การป้องกันระบบประสาทของ N-benzyl Eicosapentaenamide ในหนูแรกเกิดหลังได้รับบาดเจ็บจากสมองขาดเลือด-ขาดเลือด
Mar 21, 2022
ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
เชิงนามธรรม:
มาเก๊า(Lepidium meyenii) ได้กลายเป็นอาหารจากพืชที่ได้รับความนิยมเนื่องจากมีคุณสมบัติทางยาและคุณค่าทางโภชนาการแมคคาไมด์ที่เป็นส่วนผสมเฉพาะที่พบในmacaเป็นชุดเฉพาะของ N-benzyl amides ของกรดไขมันสายยาวที่ไม่มีขั้ว ซึ่งมีคุณสมบัติทางชีวภาพหลายอย่าง เช่น ลักษณะการต้านอาการเมื่อยล้าและการปรับปรุงสุขภาพการเจริญพันธุ์ ในการศึกษานี้ ได้มีการระบุ N-benzyl eicosapentaenamide (NB-EPA) ชนิดใหม่จากmaca. เราสำรวจเพิ่มเติมเกี่ยวกับบทบาทการป้องกันระบบประสาทในการบาดเจ็บที่สมองขาดออกซิเจนและขาดเลือด ผลการวิจัยของเราระบุว่าการรักษาด้วย NB-EPA ที่สังเคราะห์ทางชีวเคมีช่วยลดขนาดของภาวะกล้ามเนื้อสมองขาดเลือดได้อย่างมีนัยสำคัญ และปรับปรุงความผิดปกติของระบบประสาทหลังจากความเสียหายของสมองขาดออกซิเจนและขาดเลือดในหนูแรกเกิด NB-EPA ยับยั้งการตายของเซลล์ประสาทหลังจากการท้าทายการขาดเลือด NB-EPA ปรับปรุงการอยู่รอดของเซลล์ประสาทและการเพิ่มจำนวนผ่านการกระตุ้นสัญญาณ AKT ที่มีฟอสโฟรีเลต ข้อสังเกต คุณสมบัติในการป้องกันของ NB-EPA ต่อความเสียหายของเส้นประสาทขาดเลือดขึ้นอยู่กับการปราบปรามของวิถี p53–PUMA เมื่อนำมารวมกัน การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่า NB-EPA อาจเป็นตัวแทนของสารป้องกันระบบประสาทชนิดใหม่สำหรับทารกแรกเกิดที่มีภาวะสมองจากสมองขาดเลือดขาดเลือด (hypoxic-ischemic encephalopathy)
คำสำคัญ:maca; N-เบนซิล ไอโคซาเพนทาเอนาไมด์; ทารกแรกเกิด hypoxic-ischemic encephalopathy; การป้องกันระบบประสาท; PUMA
1. บทนำ
Neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE) เป็นสาเหตุทั่วไปของการบาดเจ็บที่สมองเนื่องจากการกีดกันออกซิเจนและการลดการไหลเวียนของเลือด [1,2] HIE ไม่ชอบการพัฒนาของสมองอย่างมาก ซึ่งเป็นปัจจัยหลักที่ทำให้เกิดความผิดปกติทางระบบประสาทในเด็ก [3] ผลที่ตามมาจาก HIE ที่พบบ่อยที่สุด ได้แก่ สมองพิการ ความบกพร่องทางสติปัญญาอย่างรุนแรง และการขาดดุลของการเคลื่อนไหวและพฤติกรรม ส่งผลให้ทารกแรกเกิดเสียชีวิตหรือทุพพลภาพในระยะยาวหลายล้านรายทุกปี [4] ภาวะอุณหภูมิร่างกายต่ำกว่าปกติคือการรักษาทางคลินิกสำหรับผู้ป่วย HIE ทารกแรกเกิด และได้รับการแสดงเพื่อปรับปรุงผลลัพธ์ทางระบบประสาทในผู้รอดชีวิต [5] อย่างไรก็ตาม การใช้การรักษาภาวะอุณหภูมิร่างกายต่ำกว่าปกตินั้นไม่เพียงพอต่อการลดการตายหรือหลีกเลี่ยงความผิดปกติทางพัฒนาการทางระบบประสาทอย่างรุนแรงใน HIE ระดับรุนแรง [6] แม้จะมีความก้าวหน้าอย่างมากในเทคโนโลยีทางการแพทย์สมัยใหม่ แต่ก็ไม่มีการรักษาทางการแพทย์ที่มีประสิทธิภาพสำหรับความเสียหายของเส้นประสาทที่เกิดจาก HIE [7] การบำบัดด้วยระบบประสาทมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการฟื้นตัวของการทำงานของสมองในระยะยาว [8] ดังนั้นจึงจำเป็นต้องพัฒนาการบำบัดรักษาทางระบบประสาทที่ปลอดภัยและมีประสิทธิภาพ
ฉันสามารถซื้อเปลือก cistanche ได้ที่ไหน
มาเก๊า(Lepidium meyenii) เป็นสมุนไพรประจำปีหรือล้มลุกของตระกูลกะหล่ำในอเมริกาใต้ซึ่งจัดเป็นอาหารทรัพยากรใหม่ในปี 2554 [9,10] มีการระบุส่วนประกอบต่างๆ ที่มีผลทางเภสัชวิทยาและโภชนาการใน maca ซึ่งรวมถึงพอลิแซ็กคาไรด์ ไฟโตสเตอรอล อัลคาลอยด์ กลูโคซิโนเลต มาเคน และแมคคาไมด์[11,12]. ในบรรดาส่วนผสมที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพเหล่านี้ แมคคาไมด์ ซึ่งเป็นกลุ่มของสารประกอบ N-benzyl amide ของกรดไขมันสายยาวที่ไม่มีขั้ว ได้รับการยอมรับว่าเป็นองค์ประกอบเฉพาะในขณะที่มีส่วนทำให้เกิดประสิทธิภาพที่สำคัญในมาคา เช่น ต้านความเมื่อยล้า ต้านโรคกระดูกพรุน และช่วยเพิ่มการเจริญพันธุ์ [13 –15]. เมื่อเร็ว ๆ นี้ Macamides และสารสังเคราะห์ที่คล้ายคลึงกันได้รับรายงานเพื่อแสดงฤทธิ์ยับยั้งกรดไขมัน amide hydrolase (FAAH) ที่ชัดเจน ซึ่งหมายความว่าสารประกอบเหล่านี้มีฤทธิ์ป้องกันระบบประสาทและต้านการอักเสบได้ [16,17]
ซิสทานเช ทูบูโลซา
ในการศึกษานี้ ได้มีการระบุชนิดใหม่ของการเพิ่มสูงสุดของ N-benzyl eicosapentaenamide (NB EPA) จากmaca. เราสำรวจกิจกรรมทางชีวภาพเพิ่มเติมเกี่ยวกับความเสียหายของสมองที่ขาดออกซิเจนและขาดเลือด การค้นพบของเราแสดงให้เห็นว่า NB-EPA ช่วยเยียวยาอาการบาดเจ็บที่สมองของทารกแรกเกิดที่อาศัย HI อย่างมีนัยสำคัญผ่านการปรับปรุงภาวะสมองขาดเลือดและความผิดปกติทางพฤติกรรม โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ผลกระทบต่อระบบประสาทของ NB-EPA ต่อการอยู่รอดของเซลล์ประสาทขาดเลือดนั้นขึ้นอยู่กับการปราบปรามของเส้นทางการส่งสัญญาณ p53–PUMA
2. ผลลัพธ์
2.1. การระบุและการสังเคราะห์ N-benzyl Eicosapentaenamide
