องค์ประกอบ Monoterpene จาก Cistanche Tubulosa— โครงสร้างทางเคมีของ Kankanosides A—E และ Kankanol—

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

Haihui XIE, Toshio MORIKAWA, Hisashi MATSUDA, Seikou NAKAMURA, Osamu MURAOKA และมาซายูกิ โยชิคาวะ

เชิงนามธรรม

อิริดอยด์ไกลโคไซด์ใหม่สี่ชนิด แคนคาโนไซด์ A (1), B (2), C (3) และ D (4), คลอรีนอิริดอยด์, แคนแคนอล (5) และโมโนเทอร์พีนอะไซคลิก แคนคาโนไซด์ E (6) ถูกแยกออก จากสารสกัดเมทานอลของลำต้นแห้งของ Cistanche tubulosa (SCRENK) R. WIGHT (Orobanchaceae) ร่วมกับ 16 สารประกอบที่รู้จักกัน โครงสร้างของสารประกอบใหม่เหล่านี้ (1-6) ถูกกำหนดโดยอาศัยหลักฐานทางเคมีและฟิสิกส์เคมี

คำสำคัญ:Cistanche tubulosa; แคนคาโนไซด์; แคนแคนอล; ไอริดอยด์; โมโนเทอร์พีน; วงศ์กล้วยไม้

Cistanche tubulosa(SCRENK) ร. ไวท์ (Orobanchaceae)เป็นพืชกาฝากยืนต้นที่เติบโตบนรากของสายพันธุ์ Salvadora หรือ Calotropis และจำหน่ายในแอฟริกาเหนือ อารเบีย และประเทศในเอเชีย 1) ลำต้นของพืชชนิดนี้ (Kanka-nikujuyou ในภาษาญี่ปุ่น) มีการใช้ตามประเพณีในการรักษาความอ่อนแอ เป็นหมัน โรคปวดเอว และร่างกายอ่อนแรง2) ก่อนหน้านี้ Iridoids, monoterpenoids, phenylethanoids และ lignans หลายชนิดถูกแยกได้จาก C. tubulosa ของจีนและปากีสถาน 1,3–7) ในการศึกษาต่อเนื่องของเราเกี่ยวกับองค์ประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากยาธรรมชาติของจีน 8–18) อิริดอยด์ไกลโคไซด์ใหม่สี่ชนิด แคนคาโนไซด์ A (1), B (2), C (3) และ D (4 ), คลอรีนอิริดอยด์, แคนแคนอล (5) และโมโนเทอร์พีนไกลโคไซด์อะไซคลิก, แคนคาโนไซด์ E (6) แยกได้จากสารสกัดเมทานอลของยาสมุนไพรนี้ร่วมกับสารประกอบที่รู้จัก 16 ชนิด รวมทั้งโมโนเทอร์พีน 12 ชนิด (7–18) บทความนี้กล่าวถึงการแยกและการอธิบายโครงสร้างขององค์ประกอบ monoterpene ใหม่ (1-6)

Cistanche tubulosa

สารสกัดเมทานอลจากลำต้นแห้งของCistanche tubulosa(26.8 เปอร์เซ็นต์จากยาสมุนไพรนี้) อยู่ภายใต้เฟสปกติและซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟีแบบย้อนกลับเฟสและ HPLC ซ้ำเพื่อให้แคนคาโนไซด์ A (1, 00{{10 }}54 เปอร์เซ็นต์ ), B(2, 0.030 เปอร์เซ็นต์ ), C (3, 0.00 27 เปอร์เซ็นต์ ) และ D (4, {0}}.0015 เปอร์เซ็นต์ ), กันกนอล (5, 0.0{ {66}}34 เปอร์เซ็นต์ ) และ kankanoside E (6, 0.027 เปอร์เซ็นต์ ) ร่วมกับ mussaenosidic acid19) (7, 0.020 เปอร์เซ็นต์ ) , geniposidic acid19) (8, 0.030 เปอร์เซ็นต์ ), 8-epiloganic acid7) (9, 0.033 เปอร์เซ็นต์ ), gluroside19) (10, 0.14 เปอร์เซ็นต์ ), antirrhide20) (11, 0.0079 เปอร์เซ็นต์ ), ajugol19) (12, 0.011 เปอร์เซ็นต์ ), bartsioside19) (13, 0.21 เปอร์เซ็นต์ ), 6-deoxycatalpol19) (14, 0.11 เปอร์เซ็นต์ ), argyol21) (15, 0.0030 เปอร์เซ็นต์ ), cistanin22,23) (16, 0.0040 เปอร์เซ็นต์ ), cis tachlorin22) ( 17, 0.0035 เปอร์เซ็นต์ ), (2E,6Z)-8-bD-glucopyranosyloxy-2,6-dimethyl-2,6-octadienoic acid24) (18, 0.0028 เปอร์เซ็นต์ ), ดี แมนนิทอล25) (4.19 p เปอร์เซ็นต์ ), uridine25) (0.0069 เปอร์เซ็นต์ ), (3R)-3-ไฮดรอกซี-2- pyrrolidinone26,27) (0.0020 เปอร์เซ็นต์ ) และ (3R)-3-ไฮดรอกซี-1-เมทิล{ {97}}ไพร์โรลิดิโนน27) (0.0059 เปอร์เซ็นต์ )

