระบุว่าเป็นCistanche ทะเลทรายโดย ทู [44–46]. ดังนั้นจึงสับสนในการจำแนกประเภทของ Cistanche และเป็นการยากที่จะแยกแยะต้นกำเนิดทั้งสองของ Cistanches Herba วิธีการดั้งเดิมสำหรับการควบคุมคุณภาพของ Cistanches Herba คือการระบุลักษณะทางสัณฐานวิทยา [47,48] การระบุด้วยกล้องจุลทรรศน์ [49] และ TLC (โครมาโตกราฟีแบบชั้นบาง) [50,51] FTIR (Fourier Transform Infrared Spectroscopy) [14], HPLC (สูง ประสิทธิภาพโครมาโตกราฟีของเหลว) [52,53] วิธีการทางสัณฐานวิทยาและจุลทรรศน์สามารถแยกแยะชนิดพันธุ์จากสกุลหรือตระกูลต่างๆ ที่มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาและจุลทรรศน์แตกต่างกันอย่างมาก ในขณะที่แยกแยะสายพันธุ์พี่น้องได้ยาก TLC และ FTIR สามารถแยกแยะสายพันธุ์ที่มีองค์ประกอบทางเคมีประเภทต่างๆ ได้อย่างชัดเจน ในขณะที่การระบุองค์ประกอบและเนื้อหาทางเคมีทำได้ยาก HPLC ส่วนใหญ่จะใช้สำหรับการแยกความแตกต่างของสปีชีส์ที่มีองค์ประกอบทางเคมีต่างกัน อย่างไรก็ตาม เวลาของการวิเคราะห์จะนานขึ้นและความไวค่อนข้างต่ำกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับ UPLC ในทำนองเดียวกัน เทคโนโลยี UPLC-QTOF/MS สามารถระบุองค์ประกอบทางเคมีได้เร็วและแม่นยำกว่าวิธีทางเคมีอื่นๆ วิธีการระบุโมเลกุลแสดงให้เห็นได้ดีในการเลือกปฏิบัติโดยพิจารณาจากความแปรผันทางพันธุกรรม เช่น SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate-Polyacrylamide Gel Electrophoresis) [54], AFLP (Amplified Fragment Length Polymorphism) [55,56] อย่างไรก็ตาม วิธีการระดับโมเลกุลเหล่านี้ไม่ใช้งานง่ายและไม่เป็นสากล ในทำนองเดียวกัน บาร์โค้ดของ DNA สามารถแยกแยะสายพันธุ์ได้ในระดับสากล รวดเร็ว และแม่นยำกว่าวิธีการอื่นๆ ในระดับโมเลกุล สำหรับสปีชีส์จากสกุลเดียวกันและความสัมพันธ์ทางพันธุกรรมที่ใกล้ชิด วิธีการเหล่านั้นเพียงอย่างเดียวอาจไม่สามารถระบุได้เป็นอย่างดี

ที่นี่ เรารวม UPLC-QTOF/MS และบาร์โค้ด DNA ในการระบุCistanche ทะเลทรายและCistanche tubulosaและประเมินเครื่องหมายทางเคมีและโมเลกุลที่จะอนุญาตให้มีการเลือกปฏิบัติ ตรวจพบพีคมวลที่ผ่านการรับรอง 23 พีค และระบุ 16 พีคโดยใช้ UPLC–QTOF/ MS และพบสารประกอบมาร์คเกอร์ที่มีศักยภาพสามชนิดในตอนแรกเพื่อช่วยในการเลือกปฏิบัติของแหล่งกำเนิดสองชนิดโดยการวิเคราะห์ PCA และ OPLS-DA นอกจากนี้ ตัวชี้วัดสี่ตัวได้รับการประเมินโดยเทคโนโลยีบาร์โค้ดของ DNA ในแง่ของความสามารถในการแยกความแตกต่างของแหล่งกำเนิดสองแหล่ง: ประสิทธิภาพในการระบุ, ประสิทธิภาพทางพันธุกรรม, ช่องว่างบาร์โค้ด และการวิเคราะห์ต้นไม้ NJ ภูมิภาค psbA-trnH ได้รับการสนับสนุนเป็นบาร์โค้ด DNA ที่เหมาะสมสำหรับการเลือกปฏิบัติCistanche ทะเลทรายและCistanche tubulosa. โดยสรุป ขั้นแรก เราได้สร้างวิธีการที่ผสมผสานการวิเคราะห์โมเลกุลและเคมีขึ้นใหม่สำหรับการเลือกปฏิบัติและการควบคุมคุณภาพในแหล่งกำเนิดสองแหล่งของ Cistanches Herba บาร์โค้ดของ DNA สามารถแยกแยะความแตกต่างของแหล่งกำเนิดสองแบบและรับรองความถูกต้องของสปีชีส์ได้ในระดับสากลและแม่นยำ เทคโนโลยี UPLC-QTOF/MS สามารถวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีเพื่อประเมินคุณภาพของวัสดุยาได้อย่างรวดเร็วและแม่นยำ วิธีการรวมบาร์โค้ดของ DNA และเทคโนโลยี UPLC-QTOF/MS ช่วยรับประกันการระบุแหล่งที่มาของวัสดุยาต่างๆ อย่างถูกต้องและเป็นวิทยาศาสตร์มากขึ้น และอาจใช้เป็นวิธีการในการระบุสายพันธุ์หรือสกุลอื่นๆ ที่สับสนในการจำแนกประเภท

