Rosinidin ลดทอนการด้อยค่าของหน่วยความจำที่เกิดจาก Lipopolysaccharide ในหนู: กลไกการทำงานที่เป็นไปได้ ได้แก่ สารต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ต้านการอักเสบ

โปรดติดต่อoscar.xiao@wecistanche.comเพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

เชิงนามธรรม:การตรวจสอบนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินผลดีของโรซินิดินในการเรียนรู้ที่เกิดจากไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS) และความจำเสื่อมในหนู หนูแรท Wistar ที่โตเต็มวัย (150–200 ก.) ถูกแบ่งเท่าๆ กันเป็นสี่กลุ่มที่แตกต่างกันและได้รับการรักษาดังนี้: กลุ่มที่ 1 (ปกติ) และกลุ่มที่ 2 (กลุ่มควบคุม LPS) ถูกบริหารให้ทางปากด้วย SCMC 0.5 เปอร์เซ็นต์ 3 มล. (พาหนะ ); กลุ่มที่ 3 และกลุ่มที่ 4 เป็นกลุ่มทดสอบและบริหารให้รับประทานด้วยขนาดยาที่ต่ำกว่าของโรซินิดิน (10 มก./กก.) และขนาดยาที่สูงขึ้น 20 มก./กก. การรักษาที่กล่าวถึงหลังข้อเสนอ 1 ชั่วโมงทุกวัน สัตว์กลุ่ม 1 ถูกฉีดด้วยน้ำเกลือปกติ (ip) และกลุ่ม 2–4 ถูกบำบัดด้วย LPS 1 มก./กก./วัน ตารางการรักษานี้ได้รับการปฏิบัติตามทุกวันเป็นเวลา 7 วัน ในระหว่างการรักษา หนูตารางเวลาได้รับการประเมินสำหรับกิจกรรมของหัวรถจักรที่เกิดขึ้นเอง ความจำ และความสามารถในการเรียนรู้ การประเมินทางชีวเคมีดำเนินการจาก acetylcholine esterase(AChE), สารต้านอนุมูลอิสระภายใน (GSH, SOD, GPx และ catalase), สารบ่งชี้ความเครียดออกซิเดชัน MDA, สารบ่งชี้การอักเสบของระบบประสาท (IL-6, IL-1 , TNF- และ NF-κB) และ BDNF กิจกรรมของหัวรถจักรที่เกิดขึ้นเองซึ่งเหนี่ยวนำโดย LPS ลดลงและการด้อยค่าของหน่วยความจำในสัตว์ นอกจากนี้ LPS ยังลดระดับ GST, SOD, GPx และ catalase; กิจกรรมที่เปลี่ยนแปลงของ AChE; ระดับที่สูงขึ้นของ MDA, IL-6, IL-1 , TNF- และ NF-κB; และลดระดับของ BDNF ในเนื้อเยื่อสมอง การบริหารให้ขัดสนในสัตว์ที่ได้รับการบำบัดด้วย LPS ช่วยลดความบกพร่องทางระบบประสาทที่เกิดจาก LPS ความเครียดออกซิเดชันการอักเสบของระบบประสาทเครื่องหมายและย้อนกลับกิจกรรมของเอนไซม์ Ach และระดับ BDNF สู่ระดับปกติ ผลปรากฏว่าโรซินิดินลดทอนผลกระทบของ LPS ต่อการเรียนรู้ความจำในหนู

คำสำคัญ:acetylcholinesterase; แอนโธไซยานิดิน;ฟลาโวนอยด์; สารป้องกันประสาท

บทนำ

โรคทางระบบประสาทมีลักษณะการอักเสบของระบบประสาท อันเป็นผลมาจากการอักเสบของระบบประสาทและความผิดปกติของไมโตคอนเดรีย สปีชีส์ของออกซิเจนปฏิกิริยา (ROS) และไนโตรเจน (RNS) จะถูกส่งไปที่ระดับสุดขั้ว [1–3] ไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ที่เป็นส่วนประกอบของผนังเซลล์ (LPS) ที่พบในแบคทีเรียแกรมลบมักใช้กับสัตว์ที่เป็นสาเหตุของการอักเสบในระบบประสาท [1,2] LPS ในระบบได้รับการระบุว่าเป็นรูปแบบโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับเชื้อโรคโดยสัตว์มีกระดูกสันหลังที่สูงกว่า โดยการจับกับเซลล์ภูมิคุ้มกัน LPS จะกระตุ้นปัจจัยนิวเคลียร์ κB (NFκB) เพื่อเพิ่มการแสดงออกของปัจจัยเนื้อร้ายของเนื้องอก (TNF- ), interleukin-6 (IL-6) ​​และ interleukin-1 ( อิลลินอยส์-1 ). หลังจากการปล่อยไซโตไคน์ ไมโครเกลียและมาโครฟาจในระบบประสาทส่วนกลาง (CNS) ยังผลิตไซโตไคน์ชนิดเดียวกัน โดยมุ่งเป้าไปที่สารตั้งต้นของเซลล์ประสาทและกระตุ้นการอักเสบภายในเซลล์ประสาท [1,2] การตอบสนองต่อการอักเสบอย่างรวดเร็วที่เกิดจาก LPS ทำให้เกิดเปอร์ออกไซด์และ ROS ที่ค่อนข้างสูงใน CNS [1,2] ในที่สุด พยาธิสภาพที่เกิดจากความเครียดออกซิเดชันจะส่งผลให้เกิดเมื่อระดับของเปอร์ออกไซด์และ ROS เกินการป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระภายในร่างกาย [1,2] ลิปิดเปอร์ออกซิเดชันมุ่งเป้าไปที่กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนในสมอง [4,5] นอกจากนี้ สมองยังมีกลไกป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระเพียงเล็กน้อย ดังนั้นจึงมีความอ่อนไหวสูงต่อความเสียหายจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน [4–6] นอกจากนี้ LPS ยังส่งผลให้เกิดความผิดปกติทางพฤติกรรม เช่น ความผิดปกติของความรู้ความเข้าใจและภาวะสมองเสื่อม [1,2,5] มันคือ

