ฤทธิ์ต้านการอักเสบร่วมกันของสารสกัด Laminaria Japonica Fucoidan และ Cistanche Tubulosa
Mar 03, 2022
ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com
เชิงนามธรรม
ดิต้านการอักเสบผลของฟูคอยแดนและCistanche tubulosa สารสกัด (CT) ได้รับการตรวจสอบในระบบการเพาะเลี้ยงมาโครฟาจในหลอดทดลองและแบบจำลองการอักเสบของถุงลมนิรภัยที่เกิดจากคาราจีแนนในร่างกายCistanche Tubulosaสารสกัดยับยั้งการผลิตไนตริกออกไซด์จากเซลล์มาโครฟาจ RAW 264.7 ที่กระตุ้น ขณะที่ฟูคอยแดนไม่ทำงาน แบบจำลองการอักเสบของถุงลมนิรภัยในร่างกาย การหลั่งของหลอดเลือดที่เกิดจากคาราจีแนน และความเข้มข้นของไนตริกออกไซด์และพรอสตาแกลนดิน E2 ที่เพิ่มขึ้นในสารหลั่งถูกระงับโดยเสริมฤทธิ์กันโดยการบริหารร่วมของฟูคอยแดนหรือCistanche Ttubulosaสารสกัด. นอกจากนี้ การอักเสบของเนื้อเยื่อลดลงอย่างมากโดยการรักษาแบบผสมผสาน อย่างไรก็ตาม ไม่มีผลเสริมฤทธิ์กันกับอักเสบการแทรกซึมของเซลล์แม้ว่าฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)แยกแต่ละเซลล์ลดจำนวนลงอย่างเห็นได้ชัด ดังนั้นจึงแนะนำว่าฟูคอยแดนสกัดกั้นการแทรกซึมของอักเสบเซลล์ในขณะที่ CT(Cistanche tubulosa) สารสกัดยับยั้งการกระตุ้นเซลล์ และการรักษาแบบผสมผสานอาจเป็นตัวเลือกที่มีแนวโน้มดีในการบรรเทาอาการอักเสบประเภทต่างๆ
คำสำคัญ: คาราจีแนน การอักเสบ ฟูคอยแดน สารสกัดจากซิสทานเช ทูบูโลซ่า
ในฐานะที่เป็นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันต่อแอนติเจนจากต่างประเทศ มาโครฟาจจะปล่อยไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ เช่น ปัจจัยเนื้องอก-เนื้อร้าย- (TNF- ), อินเตอร์ลิวคิน-1 (IL-1 ), IL-6 และอื่นๆ [1,2]. ไซโตไคน์ดังกล่าวทำให้เกิดการไหลเข้าของเคมีบำบัดของแกรนูโลไซต์ โมโนไซต์ ลิมโฟไซต์ และแมสต์เซลล์ไปยังเนื้อเยื่อที่เสียหายซึ่งส่งเสริมการกำจัดแอนติเจนและการกู้คืนเนื้อเยื่อ [3,4] อย่างไรก็ตาม การแทรกซึมและกระตุ้นเซลล์มากเกินไปทำให้อาการบาดเจ็บของเนื้อเยื่อรุนแรงขึ้น นำไปสู่อาการบวมน้ำ (การหลั่งของหลอดเลือด) และความเจ็บปวดซึ่งเป็นปรากฏการณ์ที่รู้จักกันดีของการอักเสบ
TNF- เป็นปัจจัยสำคัญในการกระตุ้นการแสดงออกของยีนไนตริกออกไซด์ซินเทส (iNOS) ในหลายเซลล์ การกระตุ้น iNOS นำไปสู่การผลิตไนตริกออกไซด์ (NO)[5-7] ซึ่งไม่เพียงแต่ปรับการทำงานทางสรีรวิทยาหลายอย่าง เช่น การฆ่าเชื้อแบคทีเรียและการขยายหลอดเลือด แต่ยังทำให้เกิดการอักเสบ [8,9] หลังจากการบาดเจ็บของเนื้อเยื่อ การย่อยสลายโดยฟอสโฟลิเปสของฟอสโฟลิปิดของเยื่อหุ้มเซลล์จะสร้างกรดอาราคิโดนิก กรดอาราคิโดนิกถูกย่อยสลายเพิ่มเติมโดยไซโคลออกซีเจเนส (COX) ไปเป็นพรอสตาแกลนดิน (PGs) [10] ปริมาณ PGE2 ที่มากเกินไปที่เกิดจาก COX-II ทำให้เกิดไซโตไคน์หลายชนิดสำหรับการอักเสบ เนื่องจากทั้ง NO และ PGE2 ทำหน้าที่เป็นปัจจัยสำคัญสำหรับการอักเสบและการชักนำให้เกิดความเจ็บปวด เส้นทาง TNF- – และ COX-II–PGE2 จึงเป็นกระแสหลักของกระบวนการอักเสบ ซึ่งถูกยับยั้งโดยคอร์ติโคสเตียรอยด์และยาที่ไม่ใช่สเตียรอยด์ต้านการอักเสบยา (NSAIDs) ตามลำดับ [10,11]