โครงสร้างของ Kankanoside A (1) Kankanoside A (1) ได้รับมาในรูปของผงอสัณฐานและแสดงการหมุนของแสงเชิงลบ ([a]D 25 107.4 องศาใน MeOH) สเปกตรัม IR ของ 1 แสดงแถบดูดกลืนที่ 1647 ซม. 1 ซึ่งกำหนดให้กับฟังก์ชันโอเลฟิน นอกเหนือจากแถบการดูดกลืนแสงที่แรงที่ 3410 และ 1076 ซม. 1 ที่บ่งบอกถึงมอยอิตีของไกลโคไซด์ ในการทิ้งระเบิดด้วยอะตอมอย่างรวดเร็วของไอออนบวกและลบ (FAB) -MS ที่ 1 พีคของไอออนควอซิโมเลกุลถูกสังเกตที่ m/z 369 (M Na) และ 345 (MH) และการวิเคราะห์ FAB-MS ที่มีความละเอียดสูงเผยให้เห็นโมเลกุล สูตร 1 เป็น C16H26O8 การไฮโดรไลซิสด้วยกรดของ 1 ด้วยกรดไฮโดรคลอริก 1.0 โมลาร์ (HCl) ที่ถูกปลดปล่อย D-glucose ซึ่งถูกระบุโดยการวิเคราะห์ HPLC โดยใช้ตัวตรวจวัดการหมุนด้วยแสง8,10—12,15—18) 1 H- (CD3OD, ตารางที่ 1) และ สเปกตรัม 13C-NMR (ตารางที่ 2) ของ 1 ซึ่งถูกกำหนดโดยการทดลอง NMR ต่างๆ 28) แสดงสัญญาณที่กำหนดให้กับเมทิลสองตัว [d 1.31 (s, 10-H3), 1.51 (br s, {{47} }H3)], สองเมทิลีน [d 1.49, 2.02 (ทั้ง m, 6a- และ 6b-H), 1.64, 1.67 (ทั้ง m, 7b- และ 7a-H)], สอง methines [d 2.21 (dd, J 2.7) , 9.5 Hz, 9-H), 2.71 (m, 5-H)] และกลุ่มอะซีตัลไม่อิ่มตัว a,b [d 5.33 (d, J 2.7 Hz, 1-H ), 5.95 (br s, 3-H)] ร่วมกับ b-glucopyranosyl moiety [d 4.62 (d, J 7.9 Hz, 1 -H)] ดังแสดงในรูปที่ 1 การทดลอง 1 H–1H correlation spectroscopy (1 H–1 H COSY) ในวันที่ 1 ระบุการมีอยู่ของโครงสร้างบางส่วนที่เขียนด้วยเส้นหนา ในการทดลองความสัมพันธ์แบบหลายพันธะนิวเคลียร์เฮเทอโรนิวเคลียร์ (HMBC) บน 1 ความสัมพันธ์ระยะยาวถูกสังเกตพบระหว่างโปรตอนและคาร์บอนต่อไปนี้ (3-H, 1 -H และ 1-C; 11- H3 และ 3-C; 3-H, 5-H, 6-H2, 9-H, 11-H3 และ 4- C ; 11-H3 และ 5-C; 10-H3 และ 7-C; 1-H, 7-H2, 9-H, 10-H3 และ 8-C; 10-H3 และ 9-C; 7-H2 และ 10-C) ดังแสดงในรูปที่ 1 การไฮโดรไลซิสด้วยเอนไซม์ของ 1 กับ b-glucosidase ให้ aglycon, kankagenin a (1a) ดังแสดงในรูปที่ 3 การเปรียบเทียบสเปกตรัม 13C NMR สำหรับ 1 กับ 1a สำหรับ 1a เผยให้เห็นการเปลี่ยนแปลงของไกลโคซิเลชันรอบตำแหน่ง 1- ใน 1 [1: ดีซี 94.1 (1-C), 134.6 (3-C), 53.3 (9-C); 1a: ดีซี 92.9 (1-C), 135.3 (3-C), 54.7 (9-C)] ดังนั้น ความเชื่อมโยงของ bD-กลูโคราโนซิล มอยอิตีใน 1 ยังถูกชี้แจงให้อยู่ที่ตำแหน่ง 1- ของ 1a ถัดไป โครงสร้างสเตอริโอสัมพัทธ์ของ 1 มีลักษณะเฉพาะโดยการทดลองนิวเคลียร์ Overhauser Enhancement Spectroscopy (NOESY) ซึ่งแสดงความสัมพันธ์ของ NOE ระหว่างคู่โปรตอนต่อไปนี้ (1-H และ 10-H3; 3-H และ 11-H3; 5-H และ 6b-H, 9-H; 6b-H และ 7b-H; 7a-H และ 10-H3; 7b-H และ {{ 190}}H) ดังแสดงในรูปที่ 2 ในที่สุด การกำหนดค่าสัมบูรณ์ของตำแหน่ง 1-ใน 1 ถูกกำหนดโดยการประยุกต์ใช้กฎ 13C NMR glycosylation shift ของ 1,1 -disaccharide,29) ซึ่งพบว่า เพื่อนำไปใช้กับสารประกอบเฮมิอะซีตัล.30,31) โครงสร้างสเตอริโอของตำแหน่ง 1-ใน 1 ได้รับการยืนยันว่าคงอยู่ใน 1a โดยการเปรียบเทียบการวิเคราะห์ 1 H- NMR รวมถึงการทดลอง NOESY ค่าการเปลี่ยนแปลงไกลโคซิเลชัน [Dd 1.2 ppm (1 -C) และ 0.9 ppm (1- C) ใน pyridine-d5] พบว่าเป็นคุณลักษณะของการรวม R, Rhemiacetal ซึ่งสอดคล้องกับโครงสร้างสเตอริโอสัมบูรณ์ของ 1 ดังแสดงในรูปที่ 3 ดังนั้น การกำหนดค่าสัมบูรณ์ที่ตำแหน่ง 1- ของ 1 ถูกกำหนดให้เป็นการกำหนดค่าแบบ S และโครงสร้างสเตอริโอแบบสัมบูรณ์ของ 1 ได้รับการอธิบายตามที่แสดง

โครงสร้างของ Kankanosides B (2) และ C (3) Kankanoside B (2) ยังถูกแยกออกเป็นผงอสัณฐานที่มีการหมุนด้วยแสงเชิงลบ ([a]D 26 118.7 องศาใน MeOH) สเปกตรัมอินฟราเรดของ 2 แสดงแถบการดูดกลืนที่ 3410, 1647 และ 1{{5{{80}}}}85 ซม. 1 ที่สามารถอธิบายหน้าที่ของไฮดรอกซิล โอเลฟิน และอีเทอร์ได้ สูตรโมเลกุล C15H24O10 ของ 2 ถูกกำหนดหาโดยพีคไอออนควอซิโมเลกุลใน FAB-MS ที่เป็นไอออนบวกและโดย FAB-MS ที่มีความละเอียดสูง การไฮโดรไลซิสของกรด 2 ที่มี D-glucose ที่ปลดปล่อย HCl 1.0 โมลาร์ ซึ่งถูกระบุโดยการวิเคราะห์ HPLC โดยใช้ตัวตรวจวัดการหมุนด้วยแสง 8,10—12,15—18) 1 H- (CD3OD, ตารางที่ 1) และ 13C-NMR ( ตารางที่ 2) spectra28) ของ 2 แสดงสัญญาณที่กำหนดให้กับสองเมทิลีน [d 1.40 (DDD, J 5.2, 7.3, 13.5 Hz, 6a-H), 2.52 (DDD, J 7.0, 9.2, 13.5 Hz, 6b-H), 3.85 , 3.99 (ทั้ง d, J 11.9 Hz, 10-H2)], สี่ methines [d 2.21 (dd, J 6.4, 8.6 Hz, 9-H), 2.83 (m, 5- H), 4.02 (dd, J 5.2, 7.0 Hz, 7-H), 5.49 (d, J 6.4 Hz, 1-H)] และคู่ cisolefifin [d 4.95 (dd, J 4.0) , 6.1 Hz, 4-H), 6.22 (dd, J 1.8, 6.1 Hz, 3-H)] ร่วมกับมอยอิตี b-glucopyranosyl [d 4.72 (d, J 7.9 Hz, 1 - ชม)]. สัญญาณโปรตอนและคาร์บอนในข้อมูล 1 H- และ 13C-NMR ของ 2 มีความคล้ายคลึงกับสัญญาณของ 6-deoxycatalpol (14) ยกเว้นสัญญาณที่เกิดจาก 7- และ 8- ตำแหน่ง ดังแสดงในรูปที่ 1 การทดลอง 1 H–1 H COZY บน 2 ระบุการมีอยู่ของโครงสร้างบางส่วนที่เขียนด้วยเส้นหนา และในการทดลอง HMBC พบว่ามีความสัมพันธ์ระยะยาวระหว่างคู่โปรตอนและคาร์บอนต่อไปนี้ ({{ 122}}H, 1 -H และ 1-C; 1-H และ 3-C; 10-H2 และ 7- C; 1-H , 7-H, 9-H, 10-H2 และ 8-C; 7-H, 10-H2 และ 9-C ; 7-H และ 10-C) โครงสร้างสเตอริโอสัมพัทธ์ของ 2 มีลักษณะเฉพาะโดยการทดลอง NOESY ซึ่งแสดงความสัมพันธ์ของ NOE ระหว่างคู่โปรตอนต่อไปนี้ (1-H และ 10-H2; 3- H และ 4-H; 5-H และ 6b-H, 9-H; 6b-H และ 7-H; 7-H และ 9-H) ดังแสดงในรูปที่ 2 ในที่สุด การบำบัดด้วยด่าง 14 ด้วยโพแทสเซียมไฮดรอกไซด์ในน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์ ให้ผล 2 และ 19, 32) เพื่อให้โครงสร้างสเตอริโอของ 2 ชัดเจนขึ้น