เป็นไปได้ที่จะลดความชุกของโรคเกี่ยวกับระบบประสาทโดยการลดการอักเสบของระบบประสาทและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันในช่วงต้น [1,2] การศึกษาล่าสุดได้พิสูจน์แล้วว่าสารต้านอนุมูลอิสระและสารต้านการอักเสบมีประโยชน์ในการรักษาโรคต่างๆ ของระบบประสาทส่วนกลาง รวมถึงการอักเสบและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันที่เกิดจาก LPS [1,2,5,7] ในโรคทางระบบประสาทสารฟลาโวนอยด์ยับยั้งสารไกล่เกลี่ยการอักเสบ กระตุ้นเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ ยับยั้งลิพิดเปอร์ออกซิเดชัน และปรับการแสดงออกของยีน [8] มีรายงานว่าฟลาโวนอยด์จำนวนมากมีฤทธิ์ปกป้องระบบประสาทในรูปแบบต่างๆ ของโรคทางระบบประสาท [9,10] ผลไม้และดอกไม้ของพืชชั้นสูงมีสีแดงน้ำเงินที่ละลายน้ำได้สารฟลาโวนอยด์ แอนโธไซยานินและแอนโธไซยานิดินที่ปราศจากน้ำตาล ทั้งแอนโธไซยานินและแอนโธไซยานิดินใช้เป็นสารแต่งสีในอาหารหลายชนิดและเป็นส่วนผสมทางเภสัชกรรม [11] นอกจากนี้ แอนโธไซยานินและแอนโธไซยานิดินมีประโยชน์ต่อสุขภาพ [11,12] แอนโธไซยานินและสารเมตาโบไลต์ของพวกมันได้รับการศึกษาเพื่อทำหน้าที่ป้องกันระบบประสาทในโรคต่างๆ ของระบบประสาท [13] แอนโธไซยานินมีผลดีในภาวะซึมเศร้าโดยเพิ่มการควบคุมการแสดงออกของสารสื่อประสาทโมโนเอมีนและ neurotrophic factor ที่ได้รับจากสมอง (BDNF) [14] โรซินิดินเป็นฟลาโวนอยด์ (แอนโธไซยานิดิน) ที่พบเป็นเม็ดสีในดอกไม้อย่าง Catha ดังนั้นจึงทำให้โรซิอุสและพรีมูลาโรเซีย โรซินิดิน (รูปที่ 1) ประกอบด้วยเบนโซไพริเลียมที่มีหมู่แทนที่ไฮดรอกซีที่ตำแหน่ง 3 และ 5 หมู่แทนที่เมทอกซีที่ตำแหน่ง 7 และ 4-ไฮดรอกซี-3-การแทนที่เมทอกซีฟีนิลที่ตำแหน่ง 2

ในเป้าหมายของเอนไซม์ซิลิโก การศึกษาพบว่าโรซินิดินมีคุณสมบัติทางโครงสร้างที่จำเป็นและการดำเนินการทางเภสัชวิทยา และมีศักยภาพที่จะเป็นตัวยาสำหรับการรักษา neurodegenerative [8] การศึกษาเทียบท่าระดับโมเลกุลพบว่าโรซินิดินมีฤทธิ์ป้องกันระบบประสาทที่ดีต่อโรคพาร์กินสัน [8] จากข้อมูลข้างต้น การศึกษาได้ดำเนินการเพื่อประเมินประสิทธิภาพของ rosinidin ในการด้อยค่าของหน่วยความจำที่เกิดจาก LPS ในหนูแรท

