การเปิดใช้งานความทรงจำที่ใช้สื่อกลาง Hippocampal อีกครั้งในระหว่างการรวมตัวใหม่เพื่อขัดขวางความกลัวตอนที่ 3

การรบกวน dDG เกิดขึ้นเฉพาะกับความทรงจำแห่งความกลัว และไม่ส่งผลกระทบต่อความทรงจำอื่น ๆ ที่เป็นสื่อกลางฮิปโปแคมปัส

ความสัมพันธ์ระหว่างความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวและความทรงจำมีความสำคัญเนื่องจากมีผลกระทบอย่างมากต่อผลลัพธ์ในชีวิตของเรา แม้ว่าความกลัวมักถูกมองว่าเป็นเชิงลบและไม่เป็นที่พอใจ แต่ก็สามารถพัฒนาความจำและความสามารถทางปัญญาของเราได้

ความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวเป็นรูปแบบหนึ่งของความทรงจำที่ทรงพลังเพราะมันมาพร้อมกับประสบการณ์ทางอารมณ์ที่เข้มข้น การวิจัยแสดงให้เห็นว่าเรามีแนวโน้มที่จะจดจำข้อมูลที่เกี่ยวข้องเมื่อต้องเผชิญกับความกลัวหรือภัยคุกคามมากกว่าเหตุการณ์อื่นๆ ในชีวิตประจำวันของเรา ความสามารถในการจดจำนี้ทำให้เราตื่นตัวมากขึ้นต่อสถานการณ์ที่อาจเป็นอันตรายถึงชีวิต เพื่อให้เราสามารถตอบสนองต่อภัยคุกคามในอนาคตได้ดียิ่งขึ้น

นอกจากนี้ ความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวยังสามารถพัฒนาความสามารถทางปัญญาของเราได้อีกด้วย เนื่องจากความทรงจำรูปแบบนี้มีอารมณ์และความหมายจึงรวมกับข้อมูลอื่นๆ ทำให้จดจำและเข้าใจได้ง่ายขึ้น นอกจากนี้ยังช่วยพัฒนาทักษะสมาธิและการคิดของเรา พัฒนาความสามารถในการเรียนรู้และความจำของเราให้ดียิ่งขึ้นอีกด้วย

ดังนั้นการทำความเข้าใจบทบาทและคุณค่าของความทรงจำด้วยความกลัวจึงเป็นสิ่งสำคัญสำหรับผู้ที่ต้องการพัฒนาความจำของตนเอง แม้ว่าความกลัวอาจเป็นประสบการณ์ที่ยากจะยอมรับ แต่หากเรามีทัศนคติเชิงบวก ความกลัวก็สามารถกลายเป็นมิตรและพันธมิตรในการส่งเสริมการเติบโตทางสติปัญญาและส่วนบุคคลของเราได้ ไม่ว่าเราจะเผชิญกับความกลัวใดก็ตาม เราสามารถได้รับประสบการณ์จากความกลัวนั้น เรียนรู้ที่จะเอาชนะมัน และปรับปรุงความยืดหยุ่นทางความคิดและจิตใจของเรา

ดังนั้นแม้ว่าความทรงจำที่กลัวจะรู้สึกท่วมท้นและไม่มั่นคง แต่เราไม่ควรมองว่าสิ่งเหล่านั้นเป็นสิ่งที่เป็นลบ แต่เราควรเรียนรู้วิธีใช้มันเพื่อการเติบโตและความก้าวหน้าของเรา เพียงแค่คิดเชิงบวกและคิดหนัก เราก็สามารถเรียนรู้เพิ่มเติมจากผลของความกลัว และปรับปรุงความจำและความสามารถทางปัญญาของเราได้ จะเห็นได้ว่าเราต้องปรับปรุงความจำ และ Cistanche Deserticola สามารถปรับปรุงความจำได้อย่างมาก เนื่องจาก Cistanche Deserticola เป็นยาแผนโบราณของจีนที่มีลักษณะพิเศษมากมาย หนึ่งในนั้นคือการปรับปรุงความจำ ประสิทธิภาพของ Cistanche Deserticola มาจากส่วนผสมออกฤทธิ์หลายชนิดที่มีอยู่ในนั้น รวมถึงกรดแทนนิก โพลีแซ็กคาไรด์ ฟลาโวนอยด์ไกลโคไซด์ ฯลฯ ส่วนผสมเหล่านี้สามารถส่งเสริมสุขภาพสมองได้ผ่านวิถีทางที่หลากหลาย

