Aบช.สตรัค

พื้นหลัง:bis resorcinol ถูกแยกออกเป็นองค์ประกอบหลักของลำต้นของ Heliciopsis terminals (Proteaceae) เมื่อเร็ว ๆ นี้ resorcinol ถูกนำมาใช้เป็นสารไวท์เทนนิ่งที่ออกฤทธิ์ในผลิตภัณฑ์เครื่องสำอางต่างๆ เนื่องจากการเลียนแบบโครงสร้างของ resorcinol ประโยชน์ของ bis resorcinol ในฐานะตัวต่อต้านเอนไซม์ที่แก่ชราจึงแสดงให้เห็นในการศึกษานี้

จากการศึกษาที่เกี่ยวข้องพบว่า cistanche เป็นสมุนไพรทั่วไปที่รู้จักกันในชื่อ "สมุนไพรมหัศจรรย์ที่ช่วยยืดอายุ" ส่วนประกอบหลักของมันคือ cistanoside ซึ่งมีฤทธิ์ต่างๆ เช่น ต้านอนุมูลอิสระ ต้านการอักเสบ และส่งเสริมการทำงานของภูมิคุ้มกัน กลไกระหว่างซิสแทนช์กับการทำให้ผิวขาวขึ้นอยู่ที่ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของซิสแทนช์ไกลโคไซด์ เมลานินในผิวหนังของมนุษย์ผลิตโดยปฏิกิริยาออกซิเดชั่นของไทโรซีนที่เร่งปฏิกิริยาโดยไทโรซิเนส และปฏิกิริยาออกซิเดชั่นต้องอาศัยออกซิเจน ดังนั้นอนุมูลอิสระในร่างกายจึงกลายเป็นปัจจัยสำคัญที่ส่งผลต่อการผลิตเมลานิน Cistanche ประกอบด้วย cistanoside ซึ่งเป็นสารต้านอนุมูลอิสระและสามารถลดการสร้างอนุมูลอิสระในร่างกายได้ จึงไปยับยั้งการสร้างเมลานิน

คลิกที่ Cistanche Tubulosa เพื่อการฟอกสีฟัน

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:

david.deng@wecistanche.com วอทแอพ:86 13632399501

วิธีการ:บิสรีซอร์ซินอลถูกทำให้บริสุทธิ์จากสารสกัดเอทานอลหยาบของลำต้นของขั้ว H. โดยการสกัดด้วยตัวทำละลายและการเตรียมโครมาโตกราฟีตามลำดับ กิจกรรมการยับยั้งเอนไซม์คอลลาจีเนส อีลาสเตส และไทโรซิเนสของสารประกอบถูกตรวจสอบโดยใช้เทคนิคทางสเปกโทรสโกปีที่แตกต่างกัน การเชื่อมต่อระดับโมเลกุลดำเนินการเพื่อทำนายปฏิกิริยาที่เป็นไปได้ของสารรอบ ๆ ไซต์ที่ใช้งานของเอนไซม์

ผลลัพธ์:ค่า IC50 บนคอลลาจิเนสของบิสรีซอร์ซินอลและกรดคาเฟอิกคือ 156.7 ± 0.7 และ 308.9 ± 1.6 µmole L−1 ตามลำดับ สำหรับกิจกรรมอีลาสเตส IC50 ของ 33.2 ± 0.5 และ 34.3 ± 0.3 µmole L−1 ถูกกำหนดหาตามลำดับสำหรับบิสรีซอร์ซินอลและกรดเออร์โซลิก bis resorcinol ยับยั้งเอนไซม์ไทโรซิเนสโดยแสดง IC50 ที่ 22.8 µmole L−1 และที่ 78.4 µmole L−1 มีอยู่สำหรับ -arbutin bis resorcinol จับกับคอลลาจีเนส อีลาสเตส และไทโรซิเนสด้วยพลังงานการจับตามลำดับที่ −5.89, −5.69 และ −6.57 kcal mol−1 พลังงานที่มีผลผูกพันเหล่านี้อยู่ในช่วงเดียวกับสารยับยั้งที่ทดสอบ กลุ่มอะโรมาติกฟีนอลในโครงสร้างมีหน้าที่ในหลักการและสนับสนุนปฏิกิริยาที่จับกับเอ็นไซม์ การจับกับไฮโดรเจนเนื่องจากหมู่ไฮดรอกซิลและแรงดึงดูดที่เกี่ยวข้องกับ π จากวงแหวนอะโรมาติกทำให้เกิดความสามารถในการจับกับบิสรีซอซินอลได้หลากหลาย

