โพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถชะลอความชราของการทํางานของปอดได้อย่างมีนัยสําคัญ

ติดต่อ : ออเดรย์ Hu Whatsapp / hp : 0086 13880143964 อีเมล์ :audrey.hu@wecistanche.com

ซุนหยุนหวังเต๋อจุนหลิวเสี่ยวเหม่ยซือเล่อจางหงฉวน

(สถาบันแพทยศาสตร์มหาวิทยาลัยหยางโจว225001หยางโจว)

ริ้ว รอยเป็นกระบวนการที่เนื้อเยื่อและอวัยวะของร่างกายได้รับความเสื่อมโทรมในการทํางานและสัณฐานวิทยาและแม้กระทั่งความชราในช่วงชีวิต ปอดเชื่อมต่อโดยตรงกับสภาพแวดล้อมภายนอกและยอมรับการไหลเวียนโลหิตจากทั้งร่างกาย มันมีความเสี่ยงมากที่สุดต่อปัจจัยที่เป็นอันตรายต่าง ๆ ในสภาพแวดล้อมและในร่างกาย มันเป็นหนึ่งในอวัยวะแรกสุดในร่างกายที่เกิดริ้วรอย บทบาทของอนุมูลอิสระในกระบวนการชราได้รับการยืนยันจากการวิจัยของนักวิชาการหลายคน. การทดลองนี้ใช้โอโซนเพื่อสร้างแบบจําลองอายุทดลองเพื่อสังเกตผลของโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche ต่อความทนทานต่อการขาดออกซิเจนการทํางานของสารต้านอนุมูลอิสระและโครงสร้างพิเศษของปอดของหนูที่มีอายุมาก. อิทธิพล คาดว่าจะวางรากฐานการวิจัยสําหรับโพลีแซคคาไรด์จากซิตันเช่ในการชะลอการเปลี่ยนแปลงความเสื่อมของปอดและการดูแลสุขภาพของระบบทางเดินหายใจผู้สูงอายุ

วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้คือการสังเกตการเปลี่ยนแปลงความเสื่อมในโครงสร้างพิเศษของเซลล์เนื้อเยื่อปอดในหนูอายุทดลองและอิทธิพลของโพลีแซคคาไรด์จากซิตันเช่กับมัน ใช้โอโซน (Ozone, Ob) สูดดมอย่างต่อเนื่องเป็นเวลา 4 สัปดาห์เพื่อกระตุ้นวิธีการสร้างแบบจําลองอายุปอดโดยใช้โพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche 50 และ 100 กรัมในการบริหารหนูจําลองเป็นเวลา 6 สัปดาห์เพื่อตรวจหาความทนทานต่อการขาดออกซิเจนปอดและซีรั่มซูเปอร์ออกไซด์ในกิจกรรม Dismutase (SOD) ของหนูที่มีอายุมากและปริมาณ malondialdehyde (MDA) การเปลี่ยนแปลงของออร์แกเนลล์เนื้อเยื่อปอดและโครงสร้างพิเศษถูกสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน ผลการวิจัย หนูสูงวัยทดลองที่เกิดจากโอโซนช่วยลดความทนทานต่อการขาดออกซิเจนได้อย่างมาก ปอดและซีรั่ม SOD ลดลงและ MDA เพิ่มขึ้น เมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจําลองโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถยืดเวลาความทนทานต่อการขาดออกซิเจนของหนูที่มีอายุมากได้อย่างมีนัยสําคัญ (P<0.01), improve="" the="" activity="" of="" sod="" in="" the="" serum,="" reduce="" the="" content="" of="" mda=""><0.01), and="" delay="" the="" degeneration="" of="" mitochondria="" and="" lamellar="" bodies="" in="" the="" lung="" cells="" of="" aging="" mice=""><0.01). conclusion="">โพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถอย่างมีนัยสําคัญชะลอการทดลองความเสื่อมทางสรีรวิทยาและสัณฐานวิทยาของเซลล์ของปอดของหนูสูงวัยทางเพศ

