การทำแผนที่ภูมิทัศน์โปรตีโอมิกส์ของโรคเบห์เชต์ที่แก้ไขโดยอวัยวะโดยใช้โปรตีโอมิกส์พลาสมาในเชิงลึกเพื่อระบุการแสดงออกของโปรตีนที่มีผลผูกพันกับไฮยาลูโรนิก 2 ที่เกี่ยวข้องกับการมีส่วนร่วมของหลอดเลือด

วัตถุประสงค์.

การศึกษานี้ดำเนินการเพื่อชี้แจงกลไกการเกิดโรคและความหลากหลายของโรคเบเชต์ (BD) ที่เกี่ยวข้องกับอวัยวะต่างๆ โดยใช้โปรตีโอมิกส์เชิงลึกเพื่อระบุตัวชี้วัดทางชีวภาพสำหรับการประเมินทางคลินิกและการรักษาผู้ป่วยโรคเบ็ด

วิธีการ

เราวัดระดับการแสดงออกของโปรตีนในตัวอย่างพลาสมาจากผู้ป่วย 98 รายที่มี BD และกลุ่มควบคุมที่ดีต่อสุขภาพ 31 รายโดยใช้แพลตฟอร์มโปรตีโอมิกส์เชิงลึกของเราพร้อมแมสสเปกโตรมิเตอร์ที่ได้มาโดยไม่ขึ้นกับข้อมูลและไมโครอาร์เรย์ของแอนติบอดี เราทำการวิเคราะห์ทางชีวสารสนเทศของกระบวนการทางชีวภาพและเส้นทางการส่งสัญญาณที่เปลี่ยนแปลงในกลุ่ม BD และสร้างภูมิทัศน์โปรตีโอมิกส์ของการเกิดโรค BD ที่แก้ไขด้วยอวัยวะ จากนั้นเราตรวจสอบตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของความรุนแรงของโรคและกลุ่มย่อยของหลอดเลือดในกลุ่มผู้ป่วย BD 108 รายที่เป็นอิสระและกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี 29 รายโดยใช้การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

ผลลัพธ์.

กลุ่ม BD มีโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 220 ชนิด ซึ่งแยกแยะระหว่างผู้ป่วย BD (88.6%) และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี (95.5%) การวิเคราะห์ทางชีวสารสนเทศเผยให้เห็นกระบวนการทางชีววิทยาต่างๆ ที่เกี่ยวข้องกับโรค BD รวมถึงการกระตุ้นส่วนเสริม การรักษาบาดแผล การสร้างเส้นเลือดใหม่ และภูมิคุ้มกันที่ใช้เม็ดเลือดขาวเป็นสื่อกลาง นอกจากนี้ ภูมิทัศน์โปรตีโอมิกส์ที่สร้างขึ้นของ BD ที่แก้ไขโดยอวัยวะได้ระบุคุณสมบัติโปรตีโอมิกส์ของ BD ที่เกี่ยวข้องกับอวัยวะต่าง ๆ และเป้าหมายโปรตีนที่สามารถนำมาใช้ในการพัฒนาการรักษา โปรตีนที่มีผลผูกพันกับไฮยาลูโรนิก 2, tenascin และ serpin A3 ได้รับการตรวจสอบว่าเป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่มีศักยภาพสำหรับการประเมินทางคลินิกของ BD ของหลอดเลือดและเป้าหมายการรักษา

บทสรุป.

ผลลัพธ์ของเราให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีคุณค่าเกี่ยวกับการเกิดโรคของ BD ที่ได้รับการแก้ไขโดยอวัยวะในแง่ของลักษณะโปรตีโอมิกส์และตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่มีศักยภาพสำหรับการประเมินทางคลินิกและการรักษาที่มีศักยภาพสำหรับหลอดเลือด BD

การแนะนำ

โรคเบเช็ท (BD) เป็นโรคหลอดเลือดอักเสบเรื้อรังหลายระบบที่แพร่หลายอย่างมากในประชากรตามเส้นทางการค้าโบราณที่เรียกว่าเส้นทางสายไหม การศึกษาในปี 2016 พบว่าความชุกของโรค BD ในตุรกีอยู่ที่ 602 ต่อ 100000 ในประชากรวัยรุ่น/ผู้ใหญ่ (1) BD มีความแตกต่างกันอย่างมาก และผู้ป่วยที่มีการมีส่วนร่วมของอวัยวะหลายส่วน รวมถึงแผลในช่องปาก แผลที่อวัยวะเพศ ม่านตาอักเสบ และรอยโรคที่ผิวหนัง BD อาจถึงแก่ชีวิตได้อันเป็นผลมาจากหลอดเลือดโป่งพองแตกหรือภาวะแทรกซ้อนทางระบบประสาทที่รุนแรง ไม่ทราบลักษณะโมเลกุลของ BD ที่เกี่ยวข้องกับอวัยวะต่าง ๆ วิธีการวินิจฉัยทางคลินิกและทางเลือกการรักษาในภายหลังส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับอาการทางคลินิก อย่างไรก็ตาม ไม่มีตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่อนุญาตให้มีการแยกความแตกต่างของ BD ตามการมีส่วนร่วมของอวัยวะต่างๆ เมื่อเปรียบเทียบกับจีโนมิกส์ โปรตีโอมิกส์เสนอวิธีการทางเลือกในการรับข้อมูลมากมายเกี่ยวกับการเกิดโรคของ BD และการค้นหาตัวบ่งชี้ทางชีวภาพสำหรับการวินิจฉัยและการรักษา BD Lee และคณะได้ค้นพบโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 22 ชนิดโดยใช้อิเล็กโตรโฟรีซิสแบบมิติ 2- รวมกับเลเซอร์ดีซัปชัน/ไอออไนเซชันที่ใช้เมทริกซ์ช่วย ควบคู่กับแมสสเปกโตรมิเตอร์ตามเวลาการบิน (2) โปรตีนที่มีลักษณะเฉพาะสามชนิดใน BD ในลำไส้ (ไฟบริน, อะโพลีโปโปรตีน A-IV และเซรั่มอะไมลอยด์ A) ได้รับการตรวจสอบเพิ่มเติมในกลุ่มประชากรอิสระโดยใช้การทดสอบอิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) การใช้อาร์เรย์บีดไซโตไคน์ของ Bio-Rad ที่มีไซโตไคน์อักเสบ 25 ตัว Lopalco และคณะพบว่า gp130/secreted interleukin-6 (IL-6) receptor , secreted IL-6 receptor , IL{{19} } และระดับซีรั่ม thymic stromal lymphopoietin เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในชุดย่อย BD ที่มีอาการทางเยื่อเมือกและการมีส่วนร่วมของตาเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มย่อยที่มีส่วนเกี่ยวข้องกับเยื่อเมือกเท่านั้น (3) อย่างไรก็ตาม ข้อมูลที่ได้รับในการศึกษาเหล่านี้มีจำกัดเนื่องจากโปรตีนและกลุ่มผู้ป่วยมีขนาดเล็กและตัวชี้วัดทางชีวภาพที่ระบุไม่ได้รับการตรวจสอบความถูกต้องอย่างดี สำหรับการศึกษานี้ เราได้ดำเนินการตามความรู้ของเรา การทำโปรไฟล์พลาสมาโปรตีโอมแบบครอบคลุมครั้งแรกของ BD โดยใช้แพลตฟอร์มโปรตีโอมิกส์ในเชิงลึกของเราที่รวมเข้ากับสเปกโตรมิเตอร์มวลสารที่ได้รับข้อมูลโดยไม่ขึ้นกับข้อมูล (DIA-MS) พร้อมไมโครอาร์เรย์แอนติบอดีที่ปรับแต่งได้ (4) ด้วยข้อมูลโปรตีโอมิกส์ เราวิเคราะห์โปรตีนที่แสดงความแตกต่างระหว่างผู้ป่วย BD และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี และกระบวนการทางชีวภาพและวิถีทางของโปรตีนเหล่านี้เกี่ยวกับการเกิดโรค BD นอกจากนี้เรายังสร้างภูมิทัศน์ BD ที่แก้ไขด้วยอวัยวะและระบุลักษณะโปรตีโอมิกส์ของแต่ละอวัยวะ ตัวชี้วัดทางชีวภาพของหลอดเลือด BD และความรุนแรงของโรคได้รับการตรวจสอบในกลุ่มประชากรอิสระ

ผู้ป่วยและวิธีการ

การศึกษานี้ได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมทางการแพทย์ของ Peking Union Medical College Hospital (JS{0}}) บทความนี้ไม่มีข้อมูลที่สามารถระบุตัวตนได้สำหรับผู้ป่วย BD หรือผู้เข้าร่วมการควบคุมที่มีสุขภาพดี กลุ่มการค้นพบนี้รวมผู้ป่วย 98 BD และผู้ควบคุมที่มีสุขภาพดี 31 คน พลาสมาโปรตีโอมถูกวัดในเชิงลึกโดยใช้ DIA-MS และไมโครแอเรย์ของแอนติบอดี การวิเคราะห์ทางชีวสารสนเทศศาสตร์ถูกนำมาใช้เพื่อระบุกลไกทางชีววิทยาที่เปลี่ยนแปลงในกลุ่ม BD และเพื่อสร้างภูมิทัศน์โปรตีโอมิกส์ของ BD ที่แก้ไขโดยอวัยวะ ตัวชี้วัดทางชีวภาพในพลาสมาผู้สมัครได้รับการตรวจสอบความถูกต้องโดยใช้ ELISA ในกลุ่มอิสระที่ประกอบรวมด้วยกลุ่มควบคุมที่ดีต่อสุขภาพและผู้ป่วยที่มีภาวะหลอดเลือดแดง BD และ Takayasu ลักษณะทางคลินิกและข้อมูลการรักษาของการค้นพบและการตรวจสอบความถูกต้องแสดงอยู่ในตารางเสริม 1-6 และขั้นตอนการทดลองโดยละเอียดได้อธิบายไว้ในเอกสารเสริมซึ่งมีอยู่บนเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley com/doi/10.1002/art.42348.

