กลยุทธ์การรักษาใหม่สําหรับโรคไตโรคเบาหวาน: CCR2 Antagonist

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ส่วนที่ 2. :ผลของศัตรู CCR2 ต่อแมคโครฟาจและตัวรับเหมือนโทร 9 นิพจน์ในรูปแบบเมาส์ของโรคไตโรคเบาหวาน

เซโกะ อิโตะ, ฮิโรยูกิ นากาชิมะ, ทาคูยะ อิชิคิริยามะ, มาซาฮิโระ นากาชิมะ, อากิระ ยามากาตะ และคณะ

นามธรรม

การเกิดโรคของโรคไตโรคเบาหวาน(DN) เกี่ยวข้องกับการรับสมัครแมคโครฟาจ (Mo) ไปยังไตการผลิตปัจจัยเนื้อร้ายเนื้องอก - αu (TNF-o) และความเครียดออกซิเดชัน มีรายงานว่าการกระตุ้นตัวรับ 9 (TLR9) ที่มีลักษณะคล้ายโทรมีส่วนเกี่ยวข้องกับการอักเสบในระบบและทําให้อาการนี้รุนแรงขึ้นในกลุ่มอาการเมตาบอลิซึม ดังนั้นเราจึงตั้งสมมติฐานว่า TLR9 มีบทบาทในการเกิดโรคของ DN(โรคไตโรคเบาหวาน). สองชุดย่อยของไต Mos ใน DNโรคไตโรคเบาหวานแบบจําลอง (db/db) หนูได้รับการวิเคราะห์โดยใช้โฟลว์ไซโตเมทรีเพื่อประเมินการกระจายและการแสดงออกและฟังก์ชัน TLR9 หนูได้รับการบริหารซีซีอาร์2ศัตรู INCB3344 สําหรับ 8 สัปดาห์; การเปลี่ยนแปลงในการกระจาย Mo และฟังก์ชั่นและผลการรักษาใน DNโรคไตโรคเบาหวานพยาธิวิทยาถูกตรวจสอบ CD11bhigh ที่ได้จากไขกระดูก (BM-Mo) และ CD11blow Mos (Res-Mo) ที่มีถิ่นที่อยู่ในเนื้อเยื่อถูกระบุในไตของเมาส์ ในชื่อ DNโรคไตโรคเบาหวานความคืบหน้าจํานวน BM-Mφ นิพจน์ TLR9 และการผลิตα TNF เพิ่มขึ้นอย่างมาก ใน Res-Mos การผลิตสายพันธุ์ออกซิเจนปฏิกิริยา (ROS) และกิจกรรม phagocytic ได้รับการปรับปรุง INCB3344 ลดลง albuminuria, ระดับซีรั่ม creatinine, ความอุดมสมบูรณ์ของ BM-Mφ, การแสดงออกของ TLR9 และการผลิต TNF-a โดยการผลิต BM-Mφs และ ROS โดย Res-Mos ทั้งการเพิ่มการเปิดใช้งาน BM-Mo ผ่านการผลิต TLR9 และ TNF-α และการผลิต ROS ที่เพิ่มขึ้นโดย Res-Mos มีส่วนเกี่ยวข้องกับ DN(โรคไตโรคเบาหวาน)ความก้าวหน้า ดังนั้นการปิดใช้งาน Mos และการแสดงออก TLR9 ของพวกเขาโดย INCB3344 จึงเป็นกลยุทธ์การรักษาที่มีศักยภาพสําหรับ DN (โรคไตโรคเบาหวาน).

ใหม่ & น่าสังเกต เราจําแนกแมคโครฟาจไต (Mos) เป็น Mos ที่ได้จากไขกระดูก (BM-Mos) ที่แสดง CD1lb สูงและ Mo (Res-Mos) ที่มีถิ่นที่อยู่เฉพาะเนื้อเยื่อซึ่งแสดง CD11b ต่ํา ในโรคไตโรคเบาหวาน(DN) รุ่นหนู การแสดงออกของตัวรับ 9 (TLR9) ที่เหมือนโทรและการผลิต TNF-αผ่านการเปิดใช้งาน TLR9 ในการผลิต BM-Mos และ ROS ใน Res-Mos ได้รับการปรับปรุงนอกจากนี้ซีซีอาร์2ศัตรูระงับการแทรกซึมของไตของ BM-Mos และหน้าที่ของพวกเขาและการผลิต ROS โดย Res-Mos ด้วยการปราบปราม TLR9 ร่วมกัน การศึกษาของเรานําเสนอกลยุทธ์การรักษาใหม่สําหรับ DN (โรคไตโรคเบาหวาน).