แคนคาโนไซด์ C (3) ถูกแยกออกมาเป็นผงอสัณฐานที่มีการหมุนของแสงเป็นลบ ([a]D 26 34.0 องศาใน MeOH) ใน FAB-MS ที่เป็นประจุลบเป็น 3 คู่ของพีคไอออนควอซิโมเลกุลของไอโซโทปถูกสังเกตพบที่ m/z 399 และ 401 (MH) สูตรโมเลกุลของ 3 ถูกกำหนดหาเป็น C15H25ClO10 โดยการวัด FAB-MS ที่มีความละเอียดสูง การไฮโดรไลซิสของกรด 3 ที่มี D-glucose ที่ปลดปล่อย HCl 1.0 โมลาร์ ซึ่งถูกระบุโดยการวิเคราะห์ HPLC โดยใช้ตัวตรวจวัดการหมุนด้วยแสง 8,10—12,15—18) 1 H- (CD3OD, ตารางที่ 1) และ 13C-NMR ( ตารางที่ 2) spectra28) ของ 3 แสดงสัญญาณที่กำหนดให้กับเมทิลีนสามตัว [d 1.70 (br dd, J ca. 3, 13 Hz, 4a-H), 2.70 (br dd, J ca. 6, 13 Hz, 4b-H) , 1.68 (br d, J ca. 13 Hz, 6a H), 2.44 (m, 6b-H), 4.01, 4.04 (ทั้ง d, J 11.3 Hz, 10-H2)], ห้า methines [d 2.47 (dd, J 2.5, 7.9 Hz, 9-H), 2.61 (m, 5- H), 3.94 (br s, 7-H), 5.10 (br d, J ca. 3 Hz, 3-H), 5.48 (d, J 2.5 Hz, 1-H)] และมอยอิตี b-glucopyranosyl [d 4.60 (d, J 8.0 Hz, 1 -H)] สัญญาณโปรตอนและคาร์บอนในสเปกตรัม 1 H- และ 13C-NMR ของ 3 สามารถซ้อนทับกับสัญญาณของ 2 ได้ ยกเว้นสัญญาณเนื่องจากตำแหน่ง 3- และ 4- ตำแหน่งของ bD-glucopyranosyl และฟังก์ชันคลอรีนใน 3 ได้รับการอธิบายจากการทดลอง H–H COZY และ HMBC ดังแสดงในรูปที่ 1 ดังนั้นโครงสร้างระนาบของ 3 จึงถูกสร้างขึ้นตามที่แสดง โครงสร้างสเตอริโอสัมพัทธ์ของ 3 ถูกกำหนดโดยการทดลอง NOESY ซึ่งสังเกตความสัมพันธ์ของ NOE ระหว่างคู่โปรตอนต่อไปนี้ (1-H และ 3-H, 10-H2; 3- H และ 4a-H; 4b-H และ 5- H; 5-H และ 6b-H, 9-H; 6b-H และ 7-H; {{121} }H และ 9-H) ดังแสดงในรูปที่ 2

โครงสร้างของ Kankanoside D (4) และ Kankanol (5) Kankanoside D (4) ถูกแยกออกเป็นผงอสัณฐานที่มีการหมุนด้วยแสงเชิงลบ ([a]D 25 30.6 องศาใน MeOH) สเปกตรัม IR ของ 4 แสดงแถบดูดกลืนที่ 1655 ซม. 1 ซึ่งระบุถึงฟังก์ชันโอเลฟินและแถบดูดกลืนแสงที่แรงที่ 3410 และ 1078 ซม. 1 บ่งบอกถึงโครงสร้างไกลโคซิดิกของมัน ใน FAB-MS ที่เป็นประจุบวกเท่ากับ 4 สังเกตพีคของไอออนควอซิโมเลกุลที่ m/z 341 (M Na) สูตรโมเลกุล C15H26O7 ของ 4 ถูกกำหนดหาโดยการวัด FAB-MS ที่มีความละเอียดสูง การไฮโดรไลซิสของกรดเท่ากับ 4 ที่มี D-glucose ที่ปลดปล่อย HCl 1.0 โมลาร์,8,10—12,15—18) ในขณะที่ (R)-ความหมุนเวียน (4a) 33,34) ได้มาจากการไฮโดรไลซิสด้วยเอนไซม์ 4 กับบี-กลูโคซิเดส 1 H-NMR (ตารางที่ 3, CD3OD) และ 13C-NMR (ตารางที่ 4) สเปกตรัม28) ของ 4 แสดงสัญญาณที่กำหนดให้กับเมทิล [d 1.69 (s, 10-H3)], สามเมทิลีน [d 1.41, 2.06 (ทั้ง m, 4-H2), 1.51, 2.01 (ทั้ง m, 6a- และ 6b-H), 2.23 (br dd, J ca. 8, 15 Hz, 7a-H), 2.37 (br dd , J ca. 8, 15 Hz, 7b-H)], methine [d 2.90 (m, 5-H)] และเมทิลีนสองตัวที่มีฟังก์ชันออกซิเจน {d [3.56 (DDD, J 2.8, 7.4) , 13.2 Hz), 3.97 (DDD, J 4.9, 8.0, 13.2 Hz), 3-H2], 4.04, 4.18 (ทั้ง d, J 12.2 Hz, 1-H2)} ร่วมกับ a b- ส่วนกลูโคราโนซิล [d 4.25 (d, J 7.7 Hz, 1 -H)] ตำแหน่งของส่วน bD-กลูโคราโนซิลใน 4 ถูกทำให้กระจ่างโดยการทดลอง HMBC ให้เป็นตำแหน่ง 3- (รูปที่ 1) จากหลักฐานนี้ โครงสร้างสามมิติแบบสัมบูรณ์ของ 4 ถูกกำหนดให้เป็นตามที่แสดง