ผลลัพธ์

ลักษณะผู้ป่วย ลักษณะทางคลินิกของผู้ป่วยโรค BD และการใช้กลูโคคอร์ติคอยด์ (GCs) และยากดภูมิคุ้มกันในขณะที่เจาะเลือดแสดงอยู่ในตารางเสริม 1 ที่มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi / 10.1002/art.42348. ในการวิเคราะห์โปรตีโอมิกส์ของเรา ไม่พบความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญในเพศและอายุระหว่างผู้ป่วย 98 คนที่เป็นโรค BD และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี 31 คน (กลุ่มการค้นพบ) (ตารางเสริม 1) ในกลุ่ม BD ผู้ป่วย 45, 38 และ 15 รายมี BD ระดับเล็กน้อย ปานกลาง และรุนแรง ตามลำดับ ผู้ป่วย BD ทั้งหมดมีแผลในช่องปาก และ > 20% มีแผลที่อวัยวะเพศ (80.6%) รอยโรคที่ผิวหนัง (65.3%) รอยโรคที่ตา (23.5%) และการมีส่วนร่วมของหลอดเลือด (22.4 %) การมีส่วนร่วมของหลอดเลือดของผู้ป่วย BD ในกลุ่มการค้นพบแสดงอยู่ในตารางเสริม 2 และลักษณะของกลุ่มการตรวจสอบความถูกต้องที่ใช้เพื่อตรวจสอบการแสดงออกของตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของผู้สมัครจะแสดงในตารางเสริม 3–5 (มีอยู่บนเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อ ที่https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348)

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

คลิกที่นี่เพื่อดูผลิตภัณฑ์ Cistanche Enhance Immunity

【สอบถามเพิ่มเติม】 อีเมล:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

การทำโปรไฟล์เชิงลึกของพลาสมาโปรตีโอมในผู้ป่วย BD โดยใช้ DIA-MS และแอนติบอดีไมโครอาร์เรย์ ภาพประกอบแผนผังของการศึกษาโปรไฟล์โปรตีนแสดงในรูปที่ 1A และรูปที่ 1 เพิ่มเติม มีอยู่บนเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/ 10.1{{11} }02/art.42348. ตัวอย่างพลาสมาทั้งหมดจากผู้ป่วย BD และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดีถูกวัดโดยใช้แพลตฟอร์มโปรตีโอมิกส์ในพลาสมาเชิงลึกของเราซึ่งประกอบด้วย DIA-MS และไมโครอาร์เรย์แอนติบอดีที่มีความสามารถในการทำซ้ำสูง ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของ Spearman ในการตรวจจับโปรตีนในพลาสมาโดยใช้แอนติบอดี microarray อยู่ที่ 0.98 และ 0.93 ภายในและระหว่างอาร์เรย์ที่แตกต่างกันตามลำดับ (ตัวเลขเสริม 2A และ 2B มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https //onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348) ค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของสเปียร์แมนในการตรวจจับโปรตีนในพลาสมาโดยใช้ DIA-MS เท่ากับ 0.92 (ช่วง 0.87–0.96; รูปที่ 2C เพิ่มเติม) รูปภาพสแกนที่เป็นตัวแทนโดยแอนติบอดี microarray สำหรับผู้ป่วย BD และการควบคุมที่ดีต่อสุขภาพแสดงในรูปที่ 3 เพิ่มเติมซึ่งมีอยู่ที่ https:// onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348 ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าโดยรวมแล้ว โปรตีนในพลาสมาของผู้ป่วย BD ได้รับการควบคุมที่ดีขึ้นเมื่อเปรียบเทียบกับโปรตีนในพลาสมาของกลุ่มควบคุมที่ดีต่อสุขภาพ ด้วยแพลตฟอร์มพลาสมาโปรตีโอมิกส์ในเชิงลึกของเรา เราได้ระบุโปรตีน 759 ชนิด (รูปที่ 1, 4 และ 5 เพิ่มเติมมีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348) ซึ่งกระจายที่ขนาดประมาณ 10 ลำดับในพลาสมา (รูปที่ 1B) โปรตีนเหล่านี้ประกอบด้วยตัวชี้วัดทางชีวภาพโปรตีน 410 ตัว (ฐานข้อมูลตัวชี้วัดทางชีวภาพในพลาสมาโรคของมนุษย์ ออนไลน์ที่ http://biokb.ncpsb. org. cn/hdpp/#/) และเป้าหมายการรักษา 388 เป้าหมายที่ได้รับการอนุมัติในปัจจุบันหรืออยู่ระหว่างการวิจัยในการทดลองทางคลินิกที่กำลังดำเนินอยู่ (การรักษา ฐานข้อมูลเป้าหมาย ออนไลน์ที่ http://db.idrblab.net/ttd/) (รูปที่ 1B) คำอธิบายประกอบการทำงานของตัวบ่งชี้ทางชีวภาพและเป้าหมายการรักษาบ่งชี้ว่าโปรตีนเหล่านี้เป็นของโรคภูมิต้านตนเองและโรคอักเสบอัตโนมัติต่างๆ รวมถึง BD, โรคไตอักเสบลูปัส, โรคกระดูกสันหลังอักเสบยึดติด และ vasculitis (รูปที่ 1C และ 1D และตารางเสริม 7 และ 8 มีอยู่ใน โรคข้ออักเสบและโรคข้อ เว็บไซต์ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/ 10.1002/art.42348) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าพลาสมาโปรตีนที่ตรวจพบด้วยแพลตฟอร์มของเรามีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการเกิดขึ้นและการพัฒนาของ BD

รูปที่ 1 การทำโปรไฟล์โปรตีโอมของตัวอย่างพลาสมาจากผู้ป่วยโรคเบเช็ท (BD) โดยใช้แพลตฟอร์มโปรตีโอมิกส์เชิงลึกพร้อมแมสสเปกโตรมิเตอร์มวลสารที่เป็นอิสระจากข้อมูล (DIA-MS) และการวิเคราะห์ไมโครอาร์เรย์ของแอนติบอดี ขั้นตอนการทำงานของการศึกษาโปรตีโอมิกส์ของ BD B, การกระจายความเข้มข้นของโปรตีนในพลาสมาที่ตรวจพบด้วย DIA-MS และแอนติบอดีไมโครอาร์เรย์ตามความเข้มข้นอ้างอิงในฐานข้อมูลโปรตีโอมในพลาสมาของมนุษย์ (//www.plasmaproteomedatabase.org/) C, โรคที่เกี่ยวข้องกับตัวชี้วัดทางชีวภาพของโปรตีนที่ตรวจพบ ซึ่งได้รับการระบุโดยใช้ฐานข้อมูลตัวชี้วัดทางชีวภาพของโปรตีนในพลาสมาโรคของมนุษย์ (HDPP) (http://biokb.ncpsb.org.cn/hdpp/#/) D โรคที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนเป้าหมายการรักษาที่ตรวจพบ ซึ่งระบุโดยใช้ฐานข้อมูลเป้าหมายการรักษา (TTD) (//db.idrblab.net/ttd/) ขนาดวงกลมใน C และ D สอดคล้องกับจำนวนโปรตีนที่เพิ่มขึ้นในแต่ละโรค HC=การควบคุมที่ดี; FASP=การเตรียมตัวอย่างโดยใช้ตัวกรองช่วย QE-HF=แมสสเปกโตรมิเตอร์ HF Hybrid Quadrupole Orbitrap (ThermoFisher) ที่แน่นอน; สเตรป-พีอี=สเตรปตะวิดิน-ไฟโคเอรีทริน; การสอบวิเคราะห์อิมมูโนซอร์เบนท์ที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ELISA =; IgA=อิมมูโนโกลบุลิน A.

การวิเคราะห์โปรตีโอมทั้งโปรตีนในพลาสมาที่แสดงออกแตกต่างกันที่เกี่ยวข้องกับ BD รูปที่ 1 เพิ่มเติม มีอยู่ที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ art.42348 แสดงแผนภูมิการไหลของวิธีการระบุและบูรณาการโปรตีนที่แสดงออกอย่างแตกต่างจาก DIA-MS และผลลัพธ์ microarray ของแอนติบอดี DIA-MS กำหนดเป้าหมายโปรตีนทั้งหมด 493 ตัว โดยที่โปรตีน 379 ตัวถูกเก็บรักษาไว้ด้วย<29 missing values in the BD group and < 7 missing values in the healthy control group. After 36 proteins with potential contaminations from blood cells (5) were removed, we analyzed 343 additional proteins for hypothesis testing, of which 166 proteins showed a statistically significant difference between the BD and healthy control groups. The antibody microarray detected 549 proteins. After 5 control proteins were removed, we retained 544 proteins for further analysis; of these, 74 proteins showed statistically significant differences between the BD group and the healthy control group (Supplementary Figure 1). In total, 220 (29.0%) of 759 proteins were significantly differently expressed between the BD group and the healthy control group (P < 0.05), as shown using our in-depth proteomics platform comprising DIA-MS and the antibody microarray (Figure 2A and Supplementary Figures 1 and 5, available at https:// onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348). The number of differentially expressed proteins is 10-fold more than previously reported (2,3,6). Among these proteins, 5 were identified as potential plasma or serum biomarkers in proteomics research for patients with BD, including haptoglobin, apoprotein, transthyretin, immunoglobulin light chain, and immunoglobulin heavy chain. Furthermore, growth arrest–specific 6, resistin, von Willebrand factor (VWF), and others were also identified to be increased in the BD group (Figure 2B). We identified 215 new proteins associated with BD, including serpin A3 (SERPINA3), glycosylphosphatidylinositol specific phospholipase D1 (GPLD1), and attractin (ATRN) (Figure 2C).

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

เพื่อตรวจสอบว่าผู้ป่วยโรค BD สามารถแยกความแตกต่างจากกลุ่มควบคุมที่ดีต่อสุขภาพได้หรือไม่ เราทำการวิเคราะห์การจัดกลุ่มแบบลำดับชั้นที่ไม่เอนเอียงของโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 220 ชนิด (P < 0.05) โดยที่ { {3}}.0% ของผู้ป่วยที่มี BD และ 86.4% ของการควบคุมที่ดีต่อสุขภาพถูกรวมกลุ่มกัน (รูปที่ 6 เพิ่มเติม มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley. com/doi/ 10.1002/art.42348) ในบรรดาโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 130 ชนิด ( P <0.01) เราพบว่าผู้ป่วย BD 88.6% และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี 95.5% ถูกรวมกลุ่มกัน (รูปที่ 2D) การวิเคราะห์จำแนกกำลังสองน้อยที่สุดบางส่วนเพิ่มเติมเผยให้เห็นว่าผู้ป่วยในกลุ่ม BD สามารถแยกแยะได้อย่างชัดเจนจากการควบคุมที่ดีต่อสุขภาพตามการจำแนกประเภทของโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน (รูปที่ 7 เพิ่มเติมมีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley com/doi/10.1002/art.42348) การเพิ่มคุณค่าของโรคโดยใช้แพลตฟอร์ม DisGeNET (7) ระบุเพิ่มเติมว่าโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกันเหล่านี้มีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับการอักเสบและโรคภูมิต้านตนเองและหลอดเลือดรวมถึง BD และ vasculitis (รูปที่ 2E และตารางเสริม 9 มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https //onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348) ในการวิเคราะห์ชีวสารสนเทศศาสตร์ของเราโดยใช้ Cytoscape และ CluGo มีการระบุกระบวนการทางชีววิทยาหลัก 8 กระบวนการต่อไปนี้ใน BD: 1) การกระตุ้นส่วนเสริม 2) การควบคุมระดับอนุภาคไลโปโปรตีนในพลาสมา 3) การสมานแผล 4) การสร้างเส้นเลือดใหม่ 5) ภูมิคุ้มกันที่เป็นสื่อกลางของเม็ดเลือดขาว 6 ) กิจกรรมเปปทิเดส 7) การควบคุมเชิงบวกของการกระตุ้นเซลล์ และ 8) การย้ายถิ่นของเม็ดเลือดขาว (รูปที่ 2F และตารางเสริม 10 มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348 ). กระบวนการทางชีววิทยาเหล่านี้มาบรรจบกับกลไกทางพยาธิวิทยาของการอักเสบและการแข็งตัวของเลือดในระหว่างการพัฒนา BD ซึ่งโปรไฟล์ของไขมันและการเปลี่ยนแปลงโดยความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชั่นระหว่างการอักเสบนำไปสู่ความผิดปกติของเยื่อบุผนังหลอดเลือดและเหตุการณ์ของหลอดเลือด (8–11)