แมคคาไมด์เป็นหมู่ของอัลคาลอยด์ที่เป็นเอไมด์ที่เกิดจากเบนซิลลามีนและมอยอิตีของกรดไขมัน ซึ่งถือเป็นสารประกอบที่เป็นคุณลักษณะเฉพาะของmaca. ที่นี่ เราระบุค่าสูงสุดใหม่ NB-EPA (สูตรโมเลกุล C27H37NO) จาก maca ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 1A โครมาโตกราฟีของเหลวที่มีประสิทธิภาพสูงด้วยอิเล็กโตรสเปรย์ ไอออนไนซ์แมสสเปกโตรเมตรี (HPLC-ESI-MS/MS) แสดงพีคสองพีคซึ่งถูกบันทึกในโครมาโตแกรมของไอออนรวมของ m/z 392.3 ด้วยเวลาการคงตัวที่ 7.{1 0}} นาที และ 9.0 นาที ตามลำดับ สเปกตรัม MS/MS แสดงให้เห็นว่าข้อมูลชิ้นส่วนของพีคที่มีเวลาเก็บรักษา 7.0 นาทีสอดคล้องกับชิ้นส่วนทางทฤษฎีของ NB-EPA (รูปที่ 1B) พีคไอออนของแฟรกเมนต์หลักที่ตรวจพบจากมาคาไมด์ใหม่นี้คือ m/z 91.1 ซึ่งสอดคล้องกับเบนซิล [C7H7] บวก พีคไอออนของชิ้นส่วน MS/MS ทางด้านกรดไขมันสอดคล้องกับข้อมูล MS/MS ที่รายงานของกรดไอโคซาเพนทาอีโนอิกในเว็บบุ๊กเคมีของสถาบันมาตรฐานและเทคโนโลยีแห่งชาติ (NIST) (SRD 69)
เนื่องจากมีปริมาณ NB-EPA ต่ำในmacaจากนั้นเราก็สังเคราะห์ NB-EPA โดยใช้วิธีการควบแน่นของคาร์โบไดอิไมด์ ของผสมที่สังเคราะห์ขึ้นถูกทำให้บริสุทธิ์โดยระบบ HPLC กึ่งเตรียมการ เศษส่วนที่มีเวลาคงอยู่ตั้งแต่ 23.5 ถึง 25.5 นาทีถูกรวบรวม และความบริสุทธิ์ของเศษส่วนที่ถูกรวบรวมถึง 98.2 เปอร์เซ็นต์ (รูปที่ 1C, D) การวิเคราะห์ HPLC-MS/MS แสดงให้เห็นว่า NB-EPA สังเคราะห์ทางชีวภาพและ NB-EPA ตามธรรมชาติมีลักษณะการแยกโครมาโตกราฟีที่เหมือนกันและข้อมูลชิ้นส่วนแมสสเปกโตรเมทรีทุติยภูมิ (รูปที่ 1E–G) เมื่อรวมกันแล้ว ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่ามะคาไมด์NB-EPA ถูกระบุจากmacaและสังเคราะห์ได้สำเร็จ
2.2. NB-EPA ช่วยลดปริมาณของเนื้อร้ายและการขาดดุลทางระบบประสาทในการบาดเจ็บที่สมองของทารกแรกเกิด HI
จากนั้นเราได้ตรวจสอบฤทธิ์ทางชีวภาพของ NB-EPA ในหนูแรกเกิดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมองขาดเลือดขาดเลือด (HI) รูปภาพของลักษณะสมองแสดงให้เห็นว่าเนื้อเยื่อสมองขาดเลือดกลายเป็นสีขาวและบวมในกลุ่มกระสายยาในวันที่ 1, 3, 7 และ 14 หลังเลิกเรียน (รูปที่ 2A) ในทางตรงกันข้าม การให้ NB-EPA ขนาด 250 ไมโครกรัม/วันเป็นเวลา 3 วัน ช่วยลดอาการบวมของสมองและปริมาณน้ำในสมองได้อย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 2A, B) การย้อมสีด้วย 2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride (TTC) แสดงให้เห็นว่าการรักษาด้วย NB-EPA (11.13 ± 2.58 เปอร์เซ็นต์ ) ลดขนาดของโรคหลอดเลือดสมองตีบได้ 3 วันหลังการทดลอง HI เมื่อเทียบกับยานพาหนะ (37.01 ± 4.68 เปอร์เซ็นต์) ) (รูปที่ 2C) การทดสอบทางระบบประสาทแสดงให้เห็นว่าหนูเมาส์ในกลุ่มกระสายยาแสดงความผิดปกติทางพฤติกรรมทางระบบประสาทที่มีนัยสำคัญที่ 1, 3 และ 7 วันหลัง HI (รูปที่ 2D–F) ในทางตรงกันข้าม การรักษาด้วย NB-EPA ช่วยปรับปรุงความบกพร่องทางระบบประสาทเหล่านี้ได้อย่างชัดเจน (รูปที่ 2D–F) ดังนั้น ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่า NB-EPA ป้องกันรอยโรคขาดเลือดและความผิดปกติของระบบประสาทในหนูแรกเกิดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง HI
รูปที่ 1 โครมาโตแกรมและสเปกตรัม MS/MS ของ NB-EPA ตามธรรมชาติและ NB-EPA สังเคราะห์ (A) โครมาโตแกรมที่เป็นตัวแทนของกระแสไอออนทั้งหมด (TIC) ที่ได้รับในโหมดการตรวจสอบไอออน (SIM) ที่เลือกในเชิงบวกสำหรับตัวอย่างสารสกัดจากมาค่า (B)MS/MS สเปกตรัมของ m/z3923 ([NB-EPA plus H]*) สำหรับตัวอย่างสารสกัดจาก maca (C) การเตรียม HPLCchromatogram แบบกึ่งการเตรียมของวัสดุ NB-EPA สังเคราะห์ (D)โครมาโตแกรม HPLC ของเศษส่วนของ NB-EPA (23.5-25.5 นาที) ที่รวบรวมจากระบบ HPLC แบบกึ่งเตรียม (E) โครมาโตแกรมตัวแทน TIC ที่ได้รับในโหมดซิมบวกสำหรับตัวอย่าง NB-EPA สังเคราะห์ (F)MS/MS สเปกตรัมของ m/z 392.3 สำหรับตัวอย่าง NB-EPA สังเคราะห์ทางชีวเคมี (G) โครงสร้างทางเคมีของ NB-EPA
2.3. NB-EPA ลดความเสียหายของสมองที่เกิดจาก HI โดยการปราบปรามการตายของเซลล์ประสาท
ต่อไป เราสำรวจว่าการป้องกัน NB-EPA ในอาการบาดเจ็บที่สมอง HI เกี่ยวข้องกับการปรับการตายของเซลล์ประสาทหรือไม่ การย้อมสี Hematoxylin-eosin (HE) แสดงให้เห็นว่าการจัดเรียงเซลล์ประสาทในคอร์เทกซ์, hippocampus dentate gyrus (DG), แอมโมเนียของ Cornu (CA) 1 และบริเวณ CA3 นั้นไม่เป็นระเบียบ และเส้นใยประสาทถูกคลายและ vacuolated ในสมองขาดเลือดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่ HI อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วย NB-EPA ได้ยกเลิกความเสียหายของเซลล์ประสาทอย่างชัดเจน (รูปที่ 3A) Western blot ยืนยันว่า NB-EPA ลดการแสดงออกของโปรตีน pro-apoptotic ลงอย่างเห็นได้ชัด เช่น p53, PUMA และ Bax ในเนื้อเยื่อสมองขาดเลือด (รูปที่ 3B, C) นอกจากนี้ นิวเคลียสของนิวเคลียสของนิวเคลียส (NeuN) และการย้อมสีสองครั้งของ TUNEL แสดงให้เห็นการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในจำนวนของ TUNEL บวกกับ NeuN บวกเซลล์ 7 วันหลังเกิด HI ในหนูเมาส์ที่ได้รับ NB-EPA (5.80 ± 1.35 เปอร์เซ็นต์) เมื่อเทียบกับกระสายยา (14.39 ± 2.55 เปอร์เซ็นต์ ). (ภาพที่ 3D) ข้อมูลเหล่านี้บ่งบอกว่าผลประโยชน์ของ NB-EPA ในการดูหมิ่นสมอง HI นั้นเกี่ยวข้องกับการยับยั้งการตายของเซลล์ประสาท
