thภาษา
หน้าหลัก / ความรู้ / เนื้อหา

ความรู้

สัดส่วนของความเข้มข้นในอาหารของโคนมที่ให้นมบุตรในช่วงแรกมีผลกระทบที่ตรงกันข้ามกับการหมุนเวียนของโปรไฟล์การถอดเสียงของเม็ดเลือดขาวทั่วโลก สุขภาพ และการเจริญพันธุ์ตามความเท่าเทียมกัน

Dec 26, 2023

เชิงนามธรรม:การทำงานของเม็ดเลือดขาวหมุนเวียนในโคนมจะถูกระงับหลังการคลอด โดยมีสมดุลพลังงานเชิงลบเป็นปัจจัยเสี่ยง โปรไฟล์การถอดรหัสเม็ดเลือดขาวถูกเปรียบเทียบแยกกันในวัว Holstein – Friesian 44 multiparous (MP) และ primiparous (PP) 18 ตัวที่ได้รับอาหารที่มีสัดส่วนความเข้มข้นแตกต่างกันเพื่อทดสอบว่าความผิดปกติของระบบภูมิคุ้มกันสามารถบรรเทาได้ด้วยโภชนาการที่เหมาะสมหรือไม่ หลังจากคลอดลูกแล้ว มีการเสนอวัว (1) มีความเข้มข้นต่ำ (LC); (2) อาหารเข้มข้นปานกลาง (MC) หรือ (3) อาหารที่มีความเข้มข้นสูง (HC) โดยมีสัดส่วนของความเข้มข้นต่อหญ้าหมัก 30%:70%, 50%:50% และ 70%:30% ตามลำดับ ข้อมูลฟีโนไทป์ของวัวที่รวบรวม ได้แก่ สารเมตาบอไลต์ที่หมุนเวียน ผลผลิตน้ำนม และบันทึกสุขภาพและการเจริญพันธุ์ ดำเนินการจัดลำดับ RNA ของเม็ดเลือดขาวหมุนเวียนที่ 14 วันในนม อาหาร HC ช่วยเพิ่มความสมดุลของพลังงานในทั้งสองกลุ่มอายุ มียีนที่แสดงออกแตกต่างกันใน PP มากกว่าในวัว MP (460 กับ 173, การเปรียบเทียบ HC กับ LC) โดยมีการทับซ้อนกันเล็กน้อย วัว MP ที่รับประทานอาหาร LC แสดงให้เห็นถึงการควบคุมส่วนเสริมและการแข็งตัวของเลือด และกลไกการป้องกันภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติต่อเชื้อโรค และมีแนวโน้มว่าจะเกิดกรณีเต้านมอักเสบและภาวะเจริญพันธุ์แย่ลงมากขึ้น ในทางตรงกันข้าม วัว PP ในอาหาร HC แสดงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันที่ดีกว่าโดยพิจารณาจากการแสดงออกของยีนและข้อมูลฟีโนไทป์ และระยะเวลาการคลอดที่นานขึ้นจนถึงการปฏิสนธิ เม็ดเลือดขาวของโค MP และ PP จึงตอบสนองต่ออาหารที่แตกต่างกันระหว่างอายุ ปริมาณสารอาหาร และภูมิคุ้มกันที่ส่งผลต่อสุขภาพและการเจริญพันธุ์ในภายหลัง

Desert ginseng-Improve immunity (21)

ประโยชน์ของซิสตานช์สำหรับระบบภูมิคุ้มกันของผู้ชาย

คลิกที่นี่เพื่อดูผลิตภัณฑ์ Cistanche Enhance Immunity

【สอบถามเพิ่มเติม】 อีเมล:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

คำสำคัญ:ภูมิคุ้มกันหลังคลอด; ภูมิคุ้มกัน; การเผาผลาญ; เม็ดเลือดขาว; อาหารให้นมบุตร; การถอดเสียง; การสืบพันธุ์; วัว

1. บทนำ

โคนมในระยะหลังคลอดมีลักษณะพิเศษคือกดภูมิคุ้มกันซึ่งส่งผลต่อภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและภูมิคุ้มกันแบบปรับตัว รวมทั้งภูมิคุ้มกันแบบเซลล์และร่างกาย เม็ดเลือดขาวที่หมุนเวียนจะถูกคัดเลือกเข้าไปในเนื้อเยื่อ เช่น ต่อมน้ำนม และเยื่อบุโพรงมดลูกในระหว่างการอักเสบ อย่างไรก็ตาม การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นการลดลงของทั้งจำนวนเม็ดเลือดขาวและความสามารถในการทำงานของพวกมันในช่วงระยะเวลาที่อยู่นอกครรภ์ [1,2] ผลกระทบที่รายงาน ได้แก่ phagocytosis ที่บกพร่องและการออกซิเดชั่นระเบิด [3–5] การตอบสนองที่ลดลงของการไหลเวียนของ T-cells ต่อสารก่อมะเร็ง และลดการผลิตอิมมูโนโกลบูลินโดย B-cells [6,7] สาเหตุมีหลายปัจจัย แต่ดูเหมือนว่าจะเชื่อมโยงกับการแบ่งสารอาหารเพื่อสนับสนุนการผลิตน้ำนมในช่วงเริ่มต้นของการให้นมบุตร ซึ่งจะทำให้การทำงานของระบบภูมิคุ้มกันลดลง [8-10] เม็ดเลือดขาวต้องการกลูโคส กรดไขมันชนิดต่างๆ และโคเลสเตอรอลหรือออกซีสเตอรอลอย่างเพียงพอเพื่อการบำรุงรักษาและการทำงาน [8,11,12] อย่างไรก็ตาม สารอาหารที่มีอยู่จะให้ความสำคัญกับต่อมน้ำนมหลังคลอด ซึ่งต้องใช้พลังงานและโปรตีนที่สามารถเผาผลาญได้มากกว่าที่ได้รับจากการกินอาหารประมาณ 25% [8,13,14] นอกจากนี้ การคลอดบุตรยังมีลักษณะเฉพาะคือกระบวนการอักเสบที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงการหลั่งของพรอสตาแกลนดิน สเตียรอยด์ และไซโตไคน์ต่างๆ และการบาดเจ็บที่อาจเกิดขึ้นระหว่างกระบวนการคลอดบุตร [15–17] การตอบสนองต่อการอักเสบต่อการคลอดและสารเมตาบอไลต์ที่ปล่อยออกมาระหว่างการเคลื่อนย้ายเนื้อเยื่อมีผลกระทบต่ออาการเบื่ออาหารอย่างมาก การบริโภคลดลงอีก และทำให้สมดุลพลังงานเชิงลบ (NEB) รุนแรงขึ้น [18] เมื่อการกินอาหารไม่สามารถตอบสนองความต้องการพลังงานที่เพิ่มขึ้น วัวจะเข้าสู่ช่วง NEB โดยที่บางคนมีภาวะการเผาผลาญไม่สมดุล [19–21] NEB เกี่ยวข้องกับการดื้อต่ออินซูลิน การแสดงออกของตัวรับฮอร์โมนการเจริญเติบโตของตับ (GH) ลดลง และการสังเคราะห์ IGF{23}} ของตับลดลง [22,23] การแยก GH กับอินซูลินในโคหลังคลอดเป็นการปรับตัวที่จัดลำดับความสำคัญของการจัดหากลูโคสไปยังเนื้อเยื่อ เช่น เซลล์เยื่อบุของเต้านม ซึ่งการดูดซึมไม่ขึ้นกับอินซูลิน [8] ในสถานการณ์เช่นนี้ การแข่งขันในการจัดหาพลังงานระหว่างต่อมน้ำนมและระบบภูมิคุ้มกันเป็นสิ่งที่หลีกเลี่ยงไม่ได้ เนื่องจากทั้งสองอย่างนี้ต้องพึ่งพาสารตั้งต้นที่จำเป็นเหมือนกัน และทั้งสองต่างก็เป็นผู้ใช้พลังงานรายใหญ่ Kvidera และคณะ [24] แสดงให้เห็นว่าการกระตุ้นการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันเต็มรูปแบบในวัวต้องใช้กลูโคส 2.5 ถึง 3.1 กิโลกรัมต่อวัน ซึ่งคล้ายคลึงกับข้อกำหนดโดยประมาณที่ 2.7 กก./วัน ของกลูโคสที่เซลล์เยื่อบุของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมนำไปใช้ในการผลิตน้ำนม 40 กก./วัน [8]

การเคลื่อนย้ายเนื้อเยื่อยังสัมพันธ์กับความเข้มข้นของการไหลเวียนที่เพิ่มขึ้นของกรดไขมันชนิดไม่เอสเทอริฟายด์ (NEFAs), เบต้า-ไฮดรอกซีบิวทีเรต (BHB) และ IGF ที่ลดลง-1 ซึ่งทั้งหมดนี้มีส่วนทำให้เกิดความผิดปกติของระบบภูมิคุ้มกัน [5,9,10,20 ] ตัวอย่างเช่น การศึกษาล่าสุดของเราแสดงให้เห็นว่าการยึดเกาะระหว่างเซลล์ของเม็ดเลือดขาวถูกยับยั้งเมื่อความเข้มข้นของ NEFA เกิน 750 µM [25] แม้ว่าการเคลื่อนย้ายเนื้อเยื่อเป็นการปรับตัวตามปกติของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเพื่อรองรับการให้นมบุตร แต่การศึกษาจำนวนมากแสดงให้เห็นว่า NEB ที่รุนแรงมีอิทธิพลสำคัญต่อความสามารถในการตั้งครรภ์ในเวลาต่อมาของวัวในเวลาที่เหมาะสม [26] อาจเกิดจากปัจจัยหลายประการ รวมถึงความล่าช้าในการฟื้นฟูสภาพแวดล้อมของมดลูกที่เหมาะสม [2]; ระยะเวลาการตกไข่ที่ขยายออกไป [27] สภาพแวดล้อมภายในรูขุมขนที่ไม่ดี [28] และคุณภาพของโอโอไซต์บกพร่อง [29] โดยทั่วไปโคนมจะคลอดลูกประมาณ 90% ของน้ำหนักตัวโตเต็มที่ [30] การศึกษาก่อนหน้านี้ของเราแสดงให้เห็นว่าโคพันธุ์ไพรมิพารัส (PP) มีอินซูลิน, IGF-1 สูงกว่า และความเข้มข้นของเลปตินในการไหลเวียนของพวกมัน มีความเข้มข้นของสารเมตาบอไลต์ในเลือดต่ำกว่า (BHB, NEFA และยูเรีย) และมีความเข้มข้นของกลูโคสสูงกว่ามัลติพารัส (MP ) วัวเป็นเวลาอย่างน้อย 7 สัปดาห์หลังคลอด [31,32] สิ่งนี้บ่งชี้ว่าแกน somatotrophic หลุดออกน้อยกว่าในการให้นมในช่วงแรกในวัว PP เมื่อเปรียบเทียบกับวัว MP ซึ่งสัมพันธ์กับการจัดลำดับความสำคัญของสารอาหารไปยังต่อมน้ำนมที่อ่อนแอกว่า ดังนั้นจึงช่วยให้เติบโตได้อย่างต่อเนื่อง โปรไฟล์การแสดงออกของยีนในเม็ดเลือดขาวที่หมุนเวียนยังแตกต่างกันระหว่างวัว PP และ MP ในระหว่างการให้นมบุตรระยะแรก ๆ [33]

Desert ginseng-Improve immunity (23)

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน


การเพิ่มประสิทธิภาพการจัดการด้านโภชนาการในช่วงระยะเวลาแห้งจะช่วยเพิ่มการบริโภควัตถุแห้ง (DMI) ลดอุบัติการณ์ของโรคในครรภ์ และปรับปรุงภาวะเจริญพันธุ์ [34] มีแนวทางทั่วไปในการลดความเสี่ยงโรคที่เกี่ยวข้องกับการให้อาหารและการจัดการ [35] อย่างไรก็ตาม มีข้อมูลเพียงเล็กน้อยเกี่ยวกับสูตรอาหารสำหรับวัวแต่ละตัวที่มีภาวะเมตาบอลิซึมไม่สมดุลในช่วงหลังคลอด ซึ่งสามารถปรับปรุงการทำงานของระบบภูมิคุ้มกัน ลดอุบัติการณ์ของโรค และปรับปรุงประสิทธิภาพการสืบพันธุ์ในภายหลัง การกำหนดอาหารที่มีศักยภาพในการได้รับสารอาหารสูงเป็นแนวทางปฏิบัติ [36] ในการศึกษานี้ วัวที่ให้นมในช่วงแรกได้รับอาหารที่มีความเข้มข้นต่ำ (LC) ปานกลาง (MC) หรือมีความเข้มข้นสูง (HC) โดยพิจารณาจากสัดส่วนของความเข้มข้นต่อหญ้าหมัก และผลกระทบต่อสุขภาพและโรคทางเมตาบอลิซึม และภูมิคุ้มกันของระบบ ( โดยการประเมินโปรไฟล์การแสดงออกของยีนของเม็ดเลือดขาวหมุนเวียนทั่วโลก) ได้รับการพิจารณา ข้อมูลจากวัว PP และ MP ได้รับการวิเคราะห์แยกกันเพื่อหลีกเลี่ยงผลกระทบที่ทำให้เกิดความสับสนใด ๆ ที่เกิดจากความเท่าเทียมกัน สมมติฐานของเราคืออาหารที่มีความเข้มข้นสูงจะปรับปรุงการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันและเป็นประโยชน์ต่อภาวะเจริญพันธุ์

Desert ginseng-Improve immunity (2)

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

2. ผลลัพธ์

2.1. ผลของอาหารต่อการบริโภควัตถุแห้ง ผลผลิตน้ำนม สมดุลพลังงาน และเมตาบอไลต์ในเลือด

พารามิเตอร์ของนม น้ำหนักตัว (BW) DMI คะแนนสภาพร่างกาย (BCS) ความสมดุลของพลังงาน (EBAL) และสารเมตาบอไลต์ของเลือดสำหรับโค MP และ PP ที่ประมาณ 14 วันในนม (DIM) สรุปไว้ในตารางที่ 1 DMI สำหรับ วัว MP มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญระหว่างกลุ่มอาหารทั้งสามกลุ่มโดยมีลำดับ HC > MC > LC (p < 0.01–0.0{{11 }}1) ผลผลิตน้ำนมในโค MP ที่ได้รับอาหาร HC สูงกว่าวัวที่ได้รับอาหาร LC อย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05) ความแตกต่างในผลผลิตนมที่แก้ไขด้วยพลังงาน (ECM) ระหว่างกลุ่ม LC และ HC มีนัยสำคัญ (p < 0.05) โดยมีค่ากลางในกลุ่ม MC ค่า EBAL ในกลุ่ม MP ทั้งสามกลุ่มเป็นลบ แต่ค่าในวัว MC และ HC นั้นดีกว่าอย่างมีนัยสำคัญ (เป็นลบน้อยกว่า) มากกว่าในวัว LC (p <0.01) ความเข้มข้นในการหมุนเวียนของทั้งกลูโคส (p < 0.01) และ IGF-1 (p < 0.001) ในวัว HC สูงกว่าวัว LC อย่างมีนัยสำคัญ วัว MP ที่เสนออาหาร HC ยังผลิตยูเรียหมุนเวียนน้อยกว่า (p < 0.001), BHB (p < 0.05) และ NEFAs มากกว่าวัวที่เสนออาหาร LC ที่มีความเข้มข้น LC > MC > HC แม้ว่าความแตกต่างของความเข้มข้น NEFA ระหว่างกลุ่มอาหาร ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ

ตารางที่ 1 ปริมาณสารอาหารแห้งทั้งหมด พารามิเตอร์ของนม น้ำหนักตัว ความสมดุลของพลังงาน คะแนนสภาพร่างกาย และสารเมตาบอไลต์ของเลือดที่ประมาณ 14 วันหลังคลอด วิเคราะห์ตามความเท่าเทียมกันและอาหาร 1,2

Table 1. Total dry matter intakes, milk parameters, body weights, energy balance, body condition score, and blood metabolites at around 14 days after calving, analyzed according to parity and diet 1,2

ในโค PP ผู้ที่ได้รับอาหาร MC หรือ HC มี DMI สูงกว่าวัวที่ได้รับอาหาร LC (p < {{0}}.01) ผลผลิตน้ำนมไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ EBAL ให้ผลเป็นบวกในวัวที่ให้อาหาร MC หรือ HC ในขณะที่วัวที่ให้อาหาร LC จะให้ผลเป็นลบ ความแตกต่างใน EBAL ระหว่างโค HC และ LC PP มีนัยสำคัญ (p < 0.05) จากสารเมตาบอไลต์ที่วัดได้ มีเพียงความเข้มข้นของยูเรียที่แตกต่างกันระหว่างกลุ่ม โดยต่ำกว่าในโค HC (LC > MC > HC, p < 0.001 สำหรับ LC เทียบกับ HC หรือ MC)

2.2. ผลของอาหารต่อพารามิเตอร์การอักเสบ

ผลของอาหารต่อพารามิเตอร์การอักเสบที่วัดในมดลูกและต่อมน้ำนมแสดงไว้ในตารางที่ 2 ในวัว PP อัตราส่วนของเม็ดเลือดขาวโพลีมอร์โฟนิวเคลียร์ต่อเซลล์เยื่อบุมดลูก (PMNs: UECs) ที่รวบรวมจากมดลูกโดยใช้ไซโตบรัชสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญสำหรับ วัวใน HC เปรียบเทียบกับอาหาร LC (p < 0.05) ในวัว MP แนวโน้มเป็นไปในทิศทางเดียวกัน โดยมี LC < MC < HC แต่ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ ในนม วัว MP ที่รับประทานอาหาร LC มี SCC สูงกว่าวัวที่รับประทานอาหาร MC หรือ HC อย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05) ในขณะที่วัว PP แนวโน้มที่ไม่มีนัยสำคัญอยู่ในทิศทางตรงกันข้าม . ความเข้มข้นของ N-acetyl{7}}d-glucosaminidase (NAGase) และแลคเตตดีไฮโดรจีเนส (LDH) ของนม ซึ่งเป็นเอนไซม์ของนมที่บ่งชี้โรคเต้านมอักเสบ เป็นไปตามแนวโน้มทั่วไปเช่นเดียวกับค่า SCC แต่ไม่มีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญ ผลลัพธ์เหล่านี้ได้รับการสนับสนุนจากบันทึกด้านสุขภาพ วัว MP ที่รับประทานอาหาร HC ไม่พบกรณีของโรคเต้านมอักเสบใดๆ (0/15) ในขณะที่ 4/14 (28.6%) ของวัวที่รับประทานอาหาร LC ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกภายใน 16 วันหลังคลอด แนวโน้มเป็นไปในทิศทางตรงกันข้ามอีกครั้งสำหรับวัว PP โดยมีหนึ่งในหก (16.7%) ที่ได้รับอาหาร LC ที่เป็นโรคเต้านมอักเสบทางคลินิก เปรียบเทียบกับกรณีของโรคเต้านมอักเสบทางคลินิก 1 กรณีและโรคเต้านมอักเสบไม่แสดงอาการ 2 กรณีในอาหาร HC (50%)

ตารางที่ 2. พารามิเตอร์การอักเสบที่ประมาณ 14 วันหลังคลอด ตามความเท่าเทียมกันและอาหาร 1,2.

Table 2. Inflammatory parameters at around 14 days after calving according to parity and diet 1,2.