เส้นทางที่สำคัญที่สุดอย่างต่อเนื่องจากฐานข้อมูล KEGG (มีอยู่ที่ http://www.genome.ad.jp/kegg) คือการเสริมและการแข็งตัวลดหลั่น (รูปที่ 3A) โดยที่โปรตีน 38 ตัว (P < 0.05 ) ถูกระบุซึ่งรวมถึงส่วนประกอบ (C) ส่วนเติมเต็ม 19 ชนิด (สายโซ่อัลฟาของ C1QA, C1QB, C1QC, C1S, C2, C4B, โปรตีนที่จับ C4b [C4BPA), สายโซ่อัลฟา C5, C6, C7, C8, สายโซ่อัลฟา C8, แกมมา C8 สายโซ่ [C8G], C9, ปัจจัยเสริม [CF] B, CFH, โปรตีนที่เกี่ยวข้องกับ CFH 4 [CFHR4], CFI และโปรตีนคล้ายตัวรับ 1 ส่วนประกอบ), ปัจจัยการแข็งตัว 5 ตัว (F11, F12, F13B, F5 และ F9 ), โปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการแข็งตัวของเลือด 4 ชนิด (ตัวกระตุ้นพลาสมิโนเจนชนิดเนื้อเยื่อ [PLAT], โปรตีน C, โปรตีนต้านการแข็งตัวของเลือด S [PROS1] และ VWF) และโปรตีนตระกูลเซอร์พิน 5 ชนิด (SERPINA1, SERPINC1, SERPIND1, SERPINF2 และ SERPING1) โปรตีนยี่สิบห้าชนิดในคาสเคดเป็นเป้าหมายที่สามารถใช้ยาได้สำหรับการบำบัดรักษาโรค (รูปที่ 3B) สิ่งที่น่าสนใจคือโปรตีนส่วนใหญ่ที่รวมอยู่ในทางเดิน KEGG และส่วนเสริมและการแข็งตัวของเลือดซ้อนทับกับโปรตีนที่เกี่ยวข้องในกระบวนการทางชีววิทยาที่ได้รับการเสริมสมรรถนะมากที่สุดของการแข็งตัวของเลือด / การรักษาบาดแผล (รูปที่ 3B และตารางเสริม 10 มีอยู่ที่ https:// onlinelibrary.wiley.com/ ดอย/10.1002/art.42348.). วิถีทางการติดเชื้อที่ทำให้เกิดโรคหลายอย่างได้รับการระบุโดยใช้การวิเคราะห์วิถีทางของ KEGG ในการศึกษา ซึ่งรวมถึงการติดเชื้อ Staphylococcus aureus โรคพรีออน ไอกรน การติดเชื้อ papillomavirus ในมนุษย์ การติดเชื้อไวรัสเริม 1 และปฏิกิริยาระหว่างโปรตีนของไวรัสกับไซโตไคน์และตัวรับไซโตไคน์ โดยเน้นที่บทบาทของการติดเชื้อที่ทำให้เกิดโรค ใน BD (รูปที่ 8A เพิ่มเติมมีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่https://online ห้องสมุด.

รูปที่ 2 โปรตีนถูกแสดงออกมาอย่างแตกต่างระหว่างผู้ป่วย BD และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดีที่ระบุโดย DIA-MS และไมโครอาร์เรย์ของแอนติบอดี แผนผังภูเขาไฟที่แสดงให้เห็นโปรตีนที่ผิดปกติในผู้ป่วย BD เทียบกับกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี โปรตีนที่ได้รับการควบคุมขึ้นและลงอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.05) ถูกระบุเป็นจุดสีแดงและสีน้ำเงินตามลำดับ B แผนกระจายแสดงความเข้มข้นของการแสดงออกของโปรตีนตัวแทนในพลาสมาของผู้ป่วย BD และการควบคุมสุขภาพ สัญลักษณ์แสดงถึงตัวอย่างแต่ละรายการ เส้นแนวนอนแสดงถึงค่ามัธยฐาน C, แผนภาพเวนน์ เปรียบเทียบจำนวนของโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกันในผู้ป่วย BD ที่ระบุในการศึกษาของเรากับที่ระบุในการศึกษาก่อนหน้า D, การวิเคราะห์การจัดกลุ่มตามลำดับชั้นของโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน (P < 0.01) ระหว่าง BD และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี โดยที่ 88.6% ของผู้ป่วยที่มี BD และ 95.5% ของ HC ถูกรวมกลุ่มกัน พื้นที่สี่เหลี่ยมประบ่งบอกถึงแต่ละกลุ่มพร้อมกับโปรตีนที่แสดงออกอย่างสูงที่สอดคล้องกัน E, การเพิ่มคุณค่าของโรค (มาจากแพลตฟอร์ม DisGeNET) ที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนที่ผิดปกติในผู้ป่วย BD ที่สัมพันธ์กับการควบคุมที่ดีต่อสุขภาพ (log1 0 [ค่า q] < −15) F, กระบวนการทางชีวภาพที่ได้รับการเสริมสมรรถนะอย่างมีนัยสำคัญซึ่งระบุโดยใช้โปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกันในผู้ป่วย BD ที่สัมพันธ์กับการควบคุมสุขภาพ (P < 0.05) *=ป < 0.05; **=ป < 0.01; ***=ป < 0.001; ****=ป < 0.0001. การยับยั้งการเจริญเติบโตของ GAS6=–เฉพาะเจาะจง 6; RETN=ต่อต้าน; VWF=ปัจจัยจาก Willebrand; เซอร์พินา3=เซอร์พิน A3 ( 1-แอนติไคโมทริปซิน); GPLD1=ไกลโคซิลฟอสฟาติดิลโนซิทอลเฉพาะฟอสโฟไลเปส D1; ATRN=ดึงดูด (ดูรูปที่ 1 สำหรับคำจำกัดความอื่น ๆ )

รูปที่ 3 เส้นทางการส่งสัญญาณที่เกี่ยวข้องกับการเกิดโรคของ BD A เส้นทางการส่งสัญญาณที่เพิ่มขึ้นอย่างมากที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกันในผู้ป่วย BD สัมพันธ์กับการควบคุมที่ดีที่ระบุซึ่งใช้ฐานข้อมูล KEGG และรีแอคโทม (P < 0.01) แบบอักษรสีแดงบ่งบอกถึงวิถีที่เกี่ยวข้องกับการแข็งตัวของเลือดและการกระตุ้นการทำงานของส่วนเสริม B ลำดับส่วนเสริมและการแข็งตัวของเลือด ระบุโดยใช้ฐานข้อมูล KEGG แสดงความสัมพันธ์ที่สำคัญที่สุดกับโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกันในผู้ป่วย BD ที่สัมพันธ์กับการควบคุมที่ดีต่อสุขภาพ มีการระบุโปรตีนอันเป็นเอกลักษณ์ที่สามารถกำหนดเป้าหมายโดยยาที่ได้รับอนุมัติที่เป็นที่รู้จัก C และ D โดเมนโปรตีนที่ได้รับการเสริมสมรรถนะอย่างมีนัยสำคัญ (C) และส่วนประกอบของเซลล์ (D) ที่ระบุโดยโปรตีนที่แสดงออกอย่างมีนัยสำคัญในผู้ป่วย BD ที่สัมพันธ์กับการควบคุมที่ดีต่อสุขภาพ (P <0.01) ใน A, C และ D ความยาวของแท่งระบุฐานล็อก 10 ของค่า P และตัวเลขที่อยู่ถัดจากแท่งระบุจำนวนโปรตีนที่เกี่ยวข้องในแต่ละหมวดหมู่ IGF=ปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลิน; IGFBP=โปรตีนที่มีผลผูกพันกับปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลิน; C=ส่วนเสริม; ER=ตาข่ายเอนโดพลาสมิก; ECM=เมทริกซ์นอกเซลล์; CUB=เสริม C1r/C1s, Uegf และ Bmp1; EGF=ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง; ขึ้น=ขึ้นควบคุม; ลง=ลงควบคุม (ดูรูปที่ 1 สำหรับคำจำกัดความอื่น ๆ )

wiley.com/doi/10.1002/art.42348) (12–17) วิถีทาง KEGG ของการติดเชื้อ Staphylococcus aureus ที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 13 ชนิด ( P <0.05) ได้รับการเสริมสมรรถนะอย่างมีนัยสำคัญ (บางส่วนถูกทำเครื่องหมายในรูปที่ 8B เพิ่มเติม) ซึ่งบ่งบอกถึงบทบาทของการติดเชื้อ Staphylococcus aureus ในการเกิดโรคของ BD (18, 19) ท้ายที่สุด การวิเคราะห์การเสริมสมรรถนะระบุโดเมนส่วนเติมเต็ม รวมถึงโดเมนที่มีอยู่มากมายในโปรตีนควบคุมส่วนเสริม การทำซ้ำของซูชิ คอมเพล็กซ์การโจมตีด้วยเยื่อหุ้มเซลล์/เพอร์ฟอริน โดเมนส่วนประกอบส่วนเสริม C1q และโดเมน CUB (สำหรับส่วนเติมเต็ม C1r/C1s, Uegf และ Bmp1 ) (รูปที่ 3ค) การวิเคราะห์การเพิ่มคุณค่าส่วนประกอบของเซลล์เปิดเผยว่าโปรตีนที่ได้รับการควบคุมขั้นสูงนั้นได้รับการเสริมสมรรถนะในเมทริกซ์นอกเซลล์ที่มีคอลลาเจน ลูเมนของเม็ดหลั่ง เกล็ดเลือดอัลฟ่าแกรนูล และอนุภาคไลโปโปรตีนในพลาสมา แต่โปรตีนที่ได้รับการควบคุมด้านล่างส่วนใหญ่ได้รับการเสริมสมรรถนะใน พื้นที่นอกเซลล์และภายนอก (รูปที่ 3 มิติ)

เพื่อตรวจสอบอิทธิพลของการรักษาต่อโปรตีนในพลาสมา เราได้จัดกลุ่มผู้ป่วยโรค BD ตามการรักษาด้วย GCs และยากดภูมิคุ้มกัน ผู้ป่วยโรค BD ที่มีหรือไม่มีการรักษาสามารถแยกแยะได้อย่างชัดเจนจากกลุ่มควบคุมที่ดีต่อสุขภาพ (รูปที่ 9A เพิ่มเติม มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art 42348) การวิเคราะห์แสดงให้เห็นว่ากระบวนการทางชีววิทยาส่วนใหญ่ที่เปลี่ยนแปลงในผู้ป่วย BD ที่ได้รับการรักษากับผู้ป่วย BD ที่ไม่ได้รับการรักษาด้วย GCs และยากดภูมิคุ้มกันนั้นสัมพันธ์กับการควบคุมการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน (รูปที่ 9B เพิ่มเติม) นอกจากนี้เรายังเปรียบเทียบการแสดงออกที่แตกต่างกันของโปรตีนในพลาสมาระหว่างผู้ป่วย BD ที่ไม่มีการรักษากับผู้ป่วย BD ที่ได้รับ GC และการรักษาด้วยภูมิคุ้มกัน ผลลัพธ์ระบุโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 68 ชนิด ( P <0.05) ที่เกี่ยวข้องเช่นการควบคุมระดับอนุภาคไลโปโปรตีนในพลาสมาและการกวาดล้างและกิจกรรมเอนโดเพปทิเดสประเภทซีรีน (รูปที่ 10 เพิ่มเติม มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https:// onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348)

