ส่วนที่ Ⅱ:การแสดงออกของ PKD1 มากเกินไปทำให้เกิดโรคไต Polycystic

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

Caroline Thivierge, Almira Kurbegovic, Martin Couillard, Richard Guillaume, Olivier Coté และ Marie Trudel

กลไกการก่อโรคที่เป็นรากฐานautosomal เด่น โรคไต polycystic(ADPKD) ยังคงต้องชี้แจง ขณะที่มีหลักฐานว่า PKD1 (โรคไต polycystic 1) ยีน haploinsufficiency และการสูญเสีย heterozygosity อาจทำให้เกิดซีสต์ในหนูเมาส์ ระดับสูงขัดแย้งกับ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ตรวจพบการแสดงออกในไตของผู้ป่วย ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) เพื่อตรวจสอบว่า PKD1 (โรคไต polycystic 1) การทำงานที่เพิ่มขึ้นอาจเป็นกระบวนการที่ทำให้เกิดโรคได้ PKD1 (โรคไต polycystic 1) โครโมโซมเทียมจากแบคทีเรีย PKD1 (โรคไต polycystic 1)-BAC) ถูกดัดแปลงโดยการรวมแบบโฮโมโลกัสเพื่อกำหนดเป้าหมาย PKD1 แบบเนิ่นๆ (โรคไต polycystic 1) การแสดงออกโดยเฉพาะกับไตผู้ใหญ่ สายพันธุ์แปลงพันธุ์หลายสายพันธุ์ถูกสร้างขึ้นซึ่งแสดงออก PKD1 มากเกินไปอย่างจำเพาะ (โรคไต polycystic 1) แปลงยีนในไต 2- ถึง 15-พับเหนือ PKD1 (โรคไต polycystic1) ระดับภายนอก หนูดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมดพัฒนาซีสต์ท่อและไตและไตไม่เพียงพอและเสียชีวิตจากภาวะไตวาย โมเดลนี้แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกที่มากเกินไปของ PKD1 ชนิดไวด์ (โรคไต polycystic 1) เพียงอย่างเดียวก็เพียงพอแล้วที่จะกระตุ้นการสร้างถุงน้ำดีที่คล้ายกับ ADPKD ของมนุษย์ (autosomal เด่นโรคไต polycystic). ผลลัพธ์ของเรายังเผยให้เห็นการแสดงออกของ c-Myc ของไตที่เพิ่มขึ้นอย่างเด่นชัดในหนูจากสายพันธุ์ดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมด ซึ่งบ่งชี้ว่า c-Myc เป็นเอฟเฟกต์ปลายน้ำที่สำคัญในร่างกายของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) วิถีทางโมเลกุล การศึกษานี้ไม่เพียงแต่สร้าง PKD อันล้ำค่าและแรกเท่านั้น（โรคไต polycystic）แบบจำลองเพื่อประเมินการเกิดโรคระดับโมเลกุลและการรักษา แต่ยังให้หลักฐานว่าการทำงานที่เพิ่มขึ้นอาจเป็นกลไกการก่อโรคใน ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal).

Cistanche รักษาโรคไต

คลิกที่นี่เพื่อเป็นส่วนหนึ่ง Ⅰ

ผลลัพธ์

การผลิต PKD1 (โรคไต polycystic 1) -Ac-BAC โดยการรวมตัวคล้ายคลึงกัน เพื่อตรวจสอบว่า PKD1 (โรคไต polycystic 1) การทำงานที่เพิ่มขึ้นเพียงอย่างเดียวก็เพียงพอแล้วที่จะสร้างฟีโนไทป์ของ ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) ก่อนอื่นเราแยกยีนโคลนที่มี PKD1 ทั้งหมด (โรคไต polycystic 1) ยีนในไลบรารี BAC vector 129/Sv ไลบรารีนี้ถูกคัดกรองโดย PCR โดยมีไพรเมอร์สองชุดสำหรับ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ยีนที่ขยาย exon 1 ที่ 5'end และ exons 39 ถึง 40 ไปทาง 3'end (รูปที่ 1) โคลน BAC ที่เป็นบวกสำหรับ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ระบุยีนที่รวมตัวยีน Tsc2 ที่อยู่ติดกันทั้งหมด เม็ดมีด PKD1 (โรคไต polycystic 1) มีลักษณะเฉพาะในรายละเอียดเพื่อให้แน่ใจว่าโครงสร้างจีโนมตรงกับโครงสร้างภายในของ PKD1 (โรคไต polycystic1) ยีนของสายพันธุ์ของหนูเมาส์ 129/Sv จากที่ซึ่งเม็ดมีดได้มาจากและจากสายพันธุ์แท้ C57BL/6J แผนที่จีโนมของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) โลคัสใน BAC และในสายพันธุ์แท้เหล่านี้โดยการวิเคราะห์ Southern blot โดยมีการย่อยด้วยเอ็นไซม์จำกัดสี่ครั้งและโพรบเจ็ดตัวที่ครอบคลุม PKD1 ทั้งหมด (โรคไต polycystic 1)ยีน ปรากฏเหมือนกันโดยไม่มีหลักฐานของการจัดเรียงใหม่ (รูปที่ 1) BAC นี้มีส่วนแทรก -121-kb รวมถึง ~37 kb ของอัปสตรีมและ -39 kb ของลำดับดาวน์สตรีมของ PKD1 (โรคไต polycystic1) ยีนที่กำหนดโดยอิเล็กโตรโฟรีซิสและการจัดลำดับ

