ส่วนที่ 2 การตรวจจับ Cistanches Herba (Rou Cong Rong) ผลิตภัณฑ์ยาโดยใช้ลายเซ็นนิวคลีโอไทด์เฉพาะชนิด

โดยการค้นหาลายเซ็นของนิวคลีโอไทด์ที่พัฒนาขึ้นในการศึกษานี้ เราพบว่ายาสิทธิบัตรของจีน 15 รายการจาก 31 รายการระบุว่ามีซิสตันเชส เฮอร์บากลับมีสารเจือปน รวมทั้งส่วนผสมปลอมแปดชนิดและสารเจือปนเจ็ดชนิด (ตารางที่ 2) ตัวอย่างเช่น หกชุดงานถูกแทนที่ด้วย Cy ซองการิคัม ซึ่งรวมถึงยาเม็ด Shihu Yeguang สามชุด ยาเม็ด Kangguzhi Zengsheng ชุดหนึ่ง แคปซูล Sanbao ชุดหนึ่ง และอนุภาค Wenweishu ชุดหนึ่ง

นอกจากนี้ การผลิตที่ต่างกันจากผู้ผลิตรายเดียวกันให้ผลลัพธ์ที่แตกต่างกันบ้าง ตัวอย่างเช่น ในสามแบทช์จากผู้ผลิตหนึ่งราย (ZCY16, ZCY69 และ ZCY71) หนึ่งแบทช์ประกอบด้วยส่วนผสมของ Ciทะเลทรายและไซ songaricum หนึ่งชุดประกอบด้วยส่วนผสมของซี. ทะเลทรายและซี. tubulosaและมีเพียงชุดเดียวเท่านั้นซี. tubulosa. สองแบทช์จากผู้ผลิตรายอื่น (ZCY44 และ ZCY70) ก็ต่างกันเช่นกัน: หนึ่งแบทช์มี Cy songaricum ในขณะที่ชุดอื่นมีซี. ทะเลทรายและซี. tubulosa.

ซิสตันเชส เฮอร์บาตรวจพบใน 23 รายการจากทั้งหมด 31 รายการของยาจีนที่ได้รับการทดสอบ (ตารางที่ 2) และมีเพียง 16 ตัวอย่างเท่านั้นที่เป็นของแท้ เช่น ไม่มีสารเจือปนหรือส่วนผสมปลอมซี. tubulosaตรวจพบในสิทธิบัตรยาจีน 16 ชุด และ Ci. ตรวจพบ Deserticola ใน 10 กลุ่ม O. coerulescens ไม่พบในผลิตภัณฑ์ใดๆ (ตารางที่ 2)

Cistanche deserticola มีเอฟเฟกต์มากมาย คลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

อภิปรายผล

ความจำเป็นของการพัฒนาวิธีการใหม่สำหรับการตรวจสอบผลิตภัณฑ์ยาที่มีจำหน่ายในท้องตลาดที่มีCistanchesเฮอร์บา