2.3. ข้อมูลการเจริญพันธุ์

รายละเอียดของข้อมูลภาวะเจริญพันธุ์แสดงไว้ในตารางที่ 3 สำหรับวัว MP วัวที่รับประทานอาหาร LC ใช้เวลาในการตั้งครรภ์นานกว่าเล็กน้อยและต้องการบริการต่อการปฏิสนธิมากกว่าวัว HC (2.4 ± 0.42 เทียบกับ 1.6 ± 0.23) แม้ว่าวัว HC ส่วนใหญ่ไม่ได้รับการบริการ (การตัดสินใจของฝ่ายบริหาร) หรือไม่ตั้งครรภ์เลย (6{{10}}.0% เทียบกับ . 71.4%). อย่างไรก็ตามไม่มีความแตกต่างเหล่านี้ที่มีนัยสำคัญ สำหรับวัว PP สิ่งที่ตรงกันข้ามเป็นจริง โดยวัว LC มีช่วงเวลาการปฏิสนธิที่สั้นที่สุด 29 วัน (p < {{20}}.05) โดยสัตว์ห้าตัวจากหกตัวจะตั้งครรภ์บริการครั้งแรก . ในทางตรงกันข้าม ครึ่งหนึ่งของกลุ่ม HC ไม่ได้รับบริการ (n=2) หรือล้มเหลวในการตั้งครรภ์ (n=1) โดยที่ทั้งสามกลุ่มตั้งครรภ์ต้องการบริการ 2.0 ± 0.41 ต่อความคิด ส่งผลให้กลุ่ม HC มีคะแนน "ในน่องโดย" (ICB) สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (p < 0.05)

ตารางที่ 3. ข้อมูลการเจริญพันธุ์ตามความเท่าเทียมกันและอาหาร 1,2

Table 3. Fertility data according to parity and diet 1,2

2.4. โปรไฟล์การถอดรหัสเม็ดเลือดขาวในวัวมีสัดส่วนความเข้มข้นที่แตกต่างกัน

จีโนมวัวอ้างอิงของ ARS-UCD 1.2 จัดทำโดย RefSeq (//www. ncbi.nlm.nih.gov/assembly เข้าถึงเมื่อวันที่ 1 พฤษภาคม 2565) มียีน 35,158 ยีน ซึ่งในจำนวนนี้ 19,001 ยีนของเม็ดเลือดขาวสามารถวัดปริมาณได้เมื่ออ่านลำดับ ในไฟล์ FASTQ ถูกแมปกับมัน แปลงภูเขาไฟที่แสดงโปรไฟล์การแสดงออกในทั้งวัว MP และ PP ที่ได้รับอาหารที่แตกต่างกันสามชนิดถูกนำเสนอในรูปที่ 1 ในวัว MP มียีนที่แสดงออกแตกต่างกัน 173 ยีน (DEGs) ในการเปรียบเทียบระหว่าง HC และ LC, 126 ระหว่าง MC และ LC และ 68 สำหรับ HC กับ MC (ไฟล์เสริม S1A – C) แผนภาพเวนน์แสดงให้เห็นว่าไม่มียีน (DEG ทั่วไป) ที่มีนัยสำคัญในการเปรียบเทียบอาหารทั้งสามรายการ (รูปที่ 2A) ในวัว PP มี 460 DEGs ในการเปรียบเทียบ HC กับ LC, 178 ระหว่าง MC กับ LC และ 128 ระหว่าง HC กับ MC (ไฟล์เสริม S2A – C) ยีนทั่วไปเพียงยีนเดียว (DCN, การเปลี่ยนแปลงการพับ (FC)=−7.3) มีนัยสำคัญในการเปรียบเทียบอาหารทั้งสาม (รูปที่ 2B) สิ่งนี้จะเข้ารหัสเดครินซึ่งเป็นโปรตีนที่มีบทบาทในการประกอบคอลลาเจนไฟบริล โดยรวมแล้วพบว่า DEG จำนวนมากถูกพบในการเปรียบเทียบการบริโภคการแสดงออกของยีนเม็ดเลือดขาวใน PP มากกว่าในวัว MP แม้จะมีขนาดกลุ่มที่เล็กกว่า โดยยีนเหล่านี้ส่วนใหญ่ได้รับการควบคุมในอาหาร HC นอกจากนี้ มีการทับซ้อนกันเล็กน้อยในยีนที่ระบุระหว่างกลุ่มอายุต่างๆ ดังที่แสดงในแผนภาพเวนน์ในรูปที่ 3 สิ่งนี้ชี้ให้เห็นว่าอาหารมีผลกระทบที่แตกต่างกันต่อเม็ดเลือดขาวในโค PP และ MP ในทั้งสองกลุ่มอายุ พบความแตกต่างมากที่สุดระหว่างวัวที่เสนออาหาร LC เทียบกับ HC ดังนั้นเราจึงมุ่งเน้นไปที่การเปรียบเทียบนี้ในการวิเคราะห์ที่ตามมา

Figure 1. Volcano plots show the expression profiles in both the MP and PP cows receiving three different diets. (A) MP cows HC vs. LC, (B) MP cows HC vs. MC, (C) MP cows MC vs. LC, (D) PP HC vs. LC, (E) PP HC vs. MC and (F) PP MC vs. LC. HC: high concentrate (n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows), MC: medium concentrate (n = 5 in PP cows and n = 15 in MP cows), and LC: low concentrate (n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows). The fold changes were log2-transformed. The green dots indicate the downregulated genes with p (BH) < 0.05 and fold changes ≤ −1.5 and the red dots indicate upregulated genes with p (BH) < 0.05 and fold changes ≥ 1.5. The orange dots indicate the genes with p (BH) < 0.05 but absolute fold changes < 1.5.

Figure 1. Volcano plots show the expression profiles in both the MP and PP cows receiving three different diets. (A) MP cows HC vs. LC, (B) MP cows HC vs. MC, (C) MP cows MC vs. LC, (D) PP HC vs. LC, (E) PP HC vs. MC and (F) PP MC vs. LC. HC: high concentrate (n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows), MC: medium concentrate (n = 5 in PP cows and n = 15 in MP cows), and LC: low concentrate (n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows). The fold changes were log2-transformed. The green dots indicate the downregulated genes with p (BH) < 0.05 and fold changes ≤ −1.5 and the red dots indicate upregulated genes with p (BH) < 0.05 and fold changes ≥ 1.5. The orange dots indicate the genes with p (BH) < 0.05 but absolute fold changes < 1.5.

รูปที่ 1 แปลงภูเขาไฟแสดงโปรไฟล์การแสดงออกของวัว MP และ PP ที่ได้รับอาหารสามแบบที่แตกต่างกัน (A) วัว MP HC กับ LC, (B) วัว MP HC กับ MC, (C) วัว MP MC กับ LC, (D) PP HC กับ LC, (E) PP HC กับ MC และ (F ) พีพี เอ็มซี กับ แอลซี HC: มีความเข้มข้นสูง (n=6 ในวัว PP และ n=14 ในวัว MP), MC: มีความเข้มข้นปานกลาง (n=5 ในวัว PP และ n=15 ในวัว MP ) และ LC: ความเข้มข้นต่ำ (n=6 ในวัว PP และ n=14 ในวัว MP) การเปลี่ยนแปลงการพับได้รับการเปลี่ยนแปลง2- จุดสีเขียวบ่งบอกถึงยีนที่ถูกควบคุมด้วย p (BH) < 0.05 และการเปลี่ยนแปลงแบบพับน้อยกว่าหรือเท่ากับ −1.5 และจุดสีแดงบ่งบอกถึงยีนที่ได้รับการควบคุมด้วย p (BH) < {{ 16}}.05 และพับการเปลี่ยนแปลงมากกว่าหรือเท่ากับ 1.5 จุดสีส้มบ่งบอกถึงยีนที่มี p (BH) <0.05 แต่การเปลี่ยนแปลงของพับสัมบูรณ์ <1.5

Figure 2. Venn diagrams showing the differentially expressed genes by the circulating leukocytes between the three dietary groups in (A) multiparous (MP) cows and (B) primiparous (PP) cows. HC: high concentrate (n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows), MC: medium concentrate (n = 5 in PP cows and n = 15 in MP cows) and LC: low concentrate (n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows).

รูปที่ 2 แผนภาพเวนน์แสดงยีนที่แสดงออกแตกต่างกันโดยเม็ดเลือดขาวที่หมุนเวียนระหว่างกลุ่มอาหารสามกลุ่มในวัว (A) multiparous (MP) และ (B) วัวชนิด primiparous (PP) HC: มีความเข้มข้นสูง (n=6 ในวัว PP และ n=14 ในวัว MP), MC: มีความเข้มข้นปานกลาง (n=5 ในวัว PP และ n=15 ในวัว MP ) และ LC: ความเข้มข้นต่ำ (n=6 ในวัว PP และ n=14 ในวัว MP)

Figure 3. Venn diagrams showing the differentially expressed genes by circulating leukocytes between the PP and MP cows in the comparisons of (A) high concentrate (HC) with low concentrate (LC); (B) HC with medium concentrate (MC), and (C) MC with LC. HC: n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows, MC: n = 5 in PP cows and n = 15 in MP cows and LC: n = 6 in PP cows and n = 14 in MP cows

รูปที่ 3 แผนภาพเวนน์แสดงยีนที่แสดงออกแตกต่างกันโดยการหมุนเวียนเม็ดเลือดขาวระหว่างวัว PP และ MP ในการเปรียบเทียบ (A) ที่มีความเข้มข้นสูง (HC) กับความเข้มข้นต่ำ (LC); (B) HC ที่มีความเข้มข้นปานกลาง (MC) และ (C) MC ที่มี LC HC: n=6 ในวัว PP และ n=14 ในวัว MP, MC: n=5 ในวัว PP และ n=15 ในวัว MP และ LC: n {{5 }} ในวัว PP และ n=14 ในวัว MP

2.5. การเปรียบเทียบโปรไฟล์การแสดงออกของยีนของเม็ดเลือดขาวระหว่างวัวหลายตัวที่ได้รับอาหารที่มีความเข้มข้นสูงหรือต่ำ

DEG ที่ควบคุมและลดระดับ 20 อันดับแรกจัดอันดับโดยค่า p (ปรับ BH) ในวัว MP ที่เลี้ยง HC เมื่อเปรียบเทียบกับที่เลี้ยงด้วยอาหาร LC จะได้รับในไฟล์เสริม S1D, E ในบรรดา DEG ที่ควบคุม ส่วนใหญ่มีส่วนร่วมใน GO หน้าที่ของกระบวนการระบบภูมิคุ้มกัน เมแทบอลิซึม และการตอบสนองต่อสิ่งเร้า โดยโปรตีนเข้ารหัสหลายชนิดมีหลายบทบาท ตัวอย่างเช่น ALAS2 (การเข้ารหัส 50 -อะมิโนเลวูลิเนต ซินเทส 2) มีบทบาทในกระบวนการเมแทบอลิซึม การตอบสนองต่อสิ่งเร้า และกระบวนการพัฒนาการ COL1A1 (คอลลาเจนประเภท I อัลฟา 1 สายโซ่) และ DAB2 เกี่ยวข้องกับเมแทบอลิซึม การตอบสนองต่อสิ่งเร้า สิ่งมีชีวิตหลายเซลล์ การเคลื่อนไหว และการพัฒนา ยีนที่ได้รับการควบคุมสูงสุด 20 อันดับแรกแสดงให้เห็นรูปแบบที่ชัดเจนของการเปลี่ยนแปลงภูมิคุ้มกันโดยมี DEG ที่เกี่ยวข้อง 14 รายการ ในจำนวนนี้ DMTB1, FGA, FGB และ TF เข้ารหัสเปปไทด์ต้านจุลชีพ, ALB และ TF เข้ารหัสโปรตีนระยะเฉียบพลันเชิงลบ (APP) และ FGA และ FGG เข้ารหัส APP เชิงบวก ยีน 8 ยีนมีบทบาทในการเผาผลาญอาหาร และมี 10 ยีนที่เกี่ยวข้องกับการตอบสนองต่อสิ่งเร้า

Desert ginseng-Improve immunity (15)

cistanche พืชเพิ่มระบบภูมิคุ้มกัน

DEG ของเม็ดเลือดขาวที่ได้มาจากการเปรียบเทียบ HC กับกลุ่ม LC จะถูกวิเคราะห์ด้วยการเสริมสมรรถนะ GO ต่อไป DEG ที่ได้รับการควบคุม 76 รายการได้รับการเสริมสมรรถนะอย่างมีนัยสำคัญด้วยฟังก์ชัน 208 รายการ ซึ่ง 20 อันดับแรกที่อิงตามคะแนนการเพิ่มคุณค่าจะแสดงไว้ในรูปที่ 4A สิ่งเหล่านี้เกี่ยวข้องกับการทำงานของเซลล์ในด้านต่างๆ โดยมีปัจจัยการเจริญเติบโตที่ได้รับจากเกล็ดเลือดเกาะอยู่ด้านบน การทำงานหลายอย่างเกี่ยวข้องกับเมแทบอลิซึมของโปรตีนและกรดอะมิโน (เกี่ยวข้องกับ APLP1, COL1A1, COL1A2, COL3A1, HTR1B และ P2RY12 โดยส่วนใหญ่), แร่ธาตุทางชีวภาพและการประมวลผลคอลลาเจน (เกี่ยวข้องกับ COL1A1, COL1A2, SPP1 และ TUFT1) และการสื่อสารของเซลล์ ในทางตรงกันข้าม ฟังก์ชั่นด้านบนของ DEG ที่ลดลง 97 รายการมีธีมที่ชัดเจนของกระบวนการป้องกันภูมิคุ้มกันต่างๆ (รูปที่ 4B) ซึ่งส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับ 20 DEG ในจำนวนนี้ FGA (แอปเชิงบวก) ได้รับการควบคุมลดลง 85- เท่าในการเปรียบเทียบ HC กับ LC เครื่องมือเบราว์เซอร์ GO สรุปฟังก์ชันทางชีววิทยาของ DEG ทั้งขึ้นและลงที่มีการควบคุมออกเป็นแปดหมวดหมู่ที่สำคัญ (ตารางที่ 4) ยกเว้นการทำให้แร่ธาตุทางชีวภาพ หน้าที่ทางชีวภาพอื่น ๆ ทั้งหมด โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่เกี่ยวข้องกับการป้องกันภูมิคุ้มกัน มีความเกี่ยวข้องอย่างเด่นชัดกับ DEG ที่ลดลง

Figure 4. Top 20 GO functions associated with the DEGs derived from HC vs. LC comparisons. (A) MP upregulated DEGs, (B) MP downregulated DEGs, (C) PP upregulated DEG and (D) PP downregulated DEGs.

รูปที่ 4 ฟังก์ชั่น GO 20 อันดับแรกที่เกี่ยวข้องกับ DEG ที่ได้มาจากการเปรียบเทียบ HC กับ LC (A) MP ที่ควบคุม DEGs, (B) MP ที่ลดระดับ DEGs, (C) PP ที่ควบคุม DEG และ (D) PP ที่ลดระดับ DEGs

ตารางที่ 4 สรุปฟังก์ชันหลักของการเพิ่มคุณค่า GO ของ DEG ของเม็ดเลือดขาวในการเปรียบเทียบระหว่างวัวหลายตัวที่ได้รับอาหารเข้มข้นสูง (n=14) และต่ำ (n=14) ในการให้นมในระยะแรก

Table 4. Summary of GO enrichment main functions of leukocyte DEGs in the comparison between the multiparous cows receiving high (n = 14) and low (n = 14) concentrate diets in early lactation.

ตารางที่ 4. ต่อ

Table 4. Cont.

DEG ที่รวมกันขึ้นและลง (n=173) ได้รับการเสริมสมรรถนะอย่างมีนัยสำคัญด้วยวิถี 23 KEGG ซึ่งส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับกระบวนการภูมิคุ้มกันและเมแทบอลิซึมต่างๆ (ตารางที่ 5) น้ำตกเสริมและการจับตัวเป็นก้อนอยู่ด้านบนโดยมี DEG ที่ควบคุมลดลงแปดรายการ (CFB, FGA, FGB, FGG, KNG1, PROC, SERPINA1 และ VTN) วิถีการอักเสบของการส่งสัญญาณคล้าย NOD มีความสัมพันธ์กับหก DEG (IFNB1, MAPK10, OAS1X, OAS1Y, OAS1Z และ OAS2) ซึ่งทั้งหมดยกเว้น MAPK10 ถูกลดระดับลง วิถีทางของการย่อยและการดูดซึมโปรตีนมี DEG หกส่วน โดยที่ 3 รายการ (COL1A1, COL1A2 และ COL3A1) ได้รับการควบคุม และอีก 3 รายการถูกควบคุม (CELA2A, COL5A3 และ ELN) DEG ที่ควบคุมลดลงห้ารายการมีส่วนเกี่ยวข้องในวิถีการส่งสัญญาณของตัวรับที่กระตุ้นการทำงานของเปอร์รอกซิโซม (PPARs) (APOA2, APOC3, FABP1, HMGCS2 และ PCK1) เส้นทางของปฏิสัมพันธ์ระหว่างเมทริกซ์นอกเซลล์กับตัวรับ การยึดเกาะโฟกัส และการส่งสัญญาณสฟิงโกลิพิด ล้วนเกี่ยวข้องกับการบำรุงรักษาโครงสร้างของเซลล์และเนื้อเยื่อ

ตารางที่ 5 วิถีทางที่มีนัยสำคัญที่ระบุโดยการเสริมสมรรถนะวิถีทาง KEGG ที่เกี่ยวข้องกับยีนของเม็ดเลือดขาวที่แสดงออกแตกต่างกันในวัวหลายตัวเสนออาหารที่มีความเข้มข้นสูง (n=14) เมื่อเทียบกับวัวที่เสนออาหารที่มีความเข้มข้นต่ำ (n=14)

Table 5. Significant pathways identified by KEGG pathway enrichment associated with differentially expressed leukocyte genes in the multiparous cows offered the high concentrate diet (n = 14) compared with those offered the low concentrate diet (n = 14).