รูปที่. 2.การผลิตโครงสร้าง SBPkdlrAc และหนูดัดแปรพันธุกรรม (a) เหตุการณ์การรวมตัวใหม่ที่คล้ายคลึงกันแบบต่อเนื่องได้ดำเนินการบน Pkdl-BAC ของหนูเพื่อแนะนำการดัดแปลงสองแบบ: องค์ประกอบควบคุม SB ที่ใส่ต้นน้ำของ codon การเริ่มต้น Pkdl ทันทีและการกลายพันธุ์จุดเงียบของ EcoRI (RI*) ที่แนะนำใน exon(ex) 10. เวกเตอร์การรวมตัวใหม่ของ BAC มีต้นกำเนิด R6Ky ของการจำลองแบบ, ยีนที่ดื้อต่อแอมพิซิลลิน, ยีน SacB, ยีน RecA และไซต์การโคลน Smal ที่ไม่เหมือนใครซึ่งองค์ประกอบควบคุม "SB" (หรือการกลายพันธุ์จุดเงียบของ exon 10) ถูกโคลน ด้วยแขนยีน Pkd1 ขนาบข้าง เวกเตอร์การรวมตัวใหม่ของ BAC ถูกอิเล็กโตรโพเรเตอร์เข้าไปในเซลล์ E, coli (DH10B) ที่มีชนิดพันธุ์ป่า Pkdl-BAC และหลังจากการเลือก เหตุการณ์การรวมตัวใหม่ที่คล้ายคลึงกันครั้งแรกเกิดขึ้นผ่านทางหนึ่งในสองแขน Pkd1 เพื่อผลิตการรวมตัวของ BAC เวกเตอร์การรวมตัวใหม่และบริเวณ Pkdl ที่ซ้ำกันของการรวมตัวของ BAC ถูกกำจัดในขั้นตอนการคัดเลือกที่สอง Pkdl-BAC ที่แก้ไขแล้วสามารถเปลี่ยนกลับเป็นประเภทไวด์หรือรวมถึงการดัดแปลงที่ตั้งใจไว้ การรวมตัวที่คล้ายคลึงกันที่ตามมาใน BAC ที่แก้ไขใหม่นั้นสามารถนำมาใช้ได้ (b) (ienomc DNA ot SBPkd l-etransgenic mxce ถูก anakZed bv Sou thern blot.AVicToiD1ecLon ของชิ้นส่วนที่เป็นเส้นตรงทำให้เกิดการแทรกของทรานส์ยีนในหัวต่อหัว การวางแนว -to-tail และ/หรือ tail-to-tail 5'end ถูกวิเคราะห์โดยการย่อยของ DNA จีโนมด้วย HindIII และถูกผสมด้วยโพรบ SB transgene จำเพาะ (แผงด้านซ้าย) ทั้งสามสายของเมาส์ที่แปลงพันธุ์สร้าง 10 ที่คาดไว้ .9-kb band สำหรับการแทรกแบบ head-to-tail แถบเพิ่มเติมที่สังเกตพบในบรรทัดที่ 39 น่าจะเป็นส่วนแยกระหว่าง SB และจีโนมของเมาส์ ความสมบูรณ์ภายในของทรานส์ยีนถูกเฝ้าติดตามโดยการย่อยของเอ็นไซม์ที่มีข้อจำกัดหลายอย่าง และ แสดงตัวอย่าง DNA หนึ่งหยดที่ย่อยด้วย EcoRI และผสมด้วยโพรบ Pkdl (exon 7-15) (แผงตรงกลาง)

SBPKD1 นี้ (โรคไต polycystic 1) -BAC clone ถูกแก้ไขโดยเหตุการณ์ recombination ที่คล้ายคลึงกันสองครั้งติดต่อกันใน E. coli ยีน PKD1 (โรคไต polycystic 1) ถูกแท็กใน exon 10 โดยการแทนที่นิวคลีโอไทด์ (G ถึง A) เพื่อสร้างไซต์ EcoRI แบบใหม่ที่ตำแหน่ง 2355 บนแผนที่ cDNA การกลายพันธุ์ของจุดเงียบนี้ถูกสร้างขึ้นเพื่อแยกความแตกต่างของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ยีนและการถอดเสียงของ BAC จากแหล่งกำเนิดภายใน นอกจากนี้ เราได้เปลี่ยนองค์ประกอบกฎเกณฑ์ 5' ของ PKD1 (โรคไต polycystic 1)-ยีน BAC โดยการใช้ประโยชน์จากองค์ประกอบที่จำเพาะของเยื่อบุผิวของไตที่ระบุก่อนหน้านี้ "SB" จาก SBM (เชื่อมโยงกับ c-Myc) หรือ SBF ที่เชื่อมโยงกับ c-fos) โครงสร้าง-ทรานส์-ยีนเพื่อจำกัดการแสดงออกไปยังไต (36, 38)(รูปที่ 2a)

SBPkdlrAG-BAC ใหม่นี้ถูกย่อยด้วย NotL ซึ่งเป็นไซต์ที่ไม่ซ้ำกันซึ่งอยู่ทางต้นน้ำขององค์ประกอบ SB ทันที และ ClaI ภายในร่างกายของยีน Tsc2 โดยจะตัดองค์ประกอบกฎข้อบังคับ Tsc2 และส่วนที่ 5' ของยีนออกเพื่อให้แน่ใจว่าไม่มี T'sc2 การแสดงออกจากภายนอกในเนื้อเยื่อทั้งหมดและเพื่อเอาลำดับเวกเตอร์ BAC ของโปรคาริโอตออก (รูปที่ 1 และ 2) แฟรกเมนต์เชิงเส้น NotI-ClaI ขนาด 70-kb นี้ถูกแยกออก ทำให้บริสุทธิ์ และหาปริมาณสำหรับการฉีดไข่ขนาดเล็ก (36)

ประโยชน์ของ CISTANCHE: การรักษาโรคไต

การผลิตและการวิเคราะห์หนูเมาส์แปลงพันธุ์ SBPkdl-ac ผู้ก่อตั้งดัดแปลงพันธุกรรมสี่รายที่ถือสำเนาของยีน SBPkdlrAc หลายสำเนาซึ่งพัฒนา PKD อย่างสม่ำเสมอ จากสี่ SBPKD1 (โรคไต polycystic 1)หนูผู้ก่อตั้ง RAC ที่กำหนดโดยการวิเคราะห์ภาคใต้ สาม SBPKD1 (โรคไต polycystic 1)TAG สายพันธุ์แปลงพันธุ์ถูกสร้างขึ้นด้วยสำเนาสองถึงเก้าสำเนาของทรานส์ยีน(รูปที่ 2b) การแสดงคุณลักษณะของความสมบูรณ์ของทรานส์ยีนในสายเหล่านี้ถูกเฝ้าติดตามด้วยโพรบ 5', ภายใน และ 3' ตามที่แสดงโดยตัวอย่างที่เป็นตัวแทนในรูปที่ 2b สายแปลงพันธุ์ที่เปิดเผยด้วยโพรบ "SB" 5' แถบที่ 10.9 kb ที่สอดคล้องกับ SBPkdlrAc ยีนทรานส์ถูกรวมเข้าในการวางแนวแบบหัวต่อหางและเปิดเผยด้วยโพรบ 3' วง 7.1-kb (รูปที่ 2b) นอกจากนี้ โพรบภายในตรวจพบแถบ PKD1 ภายในร่างกาย 9.{15}}kb (โรคไต polycystic 1) รวมทั้งแถบ 6.9-kb และ 2.5-kb ของทรานส์ยีน เนื่องจากไซต์การแทรก EcoRI ใน exon 10 (รูปที่ 2b) หนูเมาส์เหล่านี้มีสำเนาที่สมบูรณ์ของทรานส์ยีนที่มีพื้นฐานอยู่บนการวิเคราะห์โครงสร้างที่ทับซ้อนกันของจีโนม

