ส่วนที่ 2: น้ำนมของมนุษย์ Oligosaccharide 2/-Fucosyllactose กระตุ้นการป้องกันระบบประสาทจากโรคหลอดเลือดสมองตีบ

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

กรุณาคลิกที่นี่เพื่อส่วนที่ 1

3. อภิปราย

ในการศึกษานี้ 2FL ลดการกระตุ้น microglia ที่เกิดจากเฮมินและการเสื่อมสภาพของระบบประสาทในคอร์เทกซ์ปฐมภูมิเซลล์ประสาทและโคคัลเจอร์ BV2 microglia 2FL ปรับปรุงการทำงานของหัวรถจักรในหนู ICH ด้วยการใช้การวิเคราะห์อิมมูโนฮิสโตเคมีและ qPCR เราแสดงให้เห็นว่า 2FL ยับยั้งการกระตุ้นไมโครเกลีย, CD4(บวก) การแทรกซึมของลิมโฟไซต์ CD4(บวก) และการแสดงออกของตัวบ่งชี้ความเค้นในสมองและ ER ในสมองของ ICH การค้นพบหลักของการศึกษานี้คือ 2FL คือสารป้องกันประสาทต่อการบาดเจ็บของ ICH

ICH ทำให้สมองเสียหายเฉียบพลันและไม่สามารถย้อนกลับได้ หลังจากการดูถูกอย่างเฉียบพลัน ปฏิกิริยาน้ำตกหลายชุดก็เปิดขึ้น ซึ่งส่งผลให้เกิดความเสื่อมเรื้อรังในขั้นทุติยภูมิ เฮโมโกลบินและผลิตภัณฑ์จากการย่อยสลายมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการบาดเจ็บทุติยภูมิ เฮมินเป็นพิษต่อเซลล์และก่อให้เกิดความเสียหายต่อสมอง ร่วมกับโรคหลอดเลือดสมองตีบ [21,22] เฮมินที่มากเกินไปกระตุ้นปฏิกิริยาลูกโซ่อนุมูลอิสระ [23] และอำนวยความสะดวกในการตายของเซลล์และไมโทคอนเดรีย [24] เฮมินยังกระตุ้นการกระตุ้น microglial และทำให้อาการบาดเจ็บที่อวัยวะภายในรุนแรงขึ้นหลังจากการตกเลือดในสมอง [25,26] ในการศึกษานี้ ใช้เฮมินเพื่อจำลอง ICH ใน aเซลล์ประสาทและโคคัลเจอร์ BV2 microglia เราแสดงให้เห็นว่าเฮมินเป็นพิษต่อระบบประสาทและไมโครเกลียที่เปิดใช้งาน การรักษาด้วย 2FL ลดการกระตุ้น IBA1 ที่อาศัย hemin-mediated และฟื้นฟู MAP2 immunoreactivity ข้อมูลของเราแนะนำว่า 2FL นั้นต่อต้านการฉีดยาชาและสารป้องกันประสาทในรูปแบบเซลลูลาร์ของ ICH

ก่อนหน้านี้ เราแสดงให้เห็นว่าการฉีดคอลลาเจนในท้องถิ่นส่งผลให้เกิด ICH และ bradykinesia ในหนู [13] ในการศึกษานี้ ใช้แบบจำลองสัตว์ที่คล้ายกันเพื่อตรวจสอบผลการป้องกันของ 2FL ในร่างกาย เราแสดงให้เห็นว่าการใช้ 2FL อย่างเป็นระบบเป็นเวลา 5 วันช่วยปรับปรุงการเคลื่อนไหวของหัวรถจักรในหนู ICH เนื่องจากการอักเสบมีบทบาทสำคัญในการพัฒนา ICH [7,8,27] เราจึงพบการกระตุ้น microglia ในสมองของ ICH ด้วย 2FL ลด IBA1-ir และฟื้นฟู microglia บางส่วนในสมอง ICH ที่มีรอยโรค นอกจากนี้ เราพบว่า 2FL ควบคุมการแสดงออกของผู้ผลิตไมโครเกลีย/มาโครฟาจ M2 (ป้องกันการแทรกซึม) ในสมองของหนู ICH ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า 2FL ยับยั้งการกระตุ้นไมโครเกลียที่อาศัย ICH ในสมองที่ได้รับบาดเจ็บ

ICH ส่งเสริมการย้ายเซลล์ภูมิคุ้มกันส่วนปลาย เช่น CD4 plus และ CD8 plus T cells ไปยังสมองที่มีรอยโรค [28,29] ก่อนหน้านี้เราได้รายงานการแสดงออกของ T-cell markers ที่เป็นพิษต่อเซลล์ในสมองของ ICH [13] นอกจากนี้ การแทรกซึมสูงสุดของเซลล์ CD4 T อยู่ระหว่างวันที่ 3 ถึง 4 หลังการบาดเจ็บจากการขาดเลือดในหนูเมาส์ [30] ในการศึกษานี้ เราแสดงให้เห็นว่า ICH เพิ่ม CD4 บวกกับการแทรกซึมของลิมโฟไซต์เข้าไปใน striatum ที่มีรอยโรคในวันที่ 5 ในหนู; การแทรกซึมของเซลล์ CD4 ลดลงอย่างเห็นได้ชัดโดย 2FL ข้อมูลเหล่านี้สนับสนุนแนวคิดที่ว่า 2FL ยับยั้งการย้าย T-cell จากส่วนนอกไปยังสมองของ ICH