คลิกรู้อาหารเสริมเพื่อเพิ่มความจำ

เพื่อตรวจสอบว่าการจัดการของเราซึ่งขัดขวางความทรงจำที่น่ากลัว จะส่งผลต่อความทรงจำที่ใช้สื่อกลางฮิปโปแคมปัสประเภทอื่นๆ อย่างไม่เจาะจงหรือไม่ เราได้ฝึกหนูในงานหน่วยความจำอ้างอิงเชิงพื้นที่

เช่นเดียวกับการทดลองก่อนหน้านี้ เราได้ฉีดหนูด้วย AAV 5-CaMKIIa-(hChR2-H134R) -eYFP ที่ไม่เจือปนไปยังเซลล์ประสาท DG ที่มีป้ายกำกับแบบสุ่ม (รูปที่ 5a) จากนั้นหนูที่ถูกจำกัดการใช้น้ำจะได้รับการฝึกให้ได้รับรางวัลน้ำจากแขนข้างหนึ่งในเขาวงกตรัศมีแขน 8-

พวกเขาได้รับการทดลอง 4 ครั้งจนกระทั่งบรรลุเกณฑ์การปฏิบัติงาน หลังจากนั้น เพื่อประเมินผลของการกระตุ้นต่อความทรงจำเกี่ยวกับความกลัว พวกเขาได้รับโปรโตคอลพฤติกรรมเดียวกันกับการทดลองครั้งก่อน

เพื่อประเมินผลกระทบของการกระตุ้น dDG ต่อหน่วยความจำอ้างอิงเชิงพื้นที่ เราได้ทดสอบหนูอีกครั้งกับประสิทธิภาพหน่วยความจำเชิงพื้นที่หลังจากการปรับสภาพด้วยความกลัวและหลังจากการเรียกคืน และทำการทดลองใช้โพรบแบบม่านหลังจาก EXT2 เพื่อให้แน่ใจว่าหนูใช้ตัวชี้นำเขาวงกตพิเศษเพื่อดำเนินการ สิ่งที่น่าสนใจคือหนูในการทดลองนี้แสดงให้เห็นว่าการแช่แข็งภายหลังช็อกลดลงในระหว่างการปรับสภาพความกลัวเมื่อเปรียบเทียบกับหนูตัวอื่นในการศึกษา ซึ่งเราเชื่อว่าเป็นผลโดยตรงจากการจัดการบ่อยขึ้นเนื่องจากการฝึกอบรมในงานอ้างอิงเชิงพื้นที่ (รูปที่ 5b และรูปที่ 1 เพิ่มเติม)

อย่างไรก็ตาม ในระหว่างการเรียกคืน หนู eYFP แสดงการเยือกแข็งตามปกติในขณะที่ตามที่คาดไว้ หนู ChR2- แสดงการแข็งตัวในแบบเรียลไทม์ที่ลดลง (รูปที่ 5c) ความกลัวที่ลดลงนี้ตอบสนองยังคงมีอยู่ในระหว่างการสูญพันธุ์ (รูปที่ 5d) โดยหนู ChR2 แสดงการแช่แข็งน้อยลงใน 3 นาทีแรกของ EXT1 (รูปที่ 1g เพิ่มเติม) และตลอดเซสชัน EXT2 ทั้งหมด ไม่พบความแตกต่างในระหว่างการช็อกทันที (รูปที่ 5e) และตามที่คาดไว้ กลุ่ม ChR2- แสดงให้เห็นการแช่แข็งน้อยลงในระหว่างการคืนสถานะ (รูปที่ 5f, g)