ซิสตันเชส เฮอร์บาเป็นยาชูกำลังที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในยารักษาสิทธิบัตรจีนและผลิตภัณฑ์ยาอื่น ๆ อย่างไรก็ตาม การควบคุมคุณภาพของยาตามสิทธิบัตรของจีนทำให้เกิดความท้าทายอย่างมากเนื่องจากส่วนผสมมีความหลากหลายและซับซ้อน เนื่องจากขาดการกำกับดูแลด้านกฎระเบียบ จึงมีโอกาสมากที่จะเกิดการปลอมปนหรือปลอมแปลงผลิตภัณฑ์ นอกจากนี้ ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดควรได้รับการประมวลผลตามตำรับยาหรือมาตรฐานอื่นๆ ไม่อนุญาตให้มีการปลอมแปลงหรือปลอมแปลงระหว่างการประมวลผล ดังนั้นจึงมีการกำหนดวิธีการควบคุมคุณภาพที่หลากหลาย เช่น โครมาโตกราฟีของเหลวสองมิติแบบตัดหัวใจหลายดวง (Yao et al., 2015), สเปกโทรสโกปีสะท้อนแสงใกล้อินฟราเรด (Zhang and Su, 2014; Zhang et al., 2015 ) และ liquid chromatography-mass spectrometry (Wang et al., 2016b) อย่างไรก็ตาม วิธีการวิเคราะห์ทางเคมีในปัจจุบันของคณะกรรมการเภสัชตำรับจีน (2015) ไม่สามารถใช้เพื่อรับรองความถูกต้องของส่วนผสมทั้งหมดในยาสิทธิบัตรของจีนหรือเพื่อตรวจหาว่ามีส่วนผสมที่ปลอมปนอยู่ นอกจากนี้ จากการศึกษายังแสดงให้เห็นว่าเมแทบอไลต์เป้าหมายในพืชเปลี่ยนแปลงไปในระหว่างกระบวนการผลิต ส่งผลให้เกิดความแปรปรวนอย่างมากในผลการทดสอบหรือความล้มเหลวของวิธีการทดสอบโดยสิ้นเชิง (Ananingsih et al., 2013) ดังนั้น เครื่องมือระดับโมเลกุล เช่น ลายเซ็นของนิวคลีโอไทด์จำเพาะต่อสปีชีส์จึงพร้อมที่จะเสริมความแข็งแกร่งให้ระบบควบคุมคุณภาพต่อความเสี่ยงของการทดแทนผลิตภัณฑ์ที่ฉ้อฉล การปลอมปน และการรวมส่วนผสมที่ไม่ได้ติดฉลาก

แม้ว่า ITS/ITS2 จะถือเป็นเครื่องมือที่มีประสิทธิภาพสูงในการระบุตัวยาสมุนไพร แต่ลำดับเหล่านี้ไม่สามารถขยายจากตัวอย่างที่มีการประมวลผลสูง (Newmaster et al., 2013; de Boer et al., 2015) วังและคณะ รายงานว่าไม่สามารถขยาย ITS2 จากสารสกัด Angelicae Sinensis Radix หรือยาต้มที่ต้มนานกว่า 120 นาที (Wang et al., 2016a) ตามเทคโนโลยีแบบดั้งเดิมและคณะกรรมการเภสัชตำรับจีน (2015) Cistanches Herba ได้รับการแปรรูปอย่างสูงเสมอเพื่อเพิ่มประสิทธิภาพในยา กระบวนการเหล่านี้ รวมถึงการอบแห้งด้วยเตาอบ การใส่เกลือ และการนึ่งด้วยไวน์ (Zou et al., 2017) ซึ่งนำไปสู่การเสื่อมสภาพของ DNA นอกจากนี้ยังมีการเพิ่มสารเพิ่มปริมาณต่างๆ ในระหว่างการแปรรูป เช่น น้ำผึ้ง แป้ง และเด็กซ์ทริน หากไม่ได้กำจัดสารเพิ่มปริมาณเหล่านี้ออกอย่างสมบูรณ์ ความบริสุทธิ์ของ DNA จะได้รับผลกระทบ ตัวอย่างเช่น กระบวนการผลิตต่อไปนี้ใช้เพื่อสร้างแคปซูล Sanbao ที่ประกอบด้วย Cistanches Herba: "ต้มชิ้นยาเป็นเวลา 1.5 ชั่วโมงสองครั้ง รวม decoctions และกรองส่วนผสม กรองสารกรองให้มีความหนาแน่นสัมพัทธ์ 1.20∼1.25 (ที่ 80 ◦C) เติมผงดินอื่นๆ และผสมให้เข้ากันเพื่อให้ได้ส่วนผสมที่เป็นเนื้อเดียวกัน จากนั้น ผึ่งส่วนผสมให้แห้งที่อุณหภูมิ 60◦C แล้วบดให้ละเอียด