Cistanche มีฤทธิ์ป้องกันระบบประสาท

การศึกษาก่อนหน้านี้ระบุว่า 2FL มีผลป้องกันในบริเวณรอบนอก ในเซลล์ลำไส้ของมนุษย์ 2FL ลดการเหนี่ยวนำของ CD14 [18] และการแสดงออกของ IL-8, IL-1b และ MIP-2 [31] 2FL ยังลดความรุนแรงของ necrotizing enterocolitis ในลำไส้เล็กของหนูแรกเกิด [32] ในการศึกษานี้ เราแสดงให้เห็นว่า 2FL มีสารต้านการแทรกซึมและสารป้องกันประสาทผลกระทบในสมองของ ICH การศึกษาอื่น ๆ ยังสนับสนุนว่า 2FL ปรับปรุงการเรียนรู้และศักยภาพในระยะยาวของสัตว์ฟันแทะในสัตว์ฟันแทะ [17] เช่นเดียวกับการป้องกันการตายของเซลล์ในสมองขาดเลือด [19] ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า 2FL มีผลดีหลายประการต่อ CNS และการอักเสบและการเสื่อมสภาพของส่วนปลาย

ICH สามารถเหนี่ยวนำให้เกิดทุติยภูมิได้การเสื่อมสภาพของระบบประสาทผ่านความเครียด ER [33] ตัวอย่างเช่น เส้นทาง PERK ถูกกระตุ้นในสมองของ ICH ดังที่เห็นได้จากการควบคุม p-eIF2& และ ATF4 [34] ความเครียด ER ที่เป็นผลลัพธ์ถูกกระตุ้นต่อไปเซลล์ประสาทอะพอพโทซิสและการตายของเซลล์ นอกจากนี้เรายังรายงานด้วยว่าการแสดงออกของ PERK, IRE1, CHOP, SigmaR1 และ caspase-3 ได้รับการปรับปรุงในสมองของ ICH 2FL ยับยั้งการตอบสนองเหล่านี้อย่างมีนัยสำคัญ กลไกโดยละเอียดซึ่งอยู่ภายใต้การควบคุมความเครียดของ ER โดยการตรวจสอบหมายจับ 2FL

มีข้อ จำกัด บางประการในการศึกษานี้ เราไม่ได้ใช้ขนาดของก้อนเลือดในการประเมินผลลัพธ์หลังการรักษาด้วย 2FL ตามที่ระบุไว้ก่อนหน้านี้ การหาปริมาณของพื้นที่ hematoma บนชิ้นเนื้อเยื่อมักจะใช้แรงงานมาก และบางครั้งก็เป็นอัตนัย [35] วิธีการใหม่ได้รับการพัฒนาขึ้นเมื่อเร็วๆ นี้เพื่อให้สามารถวัดปริมาตรเลือดในสมองได้อย่างแม่นยำและมีประสิทธิภาพ [35] จะเป็นที่สนใจในการพิจารณาความสัมพันธ์ของปริมาตรเม็ดเลือดกับการปรับปรุงการทำงานของหัวรถจักรหลังการรักษา 2FL โดยใช้วิธีการใหม่นี้ การศึกษาของเราดำเนินการในแบบจำลองเซลล์และสัตว์ของ ICH จำเป็นต้องมีการศึกษาไพรเมตที่ไม่ใช่มนุษย์เพิ่มเติมและการทดลองแบบสุ่มในอนาคตของการรักษาด้วย 2FL ในมนุษย์ก่อนการใช้งานทางคลินิก

นมแม่ถือเป็นแหล่งโภชนาการที่ดีที่สุดสำหรับทารกแรกเกิดและทารกที่กำลังพัฒนา นอกเหนือจากคุณค่าทางโภชนาการแล้ว นมของมนุษย์ยังมีสารประกอบที่เป็นประโยชน์ [36] เช่น 2FL ในการศึกษานี้ เราแสดงให้เห็นว่า 2FL ซึ่งเป็นส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพในนมของมนุษย์ มีผลในการป้องกัน ICH 2FL อาจมีความหมายทางคลินิกสำหรับการรักษา ICH

ประโยชน์ของสารสกัด cistanche

4. วัสดุและวิธีการ

4.1. สัตว์

ซื้อหนู Sprague-Dawley เพศผู้ที่โตเต็มวัยและตั้งครรภ์นอกเวลาจาก BioLASCO ไทเป ไต้หวัน การใช้สัตว์ได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการวิจัยสัตว์ของสถาบันวิจัยสุขภาพแห่งชาติของไต้หวัน (NHRI-IACUC106101-A) การทดลองกับสัตว์ทั้งหมดได้ดำเนินการตาม National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animal (NIH Publications No. 8023, revised 1978)

4.2. วัสดุ

2′-Fucosylactose ให้บริการโดย Advanced Protein Technologies Corp. (ซูวอน-ซิ จังหวัดคยองกี-โด ประเทศเกาหลี) Bovine serum albumin, chloral hydrate, fetal bovine serum, L-glutamate, paraformaldehyde, poly-D-lysine, hemin และ Triton X-100 ซื้อมาจาก Sigma (St. Louis, MO, USA) Alexa Fluor 488 (แอนติบอดีทุติยภูมิ), อาหารเสริม B27, อาหารกลางของ Eagle ดัดแปลงของ Dulbecco,เซลล์ประสาทสื่อและทริปซินถูกซื้อจาก Invitrogen (Carlsbad, CA, USA) ซื้อแอนติบอดีต้าน CD4 จาก Proteintech (Rosemont, IL, USA) ซื้อ Anti-MAP2 จาก Millipore (Burlington, VT, USA) ซื้อแอนติบอดี Anti-IBA1 จาก Wako (ริชมอนด์, เวอร์จิเนีย, สหรัฐอเมริกา)

