การเตรียมการแยกตัวและการทำให้บริสุทธิ์ของสารประกอบสี่ชนิดจาก Cistanches Deserticola YC Ma โดยโครมาโตกราฟีแบบต้านกระแสไฟความเร็วสูง

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

เชิงนามธรรม:

ตามขั้นตอนการเสริมคุณค่าองค์ประกอบบนคอลัมน์ซิลิกาเจล สี่ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ถูกแยกออกจาก .ได้สำเร็จCistanches deserticolaและทำให้บริสุทธิ์ด้วยโครมาโตกราฟีแบบกระแสตรงความเร็วสูงแบบเตรียมการ (HSCCC) ด้วยระบบตัวทำละลายสองเฟสที่ประกอบด้วยเอทิล อะซิเตต-n-บิวทานอล-เอธานอล-น้ำ (40:6:6:50, v/v /v/v). แอคทีโอไซด์ทั้งหมด 30.9 มก. ไอโซแอคทีโอไซด์ 13.0 มก. ไซริงกาไลด์ 12.5 มก. A 3'- -L-rhamnopyranoside และ 7.2 มก. 2'-อะซิติแลคติโอไซด์ที่มีความบริสุทธิ์สูงกว่า 95 เปอร์เซ็นต์ ตามที่กำหนดโดย HPLC-ELSD คือ ได้ในขั้นตอนเดียวแยกจาก 297 มก. ของสารสกัดจาก Cistanche Deserticolaตามลำดับ โครงสร้างของพวกเขาถูกระบุโดย HR-MS, 1H-NMR และ 13C-NMR

คำสำคัญ: โครมาโตกราฟีแบบทวนกระแสความเร็วสูง;Cistanches deserticola YC หม่า;ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์; แอคทีโอไซด์; ไอโซแอคทีโอไซด์; ไซริงกาไลด์ A 3'- -แอล-แรมโนไพราโนไซด์; 2'-อะซิติแลคติโอไซด์

บทนำ

Cistanches deserticolaYC Ma สายพันธุ์ของCistanchesที่อยู่ในวงศ์ Orobanchaceae เป็นยาจีนโบราณที่รู้จักกันดีสำหรับการรักษาภาวะไตบกพร่อง, ภาวะมีบุตรยากของเพศหญิง, ตกขาวผิดปกติ, โรคประสาทอ่อนและท้องผูกในวัยชรา [1] เป็นพืชกาฝากที่กระจายอยู่ทั่วไปทางตะวันตกเฉียงเหนือของจีน จนถึงตอนนี้ สารประกอบหลายชนิด รวมทั้ง phenylethanoid glycosides (PhGs), iridoids และ lignans ถูกแยกออกจากสปีชีส์นี้ [2] มีรายงานว่า PhGs บางตัวมีฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระ ปกป้องตับ และประสาท [3–6] อย่างไรก็ตาม ขั้นตอนการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของ PhGs นั้นยากและใช้เวลานาน นอกจากนี้ วิธีโครมาโตกราฟีแบบพหุคูณแบบคลาสสิกไม่เพียงแต่ใช้ตัวทำละลายอินทรีย์จำนวนมากเท่านั้น แต่ยังให้การกู้คืนตัวอย่างที่ต่ำกว่าอีกด้วย โครมาโตกราฟีแบบต้านกระแสไฟความเร็วสูง (HSCCC) ซึ่งเป็นเทคนิคโครมาโตกราฟีแบบแบ่งส่วนของเหลวและของเหลวที่ไม่มีการรองรับ ให้การกู้คืนตัวอย่างที่ดีเยี่ยมเมื่อเทียบกับวิธีการทั่วไปบางวิธี และมีการใช้กันอย่างแพร่หลายสำหรับการแยกและทำให้ผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติต่างๆ บริสุทธิ์ [7–9] . แม้ว่า PhGs หลายตัวได้รับการทำให้บริสุทธิ์จากCistanchesประเภทและอื่น ๆ โดย HSCCC [10–14] ไม่มีรายงานใดที่รายงานการทำให้แอกทิโอไซด์ ไอโซแอคทีโอไซด์ ไซริงกาไลด์ A 3'- -L-rhamnopyranoside และ 2'-acetylacteoside บริสุทธิ์ในระบบเดียว