2.6. การเปรียบเทียบรูปแบบการแสดงออกของยีนของเม็ดโลหิตขาวระหว่างโคพันธุ์แรกที่ได้รับอาหารที่มีความเข้มข้นสูงหรือต่ำ

เม็ดเลือดขาว DEGs หมุนเวียน 20 อันดับแรกในวัว PP ที่เลี้ยง HC เมื่อเปรียบเทียบกับอาหาร LC นั้นแสดงอยู่ในไฟล์เสริม S2D, E. ภูมิคุ้มกันและกระบวนการเมแทบอลิซึมมีอิทธิพลเหนือหน้าที่ทางชีววิทยาของ DEG ที่ควบคุมด้านบนซึ่งมี 11 และ 12 DEGs ตามลำดับ ในบรรดาสิ่งเหล่านี้ ACSL6, MMP9 และ SLC11A1 เกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนเม็ดเลือดขาว และ ACSL6, ADGRG3, COL1A2, DUSP1, HCK, MMP9 และ PADI4 ในกระบวนการพัฒนา SLC40A1 เป็นตัวขนส่งธาตุเหล็กหลักที่มีบทบาทสำคัญในการรักษาสมดุลของระดับธาตุเหล็กในเซลล์และทั่วร่างกาย DEG เหล่านี้บางส่วนเข้ารหัสโปรตีนด้วยหลายฟังก์ชัน ตัวอย่างเช่น MMP9, DUSP1, SLC11A1 และ COL1A2 เชื่อมโยงกับฟังก์ชัน GO ข้างต้นส่วนใหญ่ หน้าที่ทางชีววิทยาของ DEG ที่ควบคุมจากบนลงล่างมีความหลากหลายมากขึ้น มี DEG แปดตัวที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการของระบบภูมิคุ้มกัน มีบทบาทห้าประการในเมแทบอลิซึม และสอง DEG เกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนและกระบวนการพัฒนาของเม็ดเลือดขาว (EPCAM และ FCRL3) ขอย้ำอีกครั้งว่า DEG บางตัว เช่น CD96 และ FCRL3 เข้ารหัสโปรตีนที่มีหลายบทบาท

ในวัว PP นั้น DEG ที่ได้รับการควบคุม 382 ตัวที่ได้มาจากการเปรียบเทียบ HC กับ LC มีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับฟังก์ชัน 690 GO โดย 20 อันดับแรกจะแสดงในรูปที่ 4C ทั้งหมดนี้เกี่ยวข้องกับ 116 DEGs (ไฟล์เสริม S2F) ที่มีกิจกรรมภูมิคุ้มกันต่างๆ ฟังก์ชั่นบนสุดคือวิถีการส่งสัญญาณของตัวรับที่ผิวเซลล์ สิ่งนี้เกี่ยวข้องกับ 43 DEG ซึ่งรวมถึงยีนที่เข้ารหัสตัวรับจำนวนมากสำหรับลิแกนด์ภูมิคุ้มกัน เช่น CXCR1, CXCR2, IL17RD และ IL1RAP ฟังก์ชันนี้มีฟังก์ชันย่อยที่สำคัญหกฟังก์ชัน รวมถึงวิถีการส่งสัญญาณที่ใช้สื่อกลางของไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ (LPS) (PTAFR, TLR4 และ SCARB1) และวิถีการส่งสัญญาณของตัวรับผิวเซลล์ที่ควบคุมการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน ฟังก์ชั่นย่อยอันดับต้นๆ ภายในการควบคุมกระบวนการของสิ่งมีชีวิตหลายเซลล์คือการควบคุมการผลิตไซโตไคน์ โดยมี DEG ที่ควบคุม 24 รายการ เช่น MARK13, LTF และ TLR4 มี DEG ที่ลดลงน้อยลง (เพียง 78) ซึ่งเกี่ยวข้องกับฟังก์ชัน GO ที่สำคัญ 298 รายการ โดยมีคะแนนการตกแต่งที่ต่ำกว่าและกระบวนการทางชีววิทยาที่หลากหลายมากขึ้น รูปที่ 4D แสดงฟังก์ชัน 20 อันดับแรก สิ่งเหล่านี้จำนวนหนึ่งเกี่ยวข้องกับแง่มุมต่างๆ ของภูมิคุ้มกัน เช่น การยึดเกาะของเซลล์ การควบคุมการผลิตตัวกลางในการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน การตอบสนองต่อ LPS และการตอบสนองต่อโมเลกุลที่มีต้นกำเนิดจากแบคทีเรีย ปัจจัยอื่นๆ เกี่ยวข้องกับการบำรุงรักษาสภาวะสมดุล เช่น ผิวเซลล์ ไซโตไลซิส การขนส่งผ่านเมมเบรน และเอนโดเพปทิเดสชนิดซีรีน การสรุปการทำงานทางชีววิทยาที่สำคัญที่เกี่ยวข้องกับ DEG ทั้งขึ้นและลงทำให้เกิดเจ็ดหมวดหมู่ (ตารางที่ 6) โดยมีกระบวนการของระบบภูมิคุ้มกันอยู่ด้านบน และหน้าที่อื่น ๆ ส่วนใหญ่ยังเกี่ยวข้องกับการป้องกันระบบภูมิคุ้มกันด้วย ตัวอย่างเช่น การเคลื่อนที่ได้รับการเสริมสมรรถนะด้วย DEGs ที่มีคุณสมบัติทางเคมีและภูมิคุ้มกัน และปฏิสัมพันธ์ระหว่างสิ่งมีชีวิตต่างๆ ซึ่งเกี่ยวข้องกับการฆ่าเชื้อโรคที่บุกรุก ทั้งกระบวนการระดับเซลล์และการควบคุมทางชีวภาพมีความสัมพันธ์กับ DEG จำนวนมาก กระบวนการระดับเซลล์ (n=239 DEG) มีฟังก์ชันย่อยมากมายที่เกี่ยวข้องกับการยึดเกาะของเซลล์ การฆ่าเซลล์ การกระตุ้นเซลล์ภูมิคุ้มกัน และการเพิ่มจำนวนเซลล์ การควบคุมทางชีวภาพ (125 DEG) ยังเกี่ยวข้องกับกิจกรรมภูมิคุ้มกันหลายอย่าง เช่น การควบคุมกระบวนการของระบบภูมิคุ้มกัน การเคลื่อนไหว และการตอบสนองต่อสิ่งเร้า ฟังก์ชั่นทั้งหมดเหล่านี้มี DEGs ที่ได้รับการควบคุมเป็นส่วนใหญ่ในอาหาร HC

ตารางที่ 6 สรุปฟังก์ชันหลักของการเพิ่มคุณค่า GO ของ DEG ในการเปรียบเทียบระหว่างโคพันธุ์แรกที่ให้อาหารเข้มข้นสูง (n=6) และต่ำ (n=6) ในการให้นมบุตรในระยะแรก

Table 6. Summary of GO enrichment main functions of DEGs in the comparison between the primiparous cows offered the high (n = 6) and low (n = 6) concentrate diets in early lactation.

ตารางที่ 6. ต่อ

Table 6. Cont.

DEG ที่รวมกันขึ้นและลง (460) ในวัว PP ได้รับการเสริมสมรรถนะด้วยวิถีทาง KEGG ที่สำคัญ 35 เส้นทาง (ตารางที่ 7) หลายอย่างเกี่ยวข้องกับกระบวนการเผาผลาญที่เกี่ยวข้องกับกรดอะมิโน (วาลีน ลิวซีน ไอโซลิวซีน อาร์จินีน และกลูตาไธโอน) โปรตีน ไขมัน (กรดอะราคิโดนิก กลีเซอรอลิปิด และคอเลสเตอรอล) วิตามินบี 6 และฮอร์โมนบางชนิด (อัลโดสเตอโรน คอร์ติซอล ไทรอยด์ และฮอร์โมนการเจริญเติบโต ). เส้นทางเมแทบอลิซึมเหล่านี้ได้รับการเสริมสมรรถนะโดยส่วนใหญ่ด้วย DEG ที่ควบคุมอาหาร HC ตัวอย่างเช่น การสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโนสัมพันธ์กับ DEG ที่ได้รับการควบคุม 5 รายการ (ARG2, ASS1, GPT2, SDS และ SDSL) เส้นทางของการสังเคราะห์ฮอร์โมนการเจริญเติบโต การหลั่ง และการออกฤทธิ์เสริมด้วย 6 รายการที่ได้รับการควบคุม (ADCY6, CREB3L2, CREB5, FOS , MAPK13 และ SOCS3) และ DEG ที่ลดลง (BCAR1) หนึ่งรายการ และเมแทบอลิซึมของกรดอาราชิโทนิกมี DEG ที่ควบคุมห้ารายการ (CYP2J2, GGT5, GPX3, PLB1 และ TBXAS1) เส้นทางหลายอย่างที่เกี่ยวข้องกับกระบวนการภูมิคุ้มกัน/การอักเสบก็ได้รับการเสริมสมรรถนะอย่างมีนัยสำคัญเช่นกัน โดยส่วนใหญ่จะมี DEG ที่ควบคุมเพิ่มขึ้นอีกครั้ง สิ่งเหล่านี้รวมถึงวิถีการส่งสัญญาณของคีโมไคน์, MAPK และ TNF และการลดหลั่นของส่วนเสริมและการแข็งตัวของเลือด ตัวอย่างเช่น เส้นทางการส่งสัญญาณของเคมีโมไคน์มีแปดอัพควบคุม (ADCY6, CCL16, CCR1, CXCL13, CXCR1, CXCR2, GNG7 และ HCK) และ DEG สองดาวน์ควบคุม (BCAR1 และ CCR5), เส้นทางการส่งสัญญาณ TNF มีหก DEGs อัพควบคุม (CREB3L2, CREB5 FOS, MAPK13, MMP9 และ SOCS3) และเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK มี DEG ที่ได้รับการควบคุม 12 รายการ ซึ่งรวมถึง IL1A, MAP3K6 และ MAPK13

ตารางที่ 7 วิถีทางที่สำคัญที่ถูกระบุโดยการเพิ่มคุณค่าของวิถี Kegg ที่เกี่ยวข้องกับยีนของเม็ดเลือดขาวที่แสดงออกแตกต่างกันในวัวพันธุ์แรกเสนออาหารที่มีความเข้มข้นสูง (n=6) เปรียบเทียบกับที่เสนออาหารที่มีความเข้มข้นต่ำ (n=6)

Table 7. Significant pathways identified by Kegg pathway enrichment associated with differentially expressed leukocyte genes in the primiparous cows offered the high concentrate diet (n = 6) compared with those offered the low concentrate diet (n = 6).

3. การอภิปราย

โคนมหลังคลอดมีกลไกสมดุลในการควบคุมการแบ่งสารอาหารระหว่างการให้นมและการทำหน้าที่ในชีวิตที่สำคัญอื่นๆ เช่น ภูมิคุ้มกันและการเจริญเติบโต [8] การเคลื่อนย้ายเนื้อเยื่อเป็นการปรับตัวตามปกติของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเพื่อรองรับการให้นมบุตร แต่วัวบางตัวกลับไม่สมดุลในการเผาผลาญ [35,37] สัตว์ดังกล่าวมีประสบการณ์ในการเคลื่อนตัวของเนื้อเยื่อไขมันมากเกินไป การดื้อต่ออินซูลิน และการอักเสบทั่วร่างกาย ซึ่งส่งผลให้ภูมิคุ้มกันบกพร่องซึ่งมักพบเห็นได้ในเวลานี้ [38] สิ่งนี้เกี่ยวข้องกับผู้ไกล่เกลี่ยการอักเสบเช่น TNF และ IL6 [39,40] ในวันที่ 14 หลังการคลอด เมื่อมีการเก็บตัวอย่างเม็ดเลือดขาวที่หมุนเวียนในการศึกษานี้ เซลล์จึงได้รับการสัมผัสกับช่วงของการกระตุ้นการอักเสบ เราได้แสดงให้เห็นโดยใช้การวิเคราะห์ลำดับถัดไปและชีวสารสนเทศศาสตร์ว่าอาหารที่มีสัดส่วนของความเข้มข้นที่แตกต่างกันนั้นให้ผลที่แตกต่างกันต่อทรานสคริปต์โตมของเม็ดเลือดขาวในโค PP และ MP ในการให้นมในระยะแรก สิ่งนี้เกี่ยวข้องกับความแตกต่างด้านสุขภาพและการเจริญพันธุ์ ข้อมูลนี้ได้เพิ่มข้อค้นพบใหม่ลงในรายงานก่อนหน้าของเราเกี่ยวกับผลกระทบด้านโภชนาการต่อการผลิตน้ำนมและภูมิคุ้มกัน [32]

3.1. การเปรียบเทียบผลของอาหารเข้มข้นสูงและต่ำในโคหลายตัว

วัว MP ในอาหาร HC มี DMI สูงกว่าวัว MC และ LC และสิ่งนี้สัมพันธ์กับความเข้มข้นของการไหลเวียนของกลูโคสและ IGF ที่สูงขึ้น{{0}} สิ่งนี้ทำให้โค HC มีภาวะ NEB ที่รุนแรงน้อยกว่าและผลิตน้ำนมได้มากขึ้น อาหาร HC ได้รับการจัดทำขึ้นเพื่อตอบสนองความต้องการด้านพลังงานและโปรตีนสำหรับการให้นมบุตรและการรักษาสภาวะสมดุลของร่างกาย และการตรวจวัดเมตาบอไลต์ยืนยันว่าสถานะการเผาผลาญของพวกมันดีกว่าวัว LC อย่างแน่นอน โดยมีข้อกำหนดน้อยกว่าในการเคลื่อนย้ายเนื้อเยื่อเพื่อตอบสนองความต้องการพลังงาน สิ่งนี้น่าจะช่วยเร่งความละเอียดของกระบวนการอักเสบหลังคลอด เนื่องจากโรคอักเสบหลายชนิดในการให้นมบุตรในระยะแรกเกี่ยวข้องหรือเกิดจากความผิดปกติของระบบเมตาบอลิซึม [38] และเราแสดงให้เห็นก่อนหน้านี้ว่าการอักเสบของมดลูกได้รับการแก้ไขเร็วกว่าในวัวที่มีสถานะสมดุลพลังงานดีขึ้น [2]. ในการศึกษาครั้งนี้ ไม่มีความแตกต่างในอัตราส่วนของ PMN ต่อเซลล์เยื่อบุผิวในช่องมดลูกตามอาหารในวัว MP ดัชนีนี้มักถูกใช้เป็นตัวบ่งชี้ของเยื่อบุโพรงมดลูกอักเสบทางเซลล์วิทยา [41] อย่างไรก็ตาม มีการสังเกตความแตกต่างตามการควบคุมอาหารในต่อมน้ำนมเนื่องจากโค LC มี SCC สูงกว่า และสิ่งนี้สัมพันธ์กับสัดส่วนที่มากขึ้นที่ประสบกับโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกในช่วง 16 DIM แรก (28.6% เทียบกับ 0% ใน LC เทียบกับ 0% . กลุ่ม HC)

DEG ส่วนใหญ่ที่ระบุในการวิเคราะห์ทรานสคริปโตมของเม็ดเลือดขาวเกี่ยวข้องกับกระบวนการภูมิคุ้มกันและ/หรือเมแทบอลิซึม ตามที่คาดไว้ในประชากรเซลล์ภูมิคุ้มกัน วิถีทาง KEGG ที่สำคัญที่สุดคือน้ำตกเสริมและการแข็งตัวของเลือด ซึ่งรวมถึงยีนที่มีการควบคุมต่ำที่สุดหกยีนในวัว HC ในจำนวนนี้ CFB เข้ารหัสปัจจัยเสริม B ซึ่งเป็นส่วนประกอบของเส้นทางทางเลือกของการเปิดใช้งานส่วนประกอบเสริม FGA, FGB และ FGG เข้ารหัสหน่วยย่อยสามหน่วยของ fibrinogen ปัจจัยการแข็งตัวซึ่งเป็นส่วนประกอบสำคัญของลิ่มเลือดที่มีความสำคัญในการจับแบคทีเรียกับเกล็ดเลือดด้วย ไคนิโนเจนในรูปแบบน้ำหนักโมเลกุลสูงซึ่งเข้ารหัสโดย KNG1 ก็เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการแข็งตัวของเลือดเช่นกัน และไคนิโนเจนจะปล่อยเบรดีไคนิน ซึ่งเป็นเปปไทด์ที่มีหน้าต่างๆ มากมาย รวมถึงฤทธิ์ต้านเชื้อแบคทีเรียและเชื้อรา Vitronectin ซึ่งเข้ารหัสโดย VTN ยังเกี่ยวข้องกับการควบคุมวิถีการแข็งตัวของเลือดและการรักษาบาดแผล ในขณะที่ขอบเขตการจับกับเฮปารินของมันก็มีคุณสมบัติต่อต้านจุลินทรีย์ PROC เข้ารหัสไกลโคโปรตีนในพลาสมาซึ่งมีรูปแบบที่กระตุ้นซึ่งมีโดเมนซีรีนโปรตีเอสซึ่งทำหน้าที่ในการย่อยสลายรูปแบบที่กระตุ้นของปัจจัยการแข็งตัวของเลือด V และ VIII ในขณะที่ SERPINA1 เข้ารหัสตัวยับยั้งซีรีนโปรตีเอสซึ่งมีเป้าหมาย ได้แก่ พลาสมิน ทรอมบิน และตัวกระตุ้นพลาสมิโนเจน ก่อนหน้านี้มีการแสดงการควบคุมส่วนเติมเต็มและการแข็งตัวของเลือดในเนื้อเยื่อของเต้านมว่าเป็นการตอบสนองของโฮสต์ในระยะเริ่มแรกต่อ E. coli หรือ Staph การติดเชื้อออเรียส [43] เนื่องจากวิถีทางนี้แสดงออกได้ชัดเจนมากขึ้นในวัวที่รับประทานอาหาร LC สิ่งนี้จึงสนับสนุนหลักฐานที่แสดงถึงอุบัติการณ์ของโรคเต้านมอักเสบในสัตว์เหล่านี้มากขึ้น

Desert ginseng-Improve immunity (23)

cistanche tubulosa-ปรับปรุงระบบภูมิคุ้มกัน

ฟังก์ชั่นยอดนิยมอีกประการหนึ่งที่สรุปโดยเบราว์เซอร์ GO คือกระบวนการฆ่าเชื้อโรค (ปฏิสัมพันธ์ระหว่างสิ่งมีชีวิต) ซึ่งเกี่ยวข้องกับ DEG ที่ลดลง 14 ตัวในวัว HC (ตารางที่ 4) ซึ่งรวมถึงยีนจำนวนหนึ่งที่เกี่ยวข้องกับฤทธิ์ต้านไวรัส (IFI6, IFNB1, ISG15, MX2, OAS1Y, OAS1Z, OAS2 และ RSAD2) ที่ถูกแสดงออกในระดับที่ต่ำกว่า ในจำนวนนี้ IFNB1 เข้ารหัสอินเตอร์เฟอรอนเบต้า 1 ในขณะที่ยีนอื่นๆ ทั้งหมดเป็นยีนที่กระตุ้นด้วยอินเตอร์เฟอรอน [44,45] พวกมันทั้งหมดยังเป็นส่วนหนึ่งของวิถีการส่งสัญญาณเหมือน NOD (NLR) NLR คือตัวรับการจดจำรูปแบบไซโตซิลิกที่ถูกกระตุ้นโดยส่วนประกอบที่ไม่ใช่ในตัวเองหลายชนิด รวมถึงเพปทิโดไกลแคนจากแบคทีเรีย ซึ่งอาจเริ่มต้นการแสดงออกที่ขึ้นกับ NF-kappa B-/AP-1-ของไซโตไคน์ที่ทำให้เกิดการอักเสบ การแสดงออกของอินเตอร์เฟอรอนประเภท I การกินอัตโนมัติและ อาการอักเสบ [46] การศึกษาล่าสุดของเราแสดงให้เห็นว่าวิถีทางนี้ได้รับการควบคุมในเม็ดเลือดขาวจากวัวที่ติดเชื้อ E. coli [47] ยีนอีกตัวที่ระบุคือ MPO ซึ่งเข้ารหัส myeloperoxidase ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่เก็บไว้ในเม็ดอะซูโรฟิลิกของ PMN และมาโครฟาจ มันถูกปล่อยออกสู่ของเหลวนอกเซลล์ในระหว่างกระบวนการอักเสบ และถูกใช้เป็นเครื่องหมายของการอักเสบและความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน [48] IL1R2 เข้ารหัสสมาชิกของตระกูลตัวรับ interleukin 1 และเป็นหนึ่งใน DEG ที่มีการควบคุมลดลงที่สำคัญที่สุดที่ระบุในวัว MP สิ่งนี้สามารถจับ IL1A, IL1B และอินเตอร์ลิวคิน 1 รีเซพเตอร์, ชนิด I (IL1R1/IL1RA) แต่ทำหน้าที่เป็นตัวรับล่อเพื่อยับยั้งการทำงานของลิแกนด์

ยีนที่มีการแสดงออกที่แตกต่างกันที่สำคัญที่สุดระหว่างวัว MP ในอาหารที่แตกต่างกันคือ FCER1A โดยมีการแสดงออกที่ต่ำกว่าในวัว HC สิ่งนี้จะเข้ารหัสหน่วยย่อยของตัวรับ IgE ซึ่งเป็นตัวริเริ่มการตอบสนองต่อการแพ้ที่อาจพัฒนาขึ้นเพื่อส่งเสริมการป้องกันโฮสต์จากปรสิตผ่านการปล่อยตัวกลางไกล่เกลี่ย เช่น ฮิสตามีน [49] สิ่งที่น่าสนใจคือ FCER1A เป็นหนึ่งใน 18 ยีนที่มีการระบุว่าระดับการแสดงออกเป็นการแบ่งแยกระหว่างความอุดมสมบูรณ์ของวัวสาว [50] บทบาทที่ชัดเจนของมันในโคยังคงไม่ทราบแน่ชัด แต่ในการทดลองวัคซีนกับลูกโคที่ทดลองติดเชื้อไส้เดือนฝอยปรสิต Ostertagia ostertagi ที่มีความสำคัญทางเศรษฐกิจ ระดับการแสดงออกของมันในเลือดมีความสัมพันธ์เชิงบวกกับจำนวนแมสต์เซลล์และเชิงลบกับจำนวนหนอน [51] ยีนที่ได้รับการควบคุมอีกสามยีนในวัว HC ที่มีการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันบางส่วน ได้แก่ ALAS2, GZMB และ LIF ALAS2 เข้ารหัส 50 -อะมิโนเลวูลิเนต ซินเทส 2 ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่มีตำแหน่งในไมโตคอนเดรียซึ่งจำเพาะต่ออีรีทรอยด์ ซึ่งกระตุ้นขั้นตอนแรกและขั้นตอนจำกัดอัตราในวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของฮีม ฮีมเป็นปัจจัยร่วมที่สำคัญในกระบวนการสำคัญต่างๆ มากมาย รวมถึงการขนส่งออกซิเจน ในขณะที่การกลายพันธุ์ในยีนนี้เชื่อมโยงกับโรคต่างๆ ในมนุษย์ รวมถึงโรคโลหิตจาง [52] GZMB เข้ารหัสพรีโปรโปรตีนที่ถูกหลั่งโดยเซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติและทีลิมโฟไซต์ที่เป็นพิษต่อเซลล์ และได้รับการประมวลผลเพื่อสร้างโปรตีเอสที่ออกฤทธิ์ที่กระตุ้นการตายของเซลล์เป้าหมาย และยังประมวลผลไซโตไคน์และลดโปรตีนเมทริกซ์นอกเซลล์ [53] ปัจจัยยับยั้งมะเร็งเม็ดเลือดขาวไซโตไคน์ซึ่งเข้ารหัสโดย LIF ได้รับการระบุในตอนแรกผ่านการมีส่วนร่วมในการสร้างความแตกต่างของมาโครฟาจ แต่ยังแสดงให้เห็นว่ามีบทบาทสำคัญในการพัฒนาของตัวอ่อนและการตั้งครรภ์ในหลากหลายสายพันธุ์รวมถึงโคด้วย [54]