สำหรับประสิทธิภาพของเขาวงกต เกณฑ์การวัดของหนูทั้งหมดระหว่าง 5 ถึง 14 วัน (รูปที่ 5 ชม.) และปรับปรุงตลอดระยะเวลาที่ได้รับ ในแง่ของเวลาแฝงในการค้นหารางวัล จำนวนการเบี่ยงเบนของแขน (เมื่อเมาส์ไปที่แขนครั้งแรก) จำนวนข้อผิดพลาดในการอ้างอิง (เช่น ป้อนผิดแขน) และข้อผิดพลาดในการอ้างอิงซ้ำๆ (ข้อผิดพลาดของหน่วยความจำในการทำงาน) ที่เกิดขึ้น (รูปที่ 5i–p แผงด้านซ้ายสุด)

ประสิทธิภาพแบ่งออกเป็น 2 ประเภท ได้แก่ การทดลองที่ 1 ซึ่งตีความว่าเป็นการประเมินความจำระยะยาวจากวันก่อน และการทดลองที่ 2-4 ซึ่งตีความว่าเป็นการประเมินความจำระยะสั้นจากการทดลองครั้งก่อนในวันเดียวกัน . หนูถูกทดสอบซ้ำครั้งแรกในเขาวงกต 3 ชั่วโมงหลังจากการปรับสภาพความกลัว เพื่อยืนยันว่าการปรับสภาพความกลัวนั้นไม่ได้ส่งผลต่อความจำเชิงพื้นที่

เราไม่เห็นผลใดๆ (รูปที่ 5i–p แผงตรงกลาง) การทำงานภายใต้สมมติฐานว่าการหยุดชะงักของความทรงจำที่เกิดจากความกลัวโดยการแทรกแซงทางสายตาของเราเกิดขึ้นเนื่องจากมีเงื่อนไขสำหรับหน่วยความจำที่จะได้รับการรวมเข้าด้วยกันใหม่ การสังเกตความบกพร่องของหน่วยความจำเชิงพื้นที่อาจถูกบดบังหากหน่วยความจำนี้ ไม่ผ่านการควบรวมกิจการด้วย

เพื่อทดสอบอย่างแม่นยำว่าการแทรกแซงของเรามีความเฉพาะเจาะจงกับความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวหรือไม่ เราจึงพยายามเพิ่มความเป็นไปได้ที่เงื่อนไขขอบเขตที่อนุญาตให้มีการรวมหน่วยความจำใหม่สำหรับหน่วยความจำเชิงพื้นที่นั้นเป็นไปตาม64 ด้วยเหตุนี้ เราจึงให้หนูครึ่งหนึ่ง (กลุ่มเตือนความจำ) เซสชั่นเตือนความจำหนึ่งครั้ง (การทดลองที่ 1) 5 นาทีก่อนการทดสอบการเรียกคืนความทรงจำที่หวาดกลัว

ในระหว่างเซสชันการแจ้งเตือนนี้ เราได้แทนที่พื้นในใจกลางเขาวงกตด้วยกระดาษทรายเพื่อสร้างข้อผิดพลาดในการทำนาย 65 ซึ่งไม่ส่งผลกระทบต่อตำแหน่งของรางวัล แต่ทำให้หนูได้รับสัญญาณที่ไม่คาดคิดในระหว่างการทดลอง หนูเตือนความจำได้รับการทดลอง 2–43 ชั่วโมงหลังเซสชันการเรียกคืน ในขณะที่หนูอีกครึ่งหนึ่ง (ไม่มีกลุ่มการแจ้งเตือน) ไม่ได้รับเซสชันการแจ้งเตือน และได้รับการทดลองปกติทั้งหมด 4 ครั้งแทน 3 ชั่วโมงหลังจากเซสชันการเรียกคืน

อีกครั้ง เราไม่เห็นความแตกต่างด้านประสิทธิภาพ และหนูทุกตัวทำงานได้ดีภายในช่วงเกณฑ์ (รูปที่ 5i – p, แผงกลาง) หนูทุกตัวได้รับการทดสอบบนเขาวงกตในวันรุ่งขึ้น และ 3 ชั่วโมงต่อมาได้รับช่วงการสูญพันธุ์ครั้งแรก การวัดขนาดได้รับผลกระทบในระหว่างการทดสอบนี้ ยกเว้นการเบี่ยงเบนของแขน (รูปที่ 5k,l)