ผลงานของผู้เขียน

คิดและออกแบบการทดลอง: LFH SHZ LBW ทำการทดลอง: SHZ LBW วิเคราะห์ข้อมูล: SHZ LBW รีเอเจนต์/วัสดุ/เครื่องมือวิเคราะห์ที่มีส่วนร่วม: LFH เขียนบทความ: SHZ XJ LBW. ตรวจสอบต้นฉบับ: ZHW

Cistanche deserticola มีเอฟเฟกต์มากมาย คลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

อ้างอิง

1. Tu PF, Lou ZC, Li SC, Wang CS, Jiang WY และอื่น ๆ (พ.ศ. 2539) เปรียบเทียบการบำรุงไตและหยางเสริมประสิทธิภาพสามสายพันธุ์ของherbacistanches. วารสารวัสดุยาจีน 19: 420–421

2. Zhang Y, Wu H, Wang SN, Zheng HC (1994) เปรียบเทียบการบำรุงไตและการเสริมสร้างการทำงานของหยางของสามสายพันธุ์ที่แตกต่างกันherbacistanches. China Journal of Chinese Materia Medica 19: 169–171.

3. Lei L, Song ZH, Tu PF (2003) ความก้าวหน้าในการวิจัยองค์ประกอบทางเคมีในพืชCistancheฮัฟฟิ้ง และลิงค์ ยาจีนโบราณและยาสมุนไพร 34: 473–476

4. Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, และคณะ (2006) Phenylethanoid aminoglycosides และ acylated oligosugars ที่มีกิจกรรม vasorelaxant จากCistanchetubulosa. Bioorg Med Chem 14: 7468–7475

5. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ และอื่น ๆ (2009) ผลกระทบของภาวะไขมันในเลือดต่ำของCistanchetubulosaสารสกัด ซึ่งเป็นยาแผนโบราณของจีนในหนู Am J Chin Med 37: 1125–1138

6. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S และอื่น ๆ (2010) ผลการยับยั้งของแอกทีโอไซด์ที่แยกได้จากCistanchetubulosaเกี่ยวกับการปลดปล่อยตัวกลางทางเคมีและการผลิตไซโตไคน์ที่อักเสบโดยเซลล์ RBL-2H3 และ KU812 แพลนตา เมด, 1512–1518.

7. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H และอื่น ๆ (2010) Acylated phenylethanoid aminoglycosides ที่มีฤทธิ์ปกป้องตับจากพืชในทะเลทรายCistanchetubulosa. Bioorg Med Chem 18: 1882–1890.

8. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Yuan D, และคณะ (2010) อิริดอยด์และอะไซคลิกโมโนเทอร์ปีนไกลโคไซด์, แคนคาโนไซด์ L, M, N, O และ P จากCistanchetubulosa. Chem Pharm Bull (โตเกียว) 58: 1403–1407

9. He YP, Yin ZZ, Tu PF, Lou ZC (1997) การระบุและสำรวจยาดิบเชิงพาณิชย์ของ herba cistanche วารสารวัสดุยาจีน 20: 117– 122

10. Zhu SY (2001) การระบุทางเภสัชวิทยาของCistanchetubulosaสายพันธุ์สับสนของCistancheทะเลทราย. วารสารวัสดุยาจีน 24: 24–25.

