การโคลนยีน การระบุหน้าที่ การวิเคราะห์โครงสร้างและการแสดงออกของซูโครสซินเทสจาก Cistanche Tubulosa Ⅲ

4 การวิเคราะห์การแสดงออกของ CtSus ในส่วนต่างๆ ของ Cistanche tubulosa และระบบเพาะเลี้ยงเซลล์ภายใต้ความเครียดจากภัยแล้ง

4.1 การวิเคราะห์การแสดงออกของ CtSus ในส่วนต่างๆ ของ Cistanche tubulosa

ในหลอดทดลอง การทดลองการเปลี่ยนแปลงทั้งเซลล์และการทดลองปฏิกิริยาเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์ยืนยันว่าโปรตีนที่เข้ารหัสโดยยีน CtSus สามารถกระตุ้นการสังเคราะห์ UDP-กลูโคสได้ เพื่อสำรวจความสัมพันธ์เพิ่มเติมระหว่างยีนนี้กับการสังเคราะห์ทางชีวภาพของสารประกอบไกลโคไซด์ใน Cistanche tubulosa ได้มีการวิเคราะห์ระดับการแสดงออกของยีนนี้ในส่วนต่างๆ ของ Cistanche tubulosa

สมุนไพร CISTANCHE คุณภาพสูงที่มีเอไคนาโคไซด์ 10-98%

Echinacoside is the most representative glycoside compound in Cistanche tubulosa, and its content can reach more than 30% of the dry weight of Cistanche tubulosa plants [23]. The research group previously measured the content of echinacoside in different parts of Cistanche tubulosa plants. Specifically, the content of echinacoside in different tissues is as follows: haustoria>underground part>>ส่วนทางอากาศ ในหมู่พวกเขาเนื้อหาของ echinacoside ใน haustoria นั้นสูงที่สุด

PCR เชิงปริมาณเรืองแสงแบบเรียลไทม์ดำเนินการโดยใช้ cDNA จากส่วนต่าง ๆ ของ Cistanche tubulosa เป็นเทมเพลต และวิเคราะห์ผลลัพธ์โดยวิธี 2 – ΔΔCT และดำเนินการวิเคราะห์เชิงอนุพันธ์ ผลลัพธ์แสดงไว้ในรูปที่ 4A ระดับการแสดงออกของยีน CtSus ใน haustoria นั้นสูงที่สุด 1.5 เท่าของส่วนทางอากาศ และระดับการแสดงออกในส่วนใต้ดินนั้นสูงกว่าในส่วนทางอากาศอย่างมีนัยสำคัญซึ่งสอดคล้องกับรูปแบบการสะสมของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ แสดงโดยเอไคนาโคไซด์ในส่วนต่างๆ ของ Cistanche tubulosa

รูปที่ 4 ระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ของ CtSus ในส่วนต่างๆ ของ C. tubulosa และเซลล์แขวนลอยที่บำบัดโดย PEG6000 ตอบ: ระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ของ CtSus ในส่วนต่างๆ ของ C. tubulosa; B: ระดับการแสดงออกสัมพัทธ์ของ CtSus ในเซลล์แขวนลอย C. tubulosa ที่บำบัดโดย PEG6000 ณ จุดเวลาที่ต่างกัน n=3, 𝑥̅±s.*P ＜ 0.05,***P ＜ 0.001

4.2 การวิเคราะห์การแสดงออกของ CtSus ในเซลล์แขวนลอย Cistanche Deserticola ภายใต้สภาวะความเครียดจากภัยแล้ง