ระเบียบวิธี2.1. เคมีภัณฑ์ Rosinidin และ LPS ได้มาจาก Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA) ชุดวิเคราะห์สำหรับ interleukin-6 (IL-6), interleukin-1 (IL-1 ), tumor necrosis factor-alpha (TNF- ), Nuclear factor-kappa (NF) -κB) และปัจจัย neurotrophic ที่ได้รับจากสมอง (BDNF) ถูกวัดโดยใช้การทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ของหนูที่มีจำหน่ายในท้องตลาด รูปที่ 1 โครงสร้างทางเคมีของ rosinidin ในเป้าหมายของเอนไซม์ซิลิโก การศึกษาพบว่าโรซินิดินมีคุณสมบัติทางโครงสร้างที่จำเป็นและการดำเนินการทางเภสัชวิทยา และมีศักยภาพที่จะเป็นตัวยาสำหรับการรักษา neurodegenerative [8] การศึกษาเทียบท่าระดับโมเลกุลพบว่าโรซินิดินมีฤทธิ์ป้องกันระบบประสาทที่ดีต่อโรคพาร์กินสัน [8] จากข้อมูลข้างต้น การศึกษาได้ดำเนินการเพื่อประเมินประสิทธิภาพของ rosinidin ในการด้อยค่าของหน่วยความจำที่เกิดจาก LPS ในหนูแรท 2. วิธีการ 2.1. เคมีภัณฑ์ Rosinidin และ LPS ได้มาจาก Sigma Aldrich (St. Louis, MO, USA) ชุดวิเคราะห์สำหรับ interleukin-6 (IL{{20}}), interleukin-1 (IL-1 ), tumor necrosis factor-alpha (TNF- ), นิวเคลียร์ factor-kappa (NF-κB) และ neurotrophic factor ที่ได้รับจากสมอง (BDNF) ถูกวัดโดยใช้ชุดทดสอบ immunosorbent assay ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ในหนูที่มีจำหน่ายในท้องตลาดอินเดีย (Modern Lab, MS, Indore, India) การทดลองดำเนินการโดยใช้รีเอเจนต์และสารเคมีคุณภาพสูง ชีวโมเลกุล 2.2 สัตว์ หนูวิสตาร์ (200–240 ก.) ถูกปรับให้เข้ากับสภาพห้องปฏิบัติการ พวกเขามีอิสระในการเข้าถึงอาหารและน้ำ คณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ของสถาบันได้อนุมัติโปรโตคอลซึ่งเป็นไปตามแนวทางของ CPCSEA รัฐบาลอินเดีย 2.3. การศึกษาความเป็นพิษในช่องปากเฉียบพลัน การศึกษาความเป็นพิษในช่องปากเฉียบพลัน (LD50) ของโรซินิดินดำเนินการตามแนวทางที่กำหนดโดยองค์การเพื่อความร่วมมือทางเศรษฐกิจและการพัฒนา (OECD) ภาคผนวก- 423 [15,16] 2.4. โรซินิดินในการทดลองถูกเจือจางด้วยสารละลายโซเดียมซีเอ็มซี 0.5 เปอร์เซ็นต์ และให้สัตว์ทดลองทางปากเป็นเวลา 07 วัน เพื่อกระตุ้นการอักเสบของระบบประสาทและความจำเสื่อมในหนู ให้ LPS 1 มก./กก. ในช่องท้องหลังจากการเจือจางครั้งใหม่ด้วยน้ำเกลือ (pH 7.4) [1,2,5] หนูแรททั้งหมด 24 ตัว (n=6) ถูกแยกออกจากกันอย่างเท่าเทียมกันเป็นสี่กลุ่มที่แตกต่างกันและให้การรักษาต่อไปนี้: กลุ่ม I-normal และ II-LPS กลุ่มควบคุมถูกบำบัดด้วยโซเดียม CMC 0.5 เปอร์เซ็นต์ 3 มล./กก. กลุ่มทดสอบที่มีขนาดยาที่ต่ำกว่า III และขนาดยาที่สูงกว่าทางหลอดเลือดดำได้รับสารแขวนลอยโรซินิดิน 10 และ 20 มก./กก. (PO) ใน SCMC 0.5 เปอร์เซ็นต์ ทุกวัน 1 ชั่วโมงหลังการรักษาทางปาก กลุ่ม I ได้รับการบำบัดด้วยน้ำเกลือปกติ 3 มล./กก. (ip)/วัน และฉีด LPS 1 มก./กก./วัน (ip) ไปยังกลุ่ม II-IV การรักษาที่กล่าวข้างต้นทั้งหมดได้รับทุกวันเป็นเวลา 7 วัน ในระหว่างตารางการรักษา 2 ชั่วโมงหลังการรักษาด้วย LPS ได้ทำการทดสอบพฤติกรรมสำหรับสัตว์ ในวันที่ 7 หลังจากการทดสอบพฤติกรรมสัตว์ถูกสังเวยและสมองถูกถอดออกเพื่อทำการทดสอบทางชีวเคมี [1,2,5] โปรโตคอลการทดลองแสดงเป็นแผนผังในรูปที่ 2