4.3. Primary Rat Cortical Neuron (PCN) และ Microglia Coculture

เยื่อหุ้มสมองปฐมภูมิเซลล์ประสาทเตรียมการเพาะเลี้ยง (PCN) จากเนื้อเยื่อเปลือกนอกของตัวอ่อน (E14–15) ที่ได้จากตัวอ่อนในครรภ์ของหนูแรท Sprague-Dawley ที่ตั้งครรภ์ในระยะตั้งครรภ์ หลังจากนำหลอดเลือดและเยื่อหุ้มสมองออกแล้ว คอร์ติเซที่สะสมไว้จะถูกทริปซิไนซ์ (005 เปอร์เซ็นต์ ; Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) เป็นเวลา 20 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากล้างทริปซินด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อ Eagle's ดัดแปลงของ Dulbecco ที่อุ่นไว้ล่วงหน้า (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) เซลล์จะถูกแยกออกจากกันโดยการบดละเอียด นับ และชุบลงในเพลตเพาะเลี้ยงเซลล์ 96-หลุม (5.0 × 104/หลุม) ที่เคลือบไว้ล่วงหน้า ด้วยโพลี-ดี-ไลซีน (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) สื่อชุบวัฒนธรรมประกอบด้วยเซลล์ประสาทสื่อที่เสริมด้วย FBS ที่ระงับความร้อน 2 เปอร์เซ็นต์, 0.5 mmol/L L-glutamine, 0.025 mM L-glutamate และ 2 เปอร์เซ็นต์ B27 (Invitrogen, Carlsbad, แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา) วัฒนธรรมได้รับการบำรุงรักษาที่ 37 О C ในบรรยากาศที่มีความชื้น 5 เปอร์เซ็นต์ CO2 และ 95 เปอร์เซ็นต์ในอากาศ วัฒนธรรมถูกเลี้ยงโดยการแลกเปลี่ยน 50 เปอร์เซ็นต์ของอาหารกับอาหารเลี้ยงเชื้อ (อาหาร neurobasal), 0.5 มิลลิโมล/ลิตร L-glutamine และ 2 เปอร์เซ็นต์ B27 กับอาหารเสริมสารต้านอนุมูลอิสระในวันที่ในหลอดทดลอง ( DIVs) 3 และ 5 BV2 microglia ถูกเพาะเลี้ยงแยกจากกัน แยกออกโดย 0.05 เปอร์เซ็นต์ trypsin-ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA, Invitrogen) และปั่นแยกที่ 100× g เป็นเวลา 5 นาที เซลล์ BV2 ถูกแขวนลอยใหม่ในอาหารที่มีอาหารเสริม B27 โดยไม่มีสารต้านอนุมูลอิสระ (一AO จาก Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) ความหนาแน่นของเซลล์ที่รอดตายถูกนับโดยใช้การทดสอบทรีแพนบลู เซลล์ถูกชุบบนหลุมชุบ PCN ที่ความเข้มข้น 3.0 × 103/หลุมบน DIV 7 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [37] cocultures ถูกเลี้ยงด้วยอาหาร 一AO บน DIV 7 และ 10 ใน DIV 10 วัฒนธรรมได้รับการบำบัดด้วยกลูตาเมตด้วย 2FL หรือยานพาหนะ ที่ 48 ชั่วโมงหลังการรักษาด้วยยา เซลล์จะถูกตรึงด้วยพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4 เปอร์เซ็นต์ (PFA, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง

ฤทธิ์ป้องกันระบบประสาทของ cistanche: รักษาโรคพาร์กินสัน

4.4. อิมมูโนไซโตเคมี

หลังจากขจัดสารละลาย PFA 4 เปอร์เซ็นต์ออก เซลล์ถูกล้างด้วย PBS เซลล์แบบตายตัวถูกบำบัดด้วยสารละลายการบล็อก (5 เปอร์เซ็นต์ BSA และ 0.1 เปอร์เซ็นต์ Triton X-100 ใน PBS) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เซลล์ถูกบ่มเป็นเวลา 1 วันที่ 4 О C ด้วยโมโนโคลนัลแอนติบอดีของหนูเมาส์ที่ต้าน MAP2 (1:500; Millipore, Billerica, MA, USA) และโพลีโคลนัลแอนติบอดีของกระต่ายที่ต้าน IBA1 (1:500; Wako, Richmond, VA, USA) ก่อนล้างด้วย PBS สามครั้ง แอนติบอดีปฐมภูมิที่ถูกจับถูกแสดงภาพโดยใช้แอนติเมาส์ของแพะ AlexaFluor 488 หรือแอนติบอดีทุติยภูมิต้านกระต่าย AlexFluoro 568 แพะ (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) ถ่ายภาพโดยใช้กล้อง DS-Qi2 (Nikon, Tokyo, Japan) ที่ติดมากับ NIKON ECLIPSE Ti2 (Nikon, Tokyo, Japan) โดยผู้สังเกตการณ์ที่ตาบอด ความหนาแน่นของพิกเซลของ MAP2-ir หรือ IBA1-ir ถูกวิเคราะห์โดยใช้ซอฟต์แวร์ NIS Elements AR 5.11 (Nikon)