รูปที่ 2 การบริหาร NB-EPA ช่วยลดภาวะสมองขาดเลือดและความบกพร่องทางพฤติกรรมในหนูแรกเกิดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง HI (A) ภาพตัวแทนของลักษณะสมองที่ 1,3,7 และ 14 วันหลัง HI (B) การวิเคราะห์ทางสถิติของปริมาณน้ำในสมองจากหนูทุกกลุ่มที่ 3 วันหลัง Hl (C) ภาพถ่ายตัวแทนของส่วนสมองโคโรนัลที่ย้อมด้วย TTC จากหนูทุกกลุ่มใน 3 วันหลังจาก HI และการวิเคราะห์เชิงปริมาณของปริมาตรของกล้ามเนื้อหัวใจตาย (DF) ผลลัพธ์ทางพฤติกรรมทางระบบประสาทของการสะท้อนกลับทางภูมิศาสตร์ (D), ปฏิกิริยาหลีกเลี่ยงหน้าผา (E) และการทดสอบการยึดเกาะ (F) ที่ 1,3 และ 7 วันหลัง HI ข้อมูลคือความคลาดเคลื่อนมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM) ( n=8 ต่อกลุ่ม).*p<0.05 compared="" to="">
2.4. NB-EPA ลดความเสียหายของสมองที่เกิดจาก HI โดยการปราบปรามการตายของเซลล์ประสาท
การย้อมสี Nissl แสดงให้เห็นว่าเซลล์ประสาทจำนวนมากแสดงอาการฝ่อ บวม และนิวเคลียส pyknosis และถึงกับเสียชีวิตด้วยการหายตัวไปของร่างกาย Nissl ในสมองขาดเลือด ในทางตรงกันข้าม NB-EPA เห็นได้ชัดว่าปรับปรุงการอยู่รอดของเซลล์ประสาทและการจัดเรียงเซลล์ประสาทใหม่หลังจากได้รับบาดเจ็บที่ HI (รูปที่ 4A, B) Western blot แสดงให้เห็นว่า NB-EPA เพิ่มระดับของ phosphorylated AKT (p-AKT) ซึ่งทำหน้าที่เป็นสัญญาณการเอาตัวรอดในเนื้อเยื่อสมองขาดเลือด 7 วันหลังจากการท้าทาย HI (รูปที่ 4C, D) Doublecortin (DCX) เป็นเครื่องหมายสำหรับสารตั้งต้นของเซลล์ประสาทและเซลล์ประสาทที่ย้ายมาใหม่ [18] และ Ki-67 เป็นเครื่องหมายของการเพิ่มจำนวนเซลล์ [19] การบำบัดด้วย NB-EPA (19.83 ± 1.25 เซลล์/มม.3) เพิ่มจำนวนของ Ki-67 บวก DCX บวกเซลล์ 7 วันหลัง HI เมื่อเทียบกับกระสายยา (11.83 ± 1.08 เซลล์/มม.3) อย่างน่าทึ่ง (รูปที่ 4E) ดังนั้น ข้อมูลเหล่านี้จึงบอกเป็นนัยว่า NB-EPA ช่วยอำนวยความสะดวกในการอยู่รอดของเซลล์ประสาทและการเพิ่มจำนวนในหนูแรกเกิดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง HI
รูปที่ 3 NB-EPA ยับยั้งการตายของเซลล์ประสาทในหนูแรกเกิดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง HI (A) ภาพถ่ายตัวแทนของการย้อมสี HE ในบริเวณคอร์เทกซ์, ฮิปโปแคมปัส DG, CA1 และ CA3 จากหนูทุกกลุ่มใน 7 วันหลัง HI (แถบมาตราส่วน, 75 μm) （B） ภาพตัวอย่าง Western blot ของ p53, PUMA, และ Bax จากหนูทุกกลุ่มใน 7 วันหลังจาก HI (C) การวิเคราะห์ข้อมูล Densitometric แสดงใน (B) (D) รูปภาพตัวแทนของ NeuN (สีแดง) และ TUNEL (สีเขียว) จากหนูทุกกลุ่มใน 7 วันหลัง HI (ซ้าย แถบมาตราส่วน 25 um) ในเปลือกสมอง การหาปริมาณของเซลล์ที่มีป้ายกำกับสองเซลล์ NeuN และ TUNEL ที่ 7 วันหลัง HI (ขวา) ข้อมูลมีค่าเฉลี่ย± SEM (n =8 ต่อกลุ่ม) *พี<005 compared="" to="">
cistanche pdf
2.5. NB-EPA ลดความเสียหายของสมองที่เกิดจาก HI โดยการปราบปรามการตายของเซลล์ประสาท
จากผลการป้องกันข้างต้นของ NB-EPA ในความเสียหายของสมอง HI ของทารกแรกเกิด เราได้ประเมินเพิ่มเติมถึงอิทธิพลโดยตรงของ NB-EPA ต่อการอยู่รอดของเซลล์ประสาทในหลอดทดลอง เซลล์ประสาทคอร์เทกซ์ปฐมภูมิที่เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 7 วัน ในหลอดทดลอง มีลักษณะกลมและเล็ก โดยมีไซแนปส์ที่สมบูรณ์และเครือข่ายที่เชื่อมต่อถึงกัน (รูปที่ 5A) ความบริสุทธิ์ของเซลล์ประสาทถูกกำหนดโดยโฟลว์ไซโตเมทรี และอัตราบวกมากกว่า 95 เปอร์เซ็นต์ (รูปที่ 5B) เซลล์ประสาท NeuN* ยังถูกจำแนกโดยอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ (รูปที่ 5C) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ประสาทคอร์เทกซ์ปฐมภูมิได้รับการเพาะเลี้ยงสำเร็จ
รูปที่ 4 NB-EPA ช่วยเพิ่มการอยู่รอดของเซลล์ประสาทและการเพิ่มจำนวนในหนูแรกเกิดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง HI (A) ภาพถ่ายตัวแทนของการย้อมสี Nissl ในบริเวณคอร์เทกซ์, ฮิปโปแคมปัส DG, CAL และ CA3 จากหนูทุกกลุ่มใน 7 วันหลังจาก HI (แถบมาตราส่วน 75 μm) （B） การวิเคราะห์ทางสถิติของจำนวนเซลล์ประสาทแสดงใน （A） （C）ภาพตัวแทน Western blot ของ p-AKT และ AKT จากหนูทุกกลุ่มที่ 7 วันหลังจาก H. (D) การวิเคราะห์ข้อมูล Densitometric จะแสดงใน (C) (E) รูปภาพตัวแทนของ DCX(สีเขียว) และ Ki-67 (สีแดง) จากหนูทุกกลุ่มที่ 7 วันหลังจาก HI (ซ้าย, แถบมาตราส่วน, 25 um) ในพื้นที่ DG ของฮิบโปแคมปัส การหาปริมาณของ DCX และ Ki-67 เซลล์ที่มีป้ายกำกับคู่ที่ 7 วันหลัง HI (ขวา) ข้อมูลมีค่าเฉลี่ย±SEM (n=8 ต่อกลุ่ม)*p<0.05 compared="" to="">