PKD1 (โรคไต polycystic 1) เพิ่มฟังก์ชันในหนูเมาส์แปลงพันธุ์ SBPkdl-Ac สำหรับผู้ใหญ่ การแสดงออกของ SBPkdl-AG ทรานส์ยีนและ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ยีนถูกตรวจสอบในอวัยวะต่างๆ การหาปริมาณของระดับการถอดรหัสจากยีนและ/หรือยีนภายในร่างกายดำเนินการโดยการวิเคราะห์ Northern blot (รูปที่ 3a) ตามที่คาดไว้ ทรานส์ยีนและทรานสคริปยีนภายในร่างกายมีความยาวใกล้เคียงกัน (14.2 kb) ตามการแสดงออกของ GAPDH ในกลุ่มควบคุม ไตจาก SBPkd 1 A ทุกสายของเมาส์มีการแสดงออกของการถอดรหัสเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่องเมื่อเทียบกับ PKD1 ปกติ (โรคไต polycystic 1) ระดับในไตผู้ใหญ่ (n=3) ที่มีอายุใกล้เคียงกัน ยีนของไตและการแสดงออกที่เกิดภายในสำหรับสายแปลงพันธุ์ที่ต่างกันแสดงช่วงของ 2- ถึง 15-เท่าเหนือการควบคุมของไตภายนอก PKD1(โรคไต polycystic 1)ระดับ (รูปที่ 3a) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สายแปลงพันธุ์ 39(n=4) แสดง PKD1 ที่สูงขึ้น (โรคไต polycystic 1) ระดับที่มากกว่าบรรทัดที่ 3 (n=3) และ 41(n=4). นอกจากนี้ PKD1 (โรคไต polycystic 1)ระดับการแสดงออกที่วัดโดยการวิเคราะห์ Northern blot มีความสัมพันธ์กับระดับที่ได้จาก PCR แบบเรียลไทม์โดยใช้ไพรเมอร์ใน exons 1 และ 2 (รูปที่ 3b)

รูปที่ 3การวิเคราะห์การแสดงออกของไตของหนู SBPkdlrA (a) การวิเคราะห์การแสดงออกของการถอดเสียง Pkd1 endogenous(end) และ SBPkdlrA transgene (Tg) ในไตจากยีน 3 สายโดย Northern blotting ตัวอย่างสองตัวอย่างจากแต่ละสายแปลงพันธุ์ 3,39 และ 41 ถูกเปรียบเทียบกับการถอดรหัส Pkdl ของไตภายในตัวของหนูควบคุมปกติที่จับคู่อายุจากภูมิหลังทางพันธุกรรมเดียวกัน (C5BI 6I × CBA/DE, ตัวอย่าง Kidney RNA ได้มาจากหนูดัดแปลงพันธุกรรมก่อน โรคไตวายเรื้อรังระยะสุดท้าย Transcript จาก endo และ Tg มีทั้งความยาว -14.2 kb การแสดงออกที่มากเกินไปอย่างเป็นระบบของการถอดเสียงถูกสังเกตพบในไตของหนูดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมดที่สัมพันธ์กับกลุ่มควบคุมที่ไม่ผ่านการดัดแปลงพันธุกรรม GAPDH ถูกใช้เป็นตัวควบคุมภายใน สำหรับการโหลด การหาปริมาณของการแสดงออกของไตในหนูดัดแปรพันธุกรรมเหล่านี้มีตั้งแต่ 2- ถึง 15- เท่าเมื่อเทียบกับระดับ Pkd1 ภายนอกจากหนูควบคุมที่ตั้งค่าโดยพลการที่ 1 (b) การแสดงแผนผังของ SBPkdl- ทรานส์ยีนและไพรเมอร์คือ ใช้เพื่อขยาย Pkdl ทั้งหมดรวมถึงภายนอกและทรานส์ยีน (exon 1 และ exon 2) และเฉพาะทรานส์ยีน Pkd1 (B. exon 2) โดย PCR แบบเรียลไทม์และ RT-PCR กึ่งปริมาณ การวิเคราะห์ RT-PCR ของการแสดงออกของยีน SBPkdlAc ถูกหาปริมาณในไต และพิเศษ เนื้อเยื่อไต การประเมินกึ่งเชิงปริมาณที่เป็นตัวแทนของทรานส์ยีน SBPkdl.Ac (Tg) แสดงให้เห็นซึ่งรวมถึงตัวอย่างเนื้อเยื่อไต (K) จากหนูเมาส์หนึ่งตัวของสายแปลงพันธุ์ทั้งสาม (3. 39 และ 41) และเนื้อเยื่อภายนอกไต H, หัวใจ; ลู, ปอด; ข. สมอง; ลี่, ตับ; และ S. spleen จากหนูเมาส์ในบรรทัดที่ 39 การแสดงออกของทรานส์ยีนนั้นสามารถตรวจพบได้ง่ายในไตของหนูที่ดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมด ในขณะที่มันอยู่ในระดับต่ำที่จะตรวจไม่พบในเนื้อเยื่อนอกไต การแสดงออกจากทรานส์ยีน SBPkd1rAc สร้างแอมพลิคอน 307-bp เฉพาะ ในขณะที่การควบคุมภายในของ S16 สร้างแอมพลิคอน 102-bp M,100-เครื่องหมาย bp; H, O, การควบคุมเชิงลบสำหรับการขยาย PCR (c) การวิเคราะห์นิพจน์ PCR แบบเรียลไทม์ของ SBPkdlr ทรานส์ยีนถูกกำหนดหาจากหนูเมาส์อิสระหลายตัว ทรานส์ยีน SBPkdl.Ac จากสามสายของหนูเมาส์แปลงพันธุ์ 3 (n=5),39(n =7) และ 41 (n=5) แสดงให้เห็นว่าสายที่ 39 และ 41 มีระดับสูงสุด ระดับการแสดงออกของไต การแสดงออกของยีน SBPkdlrAc ในเนื้อเยื่อนอกไตจากหนูเมาส์ (n=3) ของสายพันธุ์แปลงพันธุ์สามสายพันธุ์ถูกประเมินโดย PCR แบบเรียลไทม์ เมื่อเปรียบเทียบกับไตของแต่ละสายยีน (100 เปอร์เซ็นต์ ) การวิเคราะห์เนื้อเยื่อนอกไตพบว่าระดับการแสดงออกของยีนลดลงอย่างต่อเนื่อง 10- ถึง 1 000-เท่าในสมอง หัวใจ ตับ ตับอ่อน , ม้าม และปอด (d) การแสดงออกของยีน c-mc ภายนอกในไต SBPkdl.Ac โดย RT-PCR แบบกึ่งปริมาณ ภาพประกอบแผนผังแสดงไพรเมอร์ที่ใช้ในการขยาย c-Myc ตามที่คาดไว้ การแสดงออกของ c-Myc นั้นน้อยที่สุดในไตที่ไม่ผ่านการดัดแปลงพันธุกรรมของผู้ใหญ่ (กลุ่มควบคุม) ในทางตรงกันข้าม การตรวจพบการแสดงออกของ c-Mye ที่เพิ่มขึ้นจะตรวจพบในไต SBPkdlrAc ของผู้ใหญ่ทั้งสามเส้น ตามที่สังเกตพบในไต SBM ดัดแปลงพันธุกรรมของผู้ใหญ่ที่ใช้เป็น การควบคุมเชิงบวก แอมพลิคอนของ c-Myc คือ 250 bp; แอมพลิคอนของ S16 ซึ่งเป็นตัวควบคุมภายในคือ 102 bp.M,100-bp marker