การวิจัยเบื้องต้นเกี่ยวกับโครงการนี้แสดงให้เห็นว่าความเครียดจากภัยแล้งที่เกิดจาก PEG6000 สามารถเพิ่มการสะสมของฟีนิลเอธานอลไกลโคไซด์ในเซลล์แขวนลอยของ Cistanche Deserticola ได้อย่างมีนัยสำคัญ จาก 3 ถึง 9 วันหลังจากการเหนี่ยวนำ ปริมาณเอ็กไคนาเซียไซด์เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ตั้งแต่วันที่ 12 ถึงวันที่ 15 อัตราการเติบโตของปริมาณเอชินาโคไซด์ช้าลงและถึงค่าสูงสุดในวันที่ 15 จากนั้น เมื่อเวลาเพาะเลี้ยงเพิ่มขึ้น ปริมาณเอชินาโคไซด์ก็เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ปริมาณฟรุกโตไซด์ค่อยๆ ลดลง [24] จากการวิจัยนี้ บทความนี้ใช้ cDNA ของเซลล์สารแขวนลอย Cistanche Deserticola ที่ไม่ได้รับการบำบัด และเซลล์สารแขวนลอย Cistanche Deserticola ที่เกิดจาก PEG6000- เป็นแม่แบบในการดำเนินการตรวจหา PCR เชิงปริมาณเรืองแสงแบบเรียลไทม์เพื่อตรวจสอบยีน CtSus ในเซลล์สารแขวนลอย Cistanche Deserticola ภายใต้ สภาวะความเครียดจากภัยแล้ง การเปลี่ยนแปลงในระดับการแสดงออก ผลลัพธ์แสดงไว้ในรูปที่ 4B ในเซลล์สารแขวนลอย Cistanche Deserticola ที่เกิดจาก PEG6000 การแสดงออกของ CtSus เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในวันที่ 6 หลังจากการเหนี่ยวนำ ไปถึงค่าสูงสุดในวันที่ 9 และจากนั้นกลับไปสู่ระดับเดียวกันกับกลุ่มควบคุม กลุ่มระดับเดียวกัน ผลลัพธ์ข้างต้นแสดงให้เห็นว่าความเครียดจากภัยแล้งสามารถเพิ่มการแสดงออกของยีน CtSus ในเซลล์แขวนลอย Cistanche Deserticola ได้อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งสอดคล้องกับรูปแบบการสะสมของเอ็กไคนาซีไซด์ภายใต้ความเครียดจากภัยแล้ง อย่างไรก็ตาม การแสดงออกสูงสุดของยีน CtSus จะปรากฏก่อนจุดสูงสุดของปริมาณเอ็กไคนาซีไซด์ เนื่องจากผู้ให้ไกลโคซิลที่ออกฤทธิ์สังเคราะห์โดยการเร่งปฏิกิริยาด้วย CtSus เป็นสารตั้งต้นที่สำคัญที่จำเป็นสำหรับปฏิกิริยาไกลโคซิเลชันแบบหลายขั้นตอนในวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพที่ตามมาของเอ็กไคนาซีไซด์ มีการคาดเดาว่าหลังจากเผชิญกับความเครียดจากภัยแล้ง สิ่งมีชีวิตจะระดมยีนที่เกี่ยวข้องกับเมแทบอลิซึมปฐมภูมิเป็นพิเศษ เพื่อให้เกิดการสะสมของผู้บริจาคที่กระตือรือร้น และจากนั้นจึงบรรลุการสะสมเมแทบอลิซึมรองที่สำคัญของผลิตภัณฑ์เมตาบอลิซึม

5 การศึกษาโครงสร้างสามมิติของโปรตีน CtSus และการวิเคราะห์จุดออกฤทธิ์ที่สำคัญ

จากการทำงานของ CtSus ในการเร่งปฏิกิริยาการผลิตไกลโคซิลผู้บริจาค UDP-กลูโคส ได้มีการศึกษาพื้นฐานโครงสร้างของกิจกรรมการเร่งปฏิกิริยาของ CtSus ต่อไป เครื่องมือออนไลน์ SOPMA ใช้เพื่อทำนายโครงสร้างทุติยภูมิของโปรตีน ผลการศึกษาพบว่าโครงสร้างรองของ CtSus ประกอบด้วยเอนริเก้ 55.28%, ขดลวดสุ่ม 25.47%, เส้นขยาย 12.80% และการหมุน 6.46% (รูปที่ 5A) ซึ่งบ่งชี้ว่า -เอนริเก้เป็นหน่วยโครงสร้างรองที่สำคัญที่สุดในโปรตีน CtSus ตามด้วยขดลวดสุ่มซึ่งมีสัดส่วนของโปรตีนมากเช่นกัน เส้นที่ขยายออกและการหมุนจะกระจายไปทั่วโปรตีน จากการศึกษาที่มีอยู่พบว่าซูโครสซินเทสมักมีอยู่ในรูปของเตตระเมอร์ซึ่งถือเป็นรูปแบบที่ออกฤทธิ์ ดังนั้นบทความนี้จึงใช้ AlphaFold2 เพิ่มเติมเพื่อทำนายโครงสร้างของโปรตีน CtSus และได้รับโครงสร้างสามมิติของโปรตีนเตตระเมอร์ การเปรียบเทียบฐานข้อมูล PDB (Protein Data Bank) พบว่าลำดับความคล้ายคลึงกันระหว่าง Arabidopsis thaliana sucrose synthase AtSus1 (PDBID 3S28) และ CtSus สามารถเข้าถึง 77.93% โครงสร้าง CtSus ที่คาดการณ์ไว้ถูกนำมาเปรียบเทียบกับโครงสร้างสามมิติ AtSus1 และค่าส่วนเบี่ยงเบนกำลังสองเฉลี่ยของราก (RMSD) หลังจากการซ้อนทับของโปรตีนคือ 1.11 Å ซึ่งบ่งชี้ว่าโครงสร้างเชิงพื้นที่ของทั้งสองมีความสอดคล้องกันสูง (รูปที่ 5B)