DEG ที่ได้มาจากการเปรียบเทียบ HC กับ LC ในวัว MP ยังได้รับการเสริมสมรรถนะด้วยวิถีทางที่สำคัญหลายประการที่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญกลูโคส โปรตีน และกรดไขมัน สิ่งเหล่านี้รวมถึง DEG ที่ลดระดับสี่รายการที่เกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณ PPAR (APOA2, APOC3, FABP1 และ PCK1) ในการศึกษานี้ตรวจพบไอโซฟอร์ม PPAR หลักสามชนิด (A, D, G) ในประชากรเม็ดเลือดขาว แม้ว่าการแสดงออกของ PPAR เองจะไม่ได้รับอิทธิพลจากการรับประทานอาหาร แต่วิถีนี้สามารถมีอิทธิพลต่อการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการเผาผลาญกลูโคสและไขมัน ความแตกต่างของเซลล์ไขมัน และการตอบสนองต่อการอักเสบ [55,56] และมีส่วนช่วยในการปรับตัวในการเผาผลาญเพื่อให้ได้รับสารอาหารที่จำกัดโดย กระตุ้นให้เกิดยีนที่เกี่ยวข้องกับการเกิดออกซิเดชัน [57] วิถีเมแทบอลิซึมของเรตินอลก็ลดลงเช่นกันในวัว HC ด้วยการแสดงออกของ RBP4 และ TTR ที่ต่ำกว่า (การเข้ารหัสโปรตีนที่จับกับเรตินอลและทรานสไทเรติน ตามลำดับ) ซึ่งทั้งสองอย่างนี้ทำหน้าที่เป็นตัวขนส่งเรตินอลในเลือด ปฏิสัมพันธ์ของเรตินอลกับวิถีการส่งสัญญาณ PPAR มีอิทธิพลต่อการถอดรหัสของยีนปลายน้ำอื่นๆ อีกมากมาย [58] APOA2 และ APOC3 ร่วมกับ APOH ก็เป็นส่วนหนึ่งของวิถีเมแทบอลิซึมของคอเลสเตอรอลเช่นกัน คอเลสเตอรอลเป็นองค์ประกอบหลักของพลาสมาเมมเบรนและมีอิทธิพลต่อทั้งการจัดองค์กรและหน้าที่ของมัน [59,60] การศึกษาล่าสุดได้เน้นย้ำถึงบทบาทใหม่ของคอเลสเตอรอลในฐานะตัวปรับสำคัญของกิจกรรมภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและการปรับตัว [61]

วิถีทางของไกลโคไลซิส/กลูโคโนเจเนซิสสัมพันธ์กับ DEG ที่ลดลงสามตัวในวัวที่เลี้ยงด้วย HC (ADH1C, ALDOB และ PCK1) ในจำนวนนี้ PCK1 เข้ารหัส phosphoenolpyruvate carboxykinase 1 ซึ่งทำหน้าที่เป็นจุดควบคุมหลักสำหรับการควบคุมการสร้างกลูโคโนเจเนซิส เอนไซม์นี้ร่วมกับ GTP กระตุ้นการสร้างฟอสโฟอีนอลไพรูเวตจากออกซาโลอะซิเตต พร้อมปล่อยก๊าซคาร์บอนไดออกไซด์และ GDP การกระตุ้นระบบภูมิคุ้มกัน/การอักเสบช่วยส่งเสริมการถอดรหัสยีนกลูโคโนเจนิกผ่านตัวรับที่มีลักษณะคล้ายค่าผ่านทาง 4 (TLR4) [62] สิ่งนี้อาจทำให้เซลล์ภูมิคุ้มกันเปลี่ยนการเผาผลาญกลูโคสจากออกซิเดชั่นฟอสโฟรีเลชั่นไปสู่ไกลโคไลซิสเพื่อผลิตทั้งพลังงานและสารอาหารที่จำเป็นสำหรับการแพร่กระจายและการผลิตโมเลกุลของภูมิคุ้มกัน [12,63] สิ่งนี้นำไปสู่ความต้องการกลูโคสที่เพิ่มขึ้นซึ่งแข่งขันกับข้อกำหนดในการผลิตแลคเตท [64]

โดยสรุป ความแตกต่างในการแสดงออกของยีนระหว่างวัว MP ในอาหาร HC และ LC ให้หลักฐานของการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันที่เพิ่มขึ้นและการอักเสบในวัว LC ร่วมกับอุบัติการณ์ของโรคเต้านมอักเสบที่สูงขึ้น ในทางตรงกันข้าม ยีนที่เข้ารหัสโปรตีนบางชนิดน่าจะดีต่อสุขภาพและการเจริญพันธุ์ เช่น ALAS2 และ LIF ได้รับการควบคุมในวัว HC สิ่งนี้สนับสนุนดัชนีเมตาบอลิซึมที่วัดได้แสดงให้เห็นว่ามีสถานะ EBAL ที่ดีขึ้นในวัว MP ในอาหาร HC ซึ่งอาจช่วยปกป้องพวกมันจากการพัฒนาของโรคติดเชื้อหรือโรคเมตาบอลิซึม

3.2. การเปรียบเทียบผลของอาหารเข้มข้นสูงและต่ำในโคพันธุ์แรก

ในความคล้ายคลึงกับวัว MP วัว PP ในอาหาร HC ก็มี DMI สูงกว่าเช่นกัน ประมาณ 4 กิโลกรัม/วัน แต่ผลผลิตน้ำนมไม่ได้เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ ไม่มีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญในการไหลเวียนของความเข้มข้นของกลูโคส, NEFA, BHB หรือ IGF-1 โดยมีเพียงยูเรียเท่านั้นที่จะสูงกว่าในอาหาร LC ในทางตรงกันข้าม การแสดงออกของยีนเม็ดเลือดขาวระหว่างกลุ่มอาหารมีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญมากกว่าในวัว MP โดยมีการระบุ 460 เทียบกับ 173 DEG ในการเปรียบเทียบ HC กับ LC ซึ่ง 83% ได้รับการควบคุมในวัว PP ในอาหาร HC มีเพียงสัดส่วนเล็กน้อยของ DEGs ที่ทับซ้อนกันระหว่างสองกลุ่มอายุ (รูปที่ 3) ซึ่งบ่งชี้ว่าการเปลี่ยนแปลงในการทำงานของเม็ดเลือดขาวต่อการให้นมบุตรในช่วงแรกนั้นมีความอ่อนไหวในวัว PP มากกว่าในวัว MP เราคาดหวังว่าอาหาร HC จะเป็นประโยชน์ต่อวัว PP โดยการเพิ่ม DMI ของพวกมัน และตอบสนองความต้องการโปรตีนที่ย่อยสลายไม่ได้และที่เผาผลาญได้อย่างสมบูรณ์ตามที่คำนวณไว้ EBAL ได้รับการปรับปรุงให้ดีขึ้นจริง ๆ ในอาหาร HC แต่การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนแสดงให้เห็นว่ามีการควบคุมยีนที่เกี่ยวข้องกับการป้องกันระบบภูมิคุ้มกันมากขึ้น วัวที่เลี้ยงด้วย HC ยังมีอัตราส่วน PMN ที่สูงกว่า: UEC ในมดลูกร่วมกับ SCC ที่มากกว่าในเชิงตัวเลขและกรณีเต้านมอักเสบมากขึ้น นี่แสดงให้เห็นว่าแท้จริงแล้วพวกเขามีแนวโน้มที่จะเป็นโรคมากกว่าแทนที่จะน้อยกว่า ก่อนหน้านี้เราพบว่านิวโทรฟิลที่เก็บจากวัว PP ในการศึกษานี้ในช่วงสามสัปดาห์แรกของการให้นมมีดัชนีฟาโกไซติกและดัชนีการระเบิดออกซิเดชันสูงกว่าอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับวัว MP แต่มี 2-ผลกระทบทางของการรับประทานอาหารและความเท่าเทียมกัน การวัดเหล่านี้ไม่ได้รับการรายงาน [32]

กระบวนการของระบบภูมิคุ้มกันที่ระบุไว้ในการเปรียบเทียบ HC กับ LC รวมถึงการควบคุมตัวรับที่ผิวเซลล์และวิถีการส่งสัญญาณการจดจำรูปแบบ, เคมีบำบัด, การผลิตไซโตไคน์ และการย้ายถิ่นของเม็ดเลือดขาวในโคที่เลี้ยงด้วย HC DEG ที่ระบุมีความเกี่ยวข้องกับกลไกการป้องกันภูมิคุ้มกันที่หลากหลาย ซึ่งรวมถึงเปปไทด์ต้านจุลชีพ (AMP) หลายชนิด (CATHL6, CXCL13, DEFB1, LTF, PGLYRP1, PGLYRP4, SA100A8, SA100A9, S100A1 และ SLC11A1) สิ่งเหล่านี้ไม่เพียงแต่สามารถฆ่าสิ่งมีชีวิตที่ถูกบุกรุกได้โดยตรง แต่ยังช่วยโดยการปรับกระบวนการภูมิคุ้มกันและยาต้านจุลชีพอื่น ๆ [65–67] ก่อนหน้านี้มีการแสดงการควบคุมเปปไทด์ต้านจุลชีพในโปรไฟล์การถอดรหัสเม็ดเลือดขาวในโคที่เป็นโรคเต้านมอักเสบทางคลินิก [47,68] และมดลูกอักเสบ/เยื่อบุโพรงมดลูกอักเสบ [69,70] ฟังก์ชั่นการยึดเกาะของเม็ดโลหิตขาวมีความสัมพันธ์กับ 16 DEG ที่ควบคุมขึ้นและ 5 DEG ที่ลดลงในสัตว์ที่เลี้ยงด้วย HC การยึดเกาะของเม็ดเลือดขาวกับผนังเส้นเลือดฝอยเป็นขั้นตอนแรกที่สำคัญในการทำให้เม็ดเลือดขาวสามารถเคลื่อนตัวจากเลือดและเคลื่อนย้ายไปยังบริเวณที่เนื้อเยื่อถูกทำลาย การติดเชื้อ และการอักเสบ [71] ปฏิกิริยาระหว่างเซลล์-เซลล์ และเซลล์-เมทริกซ์มีอิทธิพลต่อฟีโนไทป์ของเม็ดเลือดขาว และการควบคุมวิถีการยึดเกาะที่ผิดปกติสามารถนำไปสู่การกระตุ้นเม็ดเลือดขาวแบบถาวรโดยมีการอักเสบที่ไม่ได้รับการแก้ไข [72] จาก DEG ที่มีการควบคุมที่ระบุ ADAM8, ANGPTL3, CD24, ICAM3 และ THY1 ล้วนเกี่ยวข้องกับภาวะ extravasation [73,74] ในขณะที่ FN1, NRP1, TNFAIP6 และ VCAN มีบทบาทที่เป็นไปได้ในการค้าเซลล์เม็ดเลือดขาวและทำงานในเนื้อเยื่อที่อักเสบ [72, 75]. ยีนที่เข้ารหัสตัวรับเคมีบำบัด CXCR1 และ CXCR2 ได้รับการควบคุมในวัวที่เลี้ยงด้วย HC; สิ่งเหล่านี้มีความสำคัญในการกระตุ้น chemotaxis ของ PMN ไปยังบริเวณที่มีการติดเชื้อตลอดจนกระตุ้นกระบวนการทางชีวเคมีที่ฆ่าเชื้อแบคทีเรียที่บุกรุก [76]

จากยีนที่ควบคุมต่ำซึ่งเกี่ยวข้องกับการยึดเกาะในวัวที่เลี้ยงด้วย HC นั้น BCAR1 เข้ารหัสโปรตีนมัลติฟังก์ชั่นที่เรียกว่า cas ซึ่งเกี่ยวข้องกับการเคลื่อนที่ของเซลล์ การตายของเซลล์ และการควบคุมวัฏจักรของเซลล์ [77] ความหลากหลายใน BCAR1 ก่อนหน้านี้มีความเกี่ยวข้องกับการต้านทาน SCC และโรคเต้านมอักเสบ [78] ADGRG1 (หรือที่รู้จักในชื่อ GPR56) เข้ารหัสตัวรับคู่โปรตีน G ที่จับกับคอลลาเจน 3 และทรานส์กลูตามิเนส 2 ซึ่งเป็นส่วนประกอบทั้งสองของเนื้อเยื่อสโตรมา ADGRG1 แสดงให้เห็นว่ามีบทบาทในเซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติของมนุษย์ (NK) ซึ่งยับยั้งความเป็นพิษต่อเซลล์ [79] การแสดงออกของมันเองถูกควบคุมลงหลังจากการกระตุ้นด้วยไซโตไคน์ ซึ่งจะสอดคล้องกับผลลัพธ์ที่แสดงไว้ที่นี่ โปรตีน CD96 ยังทำหน้าที่เป็นตัวรับจุดตรวจสอบการยับยั้งบนเซลล์ NK [80] การศึกษาก่อนหน้านี้เกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงของเม็ดเลือดขาวในช่วงเปลี่ยนผ่านยังพบการเปลี่ยนแปลงในการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการย้ายถิ่นของ transendothelial แม้ว่าจะมีข้อสรุปที่แตกต่างกัน โดยรายงานการเปิดใช้งานหลังจากการคลอด [81] หรือการยับยั้ง [82] ตามลำดับ การวิเคราะห์ของเรายังระบุถึงความแตกต่างจำนวนหนึ่งในเส้นทางการส่งสัญญาณเมแทบอลิซึมของกรดอะมิโนในวัว PP ในอาหาร HC เมื่อเปรียบเทียบกับในอาหาร LC ที่เกี่ยวข้องกับเอนไซม์ที่เข้ารหัสโดย DEG ที่ควบคุมห้าตัว (ARG2, ASS1, GPT2, SDS และ SDSL) . ในจำนวนนี้ ASS1 เข้ารหัสอาร์จินีนซัคซิเนตซินเทส 1 ซึ่งกระตุ้นขั้นตอนสุดท้ายของวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของอาร์จินีน ในขณะที่ ARG2 เข้ารหัสอาร์จิเนส โดยเร่งปฏิกิริยาไฮโดรไลซิสของอาร์จินีนเป็นออร์นิทีนและยูเรีย แอลอาร์จินีนยังสามารถแปลงเป็นไนตริกออกไซด์ซึ่งเป็นโมเลกุลส่งสัญญาณที่มีบทบาทสำคัญในการเกิดโรคของการอักเสบ [83] Glutamic-pyruvic transaminase 2 (GPT2) เป็นเอนไซม์ไมโตคอนเดรียที่เร่งปฏิกิริยาทรานส์อะมิเนชันแบบผันกลับได้ระหว่างอะลานีนกับ 2-ออกโซกลูตาเรต เพื่อสร้างไพรูเวตและกลูตาเมต ยีนนี้ได้รับการควบคุมภายใต้สภาวะความเครียดจากการเผาผลาญและมีบทบาทในการขับเคลื่อนการสร้างกลูโคสจากการเผาผลาญกรดอะมิโน [84] Serine dehydratase (SDS) เข้ารหัสเอนไซม์ที่แปลง L-serine เป็น pyruvate และแอมโมเนีย ในขณะที่ serine dehydratase (SDSL) คาดว่าจะมีส่วนร่วมในวิถีการสังเคราะห์ไอโซลิวซีนจากทรีโอนีน

วิถีทางของเมแทบอลิซึมของคอเลสเตอรอลสัมพันธ์กับ DEG ที่ได้รับการควบคุมสี่รายการในอาหาร HC (ANGPTL3, LRP1, SCARB1 และ SORT1) สิ่งนี้อาจนำไปสู่การสะสมของคอเลสเตอรอลในเม็ดเลือดขาวของวัวที่เลี้ยงด้วย HC และส่งเสริมการอักเสบ รวมถึงการเสริมการส่งสัญญาณ TLR การกระตุ้นการอักเสบ และการผลิตโมโนไซต์และนิวโทรฟิลในไขกระดูกและม้ามมากขึ้น [85] วิถีทางของเมแทบอลิซึมของกรดอาราชิโทนิกด้วย DEG ที่ได้รับการควบคุม 5 รายการ (ตามที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้) นำไปสู่การผลิตผลิตภัณฑ์ต้านการอักเสบและโปรสตาแกลนดินจำนวนมาก เช่น พรอสตาแกลนดินและลิวโคไตรอีน [86] วิถีเมแทบอลิซึมของกลีเซอรอลลิพิดนั้นสัมพันธ์กับ DEG ที่ได้รับการควบคุมสี่ตัว (DGAT2, DGKG, GK และ GPAT3) ซึ่งเข้ารหัสสำหรับยีน lipogenic ที่เกี่ยวข้องกับการสังเคราะห์ไตรเอซิลกลีเซอรอล การสะสมของมันอาจทำให้เกิดการกระตุ้นและการอักเสบของเม็ดเลือดขาว [87,88] การค้นพบทั้งหมดนี้สนับสนุนข้อสรุปว่าอาหาร HC ควบคุมเส้นทางเมแทบอลิซึมของเม็ดเลือดขาวในวัว PP ในลักษณะที่เพิ่มการตอบสนองต่อระบบภูมิคุ้มกัน/การอักเสบ งานก่อนหน้านี้ในวัวมุ่งเน้นไปที่ช่วงแห้งเป็นหลัก และแสดงให้เห็นว่าการให้อาหารมากเกินไปและมี BCS สูงในเวลานี้ ส่งเสริมการระดมไขมันในภายหลัง และการตอบสนองต่อการอักเสบที่เพิ่มขึ้นในช่วงระยะเวลารอบนอก [34] ในการศึกษาปัจจุบัน อัตราส่วน PMN ของมดลูก: UEC และแนวโน้มต่อ SCC ที่สูงขึ้น สนับสนุนข้อเสนอแนะที่ว่ามีการย้ายเม็ดเลือดขาวไปยังมดลูกและต่อมน้ำนมเพิ่มขึ้นในวัว PP ที่ได้รับอาหาร HC แม้ว่านี่จะเป็นองค์ประกอบสำคัญของการป้องกันระบบภูมิคุ้มกัน แต่การทำงานมากเกินไปอาจทำให้เกิดการอักเสบมากเกินไปได้ จำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมโดยใช้ขนาดตัวอย่างที่ใหญ่ขึ้นเพื่อยืนยันการค้นพบเหล่านี้