การหาปริมาณของระดับการแสดงออกของทรานส์ยีนอย่างจำเพาะถูกดำเนินการโดย PCR แบบเรียลไทม์และ RT-PCR แบบกึ่งปริมาณในสายพันธุ์แปลงพันธุ์สามสายพันธุ์ที่วัยผู้ใหญ่โดยใช้ไพรเมอร์ในบริเวณที่ไม่ได้แปล 5' (B, -โกลบินโปรโมเตอร์) และในเอ็กซอน 2 ของ PKD1 (โรคไต polycystic 1)(รูปที่ 3b). SBPKD1 (โรคไต polycystic 1) การแสดงออกของ RAC ในหนูเมาส์แปลงพันธุ์ถูกเปรียบเทียบกับผลิตภัณฑ์ยีนโปรตีนไรโบโซม S16 เป็นมาตรฐานภายใน สภาวะที่ใช้สำหรับการขยาย RT-PCR แบบกึ่งปริมาณอยู่ภายในช่วงเชิงเส้น การแสดงออกของยีนโดย PCR แบบเรียลไทม์และ RT-PCR กึ่งปริมาณอย่างสม่ำเสมอและเฉพาะเจาะจงแสดงให้เห็นการแสดงออกสูงสุดในไตของสายพันธุ์แปลงพันธุ์ทั้งหมดที่สัมพันธ์กับอวัยวะอื่นๆ (รูปที่ 3b และ c) ระดับการแสดงออกของไตสำหรับแต่ละตัวอย่างสามารถทำซ้ำได้ด้วยเทคนิคการตรวจจับใดๆ ที่ใช้ ระดับสูงสุดของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) การแสดงออกของไตที่ถ่ายทอดทางพันธุกรรมถูกวัดสำหรับบรรทัดที่ 39 และ 41 เพื่อตรวจสอบว่าการแสดงออกของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ที่เพิ่มขึ้นเป็นผลมาจากยีนหรือยีนภายในร่างกาย กลุ่มเดียวกันของหนูเมาส์จากสามสายพันธุกรรมถูกเปรียบเทียบสำหรับไต PKD1 ( โรคไต polycystic 1) การแสดงออกของยีนและสำหรับการแสดงออกของ PKD1 ของไต (โรคไต polycystic 1) ทั้งหมด (ยีนและภายนอก) การแสดงออกโดย PCR แบบเรียลไทม์ ที่น่าสนใจ บรรทัดที่ 39 และ 41 เทียบกับบรรทัดที่ 3 พบว่า PKD1 ที่เพิ่มขึ้น (โรคไต polycystic 1)การแสดงออกของไตแบบทรานส์ยีนมีความคล้ายคลึงกับหรือสูงกว่าการแสดงออกของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ทั้งหมด ซึ่งชี้ไปที่ทรานส์ยีนตามความรับผิดชอบอย่างจำเพาะสำหรับการแสดงออกที่ถูกชักนำนี้ ในอวัยวะต่างๆ (รวมถึง หัวใจ ปอด สมอง ตับ ตับอ่อน และม้าม) SBPKD1 (โรคไต polycystic 1) อาร์เอซี; ทรานส์ยีนแสดงการแสดงออกที่อ่อนแอมากซึ่งตรวจพบเป็นครั้งคราวในม้ามและปอด โดยมีการแสดงออกเพียงเล็กน้อยหรือตรวจไม่พบในอวัยวะอื่น (รูปที่ 3b) การหาปริมาณโดย PCR แบบเรียลไทม์แสดงให้เห็น 10-ถึง 1,000-ระดับที่ต่ำกว่าของการแสดงออกของยีนในเนื้อเยื่อนอกไตที่สัมพันธ์กับการแสดงออกของไต (รูปที่ 3c) องค์ประกอบควบคุม "SB" ของทรานส์ยีน SBPkdlrAc การแสดงออกของไตที่พึงประสงค์ที่ได้รับ; การกระจายอวัยวะเฉพาะนี้ถูกกำหนดเช่นกันเมื่อใช้ในทรานส์ยีนที่เชื่อมโยงกับ c-Myc (SBM) และ c-fos(SBF)(36, 38) c-Mye ซึ่งเป็นเอฟเฟกต์ปลายน้ำของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) เส้นทางการส่งสัญญาณใน SBPkdlrAc: หนู เพื่อให้ได้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกการก่อโรคภายในเซลล์ของหนูแปลงพันธุ์ SBPkdlrAc เราจึงพยายามตรวจสอบระดับการแสดงออกของไต c-Myc โดยอิงจากการสังเกตก่อนหน้านี้ของเราเกี่ยวกับการลดระเบียบ c-Myc ในไต ADPKD ของมนุษย์ (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) (22) วิเคราะห์ไตจากสายแปลงพันธุ์ทั้งสาม 3(n=4).39(n=7) และ 41 (n =4) ​​รวมทั้งกลุ่มควบคุม (n {{9 }}) ดังแสดงในรูปที่ 3d มีการแสดงออกที่สำคัญของ c-Mye ที่เกิดภายในตัวในหนู SBPkdlrAa ที่สัมพันธ์กับหนูทดลองที่มีอายุใกล้เคียงกัน ที่น่าสนใจ ระดับของการแสดงออกของ c-Myc ในไต SBPkdlrAG บางตัว โดยเฉพาะอย่างยิ่งในบรรทัดที่ 39 นั้นถึงระดับที่เทียบได้กับระดับที่สังเกตได้ในแบบจำลองเมาส์แปลงพันธุ์ PKD SBM ที่เกิดจากการแสดงออกของ c-Myc ของไต