4.5. การผ่าตัด

หนูถูกเลี้ยงในที่มืด 12 ชั่วโมง (19.00 น. ถึง 07.00 น.) และรอบ 12 ชั่วโมงแสง (07:00 น. ถึง 19:00 น.) สัตว์ถูกวางยาสลบและวางไว้ในกรอบสเตอริโอแทกซิก Type VII collagenase (0.5 U/uL × 10 uL, C{{10}}, Sigma Aldrich, St. Louis, MO, USA) ได้รับการฉีดแบบสเตอริโอ เข้าไปใน striatum ด้านขวา (พิกัด: 0.0 mm rostral และ 3.0 mm ด้านข้าง bregma, 5.5 mm ใต้กะโหลกศีรษะ) ที่ 0.4 uL/min นานกว่า 5 นาทีในวันที่ 0 จากนั้น 2FL (400 มก./กก./วัน × 5 วัน) หรือกระสายยาถูกบริหารให้ ip ตั้งแต่วันที่ 1 ถึงวันที่ 5 สัตว์ถูกสังเวยในวันที่ 5 สำหรับการวิเคราะห์ทางจุลพยาธิวิทยาและ PCR

4.6. การวัดพฤติกรรมของหัวรถจักร

วัดการเคลื่อนไหวในวันที่ 5 โดยใช้เครื่องตรวจวัดกิจกรรมอินฟราเรด (Accuscan, Columbus, OH, USA) หนูถูกวางไว้ทีละตัวในห้องแสดงพฤติกรรมอินฟราเรด 3 มิติ (42 × 42 × 21 ซม.) เป็นเวลา 120 นาที วัดตัวแปรหกตัว: (i) กิจกรรมแนวตั้ง (VACTV, จำนวนการรบกวนของลำแสงทั้งหมดที่เกิดขึ้นในเซ็นเซอร์แนวตั้ง), (ii) ระยะทางทั้งหมดที่เดินทาง (TOTDIST, ระยะทาง, หน่วยเซนติเมตร, ที่สัตว์เดินทาง), (iii ) เวลาเคลื่อนที่ในแนวตั้ง (VTIME), (iv) กิจกรรมในแนวนอน (HACTV, จำนวนการรบกวนของลำแสงทั้งหมดในเซนเซอร์แนวนอน), (v) เวลาเคลื่อนที่ในแนวนอน (MOV- TIME) และ (vi) จำนวนการเคลื่อนที่ในแนวตั้ง (VMOVNO).

4.7. อิมมูโนฮิสโตเคมี

สัตว์ถูกดมยาสลบและให้ยาสลบผ่านทางช่องหัวใจด้วยน้ำเกลือที่ตามด้วย 4 เปอร์เซ็นต์ PFA ในบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PB; 0.1 โมล/ลิตร; pH 7.2); พวกเขาถูกแก้ไขเป็นเวลา 18–20 h จากนั้นถ่ายโอนไปยังซูโครส 20 เปอร์เซ็นต์ใน 0.1 M PB เป็นเวลาอย่างน้อย 16 ชั่วโมง ส่วนต่อเนื่องของสมอง

ถูกตัดที่ความหนา 30 um โดยใช้เครื่องแช่แข็ง (รุ่น: CM 3050 S; Leica, Heidelberg, Germany) ล้างส่วนของสมองใน PB และบล็อกด้วยอัลบูมินในซีรัมจากวัว 4 เปอร์เซ็นต์ (Sigma-Aldrich) ด้วย Triton X-100 0.3 เปอร์เซ็นต์ (Sigma-Aldrich) ใน 0.1 mM PB จากนั้นจึงทำการบ่มชิ้นสมองด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิต้าน CD4 (โพลีโคลนัล 1:100, เทคโนโลยีโปรตีน, โรสมอนต์, สหรัฐอเมริกา) หรือ IBA1 (โมโนโคลนัล 1:100, Wako, ริชมอนด์, เวอร์จิเนีย, สหรัฐอเมริกา) ที่ 4 О C ในชั่วข้ามคืน ล้างส่วนต่างๆ ใน ​​0.1 mM PB และบ่มในสารละลายแอนติบอดีรองของ Alexa Fluor 488 (1:500; Molecular Probes, Eugene, OR, USA) ส่วนควบคุมถูกบ่มโดยไม่มีแอนติบอดีปฐมภูมิ ส่วนสมองถูกติดตั้งบนสไลด์และปิดฝา การวิเคราะห์คอนโฟคอลดำเนินการโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ Nikon D-ECLIPSE 80i (Nikon Instruments, Inc., โตเกียว, ญี่ปุ่น) และซอฟต์แวร์ EZ-C1 3.90 (Nikon, โตเกียว, ญี่ปุ่น) ความหนาแน่นของการมองเห็นของ IBA1 หรือ CD8 ​​immunoreactivity ถูกหาปริมาณในสองส่วนของสมองที่ต่อเนื่องกันโดยมีการแสดงภาพล่วงหน้าในสัตว์แต่ละตัว photomicrographs สองภาพถูกถ่ายตามบริเวณที่มีรอยโรคต่อชิ้นสมอง วิเคราะห์ความหนาแน่นของแสง IBA1 หรือ CD4 โดยใช้ซอฟต์แวร์ NIS Elements AR 3.2 (Nikon) และหาค่าเฉลี่ยในสมองแต่ละส่วนสำหรับการวิเคราะห์ทางสถิติ การวัดอิมมูโนฮิสโตเคมีทั้งหมดดำเนินการโดยผู้สังเกตการณ์ที่ตาบอด