ภูมิทัศน์โปรตีโอมิกส์ของ BD ที่แก้ไขด้วยอวัยวะ BD เป็นโรคที่มีความหลากหลายสูงโดยมีส่วนร่วมของหลายอวัยวะ โดยนำเสนอด้วยอาการทางฟีโนไทป์ที่แตกต่างกัน (ตารางเสริม 1 ดูได้ที่ https://onlinelibrary.wiley. com/doi/10.1002/art .42348) การศึกษาได้พยายามที่จะจัดหมวดหมู่ย่อย BD ตามอาการทางคลินิก (20–23) ในการตรวจสอบความแตกต่างในผู้ป่วย BD ตามข้อมูลโปรตีโอมิกส์ เราได้ดำเนินการจัดกลุ่มฉันทามติโดยไม่ได้รับการดูแลบนโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 220 ชนิด (รูปที่ 4A) การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักเผยให้เห็นการแยกประเภทย่อย I และประเภทย่อย II ออกจากประเภทย่อย III อย่างชัดเจน (รูปที่ 4B) โปรตีนจำเพาะชนิดย่อย I ส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับการแข็งตัวของเลือดและการกระตุ้นเสริม ส่วนโปรตีนจำเพาะชนิดย่อย II ส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญกลูโคสและโปรตีน - ไขมัน และโปรตีนเฉพาะชนิดย่อย III มีส่วนร่วมในการตอบสนองต่อการอักเสบ (รูปที่ 4D และรูปที่ 11 เพิ่มเติม มีอยู่ในเว็บไซต์ Arthritis & Rheumatology ที่ https://onlinelibrary.wiley. com/doi/10.1002/art.42348) แม้ว่าไม่พบความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติเกี่ยวกับลักษณะทางคลินิกในกลุ่ม BD ที่เป็นโปรตีโอมิกส์ชนิดย่อย แต่เราพบว่าชนิดย่อย I และชนิดย่อย II มีความคล้ายคลึงกัน (รูปที่ 4B) ซึ่งสอดคล้องกับผลลัพธ์ของการวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก ผู้ป่วย BD ที่มีชนิดย่อย I และชนิดย่อย II มีอาการรุนแรงในเปอร์เซ็นต์ที่สูงกว่า รวมถึงการมีส่วนร่วมของระบบประสาท (13.8% ในกลุ่มย่อย I และ 8.2% ในกลุ่มย่อย II เทียบกับ 0% ในกลุ่มย่อย III) และการมีส่วนร่วมของหลอดเลือด (27.6% ในกลุ่มย่อย I และ 22.4 % ในกลุ่มประเภทย่อย II เทียบกับ 0% ในกลุ่มประเภทย่อย III) แม้ว่าผู้ป่วย BD ที่มีชนิดย่อย III จะมีอาการค่อนข้างเล็กน้อยถึงปานกลาง แต่ก็มีเปอร์เซ็นต์ของรอยโรคที่ผิวหนังสูงกว่า (87.5% ในกลุ่มย่อย III เทียบกับ 51.7% ในกลุ่มย่อย I และ 65.3% ในกลุ่มย่อย II) (รูปที่ 4E ตารางเสริม ข้อมูลฉบับที่ 11 สามารถดูได้ที่เว็บไซต์ Arthritis & Rheumatology ที่ https://onlinelibrary. wiley.com/doi/10.1002/art.42348) มีหลักฐานสะสมที่แสดงถึงการเปลี่ยนแปลงในกระบวนการทางชีวภาพหลายอย่างในระหว่างการพัฒนา BD รวมถึงการอักเสบอัตโนมัติ ความไม่สมดุลของรีดอกซ์ การเปลี่ยนแปลงทางเมแทบอลิซึม ภาวะไขมันผิดปกติ และความผิดปกติของการแข็งตัวของเลือด (8,24–27) ดังนั้นผลลัพธ์ของเราชี้ให้เห็นว่าแม้ว่าผู้ป่วย BD ที่อยู่ในกลุ่มโปรตีโอมิกส์ชนิดย่อย I และชนิดย่อย II จะมีความรุนแรงของ BD สูงกว่า แต่กลไกทางชีววิทยาของทั้งสองกลุ่มอาจแตกต่างกัน

cistanche พืชเพิ่มระบบภูมิคุ้มกัน

เราทำการวิเคราะห์แบบกลุ่มของกลุ่ม BD ตามข้อมูลทางคลินิก (เพศ อายุ คะแนนความรุนแรง และอาการทางคลินิก) โดยใช้ {{0}}การวิเคราะห์แบบกลุ่มขั้นตอน (23) ดังที่แสดงในรูปที่ 4E ผู้ป่วย BD ถูกจำแนกออกเป็น 2 กลุ่ม (กลุ่มที่ 1 และ 2) โดยที่ผู้ป่วยถูกจัดหมวดหมู่ตามอาการ เช่น แผลในช่องปาก แผลที่ผิวหนัง แผลที่ตา และแผลที่อวัยวะเพศ ผู้ป่วย BD ในกลุ่มที่ 1 มีอุบัติการณ์ของฟีโนไทป์ของข้ออักเสบที่เกี่ยวข้องกับอาการของโรคข้ออักเสบ (40.0%) และระบบทางเดินอาหาร (8.9%) หลอดเลือด (48.9%) และการมีส่วนร่วมของระบบประสาท (22.2%) มากกว่าอย่างมีนัยสำคัญ เมื่อเปรียบเทียบกับผู้ป่วย BD ใน คลัสเตอร์ 2 ต่อไป เราเปรียบเทียบการจำแนกทางคลินิกและโปรตีโอมิกส์ในกลุ่ม BD เดียวกัน ผลการวิจัยชี้ให้เห็นว่าผู้ป่วยในการจำแนกประเภทโปรตีโอมิกส์ชนิดย่อย I และ II และในกลุ่มทางคลินิก 1 มีลักษณะทางคลินิกที่คล้ายคลึงกัน โดยผู้ป่วยแสดงการมีส่วนร่วมของหลายอวัยวะ (เช่น ระบบทางเดินอาหาร หลอดเลือด และระบบประสาท) และความรุนแรงของโรคที่สูงขึ้น (รูปที่ 4E) ในทางกลับกัน ผู้ป่วยในกลุ่มโปรตีโอมิกส์ชนิดย่อย III และในกลุ่มทางคลินิก 2 แสดงลักษณะทางคลินิกที่คล้ายคลึงกัน โดยไม่มีข้อบ่งชี้ถึงการมีส่วนร่วมของระบบทางเดินอาหาร หลอดเลือด และระบบประสาท การค้นพบเหล่านี้สามารถรับการสนับสนุนเพิ่มเติมโดยการวิเคราะห์การจัดกลุ่มแบบลำดับชั้นที่ไม่เอนเอียง (รูปที่ 4F) ซึ่งผู้ป่วยในโปรตีโอมิกส์ชนิดย่อย III ถูกจัดกลุ่มกับคลัสเตอร์ทางคลินิก 2 และผู้ป่วยในโปรตีโอมิกส์ชนิดย่อย I และ II ถูกรวมกลุ่มกับคลัสเตอร์ทางคลินิก 1 ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นถึงประโยชน์ที่เป็นไปได้ ของการจำแนกโปรตีโอมิกส์เพื่อบ่งชี้ความหลากหลายและความรุนแรงของ BD กลยุทธ์การรักษาผู้ป่วยโรคเบ็ธส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับลักษณะทางคลินิกและอวัยวะที่เกี่ยวข้อง อย่างไรก็ตาม ยังไม่ทราบลักษณะโปรตีโอมิกส์ของ BD ที่แก้ไขด้วยอวัยวะ

รูปที่ 4 การจำแนกประเภทผู้ป่วย BD โดยใช้พลาสมาโปรตีโอมิกส์และตัวแปรทางคลินิก A แผนที่ความร้อนของเมทริกซ์ฉันทามติที่แสดงสัดส่วนที่เกิดขึ้นร่วมกันของผู้ป่วย BD ที่มีชนิดย่อยโปรตีโอมิกส์แต่ละชนิด B การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักของโปรตีโอมิกส์ชนิดย่อย I, II และ III ในผู้ป่วย BD แสดงความแตกต่างที่น่าทึ่งระหว่างกลุ่ม C, การวิเคราะห์การจัดกลุ่มตามลำดับชั้นของโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกัน (P < 0.05, ความแตกต่างการแสดงออกโดยเฉลี่ย P > 0.2) ในชนิดย่อยโปรตีโอมิกส์ 3 ชนิดในผู้ป่วย BD D กลุ่มหน้าที่ของกระบวนการทางชีววิทยาตามโปรตีนเฉพาะที่เกี่ยวข้องกับชนิดย่อย 3 ชนิด E การกระจายลักษณะทางประชากรและทางคลินิกของผู้ป่วย BD ตามชนิดย่อยของโปรตีโอมิกส์และกลุ่มการจำแนกทางคลินิก F การกระจายของลักษณะทางคลินิกแต่ละอย่างตามชนิดย่อยของโปรตีโอมิกส์และกลุ่มการจำแนกทางคลินิกในกลุ่ม BD ขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์การจัดกลุ่มแบบลำดับชั้นที่ไม่เอนเอียง ดูคำจำกัดความในรูปที่ 1

รูปที่ 5 การทำแผนที่แนวนอนของ BD ที่แก้ไขด้วยอวัยวะโดยใช้พลาสมาโปรตีโอมิกส์ A, ภูมิทัศน์โปรตีโอมิกส์ของ BD ที่แก้ไขด้วยอวัยวะ ซ้าย: แผนภาพแสดงการเปลี่ยนแปลงพับในการแสดงออกของโปรตีนในผู้ป่วย BD สัมพันธ์กับการควบคุมที่ดีต่อสุขภาพตามฟีโนไทป์ 3 ช่วงตึกจากซ้ายไปขวาแสดงถึงกลุ่มควบคุมที่ดีต่อสุขภาพ ผู้ป่วย BD ที่ไม่มีอาการสอดคล้องกัน (wo) และผู้ป่วย BD ที่มีอาการสอดคล้องกัน ความเข้มของสีของแต่ละบล็อกเป็นสัดส่วนกับการเปลี่ยนแปลงรอยพับในการแสดงออกของโปรตีนระหว่าง BD และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี สีแดงและสีน้ำเงินหมายถึงโปรตีนที่มีการควบคุมขึ้นและลงตามลำดับ ใช่แล้ว กระบวนการทางชีววิทยาที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนแต่ละชนิดที่แสดงออกแตกต่างกัน โดยมีความเข้มสีเทาของสี่เหลี่ยมจัตุรัสซึ่งระบุค่า P ตามบันทึก10- และตัวเลขที่ระบุจำนวนโปรตีนที่เกี่ยวข้องในแต่ละหมวดหมู่ B, ความสัมพันธ์ (ของเพียร์สันหรือสเปียร์แมน) ระหว่างการแสดงออกของโปรตีนที่จับกับไฮยาลูโรแนน 2 (HABP2), เทนาซิน C (TNC) และเซอร์พิน A3 ( 1-antichymotrypsin) (SERPINA3) และคะแนนความรุนแรงของผู้ป่วย BD การแรเงาหมายถึง 95% CI แปลง C, ไวโอลินแสดงความรุนแรงของการแสดงออกของ HABP2, TNC และ SERPINA3 เทียบกับความรุนแรงของโรคในกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดีและกลุ่ม BD ที่ไม่รุนแรง ปานกลาง และรุนแรง สัญลักษณ์แสดงถึงตัวอย่างแต่ละรายการ เส้นแนวนอนประสีแดงแสดงถึงค่ามัธยฐาน โดยมีเส้นประสีดำด้านบนและด้านล่างแสดงถึงช่วงระหว่างควอไทล์ *=ป < 0.{{20}}5; **=ป < 0.01; ***=ป < 0.001; ****=ป < 0.0001 ดูคำจำกัดความในรูปที่ 1