ผง" อย่างไรก็ตาม หลังจากขั้นตอนการผลิตที่อธิบายข้างต้น อาจมีปัญหาในระหว่างการสกัดดีเอ็นเอของยาสิทธิบัตรจีน และชิ้นส่วนที่ยาวอาจไม่สามารถขยายออกจากดีเอ็นเอที่เสื่อมโทรม ซึ่งจะทำให้ไม่สามารถระบุสารเจือปนได้ ดังนั้น เพื่อให้มั่นใจว่า คุณภาพและความบริสุทธิ์ของ DNA เราได้เพิ่มขั้นตอนเพิ่มเติมก่อนการสกัด DNA ของจีโนม รวมถึงการล้างด้วยบัฟเฟอร์ก่อนการล้างและการแยกท่อคู่ขนานสิบท่อเป็นหลอดเดียวสำหรับแต่ละชุด

แม้ว่ายาสิทธิบัตรจีนทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษาปัจจุบันมีส่วนผสม 6-25 ชนิด แต่ไพรเมอร์คู่ที่พัฒนาขึ้นสามารถขยายลำดับของสารเจือปนในยาสิทธิบัตรจีนเหล่านี้โดยเฉพาะ การจัดลำดับโดยตรงของผลิตภัณฑ์ PCR แสดงไฟล์การติดตามที่สะอาด ดังนั้น วิธีการที่เป็นเอกลักษณ์เฉพาะของนิวคลีโอไทด์นี้จึงสามารถระบุทั้งส่วนผสมของสายพันธุ์แท้และสารเจือปน และควรขยายขอบเขตการประยุกต์ใช้เครื่องมือวินิจฉัยระดับโมเลกุลที่มีพื้นฐานจากดีเอ็นเอสำหรับการกำกับดูแลตลาด

ไตวายและโรคต่างๆ รักษาได้ด้วย cistanche

ลายเซ็นนิวคลีโอไทด์สำหรับการระบุผลิตภัณฑ์ Cistanches Herba อย่างมีประสิทธิภาพ

เครื่องมือระดับโมเลกุลที่ใช้เทคโนโลยี PCR มีแนวโน้มสูงสำหรับการรับรองผลิตภัณฑ์ยาภายในระบบควบคุมคุณภาพ การใช้ไพรเมอร์ที่ประสบความสำเร็จในการระบุสารเจือปนที่ย่อยสลายด้วยดีเอ็นเอจาก Cistanches Herba แสดงให้เห็นว่าวิธีการตรวจหาด้วย PCR สามารถนำมาใช้กันอย่างแพร่หลาย ในตลาดยาสมุนไพรจีน ราคาของส่วนผสมของสายพันธุ์ Cistanches Herba แท้นั้นสูงกว่าราคาของสารเจือปนถึงห้าเท่า ผลลัพธ์ของเราพบว่า Cy. songaricum เป็นเพศที่ผิดประเวณีมากที่สุดของ Cistanches Herba ในตลาด รองลงมาคือ Ci ซีเนซิส ไซ มีการเพิ่ม songaricum เนื่องจากยาเหล่านี้มีลักษณะทางสัณฐานวิทยาที่คล้ายคลึงกัน นอกจากนี้องค์ประกอบทางเคมีของ Ci. sinensis คล้ายกับ Cistanches Herba เป็นเครื่องหมายควบคุมคุณภาพสำหรับซิสตันเชส เฮอร์บาสารสกัด echinacoside และ acteoside สามารถสกัดได้จาก Ci ไซเนนซิส ดังนั้น โรงงานผลิตยาบางแห่งจึงใช้ Ci sinensis แทนการผลิตสารสกัดจาก Cistanches Herba เมื่อนำมารวมกัน ผลการศึกษานี้บ่งชี้ว่ามีการฉ้อโกงอย่างมากในตลาดสำหรับผลิตภัณฑ์ยา