ผลต่อระบบประสาทของ cistanche: โรคแอนติพาร์กินสัน

4.8. PCR การถอดความเชิงปริมาณ (RT-PCR)

รวบรวมเนื้อเยื่อ striatal จากซีกโลกที่มีรอยโรคและไม่มีรอยโรค RNA ทั้งหมดแยกได้โดยใช้ TRIzol Reagent (ThermoFisher, #15596-018, Waltham, MA, USA) และ cDNA ถูกสังเคราะห์จาก RNA ทั้งหมด 1 ug โดยการใช้ RevertAid H Minus First-Strand cDNA Synthesis Kit (Thermo Scientific , #K1631, วอลแทม, แมสซาชูเซตส์, สหรัฐอเมริกา). ระดับ cDNA สำหรับ CD86, CD206, TGF , PERK, IRE1, CHOP, Sigmar1, BIP, ATF6, caspase3, actin และ GAPDH ถูกกำหนดโดยใช้ชุดไพรเมอร์-โพรบไลบรารีสากลเฉพาะหรือไพรเมอร์เฉพาะยีน (ตาราง 2). ตัวอย่างถูกผสมกับ TaqMan Fast Advanced Master Mix (Life Technologies, #4444557, Carlsbad, CA, USA) หรือ SYBR (Luminaris Color HiGreen Low ROX qPCR Master Mix; ThermoScientific, Waltham, MA, USA) PCR แบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ (qRT-PCR) ดำเนินการโดยใช้ระบบ QuantStudio™ 3 Real-Time PCR (ThermoScientific, Waltham, MA, USA) การแสดงออกของยีนเป้าหมายถูกทำให้เป็นมาตรฐานเมื่อเทียบกับยีนอ้างอิงภายในร่างกาย (ค่าเฉลี่ยเบตา-แอคตินและ GAPDH) โดยใช้อัลกอริธึม delta-delta-Ct ที่ดัดแปลง การทดลองทั้งหมดดำเนินการซ้ำกัน

4.9. สถิติ

ข้อมูลแสดงเป็นค่าเฉลี่ย 士 SEM การทดสอบ t ที่ไม่มีการจับคู่หรือ ANOVA แบบหนึ่งหรือสองทางถูกใช้สำหรับการเปรียบเทียบทางสถิติ โดยมีระดับนัยสำคัญเท่ากับ p < 0.05="" ในกรณีที่มีการเปรียบเทียบหลายรายการ="" จะทำการทดสอบหลังเฉพาะกิจของ="">

ผลงานของผู้แต่ง: T.-WH, การเขียนต้นฉบับ, การผ่าตัดสัตว์, และการรวบรวมและ/หรือการประกอบข้อมูล; K.-JW การผ่าตัดสัตว์และการรวบรวมและ/หรือการประกอบข้อมูล Y.-SW, PCR, การรวบรวมและ/หรือการประกอบข้อมูล; E.-KB การเพาะเลี้ยงเซลล์ อิมมูโนไซโตเคมี และการวิเคราะห์ข้อมูล YS และ JY, 2′ - การสังเคราะห์ FL การวิเคราะห์และตีความข้อมูล และการจัดหาสื่อการเรียนการสอน S.-JY แนวความคิดและการออกแบบ การเขียนต้นฉบับ การสนับสนุนด้านการบริหาร และการอนุมัติขั้นสุดท้ายของต้นฉบับ ผู้เขียนทุกคนได้อ่านและตกลงที่จะตีพิมพ์ต้นฉบับแล้ว

เงินทุน: การศึกษานี้ได้รับการสนับสนุนบางส่วนโดย National Health Research Institutes, Taiwan (NP-109-PP-02) และ Ministry of Science and Technology, Taiwan (MOST 106-2320-B{{3 }}MY2; ส่วนใหญ่ 108-2320-B-400-023)

คำชี้แจงของคณะกรรมการพิจารณาสถาบัน: การศึกษาดำเนินการตามแนวทางของปฏิญญาเฮลซิงกิและได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการวิจัยสัตว์แห่งสุขภาพแห่งชาติ

สถาบันวิจัยแห่งไต้หวัน (NHRI-IACUC106101-A)

คำชี้แจงความยินยอมที่ได้รับแจ้ง: ไม่เกี่ยวข้อง

คำชี้แจงความพร้อมใช้งานของข้อมูล: ข้อมูลที่สนับสนุนการค้นพบของการศึกษานี้มีให้จากผู้เขียนที่เกี่ยวข้องตามคำขอที่สมเหตุสมผล

กิตติกรรมประกาศ: ผู้เขียนขอขอบคุณ Yun Wang สำหรับความคิดเห็นที่สำคัญของเขา ความขัดแย้งทางผลประโยชน์: YS และ JY เป็นพนักงานของ Advanced Protein Technologies

ประโยชน์ของ cistanche: การป้องกันระบบประสาท

อ้างอิง

1. Goulart, เอซี; เบนเซเนอร์ ไอเอ็ม; เฟอร์นันเดส ทีจี; อเลนคาร์ AP; เฟเดลี แอลเอ็ม; Lotufo, PA การเสียชีวิตจากโรคหลอดเลือดสมองในระยะแรกและหนึ่งปีในเมืองเซาเปาโล ประเทศบราซิล: การใช้ STEPS โรคหลอดเลือดสมองขององค์การอนามัยโลก เจ. โรคหลอดเลือดสมอง Cerebrovasc. อ. 2012, 21, 832–838. [ข้ามอ้างอิง]

2. โคจิก, บี.; บุริน่า อ.; Hodzic, R.; Pasic, Z.; Sinanovic, O. ปัจจัยเสี่ยงส่งผลต่อการอยู่รอดในระยะยาวหลังจากโรคหลอดเลือดสมองตีบ เมดิ. โค้ง. 2552, 63, 203–206.