cistanche pharma พิเศษเพื่อไต

คลิกที่นี่เพื่อดูส่วนที่ 1

การอภิปราย

เรานําเสนอข้อค้นพบใหม่สามข้อในการศึกษานี้ ครั้งแรกในหนูเบาหวาน DB / DB, BM-Mos แสดง TLR9 และปล่อย TNF-。 มีมากกว่าหนูที่มีหมอกควันที่ไม่ใช่เบาหวานในขณะที่ Res-Mos ผลิต ROS มากขึ้นและแสดงให้เห็นถึงการทํางานของ phagocytic ประการที่สอง INCB3344, aซีซีอาร์2ศัตรูลดการแสดงออกของ TLR9 และการปล่อย TNF-αจาก MPS ทั้งสองประเภทและลดการผลิต ROS โดย Res-Mos สุดท้ายกลไกเหล่านี้สามารถบัญชีสําหรับการลดลงของ albuminuria และซีรั่มระดับ Cr ในหนูเบาหวาน DB / DB เช่นเดียวกับการปรับปรุงในการแพร่กระจายของ mesangial และการแสดงออกของ podocyte

จากการค้นพบของเราไตมอสถูกแบ่งออกเป็นสองประชากรเช่น BM-Mos แสดงเครื่องหมายที่ได้จากไขกระดูกและ Res-Mos แทบจะไม่แสดงออก เนื่องจากพวกเขาไม่ได้ขึ้นอยู่กับการปรากฏตัวของโรคเบาหวานสิ่งเหล่านี้จึงถือเป็นคุณสมบัติที่เป็นเอกลักษณ์ของ Mos ไตทั้งสองชนิด ในทางตรงกันข้ามฟังก์ชั่นต่าง ๆ ของพวกเขาได้รับการปรับปรุงในหนูที่เป็นโรคเบาหวาน นอกจากนี้การผลิต TNF-α ซึ่งเป็นไซโตไคน์โปรอักเสบที่ผลิตโดย Mos เป็นหลักและ IL-10 ซึ่งเป็นไซโตไคน์ต้านการอักเสบก็เพิ่มขึ้นเช่นกัน สิ่งนี้บ่งชี้ว่าไตมอสมีส่วนเกี่ยวข้องพร้อมกันไม่เพียง แต่ในการเหนี่ยวนํา แต่ยังรวมถึงการบรรจบกันของการอักเสบในสภาวะอักเสบเรื้อรังเช่น DN (โรคไตโรคเบาหวาน). บทบาทของแมคโครฟาจไตสองประเภท

เนื่องจากการขับถ่ายอัลบูมินในปัสสาวะซึ่งสะท้อนถึงความรุนแรงของไตเพิ่มขึ้นตามเปอร์เซ็นต์ของ BM-Mos ในหนู DB / DB เราขอแนะนําให้ BM-Mos มีบทบาทสําคัญใน DN (โรคไตโรคเบาหวาน) การพัฒนา นอกจากนี้เรายังพบว่าการแสดงออก TLR9 และการผลิต TNF-α ได้รับการปรับปรุงใน BM-Mos ในขณะที่การผลิต ROS และกิจกรรม phagocytic เพิ่มขึ้นใน Res-Mos ด้วย DN(โรคไตโรคเบาหวาน)ความก้าวหน้า เนื่องจากการสังเกตเหล่านี้ไม่ได้เกิดขึ้นในหนูหมอกที่อายุน้อยกว่าและแก่กว่า (ไม่แสดงข้อมูล) เราจึงคิดว่าพวกมันเกี่ยวข้องกับ DN(โรคไตโรคเบาหวาน)ความก้าวหน้าและไม่ได้เกิดจากการเปลี่ยนแปลงตามอายุ TLR รับรู้รูปแบบโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับเชื้อโรค เช่น lipopolysaccharides, DNA ของแบคทีเรีย และรูปแบบโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับอันตรายภายนอก ซึ่งระดับจะเพิ่มขึ้นในโรคเบาหวาน (33,34) โดยเฉพาะอย่างยิ่งมีรายงานว่า TLR2 และ TLR4 มีส่วนเกี่ยวข้องกับการอักเสบอย่างต่อเนื่องใน DN(โรคไตโรคเบาหวาน), น่าจะผ่านมอส (35-38) TLR9 รับรู้ดีเอ็นเอไมโตคอนเดรียและเซลล์ที่ปราศจากเซลล์ที่ปล่อยออกมาสู่การไหลเวียนโดยเซลล์หรือเซลล์ไขมันที่เสียหาย/ตาย และลวดลายดีเอ็นเอของแบคทีเรียทั่วไป CpG-ODN จึงกระตุ้นภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและแนะนําให้มีส่วนร่วมในการบาดเจ็บที่ไต (11,14)