จากนั้น เซลล์ประสาทถูกกีดกันออกซิเจน-กลูโคส (OGD) เป็นเวลา 3 ชั่วโมง และบำบัดด้วย NB-EPA ที่มีความเข้มข้นต่างกัน เซลล์ประสาทที่มีภาวะขาดออกซิเจนปรากฏขึ้นพร้อมกับการฝ่อและการเกิดนิวเคลียส pyknosis ในรถยนต์ที่ได้รับการบำบัดด้วย PBS ในทางตรงกันข้าม การรักษาด้วย NB-EPA ทำให้การอยู่รอดของเซลล์ประสาทดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลัง OGD (รูปที่ 5D) การรอดชีวิตของเซลล์ประสาทถูกวัด 24 ชั่วโมงต่อมาโดยใช้ชุดตรวจนับเซลล์-8(CCK-8) ดังที่แสดงในรูปที่ 5E เห็นได้ชัดว่าการรักษาด้วย NB-EPA ช่วยอัตราการรอดตายของเซลล์ประสาทหลังจาก OGD iniury ประสิทธิภาพสูงสุดของ NB-EPA ทำได้ที่ 1 ไมโครโมลาร์ ซึ่งใช้สำหรับการทดลองในหลอดทดลองที่ตามมาทั้งหมด การวิเคราะห์โฟลว์ไซโตเมทรียืนยันว่าจำนวนของเซลล์ประสาทที่ให้ผลบวกต่อแอนเนกซินในการเพาะเลี้ยงที่บำบัดด้วย NB-EPA ลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับวัฒนธรรมที่บำบัดด้วยพาหะนำยา PBS (รูปที่ 5F) ในขณะเดียวกัน การบำบัดด้วย NB-EPA ยังยับยั้งการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์อย่างเห็นได้ชัด ซึ่งรวมถึง p53, PUMA และ Bax ในเซลล์ประสาทที่ปรับสภาพด้วย OGD (รูปที่ 5G, H) ดังนั้น ข้อมูลเหล่านี้จึงบอกเป็นนัยว่า NB-EPA ช่วยลดความเสียหายของเส้นประสาทด้วยการควบคุมการอยู่รอดของเซลล์ประสาทในขณะที่ยับยั้งการตายของเซลล์ประสาท
รูปที่ 5. NB-EPA ลดการบาดเจ็บของเส้นประสาทขาดเลือดหลังจาก OGDchallenge (A) รูปภาพตัวแทนของเซลล์ประสาทคอร์เทกซ์ปฐมภูมิที่เพาะเลี้ยงที่ 1,3 และ 7 วัน (แถบมาตราส่วน 25 ไมโครเมตร) （B） เปอร์เซ็นต์ของ NeuN บวกเซลล์จากเซลล์ประสาทคอร์เทกซ์ปฐมภูมิที่เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 7 วัน ในหลอดทดลอง (C) ภาพแทนของ NeuN(สีเขียว) และ 4',6-diamidino-2-phenylindole (DAPI) ( สีน้ำเงิน)จากเซลล์ประสาทคอร์เทกซ์ปฐมภูมิที่เพาะเลี้ยงเป็นเวลา 7 วัน ในหลอดทดลอง (แถบมาตราส่วน 10 um) (D) ภาพตัวแทนของเซลล์ประสาทคอร์เทกซ์ปฐมภูมิจากทุกกลุ่มที่เลี้ยง 24 hof หลังจาก 3 ชั่วโมง OGD (แถบมาตราส่วน,25 μm) การทดสอบ （E）CCK-8 ในวัฒนธรรมที่อุดมด้วยนิวตรอนภายใต้เงื่อนไขการควบคุม OGD 3 ชั่วโมงตามด้วยการบำบัดด้วยช่วงความเข้มข้นของ NB-EPA อีก 24 ชั่วโมง (F) เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ประสาทที่ผนวกเข้าด้วยกันที่ 24 ชั่วโมง ของวัฒนธรรมหลังจาก 3 ชั่วโมง OGD (G) ภาพตัวอย่าง Western blot ของ p53, PUMA และ Bax จากทุกกลุ่มที่ 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงหลังจาก 3 ชั่วโมง OGD(H)การวิเคราะห์ข้อมูล Densitometric จะแสดงใน (G) ข้อมูลมีค่าเฉลี่ย ±SEM (n =3 ในแต่ละกลุ่ม)* p<0.05 compared="" to="">
2.6. NB-EPA ปกป้องเซลล์ประสาทจากการตายของเซลล์โดยการปราบปรามของ p53-PUMA
การส่งสัญญาณ เส้นทาง p53–PUMA เป็นที่ทราบกันดีว่ามีส่วนร่วมในการตายของเซลล์ประสาทในสมองที่ขาดเลือดขาดเลือด/เกิดซ้ำ [20] เราสำรวจที่นี่ว่าการปกป้อง NB-EPA จากการตายของเซลล์ประสาทนั้นเกี่ยวข้องกับการยับยั้งเส้นทาง p53–PUMA หรือไม่ ดังที่แสดงในรูปที่ 6A NB-EPA ยกเลิกอะพอพโทซิสของเซลล์ที่มีเงื่อนไข OGD แต่ไม่มีผลต่อตัวอย่างที่ปรับสภาพด้วย Pififithrin- (PFT) ซึ่งเป็นตัวยับยั้ง p53 ในขณะเดียวกัน การบำบัดด้วย NB-EPA ยับยั้งการแสดงออกของโปรตีนโปรอะพอพโทติก Bax ในเซลล์ประสาทที่ปรับสภาพด้วย OGD อย่างเห็นได้ชัด แต่ไม่มีผลกับสิ่งเหล่านั้นที่ได้รับการบำบัดด้วย PFT (รูปที่ 6B) การแสดงออกของ PUMA เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในเซลล์ประสาทหลังจากการท้าทาย OGD ในขณะที่ PUMA mRNA และการแสดงออกของโปรตีนไม่เปลี่ยนแปลงในเซลล์ประสาทที่ปรับสภาพด้วย PFT ซึ่งบ่งชี้ว่าการเหนี่ยวนำ PUMA ในเซลล์ประสาทขึ้นอยู่กับ p53- (รูปที่ 6C) การบำบัดด้วย NB-EPA ยับยั้งการแสดงออกของ PUMA ที่เหนี่ยวนำโดย OGD ในเซลล์ประสาท แต่ไม่มีผลต่อเซลล์ประสาทที่บำบัดด้วย PFT (รูปที่ 6C) เซลล์ประสาทในสมองที่มีการปิดเสียง PUMA จำเพาะแสดงเปอร์เซ็นต์ของเซลล์ apoptotic ที่ต่ำกว่า (รูปที่ 6D) และการแสดงออกที่ลดลงของโปรตีน Bax (รูปที่ 6E) ที่ 24 ชั่วโมงหลังจากการท้าทาย OGD เมื่อเทียบกับเซลล์ประสาทที่แสดงออก PUMA ดังนั้น ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่าการยับยั้งอะพอพโทซิสของเซลล์ประสาทที่เกิดจาก OGD โดยอาศัย NB-EPA นั้นส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับการกดขี่ของวิถี p53–PUMA
รูปที่ 6 NB-EPA ลดการตายของเซลล์ประสาทผ่านการยับยั้งวิถีของ p53-PUMA (A) เปอร์เซ็นต์ของภาคผนวกรวมกับเซลล์ประสาทที่มีหรือไม่มีการยับยั้ง p53 ที่ 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงที่มีหรือไม่มี NB-EPA และหลังจาก 3 ชั่วโมง OGD (B) ภาพตัวอย่าง Western blot ของ Bax โดยมีหรือไม่มีการยับยั้ง p53 ที่ 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงโดยมีหรือไม่มี NB-EPA และหลังจาก 3 ชั่วโมง OGD (ซ้าย) การวิเคราะห์ความหนาแน่นของการแสดงออกของโปรตีน Bax (ขวา) (C) การแสดงออกของ PUMA mRNA ในเซลล์ประสาทที่ 12 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงโดยมีหรือไม่มี NB-EPA และหลังจาก 3 ชั่วโมง OGD (ซ้าย); เปอร์เซ็นต์เฉลี่ยของการแสดงออกของโปรตีน PUMA ในเซลล์ประสาทที่ 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงโดยมีหรือไม่มี NB-EPA และหลังจาก 3 ชั่วโมง OGD (ขวา) (D) เปอร์เซ็นต์ของเซลล์ประสาทแอนเนกซินที่มีหรือไม่มี PUMA ล้มลงที่ 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงโดยมีหรือไม่มี NB-EPA และหลังจาก 3 ชั่วโมง OD.(E) ภาพ Western blot ที่เป็นตัวแทนของ Bax ที่มีหรือไม่มี PUMA ล้มลงที่ 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงด้วย หรือไม่มี NB-EPA และหลังจาก 3 ชั่วโมง OGD (ซ้าย) การวิเคราะห์ความหนาแน่นของการแสดงออกของโปรตีน Bax (ขวา) ข้อมูลคือค่าเฉลี่ย± SEM (n=3 ต่อกลุ่ม)*p< 0.05="" compared="" to="" vehicle.="" n.s.="" not="">