การปลอมปนในสิทธิบัตรยาจีนนั้นคล้ายกับที่พบในประเทศอื่นๆ มีการบันทึกระดับการปลอมปนที่คล้ายกันในอเมริกาเหนือ (Newmaster et al., 2013), ยุโรป (Raclariu et al., 2017) และเอเชีย (Cheng et al., 2014; Shanmughanandhan et al., 2016; Gao et al. , 2017). ในการศึกษานี้ อัตราการปลอมปนของยาตามสิทธิบัตรของจีนอยู่ที่ประมาณ 48.4 เปอร์เซ็นต์ โดยมีเพียง 16 ตัวอย่างจาก 31 ตัวอย่างเท่านั้นที่เป็น Cistanches Herba ของแท้ นอกจากนี้ เราคาดการณ์ว่าผลลัพธ์ที่แตกต่างกันในผลิตภัณฑ์จากผู้ผลิตรายเดียวกันอาจเกิดจากความแตกต่างในคุณภาพของวัสดุยาจีนรุ่นต่างๆ ดังนั้นเพื่อควบคุมคุณภาพของยาสิทธิบัตรของจีน วัตถุดิบควรได้รับการตรวจสอบก่อนนำไปแปรรูปเป็นผลิตภัณฑ์

การปลอมปนของซิสตันเชส เฮอร์บามักเกี่ยวข้องกับปัญหาอุปทานและอุปสงค์ของวัตถุดิบซี. ทะเลทรายและซี. tubulosaเป็นพืชดั้งเดิมสองต้นที่ใช้ทำสูตรอยู่ในปัจจุบันซิสตันเชส เฮอร์บา. อย่างไรก็ตาม Ci Deserticola เป็นสายพันธุ์ดั้งเดิมเพียงชนิดเดียวใน Cistanches Herba ดั้งเดิมดั้งเดิมที่ระบุไว้ใน Chinese Pharmacopoeia Commission (2000) ซึ่ง Ci. tubulosa ถูกระบุว่าเป็นการปลอมปน เนื่องจากขาดแคลน Ci. ทรัพยากรจากทะเลทรายซี. tubulosaได้รับการระบุว่าเป็นอาหารเสริมในตำรับยาจีนตั้งแต่ปี 2548 (Jiang and Tu, 2009) จนกระทั่งเมื่อเร็วๆ นี้ ราคาของสมุนไพรเหล่านี้มีความแตกต่างกันอย่างเห็นได้ชัด ซี. tubulosa มีราคาถูกกว่า Ci มาก Deserticola เพราะมีอุปทานที่มากกว่าเดิมมาก ในที่นี้ ผลลัพธ์ของเราแสดงว่า Ci tubulosa ใช้กันอย่างแพร่หลายในผลิตภัณฑ์ Cistanches Herba ที่มีจำหน่ายในท้องตลาด

โดยสรุป ลายเซ็นของนิวคลีโอไทด์และ PCR-based

วิธีการที่พัฒนาขึ้นในการศึกษานี้อาจเป็นเครื่องมือที่มีประโยชน์สำหรับอุตสาหกรรมผลิตภัณฑ์ยาในการตรวจสอบส่วนผสมและตรวจหาสารเจือปนในCistanchesผลิตภัณฑ์ของเฮอร์บา ตามผลความไว แม้ว่าสัดส่วนของสารเจือปนจะเท่ากับหนึ่งในหมื่น แต่ก็สามารถตรวจพบได้ผ่าน qRT-PCR หมายความว่าเมื่อตรวจพบลายเซ็นนิวคลีโอไทด์ในCistanchesผลิตภัณฑ์ที่มีส่วนผสมของ Herba สามารถระบุได้ว่าเป็นส่วนผสมที่ปลอมปนหรือปลอม โซลูชันใหม่สำหรับการตรวจหาส่วนผสมปลอมหรือ Cistanches Herba ที่ปลอมปนถูกจัดเตรียมไว้ซึ่งก่อนหน้านี้ไม่สามารถทำได้ผ่านวิธีการตรวจหาสารเคมีในตำรับยาจีน นอกจากนี้ วิธีนี้สามารถใช้เพื่อตรวจสอบประเภทของยาที่เพิ่มขึ้น และขยายการใช้งานเครื่องมือวินิจฉัยระดับโมเลกุลแบบ DNA สำหรับการกำกับดูแลตลาด