การผลิต ROS และ phagocytosis โดย Res-Mos เพิ่มขึ้นพร้อมกับ DN (โรคไตโรคเบาหวาน) ความก้าวหน้า มีรายงานว่าไตมอสมีส่วนเกี่ยวข้องกับ DN(โรคไตโรคเบาหวาน)ความก้าวหน้าโดยการปล่อย ROs ผ่านกิจกรรมนิโคตินาไมด์อะดีนีนไดนิวคลีโอไทด์ฟอสเฟต (NADPH) ออกซิเดส (39,40) และการศึกษาก่อนหน้านี้ของเราแสดงให้เห็นว่า ROS ที่ได้จาก Res-Mos มีส่วนเกี่ยวข้องกับการบาดเจ็บของเนื้อเยื่อตับ (20) ดังนั้นในไต Res-Mos อาจเกี่ยวข้องกับการบาดเจ็บของเนื้อเยื่อที่เกิดจาก ROS นอกจากนี้การแสดงออก TLR9 ใน Res-Mos ได้รับการปรับปรุงในสภาพโรคเบาหวาน (รูปที่ 1E) เนื่องจาก ROS ที่ผลิตโดย Res-Mos ได้รับผลกระทบจากการเปิดใช้งาน TLR9 และระดับ TNF-a ในท้องถิ่น (20,41, 42) การเพิ่มขึ้นของการผลิต ROS โดย Res-Mos ด้วย DN (โรคไตโรคเบาหวาน) ความก้าวหน้าเกิดจากการเพิ่มขึ้นของการแสดงออกของ TLR9 หรือได้รับผลกระทบจากการเหนี่ยวนําการผลิต TNF-α ที่เพิ่มขึ้นของ BM-Mos ดังนั้นเราจึงคาดการณ์ว่าการเพิ่มขึ้นของการผลิต TNF-a โดย BM-Mos และการผลิต ROS โดย Res-Mgps ทําให้ DN รุนแรงขึ้น(โรคไตโรคเบาหวาน).

แม้ว่า Res-Mos อาจมีบทบาทที่เป็นอันตรายผ่านการผลิต ROS ที่ได้รับการปรับปรุง แต่ความสามารถ phagocytosis ที่แข็งแกร่งของพวกเขาอาจมีผลต่อการป้องกัน DN(โรคไตโรคเบาหวาน) หนู Res-Mos อาจ phagocytose เซลล์ไตที่เสียหายในระหว่างการลุกลามของโรคและมีส่วนร่วมในการซ่อมแซมเนื้อเยื่อไต นอกจากนี้การเพิ่มขึ้นของการผลิต ROS โดย Res-Mos อาจเกิดขึ้นเนื่องจากการย่อยของเนื้อเยื่อที่เสียหาย phagocytosed ในขณะที่เราประเมิน ROS ที่ผลิตโดยไตมอสในสภาพแวดล้อมที่ไม่ได้กระตุ้น ROS ถูกผลิตขึ้นในระยะที่ Mos phagocytosed และย่อยเนื้อเยื่อไตที่เสียหาย ดังนั้นการผลิต ROS ที่เพิ่มขึ้นใน Res-Mos อาจไม่ใช่ผลเสียใน DN (โรคไตโรคเบาหวาน).