3. อภิปราย
ความเสียหายจากการขาดออกซิเจนและขาดเลือดในทารกแรกเกิดที่เกิดจากภาวะขาดอากาศหายใจในปริกำเนิดเป็นโรคที่พบบ่อยที่สุดในช่วงทารกแรกเกิด ไม่มีการแทรกแซงการรักษาทางเภสัชกรรมที่มีประสิทธิภาพซึ่งลดอาการบาดเจ็บที่สมองหรือปรับปรุงการทำงานของระบบประสาทในทารก [21] ในการศึกษานี้ เราพบว่าการรักษาด้วย macamide NB-EPA ตัวใหม่ช่วยบรรเทาอาการบาดเจ็บที่สมองขาดออกซิเจนและขาดเลือดในหนูแรกเกิดได้อย่างมีนัยสำคัญ การป้องกันระบบประสาทของ NB-EPA เกี่ยวข้องกับการควบคุมการอยู่รอดของเซลล์ประสาทในขณะที่ยับยั้งการตายของเซลล์ประสาท โดยเฉพาะอย่างยิ่ง กลไกต้านอะพอพโทติกที่ใช้ NB-EPA ขึ้นอยู่กับการปราบปรามของการส่งสัญญาณ PUMA แมคคาไมด์หรือที่รู้จักในชื่อสารประกอบมาร์คเกอร์ที่เป็นคุณลักษณะเฉพาะของมาคา ประกอบด้วยเบนซิลลามีนและมอยอิตีของกรดไขมันสายยาวที่มีระดับความอิ่มตัวที่ไม่เท่ากัน [22]
มีรายงานมาคาไมด์จำนวน 23 ชนิดในสารสกัดมาคา โดย N-benzylhexadecanamide เป็นสารประกอบที่มีมากที่สุดในมาคาจากเปรู ในขณะที่ N-benzyl-9Z,12Z-octadecadienamide เป็นสารประกอบที่ร่ำรวยที่สุดในมาค่าของมณฑลยูนนาน [23]. ในการศึกษานี้ เราระบุมาคาไมด์ NB-EPA นวนิยายในมาค่าจากมณฑลยูนนาน มาคาไมด์ NB-EPA ประกอบด้วยเบนซิลลามีนและกรดไอโคซาเพนทาอีโนอิก (EPA; 20:5, n-3) ซึ่งเป็นส่วนประกอบหลักของกรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนชนิดโอเมก้า-3 (n-3 PUFA ). n-3 PUFAs และสารเมตาโบไลต์ของพวกมันได้รับรายงานว่ามีอยู่ในระบบประสาทส่วนกลางและมีบทบาทสำคัญในการทำงานของสมองและโรคต่างๆ เช่น สารสื่อประสาท การสร้างระบบประสาท และการอักเสบของเส้นประสาท [24] จากข้อสังเกต การศึกษาบางชิ้นได้แนะนำว่า EPA มากกว่า n-3 PUFAs และ docosahexaenoic acid (DHA; 22:6, n-3) เกี่ยวข้องกับความเสี่ยงที่ลดลงของโรคหลอดเลือดสมองตีบส่วนใหญ่ [25 ]. ตามข้อตกลงกับการค้นพบนี้ เราแสดงให้เห็นว่า NB-EPA ของมาคาไมด์ชนิดใหม่นี้ไม่เพียงบรรเทาอาการบาดเจ็บที่สมองเท่านั้น แต่ยังช่วยปรับปรุงความบกพร่องของระบบประสาทหลังจากได้รับบาดเจ็บที่ HI เซลล์ประสาทเป็นหน่วยโครงสร้างและหน้าที่ขั้นพื้นฐานที่สุดของระบบประสาท ซึ่งมีหน้าที่ในการเชื่อมต่อและรวมข้อมูลอินพุตและส่งข้อมูลออกไป เมื่อสมองได้รับบาดเจ็บที่เกิดจากการขาดออกซิเจนและขาดเลือด เซลล์ประสาทจำนวนมากได้รับความเสียหาย ซึ่งจะทำให้ระบบประสาททำงานผิดปกติ p53 ซึ่งเป็นตัวควบคุมหลักของการตอบสนองความเครียดของเซลล์ สามารถเปิดใช้งานในพื้นที่ขาดเลือดหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง [26] มันสามารถส่งเสริมการตายของเซลล์ประสาท และการขาด p53 หรือการใช้สารยับยั้ง p53 สามารถลดความเสียหายของสมองอย่างมีนัยสำคัญในแบบจำลองโรคหลอดเลือดสมองต่างๆ [27] p53-อะพอพโทซิสที่อาศัยสื่อกลางเกิดขึ้นผ่านกลไกระดับโมเลกุลที่หลากหลาย ซึ่ง PUMA, ap53- และโมดูเลเตอร์ที่เพิ่มขึ้นของอะพอพโทซิสนั้นเป็นยีน proapoptotic ที่มีศักยภาพที่ปลายน้ำ p53 [28] การศึกษาพบว่าวิถี p53–PUMA เกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์ประสาท striatum ที่เกิดจากตัวยับยั้งไมโตคอนเดรีย [29]
ไตบาดเจ็บและโรคcistanche propiedades
การยับยั้งการกระตุ้นลูปป้อนกลับ p53–PUMA โดยตัวยับยั้ง p53 และ PUMA siRNA สามารถลดการตายของเซลล์ประสาทและการอักเสบที่เกิดจากการขาดเลือดกลับคืนสู่สภาพเดิม [30] ในที่นี้ การค้นพบของเราสอดคล้องกับการศึกษาเหล่านี้ซึ่งแสดงให้เห็นว่า PUMA เป็นตัวดำเนินการที่แข็งแกร่งของการเกิดอะพอพโทซิสที่เป็นสื่อกลาง p53-ในเซลล์ประสาทหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง HI การรักษาด้วย NB-EPA ยับยั้งการยกระดับ PUMA ในเซลล์ประสาทที่เกิดจาก HI นอกจากนี้ ผลการป้องกันของ NB-EPA ต่อการอยู่รอดของเซลล์ประสาทส่วนใหญ่ขึ้นอยู่กับการปราบปรามของสัญญาณ PUMA หลักฐานที่เพิ่มขึ้นแสดงให้เห็นว่า n-3 PUFAs มีส่วนช่วยในการอยู่รอดของเซลล์ประสาทและการสร้างเซลล์ประสาทหลังจากความเสียหายของสมองขาดเลือด [31,32] พวกเขาสามารถปรับปรุงการพยากรณ์โรคของโรคหลอดเลือดสมองและจำกัดความเสียหายของเซลล์ประสาทเพิ่มเติม [33] แม้ว่าโรคหลอดเลือดสมองตีบจะกระตุ้นการเพิ่มจำนวนและการสร้างความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิดประสาทในโซน subventricular (SVZ) เซลล์ประสาทที่สร้างขึ้นใหม่ส่วนใหญ่เสียชีวิตไม่นานหลังจากโรคหลอดเลือดสมอง [34] n-3 PUFAs ได้รับรายงานไม่เพียงแต่เพิ่มการอยู่รอดของเซลล์ประสาทที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะเท่านั้น แต่ยังช่วยอำนวยความสะดวกในการเจริญเติบโตของพวกมันในเนื้อเยื่อของเยื่อหุ้มสมองภายหลังความเสียหายจากโรคหลอดเลือดสมอง [35] เมื่อเร็ว ๆ นี้ การศึกษาหลายชิ้นยังชี้ให้เห็นถึงผลประโยชน์ของมาคาไมด์ในการแก้ไขความเสียหายของเส้นประสาท ซึ่งเกี่ยวข้องกับการปรับปรุงการทำงานของระบบทางเดินหายใจไมโตคอนเดรีย [36,37]