แม้ว่าจะมีสเตียรอยด์และ NSAIDs หลายชนิดสำหรับการรักษาโรคเกี่ยวกับการอักเสบ ยาเหล่านี้อาจก่อให้เกิดผลเสียต่อระบบภูมิคุ้มกัน ทางเดินอาหาร ไต ตับ ระบบประสาทส่วนกลาง ความดันโลหิต และระบบหัวใจและหลอดเลือด [12-14 ]. ดังนั้นจึงจำเป็นต้องลดผลกระทบจากการบำบัดด้วยสารเคมีให้เหลือน้อยที่สุดโดยแทนที่หรือใช้ร่วมกับผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ
Fucoidan, sulfate polysaccharide complex จากสาหร่ายเช่น Laminaria japonica และ Cladosiphonokamuranus ที่แพร่หลายในหลายประเทศ ถูกนำมาใช้เป็นยารักษาโรคทางตะวันออกมาเป็นเวลานาน ในการศึกษาก่อนหน้านี้ ได้แสดงให้เห็นว่าฟูคอยแดนมีฤทธิ์ต้านออกซิเดชัน ต้านการแข็งตัวของเลือด ต้านมะเร็ง และต้านการอักเสบกิจกรรม [15,16]. ดังนั้น ผลประโยชน์ของฟูคอยแดนต่อโรคเกี่ยวกับการอักเสบ การขาดเลือด ความผิดปกติของภูมิคุ้มกัน และเนื้องอกจึงดึงดูดความสนใจของผู้วิจัย [17,18] ในทางกลับกัน,Cistanche tubulosa(CT) ยังถูกนำมาใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับยาแผนโบราณในประเทศจีน มีรายงานว่าสารสกัด CT ช่วยลดการผลิต TNF-á และ IL-4 ซึ่งเป็นปัจจัยสำคัญสำหรับการผลิต NO ในเส้นทางการอักเสบ [19]
การค้นพบก่อนหน้านี้ทำให้เราศึกษาประสิทธิภาพของฟูคอยแดนและ CT . ร่วมกัน(Cistanche tubulosa)สกัด 2 เส้นทางสำคัญของการอักเสบ เพื่ออธิบายกลไกการออกฤทธิ์ เราวิเคราะห์ NO และPGE2 ในสารหลั่งจากการอักเสบของถุงลมนิรภัยที่เกิดจากคาราจีแนน [20]
วัสดุและวิธีการ
วัสดุ
ฟูคอยแดนกึ่งบริสุทธิ์และสารสกัดจากน้ำของ CT(Cistanche tubulosa)ได้รับจาก Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Korea) สารสกัดฟูคอยแดนและซีทีถูกเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส ผสม (1:3) และละลายในน้ำบริสุทธิ์ก่อนใช้ และบริหารให้ทางปากในปริมาตร 5 มล./กก.
การเพาะเลี้ยงเซลล์และ NO quantification
เซลล์ไลน์มาโครฟาจ RAW 264.7 ของหนูถูกซื้อมาจาก American Type Culture Collection (มานาสซาส สหรัฐอเมริกา) และเพาะเลี้ยงในอาหารนกอินทรีย์ดัดแปลงของ Dulbecco (ซิกมา เซนต์หลุยส์ สหรัฐอเมริกา) ที่ประกอบด้วยเซรั่มโควีนในครรภ์ 10 เปอร์เซ็นต์และยาปฏิชีวนะ [100 U/mLpenicillin ( ซิกมา) และสเตรปโตมัยซิน 100 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร (ซิกมา)] เซลล์ถูกบ่มในบรรยากาศ CO2 ที่ความชื้น 5 เปอร์เซ็นต์ที่ 37oC