ในบทความนี้ เรารายงานวิธีง่ายๆ สำหรับการแยกและทำให้บริสุทธิ์ของ PhGs สี่ตัวจาก C. deserticola สุดท้าย ได้แอคทีโอไซด์ 30.9 มก. ไอโซแอคทีโอไซด์ 13.0 มก. ไซริงกาไลด์ A 12.5 มก. 3'- -แอล-แรมโนไพราโนไซด์ และ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์ 7.2 มก. ในขั้นตอนเดียว แยกจากเศษส่วน 297 มก. ที่มีความบริสุทธิ์ 99 เปอร์เซ็นต์ 95 เปอร์เซ็นต์ 99 เปอร์เซ็นต์ และ 98 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ โครงสร้างของพวกเขามีลักษณะเฉพาะตามข้อมูลสเปกตรัม 1H- และ 13C-NMR และสเปกตรัม HR-MS โครงสร้างของ PhGs สี่ตัวที่ระบุในการศึกษานี้แสดงไว้ในรูปที่ 1

ผลลัพธ์และการอภิปราย

การวิเคราะห์ HPLC ของสารสกัดดิบ

เศษส่วนที่อุดมด้วยองค์ประกอบของสารสกัดเอ็น-บิวทาโนอิกจาก C. deserticola ถูกวิเคราะห์โดย HPLC-UV คอลัมน์ที่ใช้คือ Accurasil C18 (250 mm × 4.6 mm, id 5 μm) (Thermo-Fisher Scientific Instruments, city, state abrev, USA) เฟสเคลื่อนที่คือ methanol-water (30:70, v/v) อัตราการไหลคือ 1 มล./นาที ความยาวคลื่นของเครื่องตรวจจับตั้งไว้ที่ 254 นาโนเมตร โครมาโตแกรมของ HPLC แสดงไว้ในรูปที่ 2 พีค 1 ถึง 4 ที่สอดคล้องกับแอกทิโอไซด์ (1), ไอโซแอคทีโอไซด์ (2), ไซริงกาไลด์ A 3'- -L-rhamnopyranoside (3) และ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์ (4), ตามลำดับ

การเลือกระบบตัวทำละลายสองเฟส

การแยกสารที่ประสบความสำเร็จโดย HSCCC ส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับการเลือกระบบตัวทำละลายสองเฟสที่เหมาะสม ระบบตัวทำละลายสองเฟสถูกเลือกตามค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งพาร์ติชัน (K) ของแต่ละส่วนประกอบเป้าหมาย และช่วงที่เหมาะสมของ K ควรอยู่ที่ {{ 2}}.5 ถึง 2

ในการทดลอง ค่า K สำหรับส่วนประกอบเป้าหมายของระบบตัวทำละลายสองเฟสหลายระบบถูกแสดงไว้ในตารางที่ 1 (แม้ว่าจะสูงกว่าเล็กน้อยสำหรับพีค 4 แต่ผลลัพธ์ก็แสดงว่ายอมรับได้) ในหมู่พวกเขา เอทิลอะซิเตท–n-บิวทานอล–เอทานอล-วอเตอร์ (40:6:6:50, v/v/v/v) ให้ค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งชั้นที่เหมาะสมสำหรับสารประกอบเป้าหมาย ในที่สุด ระบบตัวทำละลายที่ประกอบด้วยเอทิลอะซิเตท–n-บิวทานอล– เอทานอล-วอเตอร์ (40:6:6:50, v/v/v/v) ถูกใช้เพื่อแยกและชำระสารประกอบสี่ตัวของ C. deserticola ดังแสดงใน รูปที่ 3 ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 2 การวิเคราะห์ HPLC ของเศษส่วนของ HSCCC แต่ละตัวเปิดเผยว่า PhG บริสุทธิ์สี่ตัว (แอกเตโอไซด์ 99 เปอร์เซ็นต์ ; ไอโซแอคทีโอไซด์ 95 เปอร์เซ็นต์ ; syringalide A 3′- -L-rhamnopyranoside 99 เปอร์เซ็นต์และ 2′- อะซิติแลคทีโอไซด์ 98 เปอร์เซ็นต์ ) สามารถหาได้จากเศษส่วนที่ยังไม่ผ่านกระบวนการใดๆ