ความผิดปกติของไตใน SBPKD1 (โรคไต polycystic 1) ARC mice similar to PKD. To characterize the phenotype caused by the transgene expression, gross and histologic examinations were undertaken on transgenic kidneys. Adult kidneys from all transgenic lines were affected bilaterally. Kidneys contained numerous cortical cysts that varied from microscopic to macroscopic in size (Fig.4a and b). SBPkdlrAc. kidneys were pale, a typical finding in PKD. On histologic examination, all transgenic founder mice and progenies (n = 25;n>6 สำหรับแต่ละบรรทัด) ได้พัฒนาซีสต์แบบท่อ (T) และไต (G) จำนวนมาก (รูปที่ 4d, f และ g) ซีสต์ถูกสังเกตพบใน tubules จากบริเวณคอร์เทกซ์และไขกระดูกรวมทั้งรวบรวม tubules จาก papilla (รูปที่ 4d และ e) หนูเมาส์แปลงพันธุ์แสดงการเกิด hyperplasia ของเยื่อบุผิวแบบท่อ (หัวลูกศร) ที่เกี่ยวข้องกับทั้งหลอดที่เป็นซีสติกและไม่ใช่ซิสติกและการเจริญเติบโตมากเกินไปบ่อยครั้ง (รูปที่ 4g และ h) แต่ความรุนแรงแตกต่างกันไปตามแต่ละหนู การเกิดพังผืดคั่นระหว่างหน้า (F). perivascular lymphoid infiltrates และ proteinaceous cast (P)ถูกสังเกตพบบ่อยครั้ง (รูปที่ 4d และ e)

มะเดื่อ 4

เพื่อกำหนดไซต์การแปลเป็นภาษาท้องถิ่นของ PKD1 ที่เพิ่มขึ้นได้อย่างแม่นยำยิ่งขึ้น (โรคไต polycystic 1)การแสดงออกในไต เราดำเนินการในแหล่งกำเนิดไฮบริดโดยใช้โพรบ exon 36-45 ที่ใช้ก่อนหน้านี้(16) สัญญาณไฮบริไดเซชันถูกจำกัดตำแหน่งอย่างจำเพาะกับเซลล์เยื่อบุผิวที่บุถุงซีสต์และไฮเปอร์พลาสติกทูบูลรวมทั้งซีสต์ไต นอกจากนี้ ยังมีสัญญาณบางอย่างที่มองเห็นได้เหนือเยื่อบุผิวของท่อที่ไม่ใช่ถุงน้ำดีหรือท่อที่ขยายออกเล็กน้อย ซึ่งน่าจะระบุท่อที่ถูกกำหนดให้ได้รับการเปลี่ยนแปลงเรื้อรังในอนาคต (รูปที่ 4i และ j) การวิเคราะห์ทางจุลพยาธิวิทยาของไตยังดำเนินการกับหนูเมาส์แปลงพันธุ์ที่เกิด (n=8), วันที่ 10(P10)(n=3),P20(n=5),P35(n{ {10}})และ P45(n= 3) เมื่อเปรียบเทียบกับลูกครอกเชิงลบของกลุ่มอายุเดียวกัน (n =2 ถึง 4) สิ่งที่น่าสนใจคือ หนูเมาส์แปลงพันธุ์แรกเกิดทั้งหมดแสดงการขยายตัวของท่อและไตที่สัมพันธ์กับ ควบคุมลูกครอกเชิงลบ (รูปที่ 4k และ 1) ซึ่งบ่งชี้ว่าความผิดปกติของไตที่เกิดขึ้นในมดลูกตามที่สังเกตในหนู SBM และใน ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) ผู้ป่วย. การขยายตัวของท่อและไตมีขนาดและจำนวนเพิ่มขึ้นตามอายุที่มากขึ้น โดย P35 หนูดัดแปรพันธุกรรมแสดงภาวะ hyperplasia ที่รุนแรงมากขึ้นและหลักฐานของ glomerulosclerosis หน้าที่ทางสรีรวิทยาของไตที่เปลี่ยนแปลงไปในหนู SBPkdlrsc หน้าที่ทางสรีรวิทยาของไตของหนูดัดแปรพันธุกรรมทั้งหมดแสดงลักษณะที่คล้ายกับ PKD ในขณะที่ลูกครอกที่ไม่ผ่านการดัดแปลงพันธุกรรมไม่เคยพัฒนาโรค ภายในเวลาไม่กี่เดือนหลังคลอด สัตว์ที่ได้รับผลกระทบพัฒนาภาวะไตวายเรื้อรัง สัตว์เหล่านี้ได้รับการตรวจสอบพารามิเตอร์การทำงานของไตโดยการวัดระดับซีรัมและปัสสาวะ ยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN)และครีเอตินีน ออสโมลาลิตีของปัสสาวะ โปรตีนในปัสสาวะ และการขับไอออน (ตารางที่ 1) หนูทั้งหมดจากสามบรรทัดเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมแสดงข้อบกพร่องที่มุ่งเน้นซึ่งเป็นข้อค้นพบทั่วไปใน ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal). และส่งผลให้ BUN ปัสสาวะลดลง ความเข้มข้นของครีเอตินีน โปรตีน และธาตุเหล็ก ยีน SBPKD1 (โรคไต polycystic 1)rAc.founders และ progenies (n=6) จากแต่ละบรรทัดถูกเฝ้าติดตามในเชิงคุณภาพสำหรับโปรตีนในปัสสาวะในตัวอย่างปัสสาวะโดย SDS-PAGE(รูปที่ 5) หนูที่มีอายุมากกว่า 2 เดือนแสดงโปรตีนในปัสสาวะที่ไม่ผ่านการคัดเลือกซึ่งเจริญขึ้นตามอายุ นอกจากนี้ ระดับของ BUN ในซีรัมและครีเอตินีนในซีรัมยังเพิ่มขึ้น เผยให้เห็นถึงภาวะไตไม่เพียงพอ (ตารางที่ 2) เนื่องจากภาวะไตไม่เพียงพอเรื้อรังมักนำไปสู่การเปลี่ยนแปลงในพารามิเตอร์ทางโลหิตวิทยา จึงได้มีการตรวจสอบสิ่งเหล่านี้ในหนูดัดแปลงพันธุกรรม SBPkdlAc อายุ 3 ถึง 14 เดือน (ตารางที่ 2) หนูดัดแปรพันธุกรรมเหล่านี้เป็นโรคโลหิตจางตามหลักฐานจากจำนวนเซลล์เม็ดเลือดแดงที่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ โดยฮีโมโกลบินและฮีมาโตคริตถึงครึ่งหนึ่งของระดับปกติ พารามิเตอร์ของเซลล์เม็ดเลือดแดงอื่นๆ เช่น เปอร์เซ็นต์ของเรติคูโลไซต์ ไม่ได้รับผลกระทบ ตามที่คาดไว้เมื่อเกิดจากความผิดปกติของไต สัตว์เหล่านี้เสียชีวิตอย่างต่อเนื่องจากภาวะไตวายที่ -5.9± 2.8 เดือน (n {{12}) }) สำหรับสายพันธุ์ทรานส์เจนิก 39 และในวัยต่อมา-14.6± 3.1 เดือน (n= 20)และ-11.7 ±6.5 เดือน (n=7) สำหรับบรรทัดที่ 3 และ 41 ตามลำดับ