เพื่อบรรเทาเรื้อรังไตโรคกับcistanche

ผลงานของผู้เขียน

JH ได้ริเริ่มการศึกษาและมีส่วนร่วมในการออกแบบ XW, RX และ JC สนับสนุนตัวอย่างและทำการทดลอง XW วิเคราะห์ข้อมูล XW, JH, ZZ, S-GN, JS และ SC ร่างต้นฉบับ ผู้เขียนทุกคนได้อ่านและอนุมัติต้นฉบับสุดท้ายแล้ว

เงินทุน

งานนี้ได้รับการสนับสนุนจาก National Natural Science Foundation of China [หมายเลข 81673552] CAMS Innovation

Fund for Medical Sciences [grant number 2016-I2 M- 3-016] และ the United Fund Key Project of the National Natural Science Foundation of China [grant number U1403224].

กิตติกรรมประกาศ

เราขอขอบคุณเพื่อนร่วมงานของเราที่ช่วยเก็บตัวอย่าง การระบุตัวตน งานห้องปฏิบัติการ และการเตรียมต้นฉบับ รวมถึง Chaokui Sun, Dianyun Hou และ Piao Zhang

วัสดุเสริม

วัสดุเสริมสำหรับบทความนี้สามารถดูได้ทางออนไลน์ที่: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpls.2018 01643/full#supplementary-material

รูปเสริม S1|ผลการเรียงตัวของลำดับ ITS2 จาก 6 สายพันธุ์

รูปเสริม S2|Agarose gel electrophoresis ของตัวอย่างทั้งหมด

ตารางเสริม S1|ข้อมูลการเก็บตัวอย่าง Cistanches Herba และสารปลอมปน

ตารางเสริม S2|ข้อมูลลำดับของสายพันธุ์ที่เกี่ยวข้องดาวน์โหลดจาก GenBank

ตารางเสริม S3|ส่วนประกอบที่ประกาศไว้ของตัวอย่างยาสิทธิบัตรจีนต่างๆ

เอกสารข้อมูลเสริม S1|ลำดับทั้งหมดที่ได้รับในการศึกษานี้

CistancheDeserticola มีเอฟเฟกต์มากมาย

ข้อมูลอ้างอิง

Aningsih, VK, Sharma, A. และ Zhou, W. (2013) คาเทชินชาเขียวระหว่างการแปรรูปและการเก็บรักษาอาหาร: การทบทวนความเสถียรและการตรวจจับ ความละเอียดของอาหาร อินเตอร์ 50, 469–479. ดอย: 10.1016/j.foodres.2011.03.004

Chen, H., Jing, FC, Li, CL, Tu, PF, Zheng, QS และ Wang, ZH (2007) Echinacoside ช่วยป้องกันระดับเซลล์นอกเซลล์ของ striatal ของ monoamine

สารสื่อประสาทจากการลดลงในหนูแรทที่มีแผลไฮดรอกซีโดพามีน 6- เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 114, 285–289. ดอย: 10.1016/j.jep.2007.07.035

Chen, S., Yao, H., Han, J., Liu, C., Song, J., Shi, L., et al. (2010). การตรวจสอบความถูกต้องของภูมิภาค ITS2 เป็นบาร์โค้ด DNA ใหม่สำหรับการระบุชนิดของพืชสมุนไพร PLOS ONE 5:e8613. ดอย: 10.1371/journal.pone.0008613

Cheng, X. , Su, X. , Chen, X. , Zhao, H. , Bo, C. , Xu, J. , et al. (2014). การวิเคราะห์ส่วนผสมทางชีวภาพของการเตรียมยาจีนโบราณตามการจัดลำดับปริมาณงานสูง: เรื่องราวของ Liuwei Dihuang Wan วิทย์. ตัวแทน. 4:5147. ดอย: 10.1038/srep05147

คณะกรรมการเภสัชตำรับจีน (2000). ตำรับยาแห่งสาธารณรัฐประชาชนจีน. ส่วนที่ 1 ปักกิ่ง: สำนักพิมพ์วิทยาศาสตร์การแพทย์ของจีน