ทดลอง

เครื่องมือ

อุปกรณ์ HSCCC ที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้คือระบบโครมาโตกราฟีแบบกระแสต้านความเร็วสูง TBE-300B (Shanghai Tauto Biotech Co., Shanghai, China) ที่มีเสาแยกคอยล์หลายชั้นเตรียมการสามชุดเชื่อมต่อกันเป็นชุด (เส้นผ่านศูนย์กลางของท่อ=2.6 มม. ปริมาตรรวม=300 มล.) และลูปตัวอย่าง 20 มล. รัศมีการหมุนหรือระยะห่างระหว่างแกนยึดกับศูนย์กลางแกนของเครื่องหมุนเหวี่ยง (แกนของเครื่องหมุนเหวี่ยง (R) คือ 5 ซม. และค่าแปรผันจาก 0.5 ที่ขั้วภายในถึง 0.8 ที่ขั้วภายนอก (=r/R โดยที่ r คือระยะห่างจากขดลวดถึงเพลาของตัวยึด) มีการใช้อุปกรณ์หมุนเวียนอุณหภูมิคงที่ HX 105 (Beijing Changliu Lab Instrument Company, Beijing, China) เพื่อควบคุมอุณหภูมิในการทดลอง ระบบ HSCCC ได้รับการติดตั้งเครื่องสูบน้ำแบบแรงดันปานกลางรุ่น TBP-5002 เครื่องตรวจจับรังสียูวีรุ่น TBP-2000 ที่ทำงานที่ 254 นาโนเมตร และเวิร์กสเตชันรุ่น V4.0 (บริษัท Jinda Biochemistry Instrument Company เซียงไฮ้ประเทศจีน).

อุปกรณ์โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง (HPLC) ที่ใช้คือระบบ Agilent 1200 ซึ่งประกอบด้วยปั๊มไบนารี G1312A, เครื่องเก็บตัวอย่างอัตโนมัติ G1329A, เครื่องตรวจจับความยาวคลื่นตัวแปร G1314A (VWD), ช่องเก็บคอลัมน์อุณหภูมิ G1316A, เครื่องดีแก๊สเซอร์ G1379B และ Agilent LC เวิร์กสเตชัน Alltech 3300 ELSD ใช้สำหรับตรวจจับความบริสุทธิ์ สเปกโตรมิเตอร์ Agilent 6520 Q-TOF และ Bruker AVANCE III 500-NMR ใช้สำหรับการระบุโครงสร้างของสารประกอบ สเปกตรัม 1H และ 13C-NMR (ที่ 500 และ 125 MHz ตามลำดับ) ถูกวัดที่อุณหภูมิห้อง (22 องศา /295.1 K)

รีเอเจนต์และวัสดุ

เอทิลอะซีเตต เอ็น-บิวทานอล และเอทานอลเป็นเกรดเชิงวิเคราะห์ และเมทานอลเป็นเกรด HPLC ตัวทำละลายทั้งหมดซื้อมาจาก Tianjin Concord Technology Company (Tianjin, China) น้ำ Milli-Q (18.2 MΩ) (Millipore, Bedford, MA, USA) ถูกใช้สำหรับสารละลายและการเจือจางทั้งหมด เก็บเหง้าของ C. deserticola จากจังหวัดมองโกเลียใน สาธารณรัฐประชาชนจีน ในเดือนมิถุนายน 2009 พืชถูกระบุโดยศาสตราจารย์ Lijuan Zhang และตัวอย่างใบสำคัญ (หมายเลข 20091001) ถูกฝากไว้ในห้องปฏิบัติการของเรา