ผลของ CISTANCHE: การรักษาโรคไต

อภิปรายผล

ในที่นี้ เรารายงานการแยกและการกำหนดลักษณะของหนู PKD1 (โรคไต polycystic 1)-ธ.ก.ส. PKD1 นี้ (โรคไต polycystic 1) ยีนถูกแท็กและองค์ประกอบควบคุมถูกแทนที่ด้วยการแสดงออกเป้าหมายโดยเฉพาะกับไตโดยเหตุการณ์การรวมตัวใหม่ที่คล้ายคลึงกันสองครั้งติดต่อกัน หนูเมาส์แปลงพันธุ์ที่ผลิตด้วยยีน SBPkdlrAG สายพันธุ์ใหม่นี้แสดงการแสดงออกของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) เพิ่มขึ้น 2-ถึง 15-เท่า และพัฒนาการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาของไตในระยะเริ่มแรกตามแบบฉบับของ PKD ที่ทำซ้ำได้ ภาวะไตไม่เพียงพอปรากฏชัดในวัยกลางคน และหนูตายก่อนเวลาอันควรจากภาวะไตวาย ผลลัพธ์ของเรายังระบุด้วยว่ากลไกการแสดงออกมากเกินไปของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ที่รับผิดชอบต่อฟีโนไทป์นี้เป็นสื่อกลางโดยการส่งสัญญาณการเปิดใช้งาน c-Myc ในร่างกาย การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า PKD1 ของหนู (โรคไต polycystic 1) ทำงานได้ในไตเพียงพอที่จะสร้างฟีโนไทป์ของไต PKD

เนื่องจากหนู PKD1 (โรคไต polycystic 1) ยีนไม่ซ้ำซ้อนเหมือนในมนุษย์ (27) เราได้ระบุและแยกโคลน BAC โดยตรงที่มี PKD1 ทั้งหมด (โรคไต polycystic 1) ยีน ระบุลักษณะที่สมบูรณ์ของ 129/Sv murine PKD1 (โรคไต polycystic 1)-ธ.ก.ส. การเปรียบเทียบทางอ้อมกับหนูเมาส์สายพันธุ์อื่นอีก 2 สายพันธุ์ ยืนยันความสมบูรณ์ของโลคัส PKD1 (โรคไต polycystic 1) พีเคดี1 (โรคไต polycystic 1)-BACinsert มีลำดับต้นน้ำและปลายน้ำ -37 ถึง 39 kb จากยีน PKD1 (โรคไต polycystic 1) การวิเคราะห์ของเราแสดงให้เห็นว่า PKD1 (โรคไต polycystic 1) ยีนใน BAC นี้เป็นโลคัสป่าของหนูโดยแท้จริงซึ่งสามารถให้บริการสำหรับการศึกษาต่อไปได้

แม้ว่าจะมีหลักฐานที่ชัดเจนว่าการก่อตัวของซีสต์ใน ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) อาจเป็นผลมาจากการสูญเสีย heterozygosity หลังจากการหยุดการทำงานของร่างกายของ PKD1 ปกติ (โรคไต polycystic 1) อัลลีล (3.21.32) นอกจากนี้ยังมีหลักฐานที่บ่งชี้ถึงการแสดงออกของโพลีซิสตินที่คงอยู่หรือเพิ่มขึ้น-1ในเยื่อบุผิวซีสต์ทูบูลาร์ (22.29) การสังเกตหลังทำให้เกิดคำถามว่าการแสดงออกมากเกินไปของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ต่อ se เป็นสาเหตุที่ใกล้เคียงเพียงพอของการเกิด cystogenesis หรือไม่ ในหนูเมาส์แปลงพันธุ์ที่มี PKD1 ของมนุษย์ (โรคไต polycystic 1), TSC2. RAB26. ยีน NTHL1 และ SLC9A3R2 มีหนูเพียงส่วนน้อยเท่านั้นที่พัฒนาซีสต์และไม่มีใครมีการแสดงออกของยีนที่ตรวจพบได้ในวัยผู้ใหญ่แม้จะมีทรานส์ยีน 30 สำเนา (31) ในหนูดัดแปรพันธุกรรมเหล่านั้น เป็นการยากที่จะกำหนดบทบาทที่ชัดเจนสำหรับการแสดงออกของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) มากเกินไปในการเกิด cystogenesis แบบจำลองของเรามีความแตกต่างกัน เนื่องจากสำเนา PKD1 (โรคไต polycystic 1) สองถึงเก้าชุดเพียงอย่างเดียว โดยไม่มียีนที่ต่อเนื่องกัน ถูกรวมเข้ากับหนูดัดแปลงพันธุกรรม เนื่องจากยีน PKD1 (โรคไต polycystic 1) มีหน้าที่สำคัญในอวัยวะหรือเนื้อเยื่อต่างๆ ดังที่อธิบายไว้สำหรับหนูจำนวนมากที่มีการทำลายยีน PKD1 (โรคไต polycystic 1) การแสดงออกทางระบบของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) อาจนำไปสู่ผลกระทบที่น่าสับสนเพิ่มเติม ดังนั้นเราจึงได้กล่าวถึงบทบาทของ PKD1 (โรคไต polycystic 1)ทำงานเพิ่มขึ้นโดยใช้วิธีการที่กำหนดเป้าหมายไปที่ PKD1 (โรคไต polycystic 1) โดยเฉพาะกับไต โดยการรวมตัวใหม่ที่คล้ายคลึงกัน ก่อนอื่นเราได้แทนที่บริเวณควบคุม PKD1 (โรคไต polycystic 1) ต้นน้ำด้วยองค์ประกอบควบคุมที่จำกัดการทำงานของไต "SB" ด้วยเหตุนี้จึงป้องกันการแสดงออกของยีนที่ลดลงตามปกติที่เห็นได้สำหรับ PKD1 (โรคไต polycystic 1)ในวัยผู้ใหญ่และกฎระเบียบของวงป้อนกลับรองที่อาจเกิดขึ้น (36,38) ประการที่สอง เราได้ทำเครื่องหมายของหนู PKD1 (โรคไต polycystic 1) ทรานส์ยีน (Pkdlr) ที่มีการกลายพันธุ์แบบจุดเงียบใน exon 10แต่ไม่ได้ใส่แท็กเอพิโทปเพื่อให้แน่ใจว่าจะมีการผลิตโปรตีน "ชนิดพันธุ์ป่า" ที่ทำงานได้อย่างสมบูรณ์พร้อมโครงสร้างที่อนุรักษ์ไว้และความสมบูรณ์ จาก BAC ที่ดัดแปลงนี้ ชิ้นส่วน SBPkdlrAG ถูกทำให้บริสุทธิ์จากยีน Tsc2 และเวกเตอร์ BAC เพื่อป้องกันการแทรกแซงโดยยีน Tsc2 ซึ่งยังสามารถทำให้เกิดซีสติกฟีโนไทป์ (8.20.28) รวมทั้งเพื่อหลีกเลี่ยงผลการยับยั้งของลำดับโปรคาริโอต (5)