คณะกรรมการเภสัชตำรับจีน (2015). ตำรับยาแห่งสาธารณรัฐประชาชนจีน. ส่วนที่ 1 ปักกิ่ง: สำนักพิมพ์วิทยาศาสตร์การแพทย์ของจีน

de Boer, HJ, Ichim, MC และ Newmaster, SG (2015) บาร์โค้ด DNA และการดูแลเภสัชของยาสมุนไพร เซฟยา. 38, 611–620. ดอย: 10.1007/วินาที40264-015-0306-8

Dubey, B. , Meganathan, PR และ Haque, I. (2011) DNA mini-barcoding: วิธีการพิสูจน์หลักฐานทางนิติวิทยาศาสตร์ของงูอินเดียบางชนิดที่ใกล้สูญพันธุ์ นิติเวช วิทย์. อินเตอร์ ยีนต์. 5, 181–184. ดอย: 10.1016/j.fsigen.2010.03.001

เอ็ดการ์ อาร์ซี (2004). กล้ามเนื้อ: การจัดตำแหน่งหลายลำดับด้วยความแม่นยำสูงและปริมาณงานสูง กรดนิวคลีอิก 32, 1792–1797. ดอย: 10.1093/var/gkh340

Fu, L. (1991). สมุดข้อมูลพืชสีแดงของจีน ส่วนที่ 1 ปักกิ่ง: Science Press, 502.

Gao, Z. , Liu, Y. , Wang, X. , Song, J. , Chen, S. , Ragupathy, S. , et al. (2017). เทคโนโลยีอนุพันธ์ของบาร์โค้ดดีเอ็นเอ (วิธีการลายเซ็นนิวคลีโอไทด์และ SNP double peak) ตรวจจับสารเจือปนและการทดแทนในยาสิทธิบัตรของจีน วิทย์. ตัวแทน. 7:5858. DOI: 10.1038/วินาที41598-017-05892-ปี

Gu, CM, Yang, XY และ Huang, LF (2016) Cistanches Herba: การทบทวนเภสัชวิทยา ด้านหน้า. ฟา. 7:289. ดอย: 10.3389/fphar.2016.00289

Hajibabaei, M., Smith, MA, Janzen, DH, Rodriguez, JJ, วิทฟิลด์,

JB และ Hebert, PDN (2006) บาร์โค้ดแบบมินิมอลสามารถระบุตัวอย่างที่ DNA เสื่อมโทรมได้ มล. อีโคล. หมายเหตุ 6, 959–964 ดอย: 10.1111/j.1471-8286.2006.01470.x

อนุสัญญาเภสัชญี่ปุ่น. (2016). เภสัชตำรับญี่ปุ่น ฉบับที่ 17 โตเกียว: กระทรวงสาธารณสุข แรงงาน และสวัสดิการของญี่ปุ่น พ.ศ. 2374-2475

Jiang, Y. และ Tu, PF (2009) การวิเคราะห์องค์ประกอบทางเคมีในสายพันธุ์ Cistanche เจ. โครมาโตกร์. 1216, 1970–1979. ดอย: 10.1016/j.chroma.2008.07.031

Keller, A. , Schleicher, T. , Schultz, J. , Müller, T. , Dandekar, T. , และ Wolf, M. (2009) การโต้ตอบ rRNA 5.8S-28S และหมายเหตุประกอบ ITS2 แบบ HMM ยีน 430, 50–57. ดอย: 10.1016/j.gene.2008.10.012

Lei, L. , Yang, F. , Zhang, T. , Tu, P. , Wu, L. และ Ito, Y. (2001) การเตรียมการแยกและทำให้บริสุทธิ์ของแอกทีโอไซด์และ 2'-อะซิติลแอกทีโอไซด์จากซิสทานเชส ซัลซ่า (CA Mey.) G. เบ็คโดยโครมาโตกราฟีแบบกระแสตรงความเร็วสูง เจ. โครมาโตกร์. เอ 912, 181–185. ดอย: 10.1016/S0021-9673(01)00583-0