2.5. พารามิเตอร์พฤติกรรม 2.5.1. Open Field Test The openfiประกอบด้วยกล่องไม้ทรงลูกบาศก์ขนาดใหญ่ ขนาด ยาว 1.2 ม. × กว้าง 1.2 ม. × สูง 50 ซม.ฟลoor แบ่งออกเป็น 16 สี่เหลี่ยม สี่เหลี่ยม 12 อันตามกำแพงถือเป็นสี่เหลี่ยมรอบนอกและสี่สี่เหลี่ยมที่เหลืออยู่ตรงกลาง หนูแต่ละตัวถูกวางไว้ในที่โล่งfiผู้สูงอายุสำหรับfiแต่ละนาทีและบันทึกการปีนเขา การเลี้ยง และการข้ามเส้นของสัตว์ เมื่อสัตว์พิงกำแพงด้วยอุ้งเท้าหน้า ถือว่าเป็นการปีนเขา เมื่ออุ้งเท้าหน้าทั้งสองถูกยกขึ้นจากฟลoor นับเป็นการเลี้ยง และเอาอุ้งเท้าทั้งสี่ออกจากสี่เหลี่ยมหนึ่งมาใส่ในไบโอ อีกช่องหนึ่งกำลังข้ามเส้น การข้ามระหว่างช่องสี่เหลี่ยมกลางและช่องสี่เหลี่ยมรอบนอกถูกนับแยกกัน [17,18] 2.5.2. Elevated Plus Maze (EPM) EPM การทดสอบประกอบด้วยสองแขนเปิด (50 × 10 ซม.) และแขนปิดที่มีสัดส่วนเท่ากันและชิดผนัง 40 ซม. จตุรัสกลาง (10 cm2 ) รวมแขนของ EPM ในวันที่ 6 การได้มาซึ่งความทรงจำถูกวัดโดยการวางสัตว์ไว้ที่ส่วนปลายของแขนข้างหนึ่งที่เปิดอยู่ โดยหันเข้าหาจัตุรัสตรงกลาง เวลาแฝงในการถ่ายโอนเริ่มต้น (ITL) ถูกวัดเป็นระยะเวลาที่จำเป็นสำหรับหนูที่จะเข้าไปในแขนที่ปิดจากแขนที่เปิดอยู่ หากสัตว์ตัวใดไม่เข้าไปในแขนปิดภายใน 2 นาที หนูจะได้รับความช่วยเหลือเบา ๆ ให้เข้าไปในแขนปิดข้างหนึ่ง อนุญาตให้สำรวจแขนปิดเป็นเวลา 10 วินาที และบันทึก 120 วินาทีเป็น ITL ในวันที่ 7 เวลาแฝงการถ่ายโอนการเก็บข้อมูล (RTL) ถูกวัดตามขั้นตอนเดียวกันกับ ITL [3,4,7] 2.5.3. การทดสอบ Y Maze เขาวงกต Y ประกอบด้วยพื้นที่ภาคกลางรูปสามเหลี่ยมที่เชื่อมต่อกับแขนสามช่องที่ทำจากเพล็กซิกลาสทาสีดำ ในวันที่ 6 ของตารางการรักษา ได้ทำการทดลองเรียนรู้การรักษาด้วย LPS 2 ชั่วโมงหลังกับสัตว์ ในระหว่างการทดลองเรียนรู้ หนูแต่ละตัวได้สัมผัสกับเครื่องมือเขาวงกต Y และสัตว์ต่างๆ ได้รับอนุญาตให้เคลื่อนไหวอย่างอิสระภายในห้องเป็นเวลา 5 นาที มีสองช่องในเขาวงกตที่ไฟฟ้าช็อต (2 Hz, 10 V เป็นเวลา 125 ms) ถูกส่งผ่านแท่งสแตนเลส เพื่อหลีกเลี่ยงไฟฟ้าช็อต สัตว์ต่างๆ จะพยายามfiและพื้นที่ปลอดไฟฟ้าช็อตและเข้าไปในช่องที่ปลอดไฟฟ้าช็อต สัตว์ได้รับอนุญาตให้อยู่ในพื้นที่ปลอดแรงกระแทกเป็นเวลา 30 วินาทีและการฝึกสิ้นสุดลง เวลาที่สัตว์เข้าไปในช่องปลอดแรงกระแทกหลังจากที่ไฟฟ้าช็อตเริ่มทำงาน ในวันที่ 7, 2 ชั่วโมงหลังการรักษาด้วย LPS, คล้ายกับวันทดลอง, ทำการทดสอบเขาวงกต Y และเวลาที่ใช้สำหรับสัตว์ที่จะเข้าไปในห้องที่ไม่มีการกระแทกถูกบันทึกไว้ บันทึกความแตกต่างของเวลาในการตอบสนองจากวันที่ 6 และ 7 [1,2,19,20] 2.5.4. Morris Water Maze (MWM) Test ในการทดสอบนี้ต่อไปนี้fiของการฝึกอบรมติดต่อกันหลายวัน การทดสอบโพรบได้รับการจัดการในวันที่หก ทำการทดสอบในสระทรงกลม (เส้นผ่านศูนย์กลาง 120 ซม. สูง 50 ซม.)fiน้ำ 30 ซม. (25 ± 1 ◦C) แท่นสีขาวเคลื่อนที่ไม่ได้ (เส้นผ่านศูนย์กลาง 9 ซม.) ถูกวางไว้ใต้ผิวน้ำ 1 ซม. ระหว่างการฝึก ทำการทดสอบกับหนูที่แช่ในน้ำเขาวงกตเป็นเวลา 90 วินาทีเพื่อค้นหาแพลตฟอร์ม