ได้รับ Kankanol (5) เป็นผงอสัณฐานที่มีการหมุนด้วยแสงเป็นบวก ([a]D 25 11.1 องศา ) ไอออนไนซ์ทางเคมี (CI)-MS เท่ากับ 5 แสดงพีคไอออนของไอโซโทปคู่หนึ่งที่ m/z 221 และ 223 เนื่องจากไอออนควอซิโมเลคิวลาร์ (MH) การวัดค่า CI-MS ที่มีความละเอียดสูงเท่ากับ 5 เผยให้เห็นสูตรโมเลกุลเป็น C9H13ClO4 1 H-NMR (ตารางที่ 1, CD3OD) และ 13C-NMR (ตารางที่ 2) สเปกตรัม28) ของ 5 แสดงการมีอยู่ของฟังก์ชันต่อไปนี้: เมทิลีนสามตัว [d 1.60 (DDD, J 2.5, 5.5, 13.1) Hz, 4a-H), 1.80 (br dd, J ca. 3, 13 Hz, 4b H), 1.83 (br d, J ca. 12 Hz, 6a-H), 2.57 (m, 6b-H), 3.75 , 3.88 (ทั้ง d, J 9.2 Hz, 10-H2)], ห้า methines [d 2.76 (dd, J 4.3, 8.0 Hz, 9-H), 2.50 (m, 5- H), 3.80 (br s, 7-H), 5.17 (br d, J ca. 3 Hz, 3-H), 5.26 (d, J 4.3 Hz, 1-H) ]. โครงสร้างระนาบของ 5 ได้รับการยืนยันโดยการทดลอง 1 H–1 H COZY และ HMBC นั่นคือ การทดลอง 1 H–1 H COZY ในวันที่ 5 ระบุการมีอยู่ของโครงสร้างบางส่วนที่เขียนด้วยเส้นหนา และในการทดลอง HMBC พบว่ามีความสัมพันธ์ระยะยาวดังแสดงในรูปที่ 1 โครงสร้างสเตอริโอสัมพัทธ์ของ 5 คือ กำหนดโดยการทดลอง NOESY ซึ่งสังเกตความสัมพันธ์ของ NOE ระหว่างคู่โปรตอนต่อไปนี้ (1-H และ 9-H; 3-H และ 4a-H; 4b-H และ {{ 93}} H; 5-H และ 6b-H, 9-H; 6b-H และ 7-H; 7-H และ 9-H) ดังที่แสดง ในรูปที่ 2 โดยการเปรียบเทียบข้อมูล 1 H- และ 13C-NMR สำหรับ 5 กับข้อมูลสำหรับ 14a ซึ่งได้จากการบำบัด 14 ด้วย HCl ในน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์ ดังแสดงในแผนภูมิ 1,35) ตำแหน่งของคลอรีน กลุ่มใน 5 ได้รับการสนับสนุนให้เป็นตำแหน่ง 3- นอกจากนี้ แอซีทิเลชันของ 5 ที่มีอะซิติกแอนไฮไดรด์ (Ac2O) และไพริดีนให้ผลผลิต 3,7-ออกไซด์ (5a) ในขณะที่ 14a ให้ไดอะซีเตต (14b) ภายใต้สภาวะแอซีทิเลชันเดียวกัน หลักฐานนี้ยังทำให้เรายืนยันตำแหน่งของคลอรีนเป็นตำแหน่ง 3b (ภาพที่ 3) ดังนั้น โครงสร้างสามมิติของ 5 จึงถูกกำหนดให้เป็นตามที่แสดง

โครงสร้างของ Kankanoside E (6) Kankanoside E (6) ถูกแยกออกเป็นผงอสัณฐานที่มีการหมุนของแสงเป็นลบ ([a]D 25 20.0 องศาใน MeOH) สเปกตรัมอินฟราเรด 6 แสดงแถบดูดกลืนที่ 3410, 1647, 1085 ซม. 1 ตามฟังก์ชันไกลโคซิดิกและคาร์บอนิล ขณะที่สเปกตรัมยูวีแสดงการดูดซึมสูงสุดที่ 211 นาโนเมตร (log e 4.63) ซึ่งบ่งชี้ว่ามีกรดคาร์บอกซิลิกที่ไม่อิ่มตัว b สูตรโมเลกุล C16H28O8 ของ 6 ถูกกำหนดคุณลักษณะโดย FAB-MS ไอออนบวกและลบ และโดยการวัด MS ที่มีความละเอียดสูง กรดไฮโดรไลซิสของดี-กลูโคสที่ถูกปลดปล่อย 6 ตัว,8,10—12,15—18) ในขณะที่ (2E,6R)-8-ไฮดรอกซี-2,6-ไดเมทิล- 2-กรดออคทาโนอิก (6a) 36) ได้มาจากการไฮโดรไลซิสด้วยเอนไซม์ที่ 6 ด้วยบี-กลูโคซิเดส 1 H-NMR (ตารางที่ 3, CD3OD) และ 13C-NMR (ตารางที่ 4) สเปกตรัม28) ของ 6 ระบุการมีอยู่ของ (2E,6R)-8-ไฮดรอกซี-2,6- ไดเมทิล-2-มอยอิตีกรดออกทาโนอิก [d 0.95 (d, J 6.4 Hz, 10-H3), 1.30, 1.48 (ทั้งสอง ม., 5-H2), 1.45, 1.70 (ม.ทั้งสอง, { {70}}H2), 1.65 (m, 6-H), 1.81 (s, 9-H3), 2.22 (2H, m, 4-H2), 3.61, 3.94 (ทั้งคู่ m, 8-H2), 6.78 (dd, J 1.2, 7.3 Hz, 3-H)] ร่วมกับส่วน bD-glucopyranosyl [d 4.26 (d, J 7.6 Hz, 1 -H)] . โดยการเปรียบเทียบสัญญาณคาร์บอนในสเปกตรัม 13C-NMR ที่ 6 กับสัญญาณของ 6a การเปลี่ยนแปลงของไกลโคซิเลชันถูกสังเกตรอบๆ ตำแหน่ง 8- ที่ 6 ตำแหน่งของการเชื่อมโยงกลูโคไซด์ยังได้รับการยืนยันโดยการทดลองของ HMBC ดังที่แสดงใน รูปที่ 1 ดังนั้น โครงสร้างสเตอริโอสัมบูรณ์ของ 6 ถูกทำให้กระจ่างเป็น (2E,6R)-8-b- D-glucopyranosyloxy-2,6-dimethyl-2-octanoic acid