เส้นทางการส่งสัญญาณ AKT มีบทบาทสำคัญในกลไกต่อต้านการตายของเซลล์ เมื่อสมองได้รับบาดเจ็บ เส้นทาง AKT จะเปิดใช้งาน และร่างกายจะเริ่มการป้องกันตนเองและการซ่อมแซมการบาดเจ็บ นำไปสู่การแสดงออกของ p-AKT [38–41] ที่เพิ่มขึ้น สอดคล้องกับการค้นพบนี้ เราสังเกตว่าการรักษาด้วย NB-EPA ปกป้องการอยู่รอดของเซลล์ประสาทจากการบาดเจ็บของสมองที่เกิดจาก HI ผ่านการกระตุ้นสัญญาณ AKT ในการเอาชีวิตรอดในขณะที่ยับยั้งวิถีโปรอะพอพโทซิส
เป็นเวลานานที่นักประสาทชีววิทยาเชื่อว่าเซลล์ต้นกำเนิดประสาท (NSCs) หายไปก่อนหรือหลังคลอดไม่นาน และการสร้างเซลล์ประสาทก็หยุดลงในเวลานั้น ความคิดที่ว่าไม่มีเซลล์ประสาทใหม่ในสมองที่โตเต็มที่เริ่มเปลี่ยนแปลงไปในปี 1960 จากการพัฒนางานวิจัย พบว่า NSC สำหรับผู้ใหญ่ส่วนใหญ่มีอยู่ใน SVZ และ subgranular zone (SGZ) ของ hippocampal dentate gyrus [42–44] นอกจากนี้ ภายหลังได้รับการยืนยันว่า NSCs ยังมีอยู่ในพื้นที่กว้างขวางอื่น ๆ ของระบบประสาทส่วนกลาง (CNS) [45] การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้แสดงให้เห็นว่า NSCs ภายนอกในเยื่อหุ้มสมองสามารถกระตุ้นได้หลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมองเพื่อช่วยในการซ่อมแซมอาการบาดเจ็บที่สมองขาดเลือดขาดเลือดผ่านการต่ออายุตัวเอง การเพิ่มจำนวน และการสร้างเซลล์ประสาท แอสโตรไซต์ และโอลิโกเดนโดรไซต์ใหม่ [46,47] . DCX มีส่วนช่วยในการซ่อมแซมเซลล์ประสาทโดยรักษาเสถียรภาพของ microtubules ในเซลล์ประสาทและเป็นเครื่องหมายสำหรับการติดตามการย้ายเซลล์ประสาทใหม่ไปยังบริเวณที่ได้รับบาดเจ็บของสมอง [48] การบาดเจ็บที่สมองขาดออกซิเจนและขาดเลือดและการบาดเจ็บที่สมองอย่างรุนแรงช่วยเพิ่มการผลิตเซลล์ประสาท striatum ใหม่ที่แสดงออกถึง DCX [49] Ki-67 เป็นแอนติเจนของนิวเคลียสที่เกี่ยวข้องกับเซลล์ที่เพิ่มจำนวน ซึ่งครอบคลุมทุกรอบการงอกขยายนอกเหนือจากเฟส G0 ในการศึกษานี้ เห็นได้ชัดว่าการบริหาร NB-EPA ส่งเสริมการสร้างเซลล์ประสาท ซึ่งสัมพันธ์กับการเพิ่มการควบคุม Ki-67 บวก DCX บวกเซลล์หลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง HI อย่างไรก็ตาม การเพิ่มจำนวนของ Ki-67 บวก DCX plus เซลล์นั้นสัมพันธ์กับการเพิ่มจำนวนและการแยกความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิดจากประสาทที่เหนี่ยวนำโดย NB-EPA หรือไม่ ยังคงต้องศึกษาเพิ่มเติม
อ้างอิง
1 ธอร์นตัน, ค.; Rousset, C.; Kichev, A.; มิยาคุนิ, วาย.; วอนเทลล์, อาร์.; บาบูรามานี AA; Fleiss, B.; Gressens, P.; Hagberg, H. กลไกระดับโมเลกุลของการบาดเจ็บที่สมองของทารกแรกเกิด นิวโรล. ความละเอียด อินเตอร์ 2012, 2012, 506320. [ข้ามอ้างอิง]
2. หม่า คิว; Zhang, L. การเขียนโปรแกรม Epigenetic ของ hypoxic-ischemic encephalopathy เพื่อตอบสนองต่อภาวะขาดออกซิเจนของทารกในครรภ์ โปรแกรม นิวโรไบโอล. 2015, 124, 28–48. [CrossRef] [PubMed]
3. Conforti M, HD; เดนิซ, BF; เดอ Almeida, W. ; มิเกล PM; โบรนาห์, แอล.; วิเอร่า เอ็มซี; เดอ Oliveira, BC; Pereira, LO Neonatal hypoxia-ischemia ทำให้เกิดความผิดปกติของมอเตอร์เล็กน้อย ฟื้นตัวจากการฝึกกายกรรม โดยไม่ส่งผลกระทบต่อโครงสร้างทางสัณฐานวิทยาที่เกี่ยวข้องกับการควบคุมมอเตอร์ในหนู ความละเอียดของสมอง 2019, 1707, 27–44. [ข้ามอ้างอิง]
4. Yıldız EP; Ekici, บี.; Tatlı, B. ทารกแรกเกิด hypoxic-ischemic encephalopathy: การปรับปรุงเกี่ยวกับการเกิดโรคและการรักษาโรค ผู้เชี่ยวชาญ. รายได้ Neurother 2017, 17, 449–459. [ข้ามอ้างอิง]
5. Azzopardi, DV; Strohm, B.; เอ็ดเวิร์ดส์ โฆษณา; Dyet, L.; ฮัลลิเดย์ เอชแอล; Juszczak, E.; Kapellou, O.; เลวีน, ม.; มาร์โลว์ N.; พอร์เตอร์ อี.; และคณะ ภาวะอุณหภูมิร่างกายต่ำกว่าปกติในการรักษาโรคสมองจากภาวะขาดอากาศหายใจในปริกำเนิด น. อังกฤษ. เจ เมด 2552, 361, 1349–1358. [CrossRef] [PubMed]
6. Tagin, แมสซาชูเซตส์; วูลคอตต์, ซีจี; วินเซอร์ เอ็มเจ; ไวท์, อาร์เค; Stinson, DA Hypothermia for neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy: การทบทวนอย่างเป็นระบบและการวิเคราะห์อภิมาน โค้ง. กุมาร. วัยรุ่น เมดิ. 2555, 166, 558–566. [CrossRef] [PubMed]
7. โทรีเซ่น, ม.; Sabir, H. Epilepsy: อาการชักในทารกแรกเกิดยังขาดการรักษาที่ปลอดภัยและมีประสิทธิภาพ แนท เรฟ นูรอล. 2015, 11, 311–312. [CrossRef] [PubMed]
8. แนร์ เจ.; Kumar, VHS การบำบัดในปัจจุบันและที่เกิดขึ้นใหม่ในการจัดการโรคสมองจากสมองขาดเลือดที่ขาดออกซิเจนในทารกแรกเกิด เด็กปี 2018, 5, 99. [CrossRef] [PubMed]
9. กอนซาเลส GF; กอนซาเลส, C.; Gonzales-Castañeda, C. Lepidium meyenii (Maca): พืชจากที่ราบสูงของเปรู - จากประเพณีสู่วิทยาศาสตร์ ฟอร์ช. เสริม. 2552, 16, 373–380. [ข้ามอ้างอิง]
10. เฉิน L.; หลี่ เจ.; Fan, L. องค์ประกอบทางโภชนาการของ maca ใน hypocotyls (Lepidium meyenii Walp.) ที่ปลูกในภูมิภาคต่าง ๆ ของจีน J. คุณภาพอาหาร 2017, 2017, 3749627. [CrossRef]
11. บาลิค เอ็มเจ; Lee, R. Maca: จากพืชอาหารแบบดั้งเดิมไปจนถึงพลังงานและความใคร่ ทางเลือก เธอ. แพทยสภา 2002, 8, 96.