การเตรียมตัวอย่างน้ำมันดิบ

ลำต้นเนื้อแห้งในอากาศแบบผงของ C. deserticola (1 Kg) ถูก refluxed สองครั้งด้วยเอทานอลที่เป็นน้ำ (8 L, 60 เปอร์เซ็นต์ v/v) เป็นเวลา 2 ชั่วโมงในแต่ละครั้ง สารสกัดถูกระเหยภายใต้แรงดันที่ลดลงและที่อุณหภูมิ 60 องศาจนการระเหยของเอทานอลทั้งหมด สารตกค้างถูกแขวนลอยในน้ำและสกัดอย่างต่อเนื่องสามครั้งด้วยคลอโรฟอร์ม เอทิล อะซิเตต และเอ็น-บิวทานอล ทำให้ได้สารสกัด n-บิวทาโนอิก 5.16 กรัมหลังจากการระเหยจนแห้งภายใต้แรงดันที่ลดลง จากนั้นจึงแยกสารสกัด n-butanoic บนคอลัมน์ซิลิกาเจล (200–300 เมช) โดยใช้การชะเกรเดียนต์แบบโปรเกรสซีฟ (CHCl3–MeOH, 10:1→1:1) เพื่อให้เศษส่วนแปดส่วน เศษส่วน 6 (297 มก.) ถูกใช้สำหรับการแยกและการแยก HSCCC เพิ่มเติม

การเลือกระบบตัวทำละลายสองเฟส

ระบบตัวทำละลายแบบสองเฟสถูกเลือกตามค่าสัมประสิทธิ์การแบ่งตัว (K) ของส่วนประกอบเป้าหมายในเศษส่วนของ C. deserticola ค่า K ถูกกำหนดโดยการวิเคราะห์ LC ดังต่อไปนี้: ปริมาณที่เหมาะสมของผงสกัดแบบหยาบ (เศษส่วน 6) ถูกละลายในเฟสล่างของระบบตัวทำละลายและวิเคราะห์โดย HPLC พื้นที่ของยอดเขาถูกบันทึกเป็น A1 จากนั้นเพิ่มปริมาตรที่เท่ากันของเฟสบนลงในสารละลายและผสมให้ละเอียดเพื่อให้ได้สมดุลของพาร์ติชั่น จากนั้นจึงวิเคราะห์เฟสด้านล่างโดย HPLC อีกครั้ง พื้นที่พีคหลังถูกบันทึกเป็น A2 ค่า K คำนวณตามสมการต่อไปนี้: K=(A1 − A2)/A2 [15,16]

การเตรียมระบบตัวทำละลายสองเฟสและสารละลายตัวอย่าง

ในการศึกษานี้ ระบบตัวทำละลายสองเฟสประกอบด้วยเอทิลอะซีเตต–n-บิวทานอล– เอทานอล-วอเตอร์ (40:6:6:50, v/v/v/v) สำหรับการแยก HSCCC ตัวทำละลายแต่ละชนิดถูกเติมไปยังกรวยแยกและปรับสมดุลอย่างละเอียดที่อุณหภูมิห้อง เฟสบนและเฟสล่างถูกแยกและกำจัดแก๊สโดยโซนิเคชั่นเป็นเวลา 30 นาทีก่อนใช้งานไม่นาน สารละลายตัวอย่างถูกเตรียมโดยการละลาย 297 มก. ของ Fraction 6 ใน 15 มล. ของเฟสล่างของเอทิล อะซีเตต–n-บิวทานอล–เอทานอล-วอเตอร์ (40:6:6:50, v/v/v/v)

ขั้นตอนการแยก HSCCC

HSCCC ดำเนินการดังนี้ คอลัมน์ขดหลายชั้นถูกเติมด้วยเฟสคงที่บนของสารอินทรีย์ด้านบน จากนั้นเฟสเคลื่อนที่ที่เป็นน้ำด้านล่างถูกปั๊มเข้าไปในส่วนท้ายของคอลัมน์ที่อัตราการไหล 1.5 มล./นาที และในเวลาเดียวกัน อุปกรณ์ HSCCC ถูกรันที่ความเร็วรอบ 900 รอบต่อนาที หลังจากสร้างสมดุลทางอุทกพลศาสตร์ ตามที่ระบุโดยเฟสเคลื่อนที่ที่ชัดเจนที่ทางออกส่วนท้าย (ประมาณสองชั่วโมงต่อมา ) สารละลายตัวอย่าง 15 มล. ที่มีสารสกัดหยาบ 297 มก. (ส่วนที่ 6) ถูกฉีดผ่านวาล์วหัวฉีด ของเสียของคอลัมน์ถูกเฝ้าติดตามอย่างต่อเนื่องภายใต้ 254 นาโนเมตร เศษส่วนพีคสี่ส่วนถูกเก็บตามโครมาโตแกรมและจากนั้นระเหยออกภายใต้แรงดันที่ลดลง อุณหภูมิของเครื่องถูกตั้งไว้ที่ 25 องศา