3. Feigin, VL; ลอว์, CM; เบนเน็ตต์ ดา; บาร์เกอร์-โคโล, SL; Parag, V. อุบัติการณ์โรคหลอดเลือดสมองทั่วโลกและการเสียชีวิตจากกรณีเริ่มต้นรายงานในการศึกษาตามประชากร 56 เรื่อง: การทบทวนอย่างเป็นระบบ มีดหมอนิวโรล. 2552, 8, 355–369. [ข้ามอ้างอิง]

4. เด มิเกล-ยาเนส เจเอ็ม; Lopez-de-Andres, A.; จิเมเนซ-การ์เซีย, อาร์.; Hernandez-Barrera, V.; เดอ มิเกล-ดิเอซ เจ.; Mendez-Bailon, M.; Perez-Farinos, N.; Muñoz-Rivas, N.; Carabantes-Alarcon, D.; Lopez-Herranz, M. อุบัติการณ์และผลของโรคหลอดเลือดสมองตีบ

ในกลุ่มผู้ใหญ่ในสเปน (2016–2018) ตามเพศ: การศึกษาแบบย้อนหลัง การศึกษาแบบกลุ่ม การสังเกต และการจับคู่คะแนนความชอบ

เจ. คลิน. เมดิ. 2564 10 3753 [ข้ามอ้างอิง]

5. Marrugat, J.; Arboix, A.; การ์เซีย-เอโรเลส, แอล.; ศาลา, ต.; วิลา เจ.; Castell, C.; Tresserras, R.; Elosua, R. อุบัติการณ์โดยประมาณและอัตราการเสียชีวิตของโรคหลอดเลือดสมองตีบและหลอดเลือดสมองขาดเลือดในปี 2545 ที่แคว้นคาตาโลเนีย รายได้ สป. คาร์ดิโอล 2550, 60, 573–580. [CrossRef] [PubMed]

6. Arboix, A.; การ์เซีย-เอโรเลส, แอล.; Massons, เจ.; Oliveres, M.; Targa, C. จังหวะ lacunar เลือดออก สมอง อ. 2000, 10, 229–234. [ข้ามอ้างอิง]

7. เก็บ RF; หัว, Y.; Xi, G. การตกเลือดในสมอง: กลไกของการบาดเจ็บและเป้าหมายการรักษา มีดหมอนิวโรล. 2555, 11, 720–731. [ข้ามอ้างอิง]

8. เชท KN; Rosand, J. การกำหนดเป้าหมายระบบภูมิคุ้มกันในการตกเลือดในสมอง จามานิวโรล. 2014, 71, 1083–1084. [CrossRef] [PubMed]

9. ชู, X.; วู X .; เฟิง, เอช.; จ้าว H.; ตาล Y.; วังแอล.; รัน, เอช.; ยี่, แอล.; เป็ง, วาย.; ตง, เอช.; และคณะ การมีเพศสัมพันธ์ระหว่างอินเตอร์ลิวคิน-1R1 กับเนโครโซมคอมเพล็กซ์เกี่ยวข้องกับการเหนี่ยวนำด้วยเฮมินเซลล์ประสาทเนื้อร้ายหลังจากการตกเลือดในกะโหลกศีรษะ โรคหลอดเลือดสมอง 2018, 49, 2473–2482. [ข้ามอ้างอิง]

10. กรัม, ม.; Sveinsdottir, S.; รัสเชอร์, เค; แฮนส์สัน อาร์เอส; ซินธิโอ, ม.; Akerstrom, B.; Ley, D. Hemoglobin ทำให้เกิดการอักเสบหลังจากการตกเลือดในช่องท้องก่อนกำหนดโดยการสร้าง methemoglobin เจNeuroinflamm. 2013, 10, 100. [ข้ามอ้างอิง]

11. Tschoe, C.; บุชเนลล์ ซีดี; ดันแคน PW; อเล็กซานเดอร์-มิลเลอร์ แมสซาชูเซตส์; วูล์ฟ SQประสาทอักเสบหลังจากการตกเลือดในสมองและเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้ จ. สโตรก 2020, 22, 29–46. [ข้ามอ้างอิง]

12. Wang, J. การวิจัยพรีคลินิกและทางคลินิกเกี่ยวกับการอักเสบหลังการตกเลือดในสมอง โปรแกรมนิวโรไบโอล. 2010, 92, 463–477. [ข้ามอ้างอิง]

13. Yu, S.-J.; วู, K.-J.; วัง Y.-S.; เพลง J.-S.; Wu, C.-H.; ม.ค. เจ.-เจ.; แบ, อี.; เฉิน H.; ชีอะห์, K.-S.; Wang, Y. ผลการป้องกันของ CXCR4 คู่อริ CX807 ในรูปแบบหนูของโรคหลอดเลือดสมองตีบ อินเตอร์ เจ โมล. วิทย์. 2020, 21, 7085. [ข้ามอ้างอิง]