บทสรุป:bis resorcinol ที่บริสุทธิ์จากขั้ว H. อาจมีประโยชน์สำหรับการรวมไว้ในผลิตภัณฑ์เครื่องสำอางในฐานะตัวต่อต้านเอนไซม์ที่ทำให้แก่ก่อนวัย

หัวเรื่อง ชีวเคมี ชีวสารสนเทศ ชีววิทยาของเซลล์ โรคผิวหนัง การทำเหมืองข้อมูล และการเรียนรู้ของเครื่อง

คำหลักขั้ว Heliciopsis, Bisresorcinol, Collagenase, Elastase, Tyrosinase, คุณสมบัติต่อต้านริ้วรอย, การเชื่อมต่อระดับโมเลกุล, การยับยั้งเอนไซม์

การแนะนำ

A bis resorcinol, (8′Z)-3,5-dihydroxy-1-[16′-(3″, 5″-dihydroxy phenyl)-8′-hexadecen{{ เบนซีน 11}}′-yl] ถูกแยกออกเป็นส่วนประกอบจำนวนมากจากลำต้นของ Heliciopsis terminals (Kurz) Sleumer ซึ่งเป็นพืชในตระกูล Proteaceae และถูกใช้โดยกลุ่มชาติพันธุ์ในเวียดนามเพื่อผลในการป้องกันตับ จนถึงปัจจุบัน ประโยชน์ทางการแพทย์ของสารนี้ในฐานะตัวแทนในการต่อต้านการอักเสบ การยับยั้งการผลิต malondialdehyde (MDA) และการป้องกันตับได้รับการชี้แจงในหลอดทดลองและในร่างกาย (Giang et al., 2019) เห็นได้ชัดว่าโมเลกุลของบิสรีซอร์ซินอลประกอบด้วยรีซอร์ซินอลสองโมเลกุล (หมายเลข EC 203-585-2) ซึ่งจับกันด้วยเมตา-C7H14C=CC7H14 เชื่อมโยง (รูปที่ 1A) เมื่อเร็ว ๆ นี้มีการใช้ Resorcinol ในรูปแบบของเซรั่มเข้มข้นสำหรับผิวหน้าเพื่อการบำบัดด้วยสีขาว อ้างอิงจากคณะกรรมการวิทยาศาสตร์ว่าด้วยความปลอดภัยของผู้บริโภค บรัสเซลส์ เบลเยียม (SCCS 1270/09, European Commission, Scientific Committee on Consumer Safety, 2010) เรสซอร์ซินอลได้รับการควบคุมให้เป็นสารออกซิแดนท์ในผลิตภัณฑ์สำหรับแต่งขนตาที่ความเข้มข้นสูงถึง 1.25 เปอร์เซ็นต์ หรือในโลชั่นและแชมพูสระผมที่ความเข้มข้นสูงถึง 0.5 เปอร์เซ็นต์ การใช้ resorcinol ในเครื่องสำอางจึงมีความหลากหลาย สำหรับสารไวท์เทนนิ่ง สันนิษฐานว่ายับยั้งการสังเคราะห์เมลานินโดยเมลาโนไซต์ที่อาศัยอยู่ในชั้นเซลล์ฐานของผิวหนังชั้นนอก ไทโรซิเนส (EC 1.14.18.1) เป็นเอนไซม์หลักในการเร่งปฏิกิริยาการสร้างเมลาโนเจเนซิสซึ่งใช้ L-ไทโรซีนเป็นสารตั้งต้น แม้ว่าเมลานินจะช่วยปกป้องผิวจากการทำลายของรังสียูวี แต่การผลิตเมลานินที่มากเกินไปอาจทำให้เกิดรอยดำ กระ และจุดด่างแห่งวัยได้ นอกจาก resorcinol แล้ว ยังมีการแสดงสารประกอบสังเคราะห์และธรรมชาติหลายชนิดที่มีโครงสร้างทางเคมีที่แตกต่างกันเพื่อแสดงฤทธิ์ต้านไทโรซิเนส (Dobos et al., 2015)