ในการทดลองที่ 1 ทั้งหนู ChR2 และ eYFP ในกลุ่มการแจ้งเตือนมีการเบี่ยงเบนของแขนที่สูงกว่า ซึ่งบ่งชี้ถึงเซสชันการแจ้งเตือน ซึ่งอาจนำไปสู่การรวมหน่วยความจำเชิงพื้นที่อีกครั้ง ซึ่งส่งผลกระทบในช่วงสั้นๆ ต่อการวัดประสิทธิภาพนี้

อย่างไรก็ตาม ผลกระทบนี้เป็นพฤติกรรมและไม่ได้เป็นผลมาจากการกระตุ้นด้วยแสงของเซลล์ dDG แบบสุ่ม เนื่องจากไม่มีความแตกต่างระหว่างหนู ChR2 และ eYFP ในการทดลองที่ 2–4 หนูในกลุ่ม ChR2 (ทั้งการแจ้งเตือนและไม่มีการเตือน) แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพที่ดีขึ้น (การเบี่ยงเบนของแขนน้อยลง) เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่ม eYFP ที่แนะนำประสิทธิภาพของเขาวงกตที่ดีขึ้นอันเป็นผลมาจากการรวมบัญชีใหม่ โดยไม่คำนึงว่าเซสชันการแจ้งเตือนจะได้รับหรือไม่

ที่สำคัญ สิ่งนี้ยังแสดงให้เห็นว่าผลกระทบที่ก่อกวนจากการบงการของเรานั้นเกิดขึ้นเฉพาะกับความทรงจำแห่งความกลัว (รูปที่ 5i–p แผงตรงกลาง) เพื่อให้แน่ใจว่าเรากำลังทดสอบหน่วยความจำที่ใช้สื่อกลางแบบฮิปโปแคมปัส โดยที่หนูใช้สัญญาณเขาวงกตพิเศษเพื่อค้นหารางวัล ต่อมาหนูกลางวันจะได้รับการทดสอบแบบ Curtain Probe

ตามที่คาดไว้ หนูทุกตัวแสดงประสิทธิภาพที่ลดลงบนโพรบเมื่อเทียบกับการฝึก 3 วันล่าสุดโดยมีประสิทธิภาพถึงระดับที่เคยเป็นเมื่อพวกเขาเริ่มงานครั้งแรก (รูปที่ 5i – p แผงขวาสุด)

เขียนใหม่ความทรงจำความกลัวเดิม

ต่อไป เราพยายามที่จะพิจารณาว่าการลดลงของความกลัวแบบมีเงื่อนไขนั้นมาพร้อมกับการเปลี่ยนแปลงในพลวัตของวงดนตรีความกลัวแบบเดิมหรือไม่ เพื่อประเมินว่าการยักย้ายของเราได้เปลี่ยนแปลงความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวดั้งเดิมหรือไม่ เราได้รวมระบบที่มีไวรัสสองระบบเข้าด้วยกัน (รูปที่ 6a)

หนูทั้งหมดถูกฉีดด้วย c-Fos-tTA-TRE-mCherry เพื่อแท็กเซลล์ dDG ที่เกี่ยวข้องกับการเข้ารหัสยุคแห่งการปรับสภาพความกลัว นอกจากนี้ หนูยังถูกฉีดด้วย AAV5-CaMKIIa-hChR2-H134R-eYFP ที่ไม่เจือจาง หรือ AAV5-CaMKIIa-eYFP ที่ไม่เจือปน เพื่อติดป้ายกำกับชุดเซลล์ประสาท dDG ที่แข่งขันกัน จากนั้นหนูจะได้รับการทดลองแบบเดียวกับที่เคยทำโดย FC เพื่อแสดงการแช่แข็งหลังการช็อก (รูปที่ 6b และรูปที่ 1 ชม. เพิ่มเติม)

ในระหว่างการเรียกคืน การกระตุ้นด้วยแสงทำให้การแช่แข็งในหนู ChR2 ลดลงแบบเรียลไทม์เมื่อเปรียบเทียบกับการควบคุม eYFP (รูปที่ 6c) และความแตกต่างเหล่านี้ยังคงมีอยู่ในการสูญพันธุ์ (รูปที่ 6d) รวมถึง 3 นาทีแรกของ EXT1 และ 3 นาทีสุดท้ายของ EXT2 (รูปที่ 1 เพิ่มเติม) ไม่พบความแตกต่างของกลุ่มระหว่างการช็อกทันที (รูปที่ 6e) ในระหว่างการคืนสถานะ หนู ChR2 ยังคงแสดงการแช่แข็งที่ลดลง (รูปที่ 6f, g)