ดังนั้นเราจึงระบุโปรตีน 58 ชนิดที่แสดงออกโดยเฉพาะในกลุ่มผู้ป่วย BD ที่แตกต่างกันซึ่งแสดงฟีโนไทป์ของอวัยวะที่แตกต่างกัน (รูปที่ 5A) การค้นหาของเราในฐานข้อมูล DrugBank (ดูได้ที่ https://go.drugbank.com/) พบว่าโปรตีน 26 ชนิด ได้แก่ apolipoprotein A-IV, CFI, ceruloplasmin (CP), กลูตาเมตดีไฮโดรจีเนส 1 (GLUD1), โปรตีนจับไฮยาลูโรนิก 2 (HABP2), F5, SERPINC1, SERPINA3, โปรตีนตัวรับทรานสเฟอร์ริน 1 (TFRC), VWF, SERPINF2, CD44, ตัวรับบริเวณ Fc III-A, อะลานีน อะมิโนทรานสเฟอเรส 1, ลิวโคไตรอีน A-4 ไฮโดรเลส, โพรโปรตีนคอนเวอร์เตสชนิดซับติลิซิน/เค็กซิน 9, แอนจิโอเทนซิโนเจน, C8G, แฮปโตโกลบิน, เพปติดิล-โพรลิล ซิส-ทรานส์ ไอโซเมอเรส A, เซลีโนโปรตีน P, SERPIND1, SERPING1, C4BPA, ลิมโฟทอกซินอัลฟา, C4B และสายโซ่หนักอินเตอร์ทริปซิน 4 เป็นเป้าหมายของยารักษาโรคที่ใช้ในคลินิกหรือในการพัฒนา (ตารางเสริม 12 มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/ 10.1002/art.42348) ในบรรดาฟีโนไทป์ ฟีโนไทป์ของข้ออักเสบที่เกี่ยวข้องกับอาการของโรคข้ออักเสบเสริมด้วยกระบวนการทางชีววิทยาที่เกี่ยวข้องกับภูมิต้านทานตนเอง ซึ่งรวมถึงการควบคุมการตอบสนองของภูมิคุ้มกันของร่างกายที่อาศัยสื่อกลางโดยการหมุนเวียนอิมมูโนโกลบูลิน การควบคุมภูมิคุ้มกันของบีเซลล์เป็นสื่อกลาง และการควบคุมของการตอบสนองของภูมิคุ้มกันที่ใช้สื่อกลางของอิมมูโนโกลบุลิน ; ฟีโนไทป์ของระบบทางเดินอาหารสัมพันธ์กับการควบคุมการกระตุ้นเสริมและภูมิคุ้มกันที่ใช้เซลล์บี ฟีโนไทป์ที่เกี่ยวข้องกับหัวใจสัมพันธ์กับกิจกรรมของตัวรับไซโตไคน์ การควบคุมกระบวนการเมแทบอลิซึมของคอลลาเจน และการถอดแยกชิ้นส่วนเมทริกซ์นอกเซลล์ ฟีโนไทป์ของท่อน้ำอสุจิอักเสบสัมพันธ์กับการตอบสนองระยะเฉียบพลัน และฟีโนไทป์ของรอยโรคที่ผิวหนังสัมพันธ์กับกิจกรรมของสารยับยั้ง endopeptidase ชนิดซีรีน การแข็งตัวของเลือด การตอบสนองทางภูมิคุ้มกันของร่างกายโดยอาศัยอิมมูโนโกลบูลินหมุนเวียน และกระบวนการอื่น ๆ (รูปที่ 5A และตารางเสริม 13 มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary .wiley.com/doi/ 10.1002/art.42348)

ฟีโนไทป์ของหลอดเลือดมีจำนวนโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกันมากที่สุด รวมถึง GLUD1, tenascin C (TNC), XC motif chemokine ligand 2, ปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังชั้นนอกที่มีโปรตีนเมทริกซ์นอกเซลล์ fibulin 1, HABP2, F5, ATRN, SERPINC1, GPLD1, คล้ายอินซูลิน ปัจจัยการเจริญเติบโตที่มีผลผูกพันโปรตีน 6, เลคตินที่มีผลผูกพันกับแมนโนส 2, SEPRINA3, TFRC, VWF, SERPINF2 และไรโบนิวคลีเอส สมาชิกครอบครัว 4 (รูปที่ 5A) การวิเคราะห์ทางชีวสารสนเทศเผยให้เห็นเพิ่มเติมว่าโปรตีนที่แสดงออกแตกต่างกันเหล่านี้เกี่ยวข้องกับการสลายเกล็ดเลือด การแข็งตัวของเลือด ฟอสโฟรีเลชันของโปรตีนหลังการแปลผล กิจกรรมของสารยับยั้งเอนโดเพปทิเดสชนิดซีรีน และการตอบสนองต่อการอักเสบเฉียบพลัน ท่ามกลางหน้าที่อื่นๆ ผลลัพธ์ทั้งหมดเหล่านี้แสดงให้เห็นถึงภูมิทัศน์โปรตีโอมิกส์ของ BD ที่แก้ไขโดยอวัยวะ ซึ่งสามารถพัฒนายาเฉพาะบุคคลสำหรับโปรตีนเป้าหมายในฟีโนไทป์ของอวัยวะแต่ละส่วนได้

ประโยชน์ของซิสตานช์สำหรับระบบภูมิคุ้มกันของผู้ชาย

Identification of plasma proteins related to BD severity. Among the 220 unique differentially expressed proteins (P < 0.05), 28 were positively correlated with the severity of BD (Figures 5B and 5C and Supplementary Figure 12, available on the Arthritis & Rheumatology website at https://onlinelibrary. wiley.com/doi/10.1002/art.42348). Seven proteins displayed a linear correlation with the severity score, namely, TNC, HABP2, SERPINA3, F5, ATRN, C4B, and CFH (Figure 5B and Supplementary Figure 12A). The expression of these 7 proteins was up-regulated in the severe BD group compared with the mild and moderate BD groups and the healthy control group, as indicated in the scatter plot in Figure 5C (see also Supplementary Figure 12A). Next, we selected and validated 7 protein candidates (TNC, HABP2, SERPINA3, ATRN, C4BPA, GPLD1, and C5) in an independent cohort composed of 108 patients with BD and 29 healthy controls by using quantitative ELISA (Supplementary Table 3, available at https://onlinelibrary.wiley. com/doi/10.1002/art.42348). The reproducibility of the ELISA for the validation of plasma proteins was >0.9 (รูปที่ 13 เพิ่มเติม มีอยู่ที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/ art.42348) ระดับพลาสมาที่เพิ่มขึ้นของ HABP2, TNC และ SERPINA3 ได้รับการยืนยันในกลุ่ม BD เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี (รูปที่ 6A) เช่นเดียวกับความสัมพันธ์กับความรุนแรงของโรค (รูปที่ 6B และ 6C) นอกจากนี้เรายังเปรียบเทียบการแสดงออกของ HABP2 ตามที่ประเมินโดยใช้ ELISA ระหว่างผู้ป่วย BD (n=39) และกลุ่มควบคุมของผู้ป่วยที่มีภาวะหลอดเลือดแดง Takayasu (n=8) และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี (n=10 ) (รูปที่ 14 เพิ่มเติมและตารางเสริม 5 มีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https:// onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348) ผลการวิจัยพบว่าความเข้มข้นของ HABP2 ในกลุ่ม BD สูงกว่าความเข้มข้นในกลุ่มควบคุมโรคหลอดเลือดแดง Takayasu และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดีอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 14 เพิ่มเติม) ซึ่งบ่งชี้ถึงความจำเพาะของ HABP2 ในฐานะตัวบ่งชี้ทางชีวภาพที่มีศักยภาพสำหรับการวินิจฉัย BD

จากคะแนนความรุนแรงของ Krause อาการเกี่ยวกับหลอดเลือดมีน้ำหนักสูงสุด ดังนั้นเราจึงแบ่งผู้ป่วยออกเป็นกลุ่ม BD ของหลอดเลือดและ BD ที่ไม่ใช่หลอดเลือดตามการปรากฏตัวของลิ่มเลือดอุดตันในหลอดเลือดดำ, หลอดเลือดแดงตีบ, การบดเคี้ยว, การขยายตัวหรือโป่งพอง (ตารางเสริม 4 ดูได้ที่ https://onlinelibrary. wiley.com/doi/1 0.10{{20}}2/art.42348) เราเปรียบเทียบระดับการแสดงออกของ HABP2, TNC และ SERPINA3 ในกลุ่ม BD ของหลอดเลือด, BD ที่ไม่ใช่หลอดเลือด และกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าโปรตีน 3 ชนิดได้รับการควบคุมอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่ม BD เกี่ยวกับหลอดเลือด (รูปที่ 6D) การวิเคราะห์เส้นโค้งลักษณะการทำงานของตัวรับสำหรับ HABP2, TNC และ SERPINA3 ก็ดำเนินการเช่นกัน โดยกำหนดจุดตัด ความไว และความจำเพาะ (ตารางที่ 14 เพิ่มเติม ดูได้ที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/1{{24 }}.1002/art. 42348.) ผลการวิจัยระบุว่า HABP2 (พื้นที่ใต้เส้นโค้ง [AUC] 0.68 ความไว 0.69 และความจำเพาะ 0.69) และ TNC (AUC 0.71 ความไว 0.58 และความจำเพาะ 0.77) อาจแยกแยะความแตกต่างของหลอดเลือดจาก BD ที่ไม่ใช่หลอดเลือด มีการเปรียบเทียบระดับของตัวบ่งชี้ทางชีวภาพทั้ง 3 รายการระหว่างผู้ป่วยที่มีภาวะหลอดเลือดไม่ทำงานและไม่ทำงาน ผลการวิจัยพบว่าระดับการแสดงออกของ HABP2, TNC และ SERPINA3 นั้นสูงขึ้นอย่างต่อเนื่องในผู้ป่วย BD โดยไม่คำนึงถึงกิจกรรมของหลอดเลือด BD (รูปที่ 15 เพิ่มเติมมีอยู่ในเว็บไซต์โรคข้ออักเสบและโรคข้อที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi /10.1002/art.42348)

รูปที่ 6 การตรวจสอบความถูกต้องของตัวบ่งชี้ทางชีวภาพของหลอดเลือด BD ตามการประเมินโดย ELISA ในกลุ่มประชากรอิสระ A, C และ D, ความเข้มข้นในพลาสมา (Conc) ของโปรตีนที่จับกับไฮยาลูโรแนน 2 (HABP2), เทนาซิน C (TNC) และเซอร์พิน A3 ( 1-แอนติไคโมทริปซิน) (SERPINA3) ในกลุ่มควบคุมที่ดีต่อสุขภาพเทียบกับ BD ทั้งหมด ผู้ป่วย (A) กับผู้ป่วย BD ในกลุ่มโรคที่ไม่รุนแรง ปานกลาง และรุนแรง (C) และเทียบกับผู้ป่วย BD ที่ไม่ใช่หลอดเลือด (N-VBD) และผู้ป่วย BD เกี่ยวกับหลอดเลือด (VBD) (D) B, สหสัมพันธ์ (ของ Pearson หรือ Spearman) ระหว่างความเข้มข้น HABP2, TNC และ SERPINA3 และคะแนนความรุนแรงของ BD การแรเงาหมายถึง 95% CI *=ป < 0.05; **=ป < 0.01; ***=ป < 0.001; ****=ป < 0.0001 ดูคำจำกัดความในรูปที่ 1