14. Mosca, F.; Gianni, ML นมมนุษย์: องค์ประกอบและประโยชน์ต่อสุขภาพ กุมาร. เมดิ. จิร. 2017, 39, 155. [ข้ามอ้างอิง]

15. โดโนแวน เอสเอ็ม; Comstock, SS นมของมนุษย์ oligosaccharides ส่งผลต่อเยื่อเมือกของทารกแรกเกิดและภูมิคุ้มกันของระบบ แอน. Nutr. เมตาบ 2016, 69, S42–S51. [ข้ามอ้างอิง]

16. Oliveros, E.; รามิเรซ, ม.; วาซเกซ, อี.; Barranco, A.; แกรนท์, ก.; เดลกาโด-การ์เซีย เจเอ็ม; บั๊กอาร์.; ฤดา, ร.; Martin, MJ การให้ 2 -fucosylactose ในช่องปากระหว่างให้นมช่วยเพิ่มความจำและการเรียนรู้ในหนู' J. Nutr. ไบโอเคมี. 2559, 31, 20–27. [ข้ามอ้างอิง]

17. Vazquez, E.; Barranco, A.; รามิเรซ, ม.; แกรนท์, ก.; เดลกาโด-การ์เซีย เจเอ็ม; มาร์ติเนซ-ลาร่า อี.; บลังโก, เอส.; มาร์ติน เอ็มเจ; Castanys, E.; บั๊กอาร์.; และคณะ ผลของโอลิโกแซ็กคาไรด์ในนมมนุษย์ 2′ -ฟูโคซิลแลคโตส ต่อศักยภาพระยะยาวของฮิปโปแคมปัลและความสามารถในการเรียนรู้ในหนู เจ. นุ. ไบโอเคมี. 2015, 26, 455–465. [CrossRef] [PubMed]

18. เขา Y.; หลิวเอส.; Kling, เดลาแวร์; ลีโอน, เอส.; Lawlor, NT; หวาง, Y.; ไฟน์เบิร์ก เอสบี; ฮิลล์ DR; Newburg, DS โอลิโกแซ็กคาไรด์ 2′-ฟูโคซิลแลคโตสในน้ำนมมนุษย์จะปรับการแสดงออกของ CD14 ใน enterocytes ของมนุษย์ ดังนั้นจึงลดการอักเสบที่เกิดจาก LPS ลำไส้ 2016, 65, 33–46. [CrossRef] [PubMed]

19. วู, K.-J.; เฉิน Y.-H.; เบ, อี.-เค.; เพลง Y.; มิน ว.; ยู, S.-J. น้ำนมมนุษย์โอลิโกแซ็กคาไรด์ 2′ -ฟูโคซิลแลคโตสรีดิวซ์การเสื่อมสภาพของระบบประสาทในสมองจังหวะ แปล ความละเอียดของจังหวะ 2020, 11, 1001–1011. [CrossRef] [PubMed]

20. วังต.; ลู, เอช.; หลี่, ดี.; Huang, W. TGF-beta1-การกระตุ้นโดยอาศัยสื่อกลางของ SERPINE1 เกี่ยวข้องกับการตายแบบอะพอพโทติกและการบาดเจ็บที่บาดแผลที่เกิดจากเฮมินในเซลล์ HT22นักประสาทวิทยา. อ. รักษา. 2564, 17, 423–433. [ข้ามอ้างอิง]

21. แดง เทนเนสซี; บิชอป จีเอ็ม; Dringen, R.; Robinson, SR เมแทบอลิซึมและความเป็นพิษของเฮมินในแอสโตรไซต์ เกลีย 2011, 59, 1540–1550. [ข้ามอ้างอิง]

22. โรบินสัน เอสอาร์; แดง เทนเนสซี; Dringen, R.; ความเป็นพิษของ Bishop, GM Hemin: แหล่งที่มาของความเสียหายของสมองที่ป้องกันได้หลังโรคหลอดเลือดสมองตีบ ตัวแทนรีดอกซ์ 2009, 14, 228–235. [ข้ามอ้างอิง]

23. กัตต์ริดจ์ เจเอ็ม; Smith, A. การป้องกันสารต้านอนุมูลอิสระโดย haemopexin ของ lipid peroxidation ที่กระตุ้นด้วยฮีม ไบโอเคมี. จ. 1988, 256, 861–865. [ข้ามอ้างอิง]

24. ได เจ.; วู, พี.; Xu, S.; หลี่, วาย.; จู้, วาย.; วังแอล.; วัง, C.; โจว, พี.; Shi, H. การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างพื้นฐานของยลในเซลล์ SH-SY5Y ระหว่างการตายของเซลล์ที่เกิดจากเฮมินรายงานระบบประสาท2017, 28, 551–554. [ข้ามอ้างอิง]

25. หลิน เอส.; หยิน Q.; จง, คิว; Lv, F.-L.; โจว, วาย.; Li, J.-Q.; วัง, เจ.-ซี.; ซู, บี.-วาย.; หยาง, Q.-W. Heme เปิดใช้งาน TLR4-สื่อกลางในการบาดเจ็บของอวัยวะผ่านเส้นทางการส่งสัญญาณ MyD88/TRIF ในการตกเลือดในสมอง เจ. Neuroinflamm. 2012, 9, 46. [ข้ามอ้างอิง]