Li, Z. , Lin, H. , Gu, L. , Gao, J. และ Tzeng, CM (2016) Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): หนึ่งในของขวัญทางเภสัชกรรมที่ดีที่สุดของการแพทย์แผนจีน ด้านหน้า. ฟา. 7:41. ดอย: 10.3389/fphar.2016.00041

Liu, XM, Li, J., Jiang, Y., Zhao, MB และ Tu, PF (2013) องค์ประกอบทางเคมีจาก Cistanche Sinensis (Orobanchaceae) ไบโอเคมี. ระบบ อีโคล. 47, 21–24. ดอย: 10.1016/j.bse.2012.09.003

Liu, Y. , Wang, X. , Wang, L. , Chen, X. , Pang, X. และ Han, J. (2016) ลายเซ็นนิวคลีโอไทด์สำหรับการระบุโสมอเมริกันและผลิตภัณฑ์ ด้านหน้า. พืชวิทย์. 7:319. ดอย: 10.3389/fpls.2016.00319

Lo, YT, Li, M. และ Shaw, PC (2015) การระบุสมุนไพรที่เป็นส่วนประกอบในยาต้มโสมด้วยเครื่องหมายดีเอ็นเอ คาง. เมดิ. 10:1. DOI: 10.1186/วินาที13020-015-0029-x

Meusnier, I. , Singer, GA, Landry, JF, Hickey, DA, Hebert, PD และ Hajibabaei, M. (2008) มินิบาร์โค้ด DNA สากลสำหรับการวิเคราะห์ความหลากหลายทางชีวภาพ BMC จีโนมิกส์ 9:214. ดอย: 10.1186/1471-2164-9-214

Newmaster, SG, Grguric, M. , Shanmughanandhan, D. , Ramalingam, S. และ Ragupathy, S. (2013) บาร์โค้ด DNA ตรวจจับการปนเปื้อนและการแทนที่ในผลิตภัณฑ์สมุนไพรในอเมริกาเหนือ บีเอ็มซี. เมดิ. 11:222. ดอย: 10.1186/1741-7015-11-222

Raclariu, AC, Mocan, A., Popa, MO, Vlase, L., Ichim, MC, Crisan, G., et al. (2017). การตรวจสอบผลิตภัณฑ์ Veronica officinalis โดยใช้ DNA metabarcoding และ HPLC-MS เผยให้เห็นการปลอมปนอย่างแพร่หลายด้วย Veronica chamaedrys ด้านหน้า. ฟา. 8:378. ดอย: 10.3389/fphar.2017.00378

Shanmughanandhan, D. , Ragupathy, S. , Newmaster, SG, Mohanasundaram, S. และ Sathishkumar, R. (2016) การประเมินการรับรองความถูกต้องของผลิตภัณฑ์สมุนไพรและการปลอมปนในอินเดียโดยใช้บัตรกำนัลห้องสมุดอ้างอิงทางชีววิทยาที่มี DNA เซฟยา. 39, 1211–1227. ดอย: 10.1007/วินาที40264-016- 0459-0

Sun, ZY, Song, JY, Yao, H. และ Han, JP (2012) การระบุโมเลกุลของ Cistanches Herba และสารเจือปนตามลำดับ nrITS2 เจ เมด พืช Res. 6, 1041–1045. ดอย: 10.5897/JMPR11.1115

Tamura, K. , Peterson, D. , Peterson, N. , Stecher, G. , Nei, M. , และ Kumar, S. (2011) MEGA5: การวิเคราะห์พันธุศาสตร์วิวัฒนาการระดับโมเลกุลโดยใช้ความน่าจะเป็นสูงสุด ระยะทางวิวัฒนาการ และวิธีการพาร์ซิโมนีสูงสุด มล. ไบโอล. วิวัฒนาการ 28, 2731–2739. ดอย: 10.1093/molbev/msr121

Wang, Q., Song, W., Qiao, X., Ji, S., Kuang, Y., Zhang, ZX, et al. (2016b). การหาปริมาณสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพ 50 ชนิดพร้อมกันของสูตรยาจีนโบราณ ยาต้ม Gegen-Qinlian โดยใช้โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูงพิเศษควบคู่ไปกับแมสสเปกโตรเมตรีแบบตีคู่ เจ. โครมาโตกร์. 1454, 15–25. ดอย: 10.1016/j.chroma.2016. 05.056