เพื่อประเมินผลของฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดจากการหลั่งของ NO, RAW 264.7 เซลล์ (1×106 เซลล์/มล.) ถูกบ่มด้วยฟูคอยแดนหรือสารสกัด CT (1–320 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) เป็นเวลา 5 นาที ตามด้วยอินเตอร์เฟอรอน- (IFN- , 10 U/มล.) และไลโปโพลีแซคคาไรด์ (LPS, 10 ไมโครกรัม/มล.) เป็นเวลา 24 ชั่วโมง ในการศึกษาเบื้องต้นของเรา ได้รับการยืนยันว่าการรักษาด้วย IFN-plus LPS สำหรับการกระตุ้นเซลล์ RAW 264.7 ไม่ส่งผลต่อความมีชีวิตของเซลล์นานถึง 24 ชั่วโมง และฟูคอยแดนและสารสกัด CT ไม่เป็นพิษต่อเซลล์ถึง 1 มก./มล. ความเข้มข้นของไนไตรต์ (NO2–) ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ออกซิไดซ์ของ NO ถูกวัดเป็นตัวบ่งชี้ NO อาหารเลี้ยงเชื้อถูกผสมกับสารทำปฏิกิริยา Griess (ซัลฟานิลาไมด์ 1 เปอร์เซ็นต์, แนฟธิลเอทิลีนไดเอไมด์ 0.1 เปอร์เซ็นต์ในกรดฟอสฟอริก 2.5 เปอร์เซ็นต์) [21] และฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาที ความเข้มข้นของไนไตรต์ถูกวิเคราะห์ที่ 540 นาโนเมตร โดยที่ NaNO2 ถูกใช้เพื่อสร้างเส้นโค้งมาตรฐาน
สัตว์และการรักษา
หนู ICR เพศผู้ (อายุ 7 สัปดาห์) ซื้อมาจาก Daehan Biolink (Eumseong, Korea) และเลี้ยงไว้ในห้องที่มีสภาพแวดล้อมคงที่ (22±2ºC;40-70 เปอร์เซ็นต์ความชื้นสัมพัทธ์; 12-ชั่วโมงแสง -รอบมืด150-300 ความสว่างลักซ์) อาหารเม็ดและน้ำบริสุทธิ์สามารถหาได้ตามต้องการ การทดลองกับสัตว์ทั้งหมดได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการการดูแลและใช้สัตว์ประจำสถาบัน (IACUC) ของมหาวิทยาลัยแห่งชาติชุงบุก (CBNU) ประเทศเกาหลี และดำเนินการตามขั้นตอนการปฏิบัติงานมาตรฐาน (SOP) ของศูนย์วิจัยสัตว์ทดลอง CBNU
หนูเมาส์ (n=8/กลุ่ม) ได้รับการรักษาทางปากด้วยฟูคอยแดน (18 หรือ 54 มก./กก.), CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด (54 หรือ 162 มก./กก.) หรือของผสม (18 บวก 54, 54 บวก 162 หรือ 90 บวก 270 มก./กก.) วันละครั้งเป็นเวลา 7 วัน ปริมาณฟูคอยแดนต่ำ (18 มก./กก.) และสารสกัด CT (54 มก./กก.) มาจากปริมาณโดยประมาณของมนุษย์ที่ 100 มก./ตัว (70 กก.) และ 300 มก./ตัวหลังจากการแปลค่าพื้นที่ผิวของน้ำหนักตัว (Km{{14) }} สำหรับมนุษย์/Km=3 สำหรับเมาส์) ตามลำดับ ปริมาณสูงของฟูคอยแดนและสารสกัด CT ถูกตั้งค่าไว้ที่ 3 เท่า เพียงอย่างเดียวหรือในของผสม และของผสมที่มีปริมาณสูงสุดสูงสุดได้รับการแก้ไขที่ 5 เท่าเพื่อประเมินผลเสริมฤทธิ์กันสูงสุด
ในวันที่ 1 ของฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)การบำบัดด้วยสารสกัด หนูเมาส์ถูกฉีดเข้าใต้ผิวหนังด้วยอากาศปลอดเชื้อ 10 มล. ที่ด้านหลังเพื่อสร้างกระเป๋า [22,23] หลังจาก 2 และ 5 วัน ถุงถูกฉีดซ้ำด้วยอากาศ 5 มล. หนึ่งชั่วโมงหลังการรักษาขั้นสุดท้าย คาราจีแนน 1 มิลลิลิตร (1 เปอร์เซ็นต์ในน้ำเกลือ; ซิกมา) หรือยานพาหนะ (น้ำเกลือ) ถูกฉีดเข้าไปในกระเป๋า
การวิเคราะห์สารหลั่ง
ถุงลมถูกล้างด้วยน้ำเกลือเย็น 1 มล. 6 ชั่วโมงหลังการฉีดคาราจีแนน และปริมาตรสุทธิของของเหลวล้างถูกบันทึก จำนวนทั้งหมดของเซลล์ที่มีการอักเสบ นิวโทรฟิล โมโนไซต์ และลิมโฟไซต์ ถูกกำหนดหาโดยใช้ตัวนับโคลเตอร์ ความเข้มข้นของ NO และ PGE2 ถูกกำหนดโดย Griess reagent(Sigma) และ enzyme immunoassay (EIA) โดยใช้ชุดเครื่องมือ Correlate-EIA (Assay Designs, Ann Arbor, AnnArboUSA) ตามลำดับ