รูปที่ 5 การตรวจสอบโครงสร้างของ CtSus ตอบ: โครงสร้างรองที่คาดการณ์ไว้ของ CtSus โดยใช้ SOPMA.Blue: helix; สีม่วง: ขดลวดสุ่ม; สีแดง: เกลียวขยาย; สีเขียว: แผ่น B: การจัดตำแหน่งโครงสร้างสามมิติของ AtSus1 (เป็นสีน้ำเงิน) และ CtSus (เป็นสีเขียว) ทั้งสองแสดงเป็น tetramer.C: สารตกค้างที่สำคัญในกระเป๋าที่มีผลผูกพันของ AtSus1 (เป็นสีน้ำเงิน) และ CtSus (เป็นสีเขียวพร้อมสารตกค้างที่มีป้ายกำกับ); D: การจัดตำแหน่งการจัดแนวการเชื่อมโยงของ UDP และฟรุกโตสใน AtSus1 (เป็นสีน้ำเงิน) และ CtSus (เป็นสีเขียว); E: การโต้ตอบระหว่าง UDP และ CtSus ที่แสดงในไดอะแกรม 2 มิติวิเคราะห์โดย Discovery Studio Client

โครงสร้างเชิงซ้อนของโปรตีนลิแกนด์คริสตัลที่รายงานของ Arabidopsis AtSus1 พร้อม UDP และฟรุกโตส (PDBID3S29) ถูกใช้เป็นเทมเพลต [16] เพื่อวิเคราะห์โหมดการจับของ CtSus ด้วย UDP และฟรุกโตส ผลลัพธ์การเชื่อมต่อระดับโมเลกุลแสดงไว้ในรูปที่ 5C สังเกตได้ว่าช่องจับสารตั้งต้นของ AtSus1 และ CtSus มีความคล้ายคลึงกันมากในแง่ของประเภทของกรดอะมิโน การกระจายตัวเชิงพื้นที่ และโครงร่าง และการทับซ้อนกันนั้นสูง ซึ่งพิสูจน์ได้ว่าลำดับของซูโครสซินเทสได้รับการอนุรักษ์ไว้อย่างสูงในพืช ความสอดคล้องกันของลิแกนด์สองตัว UDP และฟรุกโตส ในช่องการจับซับสเตรตโปรตีนถูกแสดงไว้ในรูปที่ 5D โครงสร้างการเชื่อมต่อระดับโมเลกุลที่ได้เปรียบที่สุดของ UDP และ CtSus ซ้อนทับกันได้ดีกับโครงสร้างของ UDP ในคอมเพล็กซ์คริสตัล AtSus1-UDP ซึ่งพิสูจน์ความแม่นยำของผลลัพธ์การเชื่อมต่อระดับโมเลกุล อันตรกิริยาระหว่าง UDP และเรซิดิวของกรดอะมิโนที่สำคัญในช่องจับของซับสเตรตโปรตีนแสดงไว้ในรูปที่ 5E UDP และ CtSus ส่วนใหญ่ผูกพันกันด้วยพันธะไฮโดรเจนและปฏิกิริยาที่ไม่ชอบน้ำ กรดอะมิโนที่สำคัญตกค้างในช่องจับของสารตั้งต้น ได้แก่ Leu294, Gly301, Met576, Arg578, Lys583, Gln646, Asn652, Leu677, Thr678 และ Glu681