11. Xu XQ, Ni H, Wei HY, Jia XG, Zhang BG, และคณะ (2013) การระบุด้วยกล้องจุลทรรศน์ของสามherbacistanchesในซินเจียง การวิจัยยาและ Materia Shizhen 24: 881–883

12. Zhang M, Fu XL, Wang SY (2004) การระบุเชิงพาณิชย์ด้วยกล้องจุลทรรศน์เฮอร์บาCistanchesด้วยเทคนิคการถ่ายภาพดิจิทัล วารสารวัสดุยาจีน 27: 400–402

13. Li JS, Yao ZQ, Yu MX (2000) การศึกษาการระบุตัวตนของherbacistanchesและของปลอม การวิจัยยา Shizhen และ Materia 11: 317–318

14. Xu R, Sun SQ, Liu YG, Chen J, Liu TN, et al. (2010) การศึกษาสเปกโตรสโกปี FTIR และ 2D-IR ในแหล่งต่างๆ ของherbacistanches. Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi 30: 897–900

15. Chen J, Sun SQ, Xu R, Liu YG, Yu J, และคณะ (2009) บัตรประจำตัวของCistancheทะเลทรายจาก Boschniakla rossica และ Cynomorium solarium โดยใช้ FTIR และ IR spectroscopy สหสัมพันธ์สองมิติ Guang Pu Xue Yu Guang Pu Fen Xi 29: 1502–1507.

16. Yang HC, Xia PX, Huang JX, Yuan HZ (2008) ศึกษาลายนิ้วมือ HPLC ของCistancheทะเลทราย. Pharm Care & Res 8: 255–257.

17. Xie JN, Zhao MB, Wu FW, Tu PF (2005) ลายนิ้วมือโครมาโตกราฟีของCistancheทะเลทรายโดย HPLC ยาจีนโบราณและยาสมุนไพร 36: 268–271

18. Han JP, เพลง JY, Liu C, Chen J, Qian J, et al. (2010) บัตรประจำตัวของCistancheสายพันธุ์ (Orobanchaceae) ขึ้นอยู่กับลำดับของบริเวณ intergenic plastid psbA-trnH Acta Pharmaceutica Sinica 45: 126–130.

19. Shi HM, Wang J, Wang MY, Tu PF, Li XB (2009) การระบุตัวตนของCistancheจำแนกตามประเภทเคมีและการพิมพ์ลายนิ้วมือซ้ำแบบ Inter-simple ไบโอล. เภสัช. กระทิง., 32: 142–146.

20. Han LF, Yiadom MB, Liu EW, Zhang Y, Li W, และคณะ (2012) ลักษณะโครงสร้างและการระบุ Phenylethanoid Glycosides จากCistanchesทะเลทรายYC Maโดย UHPLC/ESI-QTOF- MS/MS การวิเคราะห์ไฟโตเคมี 23: 668–676

21. Jiang X, Huang LF, Wu LB, Wang ZH, Chen SL (2012) การวิเคราะห์ UPLC-QTOF/MS ของอัลคาลอยด์ใน Franch Coptis chinensis แปรรูปแบบดั้งเดิม Evid ตาม Complement Alternat Med 2012: 942384

22. Wu LB, Jiang X, Huang LF, Chen SL (2013) การตรวจสอบเทคโนโลยีการประมวลผลของ Loquat (Eriobotrya japonica) Leaf โดย Ultra-Performance Liquid Chromatography- Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry รวมกับ Chemometrics PLOS ONE 8: e64178.

23. Hebert PD, Ratnasingham S, Waard JR (2003) ชีวิตสัตว์บาร์โค้ด: cytochrome c oxidase subunit 1 ความแตกต่างระหว่างสายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิด Proc. อาร์ ซอค ลอนดอน. ข. 270 Suppl 1: S96–99

24. Hebert PD, Cywinska A, Ball SL, Waard JR (2003) การระบุทางชีวภาพผ่านบาร์โค้ด DNA Proc Biol Sci., 270: 313:321.

25. Kress WJ, Wurdack KJ, Zimmer EA, Weigt LA, Janzen DH (2005) การใช้บาร์โค้ด DNA เพื่อระบุพืชดอก Proc Natl Acad Sci., 102: 8369–8374.