ประโยชน์ของสารสกัดจากซิสแทนเช่

ทดลอง

เครื่องมือต่อไปนี้ถูกใช้เพื่อให้ได้ข้อมูลทางกายภาพ: การหมุนจำเพาะ, Horiba SEPA-300 โพลาริมิเตอร์แบบดิจิตอล (l 5 ซม.); ยูวีสเปกตรัม, Shimadzu UV-1600 สเปกโตรมิเตอร์; สเปกตรัมอินฟราเรด, สเปกโตรมิเตอร์ Shimadzu FTIR-8100; EI-MS, CI-MS และ CI-MS ความละเอียดสูง, JEOL JMS-GCMATE แมสสเปกโตรมิเตอร์; FAB-MS และ MS ความละเอียดสูง, JEOL JMS-SX 102A แมสสเปกโตรมิเตอร์; 1 สเปกตรัม H-NMR, JEOL EX-270 (270 MHz) และ JNM-LA500 (500 MHz) สเปกโตรมิเตอร์; สเปกตรัม 13C-NMR, JEOL EX-270 (68 MHz) และ JNM-LA500 (125 MHz) สเปกโตรมิเตอร์ที่มีเตตระเมทิลไซเลนเป็นมาตรฐานภายใน และเครื่องตรวจจับ HPLC, Shimadzu RID-6ดัชนีการหักเหของแสงและเครื่องตรวจจับ SPD- 10Avp UV-VIS คอลัมน์ HPLC, คอลัมน์ YMC-Pack ODS-A (250 4.6 มม. id) และ (250 20 มม. id) ถูกใช้เพื่อวัตถุประสงค์ในการวิเคราะห์และการเตรียมการตามลำดับ

เงื่อนไขการทดลองต่อไปนี้ถูกใช้สำหรับโครมาโตกราฟี: ซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟีแบบเฟสสามัญ, ซิลิกาเจล BW-200 (Fuji Silysia Chemical, Ltd., Aichi, Japan, 15{{10}}—35 0 ตาข่าย); โครมาโตกราฟีคอลัมน์ซิลิกาเจลแบบย้อนกลับ, Chromatorex ODS DM1020T (Fuji Silysia Chemical, Ltd., Aichi, Japan, 100–200 mesh); TLC, แผ่น TLC ที่เคลือบด้วยซิลิกาเจล 60F254 (เมอร์ค, 0.25 มม.) (เฟสธรรมดา) และซิลิกาเจล RP- 18 F254S (เมอร์ค, 0.25 มม.) (เฟสย้อนกลับ); HPTLC แบบย้อนกลับ, แผ่น TLC ที่เคลือบไว้ล่วงหน้าด้วยซิลิกาเจล RP-18 WF254S (Merck, 0.25 มม.); และการตรวจจับทำได้โดยการฉีดพ่นด้วย H2SO4 ในน้ำ 1 เปอร์เซ็นต์ Ce (SO4) 2-10 เปอร์เซ็นต์ตามด้วยการให้ความร้อน

วัสดุจากพืช

ลำต้นแห้งของ Cistanche tubulosa (SCHRENK) R. WIGHT ถูกซื้อที่ Urumqi, Xinjiang Province, China ในเดือนมกราคม 2005 ผ่าน Eishin Trading Co., Ltd. เมืองโอซาก้า ประเทศญี่ปุ่น และศาสตราจารย์ Jia Xiaoguang ในสถาบัน Xinjiang Institute of Traditional Chinese และยาทางชาติพันธุ์วิทยา ตัวอย่างใบสำคัญ (255.01. Xinjiang-01) ของโรงงานแห่งนี้อยู่ในห้องปฏิบัติการของเรา