ผลกระทบของซีซีอาร์2ศัตรู INCB3344 เกี่ยวกับโรคไตโรคเบาหวาน

CCL2 แสดงออกมากเกินไปในไตของหนูแบบจําลองโรคเบาหวาน (43-46) และมีส่วนเกี่ยวข้องกับอาการกําเริบของ albuminuria เนื่องจากการกระทําของมันใน podocytes ไต(47) นอกจากนี้การแทรกซึมของ monocyte ที่บริเวณที่มีการอักเสบส่วนใหญ่ถูกควบคุมโดย CCL2 และ CCL2 ดึงดูด Ms ไปยังเนื้อเยื่อไต (ผ่านซีซีอาร์2- การส่งสัญญาณที่เป็นสื่อกลาง) และมีบทบาทสําคัญใน DN (โรคไตโรคเบาหวาน) การเกิดโรค(46,47) CCL2is ผลิตโดย podocytes ไตเซลล์ mesangial และเซลล์เยื่อบุผิวท่อและก่อให้เกิดการอักเสบคั่นระหว่างหน้าฝ่อท่อและพังผืดในไต(44, 48,49) การบริหารงานของหลาย ๆซีซีอาร์2คู่อริในหนูแบบจําลองโรคเบาหวานเพิ่งแสดงให้เห็นว่าสามารถยับยั้งการแทรกซึมของ Mo เข้าไปในไตและป้องกัน DN(โรคไตโรคเบาหวาน)ความก้าวหน้า (50-53) อย่างไรก็ตามซีซีอาร์2คู่อริไม่ได้ใช้ทางคลินิกในมนุษย์อาจเป็นเพราะปัญหาต่าง ๆ เช่นครึ่งชีวิตทางเภสัชวิทยาสั้น ๆ และความสัมพันธ์ต่ําสําหรับมนุษย์ซีซีอาร์2. ในทางตรงกันข้าม INCB3344 สามารถจับกับ monocytes ของมนุษย์ที่มีการเลือกสูงสําหรับซีซีอาร์2และมีครึ่งชีวิตทางเภสัชจลนศาสตร์ที่ยาวนานในร่างกายมนุษย์หรือหนู (8,9)

ในการศึกษาปัจจุบัน INCB3344 สามารถยับยั้งการย้ายถิ่นของ BM-Mos ไปยังไตใน DN (โรคไตโรคเบาหวาน); อย่างไรก็ตาม มันไม่ได้มีผลกระทบเด่นชัดต่อ Res-Migos ซึ่งบ่งชี้ว่าประชากร BM- และ Res-Mφ มีคุณสมบัติแตกต่างกัน นอกจากนี้ INCB3344 ยังโพลาไรซ์ Mgs เป็นฟีโนไทป์ M2 (โพลาไรเซชัน M2) ซึ่งชี้ให้เห็นถึงผลของการแปลง proinflammatory เป็นฟีโนไทป์ต้านการอักเสบ

โดยเฉพาะอย่างยิ่ง INCB3344 ลดการผลิต TNF-α อย่างมีนัยสําคัญใน Mos ทั้งสองประเภทซึ่งอาจมีส่วนช่วยมากที่สุดในการปรับปรุง DN (โรคไตโรคเบาหวาน). TNF-α มีส่วนร่วมในการเจริญเติบโตมากเกินไปของไตการขับถ่ายอัลบูมินและการทํางานของไตลดลงใน DN (โรคไตโรคเบาหวาน) (3, 54) และเป็น pleiotropic cytokine ที่ช่วยกระตุ้นการผลิตไซโตไคน์อื่น ๆ ในลักษณะ autocrine และ paracrine(55-58) ดังนั้นการยับยั้ง TNF-o อาจทําหน้าที่ปิดกั้นผู้ไกล่เกลี่ยการอักเสบอื่น ๆ ที่อาจก่อให้เกิดผลประโยชน์ต่อ DN(โรคไตโรคเบาหวาน). เป็นซีซีอาร์2การกระตุ้นนําไปสู่การผลิต TNF-a ผ่านกิจกรรมของไกลโคเจนภายในเซลล์ synthase kinase 3 (GSK3)(59), เราคาดการณ์ว่า INCB3344 ยับยั้งการผลิต TNF-α โดยการปิดกั้นเส้นทางนี้ในไตมอส. อย่างไรก็ตามเราเชื่อว่าระดับ GSK3 ในแบบจําลองนี้ควรได้รับการประเมินและจําเป็นต้องมีการศึกษาเพิ่มเติมเพื่อยืนยันการเก็งกําไรนี้ นอกจากนี้ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่า Mos ไตส่วนใหญ่เป็น BM-Mos และการผลิต TNF ในไต BM-Mos นั้นสูงกว่าใน BM-Mos อื่น ๆ ในไต ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า INCB3344 ซึ่งกดจํานวน BM-Mφ (โดยเฉพาะอย่างยิ่ง) ส่วนใหญ่มีส่วนช่วยในการแก้ไขรอยโรคของไตโดยการลดการแพร่กระจายของ mesangial และปกป้อง podocytes (เพิ่ม WT-1)