การวิเคราะห์ความสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนในพลาสมา คะแนนแบบฟอร์มกิจกรรมปัจจุบันของโรคเบห์เชต และข้อมูลทางคลินิก HABP2, TNC และ SERPINA3 แสดงระดับที่สูงขึ้นในกลุ่ม BD ที่ทำงานอยู่ เมื่อเปรียบเทียบกับ BD ที่ไม่ได้ใช้งานและกลุ่มควบคุมที่มีสุขภาพดี (P < 0.001) (รูปที่ 16A เพิ่มเติม มีอยู่ในโรคข้ออักเสบและโรคข้อ เว็บไซต์ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348) ระดับของ SERPINA3 ได้รับการยกระดับในกลุ่มที่มีคะแนนแบบฟอร์มกิจกรรมปัจจุบันของโรคของBehçet (BDCAF) สูง (รูปที่ 16B เพิ่มเติม) นอกจากนี้ ในผู้ป่วย BD ระดับของคะแนน SERPINA3 และ BDCAF มีความสัมพันธ์เชิงบวก (r=0.39, p=0.0036) ในขณะที่ระดับ HABP2 และ TNC ไม่แสดงความสัมพันธ์เชิงบวกกับ คะแนน BDCAF เราวิเคราะห์ความสัมพันธ์เพิ่มเติมระหว่างระดับพลาสมาของผู้ป่วยและข้อมูลทางคลินิก (รูปที่ 17A เพิ่มเติมและตารางเสริม 15 มีอยู่ที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/ 10.1002/art.42348) สัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของ r > 0.3 ถูกเน้นในแผนภาพคอร์ด แผนกระจายตัวแทนจะแสดงในตัวเลขเสริม S17B – G ผลการศึกษาพบว่าระดับ HABP2, TNC และ SERPINA3 มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับระดับโปรตีนที่ทำปฏิกิริยากับ C, จำนวนนิวโทรฟิล, ความกว้างของการกระจายตัวของเซลล์เม็ดเลือดแดง, อัตราส่วนนิวโทรฟิลต่อลิมโฟไซต์, จำนวนเกล็ดเลือด และความกว้างของการกระจายตัวของเกล็ดเลือด ผลลัพธ์ทั้งหมดเหล่านี้แสดงให้เห็นว่า HABP2, TNC และ SERPINA3 สัมพันธ์เชิงหน้าที่กับการอักเสบ การทำงานของเยื่อบุผนังหลอดเลือด และการกระตุ้นเกล็ดเลือด และอาจทำหน้าที่เป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพเพื่อระบุความรุนแรงและกิจกรรมของ BD ซึ่งควรได้รับการตรวจสอบในกลุ่มทางคลินิกที่แตกต่างกันในอนาคต .

การอภิปราย

BD คือภาวะหลอดเลือดอักเสบที่เป็นระบบซึ่งมีการนำเสนอทางคลินิกที่แตกต่างกัน ซึ่งสะท้อนถึงกลไกการทำให้เกิดโรคต่างๆ ที่รับผิดชอบในการกระตุ้นการอักเสบในหลอดเลือดแดงและหลอดเลือดดำทุกขนาดในเนื้อเยื่อและอวัยวะของมนุษย์ ในการศึกษานี้ เราระบุชุดโปรตีนที่ผิดปกติจำนวนมาก (n=220) ในกลุ่มผู้ป่วย BD ที่มีส่วนร่วมในกระบวนการทางชีวภาพที่แตกต่างกัน และเราใช้การวิเคราะห์ทางชีวสารสนเทศเพื่อกำหนดปฏิกิริยาระหว่างระบบภูมิคุ้มกันและการอักเสบ การมีอยู่ของการเกิดลิ่มเลือด และ บทบาททางพยาธิวิทยาที่เป็นสื่อกลางโดยระบบเสริมใน BD การวิเคราะห์ KEGG ยังเผยให้เห็นถึงความสัมพันธ์ของ BD กับการเสริมและการแข็งตัวของเลือดและการติดเชื้อแบคทีเรีย ระบบเสริมเป็นสื่อกลางของภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดและการอักเสบเพื่อป้องกันเชื้อโรคโดยการลดแกรนูเลชั่น เคมีบำบัด ฟาโกไซโตซิส วิถีการส่งสัญญาณของตัวรับบีเซลล์ และการสลายเซลล์โดยคอมเพล็กซ์การโจมตีด้วยเยื่อหุ้มเซลล์ ในขณะที่การแข็งตัวเรียงซ้อนเกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อการต้านการอักเสบ การขยายหลอดเลือด เพิ่มการซึมผ่านของ endothelial และการกระตุ้นเกล็ดเลือด การใช้ข้อมูลการเชื่อมโยงทั่วทั้งจีโนม Bakir-Gungor และคณะ แสดงให้เห็นว่าการเสริมและการแข็งตัวของน้ำตกเป็น 1 ใน 6 เส้นทางที่ใช้ร่วมกันระหว่างผู้ป่วย BD ตุรกีและญี่ปุ่น ซึ่งสนับสนุนผลลัพธ์ของเราจากภูมิหลังทางพันธุกรรมและแสดงให้เห็นถึงกลไกการอักเสบและ vasculopathy / thrombophilia ในการเกิดโรค BD (28) ภูมิคุ้มกันที่เป็นสื่อกลางของเม็ดเลือดขาว การควบคุมเชิงบวกของการกระตุ้นเซลล์ และการย้ายถิ่นของเม็ดเลือดขาวแสดงให้เห็นถึงการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันและการอักเสบใน BD นิวโทรฟิลถูกกระตุ้นเพื่อสร้างอนุมูลอิสระและกับดักนิวโทรฟิล ทำให้เกิดความเสียหายจากการอักเสบในเซลล์บุผนังหลอดเลือด ลิ่มเลือดอุดตันในหลอดเลือดดำ และโป่งพอง สายพันธุ์ออกซิเจนที่เกิดปฏิกิริยาที่ผลิตโดยนิวโทรฟิลที่แอคทีฟยังสามารถทำให้เกิดการออกซิเดชันและการดัดแปลงของไขมันและไลโปโปรตีน โดยเฉพาะอย่างยิ่งไลโปโปรตีนชนิดความหนาแน่นต่ำ ดังที่แสดงด้วยการเกิดออกซิเดชันของไขมันที่เพิ่มขึ้น (9,11) ซึ่งส่งผลให้ความเสี่ยงต่อโรคหลอดเลือดหัวใจเพิ่มขึ้น (9,10) และใน เทิร์นเพิ่มการตอบสนองต่อการอักเสบ (10) เหตุการณ์นี้เป็นไปตามกระบวนการทางชีวภาพของการควบคุมระดับอนุภาคไลโปโปรตีนในพลาสมาและการเปลี่ยนแปลงเชิงซ้อนของโปรตีนและไขมันที่พบในการศึกษาของเรา หลักฐานจากการศึกษาของเราสอดคล้องกับการค้นพบของ Emmi และคณะ ที่เชื่อมโยงการผลิตสายพันธุ์ออกซิเจนของเม็ดเลือดขาวที่เกิดปฏิกิริยาและการเกิดออกซิเดชันของไขมันในพลาสมา (8)

การวิเคราะห์การจัดกลุ่มฉันทามติโดยใช้โปรตีโอมิกส์เผยให้เห็นความแตกต่างของผู้ป่วยโรค BD ผู้ป่วยที่มีชนิดย่อย I มีอาการรุนแรงมากขึ้นซึ่งอาจเกี่ยวข้องกับกระบวนการทางชีววิทยาที่ใช้งานของการแข็งตัวของเลือดและการกระตุ้นเสริม ในทางตรงกันข้าม ผู้ป่วยที่มีชนิดย่อย III มีอาการค่อนข้างไม่รุนแรง และการตอบสนองต่อการอักเสบอาจเป็นกระบวนการทางพยาธิวิทยาหลักในกลุ่มย่อยนี้ นอกจากนี้เรายังระบุลักษณะโปรตีโอมิกส์ของผู้ป่วยโรค BD ที่มีส่วนร่วมของอวัยวะต่างๆ การวิเคราะห์ทางชีวสารสนเทศของเราแสดงให้เห็นได้อย่างมีประสิทธิภาพถึงการทำงานของคุณสมบัติโปรตีนของฟีโนไทป์ของอวัยวะแต่ละส่วน ดังตัวอย่างโดยความสัมพันธ์ระหว่างภูมิคุ้มกันอัตโนมัติและฟีโนไทป์ของข้ออักเสบที่มีอาการของอาการปวดข้อ (29–31) เหตุการณ์สำคัญเกี่ยวกับหลอดเลือด รอยโรคที่ตา และการมีส่วนร่วมของระบบประสาทเป็นสาเหตุสำคัญของการเจ็บป่วยและการเสียชีวิต (16) การรักษาโรค BD ขึ้นอยู่กับประเภทของอวัยวะที่เกี่ยวข้องและความรุนแรงของโรคภายในระบบอวัยวะนั้น อย่างไรก็ตาม เท่าที่เราทราบ ในปัจจุบันยังไม่มีการบำบัดแบบกำหนดเป้าหมายสำหรับ BD ผลลัพธ์ของเราชี้ให้เห็นว่าขั้นตอนการวินิจฉัยและการรักษาสำหรับ BD ที่แก้ไขโดยอวัยวะแต่ละส่วนอาจแตกต่างกันเนื่องจากความแตกต่างของกลไกการทำให้เกิดโรค โปรตีนสำคัญบางชนิดอาจเป็นเป้าหมายที่สามารถวางยาได้สำหรับฟีโนไทป์ รวมถึงรอยโรคในทางเดินอาหาร ระบบประสาท ตา ข้อต่อ และหลอดเลือด