26. Chen S, Yao H, Han J, Liu C, Song J และอื่น ๆ (2010) การตรวจสอบความถูกต้องของภูมิภาค ITS2 เป็นบาร์โค้ด DNA ใหม่สำหรับการระบุชนิดของพืชสมุนไพร PLoS One 5: e8613.

27. Tamura K, Peterson D, Peterson N, Stecher G, Nei M, et al. (2011) MEGA5: การวิเคราะห์พันธุศาสตร์วิวัฒนาการระดับโมเลกุลโดยใช้โอกาสสูงสุด ระยะทางวิวัฒนาการ และวิธีการ Parsimony สูงสุด โมล ไบโอล วิวัฒนาการ 28: 2731–2739

28. Meyer CP, Paulay G (2005) บาร์โค้ด DNA: อัตราความผิดพลาดจากการสุ่มตัวอย่างที่ครอบคลุม PLoS จิตเวช 3: e422

29. Kobayashi H, Karasawa H, Miyase T, Fukushima S (1984) การศึกษาองค์ประกอบCistancheเฮอร์บา.IV การแยกและโครงสร้างของ Phenylpropanoid Glycosides ใหม่สองชนิด Cistanosides C และ D. Chem Pharm Bull 32: 3880–3885

30. Kobayashi H, Karasawa H, Miyase T, Fukushima S (1985) การศึกษาเกี่ยวกับองค์ประกอบของCistancheเฮอร์บา. หก. การแยกตัวและโครงสร้างของไกลโคไซด์อิริดอยด์ใหม่ 6-Deoxyeatalpol. เคมี Pharm Bull 33: 3645–3650

31. Jiang Y, Li SP, Wang YT, Chen XJ, Tu PF (2009) ความแตกต่างของเฮอร์บาCistanchesด้วยลายนิ้วมือด้วยโครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง–การตรวจจับอาเรย์ไดโอด–แมสสเปกโตรเมทรี วารสารโครมาโตกราฟี A 1216: 2156– 2162

32. Han LF, Boakye YM, Liu E, Zhang Y, Li W, และคณะ (2012) ลักษณะโครงสร้างและการระบุ Phenylethanoid Glycosides จากCistanches deserticola YC Maโดย UHPLC/ESI–QTOF–MS/MS ไฟโตเคมทางทวารหนัก 23: 668–676

33. Li L, Tsao R, Yang R, Liu CM, Young JC และอื่น ๆ (2008) การแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์จากCistancheทะเลทรายโดยโครมาโตกราฟีแบบทวนกระแสความเร็วสูง เคมีอาหาร 108: 702–710.

34. Lu DY, Zhang JY, Yang ZY, Liu HM, Li S, และคณะ (2013) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของCistanchesเฮอร์บาโดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงควบคู่ไปกับการตรวจจับอาร์เรย์ไดโอดและแมสสเปกโตรเมทรีความละเอียดสูงรวมกับวิธีเคมี เจ ก.ย. วิทย์ 26: 2488-2495

35. Kobayashi H, Karasawa H, Miyase T, Fukushima S (1985) ศึกษาองค์ประกอบCistancheเฮอร์บา. V. การแยกตัวและโครงสร้างของ Phenylpropanoid Glycosides ใหม่สองชนิด Cistanoside E และ F. Chem Pharm Bull 33: 1452– 1457

36. Jiang Y, Tu PF (2009) การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีในCistancheสายพันธุ์. เจ โครมาโตกร์ เอ 1216:1970–1979

37 Masssart DL, Vandeginste BGM, Deming SN, Michotte Y, Kaufman L (1988) การจัดการข้อมูลในด้านวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี Chemometrics: หนังสือเรียน

38. Huang LF, Zheng SH, Wu LB, Jiang X, Chen SL (2014) อีโคไทป์ของCistanche deserticolaขึ้นอยู่กับองค์ประกอบทางเคมีและลักษณะโมเลกุล SCIENTIA SINICA Vitae 44: 318–328.

39. Tu PF, Jiang Y, Guo YH (2011) การวิจัยและการพัฒนาอุตสาหกรรมของherbacistanches. วารสารยาจีน 46: 882–887.

40. Kobayashi H, Oguchi H, Takizawa, Miyase T, Ueno A และอื่น ๆ (1987) ใหม่ phenylethanoid glycosides จากCistanchetubulosa(SCRENK) ขอเกี่ยว. ฉ. I. เคมี Pharm Bull 35: 3309–3314