การสกัดและการแยกตัว

ลำต้นแห้งของ C. tubulosa (5.0 กก.) ถูกหมักแบบผงและสกัดด้วยเมทานอลสามครั้งภายใต้การไหลย้อนเป็นเวลา 3 ชั่วโมง การระเหยของตัวทำละลายภายใต้แรงดันที่ลดลงทำให้ได้สารสกัดเมทานอล (1340 ก., 26.8 เปอร์เซ็นต์จากยาสมุนไพรนี้) สารสกัดเมทานอล (160 ก.) อยู่ภายใต้ซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟีแบบเฟสปกติ [3.2 กก. CHCl3–MeOH–H2O (10 : 3 : 1→7 : 3 : 1 ต่ำกว่า ชั้น→6 : 4 : 1)MeOH] ให้หกเศษส่วน [คุณพ่อ. 1 (5.04 ก.), คุณพ่อ 2 (9.84 ก.), คุณพ่อ 3 (7.80 ก.), คุณพ่อ 4 (13.28 ก.), คุณพ่อ 5 (113.6{{104}} ก.) และคุณพ่อ 6 (7.61 กรัม)]. เศษส่วนที่ 1 (5.00 ก.) ถูกแยกโดยรีเวิร์สเฟสซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟี [150 ก., MeOH–H2O (40 6: 60→ 5{{ 162}} : 50→60 : 40, v/v)→MeOH] เพื่อให้ได้เศษห้าส่วน {{50}} (83{{201}} มก.), คุณพ่อ 1-2 (590 มก.), คุณพ่อ 1-3 (180 มก.), คุณพ่อ 1-4 (124 มก.) และคุณพ่อ 1-5 (3200 มก.)] พ่อ {{60}} (830 มก.) ถูกแยกเพิ่มเติมโดย HPLC [MeOH–H2O (10 : 90, v/v)] เพื่อให้แคนแคนอล (5, 20 mg, 0.0034 เปอร์เซ็นต์ ), argyol (15, 18 mg, 0.0030 เปอร์เซ็นต์ ), cistanin (16, 24 mg, 0.0040 เปอร์เซ็นต์ ) และ Fr. 1-1-2 (62 มก.) ซึ่งถูกแยกเพิ่มเติมโดย HPLC [MeOH–H2O (2 : 98, v/v)] เพื่อให้ (3R)-3-ไฮดรอกซี-2-ไพร์โรลิดิโนน (0.0020 เปอร์เซ็นต์) ) และ (3R)-3-ไฮดรอกซี-1-เมทิล-2-ไพร์โรลิดิโนน (0.0059 เปอร์เซ็นต์) พ่อ 1-2 (590 มก.) ถูกทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC [MeOH–H2O (35 : 65, v/v) และ CH3CN– H2O (20 : 80, v/v)] เพื่อให้ซิสทานคลอริน (17, 21 มก., 0.0035 เปอร์เซ็นต์ ). Fraction 2 (9.72 g) ถูก Reversed-phase silica gel column chromatography [290 g, MeOH–H2O (20 : 80→30 : 70→40 : 60→60 : 40, v/v)→MeOH] to af ford เศษส่วนเจ็ด [คุณพ่อ 2-1 (1986 มก.), คุณพ่อ 2-2 (1563 มก.), คุณพ่อ 2-3 (3931 มก.), คุณพ่อ 2-4 (375 มก.), คุณพ่อ 2-5 (486 มก.), คุณพ่อ 2-6 (460 มก.) และคุณพ่อ 2-7 (336 มก.)] พ่อ 2-1 (466 มก.) ถูกแยกโดย HPLC [MeOH–H2O (5 : 95, v/v)] เพื่อให้ยูริดีน (0.0069 เปอร์เซ็นต์) พ่อ 2-2 (535 มก.) ถูกแยกโดย HPLC [MeOH–H2O (10 : 90, v/v)] เพื่อให้ต้านไรด์ (11, 15 มก., 0.0079 เปอร์เซ็นต์ ) และ 6-deoxycatalpol (14, 214 มก. 0.11 เปอร์เซ็นต์ ). พ่อ 2-3 (535 มก.) ถูกแยกโดย HPLC [MeOH–H2O (20 : 80, v/v)] เพื่อให้มีกลูโรไซด์ (10, 110 มก., 0.14 เปอร์เซ็นต์ ) และ bartsioside (13, 164 มก., 0.21 เปอร์เซ็นต์) . พ่อ 2-4 (375 มก.) ถูกแยกโดย HPLC [MeOH–H2O (30 : 70, v/v)] เพื่อให้แคนคาโนไซด์ A (1, 32 มก., 0.0054 เปอร์เซ็นต์ ) และ D (4, 9 มก., 0.0015 เปอร์เซ็นต์ ). พ่อ 2-6 (460 มก.) ถูกแยกเพิ่มเติมโดย HPLC [MeOH–H2O (45 : 55, v/v)] เพื่อจัดให้มีแคนคาโนไซด์ E (6, 161 มก., 0.027 เปอร์เซ็นต์ ) และ (2E,6Z){{192 }}bD-glucopyranosyloxy-2,6-ไดเมทิล-2,6-กรดออกตาดีโนอิก (18, 17 มก., 0.0028 เปอร์เซ็นต์) Fraction 3 (7.60 g) ถูก Reversed-phase silica gel col umn chromatography [230 g, MeOH–H2O (20 : 80→40 : 60→50 : 50→ 60 : 40, v/v)→MeOH] เพื่อให้ ห้าเศษส่วน [คุณพ่อ 3-1 (2652 มก.), คุณพ่อ 3-2 (593 มก.), คุณพ่อ 3-3 (3610 มก.), คุณพ่อ 3-4 (190 มก.) และคุณพ่อ 3-5 (336 มก.)] พ่อ 3-1 (480 มก.) ถูกทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC [MeOH–H2O (10 : 90, v/v)] เพื่อให้แคนคาโนไซด์ บี (2, 19 มก., 0.018 เปอร์เซ็นต์ ), กรดเจนิโพซิดิก (8, 32 มก., 0.030 เปอร์เซ็นต์ ) และ ajugol (12, 12 มก., 0.011 เปอร์เซ็นต์ ) เศษส่วนที่ 4 (13.10 ก.) อยู่ภายใต้โครมาโตกราฟีแบบคอลัมน์ซิลิกาเจลแบบเปลี่ยนเฟส [390 ก., MeOH–H2O (10 : 90→20 : 80→30 : 70→40 : 60→50 : 50, v/v)→ MeOH] ให้เจ็ดเศษส่วน [คุณพ่อ. 4-1 (6114 มก.), คุณพ่อ 4-2 (430 มก.), คุณพ่อ 4-3 (1058 มก.), คุณพ่อ 4-4 (170 มก.), คุณพ่อ 4-5 (2595 มก.), คุณพ่อ 4-6 (1635 มก.) และคุณพ่อ 4-7 (1064 มก.)] พ่อ 4-2 (430 มก.) ถูกแยกเพิ่มเติมโดย HPLC [MeOH–H2O (5 : 95, v/v)] เพื่อให้ได้ 2 (70 มก., 0.012 เปอร์เซ็นต์ ) และแคนคาโนไซด์ C (3, 16 มก., 0.0027 เปอร์เซ็นต์) . พ่อ 4-6 (1058 มก.) ยังถูกแยกด้วย HPLC [MeOH–H2O (15 : 85, v/v)] เพื่อสร้างกรดมัสเซนโนซิดิก (7, 116 มก., 0.020 เปอร์เซ็นต์) และกรดเอพิโลกานิก 8- (9, 193 มก., 0.033 เปอร์เซ็นต์ ) เศษส่วนที่ 5 (15.15 ก.) อยู่ภายใต้โครมาโตกราฟีแบบคอลัมน์ซิลิกาเจลแบบย้อนกลับ [455 ก., MeOH–H2O (0 : 100→10 : 90→ 20 : 80→40 : 60→50 : 50, v/v)→MeOH ] ให้เจ็ดเศษส่วน [คุณพ่อ 5-1 (9311 มก.), คุณพ่อ 5-2 (1114 มก.), คุณพ่อ 5-3 (306 มก.), คุณพ่อ 5-4 (347 มก.), คุณพ่อ 5-5 (1620 มก.), คุณพ่อ 5-6 (1453 มก.) และคุณพ่อ 5-7 (1106 มก.)] พ่อ 5-1 (9311 มก.) ถูกตกผลึกจาก MeOH เพื่อให้ D-mannitol (3337 มก., 4.19 เปอร์เซ็นต์)

สารประกอบที่ทราบ (7-18) ถูกระบุโดยการเปรียบเทียบข้อมูลทางกายภาพของพวกมัน ([a]D, IR, 1 H-NMR, 13C-NMR, MS) ด้วยค่าที่รายงาน 1,7,19—24,26,27) หรือ ตัวอย่างทางการค้า 25) Kankanoside A (1): ผงอสัณฐาน [a]D 25 107.4 องศา (c 1.50 MeOH) FAB-MS ประจุบวกที่มีความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C16H26O8Na (M Na) 369.1525; พบ 369.1522. IR (KBr): 3410, 2940, 1647, 1076 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD และ pyridine-d5) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C-NMR (125 MHz, CD3OD และ pyridine-d5) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 Positive-ion FAB-MS: m /z 369 (มนะ) . ไอออนลบ FAB-MS: m/z 345 (MH)

Kankanoside B (2): ผงอสัณฐาน [a]D 26 118.7 องศา (c 0.10, MeOH) FAB-MS ประจุบวกที่มีความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C15H24O10Na (M Na) 387.1267; พบ 387.1261. IR (KBr): 3410, 2940, 1647, 1085 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 Positive-ion FAB-MS: m/z 387 (M Na) ไอออนลบ FAB-MS: m/z 363 (MH)

Kankanoside C (3): ผงอสัณฐาน [a]D 26 34.0 องศา (c 1.00 MeOH) FAB-MS ประจุลบความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C15H24ClO10 (MH) 399.1058; พบ 399.1077. IR (KBr): 3410, 2964, 1159, 1078, 1048, 949 ซม. 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 ไอออนลบ FAB-MS: m/z 399, 401 (MH)

Kankanoside D (4): ผงอสัณฐาน [a]D 25 30.6 องศา (c 0.50, MeOH) FAB-MS ประจุบวกที่มีความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C15H26O7Na (M Na) 341.1204; พบ 341.1210. IR (KBr): 3410, 2940, 1655, 1078, 1040 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 3 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 4 Positive-ion FAB-MS: m/z 341 (M Na) ไอออนลบ FAB-MS: m/z 317 (MH)