3.3. ความคล้ายคลึงกันในการตอบสนองต่ออาหารของวัวหลายตัวและวัวพันธุ์แรก

In terms of metabolic changes, both the MP and PP cows had higher circulating concentrations of urea when on the LC diet. Blood urea in both late pregnancy and early lactation may rise following mobilization of amino acids stored in skeletal muscle [89] or when dietary protein supply exceeds energy availability or protein needed [90], so these situations could have applied here. Elevated levels of urea have been associated with reduced fertility, but only at >4.5 มิลลิโมล/ลิตร ซึ่งสูงกว่าความเข้มข้นที่มีอยู่ในสัตว์ที่เลี้ยงด้วย LC ในการศึกษานี้ [91] เกี่ยวกับข้อมูลการถอดรหัสยีนของเม็ดเลือดขาว เป็นที่น่าสนใจที่จะทราบว่า DEG ที่ได้มาจากการเปรียบเทียบ HC กับ LC ในทั้งสองกลุ่มอายุนั้นอุดมไปด้วยวิถีการย่อยและการดูดซึมโปรตีน ซึ่งยีนที่เข้ารหัสไอโซฟอร์มต่างๆ ของคอลลาเจนมีบทบาทสำคัญ . ในหมู่พวกเขามียีนคอลลาเจนที่ได้รับการควบคุมสามยีน (COL1A1, COL1A2 และ COL3A1) ในวัว MP และ PP และยีนคอลลาเจนที่ควบคุมต่ำหนึ่งยีน (COL5A3) ในวัว MP ค่าการแสดงออกในกลุ่มตัวอย่างมีขนาดเล็ก แต่ความแตกต่างมีนัยสำคัญ ส่วนหนึ่งของ RNA นี้อาจมาจากไฟโบรไซต์ ซึ่งเป็นจำนวนเซลล์ที่ประกอบด้วยเพียง 0.1–0.5% ของเซลล์ที่ไม่มีเม็ดเลือดแดงในเลือดส่วนปลาย [92,93] คอลลาเจนเป็นสารเสริมภูมิคุ้มกันที่มีมายาวนานซึ่งเกี่ยวข้องกับกระบวนการภูมิคุ้มกัน/การอักเสบต่างๆ [93,94] การผลิตที่เพิ่มขึ้นในการไหลเวียนของเลือดโดยอาหาร HC อาจส่งผลต่อการทำงานของเม็ดเลือดขาว

3.4. ผลกระทบต่อการเจริญพันธุ์

การศึกษาก่อนหน้านี้จำนวนมากได้รายงานว่าสถานะการเผาผลาญและภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกันและอุบัติการณ์โรคของโคในการให้นมบุตรในช่วงแรกมีอิทธิพลสำคัญต่อการเจริญพันธุ์ในภายหลัง (เช่น [38,95]) งานของเราเองแสดงให้เห็นว่าวัว MP ที่มีความเข้มข้นของ IGF ต่ำ-1 ที่ 14 DIM มีโอกาสน้อยที่จะตั้งครรภ์เลย [37] เมื่อเร็วๆ นี้ เรารายงานว่า 63% ของวัวที่มี IGF ต่ำ-1 ในเวลานี้ประสบปัญหาสุขภาพมากกว่าหนึ่งปัญหาในช่วง 35 DIM แรก เมื่อเปรียบเทียบกับวัวที่มี IGF สูงเพียง 26%-1 ซึ่งรวมถึงสัตว์ที่ติดเชื้อในมดลูกและโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกมากขึ้น [10] โฟลีย์และคณะ [69] แยกความแตกต่างระหว่างวัวที่มีสุขภาพดี ซึ่งสามารถฟื้นฟูสภาวะสมดุลได้ภายใน 3 สัปดาห์หลังคลอด และวัวตัวอื่นๆ ที่มีการตอบสนองต่อการอักเสบที่รุนแรงและยาวนานขึ้น ซึ่งต่อมาทำให้เกิดภาวะเยื่อบุโพรงมดลูกอักเสบทางคลินิก Galvão และคณะ แสดงให้เห็นการเชื่อมโยงกับเลือดบริเวณรอบข้าง [96] ซึ่งแสดงให้เห็นว่านิวโทรฟิลจากวัวที่มีสภาพแย่กว่า EBAL มีปริมาณไกลโคเจนต่ำกว่าที่ 7 DIM และสัตว์เหล่านี้ประสบปัญหาโรคมดลูกมากขึ้น ซึ่งอาจเกี่ยวข้องกับความพร้อมของเชื้อเพลิงออกซิเดชันที่ลดลงสำหรับการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกัน โรคเต้านมอักเสบทางคลินิกในการให้นมบุตรในระยะเริ่มแรกยังสัมพันธ์กับอัตราการสูญเสียเอ็มบริโอก่อนการปลูกถ่ายที่เพิ่มขึ้น โดยมีข้อบ่งชี้บางประการว่าค่า BCS ที่ต่ำจะเพิ่มความเสี่ยงต่อไป [97] มีการแนะนำกลไกหลายประการที่เกี่ยวข้องกับการผลิตไซโตไคน์และพรอสตาแกลนดินและสารไกล่เกลี่ยการอักเสบอื่น ๆ ซึ่งอาจส่งผลต่อรังไข่และ/หรือทำให้สภาพแวดล้อมของมดลูกไม่เอื้ออำนวย [98,99] ข้อมูลภาวะเจริญพันธุ์ที่ได้รับจากวัวในการศึกษาของเราสนับสนุนการค้นพบที่เกี่ยวข้องกับสถานะภูมิคุ้มกันและสุขภาพของวัวในการให้นมบุตรในระยะแรก วัว MP ที่รับประทานอาหาร LC ต้องการ S/C เพิ่มขึ้นเป็นตัวเลขโดยสอดคล้องกับ EBAL ที่ด้อยกว่า พร้อมด้วยหลักฐานจากการวิเคราะห์ทรานสคริปต์ของเม็ดเลือดขาวของการป้องกันภูมิคุ้มกันแบบแอคทีฟมากขึ้นที่กำลังดำเนินการอยู่ โดยได้รับการสนับสนุนจากอุบัติการณ์ของโรคเต้านมอักเสบที่สูงขึ้น ในทางตรงกันข้าม วัว PP ที่รับประทานอาหาร HC ใช้เวลาตั้งครรภ์นานกว่าอย่างมีนัยสำคัญและมีการตั้งครรภ์น้อยกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับวัวที่เลี้ยงด้วย LC พวกเขามีหลักฐานของการอักเสบมากขึ้นในการตั้งครรภ์ระยะแรก แม้ว่า EBAL ที่คำนวณได้จะดีกว่าก็ตาม ในปัจจุบัน กลไกเบื้องหลังที่ทำให้เกิดภาวะสุขภาพไม่ดีและการเจริญพันธุ์ยังไม่แน่นอน แม้ว่าเราจะพบหลักฐานจากการแสดงออกของยีนทั่วโลกของการอักเสบและพังผืดของตับที่เพิ่มขึ้น (Cheng, Little, Ferris, Takeda, Ingvartsen, Crowe และ Wathes ข้อสังเกตที่ไม่ได้เผยแพร่) .

3.5. ข้อจำกัดของการศึกษา

มีวัว PP น้อยลงต่อกลุ่ม และทำให้พลังทางสถิติของการวิเคราะห์ที่เกี่ยวข้องกับฟีโนไทป์ลดลง ดังนั้นจึงจำเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมโดยใช้ขนาดตัวอย่างที่ใหญ่ขึ้นเพื่อยืนยันผลทางอาหารต่อการสืบพันธุ์และโรค ในการศึกษานี้ เราได้สกัด RNA ทั้งหมดจากเลือดส่วนปลายทั้งหมดโดยใช้หลอด Tempus และระบบแยกของมัน สิ่งนี้ทำให้ง่ายต่อการรวบรวมสำหรับการศึกษาในฟาร์มขนาดใหญ่ แต่ไม่ได้แยกประเภทเซลล์ ซึ่งจะรวมถึง T และ B lymphocytes, เซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติ, เกล็ดเลือด, โมโนไซต์, แกรนูโลไซต์ (นิวโทรฟิล, อีโอซิโนฟิล และเบโซฟิล) และไฟโบรไซต์ ข้อมูลการแสดงออกของยีนที่นำเสนอจึงได้รับอิทธิพลจากผลการรักษาที่เป็นไปได้ต่อสัดส่วนสัมพัทธ์ของเซลล์ประเภทใดประเภทหนึ่ง นอกเหนือจากการเปลี่ยนแปลงการถอดเสียงของแต่ละบุคคล ผลลัพธ์เหล่านี้ยังขึ้นอยู่กับระดับการถอดรหัสยีนด้วย และไม่รวมข้อมูลเกี่ยวกับการประมวลผลหลังการแปล ซึ่งจะส่งผลต่อปริมาณโปรตีนเชิงฟังก์ชันที่ถูกผลิตขึ้นด้วย

4. วัสดุและวิธีการ

4.1. สัตว์และอาหาร

ขั้นตอนทั้งหมดได้ดำเนินการภายใต้พระราชบัญญัติสัตว์ (ขั้นตอนทางวิทยาศาสตร์) ปี 1986 และอยู่ภายใต้ใบอนุญาตโครงการโฮมออฟฟิศหมายเลข PPL2754 และใบรับรองการกำหนดสำหรับสถานประกอบการ งานนี้ได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมและสวัสดิการของสถาบันเกษตร-อาหารและวิทยาศาสตร์ชีวภาพ (AFBI, เบลฟัสต์, ไอร์แลนด์เหนือ, สหราชอาณาจักร) โคนมโฮลชไตน์-ฟรีเซียนหกสิบสองตัวถูกคัดเลือกจากฝูง AFBI ในจำนวนนั้น 18 ตัวเป็น PP (การให้นมบุตร 1) และ 44 MP โดยมีหมายเลขการให้นม 2–7 (3.5 ± 1.28) และวัวทุกตัวมีสุขภาพแข็งแรงตามที่สัตวแพทย์ตรวจสอบ น้ำหนักลูกคลอดคือ 680 ± 62 (เฉลี่ย ± STD) กิโลกรัมสำหรับวัว MP และ 550 ± 39 กิโลกรัมสำหรับวัว PP หลังจากการคลอดโค วัว PP และ MP ถูกกำหนดแยกกันให้กับกลุ่มอาหารสามกลุ่ม โดยการแบ่งส่วนในแต่ละกลุ่มอายุมีความสมดุลสำหรับความสามารถในการถ่ายทอดที่คาดการณ์ไว้สำหรับไขมันบวกโปรตีน (กก.) BW ก่อนคลอด และ BCS วัว MP ยังมีความสมดุลเพื่อความเท่าเทียมกันและการให้นม 305-ผลผลิตนมในแต่ละวัน วัวถูกเสนออย่างใดอย่างหนึ่ง (1) ความเข้มข้นต่ำ (LC, ความเข้มข้น 30% บวกหญ้าหมัก 70%, n=6 สำหรับ PP และ n=14 สำหรับ MP); (2) ความเข้มข้นปานกลาง (MC, ความเข้มข้น 50% บวกกับหญ้าหมัก 50%, n=6 สำหรับ PP และ n=15 สำหรับ MP) หรือ (3) ความเข้มข้นสูง (HC, ความเข้มข้น 70% บวก 30% หญ้าหมัก, n=6 สำหรับ PP และ n=15 สำหรับ MP) อาหาร (เปอร์เซ็นต์ตามวัตถุแห้ง) สารเข้มข้นสำหรับการบำบัดแต่ละครั้งถูกกำหนดสูตรเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของโปรตีนดิบในอาหารรวม (CP) ทั่วไปสำหรับ LC, MC และ HC แต่ละตัว (152, 152 และ 154 กรัม/กิโลกรัม DM ตามลำดับ) ในขณะที่พลังงานที่สามารถเผาผลาญได้ในอาหารทั้งหมดที่คำนวณได้ ( ME) ปริมาณคือ 12.0, 12.4 และ 12.8 MJ/kg DM อาหารเหล่านี้ถูกประเมินว่าให้โปรตีนที่ย่อยสลายได้ในกระเพาะรูเมนอย่างมีประสิทธิผล 1556, 1997 และ 2,420 กรัม/วัน โปรตีนที่ไม่สามารถย่อยสลายได้ในอาหาร 559, 733 และ 888 กรัม/วัน และโปรตีนที่สามารถเผาผลาญได้ 1346, 1817 และ 2275 กรัม/วัน สำหรับ LC, MC และ HC ตามลำดับ การเข้าถึงการปันส่วนการรักษาถูกควบคุมโดยระบบการให้อาหาร Calan Broadbent (American Calan Inc., Northwood, NH, USA) เชื่อมโยงกับระบบระบุตัวตนทางอิเล็กทรอนิกส์ ซึ่งอนุญาตให้บันทึกการบริโภควัวแต่ละตัวทุกวัน มีการเสนออาหารสำหรับการรักษาแต่ละครั้งที่ 107% ของปริมาณวันก่อนหน้าเพื่อให้แน่ใจว่าจะบริโภคอย่างไม่จำกัด นอกจากนี้ วัวทุกตัวยังได้รับอาหารเข้มข้นเพิ่มอีก 0.5 กก. ในการรีดนมแต่ละครั้งผ่านระบบให้อาหารในห้องนั่งเล่น เพื่อช่วยรักษาการไหลของวัวอย่างมีประสิทธิภาพ การศึกษาครั้งนี้เป็นส่วนหนึ่งของโครงการที่กว้างขึ้นและมีรายละเอียดทั้งหมดเกี่ยวกับอาหารที่นำเสนอ การจัดการการให้อาหาร และองค์ประกอบของอาหารสัตว์ได้อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [32]

4.2. การรวบรวมข้อมูลฟีโนไทป์ของวัว

น้ำหนักตัวถูกบันทึกสัปดาห์ละสองครั้งโดยใช้เครื่องชั่งน้ำหนัก BCS อยู่ที่ประมาณ 14 DIM [100] วัวทุกตัวถูกรีดนมวันละสองครั้งและมีการบันทึกผลผลิตรายวันไว้ ตัวอย่างนมได้รับการวิเคราะห์สัปดาห์ละสองครั้งโดยใช้การวิเคราะห์อินฟราเรดระดับกลางสำหรับความเข้มข้นของโปรตีน ไขมัน และแลคโตส และนับเซลล์ร่างกายของนม เก็บตัวอย่างนมตอนเช้าเพิ่มเติม (2 × 8 มล.) สัปดาห์ละสองครั้งและเก็บไว้ที่ -18 ◦C สำหรับการวิเคราะห์ LDH (EC. 1.1.1.27) และ NAGase (EC 3.2.1.30) โดยใช้การตรวจฟลูออโรเมตริก [101] ผลผลิตนมที่แก้ไขด้วยพลังงาน (ECM; กก./วัน) คำนวณตามวิธีที่ใช้ในกลุ่มของเรา [32] ประเมิน EBAL ของวัวแต่ละตัวโดยใช้วิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [102]

คลินิกโรคเต้านมอักเสบได้รับการวินิจฉัยโดยใช้วิธีการมาตรฐานโดยอาศัยการสังเกตรายวันเพื่อดูการเปลี่ยนแปลงที่ผิดปกติของลักษณะของนม (เช่น สะเก็ด ก้อนเลือด) คุณภาพ ปริมาณน้ำนมที่ได้ และการตอบสนองการอักเสบของเต้านม (รอยแดง บวม ความร้อน หรือความเจ็บปวด) การอ่านค่า SCC ของนมร่วมกับการวินิจฉัยทางคลินิกถูกนำมาใช้เพื่อแบ่งหมวดหมู่โคออกเป็นสามกลุ่ม วัวที่มีสุขภาพดีถูกกำหนดให้มี SCC < 100,000 เซลล์/นมหนึ่งมิลลิลิตร และไม่มีอาการทางคลินิก โคนมที่ยังไม่แสดงอาการถูกกำหนดให้มี SCC ระหว่าง 100,000 ถึง 400,000 เซลล์/นมหนึ่งมิลลิลิตร และไม่มีอาการทางคลินิกที่ชัดเจน วัวที่ได้รับการวินิจฉัยว่าเป็นโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกมี SCC > 400,000 เซลล์/มล. และแสดงอาการทางคลินิกบางประการข้างต้น วัวถูกผสมเทียมที่การเป็นสัดที่สังเกตได้โดยใช้การปฏิบัติฝูงปกติและข้อมูลการเจริญพันธุ์ในช่วงเวลาของการให้นมบุตรในเวลาต่อมา หรือจนกว่าสัตว์จะถูกคัดออกจากบันทึกฝูง ข้อมูลที่รายงานประกอบด้วยจำนวนวันที่มารับบริการครั้งแรก (DFS) จำนวนวันที่เริ่มตั้งครรภ์ (วันที่เปิด) จำนวนการให้บริการต่อการปฏิสนธิ และสัดส่วนของวัวที่ตั้งครรภ์ นอกจากนี้ ข้อมูลการปฏิสนธิถูกให้คะแนนโดยใช้คะแนน 4- คะแนนในน่องด้วย (ICB) เป็น (1)<100 days, (2) 100–200 days, (3) >200 วัน หรือ (4) ไม่ตั้งครรภ์หรือคัดออก

4.3. การวิเคราะห์เซลล์วิทยาของมดลูก

ตัวอย่างไซโตบรัชมดลูก (Minitube, Minitüb GmbH, Tiefenbach, เยอรมนี) ถูกนำมาจากวัวทุกตัวที่ประมาณ 14 DIM เพื่อประเมินเซลล์วิทยาของเยื่อบุโพรงมดลูกตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้า [103] ไซโตบรัชที่มีการป้องกันสองชั้นถูกนำทางด้วยตนเองผ่านปากมดลูกเข้าไปในมดลูก อุปกรณ์ป้องกันด้านในถูกดึงออกมาจากอุปกรณ์ป้องกันด้านนอก และแปรงถูกหมุนเบา ๆ กับผนังเยื่อบุโพรงมดลูก จากนั้นจึงดึงแปรงกลับเข้าไปในตัวป้องกันด้านในและถอดออก สไลด์สำหรับการตรวจทางเซลล์วิทยาถูกเตรียมโดยการกลิ้งไซโตบรัชลงบนสไลด์กล้องจุลทรรศน์แก้วที่สะอาด และยึดตัวอย่างด้วย Fisherbrand™ CytoPrep™ Cytology Fixative (Fishers Scientific, Blanchardstown, Ireland) สไลด์คงที่ถูกส่งไปยัง UCD School of Veterinary Medicine, University College Dublin, Ireland เพื่อทำการประมวลผลและย้อมด้วยคราบ Giemsa ที่ดัดแปลง การประเมินทางเซลล์วิทยาดำเนินการโดยการนับ PMNs UEC ที่กำลังขยาย 400 เท่า (Leitz Labourlux-S, Wetzlar, Germany) และกำหนดอัตราส่วน โดยนับเฉลี่ยของสนามพลังงานสูง 10 สนามต่อสไลด์

4.4. การวิเคราะห์เมตาโบไลต์ที่หมุนเวียนและ IGF-1

ที่ 14 ± 2 (เฉลี่ย ± STD) วันหลังจากการคลอด ตัวอย่างเลือด 10 มล. จะถูกเก็บจากหลอดเลือดดำคอของวัวทุกตัวลงในท่อ Na heparin สำหรับพลาสมาและหลอดธรรมดาสำหรับซีรั่ม หลังจากการแยกพลาสมาหรือซีรั่มด้วยการปั่นแยก พวกมันจะถูกเก็บไว้ที่ −20 ◦C จนกระทั่งทำการวิเคราะห์ วัดความเข้มข้นของกลูโคสในพลาสมา ยูเรีย BHB NEFA และโคเลสเตอรอลโดยใช้วิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [20,25] โดยสรุปความเข้มข้นของ NEFA ในซีรัมถูกกำหนดด้วยวิธี ACS-ACOD โดยใช้ชุด NEFA C (Wako, Neuss, Germany) วัดปริมาณกลูโคสในพลาสมาด้วยวิธีเอนไซม์ (ระบบเคมีคลินิก ADVIA 1800, Siemens Healthcare Diagnostics, Ballerup, เดนมาร์ก) ซีรัม BHB ถูกกำหนดโดยการวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 340 นาโนเมตร เนื่องจากการผลิต NADH ที่ pH ที่เป็นด่างเมื่อมี BHB ดีไฮโดรจีเนส ยูเรียในซีรั่มถูกวิเคราะห์โดยสเปกโตรโฟโตเมทรี ค่าสัมประสิทธิ์การแปรผัน (CV) ภายในและระหว่างการทดสอบในทุกกรณีต่ำกว่าสามและสี่เปอร์เซ็นต์ตามลำดับสำหรับตัวอย่างควบคุมทั้งต่ำและสูง ความเข้มข้นของ IGF ในซีรั่ม-1 ถูกหาปริมาณด้วยการตรวจด้วยกัมมันตภาพรังสีหลังการสกัดเอทานอลด้วยกรด [104] CV การทดสอบภายในคือ 12.4, 7.5 และ 9.9% สำหรับตัวอย่างควบคุมต่ำ ปานกลาง และสูง ตามลำดับ