Wang, T. , Zhang, XY และ Xie, WY (2012) Cistanche deserticola

YC Ma "โสมทะเลทราย": บทวิจารณ์ เป็น. เจ. ชิน. เมดิ. 40, 1123–1141. ดอย: 10.1142/S0192415X1250838

Wang, X. , Liu, Y. , Wang, L. , Han, J. และ Chen, S. (2016a) ลายเซ็นนิวคลีโอไทด์สำหรับการระบุ Angelicae Sinensis Radix (Danggui) และผลิตภัณฑ์ วิทย์. ตัวแทน. 6:34940. ดอย: 10.1038/srep34940

เหยา CL, Yang, WZ, Wu, WY, Dai, J., Hou, JJ, Zhang, JX,

และคณะ (2015). การหาปริมาณพร้อมกันของห้า Panax notoginseng saponins โดยโครมาโตกราฟีของเหลวสองมิติตัดหัวใจหลายดวง: การพัฒนาวิธีการและการประยุกต์ใช้ในการควบคุมคุณภาพของ Notoginseng แปดตัวที่มียาสิทธิบัตรจีน เจ. โครมาโตกร์. 1402, 71–81. ดอย: 10.1016/j.chroma.2015.05.015

Zhang, C. และ Su, J. (2014) การประยุกต์ใช้สเปกโทรสโกปีใกล้อินฟราเรดเพื่อการวิเคราะห์และการประเมินคุณภาพของผลิตภัณฑ์ยาจีนโบราณอย่างรวดเร็ว แอคตา เภสัช. บาป. ข 4, 182–192. ดอย: 10.1016/j.apsb.2014.04.001

Zhang, W. , Qu, Z. , Wang, Y. , Yao, C. , Bai, X. , Bian, S. , et al. (2015). Near-infrared reflectance spectroscopy (NIRS) สำหรับการระบุอย่างรวดเร็วของ ginsenoside Rg1 และ Re ในยา Naosaitong ยาสิทธิบัตรจีน สเปกตรัม แอคตา มอล. ไบโอมอล สเปกตรัม 139, 184–188. ดอย: 10.1016/j.saa.2014.11.111

Zou, P. , Song, Y. , Lei, W. , Li, J. , Tu, P. , และ Jiang, Y. (2017) การประยุกต์ใช้เมตาโบโลมิกส์แบบ 1H NMR สำหรับการเลือกปฏิบัติของชิ้นส่วนต่างๆ และการพัฒนาเวิร์กโฟลว์การประมวลผลใหม่สำหรับ Cistanche deserticola แอคตา เภสัช. บาป. ข 7, 647–656. ดอย: 10.1016/j.apsb.2017.07.003

แถลงการณ์ความขัดแย้งทางผลประโยชน์: ผู้เขียนประกาศว่าการวิจัยได้ดำเนินการโดยไม่มีความสัมพันธ์ทางการค้าหรือทางการเงินใด ๆ ที่อาจตีความได้ว่าเป็นผลประโยชน์ทับซ้อนที่อาจเกิดขึ้น

ลิขสิทธิ์ © 2018 Wang, Xu, Chen, Song, Newmaster, Han, Zhang และ Chen นี่เป็นบทความแบบเปิดที่เผยแพร่ภายใต้เงื่อนไขของ Creative Commons Attribution License (CC BY) อนุญาตให้ใช้ แจกจ่าย หรือทำซ้ำในฟอรัมอื่นได้ โดยต้องให้เครดิตผู้แต่งต้นฉบับและเจ้าของลิขสิทธิ์ และมีการอ้างถึงสิ่งพิมพ์ต้นฉบับในวารสารนี้ตามหลักปฏิบัติทางวิชาการที่เป็นที่ยอมรับ ไม่อนุญาตให้ใช้ แจกจ่าย หรือทำซ้ำ ซึ่งไม่เป็นไปตามข้อกำหนดเหล่านี้