Kankanol (5): ผงอสัณฐาน [a]D 25 11.1 องศา (c 1.40, MeOH) CI-MS ความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C9H14ClO4 (MH) 221.0580; พบ 221.0582 IR (KBr): 3399, 3004, 1165, 1096, 1059, 1048, 955 ซม. 1 H- NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 CI-MS m/z ( เปอร์เซ็นต์ ): 221 (MH) (5 ), 223 (MH) (2), 185 (88), 167 (100), 149 (71) และ 57 (49)

Kankanoside E (6): ผงอสัณฐาน [a]D 25 20.0 องศา (c 2.00 MeOH) FAB-MS ประจุบวกที่มีความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C16H28O8Na (M Na) 371.1682; พบ 371.1690 UV [MeOH, นาโนเมตร (log e)]: 215 (4.16) IR (KBr): 3410, 2940, 1647, 1085, 1043 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 3 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 4 Positive-ion FAB-MS: m/z 371 (M Na) ไอออนลบ FAB-MS: m/z 347 (MH)

ประโยชน์ของสารสกัดจากซิสแทนเช่

ไฮโดรไลซิสของกรด 1-4 และ 6 ด้วย 1 M HCl

สารละลาย 1-4 หรือ 6 (แต่ละ 1.5 มก.) ใน 1 โมลาร์ HCl (0.5 มล.) ถูกให้ความร้อนภายใต้การไหลย้อนเป็นเวลา 3 ชั่วโมง หลังจากการเย็นลง ของผสมของปฏิกิริยาถูกเทลงในน้ำเย็นจัดและทำให้เป็นกลางด้วย Amberlite IRA-400 (รูปแบบ OH) และเรซินถูกกำจัดออกโดยการกรอง จากนั้นกรองด้วย EtOAc ชั้นที่เป็นน้ำอยู่ภายใต้การวิเคราะห์ HPLC ภายใต้สภาวะต่อไปนี้: คอลัมน์ HPLC, เซ็นเซอร์ Ka LC NH{{10}}, 4.6 มม. id 250 มม. (Tokyo Kasei Co., Ltd., โตเกียว, ญี่ปุ่น); การตรวจจับการหมุนด้วยแสง [Shodex OR-2 (Showa Denko Co., Ltd., Tokyo, Japan)]; เฟสเคลื่อนที่ CH3CN–H2O (75: 25, v/v); อัตราเพื่อน 0.8 มล. / นาที; อุณหภูมิคอลัมน์อุณหภูมิห้อง การระบุ D-glucose ที่มีอยู่ในชั้นที่เป็นน้ำดำเนินการโดยการเปรียบเทียบเวลาการคงอยู่และการหมุนด้วยแสงกับตัวอย่างจริง: tR 12.3 นาที (การหมุนด้วยแสงเชิงบวก)

เอนไซม์ไฮโดรไลซิส 1, 4 และ 6 กับ b-Glucosidase

สารละลาย 1 (7.7 มก.) ใน H2O (1.5 มล.) ถูกบำบัดด้วยบี-กลูโคซิเดส (5.0 มก. จากอัลมอนด์, Oriental Yeast Co. โตเกียว ญี่ปุ่น) และกวนสารละลายที่ 37 องศา สำหรับ 3 วัน หลังจาก EtOH ถูกเติมไปยังของผสมของปฏิกิริยา ตัวทำละลายถูกกำจัดออกภายใต้แรงดันที่ลดลงและเรซิดิวถูกทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC [MeOH–H2O (55: 45, v/v)] เพื่อให้แคนคาจีนินเป็น (1a, 2.3 มก., 56 เปอร์เซ็นต์) . โดยผ่านกรรมวิธีที่คล้ายกัน (R)-rotundiol33,34) (4a, 1.2 มก., 69 เปอร์เซ็นต์ ) และ (2E,6R)-8-ไฮดรอกซี-2,6-ไดเมทิล{{30} }octanoic acid36) (6a, 6.8 mg, 62 เปอร์เซ็นต์ ) ได้รับจาก 4 (3.5 มก.) และ 6 (20.4 มก.) ตามลำดับ

Kankagenin a (1a): ผงสีขาว [a]D 25 18.4 องศา (c 0.20, MeOH) EI-MS ความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C10H16O3 (M ) 184.1099; พบ 184.1106. IR (KBr): 3410, 2940, 1684 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 EI MS: m/z ( เปอร์เซ็นต์ ): 184 (M , 37) , 95 (100).

การบำบัดด้วยด่าง 14 ด้วย KOH . ที่เป็นน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์

สารละลาย 14 (23.0 มก.) ในน้ำ KOH 5 เปอร์เซ็นต์ (1.0 มล.) ถูกกวนผสมที่ 80 องศา เป็นเวลา 2 ชั่วโมง ของผสมปฏิกิริยาถูกทำให้เป็นกลางด้วย Amberlite HCR-W2 (รูปแบบ H) การเคลื่อนตัวของตัวทำละลายอีกครั้งจากตัวกรองภายใต้แรงดันที่ลดลงซึ่งเป็นการตกแต่งเรซิดิว ซึ่งถูกทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC [MeOH–H2O (5: 95, v/v)] เพื่อให้ 2 (4.0 มก., 16 เปอร์เซ็นต์ ) และ 1932) (10.5 มก. , 43 เปอร์เซ็นต์ ).

การบำบัดด้วยกรด 14 ด้วย HCl . ที่เป็นน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์

สารละลาย 14 (25.0 มก.) ใน HCl ที่มีน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์ (2.{5}} มล.) ถูกกวนที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 3 ชั่วโมง ของผสมของปฏิกิริยาถูกเทลงในน้ำเย็นจัดและของผสมของปฏิกิริยาทั้งหมดถูกสกัดด้วย EtOAc สารสกัด EtOAc ถูกล้างอย่างต่อเนื่องด้วยสารละลายเอเควียสที่อิ่มตัวของ NaHCO3 และน้ำเกลือ จากนั้นทำแห้งบนผง MgSO4 ที่ปราศจากน้ำและกรอง การกำจัดตัวทำละลายออกจากสิ่งกรองภายใต้แรงดันที่ลดลงซึ่งเป็นการตกแต่งเรซิดิว ซึ่งถูกแยกโดย HPLC [MeOH–H2O (20: 80, v/v)] เพื่อให้ 14a (4.0 มก., 25 เปอร์เซ็นต์)

14a

ผงสีขาว [a]D 20 21.5 องศา (c 0.30, MeOH) CI-MS ความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C9H14ClO4 (MH) 221.0580; พบ 221.0587 IR (KBr): 3410, 2962, 1365, 1152, 1055, 945 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 CI-MS: m/z ( เปอร์เซ็นต์ ): 221 (MH) ( 7), 223 (MH) (3), 203 (M H2O) (97), 205 (M H2O) (33), 185 (7), 167 (12), 159 (32), 121(27), 110 (48), 95 (64), 85 (100), 67 (56) และ 57 (65)