4.5. การสกัดอาร์เอ็นเอในเลือด

เก็บตัวอย่างเลือดสำหรับการสกัด RNA ผ่านการเจาะเลือดที่คอจากวัวทุกตัวที่ 14 ± 2 DIM ลงในหลอด RNA ในเลือด Tempus (Thermo-Fisher Scientific, Loughborough, UK) หลอดถูกเขย่าอย่างแรงเป็นเวลา 15–20 วินาทีทันทีที่รวบรวม จากนั้นแช่แข็งและเก็บไว้ที่ −80 oC สำหรับการสกัด RNA RNA ของเลือดทั้งหมดถูกสกัดโดยใช้ชุดแยก Tempus Spin RNA (เทอร์โม-ฟิชเชอร์) ตามคำแนะนำของผู้ผลิตตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [20] Agilent BioAnalyzer 2000 (Agilent Technologies UK Ltd., Cheadle, UK) พร้อม Agilent RNA 6000 Nano Kit (Agilent Technologies UK Ltd., Cheadle, UK) ถูกนำมาใช้เพื่อประเมินปริมาณและความสมบูรณ์ของ RNA นอกจากนี้ ปริมาณและความบริสุทธิ์ได้รับการตรวจสอบด้วย NanoDrop 1000 (เทอร์โมฟิชเชอร์) ข้อมูลคุณภาพสรุปไว้ในไฟล์เสริม S3 นี่แสดงให้เห็นว่าตัวอย่าง RNA ทั้งหมดมีความสมบูรณ์ที่เหมาะสม (หมายเลข RIN > 8.7, 9.3 ± 0.3) และความบริสุทธิ์ (260/280 ระหว่าง 2.01 ถึง 2.15 ค่าเฉลี่ย ± STD 2.10 ± 0.03) ดังนั้นจึงไม่มีสัตว์ใดถูกลบออกจากการวิเคราะห์ RNA ถูกเก็บไว้ที่ −80 ◦C สำหรับการจัดลำดับ RNA ในภายหลัง

4.6. ลำดับ RNA การทำแผนที่ และการหาปริมาณ

เม็ดเลือดขาว RNA ที่สกัดได้ถูกจัดลำดับบนแพลตฟอร์ม Illumina NextSeq 500 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [68] โดยสังเขปโดยใช้เวิร์กสเตชันจัดการของเหลว epMotion (เอพเพนดอร์ฟ, ฮัมบูร์ก, เยอรมนี) RNA ทั้งหมด 750 ng ได้รับการคัดลอกแบบย้อนกลับไปยังไลบรารีลำดับ cDNA ด้วยชุด Illumina TruSeq Stranded Total RNA Library Prep Ribo-Zero Gold (อิลลูมินา, ซานดิเอโก, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา ). ไลบรารี cDNA ที่รวมกลุ่มถูกจัดลำดับบนเครื่องจัดลำดับ Illumina NextSeq 500 ที่การอ่านปลายเดี่ยวที่มีความยาวนิวคลีโอไทด์ 75 ครั้ง เพื่อให้ได้การอ่านโดยเฉลี่ย 33.5 ล้านครั้งต่อตัวอย่าง ไฟล์ดิบ FASTQ ถูกฝากไว้ที่ European Nucleotide Archive (E-MTAB-9347 และ E-MTAB-9431) การวิเคราะห์ลำดับทั้งหมดดำเนินการโดยใช้ CLC Genomic Workbench v21 (Qiagen, แมนเชสเตอร์, สหราชอาณาจักร) แต่ละตัวอย่างมีการอ่านจากสี่เลน และถูกรวมเป็นไฟล์ fastq ไฟล์เดียว คุณภาพของไฟล์ fastq ทั้งแบบดิบและแบบตัดแต่งได้รับการประเมินตาม Illumina Pipeline 1.8 และการอ่านที่ล้มเหลวจะถูกลบออก จากนั้นการอ่านจะถูกแมปกับชุดประกอบ Bos taurus ของจีโนมอ้างอิง (ARS-UCD1.2 จัดทำโดย RefSeq ที่ https://www.ncbi.nlm.nih.gov/assembly เข้าถึงเมื่อวันที่ 1 มกราคม 2021) และวัดปริมาณเป็นการอ่านต่อยีน อ่านต่อล้านเบส (RPKM) และทรานสคริปต์ต่อล้านเบส (TPM) สิ่งเหล่านี้ถูกจัดเก็บเป็นไฟล์การแสดงออกของยีน (GE) ใน CLC Genomics Workbench เพื่อใช้สำหรับการวิเคราะห์การแสดงออกของยีนที่แตกต่างกันดังต่อไปนี้

4.7. การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนที่แตกต่างระหว่างกลุ่มอาหาร

ก่อนการวิเคราะห์การแสดงออกที่แตกต่างกันสำหรับผลของการบริโภคอาหาร เราใช้การวิเคราะห์องค์ประกอบหลัก (PCA) ที่มีค่า RPKM เพื่อระบุค่าผิดปกติ และสิ่งนี้แสดงให้เห็นว่าวัวสองตัว (Blood020009, MP และ Blood020103, PP) มีค่าผิดปกติของประชากร และดังนั้นจึงถูกแยกออกจากการวิเคราะห์เพิ่มเติม (ไฟล์เสริม S4A) การวิเคราะห์องค์ประกอบหลักยังแสดงให้เห็นว่ามีการทับซ้อนกันที่จำกัดในรูปแบบการแสดงออกของยีนโดยรวมระหว่างวัว PP และ MP (ไฟล์เสริม S2B) สิ่งนี้สนับสนุนการออกแบบการศึกษาดั้งเดิมเพื่อวิเคราะห์แต่ละกลุ่มอายุแยกกัน ไฟล์ GE ที่ได้มาจากตัวอย่างแต่ละตัวอย่างทั้งหมดจึงถูกแยกตามกลุ่มอายุ (PP, n=5–6 ต่อกลุ่มและ MP, n=14–15 ต่อกลุ่ม) DEG ระหว่างกลุ่มอาหารในโค PP หรือ MP ถูกระบุด้วย CLC Genomics Workbench V21 ผ่านขั้นตอนที่คล้ายกับการวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียว อัตราการค้นพบที่ผิดพลาด (FDR) สำหรับการทดสอบหลายรายการถูกปรับด้วย Benjamini – Hochberg (BH) และพิจารณานัยสำคัญที่ p <0.05 การเปลี่ยนแปลงแบบพับ (FC) ถูกคำนวณเป็นอัตราส่วนการแสดงออกของยีนของกลุ่มที่มีความเข้มข้นสูงกว่าต่อกลุ่มที่มีความเข้มข้นต่ำกว่า (เช่น HC เทียบกับ LC, MC เทียบกับ LC หรือ HC เทียบกับ MC) หากค่าของกลุ่มที่มีความเข้มข้นสูงกว่า มากกว่ากลุ่มที่มีสมาธิต่ำ (การเปลี่ยนแปลงรอยพับที่เป็นบวก การควบคุม) ถ้าค่าของกลุ่มที่มีความเข้มข้นต่ำกว่ามากกว่าค่าของกลุ่มที่มีความเข้มข้นสูงกว่า อัตราส่วนของกลุ่มที่มีความเข้มข้นต่ำกว่าต่อกลุ่มที่มีความเข้มข้นสูงกว่าถูกนำมาใช้ (เช่น LC เทียบกับ HC, MC เทียบกับ HC และ LC เทียบกับ MC ) (การเปลี่ยนแปลงการพับเชิงลบ, การลดระดับลง) เลือก DEG ที่ควบคุมและลดระดับด้วยการเปลี่ยนแปลงพับสัมบูรณ์มากกว่าหรือเท่ากับ 1.5 ระหว่างกลุ่มอาหารเพื่อการวิเคราะห์เพิ่มเติม

4.8. การวิเคราะห์การเพิ่มคุณค่าของยีน Ontology (GO)

DEG ที่ได้จากการเปรียบเทียบคู่ระหว่างกลุ่มอาหารถูกป้อนเข้าไปใน Partek Genomics Suite V7.1 (การรวมตัวกันของ Partek, Chesterfield, MO, USA) สำหรับการวิเคราะห์การเสริมสมรรถนะ GO เพื่อตรวจสอบการทำงานทางชีววิทยาและปฏิสัมพันธ์ระหว่าง DEG และสารานุกรมเกียวโตที่เกี่ยวข้องของ วิถีทางของยีนและจีโนม (KEGG) พร้อมจีโนมของ Bos taurus ARS-UCD1.2 ใช้การทดสอบที่แน่นอนของฟิชเชอร์พร้อมการปรับ BH และพิจารณานัยสำคัญทางสถิติที่ p < 0.05

4.9. การวิเคราะห์ทางสถิติของข้อมูลฟีโนไทป์

ข้อมูลที่ได้จากวัวทั้งหมดจะถูกแบ่งตามกลุ่มอายุ (วัว PP และ MP) เป็นครั้งแรกตามการออกแบบการศึกษา ค่าของ DMI, BW, พารามิเตอร์ของนม, EBAL, BCS, สารเมตาโบไลต์ที่หมุนเวียน (กลูโคส, ยูเรีย, BHB, NEFAs, คอเลสเตอรอล และ IGF{{0}}), SCC (แปลงรูปลอการิทึม) และจำนวนเซลล์มดลูก และอัตราส่วนของพวกเขาถูกสรุปเป็นค่าเฉลี่ย ± ความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SE) การวิเคราะห์ทางสถิติถูกนำมาใช้เพื่อเปรียบเทียบความแตกต่างระหว่างกลุ่มอาหารโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียวที่สร้างไว้ในชุดซอฟต์แวร์ SPSS V28 (ชิคาโก, อิลลินอยส์, สหรัฐอเมริกา) ความสม่ำเสมอของความแปรปรวนของแต่ละตัวแปรได้รับการทดสอบด้วยสถิติของเลวีนก่อนการวิเคราะห์ความแปรปรวน ผลลัพธ์แสดงให้เห็นว่าความสม่ำเสมอระหว่างกลุ่มสำหรับ ECM, EBAL, กลูโคส, ยูเรีย, BHB และ IGF-1 ในวัว PP ไม่บรรลุผลสำเร็จ ดังนั้นจึงใช้การแปลงลอการิทึมสำหรับตัวแปรเหล่านี้ ในกรณีที่ ANOVA แสดงนัยสำคัญ มีการเปรียบเทียบหลายครั้งกับวิธี Fisher's LSD เพื่อระบุแหล่งที่มาของความแตกต่าง เนื่องจากไม่สามารถบรรลุความสม่ำเสมอของความแปรปรวนของข้อมูล SCC ของนมและเซลล์วิทยาของมดลูกได้หลังจากการแปลงลอการิทึม ตัวแปรเหล่านี้จึงถูกทดสอบโดยใช้การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบทางเดียวของ Kruskal–Wallis กับการเปรียบเทียบพหุคูณของ Dunn ข้อมูลภาวะเจริญพันธุ์ได้รับการทดสอบด้วยวิธีวิลคอกซัน ในทุกกรณี พิจารณานัยสำคัญที่ p <0.05

5. สรุปผลการวิจัย

การศึกษานี้สนับสนุนงานก่อนหน้านี้ในการสาธิตการเชื่อมโยงที่ชัดเจนระหว่างสถานะการเผาผลาญของวัวในการให้นมบุตรระยะแรกและการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันของวัว การตรวจสอบก่อนหน้านี้ส่วนใหญ่มุ่งเป้าไปที่การปรับปรุงสุขภาพหลังคลอดด้วยโภชนาการที่ดีขึ้น โดยมุ่งเน้นไปที่ช่วงก่อนคลอด และแสดงให้เห็นว่าการให้อาหารมากเกินไปและ BCS สูงในเวลานี้ ส่งเสริมการระดมไขมันในภายหลัง และการตอบสนองต่อการอักเสบที่เพิ่มขึ้นในช่วงระยะเวลานอกครรภ์ [34] เราได้ประเมินแทนว่าเป็นไปได้หรือไม่ที่จะเปลี่ยนแปลงการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันหลังการคลอดลูกโดยการปรับเปลี่ยนแผนการให้นมบุตร เราพบว่าการตอบสนองต่อการรวมความเข้มข้นเพิ่มเติม ซึ่งให้อาหารที่เป็นไปตามข้อกำหนดด้านพลังงานและโปรตีนของสัตว์ ทำให้เกิดผลกระทบที่แตกต่างกันต่อเม็ดเลือดขาวในโค MP และ PP ในวัว MP อาหาร HC มีประโยชน์อย่างชัดเจน เนื่องจากเม็ดเลือดขาวของวัว LC มีการควบคุมส่วนเสริมและการแข็งตัวของเลือด และกลไกการป้องกันภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติต่อเชื้อโรค ในทางตรงกันข้าม เม็ดเลือดขาวในวัว PP ในอาหาร HC แสดงการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน/การอักเสบที่มากขึ้น และมีอัตราส่วน PMN: UEC ที่สูงขึ้น ซึ่งบ่งชี้ว่ามีการอพยพของเม็ดเลือดขาวไปยังมดลูกเพิ่มขึ้น ต่อมาวัวเหล่านี้มีช่วงการคลอดนานขึ้นจนถึงการปฏิสนธิ ซึ่งบ่งชี้ว่าภาวะเจริญพันธุ์แย่ลง การทำงานเพิ่มเติมกับวัวจำนวนมากขึ้นนั้นรับประกันว่าจะพบผลทางอาหารต่อการเจริญพันธุ์ และเพื่อทำความเข้าใจให้ถ่องแท้มากขึ้นว่าการตอบสนองทางเมตาบอลิซึมของอาหารหลังคลอดแตกต่างกันอย่างไรในสัตว์อายุน้อย

อ้างอิง

1. มัลลาร์ด บริติชแอร์เวย์; เด็กเกอร์ส เจซี; ไอร์แลนด์, เอ็มเจ; เลสลี่ KE; ชารีฟ ส.; แวนแคมเปน, ซีแอล; แวกเตอร์, แอล.; Wilkie, BN การเปลี่ยนแปลงการตอบสนองของภูมิคุ้มกันในช่วงรอบนอกและการแตกสาขาต่อสุขภาพโคนมและลูกวัว เจ. วิทยานม. 1998, 81, 585–595. [CrossRef] [PubMed]

2. วอตส์ ดีซี; เฉิง ซ.; เชาดูรี่, ว.; เฟนวิค, แมสซาชูเซตส์; ฟิทซ์แพทริค ร.; มอร์ริส ดีจี; แพตตันเจ.; Murphy, JJ สมดุลพลังงานเชิงลบเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของยีนทั่วโลกและการตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันในมดลูกของโคนมหลังคลอด ฟิสิออล. จีโนม 2552, 39, 1–13. [ครอสอ้างอิง]

3. อิงวาร์ตเซ่น, กัวลาลัมเปอร์; Moyes, K. โภชนาการ การทำงานของระบบภูมิคุ้มกัน และสุขภาพของโคนม สัตว์ 2013, 7 (ภาคผนวก 1), 112–122. [CrossRef] [PubMed]

4. เคห์ลี เมน จูเนียร์; น็อนเนคเก้, บีเจ; Roth, JA การเปลี่ยนแปลงในการทำงานของนิวโทรฟิลของวัวในช่วงระยะเวลาตั้งครรภ์ เช้า. เจ.สัตวแพทย์. ความละเอียด 1989, 50, 207–214. [ผับเมด]

5. สเตอร์ ค.; ลอยเซลล์ พิธีกร; Lacasse, P. ผลของความเข้มข้นของกรดไขมัน nonesterified ในซีรัมหลังการคลอดต่อการทำงานของเซลล์ภูมิคุ้มกันของวัว เจ. วิทยานม. 2012, 95, 708–717. [CrossRef] [PubMed]

6. ลาเซเทรา น.; สกาเลีย ดี.; เบอร์นาบุชชี, ยู.; รอนชิ บ.; ปิรัซซี่ ด.; Nardone, A. Lymphocyte ทำงานในวัวที่มีสภาวะมากเกินไปในช่วงการคลอด เจ. วิทยานม. 2005, 88, 2010–2016. [CrossRef] [PubMed]

7. น็อนเนคเก้ บีเจ; คิมูระ, เค.; กอฟฟ์ เจพี; Kehrli, ME, Jr. ผลของต่อมน้ำนมต่อความสามารถในการทำงานของประชากรเม็ดเลือดขาวโมโนนิวเคลียร์ในเลือดจากวัวที่อยู่รอบนอก เจ. วิทยานม. 2003, 86, 2359–2368 [ครอสอ้างอิง]

8. ฮาเบล เจ.; Sundrum, A. การจัดสรรกลูโคสไม่ตรงกันระหว่างหน้าที่ของชีวิตที่แตกต่างกันในช่วงเปลี่ยนผ่านของโคนม สัตว์ 2020, 10, 1028. [CrossRef]

9. ฮอร์สต์ อีเอ; ควิเดรา, SK; Baumgard, LH การทบทวนที่ได้รับเชิญ: อิทธิพลของการกระตุ้นภูมิคุ้มกันต่อสุขภาพและประสิทธิภาพของวัวที่เปลี่ยนแปลง - การประเมินที่สำคัญของหลักคำสอนแบบดั้งเดิม เจ. วิทยานม. 2021, 104, 8380–8410. [ครอสอ้างอิง]

10. วอตส์ ดีซี; เบกเกอร์เอฟ.; บูจโจตติ, ล.; โครว์, แมสซาชูเซตส์; เฟอร์ริส, ค.; โฟลเดอร์, L.; เกรเล็ต, ค.; โฮสเตน ม.; อิงวาร์ตเซ่น, กัวลาลัมเปอร์; มาร์ชิเตลลี, ค.; และคณะ ความสัมพันธ์ระหว่างความเข้มข้นของการไหลเวียนของ IGF-1 สถานะโรค และเม็ดเลือดขาวในโคนมที่ให้นมในระยะแรก สัตว์เคี้ยวเอื้อง 2021, 1, 147–177. [ครอสอ้างอิง]

11. ดิเมโล ส.; เบอร์เกเนอร์, AV; กราเลิร์ต เจ.; Hess, C. T-cell เมแทบอลิซึมที่ควบคุมการเปิดใช้งาน, การแพร่กระจายและการสร้างความแตกต่าง; มุมมองแบบโมดูลาร์ วิทยาภูมิคุ้มกัน 2017, 150, 35–44 [CrossRef] [PubMed]

12. ลอฟตัส, ริงกิต; Finlay, DK Immunometabolism: เมแทบอลิซึมของเซลล์จะเปลี่ยนตัวควบคุมภูมิคุ้มกัน เจ. ไบโอล. เคมี. 2016, 291, 1–10. [CrossRef] [PubMed]

13. บาวแมน เดลาแวร์; Currie, WB การแบ่งสารอาหารระหว่างตั้งครรภ์และให้นมบุตร: การทบทวนกลไกที่เกี่ยวข้องกับสภาวะสมดุลและสภาวะสมดุล เจ. วิทยานม. 1980, 63, 1514–1529. [CrossRef] [PubMed]

14. Drackley รางวัลนักวิชาการมูลนิธิ JK ADSA ชีววิทยาของโคนมในช่วงเปลี่ยนผ่าน: ขอบเขตสุดท้าย? เจ. วิทยานม. 1999, 82, 2259–2273. [CrossRef] [PubMed]

15. จับบูร์ HN; ฝ่ายขาย เคเจ; คาตาลาโน, ถ.; นอร์แมน JE วิถีทางการอักเสบในสุขภาพและโรคการเจริญพันธุ์ของสตรี การทำซ้ำ 2009, 138, 903–919 [ครอสอ้างอิง]

16. ปาสคอตตินี โอบี; LeBlanc, SJ การปรับการทำงานของระบบภูมิคุ้มกันในเยื่อบุมดลูกของวัว Theriogenology 2020, 150, 193–200. [ครอสอ้างอิง]

17. เชลดอน IM; ลูอิส จีเอส; เลอบลังค์ ส.; Gilbert, RO การกำหนดโรคมดลูกหลังคลอดในโค วิทยาวิทยา 2549, 65, 1516–1530 [ครอสอ้างอิง]

18. Kuhla, B. รีวิว: ไซโตไคน์ที่ทำให้เกิดการอักเสบและการอักเสบของไฮโปทาลามัส: ผลกระทบจากการรับประทานอาหารที่ไม่เพียงพอของโคนมที่เปลี่ยนผ่าน สัตว์ 2020, 14, s65–s77 [ครอสอ้างอิง]

19. อิงวาร์ทเซ่น, กัวลาลัมเปอร์; Moyes, KM ปัจจัยที่เอื้อต่อการกดภูมิคุ้มกันในโคนมในช่วงระยะคลอด ญี่ปุ่น เจ.สัตวแพทย์. ความละเอียด 2015, 63 (ภาคผนวก 1), S15–S24.