รังสี UV เป็นปัจจัยภายนอกสำคัญที่ทำให้ผิวแก่ก่อนวัย ผิวหนังสามารถแก่ลงเมื่อเวลาผ่านไปโดยปฏิกิริยาออกซิเจน (ROS) และลิพิดเปอร์ออกไซด์ที่ผลิตขึ้นภายในหลังจากได้รับรังสียูวี ผลิตภัณฑ์รองจากเมแทบอลิซึมของลิพิดเปอร์ออกไซด์สามารถทำลายเส้นใยอีลาสตินและคอลลาเจนของเมทริกซ์นอกเซลล์ (ECM) ดังนั้นการได้รับรังสียูวีจึงส่งผลให้ผิวหนังขาดน้ำ สูญเสียความยืดหยุ่น และเกิดริ้วรอยได้ จากความรู้ของเรา ECMs ได้รับการปรับปรุงใหม่เป็นระยะเพื่อรักษาโครงสร้างเนื้อเยื่อปกติ โดยโปรตีนในเนื้อเยื่อที่หมดอายุจะถูกย่อยสลายอย่างเหมาะสมโดยเมทริกซ์เมทัลโลโปรตีนเนส เช่น คอลลาเจนเนส และซีรีนโปรตีเอส เช่น อีลาสเตส (Thring, Hili & Naughton, 2009) นอกจากนี้ ทั้งปริมาณและกิจกรรมของเอ็นไซม์ชะลอวัยเพิ่มขึ้นจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน ซึ่งนำไปสู่การย่อยสลาย ECM อย่างกว้างขวางและการแก่ชราที่ก้าวหน้า (Sherratt et al., 2019) ดังนั้น สารประกอบที่สามารถก่อตัวเชิงซ้อนกับไอออนของโลหะได้คาดว่าจะยับยั้งเอนไซม์คอลลาจีเนส อีลาสเทส และไทโรซิเนส (Selvaraj et al., 2014) โครงการนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อตรวจสอบผลกระทบทางชีวภาพของบิสซอร์ซินอลต่อไทโรซิเนส คอลลาจิเนส และอีลาสเตสในหลอดทดลอง และมีการใช้เทคนิคด็อคกิ้งเพื่อชี้แจงปฏิสัมพันธ์ของพวกมันในระดับโมเลกุล หวังที่จะชะลอกระบวนการชราและปรับปรุงลักษณะผิวด้วย bis resorcinol

วัสดุและวิธีการ

เคมีภัณฑ์และเครื่องมือ

การทำให้บริสุทธิ์แบบผสม การระบุ และการให้สัตยาบัน

สารสกัดหยาบในเอทานอลของลำต้นของขั้ว H. ได้รับมาจากศาสตราจารย์ PM Giang, คณะเคมี, Vietnam National University, ฮานอย, เวียดนาม พร้อมใบสำคัญตัวอย่างหมายเลข HNIP-18473 จากนั้น มันถูกแบ่งในเมทานอล/เอ็น-เฮกเซนซ้ำสามครั้ง ชั้นเมทานอลระเหยจนเกือบแห้งและถูกแบ่งส่วนในเอทิลอะซีเตต/1-บิวเทนในเวลาต่อมา ชั้นเอทิลอะซีเตตถูกทำให้กลายเป็นไอจนปริมาตรลดลง 80 เปอร์เซ็นต์ จากนั้น ของเหลวหนืดที่เป็นผลลัพธ์จะถูกทำให้บริสุทธิ์บนคอลัมน์ซิลิกาเจลโดยใช้คลอโรฟอร์ม/เมทานอลเกรเดียนต์ชะดังต่อไปนี้: คลอโรฟอร์ม 100 เปอร์เซ็นต์, 30:1, 20:1, 10:1, 7:1, 5:1, 3:1, 3 :2 และ 2:1 ของคลอโรฟอร์ม/เมทานอล และเมทานอล 100 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ สารชะจากตัวทำละลายผสม 5:1 ถูกรวบรวมและระเหยเป็นปริมาตรหนึ่งในสี่ ตามด้วยการแยกบนคอลัมน์ ODS โดยใช้การชะแบบไล่ระดับของเมทานอลและอะซีโตน สารประกอบที่ต้องการ เช่น bis resorcinol (รูปที่ 1) ได้มาจากสารชะที่มีอะซิโตนร้อยละ 70 และยืนยันโดย MS, NMR และ IR spectroscopies เกี่ยวกับข้อมูลไลบรารีเครื่องมือ ใช้โครมาโตกราฟีแบบชั้นบางในการประมาณค่าความบริสุทธิ์