การวิเคราะห์ HPLC และการระบุเศษส่วนพีค HSCCC

เศษส่วนพีคจาก HSCCC ถูกวิเคราะห์โดย HPLC-ELSD คอลัมน์ที่ใช้คือ Accurasil C18 (250 mm × 4.6 mm, id 5 µm) เฟสเคลื่อนที่คือ methanol-water (30:70, v/v) อัตราการไหลคือ 1 มล./นาที ELSD ดำเนินการภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้: อุณหภูมิ 45 องศา , แก๊ส 1.6 ลิตร/นาที การระบุโครงสร้างของส่วนพีคของ HSCCC สี่ส่วนถูกดำเนินการโดย HR-ESI-MS, 1H และ 13C-NMR สเปกโทรสโกปี

การระบุโครงสร้าง

เศษส่วน I: HR-ESI-MS สังเกตที่ m/z 623.2001 (M−H)−, คำนวณหา C29H35O15, 623.1981 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6 Hz, CH3 ของ rhamnose), 2.79 (2H, t, J=7.5 Hz, Ar-CH 2-), 4.37 (1H, d, J=8 Hz, H-1 ของกลูโคส), 5.18 (1H, d, J=1 Hz, H{{34} } ของ rhamnose), 6.27 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 7.59 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar -CH=CH-), 6.5–7.1 (6H, อะโรมาติก H).13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.5 (C-1), 117.2 (C{{65} }), 146.2 (C-3), 144.7 (C-4), 116.4 (C-5), 121.3 (C-6), 72.4 (C- ), 36.6 (C- ), 127.7 (Caf-1), 115.3 (Caf-2), 146.9 (Caf-3), 149.8 (Caf-4), 116.6 (Caf{{) 98}}), 123.2 (Caf-6), 168.3 (Caf- ), 114.8 (Caf- ), 148.1 (Caf- ), 104.3 (G-1), 76.1 (Glc{{116} }), 81.7 (Glc-3), 70.5 (Glc-4), 76.3 (Glc-5), 62.4 (Glc-6), 103.1 (Rha{{131}) }), 72.3 (Rha-2), 72.1 (Rha-3), 73.9 (Rha-4), 70.7 (Rha-5), 18.5 (Rha{{146}) }) เมื่อเทียบกับข้อมูลในวรรณคดี [17] เศษส่วน สอดคล้องกับแอกทีโอไซด์

เศษส่วน II: HR-ESI-MS สังเกตที่ m/z 623.1987 (M−H)−, คำนวณหา C29H35O15, 623.1981 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.25 (3H, d, J=6.5 Hz, CH3 ของ rhamnose), 2.78 (2H, t, J=7 Hz, Ar-CH2-), 4.33 (1H, d, J=8 Hz, H-1 ของกลูโคส), 5.17 (1H, d, J {{ 33}} Hz, H-1 ของ rhamnose), 6.28 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 7.56 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 6.5–7.0 (6H, อะโรมาติก H) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.5 (C-1), 117.2 (C-2), 146.2 (C-3), 144.7 (C-4 ), 116.5 (C-5), 121.3 (C-6), 72.4 (C- ), 36.7 (C- ), 127.8 (Caf-1), 115.2 (Caf{{89) }}), 146.8 (Caf-3), 149.7 (Caf-4), 116.6 (Caf-5), 123.2 (Caf-6), 169.2 (Caf- ), 115.0 (Caf- ), 147.3 (Caf- ), 104.5 (G-1), 75.5 (Glc-2), 84.2 (Glc-3), 70.1 (Glc-4 ), 75.7 (Glc-5), 64.7 (Glc-6), 102.8 (Rha-1), 72.4 (Rha-2), 72.4 (Rha-3 ), 74.1 (Rha-4), 70.5 (Rha-5), 17.9 (Rha-6) ข้อมูลสเปกตรัม 1H-NMR และ 13C-NMR สอดคล้องกับข้อมูลของไอโซแอคทีโอไซด์ตามที่รายงานในวรรณคดี [18]

เศษส่วน III: HR-ESI-MS สังเกตที่ m/z 6{{108}}7.2032 (M−H)−, calcd สำหรับ C29H35O14, 607.22032 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6 Hz, CH3 ของ rhamnose), 2.84 (2H, t, J=7.5 Hz, Ar-CH 2-), 4.37 (1H, d, J=8 Hz, H-1 ของกลูโคส), 5.19 (1H, d, J=1.5 Hz, H{{ 35}} ของ rhamnose), 6.27 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH=CH-), 7.59 (1H, d, J=16 Hz, Ar-CH =CH-), 6.6–7.1 (7H, อะโรมาติก H) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 130.8 (C-1), 116.2 (C-2), 130.9 (C-3), 156.8 (C-4 ), 130.8 (C-5), 116.2 (C-6), 72.4 (C- ), 36.4 (C- ), 127.8 (Caf-1), 114.8 (Caf{{88) }}), 149.8 (Caf-3), 146.9 (Caf-4), 116.6 (Caf-5), 123.2 (Caf-6), 168.3 (Caf- ), 115.4 (ร้านกาแฟ- ), 148.0 (ร้านกาแฟ- ), 104.3 (G-1), 76.3 (Glc-2), 81.7 (Glc-3), 70.4 (Glc-4 ), 76.1 (Glc-5), 62.5 (Glc-6), 103.0 (Rha-1), 72.3 (Rha-2), 72.2 (Rha-3 ), 73.9 (Rha-4), 70.7 (Rha-5), 18.4 (Rha-6) ตามวรรณกรรม [18] เศษ III สอดคล้องกับเข็มฉีดยา A 3'- -L-rhamnopyranoside

เศษส่วน IV: HR-ESI-MS สังเกตที่ m/z 665.21{{20}} (M−H)−, calcd สำหรับ C31H37O16, 665.2087 1H-NMR (500 MHz, CD3OD) δ ppm: 1.09 (3H, d, J=6.5 Hz, CH3 ของ rhamnose), 2.00 (3H, s, OAc), 2.72 (2H, t, J { {25}}.5 Hz, Ar-CH2-), 4.55 (1H, d, J=8 Hz, H-1 ของกลูโคส), 4.90 (1H, d, J { {37}} Hz, H-1 ของ rhamnose), 6.29 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 7.62 (1H, d, J=15.5 Hz, Ar-CH=CH-), 6.5–7.0 (6H, อะโรมาติก H) 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) δ ppm: 131.9 (C-1), 117.3 (C-2), 146.1 (C-3), 144.7 (C-4 ), 116.4(C-5), 121.4 (C-6), 72.7 (C- ), 36.4 (C- ), 127.7 (Caf-1), 115.4 (Caf{{93) }}), 146.9 (Caf-3), 149.9 (Caf-4), 116.6 (Caf-5), 123.2 (Caf-6), 168.1 (Caf- ), 114.7 (Caf- ), 148.2 (Caf- ), 101.8 (G-1), 75.3 (Glc-2), 80.3 (Glc-3), 70.8 (Glc-4 ), 76.2 (Glc-5), 62.3 (Glc-6), 103.3 (Rha-1), 72.0 (Rha-2), 71.8 (Rha-3 ), 73.7 (Rha-4), 70.8 (Rha-5), 18.5 (Rha-6), 171.5 (C=O), 20.9 (OAC) ข้อมูลสเปกตรัม 1H-NMR และ 13C-NMR สอดคล้องกับข้อมูลของ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์ [17]