การตรวจทางจุลพยาธิวิทยา
เนื้อเยื่อซับในกระเป๋าถูกเอาออกและตรึงในสารละลายฟอร์มาลินที่เป็นกลาง สไลด์เนื้อเยื่อที่ฝังพาราฟินถูกย้อมด้วยเฮมาทอกซิลิน-อีโอซินและตรวจดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงเพื่อหารอยโรคอักเสบ
การวิเคราะห์ทางสถิติ
ผลลัพธ์ถูกนำเสนอเป็นค่ากลาง±SE การเปรียบเทียบกลุ่มทดลองทำโดยการวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวตามด้วยการแก้ไขการทดสอบของทูคีย์ ค่า P<0.05 was="" considered="" statistically="">
ผลลัพธ์
การเพาะเลี้ยงเซลล์ RAW 264.7 ในหลอดทดลอง, IFN- และ LPtreatment ช่วยเพิ่มการผลิต NO อย่างมาก (รูปที่ 1) การปรับสภาพด้วยฟูคอยแดน (1–320 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) ไม่ส่งผลต่อการปลดปล่อย NO จากสายเซลล์มาโครฟาจ (รูปที่ 1A) ในการเปรียบเทียบ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด (32–320 ไมโครกรัม/มล.)ระงับการผลิตอย่างมีนัยสำคัญ ไม่มี ซึ่งบ่งชี้ถึงต้านการอักเสบกิจกรรม (รูปที่ 1B)
การฉีดคาราจีแนนลงในถุงลมของหนูช่วยเพิ่มปริมาณสารหลั่งภายในกระเป๋าได้อย่างชัดเจน (ภาพที่2) สารคัดหลั่งที่เพิ่มขึ้นดังกล่าวถูกทำให้อ่อนฤทธิ์โดยการบำบัดด้วยฟูคอยแดน (18 มก./กก.) และ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด (54 และ 162 มก./กก.) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง การรักษาฟูคอยแดนและ CT . ร่วมกัน(Cistanche tubulosa)สารสกัดลดปริมาณ exudates ลงอีกเมื่อเปรียบเทียบกับผลกระทบแต่ละอย่าง แม้ว่าการผสมขนาดยาที่สูงขึ้น (54 บวก 162 มก./กก. และ 90 บวก 270 มก./กก.) ไม่ได้แสดงประสิทธิภาพเพิ่มเติมกับการรวมกันของขนาดยาต่ำสุด (18 บวก 54 มก./กก.) (รูปที่ 2A). ไม่มีเนื้อหาในกระเป๋าเพิ่มขึ้นอย่างมากหลังจากการฉีดคาราจีแนน (รูปที่ 2B) เมื่อเปรียบเทียบกับผลอ่อนของฟูคอยแดน CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดลดความเข้มข้นของ NO ลงอย่างเห็นได้ชัด การบำบัดแบบผสมผสานของฟูคอยแดนและสารสกัด CT ช่วยลดระดับ NO ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา ในทำนองเดียวกัน เนื้อหา PGE2 ที่เพิ่มขึ้นถูกระงับโดยการรักษาร่วมกันของฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด(รูปที่ 2C)ควบคู่ไปกับสารไกล่เกลี่ยการอักเสบในกระเป๋า จำนวนของเซลล์อักเสบเพิ่มขึ้นอย่างมากโดยการฉีดคาราจีแนน: 37.8, 4.8 และ 24.1 เท่าของระดับการควบคุมสำหรับนิวโทรฟิล โมโนไซต์ และลิมโฟไซต์ ตามลำดับ (ตารางที่ 1) . อย่างไรก็ตาม ฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดช่วยลดการแทรกซึมของเซลล์อักเสบอย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งฟูคอยแดนค่อนข้างดีกว่าสารสกัด CT โดยไม่คาดคิด ไม่มีผลเสริมฤทธิ์กันในการแทรกซึมของเซลล์อักเสบโดยการบริหารร่วมของฟูคอยแดนและซีที(Cistanche tubulosa)สารสกัด.