เพื่อตรวจสอบว่าหนูเหล่านี้มีเซลล์ประสาทที่ทับซ้อนกันน้อยลงจากยุคการปรับสภาพความกลัวดั้งเดิมไปจนถึงการทดสอบการคืนสถานะหรือไม่เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม eYFP หนูจะถูกรวมเข้าด้วยกัน 90 นาทีหลังการคืนสถานะ และระดับ c-Fos เป็นปริมาณ สำหรับการทดลองแต่ละครั้ง จะมีการถ่ายภาพตัวแทนจากกลยุทธ์การแท็กเซลล์ประสาทแต่ละรายการ ( รูปที่ 7a–d และรูปที่ 5a–e เพิ่มเติม) และใช้เพื่อรับจำนวนเซลล์

ก่อนอื่นเราคำนวณจำนวนเซลล์ที่มีป้ายกำกับ DAPI ทั้งหมดสำหรับแต่ละกลุ่ม (รูปที่ 7e, f) สำหรับการทดลองที่ทำให้ยุคพฤติกรรมเปียกโชกโดยใช้โปรโมเตอร์ c-Fos (รูปที่ 1–3, 6) ขนาดของเอนแกรมถูกกำหนดเป็นเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ประสาทที่มีป้ายกำกับ DAPI (รูปที่ 7g, eYFP; รูปที่ 7 ชม., เชอร์รี่) .

โดยไม่คำนึงถึงความจุ เซลล์ที่ติดแท็กที่เกี่ยวข้องกับประสบการณ์พฤติกรรมเฉพาะ รวมถึงประสบการณ์กรงที่บ้าน ประกอบด้วยประมาณ 8% ของเซลล์ประสาทที่มีป้ายกำกับ DAPI ใน dDG (M=8.015, SD=0.572) เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ที่ติดป้ายกำกับเป็น c-Fos+ ซึ่งแสดงถึงชุดของเซลล์ที่ทำงานในระหว่างการทดสอบการคืนสถานะ (รูปที่ 7g, i, RFP; รูปที่ 7h, j, RFP & BFP) อยู่ที่ประมาณ 1.5% (M=1 .438, SD=0.21)

ในการทดลองชุดแรก เปอร์เซ็นต์ของการทับซ้อนกัน (สีเหลือง) (รูปที่ 7 ก., k) ระหว่างเอนแกรมที่ติดแท็กที่ใช้เพื่อรบกวนความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวในระหว่างการเรียกคืน (eYFP) (รูปที่ 7 ก) และเอ็นแกรมเมื่อกลับคืนสู่สถานะ (RFP) (รูปที่ . 7g, i) สามารถตีความได้ว่าเป็นการวัดว่าการจัดการโดยอาศัยการรวมใหม่ของเราส่งผลให้เกิดการรวมความทรงจำทั้งสองเข้าด้วยกันหรือไม่

เราสังเกตเห็นเปอร์เซ็นต์ของการทับซ้อนของประสบการณ์เชิงลบที่มากกว่า เมื่อเทียบกับประสบการณ์ที่เป็นกลาง แนะนำว่าประสบการณ์เชิงลบมีความคล้ายคลึงกันสูงกว่ากับความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวเมื่อเปรียบเทียบกับประสบการณ์ที่เป็นกลาง อย่างไรก็ตาม ไม่พบความแตกต่างระหว่างเปอร์เซ็นต์ของการทับซ้อนของประสบการณ์เชิงลบ เมื่อเทียบกับประสบการณ์เชิงบวก หรือประสบการณ์เชิงบวก เมื่อเทียบกับประสบการณ์ที่เป็นกลาง

เราคาดการณ์ว่าระดับของการทับซ้อนกันระหว่างประสบการณ์เชิงลบและความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวอาจป้องกันการเปิดใช้งานของกลุ่มเอนแกรมที่ไม่เจือปนเหล่านั้นอีกครั้ง เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มที่เจือจางตามจำนวนเซลล์ที่ติดแท็ก