1 วัสดุ

1.1

หนูสะอาดอายุ 3 เดือนของสายพันธุ์ ICR, 18 ~ 22g, ¥^ แต่ละครึ่งจัดทําโดยศูนย์สัตว์ทดลองของมหาวิทยาลัยหยางโจวหมายเลขใบรับรอง: Su Dongzhi 98002^

1.2 ยาและรีเอเจนต์

โพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche: จัดทําโดยสถาบันวิจัยพืชป่าหนานจิงซึ่งเตรียมด้วยน้ํากลั่นถึง 2.5 กรัม·LT, 5.0 g-L-1; SOD ชุดทดสอบ MDA จัดทําโดยสถาบันวิจัยวิศวกรรมชีวการแพทย์หนานจิงจูลี่

1.3 ตราสาร

เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์อัลตราไวโอเลต UV755B ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ของโรงงานเครื่องมือวิเคราะห์เซี่ยงไฮ้ เครื่องกําเนิดโอโซนซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ของโรงงานเครื่องมือแพทย์อู๋ซี กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนแบบส่องผ่าน H-300 ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์ของฮิตาชิ ประเทศญี่ปุ่น

วิธี 2

2 1 การเตรียมแบบจําลองอายุปอดทดลองที่มีอาการบาดเจ็บจากการเปิดกลิ่นหนู ICR ถูกนํามาจากวันและการออกแบบการทดลองและหนูในกลุ่มแบบจําลองและกลุ่มการรักษาถูกสุ่มจัดกลุ่ม

แบบจําลองอายุทดลองถูกสร้างขึ้นเป็นเวลา 4 สัปดาห์อย่างต่อเนื่อง ในเวลาเดียวกันกลุ่มควบคุม (ใช้หนูปกติที่ซื้อในชุดเดียวกัน) และกลุ่มแบบจําลองได้รับ 20 มล. - กก. ^ d'1 ด้วยน้ําเกลือปกติโพลีแซคคาไรด์จากกลุ่มการรักษา Cistanche I และ II Polysaccharide จาก Cistanche 50, 100 mg-kg-1-d-' ได้รับจากการบริหารภายในกาสติกและระยะเวลาการให้ยาคือ 6 สัปดาห์ หลังจากการบริหารครั้งล่าสุดมีการทดสอบดัชนีต่างๆ

2.2 วิธีทดสอบความทนทานต่อการขาดออกซิเจน (2)

หนูแต่ละกลุ่มถูกใส่ลงในขวดบดขนาด 250 มล. ที่มีโซดามะนาว 20 กรัม วาสลีนถูกปิดผนึกและเวลาตั้งแต่ใส่หนูลงในขวดไปจนถึงการหายใจไม่ออกและความตายถูกบันทึกไว้ภายใต้อุณหภูมิและความดันปกติ

2.3 ปอดและเลือด

การกําหนดเนื้อหา SOD^MDA ของหนูแต่ละกลุ่ม 1 ชั่วโมงหลังจากการบริหารครั้งสุดท้ายเอาลูกตาออกและเก็บเลือดเพื่อแยกซีรั่ม จากนั้นหนูก็ถูกสังเวยเนื้อเยื่อปอดถูกนําออกมาและน้ําเกลือถูกเพิ่มเข้าไปในโฮโมจีไนเซอร์แก้วเพื่อเตรียมเนื้อเยื่อปอด 100 กรัม -f1 homogenate กิจกรรม SOD ของปอดและซีรั่มถูกกําหนดโดยวิธี Huangsuyin oxidase และปริมาณ MDA ถูกกําหนดโดยวิธีการควบแน่นของกรด thiobarbituric

2.4 วิธีการเตรียมชิ้นงานด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน (3)