การตรวจฤทธิ์ทางชีวภาพ

ในหลอดทดลอง การทดลองที่ประกอบด้วยการทดสอบการยับยั้งเอนไซม์ของคอลลาเจนเนส อีลาสเทส และไทโรซิเนสสำหรับบิสเรสซอร์ซินอลและสารยับยั้งที่รู้จักได้ดำเนินการดังต่อไปนี้

การยับยั้งคอลลาเจนเนส

การทดสอบการต่อต้านคอลลาเจนล่าสุดได้รับการแก้ไขจากที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้โดย Widyowati et al (2559). โดยสังเขป บัฟเฟอร์ไตรซีน L−1 50 มิลลิโมล pH 7.5 เสริมด้วย 400 มิลลิโมล L−1 NaCl และ 10 มิลลิโมล L−1 CaCl2 ถูกใช้เป็นสารเจือจางบัฟเฟอร์ คอลลาจีเนสจาก Clostridium histolyticum (EC.3.4.24.3) ถูกละลายในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 1 มก. L−1 สารซับสเตรตของเอนไซม์ MOCAc-PRO-Leu-Gly-Leu-A2pr (Dnp)-Ala-Arg-NH2 ก่อนหน้านี้ถูกละลายใน DMSO และต่อมาถูกเจือจางในบัฟเฟอร์จนถึงความเข้มข้น 1 มิลลิโมล L−1 ตัวอย่างที่ละลายใน DMSO ถูกเจือจางให้มีความเข้มข้นต่างกันโดยใช้บัฟเฟอร์ สารละลายตัวอย่าง 2-µl ถูกบ่มด้วยสารละลายเอนไซม์ 100 µl ที่ 37 ○C เป็นเวลา 10 นาที จากนั้น เติมสารตั้งต้น 50-µl และผสมให้เข้ากัน การปล่อยสารฟลูออเรสเซนซ์ (F) ที่ 405 นาโนเมตรถูกบันทึกทันทีและตรวจสอบอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 30 นาทีโดยใช้ความยาวคลื่น 320 นาโนเมตรสำหรับการกระตุ้น ใช้กรดคาเฟอิกเป็นตัวควบคุมตำแหน่ง (รูปที่ 1) ทำการควบคุมเชิงลบด้วยน้ำ เปอร์เซ็นต์การยับยั้ง ( เปอร์เซ็นต์ ) คำนวณได้จากสมการด้านล่าง:

เปอร์เซ็นต์การยับยั้ง {{0}}{1 - (Fsam; 30 - Fsam; 0)÷(Fcont; 30 - Fcont; 0)} ×100

การยับยั้งอีลาสเทส

การทดสอบตาม Abhijit & Manjushree (2010) ถูกนำไปใช้กับการแก้ไขบางอย่าง โดยสังเขป ระบบบัฟเฟอร์คือบัฟเฟอร์ 0.2 mM Tris-HCl (pH 8.0) สารละลาย 1 µg mL−1 porcine pancreatic elastase (EC.3.4.21.36) ถูกเตรียมในน้ำปราศจากเชื้อ สารตั้งต้นของเอนไซม์ N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (SANA) ถูกละลายในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 80 มิลลิโมล L−1 ตัวอย่างที่ละลายใน DMSO ถูกเจือจางให้มีความเข้มข้นต่างๆ โดยใช้บัฟเฟอร์ สารละลายตัวอย่าง 100-µl ผสมกับสารละลายเอนไซม์ 50 µl และบ่มเป็นเวลา 15 นาที หลังจากนั้น 50 µl ของสารละลายเอนไซม์ซับสเตรตถูกเติมและผสมให้เข้ากัน OD410 ถูกวัดทันที (0 นาที) และหลังการบ่มข้ามคืน (o/n) ที่ 37 องศาโดยใช้เครื่องอ่านไมโครเพลท กรดเออร์โซลิกถูกใช้เป็นตัวควบคุมเชิงบวก (รูปที่ 1) และใช้น้ำเป็นตัวควบคุมเชิงลบ เปอร์เซ็นต์การยับยั้ง ( เปอร์เซ็นต์ ) คำนวณโดยสมการต่อไปนี้:

เปอร์เซ็นต์การยับยั้ง {{0}} {1 - [(Asam; o/n - Asam; 0)÷(Acont; o/n - Acont; 0)]} ×100:

การยับยั้งไทโรซิเนส

การทดสอบการยับยั้งเอนไซม์ไทโรซิเนสที่ใช้นั้นดัดแปลงมาจากวิธีที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (จิรัชยาเมธาสกุล et al., 2020) โดยสังเขป การทดสอบดำเนินการใน 0.05 mol L−1 ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 6.8 เห็ดไทโรซิเนส (EC.1.14.18.1) ถูกละลายในบัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 100 หน่วย mL−1 L-ไทโรซีน ซึ่งเป็นสารตั้งต้นของเอนไซม์ ถูกเตรียมให้มีความเข้มข้น 0.25 มก.มล.−1 ในบัฟเฟอร์ สารประกอบทดสอบที่ละลายใน DMSO ถูกเจือจางให้มีความเข้มข้นตั้งแต่ 0.625 ถึง 10 มก. มล.−1 ผสมตัวอย่าง 10 µl และสารละลาย L-tyrosine 40 µl ลงในหลุมของ 96-well plate และบ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากนั้นนำสารละลายเอนไซม์ 50 ไมโครลิตรมาผสมให้เข้ากัน ปฏิกิริยาหยุดลงหลังจากนั้นโดยการบ่มบนน้ำแข็งเป็นเวลา 1 นาที วัดค่า OD475 โดยใช้เครื่องอ่านไมโครเพลท - ใช้อาร์บูตินและน้ำเป็นตัวควบคุมเชิงบวก (รูปที่ 1) และตัวเปรียบเทียบเชิงลบตามลำดับ เปอร์เซ็นต์การยับยั้ง ( เปอร์เซ็นต์ ) คำนวณโดยสมการดังนี้:

การศึกษาการเทียบท่าระดับโมเลกุล

การเตรียมแกนด์และตัวรับ

โครงสร้างสามมิติ (3D) ของ bis resorcinol (CID 8917124) และสารประกอบอ้างอิง รวมถึงซับสเตรตและสารยับยั้ง ถูกดาวน์โหลดจากฐานข้อมูล PubChem สำหรับการศึกษาการเชื่อมต่อระดับโมเลกุล โครงสร้างลิแกนด์ถูกเตรียมในไฟล์รูปแบบ Protein Data Bank (PDB) โดยใช้ Online SMILES Translator และ Structure File Generator โครงสร้างผลึกของเอนไซม์ เช่น คอลลาจีเนส (PDB ID 2Y6I), อีลาสเทส (PDB ID 1BRU) และไทโรซิเนส (PDB ID 2Y9X) ได้มาจากฐานข้อมูลโปรตีน RCSB น้ำและโมเลกุลที่ติดอยู่ถูกตัดออกจากโครงสร้างโปรตีนที่เลือกทั้งหมด ในขณะเดียวกัน อะตอมของไฮโดรเจนที่มีขั้วถูกเพิ่มเข้าไปในโครงสร้างโปรตีนที่ตกผลึกโดย AutoDockTools 1.5.6 ไฟล์ของโปรตีนเป้าหมายและสารประกอบที่ใช้อื่นๆ ถูกบันทึกในรูปแบบ PDBQT ก่อนทำการเชื่อมต่อระดับโมเลกุล