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อดูรายละเอียด

การทดลองใช้แพลตฟอร์มที่มองเห็นได้ดำเนินการในวันที่ 1-2; ในช่วงนี้ฟลag (สูง 5 ซม.) ถูกแสดงบนแพลตฟอร์มเพื่อให้มองเห็นได้ การทดลองใช้แพลตฟอร์มล่องหนได้ดำเนินการในวันที่ 3-5 และในระหว่างนี้ไม่มีฟลag ถูกแสดงบนแพลตฟอร์ม ในวันที่ 6 การทดสอบโพรบได้ดำเนินการโดยไม่มีแพลตฟอร์ม [1,2,21] 2.6. พารามิเตอร์ทางชีวเคมี 2.6.1 เนื้อเยื่อสมองเป็นเนื้อเดียวกัน สัตว์ถูกตัดหัว สมองถูกแยกและทำความสะอาดโดยใช้น้ำเกลือไอโซโทนิกที่เย็นจัด ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต ({{1{{30}}}}.1 โมลาร์, pH 7.4, น้ำแข็ง-เย็น) ตัวอย่างสมองถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกัน โฮโมจีเนตถูกปั่นเหวี่ยงและทำการวิเคราะห์ทางชีวเคมีโดยใช้ส่วนลอยเหนือตะกอน [3,4,7] 2.6.2. กิจกรรม Acetylcholinesterase (AchE) โปรโตคอลที่คล้ายกับที่จัดเตรียมโดย Ellman et al (1961) ถูกติดตามเพื่อกำหนดหาแอคติวิตีของ AchE ที่แสดงเป็นโปรตีน µM/มก. [22] 2.7. พารามิเตอร์ความเครียดออกซิเดชัน Malondialdehyde (MDA) ถูกประเมินในสมองที่เป็นเนื้อเดียวกันโดยใช้วิธี Wills ระดับ MDA ถูกแสดงเป็นโปรตีน นาโนโมลาร์/มก. [23] กลูตาไธโอนแบบรีดิวซ์ (GSH) ถูกหาปริมาณตามวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดย Ellman [24] โดยใช้วิธี Misra และ Frodvich เพื่อหา superoxide dismutase (SOD) กิจกรรม SOD แสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของการควบคุม [25] ตามวิธีการที่ให้ไว้ใน Razygraev et al., 2018, วัดกิจกรรมของกลูตาไธโอนเปอร์ออกซิเดส (GPx) [26] ในการประมาณการแอคทิวิตีของแคตาเลส, 0.1 มิลลิลิตรของส่วนลอยเหนือตะกอนถูกเติมไปยังบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 1.9 มิลลิลิตร (pH 7.0, 50 มิลลิโมลาร์) ในคิวเวตต์ จากนั้น 1.0 มิลลิลิตรของ H2O2 ที่เตรียมใหม่ (30 มิลลิโมลาร์) ถูกเติมเพื่อเริ่มต้นปฏิกิริยา แอคทิวิตีของคาตาเลสแสดงเป็น µM/H2O2 ที่สลายตัว/นาที [27] 2.8. นิวโรอินฟลเครื่องหมาย ammatory และ BDNF IL-6, IL-1 , TNF- , NF-κB และ BDNF เป็นปริมาณfied โดยชุดตรวจภูมิคุ้มกัน ความเข้มข้นของเครื่องหมายถูกคำนวณและแสดงออกในโปรตีน pg/mL 2.9. การวิเคราะห์ทางสถิติ การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการผ่านซอฟต์แวร์ปริซึม ข้อมูลถูกนำเสนอเป็นค่าเฉลี่ย± SEM ANOVA ทางเดียวตามด้วยการทดสอบของ Tukey และกำหนดระดับนัยสำคัญไว้ที่ p <>

ผลลัพธ์

การศึกษาความเป็นพิษในช่องปากแบบเฉียบพลันพบว่า Rosinidin ปลอดภัยในขนาดยาทางปากสูงสุด 200 มก./กก. ในหนูทดลอง ไม่พบปฏิกิริยาการตายหรือเป็นพิษในระยะเวลา 14 วัน ตามข้อมูลการศึกษาความเป็นพิษทางปากเฉียบพลัน 1/20th และ 1/10th dose, คือ 10 มก./กก. และ 20 มก./กก. ได้รับคัดเลือกไปศึกษาต่อ 3.1. พารามิเตอร์พฤติกรรม 3.1.1. การทดสอบสนามแบบเปิด ฟิลด์เปิดถูกใช้เพื่อวัดกิจกรรมการเคลื่อนที่ของสัตว์ที่เกิดขึ้นเองตามธรรมชาติ จำนวนล้อหลัง (9.05 ± 0.35) การดูแล (7.22 ± 0.36) และการข้ามเส้น (1.08 ± { {55}}.07) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญหลังการบำบัดด้วย LPS เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมปกติ (18.50 ± 0.56, 17.19 ± 0.43 และ 5.0 ± 0.11 ตามลำดับ) ในการเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม LPS ยาโรซินิดิน (10 และ 20 มก./กก.) ก่อนการบำบัดช่วยเพิ่มการลดลงที่เกิดจาก LPS ในการข้ามเส้น (1.66 ± 0.06 และ 3.49 ± 0.14) และปีนขึ้นไปด้านหลัง (11.19 ± 0.39 และ 15.19 ± 0.41) . ผลการทดสอบสนามเปิดแสดงในรูปที่ 3

3.1.2. การทดสอบ EPM รูปที่ 4 แสดงถึงผลลัพธ์ของหน่วยความจำและความสามารถในการเรียนรู้ของสัตว์ที่ประมาณโดยใช้การทดสอบ EPM LPS ส่งผลอย่างมาก (p < 0.05)="" เวลาแฝงในการถ่ายโอนเพิ่มขึ้นในสัตว์ไบโอโมเลคิวลี="" 2021,="" 11,="" 1747="" 6="" จาก="" 13="" (82="" ±="" 1.41)="" การรักษาขนาดยาที่ต่ำกว่า="" (75.17="" ±="" 101)="" และสูงกว่า="" (40.67="" ±="" 1.05)="" ขนาดยาของโรซินิดินอย่างขึ้นกับขนาดยาช่วยฟื้นฟูเวลาแฝงในการถ่ายโอนในสัตว์="" ผลลัพธ์มีนัยสำคัญทางสถิติ="" (p="">< 0.01)="" และมีความสัมพันธ์กับสัตว์ควบคุม="" lps="" ชีวโมเลกุล="" 2564,="" 11,="" x="" 6="" จาก="" 14="" รูปที่="" 3="" ผลของโรซินิดินต่อกิจกรรมการเคลื่อนที่ที่เกิดขึ้นเองในการทดสอบภาคสนามในหนูที่ได้รับการบำบัดด้วย="" lps="" (a)="" การข้ามเป้าหมาย="" (b)="" การเลี้ยง="" และ="" (c)="" การกรูมมิ่ง="" ค่าแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±="" sem="" (n="6)" #="" p="">< 0.05="" เทียบกับหนูควบคุมปกติและ="" *="" p="">< 0.05;="" **="" p="">< 0.01;="" และ="" ***="" p="">< 0.001="" เทียบกับหนูควบคุม="">