การอภิปราย

การดัดแปลงไกลโคซิเลชันเป็นหนึ่งในวิธีการสำคัญในการปรับปรุงคุณสมบัติทางกายภาพและกิจกรรมทางชีวภาพของผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติหรือสารตั้งต้นของยา เมื่อเปรียบเทียบกับวิธีการทางเคมีแบบดั้งเดิม การดัดแปลงเอนไซม์ไกลโคซิเลชันมีข้อดีคือสภาวะของปฏิกิริยาที่ไม่รุนแรง การเลือกสรรที่แข็งแกร่ง และเป็นมิตรต่อสิ่งแวดล้อม อย่างไรก็ตาม ปฏิกิริยาไกลโคซิเลชันของไกลโคซิลทรานสเฟอเรสต้องใช้ผู้บริจาคน้ำตาล UDP จำนวนมาก ซึ่งมีราคาแพงและหาซื้อได้ยาก ส่งผลให้ไกลโคซิลทรานสเฟอเรสไม่สามารถใช้กันอย่างแพร่หลายในการผลิตภาคอุตสาหกรรมได้ ซูโครสซินเทสสามารถกระตุ้นปฏิกิริยาที่ผันกลับได้: ซูโครส + UDP ⇌ UDP-กลูโคส + ฟรุกโตส และสามารถสร้างวงจร UDP-กลูโคสที่หมุนเวียนได้ผ่านปฏิกิริยาคัปปลิ้งกับไกลโคซิลทรานสเฟอเรส Cistanche tubulosa อุดมไปด้วยสารประกอบไกลโคไซด์หลายชนิดที่มีโครงสร้างต่างกัน ซึ่งแสดงโดยสารประกอบฟีนิลเอธานอล ไกลโคไซด์ ซึ่งบ่งบอกว่าวิถีการสังเคราะห์ผู้บริจาคไกลโคซิลที่ใช้งานอยู่ในร่างกายที่เกี่ยวข้องกับซูโครสซินเทสนั้นมีการเผาผลาญที่แข็งแกร่ง แต่ซูโครสซินเทสที่เกี่ยวข้องจากพืช Cistanche ไม่มี ได้รับรายงานแล้ว ในการศึกษานี้ CtSus ของยีนซูโครสซินเทสถูกโคลนจาก Cistanche tubulosa เป็นครั้งแรก โปรตีนที่ถูกเข้ารหัสโดยยีนนี้มีโดเมนอนุรักษ์ของซูโครสสังเคราะห์จากพืช เมื่อเปรียบเทียบลำดับการสังเคราะห์ซูโครสจากพืชชนิดอื่น พบว่าลำดับกรดอะมิโนมีความคล้ายคลึงกันกับการสังเคราะห์ซูโครสจากพืชในลำดับเดียวกันมากกว่า 90% ซึ่งบ่งชี้ถึงการอนุรักษ์ลำดับการสังเคราะห์ซูโครสจากพืชในระดับสูง การวิเคราะห์วิวัฒนาการระดับโมเลกุลแสดงให้เห็นว่า CtSus อยู่ในสาขาซูโครสซินเทสของพืชใบเลี้ยงคู่ และมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดที่สุดกับซูโครสซินเทส PrSus จาก P. ramosa ของตระกูล Orobanchaceae