การเลือกสารตกค้างของไซต์ที่ใช้งานอยู่และการเชื่อมต่อโมเลกุล

โปรโตคอลกริดและการเชื่อมต่อของการคาดการณ์ไซต์ที่ใช้งานอยู่นั้นจัดทำขึ้นโดยใช้ AutoDockTools 1.5.6 ไซต์กริดถูกกำหนดให้มีระยะห่าง 0.375 Å ขนาด xyz ถูกกำหนดเป็น 126-135-160 Å3 สำหรับคอลลาจีเนส, 130-120-126 Å3 สำหรับอีลาสเทส และ 80-80-80 Å3 สำหรับไทโรซิเนส ศูนย์กริดบ็อกซ์ (ที่มีค่าออฟเซ็ตใน AutoDockTools) คือ 31.869 (5.000), −19.41 (−25.{{20}}) และ 17.815 สำหรับคอลลาจีเนส , 30.048 (−0.972), 51.253 (−2.722), 17.6 สำหรับอีลาสเตส และ −8.407 (−1.000), −23.795 (−0.250), −36.019 (−3.500 ) สำหรับไทโรซิเนส ตามลำดับ โครงสร้างโปรตีนถูกใช้เป็นของแข็งในขณะที่สารประกอบลิแกนด์ถูกตั้งค่าเป็นโมเลกุลที่ยืดหยุ่น การศึกษาการเทียบท่าดำเนินการโดยใช้อัลกอริทึมทางพันธุกรรม Lamarckian (GA) ที่ดำเนินการโดย AutoDock4 เวอร์ชัน 4.2 จำนวนการรัน GA คือ 50 โดยขนาดที่นิยมคือ 200 ADT วิเคราะห์พลังงานการจับ (ΔGbind) การโต้ตอบถูกสร้างภาพโดยใช้ BIOVIA Discovery Studio (BIOVIA, 2020) ปฏิสัมพันธ์ระดับโมเลกุลระหว่างสารประกอบและตัวรับโปรตีนได้รับการวิเคราะห์และแสดงภาพโดยใช้ซอฟต์แวร์ BIOVIA Discovery Studio (BIOVIA, 2020) โครงสร้างของสารประกอบที่จับกับโปรตีนได้รับการมองเห็นโดยใช้แพ็คเกจ Visual Molecular Dynamics (VMD) (Humphrey, Dalke & Schulten, 1996)

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ผลลัพธ์

ส่วนประกอบหลักถูกทำให้บริสุทธิ์จากลำต้นของขั้ว H. ได้สำเร็จโดยใช้การสกัดด้วยตัวทำละลายและเทคนิค HPLC แบบเฟสย้อนกลับตามลำดับ สเปกตรัม 1 H-NMR และ 13C-NMR ที่ได้มาถูกเปรียบเทียบกับสารอ้างอิงผ่าน SciFinder (https://scififinder.cas.org/) และพบว่าสอดคล้องกับ (8′Z)-1,{ {6}}ไดไฮดรอกซี-5- [16′-(3″,5″-dihyroxyphenyl)-8′-hexadecen-1′-yl] เบนซีน (Chaturvedula et al., 2{{ 23}}02). มันถูกจัดเป็นหนึ่งใน bisresorcinols bis resorcinol ล่าสุดนี้มีสูตรโมเลกุลเป็น C28H40O4 โดยมีน้ำหนักโมเลกุล 463.2819 ดาลตัน คำนวณผลผลิตการสกัดได้เท่ากับ 0.086 เปอร์เซ็นต์ โดยพิจารณาจากน้ำหนักแห้งของลำต้น ความบริสุทธิ์ของมันมากกว่า 98 เปอร์เซ็นต์ ซึ่งเกี่ยวกับสเปกตรัม 1 H และ 13C-NMR ที่ได้มา (ดูรูปที่ S1 และ S2)

การวิเคราะห์ฤทธิ์ทางชีวภาพในหลอดทดลอง

ผลที่เป็นปฏิปักษ์ของบิสเรสซอร์ซินอลต่อเอ็นไซม์ที่ทำให้แก่ก่อนวัย เช่น คอลลาจีเนส อีลาสเตส และไทโรซิเนส ถูกกำหนดในหลอดทดลองโดยใช้วิธีการทางสเปกโทรสโกปีที่แตกต่างกัน สรุปผลลัพธ์ไว้ในตารางที่ 1 และรูปที่ 2 สำหรับการยับยั้งเอนไซม์คอลลาจีเนส ตัวอย่างทดสอบในช่วง 50–550 µmol L−1 ถูกเตรียมโดยใช้ MOCAc-PRO-Leu-Gly-Leu-A2pr (Dnp)-Ala Arg-NH2 เป็นสารตั้งต้นของเอนไซม์และกรดคาเฟอิกเป็นตัวยับยั้งเอนไซม์ มีการระบุว่าบิสรีซอร์ซินอลที่ความเข้มข้น 156.7 µmol L−1 ลดการทำงานของเอนไซม์ลง 50 เปอร์เซ็นต์ (IC50) ในทางกลับกัน IC50 ของกรดคาเฟอิกคือ 308.9 ± 13.7 µmol L−1 ดังนั้นฤทธิ์ต้านคอลลาเจนของบิสเรสซอร์ซินอลจึงรุนแรงกว่ากรดคาเฟอิกอย่างมีนัยสำคัญ

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501