3.1.3. การทดสอบ Y Maze Test ด้วย LPS (9.18 ± 0.46) เพิ่มเวลาแฝงของการถ่ายโอน (p < 0.05)="" เมื่อเทียบกับสัตว์ปกติ="" (6.{{15}="" }6="" ±="" 0.39)="" การบริหารให้โรซินิดินกับขนาดยาของหนูที่บำบัดด้วย="" lps="" โดยขึ้นอยู่กับการคืนค่าเวลาแฝงในการถ่ายโอน="" (6.67="" ±="" 0.39="" และ="" 5.46="" ±="" 0.46="" ตามลำดับ)="" เทียบกับสัตว์ควบคุม="" lps="" (p="">< 0.01)="" ผลการทดสอบเขาวงกต="" y="" แสดงในรูปที่="">

3.1.4. การบริหารการทดสอบ MWM ของ LPS อย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05)="" เพิ่มความหน่วงแฝงในการทดสอบ="" mwm="" ในทุกช่วงเวลา="" การบริหารให้โรซินิดินกับสัตว์ที่บำบัดด้วย="" lps="" ช่วยลดเวลาแฝงในการหลบหนีในสัตว์อย่างมีนัยสำคัญ="" ค่าเหล่านี้มีนัยสำคัญทางสถิติที่ทั้งปริมาณต่ำและสูงกว่าของการรักษาด้วยโรซินิดิน="" (p="">< 0.001)="" ผลการทดสอบ="" mwm="" โดยละเอียดแสดงไว้ในรูปที่="">