บทสรุป

วิธี HSCCC สำหรับการเตรียมการแยกและการทำให้แอกทิโอไซด์ ไอโซแอคทีโอไซด์ ไซริงกาไลด์ A 3'- -L-rhamnopyranoside และ 2'-acetylacteoside บริสุทธิ์Cistanches deserticola YC Maก่อตั้งขึ้น การศึกษานี้บ่งชี้ว่า HSCCC เป็นเทคนิคที่มีประสิทธิภาพมากสำหรับการแยกสารเตรียมการและการทำให้ส่วนประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพบริสุทธิ์จากวัสดุจากพืช นอกจากนี้ สารประกอบสามารถแยกออกได้ในปริมาณมากเพียงพอและมีความบริสุทธิ์สูง และจากนั้นอาจใช้เป็นสารอ้างอิงสำหรับการศึกษาโครมาโตกราฟีหรือชีวแอคติวิตี วิธีการนี้เป็นเทคนิคที่เป็นไปได้ ประหยัด และมีประสิทธิภาพสำหรับการแยกผลิตภัณฑ์ธรรมชาติที่ซับซ้อนอย่างรวดเร็ว

รับทราบ

งานนี้ได้รับการสนับสนุนโดย Program for Changjiang Scholars and Innovative Research Team in University (PCSIRT), Project of International Cooperation Plan from the Ministry of Science and Technology of China (2008DFB30070) และ Scientific Program of Left Banner of Alashan ({{2 }})

อ้างอิง

1. คณะกรรมการเภสัชตำรับจีน ตำรับยาของสาธารณรัฐประชาชนจีน; สำนักพิมพ์ทางการแพทย์ของประชาชน: ปักกิ่ง ประเทศจีน 2010; เล่ม 1, น. 126.

2. เจียง วาย.; Tu, PF การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีในสายพันธุ์ Cistanche เจ. โครมาโตกร์. 2552, 1216, 2513-2522

3. โมริคาวะ ต.; แพน, ย.; Ninomiya, K.; อิมูระ เค.; มัตสึดะ, H.; Yoshikawa, ม.; หยวน, ดี.; Muraoka, O. Acylated phenylethanoid aminoglycosides ที่มีฤทธิ์ป้องกันตับจากพืชทะเลทราย Cistanche tubulosa ไบโอออร์ก. เมดิ. เคมี. 2010, 18, 1882–1890.

4. เฉิน H.; จิง เอฟซี; หลี่ CL; ตู, PF; จาง QS; Wang, ZH Echinacoside ป้องกันระดับสารสื่อประสาทโมโนเอมีนจากภายนอกเซลล์ striatal จากการลดลงในหนูที่มีแผลไฮดรอกซีโดพามีน 6- เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 2550, 114, 285–289.

5. มุราโอกะ โอ.; Ninomiya, K.; โมริกาวะ ต.; วาคายามะ, เอช.; มัตสึดะ, H.; Yoshikawa, M. องค์ประกอบป้องกันตับจากลำต้นของ Cistanche tubulosa ยาคุกาคุ ซาชิ 2007, 127, 49–51.

6. คู KA; สูง SH; พาร์ค โอไฮโอ; คิม SH; ลี KY; Kim, YC กิจกรรมป้องกันระบบประสาทในหลอดทดลองของ phenylethanoid glycosides จาก Callicarpa dichotoma แพลนตา เมด. 2548, 71, 778–780.

7. หลี่, ม.; หลิว RM; ซัน, อลาบาม่า; วู เอสเจ; Liu, NN Separation and Purification of Rutin and Acaciin จากสมุนไพรจีน Herba Cirsii โดยการผสมผสานของ Macroporous Adsorption Resin และ High-Speed ​​Counter-Current Chromatography เจ. โครมาโตกร์. วิทย์. 2552, 47, 329–332.

8. หยิน H.; จางเอส.; หลัว XM; Liu, YH การเตรียมการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของกลูโคไซด์ benzoxazinoid สองชนิดจาก Acanthus ilicifolius L. โดยโครมาโตกราฟีแบบกระแสตรงความเร็วสูง เจ. โครมาโตกร์. 2551, 1205, 177–181.