หนูผู้ก่อตั้ง SBPkdlrActransgenic ที่แตกต่างกันสี่ตัวและสามสายอิสระถูกผลิตขึ้นด้วย PKD1 ของไตจำเพาะ (โรคไต polycystic 1) - นิพจน์ที่ปรับปรุงแล้ว ที่โดดเด่นเป็นพิเศษคือการแทรกซึมที่สมบูรณ์ของฟีโนไทป์ในหนูดัดแปรพันธุกรรมเหล่านี้ SBPKD1 (โรคไต polycystic 1) ผู้ก่อตั้ง rAc และกลุ่มผลิตภัณฑ์เมาส์แบ่งปันลักษณะทางสรีรวิทยาหลายอย่างที่เหมือนกันกับ ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) ซึ่งรวมถึงการพัฒนาของซีสต์ในคอร์เทกซ์ ไขกระดูก และโกลเมอรูไลร่วมกับเยื่อบุผิว hyperplasia พังผืดคั่นระหว่างหน้า และการอักเสบของคั่นระหว่างโฟกัส

เนื่องจากฟีโนไทป์ของ PKD ถูกสังเกตอย่างสม่ำเสมอในหนูผู้ก่อตั้งดัดแปลงพันธุกรรมที่แตกต่างกันทั้งหมด และการรวมทรานส์ยีนเข้ากับจีโนมของหนูเมาส์เป็นปรากฏการณ์แบบสุ่ม ฟีโนไทป์ไม่สามารถเป็นผลมาจากผลกระทบของตำแหน่งโครโมโซมแต่จากการเพิ่มขึ้นของ PKD1 เท่านั้น (โรคไต polycystic 1)การแสดงออก. โดยแท้จริงแล้ว การแสดงออกของยีน PKD1 (โรคไต polycystic 1) ในทุกสายได้รับการพิสูจน์ว่าถูกจำกัดการทำงานของไต ตามที่สังเกตพบก่อนหน้านี้สำหรับทรานส์ยีนอื่นๆ ที่ถูกควบคุมโดยองค์ประกอบ "SB" (36,38) นอกจากนี้ การแสดงออกของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ที่เพิ่มขึ้นนี้เกิดจากทรานส์ยีนและไม่ได้เกิดจาก PKD1 ภายนอกโดยทางอ้อม (โรคไต polycystic 1) การเปิดใช้งาน ดังนั้น ผลลัพธ์ของเราจึงเป็นหลักฐานที่ชัดเจนว่าการเพิ่มการทำงานของ PKD1 ที่ทำงานได้ตามธรรมชาติ (โรคไต polycystic 1) สามารถผลิตซีสต์ในไตได้หลายซีสต์ ที่สำคัญ แนวทางปฏิบัติ SBPKD1 (โรคไต polycystic 1) เหล่านี้เป็นแบบจำลองหนูเมาส์ตัวแรกที่สร้างขึ้นโดยการแสดงออกที่มากเกินไปของเมาส์ orthologue ของมนุษย์ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ยีน

หนูเมาส์ SBPkdl-Ac แสดงให้เห็นว่า PKD1 (โรคไต polycystic 1)การแสดงออกมากเกินไปเป็นกลไกการก่อโรคหลักของการสร้างถุงน้ำดีในไต ที่สำคัญ ระดับการแสดงออกของยีนสูงสุดในไตมีความสัมพันธ์กับความก้าวหน้าและความรุนแรงของฟีโนไทป์ นอกจากนี้เรายังพบว่า PKD1 (โรคไต polycystic 1) แสดงออกมากเกินไปในการพัฒนา SBPKD1 (โรคไต polycystic 1) - ฟีโนไทป์ของ Ac มีแนวโน้มที่จะส่งสัญญาณการเปิดใช้งาน c-Myc ในร่างกาย เป็นไปได้ว่าการกระตุ้นนี้อาจโดยตรงผ่านทางโพลีซิสติน-1 การสลายตัวของโปรตีนใต้ส่วนปลาย C ที่อยู่ใต้การย่อยและการเคลื่อนย้ายนิวเคลียร์ (7) เนื่องจากการแสดงออกของไตที่เพิ่มขึ้นของ c-Myc ในหนูที่โตเต็มวัยถูกแสดงเพื่อกระตุ้น PKD มัน จะสอดคล้องอย่างมากในการสนับสนุน c-Myc ในฐานะเอฟเฟกต์ปลายน้ำที่สำคัญของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) เส้นทางการส่งสัญญาณ ผลลัพธ์นี้ยังสัมพันธ์กับการค้นพบก่อนหน้านี้ของเราเกี่ยวกับการแสดงออกของ c-Myc ที่เพิ่มขึ้นในไตของ ADPKD ของมนุษย์ทั้งหมด (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) ที่วิเคราะห์ (22) โดยรวมแล้ว ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า c-Mye เป็นตัวกลางที่สำคัญของ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ซิสโตเจเนซิส

ผลลัพธ์ของเราจาก PKD1 (โรคไต polycystic 1)แบบจำลองการเพิ่มของฟังก์ชัน ร่วมกับ PKD1 ของหนู (โรคไต polycystic 1) haploinsufficiency และการสูญเสียการทำงาน บ่งชี้ว่า PKD1 ใดๆ (โรคไต polycystic 1) การควบคุมที่ผิดปกติอาจนำไปสู่การสร้างถุงน้ำดี (2.19.23-26.31.40) PKD1 รุนแรง (โรคไต polycystic 1) ความไม่สมดุลในหนูที่เกิดจาก PKD1 (โรคไต polycystic 1) การระเหยหรือการแสดงออกที่มากเกินไปของยีนทำให้เกิดการเริ่มมีอาการและความก้าวหน้าอย่างรวดเร็วของซีสต์ในไตและส่งผลต่อสัดส่วนของ tubules ที่สูง ในทางตรงกันข้าม PKD1 ที่อ่อนกว่า (โรคไต polycystic 1) ความไม่สมดุลเช่น haploinsufficiency นำไปสู่ความก้าวหน้าที่ช้าลงของ PKD ที่มีซีสต์โฟกัสมากขึ้น การพัฒนาที่ขัดแย้งกันอย่างเห็นได้ชัดของฟีโนไทป์ที่คล้ายคลึงกันโดยใช้การควบคุมการผิดปกติของ polycystin-1 ที่ตรงกันข้ามสามารถอธิบายได้ด้วยผลลัพธ์ทั่วไป กล่าวคือ ความไม่สมดุลของความเข้มข้นของโปรตีนสัมพัทธ์ที่สามารถเปลี่ยนแปลงการก่อตัวหรือการทำงานของสารเชิงซ้อนของ polycystin multiprotein ที่ทำงานอยู่ เมื่อนำมารวมกัน ผลลัพธ์ของเราและผู้วิจัยคนอื่นๆ โต้แย้งว่ากลไกของการสร้างซีสต์ใน ADPKD (โรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomal) มีแนวโน้มที่จะเกิดขึ้นจากกลไกการก่อโรคสามอย่าง: การทำงานที่เพิ่มขึ้น การสูญเสียการทำงาน และผลกระทบของปริมาณยีน