การอภิปราย

ความบกพร่องของหน่วยความจำที่เกิดจาก LPS และความผิดปกติทางพฤติกรรมได้รับการพิสูจน์โดยกิจกรรมของหัวรถจักรที่เกิดขึ้นเอง การเรียนรู้เชิงพื้นที่และหน่วยความจำที่ลดลง อาการเหล่านี้เกิดจาก AchE ที่เพิ่มขึ้น ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน เครื่องหมายการอักเสบของระบบประสาท และระดับ BDNF ในเนื้อเยื่อสมอง ในทางกลับกัน การรักษาด้วยโรซินิดินช่วยปรับปรุงการเปลี่ยนแปลงทางพฤติกรรมและชีวเคมีที่เหนี่ยวนำโดย LPS Rosinidin ปรับปรุงกิจกรรมของหัวรถจักรที่เกิดขึ้นเอง การเรียนรู้เชิงพื้นที่ และการเปลี่ยนแปลงของความจำและ AchE ที่เกิดจาก LPS โดยขึ้นอยู่กับขนาดยา นอกจากนี้ โรซินิดินยังช่วยฟื้นฟูสถานะสารต้านอนุมูลอิสระภายในร่างกาย และลดเครื่องหมายการอักเสบของระบบประสาทและระดับ BDNF ในสมองของหนู ในการศึกษาจิตวิทยาสัตว์ การทดสอบแบบเปิดกว้างถูกใช้อย่างกว้างขวางที่สุดในการประเมินพฤติกรรมของสัตว์ [28] ข้อมูลพฤติกรรมรวบรวมจากการทดสอบภาคสนาม เช่น ความสามารถในการเดินรถทั่วไป และข้อมูลเกี่ยวกับสภาวะทางอารมณ์ของสัตว์ [28] ในการศึกษานี้ การทดสอบนี้ใช้เพื่อประเมินการเคลื่อนที่ของจักรกลที่เกิดขึ้นเองในสัตว์ที่ได้รับการบำบัดด้วย LPS การบริหาร LPS ส่งผลให้จำนวนชุดหลัง การเสริมสวย และการข้ามเส้นลดลงอย่างมีนัยสำคัญ การเปลี่ยนแปลงพฤติกรรมเหล่านี้บ่งชี้ถึงกิจกรรมการเคลื่อนไหวที่เกิดขึ้นเองของสัตว์ เอาต์พุตของมอเตอร์ ไดรฟ์สำรวจ พฤติกรรมที่เกี่ยวข้องกับความกลัว การเจ็บป่วย วัฏจักรชีวิต และปัจจัยอื่นๆ มากมายสามารถส่งผลต่อการเคลื่อนไหวที่เกิดขึ้นเองได้ [29] การรักษาด้วยโรซินิดินกลับความผิดปกติที่เกิดจาก LPS ในการเคลื่อนที่ของจักรกลที่เกิดขึ้นเองในสัตว์ที่บำบัดด้วย LPS ซึ่งบ่งชี้ถึงการออกฤทธิ์ในการป้องกันความผิดปกติของหัวรถจักรที่เกิดจาก LPS เป็นที่ทราบกันว่า LPS ทำให้เกิดความผิดปกติทางสติปัญญา ภาวะสมองเสื่อม ความสามารถในการเรียนรู้ลดลง และความบกพร่องในหน่วยความจำ [1,2,5] ผลการศึกษาในปัจจุบันนี้สนับสนุนผลการวิจัยข้างต้นได้เป็นอย่างดี การบริหาร LPS ส่งผลให้ความสามารถในการเรียนรู้ลดลงและการสูญเสียความทรงจำในสัตว์ และเห็นได้ชัดจากเวลาแฝงที่เพิ่มขึ้นในการทดสอบ EPM, MWM และ Y maze ของสัตว์ การรักษาด้วยยาโรซินิดินในสัตว์ที่บำบัดด้วย LPS ช่วยเพิ่มความสามารถในการเรียนรู้และฟื้นฟูความจำในสัตว์ ผลกระทบเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงการป้องกันของโรซินิดินต่อความผิดปกติที่เกิดจาก LPS นอกจากนี้ การรักษาด้วยโรซินิดินตามขนาดยาช่วยปรับปรุงกิจกรรมที่เพิ่มขึ้นของ AChE ที่เกิดจาก LPS ซึ่งเป็นเอนไซม์สำคัญที่กระตุ้นการไฮโดรไลซิสของอะซีติลโคลีน (Ach) ลด Achin CNS รับผิดชอบต่อการขาดดุลทางปัญญา [30] สิ่งนี้บ่งชี้ว่าโรซินิดินฟื้นความจำของสัตว์ที่ได้รับการรักษาด้วย LPS โดยการยับยั้ง AChE และท้ายที่สุดโดยการปรับปรุงระดับ Ach ใน CNS ตามที่ระบุไว้ข้างต้น การตอบสนองต่อการอักเสบเฉียบพลันที่เกิดจาก LPS ทำให้เกิดระดับของเปอร์ออกไซด์และ ROS ที่เพิ่มขึ้นใน CNS [1,2] ข้อมูลการศึกษาปัจจุบันสนับสนุนข้อค้นพบข้างต้นเป็นอย่างดี การบริหารให้ LPS เพิ่มระดับของ MDA และขัดขวางระดับสารต้านอนุมูลอิสระภายในร่างกาย ซึ่งเห็นได้ชัดจาก SOD, GSH, GPx และ catalase ที่ลดลงในสัตว์ที่บริหารด้วย LPS การรักษาด้วยโรซินิดินในหนูที่ได้รับการรักษาด้วย LPS จะทำให้ระดับสารต้านอนุมูลอิสระภายในร่างกายลดลงและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันของ LPS ลดลง ซึ่งบ่งชี้ถึงคุณสมบัติต้านอนุมูลอิสระของโรซินิดินต่อ LPS การอักเสบมีบทบาทสำคัญในการเสื่อมของระบบประสาท [31] นักวิจัยพบว่าผู้ป่วยโรค neurodegenerative แสดงความเข้มข้นของ IL- 6, TNF-, IL-1 และ NF-κB [31] ที่สูงขึ้น ในการศึกษานี้ LPS กระตุ้นระดับของตัวบ่งชี้การอักเสบ การบริหาร rosinidin ที่ลดทอน IL-6, TNF-, IL-1 และ NF-κB สิ่งนี้บ่งชี้คุณสมบัติต้านการอักเสบของโรซินิดินต่อการอักเสบที่เกิดจาก LPS ของเซลล์ประสาทในหนูแรท BDNF ซึ่งเป็นโปรตีน pleiotropic ทำหน้าที่เป็นโมดูเลเตอร์สารสื่อประสาทและเกี่ยวข้องกับความสามารถด้านการเรียนรู้และความจำ [32] หลายพื้นที่ของระบบประสาทต้องการ BDNF สำหรับการพัฒนาตามปกติ [33] BDNF เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการสร้างเส้นประสาทส่วนปลายและการสร้างเยื่อไมอีลิเนชันหลังจากเส้นประสาทถูกทำลาย [32,34] มีความเชื่อมโยงระหว่างการแสดงออกของยีน BDNF ที่ต่ำกว่าและระดับโปรตีนที่ลดลงในผู้ป่วยที่เป็นโรคซึมเศร้า [35] นอกจากนี้ยังมีรายงานว่าระดับ BDNF ที่ต่ำกว่านั้นสัมพันธ์กับโรคทางระบบประสาท [33] การรักษาด้วย LPS จะลดระดับของ BDNF ในเนื้อเยื่อสมอง ซึ่งบ่งชี้ว่าเซลล์ประสาทดูหมิ่นในสัตว์ที่ได้รับการรักษาด้วย LPS ในทางกลับกัน การรักษาด้วยสารชีวโมเลกุลปี 2021, 11, 1747 12 จาก 13 rosinidin ในสัตว์ที่ได้รับการรักษาด้วย LPS ได้ฟื้นฟูระดับ BDNF สู่ระดับปกติ ซึ่งบ่งชี้ถึงการกระทำของ rosinidin ต่อความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจาก LPS