20. วอตส์ ดีซี; เฉิง ซ.; ซาลาวาตี ม.; บูจโจตติ, ล.; ทาเคดะ, เอช.; ถังล.; เบกเกอร์เอฟ.; อิงวาร์ทเซ่น, KI; เฟอร์ริส, ค.; โฮสเตน ม.; และคณะ ความสัมพันธ์ระหว่างรูปแบบเมตาบอลิซึมและการแสดงออกของยีนในตับและเม็ดเลือดขาวของโคนมในระยะให้นมบุตร เจ. วิทยานม. 2021, 104, 3596–3616. [ครอสอ้างอิง]

21. ปิเนโด ป.; Melendez, P. ความผิดปกติของตับที่เกี่ยวข้องกับความไม่สมดุลของการเผาผลาญในโคนม สัตวแพทย์ คลินิก. น.แอม อาหารแอนิเมชั่น. การปฏิบัติ 2022, 38, 433–446. [CrossRef] [PubMed]

22. เฟนวิค, แมสซาชูเซตส์; ฟิทซ์แพทริค ร.; เคนนี ดา; ดิสกิน, มก.; แพตตันเจ.; เมอร์ฟี่ เจเจ; Wathes, DC ความสัมพันธ์ระหว่างสมดุลพลังงานเชิงลบ (NEB) และการควบคุม IGF ในตับของโคนมที่ให้นมบุตร ในประเทศ. แอนิเมชั่น. เอ็นโดคริโนล 2551, 34, 31–44. [CrossRef] [PubMed]

23. โคบายาชิ ย.; บอยด์ ซีเค; แบร็คเคน ซีเจ; แลมเบอร์สัน, ดับบลิวอาร์; ไคส์เลอร์, DH; Lucy, MC ตัวรับฮอร์โมนการเจริญเติบโตที่ลดลง (GHR) กรดไรโบนิวคลีอิกในตับของวัวที่อยู่รอบนอกมีสาเหตุมาจากการควบคุม GHR 1A ที่ลดลงโดยเฉพาะซึ่งสัมพันธ์กับปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลินที่ลดลง I. ต่อมไร้ท่อ 1999, 140, 3947–3954 [ครอสอ้างอิง]

24. ควิเดรา, SK; ฮอร์สท์, อีเอ; อาบูจามีห์ ม.; มายอร์กา อีเจ ; เฟอร์นันเดซ เอ็มวี; Baumgard, LH ความต้องการกลูโคสของระบบภูมิคุ้มกันที่กระตุ้นในการให้นมวัวโฮลชไตน์ เจ. วิทยานม. 2017, 100, 2360–2374. [CrossRef] [PubMed]

25. เฉิง ซ.; ไวลี, อ.; เฟอร์ริส, ค.; อิงวาร์ตเซ่น, กัวลาลัมเปอร์; วอตส์ ดีซี; Gplus, EC ผลของอาหารและระดับกรดไขมันที่ไม่ผ่านกระบวนการต่อโปรไฟล์การถอดเสียงทั่วโลกในการไหลเวียนของเซลล์โมโนนิวเคลียร์ในเลือดส่วนปลายในโคนมที่ให้นมบุตรระยะแรก เจ. วิทยานม. 2021, 104, 10059–10075. [ครอสอ้างอิง]

26. วอตส์ ดีซี; เฟนวิค ม.; เฉิง ซ.; บอร์น น.; เลเวลลิน ส.; มอร์ริส ดีจี; เคนนี่ ดี.; เมอร์ฟี่ เจ.; Fitzpatrick, R. อิทธิพลของสมดุลพลังงานเชิงลบต่อวงจรและภาวะเจริญพันธุ์ในโคนมที่ให้ผลผลิตสูง Theriogenology 2007, 68 (ภาคผนวก 1), S232–S241 [ครอสอ้างอิง]

27. ซานโตส, เจนัว; บิซินอตโต้ อาร์เอส; Ribeiro กลไก ES ช่วยลดภาวะเจริญพันธุ์ในโคนมรูปวงรี การสืบพันธุ์ 2016, 86, 254–262 [ครอสอ้างอิง]

28. ปาสคอตตินี โอบี; ลีรอย เจ.; Opsomer, G. Maladaptation ต่อช่วงการเปลี่ยนแปลงและผลที่ตามมาต่อความอุดมสมบูรณ์ของโคนม ทำซ้ำ ดอม. แอนิเมชั่น. 2022, 57 (ภาคผนวก 4), 21–32. [ครอสอ้างอิง]

29. ลีรอย เจแอล; วาลค์เอ็กซ์, SD; จอร์เดนส์, ล.; เดอบี้ เจ.; เดสเม็ต, กัวลาลัมเปอร์; แวน โฮค, วี.; บริตต์ เจเอช; มารี, WF; Bols โภชนาการ PE และสุขภาพเมตาบอลิซึมของมารดาที่เกี่ยวข้องกับคุณภาพของโอโอไซต์และเอ็มบริโอ: มุมมองเชิงวิพากษ์เกี่ยวกับสิ่งที่เราเรียนรู้จากแบบจำลองโคนม ทำซ้ำ เฟอร์ทิล นักพัฒนา 2015, 27, 693–703. [ครอสอ้างอิง]

30. คอฟฟีย์ ส.ส.; ฮิกกี้ เจ.; Brotherstone, S. ลักษณะทางพันธุกรรมของการเจริญเติบโตของโคนม Holstein-Friesian ตั้งแต่แรกเกิดถึงวัยเจริญพันธุ์ เจ. วิทยานม. 2549, 89, 322–329. [ครอสอ้างอิง]

31. วอตส์ ดีซี; เฉิง ซ.; บอร์น น.; เทย์เลอร์ วีเจ; คอฟฟี่ ส.ส. ; Brotherstone, S. ความแตกต่างระหว่างโคนม primiparous และ multiparous ในความสัมพันธ์ระหว่างลักษณะการเผาผลาญ ผลผลิตน้ำนม และคะแนนสภาพร่างกายในระยะตั้งครรภ์ ในประเทศ. แอนิเมชั่น. เอ็นโดคริโนล 2550, 33, 203–225. [CrossRef] [PubMed]

32. ลิตเติ้ล เมกะวัตต์; ไวลี, ARG; โอคอนเนลล์ เนแบรสกา; เวลส์ นพ.; เกรเล็ต, ค.; เบลล์, เอ็มเจ; กอร์ดอน, อ.; Ferris, CP ผลกระทบทางภูมิคุ้มกันของการเปลี่ยนแปลงระดับการรวมความเข้มข้นในอาหารที่ใช้หญ้าหมักเพื่อให้นมวัวโฮลสไตน์ฟรีเซียนในระยะเริ่มแรก สัตว์ 2019, 13, 799–809. [CrossRef] [PubMed]

33. บูจโจตติ ล.; เฉิง ซ.; ซาลาวาตี ม.; วอตส์ ซีดี; จีโนไทป์บวกสิ่งแวดล้อม, C. การเปรียบเทียบทรานสคริปโตมีในการหมุนเวียนของเม็ดเลือดขาวในการให้นมในช่วงแรกระหว่างวัวกลุ่มแรกและวัวหลายตัวให้หลักฐานสำหรับการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องกับอายุ บีเอ็มซี จีนอม 2021, 22, 693. [CrossRef] [PubMed]

34. คาร์โดโซ เอฟซี; คาลส์เชอร์, KF; Drackley บทวิจารณ์ JK Symposium: กลยุทธ์ด้านโภชนาการเพื่อสุขภาพที่ดีขึ้น การผลิต และภาวะเจริญพันธุ์ในช่วงเปลี่ยนผ่าน เจ. วิทยานม. 2020, 103, 5684–5693. [CrossRef] [PubMed]

35 Ingvartsen, KL การให้อาหารและโรคที่เกี่ยวข้องกับการจัดการในวัวช่วงเปลี่ยนผ่าน แอนิเมชั่น. ฟีดวิทย์ เทคโนโลยี 2549, 126, 175–213. [ครอสอ้างอิง]

36. ชิงช้าสวรรค์ ซีพี; กอร์ดอน เอฟเจ; แพตเตอร์สัน ดี.ซี.; เมย์น ซีเอส; McCoy, MA การเปรียบเทียบระยะสั้นของประสิทธิภาพของระบบการผลิตนมที่ใช้ทุ่งหญ้าสี่ระบบสำหรับโคนมที่ออกลูกในฤดูใบไม้ร่วง วิทยาศาสตร์พืชอาหารสัตว์หญ้า 2546, 58, 8. [CrossRef]

37. เทย์เลอร์ วีเจ; เฉิง ซ.; ปุชปากุมาร, PG; บีเวอร์ เดลาแวร์; Wathes, DC ความสัมพันธ์ระหว่างความเข้มข้นในพลาสมาของปัจจัยการเจริญเติบโตคล้ายอินซูลิน-I ในโคนมกับภาวะเจริญพันธุ์และผลผลิตน้ำนม สัตวแพทย์ รับ 2004, 155, 583–588. [ครอสอ้างอิง]

38 LeBlanc, SJ ปฏิกิริยาของการเผาผลาญ การอักเสบ และสุขภาพระบบสืบพันธุ์ในระยะหลังคลอดในโคนม ทำซ้ำ ดอม. แอนิเมชั่น. 2012, 47 (ภาคผนวก 5), 18–30. [ครอสอ้างอิง]

39. ม.ไวลาติ-ริโบนี.; ม.กัญวาล.; บุลการี, โอ.; ไมเออร์ ส.; บาทหลวง เนวาดา; เบิร์ค, CR; เคย์ เจเค; แมคโดกัลล์ ส.; มิทเชล นพ.; วอล์คเกอร์, ซีจี; และคณะ คะแนนสภาพร่างกายและระนาบของโภชนาการก่อนคลอดส่งผลต่อตัวควบคุมการถอดรหัสเนื้อเยื่อไขมันของการเผาผลาญและการอักเสบในโคนมที่แทะเล็มในช่วงระยะเวลาการเปลี่ยนแปลง เจ. วิทยานม. 2016, 99, 758–770. [ครอสอ้างอิง]

40. เทรวิซี อี.; Minuti, A. การประเมินการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติในวัวที่อยู่รอบนอก ความละเอียด สัตวแพทย์ วิทยาศาสตร์ 2018, 116, 47–54. [ครอสอ้างอิง]

41. ดรูเกอร์ เซาท์แคโรไลนา; ซิกซิก ร.; ฟาน สตราเตน, ม.; โกเชน ต.; เคดมี ม.; Raz, T. การวินิจฉัยโรคเยื่อบุโพรงมดลูกอักเสบทางเซลล์วิทยาในโคนมแบบไพรมิพารัสกับโคนมหลายตัว เจ. วิทยานม. 2022, 105, 665–683. [CrossRef] [PubMed]

42. ฮัมเซห์-คอนญาสเซ่, เอช.; ลาราดี ส.; ออสเซเลียร์ เจซี; คอนญัสเอฟ.; Garraud, O. Amotosalen-HCl-UVA การลดการเกิดโรคไม่ได้เปลี่ยนแปลงการเผาผลาญภายหลังการจัดเก็บของลิแกนด์ CD40 ที่ละลายได้, Ox40 ลิแกนด์ และอินเตอร์คีคิน-27 ซึ่งเป็นไซโตไคน์ที่โดยทั่วไปเกี่ยวข้องกับเหตุการณ์ไม่พึงประสงค์ที่ร้ายแรง ว็อกซ์ซัง. 2015, 108, 205–207. [CrossRef] [PubMed]

43. เดอ กรีฟ อ.; ซาดอกส์ ร.; รูลส์, ล.; นักบุญ ม.; เหงียน, TK; ดาวนิ่ง, อ.; เรเบล เจ.; น.สตอกโฮเฟ-ซูร์วีเดิน.; Smith, H. การตอบสนองของโฮสต์ในช่วงแรกในต่อมน้ำนมหลังจากการทดลอง Streptococcus uberis ในโคสาว เจ. วิทยานม. 2013, 96, 3723–3736. [CrossRef] [PubMed]

44. เฉิง ซ.; ชอฮาน, ล.; แบร์รี่ ที่; อบูดูเรยีมู, A.; โอเกฮิโอฟอร์, CF; เฉินเอ็กซ์.; Wathes, DC การติดเชื้อไวรัสท้องร่วงจากไวรัสเฉียบพลันในวัวยับยั้งการแสดงออกของยีนที่กระตุ้นด้วย interferon tau ในเยื่อบุโพรงมดลูกของวัว ไบโอล ทำซ้ำ 2017, 96, 1142–1153. [ครอสอ้างอิง]

45. Schoggins, JW Interferon-Stimulated Genes: พวกมันทำอะไรกันแน่? แอนนู. สาธุคุณวิรัล. 2019, 6, 567–584. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Ohto, U. กลไกการเปิดใช้งานและการควบคุมของตัวรับที่คล้าย NOD ขึ้นอยู่กับชีววิทยาเชิงโครงสร้าง ด้านหน้า. อิมมูนอล. 2022, 13, 953530. [CrossRef]

47. เฉิง ซ.; ปาลมา-เวรา ส.; บูจโจตติ, ล.; ซาลาวาตี ม.; เบกเกอร์เอฟ.; เวอร์ลิง ดี.; วอตส์ ดีซี; Gplus, EC การวิเคราะห์ Transcriptomic ของเม็ดเลือดขาวหมุนเวียนที่ได้รับระหว่างการฟื้นตัวจากโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกที่เกิดจาก Escherichia coli ในโคนม Holstein สัตว์ 2022, 12, 2146. [CrossRef]

48. ลอเรีย ว.; ดาโต๊ะ ฉัน.; กราเซียนี ฟ.; Biasucci, LM Myeloperoxidase: ตัวชี้วัดทางชีวภาพใหม่ของการอักเสบในโรคหัวใจขาดเลือดและโรคหลอดเลือดหัวใจเฉียบพลัน คนไกล่เกลี่ย อาการอักเสบ 2008, 2008, 135625. [CrossRef]

49. โอลิเวรา อ.; บีเวน, แมสซาชูเซตส์; Metcalfe, DD Mast Cell ส่งสัญญาณถึงความสำคัญของสุขภาพและโรค เจ.คลินิกภูมิแพ้. อิมมูนอล. 2018, 142, 381–393. [ครอสอ้างอิง]

50. ดิกคินสัน เซาท์อีสต์; กริฟฟิน, บริติชแอร์เวย์; เอลมอร์, MF; ครีส-แอนเดอร์สัน, ล.; เอลมอร์, เจบี; ไดซ์, PW; ร็อดนิง, เอสพี; โปรไฟล์ Biase, FH Transcriptome ในเซลล์เม็ดเลือดขาวส่วนปลาย ณ เวลาที่ผสมเทียมจะแยกแยะวัวสาวที่มีศักยภาพในการเจริญพันธุ์ต่างกัน บีเอ็มซี จีนอม 2018, 19, 129. [CrossRef]

51. ฟาน มูลเดอร์ เอฟ.; แวน คอปเปอร์โนล ส.; บอร์ลู เจ.; รินัลดี ม.; หลี่ ร.ว.; เชียรส์, เค.; แวน เดน บรอค, ว.ว.; เวอร์ครูส เจ.; แคลร์บอยต์, อี.; Geldhof, P. Granule exocytosis ของ granulysin และ granzyme B เป็นกลไกสำคัญที่มีศักยภาพในการสร้างภูมิคุ้มกันที่เกิดจากวัคซีนในโคต่อไส้เดือนฝอย Ostertagia ostertagi ติดเชื้อ ภูมิคุ้มกัน 2013, 81, 1798–1809. [CrossRef] [PubMed]

52. เทย์เลอร์ เจแอล; สีน้ำตาล, BL พื้นฐานเชิงโครงสร้างสำหรับการควบคุมความผิดปกติของการสังเคราะห์กรดอะมิโนเลวูลินิกในโรคของมนุษย์ เจ. ไบโอล. เคมี. 2022, 298, 101643. [CrossRef] [PubMed]

53. ตราปานี เจเอ; Sutton, VR Granzyme B: ฟังก์ชั่น Pro-apoptotic, ต้านไวรัสและต้านมะเร็ง สกุลเงิน ความคิดเห็น. อิมมูนอล. 2003, 15, 533–543. [CrossRef] [PubMed]

54. แคมปานีล ก.; บารูเซลลี, PS; ลิโมน, อ.; D'Occhio, MJ การกระทำเฉพาะที่ของไซโตไคน์และเซลล์ภูมิคุ้มกันในการสื่อสารระหว่างแนวคิดและมดลูกในช่วงเวลาวิกฤตของการพัฒนาตัวอ่อนระยะแรก การยึดติด และการฝังตัว - ผลกระทบต่อการอยู่รอดของตัวอ่อนในโค: การทบทวน Theriogenology 2021, 167, 1–12. [CrossRef] [PubMed]

55. บูการ์น น.; ไวเยอร์ส บี.; เดสเม็ต, เอสเจ; เดกเกอร์ เจ.; เรย์ DW; สเตลส์ บ.; De Bosscher, K. การกระทำระดับโมเลกุลของ PPARalpha ในการเผาผลาญไขมันและการอักเสบ เอ็นโดแคร์ ฉบับที่ 2018, 39, 760–802. [ครอสอ้างอิง]

56. โซโบเลฟ, วีวี; เชปูรินา อี.; คอร์ซุนสกายา, IM; เก็ปเป้ นา; เชบีเชวา, SN; โซโบเลวา เอจี; Mezentsev, A. บทบาทของปัจจัยการถอดรหัส PPAR-แกมมาในการเกิดโรคสะเก็ดเงิน เซลล์ผิวหนัง และเซลล์ภูมิคุ้มกัน นานาชาติ เจ. โมล. วิทยาศาสตร์ 2022, 23, 9708. [CrossRef]

57. ซ่ง ส.; แอตเทีย RR; คอนนอตัน ส.; นีเซน มิชิแกน; เนส, GC; อีแลม, MB; โฮริ RT; คุก, จอร์เจีย; Park, EA Peroxisome proliferator-active receptor alpha (PPARalpha) และ PPAR gamma coactivator (PGC-1alpha) กระตุ้นให้เกิดคาร์นิทีน พาลมิโตอิลทรานสเฟอเรส IA (CPT-1A) ผ่านทางองค์ประกอบของยีนอิสระ โมล เซลล์ เอ็นโดคริโนล 2010, 325, 54–63. [ครอสอ้างอิง]

58. ซิอูเซนโควา โอ.; Plutzky, J. การเผาผลาญ Retinoid และการตอบสนองของตัวรับนิวเคลียร์: ข้อมูลเชิงลึกใหม่เกี่ยวกับการควบคุมการประสานงานของ PPAR-RXR complex กุมภาพันธ์ เลตต์. 2008, 582, 32–38. [ครอสอ้างอิง]

59. เอสเพนเชด พีเจ; Hughes, AL กฎระเบียบของการสังเคราะห์สเตอรอลในยูคาริโอต แอนนู. สาธุคุณเจเนท. 2550, 41, 401–427. [ครอสอ้างอิง]

60. ฟาน เมียร์ ก.; โวลเกอร์ ดร.; Feigenson, GW Membrane lipids: พวกเขาอยู่ที่ไหนและประพฤติตนอย่างไร แนท. สาธุคุณโมล เซลล์ ไบโอล 2008, 9, 112–124. [ครอสอ้างอิง]