สัดส่วนของผู้ป่วยโรคหลอดเลือดตีบระหว่างเชื้อชาติและชาติพันธุ์ต่างๆ อยู่ระหว่าง 7.7% ถึง 43% (32); โรคนี้มักเกี่ยวข้องกับภาวะลิ่มเลือดอุดตันในหลอดเลือดแดงและ/หรือโป่งพองที่มีความเสี่ยงสูง ความรุนแรงของโรคสูง และอัตราการกลับเป็นซ้ำสะสม 5- ปีที่ 38.4% (33) ปัจจัยด้านภูมิคุ้มกันและการอักเสบได้รับการพิจารณาว่ามีส่วนทำให้เกิดการมีส่วนร่วมของหลอดเลือดและอาการใน BD เป็นที่รู้กันว่าความเสียหายต่อเซลล์บุผนังหลอดเลือดส่งผลให้เกิดความเสี่ยงต่อการเกิดลิ่มเลือดอุดตัน (34) นอกจากนี้ ผนังหลอดเลือดที่บกพร่องภายหลังการเกิดพังผืดสามารถนำไปสู่ผนังหลอดเลือดแดงที่อ่อนแอและการขยายตัวของผนังหลอดเลือดพร้อมกับโป่งพองตามมา (35,36) ความผิดปกติ การตีบแคบ และการบดเคี้ยวอาจเกิดขึ้นได้ในระหว่างการอักเสบเฉียบพลันและหลังการเกิดพังผืด (37) ในขณะที่การอักเสบเรื้อรังยังช่วยส่งเสริมคุณสมบัติการขยายหลอดเลือดที่ผิดปกติของเอ็นโดทีเลียม (38) HABP2 หรือที่เรียกว่า factor VII – activating protease ถูกค้นพบโดยความสามารถในการจับกับกรดไฮยาลูโรนิก ซึ่งเป็น glycosaminoglycan ที่มีบทบาทในการควบคุมอุปสรรคของเซลล์บุผนังหลอดเลือด (39) และเกี่ยวข้องกับการแข็งตัวของเลือดและการละลายลิ่มเลือด (40) การศึกษาก่อนหน้านี้รายงานว่า HABP2 อาจกระตุ้นการอักเสบ การตายของเซลล์ และการเติบโตของเซลล์ในกล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดและเซลล์บุผนังหลอดเลือด (41–43) และสามารถทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมความสมบูรณ์ของหลอดเลือดและการซึมผ่านผ่านตัวรับที่กระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส (PARs; คล้ายกับ thrombin )/RhoA/ วิถีการส่งสัญญาณของโปรตีนไคเนสที่เกี่ยวข้องกับโร (ROCK) (44) การปิดเสียง (โดยใช้ RNA ที่รบกวนเล็กน้อย) ของ HABP2 หรือ PAR/ RhoA/ROCK ยับยั้ง HABP{24}}การหยุดชะงักของสิ่งกีดขวางเซลล์บุผนังหลอดเลือดที่เป็นสื่อกลาง (44) TNC เป็นไกลโคโปรตีนเมทริกซ์นอกเซลล์ที่มีการอักเสบซึ่งก่อให้เกิดการสร้างและการแตกของคราบจุลินทรีย์โดยการกระตุ้นเกล็ดเลือดหรือควบคุมการทำงานของเนื้อเยื่อ plasminogen activator (45) ระดับ TNC ในซีรัมมีความสัมพันธ์กับความรุนแรงของหลอดเลือด (46) และการแสดงออกของ TNC ชั่วคราวนั้นแสดงให้เห็นว่าได้รับการควบคุมในระหว่างความเสียหายของหลอดเลือด แต่จะหายไปหลังจากการซ่อมแซมเสร็จสิ้น (45)

SERPINA3 หรือที่รู้จักกันในชื่อ 1-antichymotrypsin ยับยั้งซีรีนโปรตีเอสหลายชนิด โดยเฉพาะ cathepsin G (47) นอกจากเซลล์ที่มีการอักเสบแล้ว เซลล์กล้ามเนื้อเรียบที่หดตัวน้อยกว่ายังสามารถแยกความแตกต่างจากฟีโนไทป์ที่มีลักษณะคล้ายมาโครฟาจ ซึ่งอาจเป็นแหล่งที่มาของไซโตไคน์และ SERPINA3 ที่บริเวณที่เกิดการบาดเจ็บที่ผนังหลอดเลือด (48) การศึกษาก่อนหน้านี้ชี้ให้เห็นว่าบทบาทเชิงรุกของ SERPINA3 ในการควบคุมการแพร่กระจายของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด (49) หรือการยับยั้งการสะสมของนิวโทรฟิล (47) ในทางลบสามารถทำนายการเกิดเหตุการณ์หัวใจและหลอดเลือดที่ไม่พึงประสงค์ได้ อย่างไรก็ตาม ไม่ว่า SERPINA3 จะมีบทบาทในระหว่างการเกิดโรคของ vasculitis ในผู้ป่วยโรค BD หรือไม่ หรือเป็นผลจากกระบวนการที่ทำให้เกิดโรคยังไม่ชัดเจน โดยเฉพาะอย่างยิ่ง กรดไฮยาลูโรนิกของยา HABP2 นั้นเป็นไกลโคซามิโนไกลแคนแบบไม่มีซัลเฟตที่มีประจุลบ ซึ่งแสดงให้เห็นคุณสมบัติต้านการอักเสบ การซ่อมแซมบาดแผล การสร้างเนื้อเยื่อใหม่ และคุณสมบัติที่สำคัญอื่นๆ กรดไฮยาลูโรนิกได้รับการตรวจสอบในการรักษาโรคมะเร็ง จักษุวิทยา โรคข้อ โรคปอดวิทยา วิทยาจมูก และระบบทางเดินปัสสาวะ และเพื่อการใช้งานอื่นๆ (50) มีโมเลกุลขนาดเล็กหลายโมเลกุล (ซิงค์อะซิเตต, ซิงค์ซัลเฟต, สังกะสี, ซิงค์คลอไรด์) มุ่งเป้าไปที่ SERPINA3 (ตารางเสริม 12 มีอยู่ที่ https://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1002/art.42348) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าตัวชี้วัดทางชีวภาพที่ระบุในงานของเราอาจทำหน้าที่เป็นเป้าหมายในการพัฒนาวิธีการรักษาแบบใหม่สำหรับผู้ป่วยโรคเบ็ธ การศึกษาของเรามีข้อ จำกัด หลายประการ. ประการแรก จำนวนตัวอย่างพลาสมามีจำกัด ตัวชี้วัดทางชีวภาพที่ระบุในการศึกษาของเราควรได้รับการตรวจสอบในกลุ่มที่แตกต่างกันและใหญ่กว่า โดยมีโรคการอักเสบอัตโนมัติและภูมิต้านตนเองที่แตกต่างกันเป็นตัวควบคุม ประการที่สอง ผลลัพธ์จะต้องได้รับการตรวจสอบในกลุ่มผู้ป่วยโรคเบ็ธที่ไร้เดียงสาต่อการรักษา ประการที่สาม ควรตรวจสอบการทำงานทางชีววิทยาของโปรตีนไบโอมาร์คเกอร์ในการเกิดโรค BD ในการศึกษาในอนาคตโดยใช้แบบจำลองเซลล์และสัตว์

เมื่อนำมารวมกัน นี่คือการศึกษาครั้งแรกในการวิเคราะห์ลักษณะโปรตีโอมิกส์ของ BD ที่แก้ไขโดยอวัยวะอย่างครอบคลุม ผลลัพธ์นี้ให้ข้อมูลเชิงลึกพื้นฐานเกี่ยวกับความแตกต่างและการเกิดโรคของ BD และเน้นโปรตีนในพลาสมา (HABP2, TNC และ SERPINA3) ในฐานะตัวชี้วัดทางชีวภาพที่มีศักยภาพสำหรับการประเมินทางคลินิกในอนาคตและการรักษาโรคหลอดเลือด BD

ข้อมูลอ้างอิง

1. บาส ธ Y, Seçkin HY, Kalkan G, และคณะ การสอบสวนโรคของBehçetและความถี่ปากอักเสบกำเริบ: ความชุกสูงสุดในตุรกี บอลข่านเมดเจ 2016;33:390–5.

2. Lee HJ, Kim JH, Kim SW และคณะ การวิเคราะห์เชิงโปรตีโอมิกของซีรั่มอะไมลอยด์เป็นตัวบ่งชี้ที่เป็นไปได้ในโรคเบห์เชตในลำไส้ ขุดดิสวิทย์ 2017;62:1953–62.

3. Lopalco G, Lucherini OM, Lopalco A และคณะ ลายเซ็นของไซโตไคน์ในโรคเบเชต์ของเยื่อเมือกและตา อิมมูนอลหน้า 2017; 8:200.

4. Xu M, Deng J, Xu K และคณะ โปรตีโอมิกส์ในซีรั่มเชิงลึกเผยให้เห็นตัวชี้วัดทางชีวภาพของความรุนแรงของโรคสะเก็ดเงินและการตอบสนองต่อการแพทย์แผนจีน ธีราโนสติก 2019;9:2475–88.

5. เกเยอร์ PE, Voytik E, Treit PV และคณะ การทำโปรไฟล์พลาสมาโปรตีโอมเพื่อตรวจจับและหลีกเลี่ยงอคติที่เกี่ยวข้องกับตัวอย่างในการศึกษาตัวชี้วัดทางชีวภาพ EMBO โมลเมด 2019;11:e10427.

6. เหมา แอล ดง เอช หยาง พี และคณะ MALDI-TOF/TOF-MS เผยระดับฮอร์โมนแฮปโตโกลบินและอะไมลอยด์ A ในซีรัมที่เพิ่มขึ้นในโรคเบห์เซ็ต เจโปรตีโอมเรส 2008;7:4500–7.

7. Piñero J, Ramírez-Anguita JM, Saüch-Pitarch J และคณะ แพลตฟอร์มความรู้ DisGeNET สำหรับจีโนมของโรค: อัปเดตปี 2019 กรดนิวคลีอิก Res 2020;48:D845–55.

8. เอ็มมี จี, บาญนี จี, ลาสเทรโอลี อี และคณะ โปรไฟล์ miRNA หมุนเวียนที่เป็นเอกลักษณ์เน้นการเกิดลิ่มเลือดอุดตันในกลุ่มอาการBehçet แอน เรียม ดิส 2022;81:386–97.

9. โอเรม เอ, ยานดี เย, วานิซอร์ บี และคณะ การประเมินออโตแอนติบอดีต่อไลโปโปรตีนชนิดความหนาแน่นต่ำที่ผ่านการดัดแปลงออกซิเดชั่น (LDL) ความไวของ LDL ต่อการเกิดออกซิเดชัน ระดับไขมันในเลือดและไฮโดรเปอร์ออกไซด์ของไขมัน สถานะสารต้านอนุมูลอิสระทั้งหมด การทำงานของเอนไซม์ต้านอนุมูลอิสระ และความผิดปกติของเยื่อบุผนังหลอดเลือดในผู้ป่วยที่เป็นโรคเบเช็ต คลินไบโอเคม 2545; 35:217–24.

10. Kayatas K, Karatoprak C, Cebeci F และคณะ การมีระดับไขมันต่ำในผู้ป่วยโรค Behcet เพื่อป้องกันหลอดเลือด Eur Rev Med เภสัชวิทยา 2013;17:2330–4.

11. Buldanlioglu S, Turkmen S, Ayabakan HB และคณะ ไนตริกออกไซด์ เปอร์ออกไซด์ของไขมัน และระบบป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระในผู้ป่วยที่เป็นโรคเบเชต์ที่ออกฤทธิ์หรือไม่ได้ใช้งาน Br เจ เดอร์มาทอล 2005;153:526–30.

12. Cho SB, Zheng Z, Ahn KJ และคณะ ปฏิกิริยาของ IgA ในซีรั่มต่อ GroEL ของ Streptococcus sanguinis และ ribonucleoprotein A2/B1 นิวเคลียร์ที่ต่างกันของมนุษย์ในผู้ป่วยที่เป็นโรคBehçet Br เจ เดอร์มาทอล 2013;168:977–83.

13. Zheng Z, Sohn S, Ahn KJ และคณะ ปฏิกิริยาของซีรั่มกับโปรตีน UL48 ของไวรัสเริมชนิดที่ 1 ในผู้ป่วยโรคเบห์เซต และแบบจำลองเมาส์ที่คล้ายโรคของเบห์เซต แอกตา เดิร์ม เวเนออล 2015;95:952–8.