การทดลองแบ่งออกเป็นกลุ่มควบคุมกลุ่มแบบจําลองและกลุ่มขนาดยาสูง วิธีการสร้างแบบจําลองและการบริหารเหมือนกับข้างต้น หลังจากการบริหารครั้งสุดท้ายหนู 3 ตัวจากแต่ละกลุ่มจะถูกสุ่มเลือกและพวกมันจะถูกฆ่าตายโดยการคล้องคอและด้านขวาจะถูกจับตามลําดับ เนื้อเยื่อปลายปอด, 0.4 mmol, L-1 glutaraldehyde, และ 0.04 mmol, การตรึงสองครั้งด้วย L'1 OfeO4, การคายน้ําไล่ระดับสีอะซิโตน, การฝัง Epon 812, การย้อมสีอิเล็กตรอนตะกั่วยูเรเนียม, กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนส่ง Hitachi H-300 พร้อมกําลังขยาย 10,000 ถึง 20,000 สังเกตการเปลี่ยนแปลงและการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของออร์แกเนลล์หลักภายใต้พหุคูณ

2.5 ผลลัพธ์ของการประมวลผลทางสถิติจะแสดงในแง่ของดินหลายสิบชนิดและการเปรียบเทียบตัวอย่างทั้งสองหมายถึงใช้ t-test

3 ผลลัพธ์

3.1 ผลของโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche ต่อความทนทานต่อการขาดออกซิเจนในหนูที่มีอายุมาก

หนึ่งชั่วโมงหลังจากการบริหารครั้งสุดท้ายของหนูในแต่ละกลุ่มเวลาความอดทนขาดออกซิเจนได้รับการทดสอบ ผลการวิจัยพบว่าเวลาที่หนูสูงวัยสามารถทนต่อภาวะขาดออกซิเจนได้นั้นสั้นกว่าหนูปกติอย่างมาก เวลาเป็นเวลานานอย่างมีนัยสําคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจําลอง แต่ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสําคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมซึ่งบ่งชี้ว่าโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถปรับปรุงความทนทานต่อการขาดออกซิเจนของหนูที่มีอายุมากได้อย่างมีนัยสําคัญดูตารางที่ 1

3.2 ผลของโพลีแซคคาไรด์ Cistanche ต่อการทํางานของสารต้านอนุมูลอิสระของหนูอายุ

เลือด (ซีรั่ม) และเนื้อเยื่อปอด (ปอด homogenate) ของหนูในแต่ละกลุ่มถูกรวบรวมหลังจากการบริหารครั้งสุดท้ายและ SOD และ MDA ถูกกําหนด ผลลัพธ์ กิจกรรม SOD ในซีรั่มและปอดของหนูสูงวัยลดลง และปริมาณ MDA เพิ่มขึ้น เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมความแตกต่างมีนัยสําคัญ โพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถเพิ่มกิจกรรมของซีรั่มและ SOD ปอดในหนูที่มีอายุมาก และลดปริมาณ MDA เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมแล้ว ไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสําคัญ และความแตกต่างกับกลุ่มแบบจําลองอายุมีความสําคัญ โปรดดูตารางที่ 2 และ 3

3.3 ผลของโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche ต่อความมืดภายในเซลล์ของเซลล์เยื่อบุผิวถุงลม(4)

วิธีการผลิตกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนเหมือนเดิม การวิเคราะห์ทางสัณฐานวิทยา: ภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนชิ้นงานแต่ละชิ้นถูกสังเกตในมุมมอง 10 ด้านเพื่อวัดออร์แกเนลล์ ผลการวิจัยพบว่าไมโตคอนเดรียและลาเมลลาร์ของกลุ่มแบบจําลองลดลงเมมเบรนชั้นใต้ดินหนาขึ้นและโพลีโซมก็เพิ่มขึ้น เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมแล้วมีความแตกต่างอย่างมีนัยสําคัญ โพลีแซคคาไรด์จากกลุ่มขนาดสูง Cistanche ปรับปรุงให้ดีขึ้น เมื่อเทียบกับกลุ่มโมเดลความแตกต่างมีความสําคัญและโดยพื้นฐานแล้วมันใกล้เคียงกับกลุ่มควบคุม ดูแท็บ 4