เพื่อสำรวจกิจกรรมการเร่งปฏิกิริยาของ CtSus การศึกษานี้ได้รวม glycosyltransferase UGT71BD1 ซึ่งมีกิจกรรมที่ได้รับการตรวจสอบก่อนหน้านี้โดยกลุ่มวิจัย เพื่อสร้างระบบการแสดงออกร่วมพลาสมิดคู่ จากการทดลองเร่งปฏิกิริยาทั้งเซลล์ สภาวะต่างๆ บรรลุผลโดยไม่ต้องเพิ่มผู้ให้น้ำตาล UDP เพิ่มเติม ปฏิกิริยาไกลโคซิเลชันของสารประกอบคูมารินอบเชยและเรสเวอราทรอลสารประกอบสติลบีน เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม การเติม CtSus เพิ่มอัตราการแปลงของปฏิกิริยาไกลโคซิเลชันที่ถูกเร่งปฏิกิริยา UGT71BD1-อย่างมีนัยสำคัญ บนพื้นฐานนี้ การศึกษานี้ได้สร้างพลาสมิดการแสดงออกรีคอมบิแนนท์ของ CtSus เพิ่มเติม และบรรลุการแสดงออกที่ละลายได้ของโปรตีนรีคอมบิแนนท์ใน E. coli ในหลอดทดลอง ปฏิกิริยาเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์แสดงให้เห็นว่าเมื่อมีซูโครสและ UDP CtSus สามารถกระตุ้นการสร้าง UDP-กลูโคสได้ และหลังจากที่แท็กความสัมพันธ์ของทริกเกอร์แฟคเตอร์ที่มีอยู่ในโปรตีนรีคอมบิแนนท์ถูกลบออก ผลิตภัณฑ์ของ CtSus จะเร่งการสร้าง UDP - ได้รับกลูโคส อัตราได้รับการปรับปรุงอย่างมีนัยสำคัญ การเปลี่ยนแปลงทั้งเซลล์และผลลัพธ์ของปฏิกิริยาตัวเร่งปฏิกิริยาของเอนไซม์ ในหลอดทดลอง ยืนยันการทำงานของ CtSus ในฐานะผู้บริจาคน้ำตาลที่ใช้งานตัวเร่งปฏิกิริยาสังเคราะห์ซูโครส UDP-กลูโคส เพื่อสำรวจความสัมพันธ์เพิ่มเติมระหว่างยีน CtSus และการสังเคราะห์ทางชีวภาพของไกลโคไซด์ใน Cistanche tuberosum การแสดงออกของ CtSus ในส่วนต่างๆ ของ Cistanche tuberosum ได้รับการวิเคราะห์โดยการทดลอง PCR เชิงปริมาณเรืองแสงแบบเรียลไทม์ ผลการศึกษาพบว่ามีการแสดงออกของยีนใน haustoria ของ Cistanche tuberosum ระดับการแสดงออกสูงสุด Cistanche Deserticola เป็นพืชปรสิตและไม่สามารถรับสารอาหารที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตและการพัฒนาผ่านการสังเคราะห์ด้วยแสง ดังนั้นจึงจำเป็นต้องมีพยาธิอยู่ที่รากของพืชอาศัยและอาศัยพืชอาศัยเพื่อรับสารอาหารเพื่อรักษาการเจริญเติบโต ในพืช ซูโครสส่วนใหญ่ให้พลังงานและแหล่งคาร์บอนแก่ผู้บริจาค [12] อย่างไรก็ตาม ซูโครสไม่สามารถใช้กับเซลล์ได้โดยตรงและจำเป็นต้องย่อยสลายเพิ่มเติม เฮาส์โทเรียเป็นสะพานที่เชื่อม Cistanche Deserticola กับพืชอาศัย และมีบทบาทสำคัญในกระบวนการเติบโต สำคัญ

[25] ดังนั้นการแสดงออกที่สูงของซูโครสซินเทสใน haustoria ของ Cistanche Deserticola จึงสมเหตุสมผล การแสดงออกที่สูงของ CtSus ใน haustoria ยังสอดคล้องกับรูปแบบการสะสมขนาดใหญ่ของ phenylethanoid glycosides ใน haustoria นอกจากนี้ จากการวิเคราะห์ PCR เชิงปริมาณเรืองแสงของการเปลี่ยนแปลงระดับการแสดงออกของยีน CtSus ในเซลล์แขวนลอย Cistanche Deserticola ณ จุดเวลาต่างๆ ภายใต้ความเครียดจากภัยแล้ง พบว่าความเครียดจากภัยแล้งสามารถเพิ่มการแสดงออกของยีน CtSus ในเซลล์แขวนลอยของ Cistanche ได้อย่างมีนัยสำคัญ ซึ่งก็คือ สอดคล้องกับอิชินาซีไซด์ รูปแบบการสะสมในเซลล์แขวนลอยภายใต้ความเครียดจากภัยแล้งมีความสอดคล้องกัน ผลลัพธ์ข้างต้นชี้ให้เห็นว่า CtSus มีส่วนร่วมในวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ที่แสดงโดยเอ็กไคนาเซียใน Cistancheดอกทิวลิป ในสิ่งมีชีวิต มันเป็นหนึ่งในวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพจำนวนมาก ปฏิกิริยาไกลโคซิเลชันขั้นแรกจัดให้มี UDP-กลูโคสของผู้ให้ไกลโคซิลที่แอคทีฟ กล่าวโดยย่อคือการศึกษาครั้งนี้

การศึกษาระบุยีนซูโครสซินเทสใหม่ใน Cistanche Deserticola ซึ่งช่วยให้สามารถสังเคราะห์เอนไซม์ในหลอดทดลองของผู้ให้ไกลโคซิลที่ออกฤทธิ์ และให้องค์ประกอบทางพันธุกรรมใหม่สำหรับการสร้างแบคทีเรียทางวิศวกรรมสำหรับการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ Cistanche Deserticola glycosides