ตามที่สรุปจากการแทรกซึมของเซลล์อักเสบใน exudates เนื้อเยื่อใต้ผิวหนังรอบถุงลมแสดงรอยโรคอักเสบรุนแรง (รูปที่ 3) สังเกตพบเซลล์จำนวนมากในเนื้อเยื่อใต้ผิวหนังที่หนาขึ้นซึ่งสัมผัสกับคาราจีแนน (รูปที่ 3B) เมื่อเปรียบเทียบกับลักษณะที่ใกล้เคียงปกติในสัตว์ควบคุม (รูปที่ 3A) รอยโรคที่มีการอักเสบดังกล่าวถูกทำให้อ่อนลงอย่างเห็นได้ชัดโดยการบำบัดด้วยฟูคอยแดน(รูปที่ 3C และ 3D) หรือ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด (รูปที่ 3E และ 3F) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ฤทธิ์ต้านการอักเสบที่สูงขึ้นได้มาจากการรักษาแบบผสมผสานกับฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด(รูปที่ 3G-3I)
การอภิปราย
การใช้แบบจำลองการอักเสบของถุงลมนิรภัยที่เหนี่ยวนำโดย carrageenan ในร่างกาย การฉีดอากาศไปที่ด้านหลังของหนูทำให้เกิดการงอกขยายของเซลล์ที่แบ่งชั้นบนพื้นผิวของโพรงเพื่อสร้างโครงสร้างที่คล้ายกับไขข้อ ในรูปแบบนี้ การฉีดการแทรกซึมของเซลล์อักเสบที่เกิดจากคาราจีแนนเพิ่มสารหลั่งซึ่งบ่งบอกถึงการรั่วของหลอดเลือด ถุงลมทำหน้าที่เป็นแหล่งกักเก็บเซลล์อักเสบและผู้ไกล่เกลี่ยที่สามารถวัดได้ง่ายในของเหลวที่สะสมในพื้นที่
ในบรรดาสารไกล่เกลี่ยการอักเสบที่หลากหลายที่สามารถกระตุ้นการซึมผ่านของหลอดเลือด เป็นที่ทราบกันดีว่า NO และ PGE2 เป็นปัจจัยสำคัญที่เกี่ยวข้องกับการเกิดโรคจากการอักเสบหลายชนิด [24,25] พวกเขายังเป็นที่รู้จักในฐานะผู้ไกล่เกลี่ยของการเหนี่ยวนำความเจ็บปวดและการรับรู้[10,11] iNOS ซึ่งแสดงออกและกระตุ้นในเซลล์ประเภทต่างๆ โดยการกระตุ้นด้วย TNF- และ/หรือLPS ระหว่างการอักเสบ ทำให้เกิดความเข้มข้นสูงอย่างต่อเนื่องของ NO [3,5-7] NO เป็นโมเลกุลควบคุมที่สำคัญในการทำงานทางสรีรวิทยาที่หลากหลาย เช่น การขยายตัวของหลอดเลือดทำให้เกิดการรั่วของหลอดเลือด [8,9].PGE2 ซึ่งเกิดจากกรดอาราคิโดนิกผ่านทางค็อกซ์ มีส่วนช่วยในการพัฒนาโรคอักเสบต่างๆ [26,27] และ การผลิต PGE2 มากเกินไปเพื่อตอบสนองต่อการกระตุ้นการอักเสบต่างๆ สัมพันธ์กับการควบคุมระดับ COX-II และความก้าวหน้าของการอักเสบ [28] ดังนั้น เส้นทาง TNF- -NO และ COX-II-PGE2 จึงถูกพิจารณาว่าเป็นกระแสหลักของกระบวนการอักเสบสองสาย ซึ่งถูกขัดขวางโดยตัวยับยั้งของ iNOS (คอร์ติโคสเตียรอยด์) และCOX (NSAIDs) ตามลำดับ [22,29]
ในการศึกษาปัจจุบัน การบริหารร่วมของฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดลดปริมาตร exudate ในกระเป๋า ซึ่งบ่งชี้ว่ามีฤทธิ์ในการยับยั้งการรั่วของหลอดเลือด (รูปที่ 2A) เมื่อเทียบกับผลกระทบแต่ละอย่างของฟูคอยแดนและ CT . แต่ละตัว(Cistanche tubulosa)สารสกัด การบำบัดแบบผสมผสานเพิ่มขึ้นอีก ซึ่งหมายความว่าการกระทำของสารประกอบทั้งสองเสริมฤทธิ์กัน ผลเสริมฤทธิ์กันดังกล่าวระหว่างฟูคอยแดนและสารสกัด CT ได้รับการสนับสนุนโดยกิจกรรมของพวกมันในระดับ NO และ PGE2 ในสารหลั่ง (รูปที่ 3B และ 2C)
อย่างไรก็ตาม ที่น่าสนใจคือ ได้รับการยืนยันแล้วว่าฟูคอยแดนไม่ได้ยับยั้งการกระตุ้นการทดสอบมาโครฟาจในหลอดทดลองโดยตรง (รูปที่ 1A) ในทำนองเดียวกัน ศักยภาพในการยับยั้งของฟูคอยแดนต่อการสะสม NO และ PGE2 ในการวิเคราะห์ทางชีวภาพนั้นค่อนข้างต่ำกว่าของ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด (รูปที่ 2B และ 2C) กลไกการออกฤทธิ์ของฟูคอยแดนดังกล่าวแตกต่างจากการยับยั้งการทำงานของเซลล์โดยตรงด้วยสารสกัด CT (รูปที่ 1B) โดยการเปรียบเทียบ ฟูคอยแดนมีประสิทธิภาพสูงในการยับยั้งการแทรกซึมของเซลล์อักเสบในถุง (ตารางที่ 1) ฟูคอยแดนมีประสิทธิภาพเหนือกว่าสารสกัด CT ในการสกัดกั้นการย้ายนิวโทรฟิล โมโนไซต์ และลิมโฟไซต์ไปยังบริเวณที่เกิดการบาดเจ็บของเนื้อเยื่อที่เกิดจากคาราจีแนน ที่น่าสนใจคือ ไม่มีผลการต่อต้านการย้ายถิ่นที่เสริมฤทธิ์กัน ซึ่งบ่งบอกถึงกลไกการทำงานที่แตกต่างกันระหว่างฟูคอยแดนกับสารสกัด CT: กล่าวคือ ฟูคอยแดนขัดขวางการแทรกซึมของเซลล์อักเสบในขณะที่ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดยับยั้งการทำงานของเซลล์
เซลล์โพลีมอร์โฟนิวเคลียส โดยเฉพาะอย่างยิ่งนิวโทรฟิล เป็นส่วนประกอบหลักของเซลล์ที่ถูกคัดเลือกไปยังบริเวณที่เกิดการอักเสบเฉียบพลันที่เกิดจากคาราจีแนน นอกจากนี้ เซลล์ที่เกิดการอักเสบตามมา เช่น มาโครฟาจและลิมโฟไซต์ยังมีบทบาทสำคัญในกระบวนการอักเสบด้วยการหลั่งไซโตไคน์ [22,30,31] เมื่อปรับสภาพด้วยฟูคอยแดนหรือ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัด จำนวนเซลล์เม็ดเลือดขาวที่ย้ายเข้าสู่ถุงลมที่ฉีดด้วยคาราจีแนนถูกยับยั้งอย่างเห็นได้ชัด ผลลัพธ์นี้สอดคล้องกับผลที่จะได้รับจาก corticosteroids เช่น dexamethasone แต่ไม่ใช่โดย NSAIDs รวมถึง indomethacin [23,30] ดังนั้นจึงสันนิษฐานได้ว่าฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดมีคุณสมบัติเป็นสเตียรอยด์
นอกเหนือจากการปิดกั้นการกระทำของเคมีบำบัดของเซลล์อักเสบแล้ว CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดดูเหมือนจะยับยั้งการกระตุ้นของมาโครฟาจ สิ่งนี้ได้รับการยืนยันโดยการกระทำการยับยั้ง NO ในหลอดทดลอง และ ในร่างกาย ซึ่งเป็นตัวกลางในการอักเสบที่สำคัญที่ผลิตโดยแมคโครฟาจ ดังนั้นผลของ CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดบนมาโครฟาจอาจเกิดจากการยับยั้งการแสดงออกของ mRNA และ/หรือการยับยั้งการทำงานของ iNOS ในเซลล์เหล่านี้โดยตรง
PGE2 เป็นหนึ่งในผู้ไกล่เกลี่ยการอักเสบที่สำคัญเช่นกัน มันเพิ่มขึ้นควบคู่ไปกับอาการบวมน้ำของเนื้อเยื่อซึ่งถูกระงับโดย NSAIDs สารยับยั้ง COX [21,22] คาราจีแนนสามารถเพิ่มการผลิต PGE2 ได้โดยการกระตุ้นโปรตีน COX-II mRNA และ COX-II ในสารหลั่งในกระเป๋า [32] ในรูปแบบนี้ คาราจีแนนเพิ่มปริมาณ PGE2 อย่างมีนัยสำคัญและถูกยับยั้งโดย CT . อย่างมาก(Cistanche tubulosa)สารสกัด. เป็นที่น่าสนใจที่จะสังเกตว่าผลลัพธ์นี้สอดคล้องกับผลกระทบที่จะได้รับจาก NSAID indomethacin [23] ดังนั้นจึงสรุปได้จากผลลัพธ์ที่สารสกัด CT มีคุณสมบัติเพิ่มเติมของ NSAIDs เมื่อนำมารวมกันเชื่อว่า CT(Cistanche tubulosa)สารสกัดออกฤทธิ์ทั้ง corticosteroid และ NSAID-like ในรูปแบบการอักเสบที่เกิดจากคาราจีแนนและฟูคอยแดนนั้นช่วยเพิ่มต้านการอักเสบผลของสารสกัด CT โดยการปิดกั้นการแทรกซึมของเซลล์อักเสบ
แม้ว่าการกำหนดกลไกการทำงานที่แน่นอนจะต้องมีการศึกษาเพิ่มเติม แต่ส่วนผสมของฟูคอยแดนและ CT(Cistanche tubulosa) สารสกัดช่วยลดสัญญาณการอักเสบอย่างเห็นได้ชัดโดยการปิดกั้นเส้นทาง TNF- –NO และ COX-II–PGE2 ในการอักเสบของถุงลมนิรภัยที่เกิดจากคาราจีแนน การค้นพบนี้ให้หลักฐานว่าการรักษาฟูคอยแดนและ CT . ร่วมกัน(Cistanche tubulosa)สารสกัดอาจเป็นตัวเลือกที่มีแนวโน้มว่าจะบรรเทาอาการอักเสบประเภทต่างๆ ที่ตอบสนองต่อคอร์ติโคสเตียรอยด์หรือ NSAIDs
อ้างอิง
1. วันที่ R. อาการไม่พึงประสงค์จาก TNF- inhibitors ในโรคข้ออักเสบรูมาตอยด์ มีดหมอ 2002; 359(9306): 540-541.