3.4 การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างพิเศษของเซลล์เยื่อบุผิวปอดในหนูอายุทดลองและอิทธิพลของโพลีแซคคาไรด์ Cistanche

หนูแบบจําลองอายุสามารถเห็นได้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน: เซลล์เยื่อบุผิวชนิดถุง I เป็นชั้นเดียวของชนิดแบนที่มีความหนาประมาณ 14.00 น. นิวเคลียสมีขนาดเล็กและหนาแน่น มีไมโตคอนเดรียสองสามชนิด Golgi complex และเอนโดพลาสซึมเรติคูลัมที่กระจัดกระจายในไซโตพลาสซึม perinuclear ค่อนข้างเบาบางโดยมีไมโครฟิลาเมนต์และไมโครทูบูลน้อยลง การเปลี่ยนแปลงทางเนื้อเยื่อวิทยาของปอดของหนูที่มีอายุมากถูกสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอน การเปลี่ยนแปลงหลักคือเซลล์เยื่อบุผิวถุงลมชนิดที่สอง microvilli บนพื้นผิวอิสระของเซลล์ลดลงหรือหายไปร่างกาย lamellar อ่อนแอลงโครงสร้าง lamellar เบลอและเซลล์ไม่กี่เซลล์มีเซลล์ lamellar ขนาดเล็ก ร่างกายหายไปและเป็นสารคล้ายแถบอสัณฐานกลวงหรือเป็นเนื้อเดียวกันที่มีความหนาแน่นของอิเล็กตรอนต่ํา ไมโตคอนเดรียและเอนโดพลาสซึมเรติคูลัมหยาบจะลดลงในร่างกายของเซลล์ เยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของเซลล์เยื่อบุผิวถุงมีความหนาอย่างเห็นได้ชัดและการแพร่กระจายของเซลล์ไดอะแฟรมและไฟโบรบลาสต์สามารถเห็นได้ในถุง interstitium (รูปที่ 1,2) แม้ว่าเมมเบรนนิวเคลียร์ด้านในและอาการบวมของไมโตคอนเดรียจะเห็นได้ในกลุ่มโพลีแซคคาไรด์ Cistanche แต่ระดับนี้ลดลงอย่างมีนัยสําคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มแบบจําลอง (รูปที่ 3.4) การสังเกตภายใต้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนของกลุ่มยาแสดงให้เห็นว่าเซลล์เยื่อบุผิวชนิดแบนมีพื้นผิวเรียบไม่มีนิวเคลียสและบางส่วนมีความหนาประมาณ 0.1 มีออร์แกเนลล์สองสามตัวใน perinucleus และอนุภาคเรเดียมก็มองเห็นได้ เซลล์ประเภท II มี villi สั้น ๆ บนพื้นผิว, ไมโตคอนเดรียจํานวนมาก, เอนโดพลาสซึมเรติคูลัมหยาบ, และ Golgi complex ในไซโตพลาสซึม (รูปที่ 5,6)