การมีส่วนร่วมของผู้เขียน: Tian Weisheng รับผิดชอบด้านการวิเคราะห์ชีวสารสนเทศศาสตร์ การวิเคราะห์การแสดงออก การวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ และการเขียนร่างแรกของยีน CtSus ยาน ยารูรับผิดชอบในการคัดกรองและโคลนนิ่งยีน Cui Xiaoxue และ Huang Wenqian เข้าร่วมในการวิเคราะห์ชีวสารสนเทศศาสตร์และการวิเคราะห์การแสดงออก Wang Yingxia และ Zhao Saijing เข้าร่วมในการสร้างเวกเตอร์และการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์ Li Jun และ Shi Shepo เป็นผู้ชี้นำการวิเคราะห์กิจกรรมของเอนไซม์และการวิเคราะห์การแสดงออกเป็นหลัก Tu Pengfei และ Liu Xiao รับผิดชอบในการออกแบบแนวคิดเกี่ยวกับกระดาษ ชี้แนะการทดลอง ตลอดจนเขียนและแก้ไขรายงาน ผู้เขียนทุกคนมีส่วนร่วมในการทบทวนบทความนี้

อ้างอิง

[1] ซ่ง ZH, เล่ย แอล, ตู่ PF. ความก้าวหน้าในการวิจัยฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาในพืช CistancheHoffing และลิงค์ [J] ยาสมุนไพรชินประเพณี (中草药), 2003, 34: 113-115

[2] Liu WJ, Liu Y, Song QQ และคณะ การเปรียบเทียบทางเคมีระหว่าง Cistanchetubulosa ที่ได้รับการเพาะปลูกและในป่าโดยใช้ ¹H-NMR สเปกโทรสโกปี [J] China J Chin Mater Med (中中中药杂志), 2018, 43:3506-3512

[3] Song Y, Zeng K, Jiang Y และคณะ Cistanches Herba จากสัตว์ใกล้สูญพันธุ์สู่แบรนด์ยาจีนรายใหญ่ [J] Med Res Rev, 2021, 41: 1539-1577.[4] Liu Y, Wang H, Yang M และคณะ Cistanche Deserticola Polysaccharides ปกป้องเซลล์ PC12 จากการบาดเจ็บที่เกิดจาก OGD/RP [J] เภสัชกรรมชีวการแพทย์, 2018, 99: 671-680.

[5] หยิน Y, Huang J, Gu X และคณะ วิวัฒนาการของเอนไซม์ในการแปลงนิวคลีโอไทด์และน้ำตาลของพืช [J] .PLoS One, 2011, 6: e27995

[6] Bar-Peled M, โอนีล แมสซาชูเซตส์ การสร้างน้ำตาลนิวคลีโอไทด์ของพืช การเปลี่ยนรูป และการกอบกู้โดยการรีไซเคิลน้ำตาล [J] Annu Rev Plant Biol, 2011, 62: 127-155

[7] กัว เอช, หลี่ แอล, วัง พีจี. การแสดงคุณลักษณะทางชีวเคมีของ UDP-GlcNAc/Glc4-เอพิเมอเรสจาก Escherichia coli O86:B7 [J] ชีวเคมี 2549, 45: 13760-13768

(8) ดง S, Chesnokova ON, Turnbough CL Jr, และคณะ การจำแนก UDP-N-acetylglucosamine4-เอพิเมอเรสที่เกี่ยวข้องกับเอ็กโซสปอเรียมโปรตีนไกลโคซิเลชันใน Bacillus anthracis [J] เจ แบคทีเรียล,2009, 191: 7094-7101

[9] หลี่ แอลเอ็น, กง เจคิว. การจำแนกยีนซูโครสซินเทสในทั้งยีนใน Ornithogalumcaudatum [J] ที่ปรึกษา RSC, 2016, 6: 18778-18792

[10]ชเมลเซอร์ เค, กุทมันน์ เอ, ดิริกส์ เอ็ม, และคณะ ซูโครสซินเทส: ไกลโคซิลทรานสเฟอเรสที่เป็นเอกลักษณ์สำหรับการพัฒนากระบวนการไกลโคซิเลชันทางชีวภาพ [J] Biotechnol Adv, 2016, 34: 88-111.[11]Cardini CE, Leloir LF, Chiriboga J. การสังเคราะห์ทางชีวภาพของซูโครส [J] เจ ไบโอล เคม, 1955,214: 149-155