2. Feldmann M, เบรนแนน FM, Maini RN บทบาทของไซโตไคน์ในโรคข้ออักเสบรูมาตอยด์ Annu Rev Immunol 1996; 14: 397-400.
3. Eigler A, Sinha B, Hartmann G, Endres S. Taming TNF: กลยุทธ์ในการยับยั้ง cytokine ที่ทำให้เกิดการอักเสบ อิมมูนอลทูเดย์ 1997;18(10): 487-492.
4. Ershler WB, เคลเลอร์ ET การแสดงออกของยีน interleukin-6ที่สัมพันธ์กับอายุ โรคในระยะปลายชีวิต และความอ่อนแอที่เพิ่มขึ้น Annu รายได้ Med2000; 51: 245-270.
5. Adams V, Nehrhoff B, Späte U, Linke A, Schulze PC, Baur A, Gielen S, Hambrecht R, Schuler G. การเหนี่ยวนำของการแสดงออกของ iNOS ในกล้ามเนื้อโครงร่างโดย IL-1 และการเปิดใช้งานNFκB: ในหลอดทดลอง andin การศึกษาร่างกาย โรคหัวใจและหลอดเลือด Res 2002; 54(1): 95-104.
6. Xie QW, Whisnant R, Nathan C. โปรโมเตอร์ของยีนเมาส์ที่เข้ารหัสการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ที่ไม่ขึ้นกับแคลเซียมทำให้เกิดการเหนี่ยวนำโดย interferon และ lipopolysaccharide แบคทีเรีย เจ ExpMed 1993; 177(6): 1779-1784.
7. Yui Y, Hattori R, Kosuga K, Aizawa H, Hiki K, Kawai C. การทำให้บริสุทธิ์ของการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์จากแมคโครฟาจของหนู เจ ไบโอลเคม 1991; 266(19): 12544-12547.
8. Marletta MA, Yoon PS, Iyengar R, Leaf CD, Wishnok JS.Macrophage ออกซิเดชันของ L-arginine เป็นไนไตรต์และไนเตรต: ไนตริกออกไซด์เป็นสารตัวกลาง ชีวเคมี 1998; 27(24): 8706-8711.
9. Moncada S, Palmer RM, Higgs EA ไนตริกออกไซด์: สรีรวิทยา พยาธิสรีรวิทยา และเภสัชวิทยา Pharmacol Rev 1991; 43(2):109-142.
10. ปัง แอล โฮลท์ เจอาร์ ความเป็นพิษต่อเซลล์ต่อมาโครฟาจของเตทรานดรีน ซึ่งเป็นสารอัลคาลอยด์ที่ต้านซิลิโคซิส ร่วมกับการผลิตพรอสตาแกลนดินมากเกินไป Biochem Pharmacol 1997; 53(6): 773-782.
11. Hunskaar S, Hole K. การทดสอบฟอร์มาลินในหนู: ความแตกแยกระหว่างความเจ็บปวดจากการอักเสบและไม่อักเสบ ความเจ็บปวด 1987; 30:103-114.
12. เลสเตอร์ อาร์เอส, โนลส์ เอสอาร์, เฉือน เอ็นเอช. ความเสี่ยงของการใช้คอร์ติโคสเตียรอยด์อย่างเป็นระบบ คลินิก Dermatol 1998; 16(2): 277-288.
13. Lichtenstein DR, Syngal S, Wolfe MM. ไม่ใช่สเตียรอยด์ต้านการอักเสบยาและระบบทางเดินอาหาร ดาบสองคม. โรคข้ออักเสบรูม 1995; 38(1): 5-18.
14. Mukherjee D, Nissen SE, Topol EJ. ความเสี่ยงของการเกิดโรคหัวใจและหลอดเลือดที่เกี่ยวข้องกับสารยับยั้ง COX-2 ที่เลือก จามา 2001; 286(8):954-959.
15. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. คุณสมบัติต้านไวรัสของเศษส่วนฟูคอยแดนจาก Leathesiadifformis ไฟโตเมดิซีน 1999; 6(5): 335-340.
16. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. สารต้านอนุมูลอิสระที่มีศักยภาพและความสามารถในการต้านการแข็งตัวของเลือดของเศษส่วนฟูคอยแดนที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่ำที่สกัดจาก Laminaria japonica Int J จิตเวช Macromol2010; 46(1): 6-12.
17. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A,Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan ช่วยเพิ่มการไหลเวียนของเลือดในไตในระยะเริ่มต้นของภาวะไตขาดเลือด/อาการบาดเจ็บที่การกลับเป็นเลือดในหนู เจพีฟิสิออล ฟาร์มาคอล 2001; 52(1): 137-143.
18. Li N, Zhang Q, Song J. การประเมินทางพิษวิทยาของฟูคอยแดนที่สกัดจาก Laminaria japonica ในหนู Wistar เคมีอาหาร Toxicol 2005; 43(3): 421-426.
19. Yamada P, Iijima R, Han J, Shigemori H, Yokota S, Isoda H.Inhibitory effect ของ acteoside ที่แยกได้จาก Cistanche tubulosa ต่อการปลดปล่อยสารเคมีที่เป็นสื่อกลางและการผลิตไซโตไคน์อักเสบโดยเซลล์ RBL-2H3 และ KU812 แพลนตา เมด 2010; 76(14): 1512-1518.
20. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YBต้านการอักเสบผลของสารสกัดเอธานอลของแองเจลิกา กิกาสในแบบจำลองการอักเสบของถุงคาราจีแนน-แอร์ Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
21. เฮเวล เจเอ็ม, มาร์เล็ตตา แมสซาชูเซตส์ การทดสอบการสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ วิธีการเอ็นไซมอล 1994; 233: 250-258.
22. Romano M, Faggioni R, Sironi M, Sacco S, Echtenacher B, DiSanto E, Salmona M, Ghezzi P. Carrageenan ทำให้เกิดการอักเสบเฉียบพลันในแบบจำลองไขข้อของถุงลมนิรภัยของเมาส์ บทบาทของปัจจัยเนื้อร้ายของเนื้องอก ผู้ไกล่เกลี่ย Inflamm 1997; 6(1): 32-38.
23. Wallace JL, Chapman K, McKnight W. Limitedต้านการอักเสบประสิทธิภาพของการยับยั้ง cyclo-oxygenase-2 ในการอักเสบของ carrageenan-air pouch Br J Pharmacol 1999; 126(5): 1200-1204.
24. Guslandi M. Nitric oxide และโรคลำไส้อักเสบ Eur J Clin ลงทุน 1998; 28(11): 904-907.
25. Ritchlin CT, Haas-Smith SA, Li P, Hicks DG, Schwarz EM.Mechanisms of TNF- - และ RANKL-mediated osteoclastogenesis และการสลายของกระดูกในโรคข้ออักเสบสะเก็ดเงิน J Clin ลงทุน 2003;111(6): 821-831
26. Minghetti L. Cyclooxygenase-2 (COX-2) ในโรคสมองอักเสบและเสื่อม J Neuropathol Exp Neurol 2004;63(9): 901-910.
27. St-Onge M, Flamand N, Biarc J, Picard S, Bouchard L, DussaultAA, Laflamme C, James MJ, Caughey GE, Cleland LG, BorgeatP, Pouliot M. การกำหนดลักษณะของรุ่น prostaglandin E2 ผ่าน cyclooxygenase (COX) { {3}} วิถีทางในนิวโทรฟิลของมนุษย์ Biochim Biophys Acta 2007; 1771(9): 1235-1245.
28. ชอย YH, ปาร์ค HY.ต้านการอักเสบผลของสเปิร์มในเซลล์ microglial ที่กระตุ้นด้วยไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ J Biomed Sci2012; 19:31.
29. Wallace JL, Chapman K, McKnight W. Limitedต้านการอักเสบประสิทธิภาพของการยับยั้ง cyclo-oxygenase-2 ในการอักเสบของ carrageenan-air pouch Br J Pharmacol 1999; 126(5): 1200-1204.
30. Oliveira de Melo J, da Conceição Torrado Truiti M, Muscará MN,Bolonheis SM, Dantas JA, Caparroz-Assef SM, Cuman RK,Bersani-Amado CAต้านการอักเสบกิจกรรมของสารสกัดหยาบและเศษส่วนของใบ Nectandra falcifolia Biol Pharm Bull2006; 29(11): 2241-2245.
31. Zanardo RC, Bracaleone V, Distrutti E, Fiorucci S, Cirino G, Wallace JL. ไฮโดรเจนซัลไฟด์เป็นตัวดัดแปลงภายในของการอักเสบที่เกิดจากเม็ดเลือดขาว ฟาเส็บ เจ 2549; 20(12): 2118-2120.
32. Masferrer JL, Zweifel BS, Manning PT, Hauser SD, Leahy KM, Smith WG, Isakson PC, Seibert K. การยับยั้งการคัดเลือกของ cyclooxygenase 2 inducible ในร่างกายคือต้านการอักเสบและ nonulc erogenic Proc Natl Acad Sci สหรัฐอเมริกา 1994; 91(8): 3228-3232.