9. เป้ง AH; หลี่อาร์.; หูเจ .; เฉิน LJ; จ้าว X.; หลัว HD; ครับ HY; หยวน, วาย.; Wei, YQ อัตราการไหลไล่ระดับความเร็วสูงด้วยการแยกโครมาโตกราฟีแบบทวนกระแสด้วยความเร็วสูงของไดเทอร์พีนอยด์ห้าชนิดจาก Triperygium wilfordii และการขยายขนาด เจ. โครมาโตกร์. 2551, 1200, 129–135.

10. Xie, J.; เติ้ง, เจ.; ตาล F.; Su, J. การแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของ echinacoside จาก Penstemon barbatus (Can.) Roth โดยการรีไซเคิลโครมาโตกราฟีแบบกระแสตรงความเร็วสูง เจ. โครมาโตกร์. ค.ศ.2010, 878, 2665–2668.

11. หลี่ แอล.; เซา, ร.; ยาง, ร.; หลิว, C.; หนุ่ม เจซี; Zhu, H. การแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของ phenylethanoid glycosides จากCistanche deserticolaโดยโครมาโตกราฟีแบบทวนกระแสความเร็วสูง เคมีอาหาร. 2551, 108, 702–710.

12. หลี่ แอล.; เซา, ร.; หลิว ZQ; หลิว SY; ยาง, ร.; หนุ่ม เจซี; จู้ HH; เติ้ง, จี; Xie, MY; Fu, ZH การแยกและการทำให้แอกทิโอไซด์และไอโซแอคทีโอไซด์บริสุทธิ์จาก Plantago psyllium L. โดยโครมาโตกราฟีแบบกระแสตรงความเร็วสูง เจ. โครมาโตกร์. 2548, 1063, 161–169. โมเลกุล 2012, 17 8284

13. Lei, L.; หยาง FQ; จาง TY; ตู, PF; วู LJ; Ito, Y. การเตรียมการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของแอกทิโอไซด์และ 2'-อะซิติลแอกเตโอไซด์จากซิสตันเชส ซัลซ่า (CA Mey.) G. เบ็คโดยโครมาโตกราฟีแบบทวนกระแสความเร็วสูง เจ. โครมาโตกร์. 2544, 912, 181–185.

14. Lei, L.; หยาง FQ; จาง TY; ตู, PF; วู LJ; เฉิน เอฟเค; Ito, Y. การเตรียมการแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของ phenylethanoid glycosides จากสารสกัดจากอุจจาระของสุนัขบีเกิ้ลโดยโครมาโตกราฟีแบบทวนกระแสความเร็วสูง เจ. ลิค. โครมาโตก. ญาติ. เทคโนโลยี 2001, 24, 2187–2195.

15. เกา SY; เฟิง B.; จู้, อาร์เอ็น; หม่า เจเค; Wang, W. Preparative Isolation of Three Anthraquinones จาก Rumex japonicus โดยโครมาโตกราฟีแบบ Counter-Current ความเร็วสูง โมเลกุล 2011, 16, 1201–1210.

16. เขาเอฟ; ไป่ YH; วังเจ .; เหว่ย เจ.; ยู, CY; หลี่เอส.; ยาง WL; Han, CH การแยกตัวและการทำให้บริสุทธิ์ของ Oridonin จากทั้งโรงงานของ Isodon rubescens โดยโครมาโตกราฟีแบบต้านกระแสไฟความเร็วสูง โมเลกุล 2011, 16, 7949–7957.

17. โคบายาชิ เอช.; โอกุจิ, เอช.; ทากิซาวะ น.; มิยาเสะ, ต.; อุเอโนะ A.; Usmanghani, K.; Ahmad, M. ใหม่ phenylethanoid glycosides จาก cistanche tubulosa (Schrenk) Hook ฉ. I. เคมี. เภสัช. วัว. 2530, 35, 3309–3314.

18. Yoshizawa, F.; เดยามะ, ต.; ทากิซาวะ น.; Usmanghani, K.; Ahmad, M. องค์ประกอบของ cistanche tubulosa (Schrenk) Hook ฉ. ครั้งที่สอง การแยกตัวและโครงสร้างของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ใหม่และนีโอลิกแนนไกลโคไซด์ใหม่ เคมี. เภสัช. วัว. 2533, 38, 2470-2473