12. เฉิน SX; หลี่ เคเค; ผับ, ดี.; เจียง SP; เฉิน, บี.; เฉิน LR; ยาง Z.; หม่า ค.; Gong, XJ Optimization of Ultrasound-Assisted Extraction, การวิเคราะห์ HPLC และ UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS ของ Macamides หลักและ Macaenes จาก Maca (พันธุ์ของ Lepidium meyenii Walp) โมเลกุล 2017, 22, 2196. [CrossRef]
13. หยาง คิว; จิน, ว.; Lv, X.; ได, พี.; อ่าว ย.; วู, ม.; เติ้ง, ว.; Yu, L. ผลของ macamides ต่อความทนทานและคุณสมบัติต่อต้านความเหนื่อยล้าในหนูว่ายน้ำเป็นเวลานาน เภสัช. ไบโอล. 2016, 54, 827–834. [CrossRef] [PubMed]
14. วังต.; ซัน, CH; จง, HB; กง, วาย.; กุย ZK; เซีย, เจ.; วัง วายพี; เหลียง, ค.; เฉา HH; เฉิน XR; และคณะ N-(3- methoxybenzyl)-(9Z,12Z,15Z)-octadecatrienamide ส่งเสริมการสร้างกระดูกผ่านทางวิถีการส่งสัญญาณ Wnt/ -catenin ที่เป็นที่ยอมรับ ไฟโตเธอร์. ความละเอียด 2019, 33, 1074–1083. [ข้ามอ้างอิง]
15. อุจิยามะ, เอฟ.; จิเคียว, ต.; ทาเคดะ, อาร์.; Ogata, M. Lepidium meyenii (Maca) ช่วยเพิ่มระดับซีรั่มของฮอร์โมน luteinizing ในหนูเพศเมีย เจ. เอธโนฟาร์มาคอล. 2014, 151, 897–902. [CrossRef] [PubMed]
16. อลาสมารี, ม.; Böhlke, ม.; เคลลี่, C.; เฮอร์, ต.; Pino-Figueroa, A. การยับยั้ง Fatty Acid Amide Hydrolase (FAAH) โดย Macamides มล. นิวโรไบโอล. 2019, 56, 1770–1781. [ข้ามอ้างอิง]
17. หวง วายเจ; เป็ง XR; Qiu, MH ความคืบหน้าเกี่ยวกับองค์ประกอบทางเคมีที่ได้รับจาก Glucosinolates ใน Maca (Lepidium meyenii) แนท. แยง. โอกาสทางชีวภาพ 2018, 8, 405–412. [CrossRef] [PubMed]
18. Piens, M.; มุลเลอร์, ม.; บอดสัน, ม.; Baudouin, G.; Plumier, JC บริเวณโปรโมเตอร์อัพสตรีมสั้น ๆ เป็นสื่อกลางในการควบคุมการถอดรหัสของยีน doublecortin ของเมาส์ในเซลล์ประสาทที่แยกความแตกต่าง บีเอ็มซี. ประสาทวิทยา 2010, 11, 64. [ข้ามอ้างอิง]
19. Rahmanzadeh, R.; Hüttmann, G.; เกอร์เดส, เจ.; Scholzen, T. Chromophore-assisted light inactivation of PKI-67 นำไปสู่การยับยั้งการสังเคราะห์ ribosomal RNA การเติบโตของเซลล์ 2550, 40, 422–430. [ข้ามอ้างอิง]
20. หง, LZ; จ้าว XY; Zhang, HL p53-สื่อกลางการตายของเซลล์ประสาทในการบาดเจ็บที่สมองขาดเลือด Neurosci บูล 2010, 26, 232–240. [ข้ามอ้างอิง]
21. Wachtel, EV; Verma, S.; Mally, PV Update เกี่ยวกับการจัดการทารกแรกเกิดที่มีโรคไข้สมองอักเสบในทารกแรกเกิด Curr ปัญหา Pediatr. วัยรุ่น การดูแลสุขภาพ 2019, 49, 100636. [CrossRef] [PubMed]
22. วังเอส.; Zhu, F. องค์ประกอบทางเคมีและผลกระทบต่อสุขภาพของ maca (Lepidium meyenii) เคมีอาหาร. 2019, 288, 422–443. [ข้ามอ้างอิง]
23. คาร์วัลโญ่ เอฟซี; Ribeiro, ความหลากหลายของโครงสร้าง PR, ลักษณะการสังเคราะห์ทางชีวภาพ และการรวบรวมข้อมูล LC-HRMS สำหรับการระบุสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพของ Lepidium meyenii ความละเอียดของอาหาร อินเตอร์ 2019, 125, 108615. [ข้ามอ้างอิง]
24. Bazinet, RP; Layé, S. กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนและสารในการทำงานของสมองและโรค แนท. รายได้ Neurosci 2014, 15, 771–785. [CrossRef] [PubMed]
25. Venø, SK; บอร์ก ซีเอส; Jakobsen, มิวเซียม; Lundbye-Christensen, S.; แมคเลนแนน PL; บาค, FW; Overvad, K.; Schmidt, EB Marine n-3 กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนและความเสี่ยงของโรคหลอดเลือดสมองตีบ โรคหลอดเลือดสมอง 2019, 50, 274–282. [ข้ามอ้างอิง]
26. โยเนคุระ I.; ทาคาอิ, K.; อาซาอิ, ก.; คาวาฮาระ, น.; Kirino, T. p53 กระตุ้นการตายของเซลล์ประสาทของฮิปโปแคมปัสที่เกิดจากการขาดเลือดทั่วโลก เจ เซเรบ. ไหลเวียนของเลือด. เมตาบ 2549, 26, 1332–1340. [CrossRef] [PubMed]
27. Xie, YL; จาง, บี.; Jing, L. MiR-125b บล็อก Bax/Cytochrome C/Caspase-3 เส้นทางการส่งสัญญาณ apoptotic ในแบบจำลองหนูของการบาดเจ็บที่สมองขาดเลือด-reperfusion โดยการกำหนดเป้าหมาย นิวโรล. ความละเอียด 2018, 40, 828–837. [CrossRef] [PubMed] 28. Chen, H.; เทียน, ม.; จิน, แอล.; เจีย H.; Jin, Y. PUMA มีส่วนเกี่ยวข้องกับการตายของเซลล์ apoptosis ที่เกิดจากการขาดเลือด / reperfusion ของ astrocytes ในสมองของเมาส์ ประสาทวิทยา 2015, 284, 824–832. [CrossRef] [PubMed]
29. จาง XD; วัง Y.; วัง Y.; จาง X.; ฮัน, ร.; วู เจซี; เหลียง ZQ; กู, ZL; ฮัน, เอฟ.; ฟุคุนางะ, K.; และคณะ p53 ไกล่เกลี่ยการกระตุ้น autophagy ที่กระตุ้นความผิดปกติของไมโตคอนเดรียและการตายของเซลล์ในหนู striatum Autophagy 2009, 5, 339–350. [CrossRef] [PubMed]
30. หลี่ XQ; Yu, Q.; เฉิน FS; ตาล WF; จาง ZL; Ma, H. Inhibiting aberrant p53-การเปิดใช้งานลูปป้อนกลับของ PUMA ช่วยลดทอน neuroapoptosis ที่เกิดจาก ischemia reperfusion และ neuroinflammation ในหนูโดย downregulating caspase 3 และ NF-κB cytokine pathway เจ. นิวโรอินเฟลลม์. 2018, 15, 250. [CrossRef] [PubMed]
31. ชิ Z.; เร็น, เอช.; หลัว ซี.; เหยา X.; หลี่, พี.; เขาค.; คัง เจเอ็กซ์; วาน เจบี; หยวน TF; Su, H. Enriched Endogenous Omega-3 กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนปกป้องเซลล์ประสาทคอร์ติคอลจากการบาดเจ็บจากการขาดเลือดจากการทดลอง มล. นิวโรไบโอล. 2016, 53, 6482–6488. [CrossRef] [PubMed]
32. Belayev, L.; หง, SH; Menghani, H.; มาร์เซล เอสเจ; Obenaus, A.; ไฟรทัส อาร์เอส; Koutorova, L.; Balaszczuk, V.; มิ.ย. บี.; Oria, RB; และคณะ Docosanoids ส่งเสริมการสร้างเซลล์ประสาทและการสร้างเส้นเลือดใหม่ ความสมบูรณ์ของสิ่งกีดขวางในเลือดและสมอง การปกป้องเงามัว และการฟื้นตัวของพฤติกรรมทางระบบประสาทหลังการทดลองโรคหลอดเลือดสมองตีบ มล. นิวโรไบโอล. 2018, 55, 7090–7106. [ข้ามอ้างอิง]
33. Zendedel, A.; ฮาบิบ, พี.; แดง เจ.; แลมเมอร์ดิง แอล.; ฮอฟฟ์มันน์, เอส.; เบเยอร์, C.; Slowik, A. Omega-3 กรดไขมันไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนช่วยบรรเทาอาการอักเสบของเส้นประสาทและบรรเทาความเสียหายของโรคหลอดเลือดสมองตีบผ่านปฏิสัมพันธ์กับแอสโตรไซต์และไมโครเกลีย เจ. นิวโรอิมมูนอล. 2558, 278, 200–211. [ข้ามอ้างอิง]