14. Lule S, Colpak AI, Balci-Peynircioglu B และคณะ ซีรั่มของโรคเบห์เชตมีปฏิกิริยาตอบสนองต่อตัวกลางของเส้นใยประสาทซึ่งมีอีพิโทปร่วมกับ HSP ของแบคทีเรีย-65 ซึ่งเป็นตัวกระตุ้นสมมุติ เจ ภูมิต้านทานผิดปกติ 2017;84: 87–96.

15. Tong B, Liu X, Xiao J และคณะ ภูมิคุ้มกันของโรค Behcet ฟรอนต์ อิมมูนอล 2019;10:665.

16. เกรโก เอ, เด เวอร์จิลิโอ เอ, รัลลี เอ็ม และคณะ โรคเบเชต์: ข้อมูลเชิงลึกใหม่ๆ เกี่ยวกับพยาธิสรีรวิทยา ลักษณะทางคลินิก และทางเลือกในการรักษา ภูมิต้านทานผิดปกติ 2018;17:567–75.

17. มาร์ทา เอ็ม, ซานโตส อี, คูตินโญ่, และคณะ บทบาทของการติดเชื้อในโรคเบห์เชตและโรคนิวโรเบห์เชต์ ภูมิต้านทานผิดปกติ 2015;14: 609–15.

18. Hatemi G, Bahar H, Uysal S, และคณะ รอยโรคที่ผิวหนังแบบตุ่มหนองในกลุ่มอาการเบห์เซ็ตไม่ผ่านการฆ่าเชื้อ แอน เรียม ดิส 2004;63:1450–2.

19. Galeone M, Colucci R, D'Erme AM และคณะ สาเหตุการติดเชื้อที่เป็นไปได้ของโรคเบเชต พยาธิวิทยา Res Int 2012;2012:595380.

20. Karaca M, Hatemi G, Sut N และคณะ รอยโรค papulopustular / กลุ่มอาการข้ออักเสบของกลุ่มอาการBehçetก็เป็นกลุ่มในครอบครัวเช่นกัน โรคข้อ (อ็อกซ์ฟอร์ด) 2012;51:1053–60.

21. Tascilar K, Melikoglu M, Ugurlu S, และคณะ การมีส่วนร่วมของหลอดเลือดในกลุ่มอาการเบเชต์: การวิเคราะห์ความสัมพันธ์ย้อนหลังและระยะเวลา โรคข้อ (อ็อกซ์ฟอร์ด) 2014;53:2018–22.

22. Zou J, Luo JF, Shen Y และคณะ การวิเคราะห์แบบกลุ่มของฟีโนไทป์ของผู้ป่วยที่มีอาการเบห์เชต: การศึกษาตามรุ่นขนาดใหญ่จากศูนย์ส่งต่อผู้ป่วยในประเทศจีน โรคข้ออักเสบ Res เธอ 2021;23:45.

23. โซเอจิมะ วาย, คิริโนะ วาย, ทาเคโนะ เอ็ม และคณะ การเปลี่ยนแปลงสัดส่วนของกลุ่มทางคลินิกมีส่วนทำให้เกิดวิวัฒนาการทางฟีโนไทป์ของโรคBehçetในญี่ปุ่น โรคข้ออักเสบ Res เธอ 2021;23:49.

24. ไลบา เอ็ม, เซลิกโซห์น อู, ซิดิ วาย และคณะ ปัจจัย Thrombophilic ไม่ได้เป็นสาเหตุหลักของการเกิดลิ่มเลือดอุดตันในโรคเบเช็ท แอน เรียม ดิส 2004;63:1445–9.

25. เบกัตติ เอ็ม, เอ็มมี จี, ซิลเวสตรี อี และคณะ การกระตุ้นนิวโทรฟิลส่งเสริมการเกิดออกซิเดชันของไฟบรินและการสร้างลิ่มเลือดในโรคเบห์เชต หมุนเวียน 2016;133:302–11.

26. Zheng W, Wu X, Goudarzi M และคณะ การเปลี่ยนแปลงทางเมแทบอลิซึมที่เกี่ยวข้องกับโรคเบห์เชต โรคข้ออักเสบ Res เธอ 2018;20:214.

27. Xu J, Su G, Huang X และคณะ การวิเคราะห์เมตาโบโลมิกของอารมณ์ขันในน้ำระบุถึงการเผาผลาญกรดอะมิโนและกรดไขมันที่ผิดปกติในโรค VogtKoyanagi-Harada และ Behcet อิมมูนอลด้านหน้า 2021;12: 587393

28. Bakir-Gungor B, Remmers EF, Meguro A และคณะ การระบุวิถีทางที่ทำให้เกิดโรคที่เป็นไปได้ในโรคBehçetโดยใช้ข้อมูลการศึกษาความสัมพันธ์ทั่วทั้งจีโนมจากประชากรสองกลุ่มที่แตกต่างกัน ยูโร เจ ฮัม เจเน็ต 2015;23:678–87.

29. Tong D, Lönnblom E, Yau AC และคณะ เอพิโทปที่ใช้ร่วมกันของคอลลาเจนประเภท XI และประเภท II ได้รับการยอมรับโดยแอนติบอดีที่ทำให้เกิดโรคในหนูและคนที่เป็นโรคข้ออักเสบ อิมมูนอลส่วนหน้า 2018;9:451.

30. Durlik-Popinska K, _ Zarnowiec P, Lechowicz Ł, และคณะ แอนติบอดีที่แยกได้จากผู้ป่วยโรคข้ออักเสบรูมาตอยด์ต่อไลซีนที่มีไลซีนที่มีไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ Proteus mirabilis O3 (S1959) อาจทำปฏิกิริยากับคอลลาเจนประเภท I Int J Mol Sci 2020;21:9635

31. Jung JH, Han KD, Lee YB และคณะ โรคเบเช็ทมีความเกี่ยวข้องกับโรคปลอกประสาทเสื่อมแข็งและโรคข้ออักเสบรูมาตอยด์: การศึกษาโดยประชากรชาวเกาหลี ตจวิทยา 2021:1–6.

32. Düzgün N, Atesธ A, Aydintug OT, และคณะ ลักษณะการมีส่วนร่วมของหลอดเลือดในโรคเบเชต สแกนด์ เจ รูมาทอล 2549;35:65–8.

33. Tascilar K, Melikoglu M, Ugurlu S, และคณะ การมีส่วนร่วมของหลอดเลือดในกลุ่มอาการเบเชต์: การวิเคราะห์ความสัมพันธ์ย้อนหลังและระยะเวลา โรคข้อ (อ็อกซ์ฟอร์ด) 2014;53:2018–22.

34. เลอ จองกูร์ เอ มาร์ทอส อาร์ โลยา เอส และคณะ บทบาทที่สำคัญของกับดักนิวโทรฟิลนอกเซลล์ (NETs) ในผู้ป่วยที่เป็นโรค Behcet แอน เรียม ดิส 2019;78:1274–82.

35. Al-Basheer M, Hadadin F. การเกิดโป่งพองของโรคหลอดเลือด - Behcet วงหัวใจปอด 2550;16:407–9.

36. แชมเบอร์ส เจซี, แฮสการ์ด ดีโอ, คูเนอร์ เจเอส. การทำงานของหลอดเลือดบุผนังหลอดเลือดและกลไกความเครียดออกซิเดชันในผู้ป่วยกลุ่มอาการเบเชต เจ แอม คอลล์ คาร์ดิโอ 2001;37:517–20.

37. Demirtürk OS, Tünel HS, Alemdaroglu U. อาการหลอดเลือดของโรคBehçet ใน: Gonul M, Kartal S, บรรณาธิการ. โรคเบห์เซ็ต ลอนดอน: IntechOpen; 2017.

38 Aksu K, Donmez A, Keser G. การเกิดลิ่มเลือดที่เกิดจากการอักเสบ: กลไก ความสัมพันธ์ของโรค และการจัดการ เคอร์ Pharm Des 2012;18:1478–93.

39. ชอย-มิอุระ NH, โทเบ ที, สุมิยะ เจ และคณะ การทำให้บริสุทธิ์และการกำหนดลักษณะเฉพาะของโปรตีนที่จับกับไฮยาลูโรแนน (PHBP) ใหม่จากพลาสมาของมนุษย์: มี EGF สามตัว, คริงเกิล และโดเมนซีรีนโปรตีเอส คล้ายกับตัวกระตุ้นปัจจัยการเจริญเติบโตของเซลล์ตับ เจ ไบโอเคม 1996;119: 1157–65

40. Kanse SM, Parahuleva M, Muhl L และคณะ โปรตีเอสกระตุ้นการทำงานของปัจจัยที่ 7 (FSAP): การทำงานของหลอดเลือดและบทบาทในหลอดเลือด ทรอมบ์เฮโมสต์ 2008;99:286–9

41. Byskov K, Boettger T, Ruehle PF และคณะ ปัจจัยที่ 7 กระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส (FSAP) ควบคุมการแสดงออกของยีนอักเสบในกล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือดและเซลล์บุผนังหลอดเลือด หลอดเลือด 2017;265: 133–9.

42. Parahuleva MS, Maj R, Hölschermann H, และคณะ การควบคุมการทำงานของโมโนไซต์/มาโครฟาจโดยแฟกเตอร์ที่ 7 กระตุ้นการทำงานของโปรตีเอส (FSAP) หลอดเลือด 2013;230:365–72.

43. Kannemeier C, Al-Fakhri N, Preissner KT และคณะ โปรตีเอสที่กระตุ้นการทำงานของ Factor VII (FSAP) ยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์และการย้ายถิ่นของเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด ฟาเสบ เจ 2004;18: 728–30

44. แมมเบตซาเรฟ เอ็น, มีร์ซาโปอิอาโซวา ที, แมมเบตซาเรฟ บี และคณะ โปรตีนที่จับกับกรดไฮยาลูโรนิก 2 เป็นตัวควบคุมใหม่ของความสมบูรณ์ของหลอดเลือด ภาวะหลอดเลือดอุดตัน Vasc Biol 2010;30:483–90.

45. มิดวูด KS, Hussenet T, Langlois B, และคณะ ความก้าวหน้าทางชีววิทยาของ tenascin-C เซลล์โมลวิทยาศาสตร์ชีวิต 2011;68:3175–99.

46. ​​Gao W, Li J, Ni H และคณะ Tenascin C: ตัวชี้วัดทางชีวภาพที่มีศักยภาพในการทำนายความรุนแรงของหลอดเลือดหัวใจตีบ เจ Atheroscler Thromb 2019;26:31–8.

47. Sanchez-Navarro A, Gonzalez-Soria I, Caldiño-Bohn R และคณะ มุมมองเชิงบูรณาการของ Serpins ในสุขภาพและโรค: การมีส่วนร่วมของ SerpinA3 ฉันคือ J Physiol Cell Physiol 2021;320:C106–18

48. โซโรคิน วี, วู ซีซี. บทบาทของ Serpina3 ต่อชีววิทยาของหลอดเลือด อินท์ เจ คาร์ดิโอ 2020;304:154–5.

49. เฉียน แอลแอล, จี เจเจ, กัว เจคิว และคณะ บทบาทการป้องกันของ serpina3c ในฐานะสารยับยั้ง thrombin ใหม่ต่อหลอดเลือดในหนู คลินิกวิทย์ (ลอนดอน) 2021;135:447–63.

50. ฟัลลาคารา เอ บัลดินี อี มานเฟรดินี เอส และคณะ กรดไฮยาลูโรนิกในสหัสวรรษที่สาม โพลีเมอร์ (บาเซิล) 2018;10.