26. วัง Y.-C.; โจว, วาย.; ฝาง H.; หลิน, เอส.; วัง, P.-F.; Xiong, R.-P.; เฉินเจ .; Xiong, X.-Y.; Lv, F.-L.; เหลียง, คิว-ล.; และคณะ เฮเทอโรไดเมอร์เหมือนรีเซพเตอร์ 2/4 ทำหน้าที่เป็นสื่อกลางในการบาดเจ็บที่อวัยวะภายในในการตกเลือดในสมอง แอน. นิวโรล. 2014, 75, 876–889. [CrossRef] [PubMed]

27. คุรามัตสึ เจบี; ฮัทท์เนอร์ HB; Schwab, S. ความก้าวหน้าในการจัดการภาวะตกเลือดในสมอง เจ. ประสาท. ส่ง 2013, 120, S35–S41. [ข้ามอ้างอิง]

28. ซูซูกิ เอส.; เคลลี่ RE; ดาปานี, บีเค; เรเยส-อิเกลเซียส, วาย.; ดีทริช, WD; Duncan, RC เม็ดเลือดขาวเฉียบพลันและการตอบสนองของอุณหภูมิในการตกเลือดในสมองจากความดันโลหิตสูง โรคหลอดเลือดสมอง 1995, 26, 1020–1023 [CrossRef] [PubMed]

29. วังเจ.; Dore, S. Inflamation หลังจากการตกเลือดในสมอง เจ เซเรบ. Metab การไหลของเลือด 2550, 27, 894–908. [ข้ามอ้างอิง]

30. สตีเวนส์ เอสแอล; เป่า เจ.; ฮอลลิส เจ.; เลสซอฟ, นิวเซาท์เวลส์; คลาร์ก WM; Stenzel-Poore, MP การใช้ flow cytometry เพื่อประเมินการเปลี่ยนแปลงชั่วคราวในเซลล์ inflammatory หลังภาวะสมองขาดเลือดโฟกัสในหนูทดลอง ความละเอียดของสมอง 2545, 932, 110–119. [ข้ามอ้างอิง]

31. ยู ZT; นันทกุมาร, NN; Newburg, DS โอลิโกแซ็กคาไรด์ 2′ -ฟูโคซิลแลคโตสในน้ำนมมนุษย์ช่วยยับยั้งการทำลายที่เกิดจากเชื้อแคมไพโลแบคเตอร์ jejuni ในเซลล์เยื่อบุผิวของมนุษย์ HEp-2 และ HT-29 และในเยื่อบุลำไส้ของหนูเมาส์ เจ. นุ. 2016, 146, 1980– 1990. [CrossRef] [PubMed]

32. ดี ม.; โสธี, CP; ยามากุจิ, วาย.; เจีย H.; ลู, พี.; ฟุลตัน, WB; มาร์ติน, LY; Prindle, ต.; นีโน่ DF; โจว Q.; และคณะ โอลิโกแซ็กคาไรด์ 2′ -ฟูโคซิลแลคโตสในนมของมนุษย์ช่วยลดความรุนแรงของลำไส้อักเสบจากเนื้อตายในการทดลองโดยการเพิ่มการไหลเวียนของเยื่อหุ้มลำไส้ในลำไส้ของทารกแรกเกิด บรา เจ. นุ. 2016, 116, 1175–1187. [CrossRef] [PubMed]

33. ธันกาเมรัน, ซิม; ไจ่, S.-T.; ฮุง, H.-Y.; Hu, W.-F.; ปาง, ค.-ป.; เฉิน, S.-Y.; หลิว, เอช.เค. บทบาทของความเครียดเอนโดพลาสมิกเรติคิวลัมในการตกเลือดในสมอง เซลล์ 2020, 9, 750. [CrossRef] [PubMed]

34. หวาง, คิว; ลาน, ต.; ลู เจ.; จางเอช.; จาง, D.; ลู, ต.; ซู, พี.; เร็น เจ.; จ้าว, D.; ซัน, แอล.; และคณะ DiDang tang ยับยั้งการตายแบบอะพอพโทซิสที่อาศัยความเครียดจากเอนโดพลาสมิกเรติคิวลัมที่เกิดจากการกีดกันออกซิเจนและกลูโคสและการตกเลือดในสมองผ่านการปิดกั้นเส้นทาง GRP78-IRE1/PERK ด้านหน้า. ฟา. 2018, 9, 1423. [ข้ามอ้างอิง]

35. จาง Z.; โช, เอส.; เรห์นี อลาสกา; เกโร, เอชเอ็น.; เดฟ, KR; Zhao, W. การประเมินอัตโนมัติของปริมาตรห้อของสัตว์ฟันแทะภายใต้การทดลองจังหวะเลือดออกในสมองโดยวิธีการแบ่งส่วน Bayes แปล ความละเอียดของจังหวะ 2020, 11, 789–798. [ข้ามอ้างอิง]

36. ลางบอกเหตุ L. โอลิโกแซ็กคาไรด์นมมนุษย์: พรีไบโอติกและอื่น ๆ Nutr. รายได้ 2009, 67, S183–S191. [ข้ามอ้างอิง]

37. Yu, S.-J.; วู, K.-J.; แบ, อี.; วัง Y.-S.; เชียง, C.-W.; Kuo, L.-W.; ฮาร์วีย์ บีเค; Greig, นิวแฮมป์เชียร์; Wang, Y. การรักษาหลังการรักษาด้วยตำแหน่งช่วยลดความเครียดของเอนโดพลาสมิกเรติคิวลัมและการเสื่อมของระบบประสาทในสมองโรคหลอดเลือดสมอง iScience 2020, 23, 100866. [ข้ามอ้างอิง]