34. โอฮาบ เจเจ; เฟลมมิ่ง, เอส.; Blesch, A.; Carmichael, ST A neurovascular niche สำหรับ neurogenesis หลังจากโรคหลอดเลือดสมอง เจ. ประสาทวิทยา. 2549, 26, 13007–13016. [CrossRef] [PubMed]
35. จาง W.; วัง H.; จางเอช.; รั่ว RK; ชิ, วาย.; หู X .; เกา Y.; Chen, J. ผลิตภัณฑ์เสริมอาหารที่มีกรดไขมันโอเมก้า-3ไม่อิ่มตัวเชิงซ้อนช่วยส่งเสริมการเปลี่ยนแปลงของการฟื้นฟูระบบประสาทและหลอดเลือดอย่างแข็งแกร่งและปรับปรุงการทำงานของระบบประสาทหลังโรคหลอดเลือดสมอง ประสบการณ์ นิวโรล. 2558, 272, 170–180. [ข้ามอ้างอิง]
36. กุกนานี แคนซัส; วู N.; รอนดอน-ออร์ติซ, AN; Böhlke, ม.; เฮอร์ ทีเจ; Pino-Figueroa, AJ Neuroprotective activity ของ macamides ต่อการหยุดชะงักของไมโตคอนเดรียที่เกิดจากแมงกานีสในเซลล์ MG glioblastoma ของ U-87 ท็อกซิคอล แอปพลิเคชัน ฟา. 2018, 340, 67–76. [ข้ามอ้างอิง]
37. โจว วาย.; วัง H.; Guo, F.; ศรี N.; Brantner, A.; หยาง เจ.; ฮันแอล.; เหว่ย X.; จ้าว H.; Bian, B. Integrated Proteomics และ Lipidomics Investigation ของกลไกที่อิงกับผลทางประสาทของ N-benzylhexadecanamide โมเลกุล 2018, 23, 2929. [CrossRef] [PubMed]
38. หลิว วาย.; หลิว วาย.; จิน, เอช.; ก้อง พี.; จาง, วาย.; ตง, ค.; ชิ, X.; หลิว X .; ตอง Z.; ชิแอล.; และคณะ อาการบาดเจ็บที่สมองที่เกิดจากความเครียดจากความเย็นจะควบคุมช่อง TRPV1 และเส้นทางการส่งสัญญาณ PI3K/AKT ความละเอียดของสมอง 2017, 1670, 201–207. [ข้ามอ้างอิง]
39. Xu, W.; หลี่, ต.; เกาแอล.; เลนาแฮน, C.; เจิ้ง, เจ.; ยาน เจ.; Shao, A.; Zhang, J. โซเดียมเบนโซเอตลดอาการบาดเจ็บที่สมองทุติยภูมิโดยการยับยั้งการตายของเซลล์ประสาทและลดความเครียดที่เกิดจากออกซิเดชันของไมโตคอนเดรียในรูปแบบหนูของการตกเลือดในสมอง: การมีส่วนร่วมที่เป็นไปได้ของเส้นทาง DJ-1/Akt/IKK/NFκB ด้านหน้า. มล. ประสาทวิทยา 2019, 12, 105. [ข้ามอ้างอิง]
40. หลี่ เจ.; ใดๆ.; วัง JN; หยิน XP; โจว, เอช.; Wang, YS Curcumin กำหนดเป้าหมายปัจจัยการเจริญเติบโตของบุผนังหลอดเลือดโดยการเปิดใช้งานเส้นทางการส่งสัญญาณ PI3K/Akt และปรับปรุงการบาดเจ็บของสมองขาดออกซิเจนในหนูแรกเกิด เกาหลี. เจ. ฟิสิออล. ฟา. 2020, 24, 423–431. [ข้ามอ้างอิง]
41. หลี่ ต.; Xu, W.; เกาแอล.; กวน, จี.; จาง Z.; เขาพี; Xu, H .; แฟน, แอล.; ยัน, F.; Chen, G. Mesencephalic astrocyte-derived neurotrophic factor ช่วยป้องกันระบบประสาทในการบาดเจ็บที่สมองในระยะเริ่มต้นซึ่งเกิดจากการตกเลือดใน subarachnoid ผ่านการกระตุ้นวิถีการอยู่รอดที่ขึ้นกับ Akt และปกป้องความสมบูรณ์ของอุปสรรคในเลือดและสมอง FASEB J. 2019, 33, 1727–1741. [ข้ามอ้างอิง]
42. มอร์สเฮด CM; เรย์โนลด์ส บริติชแอร์เวย์; เครก, CG; แมคเบอร์นีย์ เมกะวัตต์; สเตนส์, วอชิงตัน; Morassutti, D.; ไวส์, เอส.; van der Kooy, D. เซลล์ต้นกำเนิดจากประสาทในสมองส่วนหน้าของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่เป็นผู้ใหญ่: ประชากรย่อยที่ค่อนข้างสงบของเซลล์ subependymal เซลล์ประสาท 1994, 13, 1071–1082 [ข้ามอ้างอิง]
43. เชียสสัน บีเจ; ทรอเป, วี.; มอร์สเฮด CM; van der Kooy, D. เซลล์ ependymal และ subependymal ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมที่โตเต็มวัยแสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการแพร่กระจาย แต่มีเพียงเซลล์ subependymal เท่านั้นที่มีลักษณะเซลล์ต้นกำเนิดจากประสาท เจ. ประสาทวิทยา. 2542, 19, 4462–4471. [CrossRef] 44. Alvarez-Buyella, A.; Lim, DA ในระยะยาว: รักษาช่องเชื้อโรคในสมองของผู้ใหญ่ เซลล์ประสาท 2004, 41, 683–686 [ข้ามอ้างอิง]
45. เวสโควี อัล; Snyder, EY การสร้างและคุณสมบัติของโคลนเซลล์ต้นกำเนิดประสาท: ความเป็นพลาสติก ในหลอดทดลอง และ ในร่างกาย พัทลุง. 2542, 9, 569–598. [CrossRef] [PubMed] 46. Buffo, A.; ไรท์, ฉัน.; ตรีปาธี ป.; ไลเปอร์, A.; โคลัค, ดี.; ฮอร์น เอพี; โมริ, ต.; Götz, M. Origin และลูกหลานของ reactive gliosis: แหล่งของเซลล์หลายเซลล์ในสมองที่ได้รับบาดเจ็บ Proc. แนท อคาเด วิทย์. สหรัฐอเมริกา 2008, 105, 3581–3586 [ข้ามอ้างอิง]
47. อาเหม็ด AI; ชทายา AB; ซาเบน, เอ็มเจ; โอเวนส์ EV; คีกเกอร์, ค.; สีเทา WP Endogenous GFAP-positive เซลล์ต้นกำเนิด/เซลล์ต้นกำเนิดประสาทในคอร์เทกซ์ของเมาส์หลังคลอดถูกกระตุ้นหลังจากได้รับบาดเจ็บที่สมอง เจ. Neurotrauma 2012, 29, 828–842. [CrossRef] [PubMed] 48. Horesh, D.; ซาพีร์, ต.; ฟรานซิสเอฟ.; หมาป่า, SG; แคสปี้, ม.; Elbaum, ม.; เชลลี่ เจ.; Reiner, O. Doublecortin, โคลงของ microtubules ฮึ่ม มล. ยีนต์. 2542, 8, 1599–1610. [CrossRef] [PubMed]
49. อ๋อง เจ.; เครื่องบิน เจเอ็ม; ผู้ปกครอง JM; Silverstein, FS การบาดเจ็บจากภาวะขาดเลือดขาดเลือดช่วยกระตุ้นการเพิ่มจำนวนโซน subventricular และการสร้างเซลล์ประสาทในหนูแรกเกิด กุมาร. ความละเอียด 2548, 58, 600–606. [CrossRef] [PubMed]
50. Shao, Y.; หลี่, วาย.; Liu, T. ศึกษาการเพิ่มประสิทธิภาพของกระบวนการสกัดของ macamides หลักจาก Maca (Lepidium meyenii Walp.) อาหาร. ความละเอียด กำลังพัฒนา 2017, 38, 35–39.
51. Skorupskaite, V.; Makarevicene, V.; Gumbyte, M. โอกาสในการสกัดน้ำมันพร้อมกันและทรานส์เอสเทอริฟิเคชันระหว่างการผลิตเชื้อเพลิงไบโอดีเซลจากสาหร่ายขนาดเล็ก: บทวิจารณ์ เชื้อเพลิง. กระบวนการ. เทคโนโลยี 2016, 150, 78–87. [ข้ามอ้างอิง]
52. ข้าว เจ ที่ 3; วานนุชชี, อาร์ซี; Brierley, JB อิทธิพลของการยังไม่บรรลุนิติภาวะต่อความเสียหายของสมองขาดเลือดขาดเลือดในหนู แอน. นิวโรล. 2524, 9, 131–141. [CrossRef] [PubMed]
53. เสี่ยวเอเจ; เฉิน, ว.; ซู, บี.; หลิวอาร์.; Turlova, อี.; Barszczyk, A.; ซัน CL; หลิวแอล.; Deurloo, ม.; วัง GL; และคณะ สารประกอบไซโลเคทัล B ในทะเลช่วยลดอาการบาดเจ็บที่สมองของทารกแรกเกิดขาดออกซิเจนและขาดเลือด มี.ค. ยาเสพติด 2014, 13, 29–47. [CrossRef] [PubMed]
54. เจียว ม.; หลี่ X .; เฉิน L.; วัง X .; หยวน, บี.; หลิว, ต.; ดง, คิว; เหมย, เอช.; Yin, H. ผลทางประสาทของ IL ที่ได้รับ astrocyte -33 ในการบาดเจ็บที่สมองขาดเลือดขาดเลือดในทารกแรกเกิด เจ. นิวโรอินเฟลลม์. 2020, 17, 251. [CrossRef] [PubMed]