แบบจําลองอายุความเสียหายของโอโซนขึ้นอยู่กับทฤษฎีอนุมูลอิสระของริ้วรอย. ความเสียหายจากอนุมูลอิสระออกซิเจนมีบทบาทสําคัญในกระบวนการของริ้วรอยปอด. ปอดเป็นอวัยวะเดียวที่สื่อสารกับสภาพแวดล้อมภายนอก ในช่วงระยะเวลาหนึ่งสัตว์จะถูกสูดดมด้วยโอโซนอย่างต่อเนื่อง ปอดเป็นคนแรกที่สัมผัสกับโอโซนและมีความเสี่ยงต่อความเสียหายมากที่สุด หลังจากโอโซนเข้าสู่ร่างกายมันจะสร้างอนุมูลอิสระไอออนประจุลบซูเปอร์ออกไซด์ที่มีการใช้งานสูงอย่างรวดเร็ว อนุมูลอิสระส่วนเกินเกินความสามารถในการกําจัดของร่างกายทําลายและบริโภคเอนไซม์กําจัดอนุมูลอิสระ (เช่น SOD) ในร่างกายแล้วทําให้อวัยวะและแม้แต่ร่างกายแก่ชรา ในการทดลองนี้ความสามารถในการต่อต้านการขาดออกซิเจนของหนูสูงวัยที่เกิดจากโอโซนลดลงอย่างมีนัยสําคัญกิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระ SOD ในซีรั่มและเนื้อเยื่อปอดลดลงและการเผาผลาญไขมัน peroxidation MDA เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสําคัญ ด้วยการใช้ Rongrong Duojing 50,100 มก. - กก. 1 การแช่อย่างต่อเนื่องของหนูอายุทดลอง, หนูที่มีอายุมากมีความทนทานต่อการขาดออกซิเจนที่เห็นได้ชัดเพิ่มขึ้น, กิจกรรมของซูเปอร์ออกไซด์ dismutase สําหรับการกําจัดอนุมูลอิสระจะเพิ่มขึ้น. เนื้อหาของสารไขมัน peroxidation จะลดลง, บ่งชี้ว่าโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถเพิ่มการทํางานของสารต้านอนุมูลอิสระของหนูอายุ.

ร่างกาย Lamellar ในไซโตพลาสซึมของเซลล์เยื่อบุผิวชนิดถุงลม n มักใช้ในการวัดการทํางานของเซลล์เยื่อบุผิว การหลั่งของสิ่งมีชีวิต lamellar ที่อดอยากเรียกว่าสารลดแรงตึงผิวถุงซึ่งมีอยู่ที่ส่วนต่อประสานอากาศและของเหลวของถุงลมและสามารถลดแรงตึงผิวของถุงลม การเปลี่ยนแปลงอายุของร่างกาย lamellar สามารถนําไปสู่การลดลงของสารที่ใช้งานพื้นผิวถุง แรงตึงผิวของถุงลมค่อนข้างสูงและแรงหดตัวของถุงลมจะเพิ่มขึ้นซึ่งส่งผลให้เกิดการหดตัวของถุงลม การสังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนพบว่าเซลล์เยื่อบุผิวถุงลมชนิด n ของหนูที่มีอายุมากมีการเปลี่ยนแปลงอย่างมีนัยสําคัญ จะเห็นได้ว่า lamellar corpuscles อ่อนแอลงโครงสร้างเบลอไมโตคอนเดรียบวมและลดลงเอนโดพลาสซึมเรติคูลัมที่หยาบกร้านก็ลดลงเช่นกันและเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินก็หนาขึ้นอย่างมีนัยสําคัญ แม้ว่าการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างที่คล้ายกันสามารถเห็นได้หลังจากการใช้โพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche แต่ระดับจะลดลงอย่างมีนัยสําคัญซึ่งบ่งชี้ว่าโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถปรับปรุงหรือชะลอการเปลี่ยนแปลงความเสื่อมทางสัณฐานวิทยาในร่างกายของเยื่อบุผิวปอด lamellar เซลล์และความเสื่อมของไมโตคอนเดรียในหนูที่มีอายุมากได้อย่างมีนัยสําคัญ โครงสร้างเซลล์ส่วนใหญ่ยังคงสภาพเดิมโดยทั่วไปทําให้การเปลี่ยนแปลงของโครงสร้างปอดล่าช้า ผลการศึกษานี้ชี้ให้เห็นว่าโพลีแซคคาไรด์จาก Cistanche สามารถลดการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างและการทํางานที่เกิดจากความเสียหายออกซิเดชันของปอดที่เกิดจากโอโซนชะลอการแก่ชราของปอดและให้หลักฐานการทดลองสําหรับการวิจัยประยุกต์