ซีซีอาร์2มีการยับยั้งเพื่อลด TNF-α pro-duction ผ่านการปราบปราม TLR9 (60,61) และไม่พบการแสดงออกของ TLR9 ในเนื้อเยื่อไต รวมถึง tubules, interstitium และ glomeruli ยกเว้นเซลล์ที่สันนิษฐานทางสัณฐานวิทยาว่าเป็น Mos ในการศึกษาปัจจุบัน ดังนั้นการบริหาร INCB3344 ยังลดการแสดงออกของ TLR9 ใน Mos ทั้งสองประเภท เมื่อนํามารวมกันผลลัพธ์ชี้ให้เห็นว่า INCB3344 ยับยั้งไม่เพียง แต่การแทรกซึมของ BM-Mg เข้าไปในไตเท่านั้น แต่ยังรวมถึงหน้าที่ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบที่เป็นอันตรายและอาจนําไปสู่การบรรเทา DN(โรคไตโรคเบาหวาน).

โดยสรุป BM-Mos แสดง TLR9 และปล่อย TNF-a อย่างล้นเหลือในหนูที่เป็นโรคเบาหวานมากกว่าในหนูที่ไม่ใช่เบาหวานในขณะที่ Res-Mos ผลิต ROS มากขึ้นและแสดงให้เห็นถึงกิจกรรม phagocytic ที่เพิ่มขึ้นในหนูที่เป็นโรคเบาหวาน INCB3344, aซีซีอาร์2ศัตรูลดการแสดงออกของ TLR9 และการปล่อย TNF-αจาก Mos ทั้งสองประเภทและลดการผลิต ROS โดย Res-Mos การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้อธิบายถึงการลดลงของระดับอัลบูมินูเรียและซีรั่ม Cr รวมถึงการปรับปรุงทางพยาธิวิทยาในหนูที่เป็นโรคเบาหวาน เราขอแนะนําว่า INCB3344 มีศักยภาพที่แข็งแกร่งในการรักษา DN(โรคไตโรคเบาหวาน)ในคลินิก

มุมมองและความสําคัญ

เราแสดงให้เห็นว่าซีซีอาร์2คู่อริ INCB3344 สามารถลดระดับอัลบูมินูเรียและซีรั่ม Cr และปรับปรุงการแพร่กระจาย mesangial และการแสดงออกของ podocyte ในหนูที่มี DN(โรคไตโรคเบาหวาน). ผลประโยชน์เหล่านี้เกิดจากการลดการผลิต TNF-α จากการปล่อย BM-Mos และ ROS จาก Res-Mφs ซึ่งทั้งสองอย่างนี้มาจากการลดลงของการแสดงออกของ TLR9 ในโพลาไรเซชัน Mos และ M2 ทั้งสองประเภท ในอนาคตคู่อริตัวรับนี้สามารถใช้เป็นทางเลือกที่แข็งแกร่งหรือเป็นพันธมิตรกับตัวบล็อกตัวรับ angiotensin II และ cotransporter-2 โซเดียมกลูโคสเพื่อรักษาผู้ป่วยเพื่อป้องกันการลุกลามของ DN(โรคไตโรคเบาหวาน).