61. ม.อ.; อากีลาร์-บัลเลสเตอร์ เอร์เรโร-เซร์เบรา, อ.; วินูเอ, อ.; มาร์ติเนซ-เฮอร์วาส ส.; Gonzalez-Navarro, H. ผลกระทบของการเผาผลาญคอเลสเตอรอลในการทำงานของเซลล์ภูมิคุ้มกันและหลอดเลือด สารอาหาร 2020, 12, 2021 [CrossRef] [PubMed]

62. มาเมโดวา แอลเค; หยวน, ก.; ลอดิก, แอนโธนี; เฟลมมิง, SD; มาเชค, DG; จำเป็นต้องมีการส่งสัญญาณ Bradford, BJ Toll-like receptor 4 สำหรับการเหนี่ยวนำการแสดงออกของยีน gluconeogenic โดย palmitate ในเซลล์มะเร็งตับของมนุษย์ เจ. นูทร. ไบโอเคม 2013, 24, 1499–1507. [CrossRef] [PubMed]

63. โซโต-เฮเรเดโร ก.; โกเมซ เด ลาส เฮราส, MM; กาบันเด-โรดริเกซ อี.; โอลเลอร์ เจ.; Mittelbrunn, M. Glycolysis-ผู้เล่นหลักในการตอบสนองต่อการอักเสบ ก.พ. เจ. 2020, 287, 3350–3369. [CrossRef] [PubMed]

64. โคมินสกี้ ดีเจ; แคมป์เบลล์ เอลเอล; Colgan, SP การเปลี่ยนแปลงทางเมตาบอลิซึมของภูมิคุ้มกันและการอักเสบ เจ. อิมมูนอล. 2010, 184, 4062–4068. [ครอสอ้างอิง]

65. อาฟาคาน นิวเจอร์ซีย์; ยัง, ที่; พีน่า, โอม; Hancock, RE ศักยภาพในการรักษาของเปปไทด์ป้องกันโฮสต์ในการติดเชื้อที่ดื้อยาปฏิชีวนะ สกุลเงิน เภสัช Des. 2012, 18, 807–819. [ครอสอ้างอิง]

66. ออวีเนต์ ช.; Rosenstein, Y. เปปไทด์ป้องกันโฮสต์มัลติฟังก์ชั่น: เปปไทด์ต้านจุลชีพซึ่งเป็นผู้เล่นขนาดเล็ก แต่ใหญ่ในภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและการปรับตัว ก.พ. เจ. 2009, 276, 6497–6508. [ครอสอ้างอิง]

67. ฮิลชี่ อลาบามา; เวิร์ธ, เค.; Hancock, RE การปรับภูมิคุ้มกันโดยเปปไทด์การป้องกันโฮสต์ประจุบวก (ยาต้านจุลชีพ) หลายแง่มุม แนท. เคมี. ไบโอล 2013, 9, 761–768. [ครอสอ้างอิง]

68. เฉิง จ.; บูจโจตติ, ล.; ซาลาวาตี ม.; มาร์ชิเตลลี, ค.; ปาลมา-เวรา ส.; ไวลี, อ.; ทาเคดะ, เอช.; ถังล.; โครว์, แมสซาชูเซตส์; วอตส์ ดีซี; และคณะ โปรไฟล์การถอดเสียงทั่วโลกของเม็ดเลือดขาวที่หมุนเวียนในโคให้นมระยะแรกที่มีโรคเต้านมอักเสบทางคลินิกหรือไม่แสดงอาการ โมล ไบโอล ตัวแทน 2021, 48, 4611–4623. [ครอสอ้างอิง]

69. โฟลีย์ ค.; อ.ชัปวันยา.; คัลลานัน เจเจ; วิสตัน ร.; มิแรนดา-คาโซลูเอนโก ร.; ลูเจ.; ไมเยอร์, ​​WG; ลินน์ ดีเจ; โอฟาร์เรลลี ซี.; Meade, KG การวิเคราะห์แบบบูรณาการของการเปลี่ยนแปลงในระดับท้องถิ่นและระบบก่อนการพัฒนาของเยื่อบุโพรงมดลูกอักเสบทางเซลล์วิทยาหลังคลอด บีเอ็มซี จีนอม 2015, 16, 811. [CrossRef]

70. มาชาโด วีเอส; Silva, TH ภูมิต้านทานแบบปรับตัวในมดลูกหลังคลอด: การใช้วัคซีนที่เป็นไปได้เพื่อควบคุมภาวะมดลูกอักเสบ Theriogenology 2020, 150, 201–209. [ครอสอ้างอิง]

71. เลย์ เค.; ฮอฟฟ์แมน HM; คิวเบส ป.; คาสซาเทลลา, แมสซาชูเซตส์; ซิคลินสกี้, อ.; เฮดดริก ซีซี; Catz, SD Neutrophils: ข้อมูลเชิงลึกใหม่และคำถามปลายเปิด วิทยาศาสตร์ อิมมูนอล. 2018, 3, eat4579. [CrossRef] [PubMed]

72. วาห์ล เอสเอ็ม; เฟลด์แมน จีเอ็ม; McCarthy, JB ระเบียบของการยึดเกาะของเม็ดเลือดขาวและการส่งสัญญาณในการอักเสบและโรค เจ. ลอยค. ไบโอล 1996, 59, 789–796. [CrossRef] [PubMed]

73. ชูเบิร์ต เค.; โพลเต้, ต.; โบนิช, ยู.; ชาเดอร์ ส.; โฮลแทปเพลส์ ร.; ฮิลเดอแบรนดท์, จี.; เลห์มันน์ เจ.; ไซมอน เจซี; แอนเดเรกก์, สห.; Saalbach, A. Thy-1 (CD90) ควบคุมการขยายตัวของเม็ดเลือดขาวในระหว่างการอักเสบ ยูโร เจ. อิมมูนอล. 2011, 41, 645–656. [CrossRef] [PubMed]

74. ดรายมุลเลอร์ ดี.; พรูสเมเยอร์ เจ.; ชูมัคเกอร์ เจ.; เฟลเลนดอร์ฟ ส.; เฮสส์ เอฟเอ็ม; ไซเฟิร์ต, อ.; บาเบนเดรเยอร์, ​​อ.; บาร์ตช เจดับบลิว; Ludwig, A. metalloproteinase ADAM8 ส่งเสริมการสรรหาเม็ดเลือดขาว ในหลอดทดลอง และในการอักเสบของปอดเฉียบพลัน เช้า. เจ. ฟิสิออล. เซลล์ปอด. โมล ฟิสิออล. 2017, 313, L602–L614. [ครอสอ้างอิง]

75. โคสเตลนิค, KB; บาร์คเกอร์, อ.; ชูลทซ์, ซี.; มิทเชลล์, TP; ราจีฟ, วี.; ไวท์, ไอเจ; ออร์รันด์-ไลออนส์, ม.; นูร์ชาร์ก ส.; คูทิลลัส ป.; Nightingale, TD การค้ามนุษย์แบบไดนามิกและการหมุนเวียนของ JAM-C เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการย้ายเซลล์บุผนังหลอดเลือด กรุณา ไบโอล. 2019, 17, e3000554. [CrossRef] [PubMed]

76. สติลลี ร.; ฟารุก เอสเอ็ม; กอร์ดอน เจอาร์; Stadnyk, AW ความสำคัญเชิงฟังก์ชันเบื้องหลังการแสดงตัวรับ IL-8 สองประเภทบน PMN เจ. ลอยค. ไบโอล 2552, 86, 529–543 [ครอสอ้างอิง]

77. บูตัน AH; ริกกินส์ RB; Bruce-Staskal, PJ ฟังก์ชั่นของอะแดปเตอร์โปรตีน Cas: การบรรจบกันของสัญญาณและการกำหนดการตอบสนองของเซลล์ อองโคยีน 2001, 20, 6448–6458 [ครอสอ้างอิง]

78. เฉิน เอ็กซ์.; เฉิง ซ.; จาง ส.; เวอร์ลิง ดี.; Wathes, DC ผสมผสานการศึกษาความสัมพันธ์ทั่วทั้งจีโนมและการวิเคราะห์ข้อมูลการแสดงออกของยีนที่แตกต่างกัน ระบุยีนที่คาดว่าจะส่งผลต่อโรคเต้านมอักเสบที่เกิดจากเชื้อโรค 2 ชนิดในโคนม เปิด เจ.แอนิเมชั่น. วิทยาศาสตร์ 2015, 5, 358–393. [ครอสอ้างอิง]

79. ช้าง GW; เซียว CC; เป็ง วายเอ็ม; วิเอรา บรากา, เอฟเอ; ครักเทน นา; เรมเมอร์สวาล, EB; ฟาน เดอ การ์ด, นพ.; สเตราส์เบิร์ก อาร์.; โคนิก จีเอ็ม; โคสเตนิส อี.; และคณะ รีเซพเตอร์ที่ควบคู่กับโปรตีน G แบบยึดติด GPR56/ADGRG1 คือรีเซพเตอร์แบบยับยั้งในเซลล์ NK ของมนุษย์ เซลล์ ตัวแทน 2016, 15, 1757–1770 [ครอสอ้างอิง]

80. บิ เจ.; Tian, ​​Z. NK ความผิดปกติของเซลล์และการบำบัดด้วยภูมิคุ้มกันจุดตรวจ ด้านหน้า. อิมมูนอล. 2019, 10, 1999. [CrossRef]

81. มินูติ อ.; กัลโล, อ.; โลเปรียโต, วี.; บรูสชิ ส.; พิคซิโอลี-แคปเปลลี เอฟ.; อุบลดี โอ.; Trevisi, E. ผลของขนาดครอกต่อการเผาผลาญก่อนคลอดและโปรไฟล์กรดอะมิโนในกระต่าย สัตว์ 2020, 14, 2109–2115. [CrossRef] [PubMed]

82. ครุกเคนเดน, แมสซาชูเซตส์; มอยส์ กม.; คุห์น-เชอร์ล็อค บ.; เลห์เนิร์ต, เค.; วอล์คเกอร์, ซีจี; ลอร์ เจเจ; มิทเชล นพ.; เมอร์เรย์, อ.; ดุคคิปาติ, VSR; ไวลาติ-ริโบนี, ม.; และคณะ การวิเคราะห์การถอดเสียงของนิวโทรฟิลที่หมุนเวียนในโคนมเล็มหญ้าบริเวณรอบข้างที่มีความเครียดทางเมตาบอลิซึม เจ. วิทยานม. 2019, 102, 7408–7420. [CrossRef] [PubMed]

83. ชาร์มา เจเอ็น; อัล-ออมราน, อ.; Parvathy, SS บทบาทของไนตริกออกไซด์ในโรคอักเสบ เภสัชวิทยาอักเสบ 2550, 15, 252–259 [CrossRef] [PubMed]

84. มาร์ติโน ม.ร.; กูเตียร์เรซ-อากีลาร์, ม.; ยี่ NKH; ลุตเกวิตต์, เอเจ; นักร้อง เจเอ็ม; แมคคอมมิส, แคนซัส; เฟอร์กูสัน ด.; ลิส KHH; โยชิโนะ เจ.; เรนเคเมเยอร์, ​​เอ็มเค; และคณะ การระงับอะลานีนทรานซามิเนส 2 ในตับที่เป็นเบาหวานจะลดระดับน้ำตาลในเลือดสูงโดยการลดการสร้างกลูโคโนเนซิสจากกรดอะมิโน ตัวแทนเซลล์ 2022, 39, 110733. [CrossRef] [PubMed]

85. สูง AR; Yvan-Charvet, L. Cholesterol, การอักเสบและภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ แนท. สาธุคุณอิมมูนอล. 2015, 15, 104–116. [ครอสอ้างอิง]

86 วอทส์ ด.; เฉิง ซ.; มารี, ว.; Foouladi-Nasht, A. กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนและภาวะเจริญพันธุ์ในสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเพศหญิง: การอัปเดต CABI Rev. 2013, 8, 1–14. [ครอสอ้างอิง]

87. อะลิปูร์ อ.; ฟาน ออสสตรอม, เอเจ; อิซราเอลจาน อ.; เวอร์เซย์เดน ค.; คอลลินส์ เจเอ็ม; เฟรน, KN; พลอคเกอร์, ดับบลิว; เอลเต้ เจดับบลิว; Castro Cabezas, M. การกระตุ้นเม็ดเลือดขาวโดยไลโปโปรตีนที่อุดมด้วยไตรกลีเซอไรด์ หลอดเลือด. ลิ่มเลือดอุดตัน วาสค์ ไบโอล 2008, 28, 792–797. [ครอสอ้างอิง]

88. คาสตอลดี อ.; มอนเตโร, ปอนด์; ฟาน ไทลิงเกน บัคเคอร์, น.; สันอิน เดลาแวร์; รานา น.; คอร์ราโด ม.; คาเมรอน น.; ฮาสเลอร์เอฟ.; มัตสึชิตะ ม.; คาปูตา ก.; และคณะ การสังเคราะห์ Triacylglycerol ช่วยเพิ่มการทำงานของการอักเสบของแมคโครฟาจ แนท. ชุมชน 2020, 11, 4107. [CrossRef]

89. เบลล์, AW การควบคุมการเผาผลาญสารอาหารอินทรีย์ระหว่างการเปลี่ยนจากการตั้งครรภ์ช่วงปลายไปสู่การให้นมบุตรเร็ว เจ.แอนิม. วิทยาศาสตร์ 1995, 73, 2804–2819. [ครอสอ้างอิง]

90. มัวร์ แดปซู; Varga, G. BUN และ MUN: การทดสอบไนโตรเจนยูเรียในโคนม บทสรุป 1996, 18, 712–720

91. วอตส์ ดีซี; บอร์น น.; เฉิง ซ.; แมนน์, จีอี; เทย์เลอร์ วีเจ; Coffey, MP การวิเคราะห์ความสัมพันธ์พหุคูณของโปรไฟล์เมตาบอลิซึมและต่อมไร้ท่อที่มีภาวะเจริญพันธุ์ในโคพันธุ์แรกและหลายพันธุ์ เจ. วิทยานม. 2007, 90, 1310–1325. [CrossRef] [PubMed]

92. อาเบะ ร.; ดอนเนลลี เซาท์แคโรไลนา; เป็ง ต.; บูคาลา ร.; เมตซ์, CN เซลล์ไฟโบรไซต์ในเลือดส่วนปลาย: วิถีทางสร้างความแตกต่างและการอพยพไปยังบริเวณแผล เจ. อิมมูนอล. 2001, 166, 7556–7562. [CrossRef] [PubMed]

93. ชไรเออร์ ส.; Triampo, W. เลือดหมุนเวียนประชากรเซลล์หายาก มันคืออะไรและมีประโยชน์อะไร? เซลล์ 2020, 9, 790 [CrossRef] [PubMed]

94. ลินน์ อลาสก้า; ยานาส, IV; Bonfield, W. Antigenicity และภูมิคุ้มกันของคอลลาเจน เจ. ไบโอเมด. เมเตอร์. ความละเอียด 2004, 71, 343–354. [ครอสอ้างอิง]

95. โรช เจอาร์; เบิร์ค, CR; ครุกเคนเดน, แมสซาชูเซตส์; ไฮเซอร์, อ.; ลอร์ เจแอล; ไมเออร์ ส.; มิทเชล นพ.; ฟิน, ซีวีซี; Turner, SA การเจริญพันธุ์และการเปลี่ยนแปลงของโคนม ทำซ้ำ เฟอร์ทิล นักพัฒนา 2017, 30, 85–100. [ครอสอ้างอิง]

96. กัลเวา, KN; ฟลามินิโอ, เอ็มเจ; บริทติน, เอสบี; สเปิร์ม ร.; ฟราก้า ม.; ไคเซต้า, ล.; ริชชี่ อ.; การ์ด, ซีแอล; บัตเลอร์ ดับบลิวอาร์; Gilbert, RO ความสัมพันธ์ระหว่างโรคมดลูกและตัวชี้วัดของนิวโทรฟิลและสถานะพลังงานที่เป็นระบบในการให้นมวัวโฮลชไตน์ เจ. วิทยานม. 2010, 93, 2926–2937. [ครอสอ้างอิง]

97. ดาห์ล มิสซูรี่; มอนเซล, FP; เดอ ไวรีส์, อ.; กัลเวา, KN; ริสโก แคลิฟอร์เนีย; Hernandez, JA หลักฐานที่แสดงว่าโรคเต้านมอักเสบอาจทำให้สูญเสียการตั้งครรภ์ในโคนม: การทบทวนการศึกษาเชิงสังเกตอย่างเป็นระบบ เจ. วิทยานม. 2017, 100, 8322–8329. [ครอสอ้างอิง]

98. แฮนเซน พีเจ; โซโตพี.; Natzke, RP Mastitis และภาวะเจริญพันธุ์ในวัว - อาจเกี่ยวข้องกับการอักเสบหรือการกระตุ้นภูมิคุ้มกันในการตายของตัวอ่อน เช้า. เจ. ทำซ้ำ. อิมมูนอล. 2004, 51, 294–301. [ครอสอ้างอิง]

99. มาลินอฟสกี้ อี.; Gajewski, Z. โรคเต้านมอักเสบและความผิดปกติของการเจริญพันธุ์ในวัว พล.ต. เจ.สัตวแพทย์. วิทยาศาสตร์ 2010, 13, 555–560.

100. เอดมันสัน, เอเจ; ลีน ไอเจ; วีเวอร์, แอลดี; ฟาร์เวอร์ ต.; เว็บสเตอร์ จอร์เจีย แผนภูมิการให้คะแนนสภาพร่างกายสำหรับโคนมโฮลชไตน์ เจ. วิทยานม. 1989, 72, 11. [CrossRef]

101. ลาร์เซน ต.; รอนท์เวด, CM; อิงวาร์ตเซ่น, กัวลาลัมเปอร์; เวลส์, ล.; Bjerring, M. กิจกรรมของเอนไซม์และโปรตีนระยะเฉียบพลันในนมที่ใช้เป็นตัวชี้วัดของโรคเต้านมอักเสบเฉียบพลันที่เกิดจากเชื้อ E. coli LPS สัตว์ 2010, 4, 1672–1679 [CrossRef] [PubMed]

102. โครห์ แมสซาชูเซตส์; โฮสเตน ม.; ซาลาวาตี ม.; เกรเล็ต, ค.; โซเรนเซน มอนแทนา; วอตส์ ดีซี; ชิงช้าสวรรค์ ซีพี; มาร์ชิเตลลี, ค.; ซิกโนเรลลี เอฟ.; นาโปลิตาโน เอฟ.; และคณะ ความแปรผันระหว่างและภายในฝูงของตัวบ่งชี้ทางชีวภาพในเลือดและนมในวัวโฮลชไตน์ในการให้นมบุตรระยะแรก สัตว์ 2020, 14, 1067–1075. [CrossRef] [PubMed]

103. บูจโจตติ ล.; เฉิง ซ.; วอตส์ ดีซี; Gplus, EC การขุดการอ่านที่ไม่ได้แมปในข้อมูล RNA-Seq ของวัวเผยให้เห็นความชุกของไวรัสเริมของวัว-6 ในโคนมของยุโรป และการเปลี่ยนแปลงที่เกี่ยวข้องในฟีโนไทป์และทรานสคริปโตเมตของเม็ดเลือดขาว ไวรัส 2020, 12, 1451 [CrossRef] [PubMed]

104. เบลท์แมน, เมน; ฟอร์ด น.; เฟอร์นีย์, พี.; คาร์เตอร์ เอฟ.; โรช เจเอฟ; โลเนอร์แกน พี.; โครว์ รัฐแมสซาชูเซตส์ การศึกษาลักษณะเฉพาะของการแสดงออกของยีนในเยื่อบุโพรงมดลูกและพารามิเตอร์การเผาผลาญในโคสาวที่ให้ตัวอ่อนที่มีชีวิตหรือไม่มีชีวิตในวันที่ 7 หลังการผสมเทียม ทำซ้ำ เฟอร์ทิล นักพัฒนา 2010, 22, 987–999. [CrossRef] [PubMed]

คุณอาจชอบ