นวนิยาย SBPkdlrAc; หนูเป็นแบบจำลองที่มีประสิทธิภาพของการสร้างถุงน้ำดีในไตซึ่งสามารถให้ข้อมูลเชิงลึกที่สำคัญเกี่ยวกับพยาธิสรีรวิทยาของ PKD, PKD1 (โรคไต polycystic 1) เส้นทางการส่งสัญญาณและพันธมิตรที่มีปฏิสัมพันธ์ การศึกษาแบบจำลองนี้อาจนำไปสู่การพัฒนากลยุทธ์การรักษาแบบใหม่เพื่อคืนสมดุลของโปรตีนให้เป็นปกติภายใน PKD1 (โรคไต polycystic 1) คอมเพล็กซ์มัลติเมอร์

Cistanche รักษาโรคไตและปรับปรุงการทำงานของไต

ข้อมูลอ้างอิง

1. Blouin, MJ, H.Beachemin, A Wright, M E. De Paepe, M. Surrette, AM. โบ. บี. นากาโมโตะ ซีเอ็น. Ou, G. Stamatoyannopoulos และ M. Trudel พ.ศ. 2543 การแก้ไขทางพันธุกรรมของโรคเซลล์เคียว: ข้อมูลเชิงลึกโดยใช้แบบจำลองเมาส์แปลงพันธุ์ แพทย์17-182.

2 Boulter, C, S.Mulroy, S. Webb, S. Fleming, K. Brindle และ R. Sandford พ.ศ. 2544 โรคหัวใจและหลอดเลือด โครงกระดูก และความบกพร่องของไตในหนูที่มีการหยุดชะงักของเป้าหมายของ PKD1 (โรคไต polycystic 1)ยีน. Proc. Natl.Acad. วิทย์. สหรัฐอเมริกา 9812174-12179

3. Brasier, JL และ EPHenske.1997 การสูญเสียของโรคไต polycystic(PKD1) บริเวณโครโมโซม 1φp13 ในเซลล์ซีสต์ของไตรองรับแบบจำลองการสูญเสียหน้าที่การงานสำหรับการเกิดโรคของซีสต์ J. Clin. Investig.99:194-199

4. Burn, TC, TD Connars, W. R Dackowski, LR.Petry,TJVan Raay, JMMilhalland, M. Venet, G. Milker,R ML Hakim,G. ML Landes, KW Klinger, F. เกียม, LF. Onuchic, T. Watnick GGGermino และ N. A Doggett.1995. Anay sis ของลำดับจีโนมสำหรับโรคไต polycystic ที่โดดเด่น autosomalยีนทำนายการปรากฏตัวของซ้ำที่อุดมด้วย leucine Hum Mol, Genet.4-575-58.

5. Chada, K, J.Magram, K. Raphael, G.Radice, E. Lacy และ F.Costantini พ.ศ. 2528 การแสดงออกจำเพาะของยีน -โกลบินต่างประเทศในเซลล์อีรีทรอยด์ของหนูดัดแปรพันธุกรรม Nature 337-380

6. Chauvet, V, F.Qian, N. ซื้อ,Y.Cai B.Phakdeekitacharoen, LF.Onuchi, T. Attie-Bitach, L. Guicharnaud, O.Devuryst,GG Germino, and M.-C. Gubler.2002 การแสดงออกของ PKDI และ PKD2 transcripts และโปรตีนในตัวอ่อนของมนุษย์และในระหว่างการพัฒนาไตตามปกติ เป็น. เจ.ภัทร. 160973-983.

7.Chaurvet, V, X Tian, ​​H.Husson, DH Grimm, T.Wang T.Hiesberger, P. Igarashi, AMBennett, O.braghimov-Beskrovnaya, S.Somlo และ MJ Caplan.2004 สิ่งเร้าทางกลทำให้เกิดความแตกแยกและนิวเคลียร์ การโยกย้ายของ pobeystin-1 C terminus.J. Cin.Investig 114:1433-1443.

8. Cheadle, JP, MPReeve, JR Sampson และ DJ Kwiatkowski 2000 ความก้าวหน้าทางพันธุกรรมระดับโมเลกุลใน tuberous sclerosis ฮึ่ม ยีน10797-114.

9. กิจการร่วมค้า EPKD1993 การระบุและการกำหนดลักษณะเฉพาะของยีน tuberous sclerosis บนโครโมโซม 16.Cell75:1305-1315

10. สมาคม EPKD1994.Theโรคไต polycystic 1ยีนเข้ารหัสทั้งหมดที่สามารถถอดเสียงได้ภายในบริเวณที่ทำซ้ำบนโครโมโซม 16 เซลล์ 7781-894

11. Consortium, L PK D 1995.โรคไต Polycystic: โครงสร้างที่สมบูรณ์ของ PKD1 (โรคไต polycystic1) ยีนและโปรตีนของมัน ซี 81:289-298

12. Couillard, M.,R Guilkume, N Tanj, V.DAgati และ M. Trudel.2002 c-Myc-Induced apoptosis ในโรคไต polycysticเป็นอิสระจากการโต้ตอบของ FasL/Fas มะเร็ง Res. 62:2210-2214.

13. De Paepe, M Land M Trudy 1904, แบบจำลองเซลล์เม็ดเลือดแดงรูปเคียวของมนุษย์ ไตอินเตอร์ 46:1337-1345.

14. GengL,Y, Segal B.PekseL N.Den Y. Pei,F.Carone, HG Rennke, AM Glücksman-Kuis, MCSchneider, M Ericsson, STReeders และ J.Zhou พ.ศ. 2539 การระบุและการโลคัลไลเซชันของโพลีเอสเตอร์ PKD1 (โรคไต polycystic 1) ผลิตภัณฑ์ยีน เจ. คลิน. สำรวจ 98-2674-2682