อ้าง อิง

1. Qi C. MaoX, Zhang Z.Wu H, การจําแนกประเภทและการวินิจฉัยแยกโรคของโรคไตโรคเบาหวาน. เจ โรคเบาหวาน Res 2017:8637138,2017. ดอย:10.1155/2017/8637138.

2. คุณ H, Gao T, คูเปอร์ TK, ไบรอันรีฟส์ W, Awad AS แมคโครฟาจเป็นสื่อกลางโดยตรงต่อการบาดเจ็บของไตเบาหวาน J Physiol Renal Physiol 305:F1719-F1727,2013. ดอย:10.1152/ajprenal.00141.2013.

3. Awad AS, You H, Gao T, Cooper TK, Nedospasov SA, Vacher J, Wilkinson PF, Farrell FX, Brian Reeves W. Macrophage-ปัจจัยเนื้อร้ายเนื้องอกที่ได้จากแมคโครฟา-อัลฟาเป็นสื่อกลางในการบาดเจ็บของไตโรคเบาหวาน ไต Int 88:722-733,2015.doi:10.1038/ki.2015.162.

4. Lin M,Yiu WH, Wu HJ, Chan LY,Leung JC,Au WS, Chan KW, Lai KN, Tang SC ตัวรับคล้ายโทร 4 ส่งเสริมการอักเสบท่อในโรคไตโรคเบาหวาน. J Am Soc Nephrol 23:86-102, 2012. ดอย:10.1681/asn.2010111210.

5. Hou Y, Shi Y, Han B, Liu X, Qiao X, Qi Y, Wang L. เปปไทด์ต้านอนุมูลอิสระ SS31 ป้องกันความเครียดออกซิเดชันลดระดับ CD36 และปรับปรุงการทํางานของไตในโรคไตโรคเบาหวาน. การปลูกถ่ายหน้าปัด Nephrol 33: 1908-1918, 2018.doi:10.1093/ndt/gfy021

6. ซอก SJ, ลี ES, คิม GT, ฮยอนเอ็ม, ลีเจเอช, เฉินเอส, ชเวอาร์, คิม HM, ลี EY, ชุง CH. การปิดล้อม CCL2/ซีซีอาร์2ส่งสัญญาณ amelioratesโรคไตโรคเบาหวานในเมาส์ DB/DB การปลูกถ่าย Nephrol Dial 28:1700-1710,2013. ดอย:10.1093/ndt/gfs555.

7. บรอดเมอร์เคล CM, ฮูเบอร์ อาร์, โควิงตัน เอ็ม, ไดมอนด์ เอส, ฮอลล์ แอล, คอลลินส์ อาร์, เลฟเฟ็ต แอล, กัลลาเกอร์ เค, เฟลด์แมน พี, คอลลิเออร์ พี, สโตว์ เอ็ม, เอ็กซ์, บาริบาวด์ เอฟ, ชิน เอ็น, โธมัส บี, เบิร์น ที, ฮอลลิส จี, เยเลสวารัม เอส, โซโลมอน เค, ฟรีดแมน เอส, หวัง เอ, ซู ซีบี, นิวตัน อาร์ซี Scherle P, Vaddi K. การค้นพบและลักษณะทางเภสัชวิทยาของนวนิยายที่ใช้งานหนูซีซีอาร์2ศัตรู, INCB3344 J Immunol 175:5370-5378, 2005. ดอย:10.4049/jimmunol.175.8.5370.

8. ชิน เอ็น, บาริบาวด์ เอฟ,หวัง เค, หยาง จี,วินน์ อาร์, โควิงตัน เอ็มบี, เฟลด์แมน พี, กัลลาเกอร์ เคบี, เลฟเฟ็ต แอลเอ็ม, ลอฟเฟ็ต แอลเอ็ม, โล วายวาย,หวัง เอ, ซู ซีบี, นิวตัน อาร์ซี, เชอร์เล พีเอ ลักษณะทางเภสัชวิทยาของ INCB3344 ซึ่งเป็นศัตรูโมเลกุลขนาดเล็กของมนุษย์ซีซีอาร์2. ชีวเคมีชีวฟิสิกส์ Res Commun 387: 251–255, 2009 ดอย:10. 1016/j.bbrc.2009.06.135.