ในกลุ่มที่ไม่มีการเจือปน เราติดแท็กประมาณ 40% (M=37.16, SD=5.5) ของเซลล์ประสาทที่มีป้ายกำกับ DAPI และในกลุ่มที่เจือจาง เราติดแท็กเซลล์ 8% ที่คล้ายกัน (M {{ 7}}.57, SD=0.4) เป็นเอนแกรมที่เกี่ยวข้องกับยุคของเรา (รูปที่ 7 ชม.) ในที่สุด เราพยายามที่จะตรวจสอบว่าความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวดั้งเดิมได้เปลี่ยนจากการปรับเงื่อนไขไปสู่การคืนสถานะหรือไม่ เนื่องจากความกลัวที่ลดลง แม้ว่าจะไม่มีอคติที่จะรวมเซลล์ที่กระตุ้นการทำงานแบบเทียมระหว่างการเรียกคืนก็ตาม

เปอร์เซ็นต์ของการทับซ้อน (สีม่วงแดง) (รูปที่ 7 ชม., l) ระหว่างชุดของเซลล์ประสาทเหล่านี้ ซึ่งถูกติดแท็กในโปรแกรมความกลัวดั้งเดิม (mCherry) (รูปที่ 7 ชม.) และโปรแกรมความกลัวเมื่อกลับคืนสถานะ (BFP) (รูปที่ 7 ชม., j) สามารถ ถูกตีความว่าเป็นการวัดว่าการแทรกแซงตามการรวบรวมข้อมูลของเราส่งผลให้เกิดการเปลี่ยนแปลงความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวดั้งเดิมหรือไม่

เราพบว่ามีการทับซ้อนกันน้อยลงอย่างมีนัยสำคัญในความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวในการปรับสภาพและการคืนสถานะในกลุ่ม ChR2 โดยบอกว่าในขณะที่เราไม่ได้รวมความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวเข้ากับวงดนตรีที่รบกวน (รูปที่ 7 ม.) แต่การจัดการของเราได้เปลี่ยนแปลงความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวดั้งเดิม (รูปที่ 7n) ซึ่งเราเชื่อว่าอาจช่วยอธิบายการลดความกลัวลงได้

เราคาดการณ์ว่าการจัดการตามการรวมใหม่ของเราทำให้เกิดการแยกตัวของวงดนตรีเหล่านี้ในลักษณะตั้งฉากโดยแยกความทรงจำเหล่านี้ออกเป็นประชากรเซลล์ประสาทที่แตกต่างกัน (รูปที่ 7m, n)

สิ่งที่น่าสนใจคือสัดส่วนของเซลล์ที่มีป้ายกำกับ/เปิดใช้งานแบบสุ่ม (eYFP) ซึ่งเป็นส่วนหนึ่งของเอนแกรมความกลัวดั้งเดิม (mCherry) นั้นสูงกว่าโอกาส (สีเหลือง) และสัดส่วนของเซลล์ที่มีป้ายกำกับแบบสุ่ม/เปิดใช้งาน (eYFP) ที่เป็นส่วนหนึ่งของเอนแกรมความกลัวเช่นกัน เมื่อคืนสถานะ (BFP) ก็อยู่เหนือโอกาส (สีฟ้า) เช่นเดียวกับที่ทับซ้อนกันของเซลล์ทั้ง 3 ประเภท (สีขาว) ในกลุ่ม eYFP (รูปที่ 7l); อย่างไรก็ตาม ไม่พบความแตกต่างระหว่างกลุ่ม

เมื่อนำมารวมกัน การค้นพบนี้ให้หลักฐานเบื้องต้นเกี่ยวกับประสิทธิภาพการรักษาที่เป็นไปได้ของการปรับความทรงจำเทียมเพื่อระงับการตอบสนองต่อความกลัวทั้งแบบเฉียบพลันและแบบยั่งยืนโดยการเปลี่ยนความทรงจำเกี่ยวกับความกลัวดั้งเดิมในช่วงระยะเวลาการรวมใหม่

For more information:1950477648nn@gmail.com