บทสรุป

การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า rosinidin บรรเทาความผิดปกติทางพฤติกรรมและทางเคมีชีวภาพที่เกิดจาก LPS ในหนูโดยลดการตอบสนองการอักเสบ ความเสียหายจากอนุมูลอิสระ และทำให้ระดับ BDNF เป็นปกติ สารต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ต้านการอักเสบของโรซินิดินอาจมีผลต่อผลประโยชน์ การบำบัดด้วยโรซินิดินได้ย้อนกลับการลดลงที่เหนี่ยวนำโดย LPS อย่างมีนัยสำคัญในการทำงานของการเคลื่อนที่ของการเคลื่อนไหวที่เกิดขึ้นเองและการด้อยค่าของหน่วยความจำในสัตว์ที่ทดสอบ LPS ลด GSH, SOD, GPx และ catalaselevels; กิจกรรมที่เปลี่ยนแปลงของ AChE; ระดับที่สูงขึ้นของ MDA, IL-6, IL-1 , TNF- และ NF-κB; และลดระดับของ BDNF ในเนื้อเยื่อสมอง การบริหารให้ขัดสนในสัตว์ที่ได้รับการบำบัดด้วย LPS ช่วยลดความบกพร่องทางพฤติกรรมของระบบประสาทที่เกิดจาก LPS ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ตัวบ่งชี้การอักเสบของระบบประสาท และทำให้กิจกรรมของเอนไซม์ Ach และระดับ DNF กลับเป็นปกติ อย่างไรก็ตาม จำเป็นต้องมีการวิจัยในอนาคตเพื่อประเมินผลในการรักษาโรคทางระบบประสาทในมนุษย์ ผลงานเขียน: แนวความคิด การบริหารโครงการ การเขียนต้นฉบับ: SSI; ทบทวนและแก้ไข, การให้ทุน: SA ผู้เขียนทุกคนได้อ่านและตกลงที่จะตีพิมพ์ต้นฉบับของต้นฉบับ เงินทุน: งานวิจัยนี้ได้รับทุนจาก Researchers Supporting Project Number (RSP-2021/146) ที่ King Saud University, Riyadh ประเทศซาอุดีอาระเบีย Institutional Review Board Statement: การศึกษาดำเนินการตามแนวทางของปฏิญญาเฮลซิงกิ และได้รับการอนุมัติโดย Institutional Review Board (หรือคณะกรรมการจริยธรรม) ของวิทยาลัยเภสัชกรรม BRN, MP, India โดยมีหมายเลขอนุมัติ IAEC/918/CPCSEA/01 มีการปฏิบัติตามโปรโตคอลตามแนวทางของ ARRIVE คำชี้แจงความยินยอมที่ได้รับแจ้ง: ไม่เกี่ยวข้อง คำชี้แจงเกี่ยวกับความพร้อมใช้งานของข้อมูล: ไม่เกี่ยวข้อง การรับทราบ: ผู้เขียนรู้สึกขอบคุณสำหรับโครงการสนับสนุนนักวิจัย (หมายเลข RSP–2021/146) ที่มหาวิทยาลัย King Saud เมืองริยาด ประเทศซาอุดีอาระเบีย ความขัดแย้งทางผลประโยชน์: ผู้เขียนประกาศว่าไม่มีความขัดแย้งทางผลประโยชน์

อ้างอิง

1. Sadraie, S.; Kiasalari, Z.; Razavian, ม.; Azimi, S.; SedighNejad, L.; Afshin-Majd, S.; Baluchnejadmojarad, T.; Roghani, M. Berberine ช่วยปรับปรุงการเรียนรู้ที่เกิดจาก lipopolysaccharide และความจำในหนู: ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลพื้นฐาน เมตาบ สมอง Dis. 2018, 34, 245–255. [CrossRef] [PubMed]
2. วัง H.; เม้ง, G.-L.; จาง, C.-T.; วัง H.; หู, ม.; ยาว ย.; หง, เอช.; ถัง, ส.-ส. Mogrol ลดทอนความบกพร่องของหน่วยความจำที่เกิดจาก lipopolysaccharide (LPS) และการตอบสนองของระบบประสาทในหนูทดลอง เจ เอเชี่ยน แนท แยง. ความละเอียด 2019, 22, 864–878. [CrossRef] [PubMed]
3. Amor, S.; เปเฟโรน แอลเอ; Vogel, DY; บรี, ม.; van der Valk, P.; เบเกอร์, D.; van Noort, JM การอักเสบในโรคทางระบบประสาท – การปรับปรุง ภูมิคุ้มกันวิทยา 2014, 142, 151–166. [ข้ามอ้างอิง]
4. Shivasharan, BD; นากากันนัน, ป.; ทิพย์เพสวามี, วท.บ.; Veerapur, VP ป้องกันผลของดอกดาวเรือง officinalis L. ดอกไม้กับความเครียดออกซิเดชันโมโนโซเดียมกลูตาเมตและ Excitotoxic สมองเสียหายในหนู อินเดียน เจ. คลิน. ไบโอเคมี. 2012, 28, 292–298. [ข้ามอ้างอิง]
5. Shaikh, A.; แดดเด เอสบี; Durg, S .; วีระปุระ รองประธานเจ้าหน้าที่บริหาร; Badami, S.; ทิพย์เพสวามี, วท.บ.; Patil, JS ผลของ Embelin ต่อพฤติกรรมการเจ็บป่วยที่เกิดจากไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ในหนูเมาส์ ไฟโตเธอร์. ความละเอียด 2016, 30, 815–822. [ข้ามอ้างอิง]
6. Durg, S.; แดดเด เอสบี; ป่าเถื่อน R.; ศิวากุมาร BS; Charan, CS Withania somnifera (Ashwagandha) ในความผิดปกติของระบบประสาทที่เกิดจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันของสมองในหนู: การทบทวนอย่างเป็นระบบและการวิเคราะห์เมตา เจ. ฟาร์ม. ฟา. 2015, 67, 879–899. [CrossRef] [PubMed]
7. Jadiswami, C.; เมกา, HM; แดดเด เอสบี; Durg, S .; โปตาดาร์ PP; ทิพย์เพสวามี, วท.บ.; Veerapur, VP Piroxicam ลดทอน 3-ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันของสมองที่เกิดจากกรดไนโตรโพรพิโอนิกและการเปลี่ยนแปลงพฤติกรรมในหนูทดลอง ท็อกซิคอล เครื่องจักร วิธีการ 2014, 24, 672–678
8. มอนเตโร เอเอฟ; เวียนา เจดี; นายาริสเสรี, ก.; ซอนเดกูมบา, EN; Mendonca จูเนียร์ เอฟเจ; สกอตติ มอนแทนา; Scotti, L. Computational Studies นำไปใช้กับ Flavonoids กับโรคอัลไซเมอร์และพาร์กินสัน ออกซิเดชั่น เซลล์. ลองเยฟ 2018, 2018, 7912765. [CrossRef] [PubMed]