อะซิทิเลชันของ 5 และ 14a

สารละลาย 5 (2.5 มก.) ในไพริดีน (0.5 มล.) ถูกบำบัดด้วยอะซิติกแอนไฮไดรด์ (Ac2O, 0.4 มล.) และของผสมถูกกวนผสมที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 12 ชั่วโมง ของผสมของปฏิกิริยาถูกเทลงในน้ำเย็นจัดและของผสมของปฏิกิริยาทั้งหมดถูกสกัดด้วย EtOAc สารสกัด EtOAc ถูกล้างอย่างต่อเนื่องด้วย HCl ในน้ำ 5 เปอร์เซ็นต์, สารละลายในน้ำ NaHCO3 ที่อิ่มตัว และน้ำเกลือจากนั้นทำแห้งบนผง MgSO4 ที่ปราศจากน้ำและกรอง การกำจัดตัวทำละลายออกจากสิ่งกรองภายใต้แรงดันที่ลดลงซึ่งเป็นการตกแต่งเรซิดิว ซึ่งถูกทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC [MeOH–H2O (35: 65, v/v)] เพื่อให้ 5a (2.3 มก., 77 เปอร์เซ็นต์) โดยผ่านขั้นตอนที่คล้ายคลึงกัน 14b (2.7 มก., 87 เปอร์เซ็นต์ ) ยังถูกเตรียมและทำให้บริสุทธิ์โดย HPLC [MeOH–H2O (55: 45, v/v)] จาก 14a (2.1 มก.)

5a

ผงสีขาว [a]D 20 1.8 องศา (c 0.18, MeOH) CI MS ความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C11H15O5 (MH) 227.0919; พบ 227.0925. IR (KBr): 2962, 1734, 1374, 1258, 1237, 1169, 1103, 1053, 947 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 CI-MS m/z ( เปอร์เซ็นต์ ): 227 (MH) (28 ), 209 (M H2O) (4), 184 (3), 166 (45), 149 (22), 138 (38), 122 (44), 94 (31), 85 (100) และ 57 (34 ).

14b

ผงสีขาว [a]D 20 23.7 องศา (c 0.06, MeOH) CI-MS ความละเอียดสูง: คำนวณสำหรับ C13H18ClO6 (MH) 305.0792; พบ 305.0790. IR (KBr): 1744, 1376, 1243, 1231, 1001, 941 ซม. 1 . 1 H-NMR (500 MHz, CD3OD) d: กำหนดไว้ในตารางที่ 1 13C-NMR (125 MHz, CD3OD) d C: กำหนดไว้ในตารางที่ 2 CI-MS: m/z ( เปอร์เซ็นต์ ): 305 (MH) ( 2), 307 (MH) (1), 263 (MH C2H3O) (6), 265 (MH C2H3O) (3), 245 (30), 203 (8), 185 (100), 167 (7), 149 (33), 121 (26), 95 (15), 85 (37) และ 57 (93)

รับทราบ

งานวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนโดยโครงการ COE ครั้งที่ 21 โครงการ Academic Frontier Project และทุนช่วยเหลือสำหรับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์จากกระทรวงศึกษาธิการ วัฒนธรรม กีฬา วิทยาศาสตร์ และเทคโนโลยีของญี่ปุ่น ผู้เขียนขอขอบคุณศาสตราจารย์ Xiaoguang Jia ในสถาบัน Xinjiang Institute of Traditional Chinese and Ethnologic Medicines ใน Urumqi ประเทศจีน สำหรับการระบุวัสดุจากพืช

ประโยชน์ cistanche

ข้อมูลอ้างอิงและหมายเหตุ

1) Kobayashi H. , Oguchi H. , Takizawa N. , Miyase T. , Ueno A. , Usmanghani K. , Ahmad M. , Chem. เภสัช. บูล., 35, 3309—3314 (1987).

2) Xinjiang Science and Technology Press, "Culture Techniques of Xinjiang Staple Medicinal Plants," Xinjiang Institute of Traditional Chinese and Ethnologic Medicines Ed., 2004, pp. 84—88.

3) Du N. , Zhou P. , Wang J. , Liu C. , Li W. , Zhongguo Yaoke Daxue Xue bao, 24, 46—48 (1993)

4) Xue D., Zhongguo Zhongyao Zazhi, 22, 170-171 (1997).

5) เพลง Z. , Mo S. , Chen Y. , Tu P. , Li W. , Zhao Y. , Zheng J. , Zhongguo Zhongyao Zazhi, 25, 728—730 (2000)

6) เพลง Z., Tu P., Zhao Y., Zheng J., Zhongcaoyao, 31, 808—810 (2000)

7) Yoshizawa F. , Deyama T. , Takizawa N. , Usmanghani K. , Ahmad M. , เคมี เภสัช. กระทิง. 38, 2470-2473 (1990).

8) Matsuda H. , Morikawa T. , Tao J. , Ueda K. , Yoshikawa M. , Chem. เภสัช. กระทิง., 50, 208—215 (2002).

9) Morikawa T. , Matsuda H. , Toguchida I. , Ueda K. , Yoshikawa M. , J. Nat. Prod., 65, 1468-1474 (2002).

10) Tao J. , Morikawa T. , Toguchida I. , Ando S. , Matsuda H. , Yoshikawa M. , Bioorg. เมดิ. เคมี., 10, 4005—4012 (2002).

11) Morikawa T. , Tao J. , Ando S. , Matsuda H. , Yoshikawa M. , J. Nat. Prod., 66, 638–645 (2003).

12) Tao J. , Morikawa T. , Ando S. , Matsuda H. , Yoshikawa M. , Chem. เภสัช. บูล., 51, 654-662 (2003).

13) Matsuda H. , Morikawa T. , Xie H. , Yoshikawa M. , Planta Med. , 70, 847—855 (2004)

14) Sun B. , Morikawa T. , Matsuda H. , Tewtrakul S. , Harima S. , Yoshikawa M. , J. Nat. Prod., 67, 1464—1469 (2004).

15) Morikawa T. , Sun B. , Matsuda H. , Wu LJ, Harima S. , Yoshikawa M. , Chem. เภสัช. บูล., 52, 1194-1199 (2004).

16) Xie H. , Wang T. , Matsuda H. , Morikawa T. , Yoshikawa M. , Tani T. , Chem. เภสัช. บูล., 53, 1416—1422 (2005).

17) Morikawa T. , Xie H. , Matsuda H. , Yoshikawa M. , J. Nat. Prod., 69 (2006) ในสื่อ.

18) Morikawa T. , Xie H. , Matsuda H. , Wang T. , Yoshikawa M. , Chem. เภสัช. บูล., 54, 506–513 (2549).

19) Kobayashi H. , Karasawa H. , Miyase T. , Fukushima S. , Chem. เภสัช. บูล., 33, 3645–3650 (1985)

20) Otsuka H., Phytochemistry, 33, 617–622 (1993).

21) Zhao W. , Yang G. , Xu R. , Qin G. , Phytochemistry, 41, 1553-1555 (1996)

22) Kobayashi H. , Karasawa H. , Miyase T. , Fukushima S. , Chem. เภสัช. กระทิง., 32, 1729–1734 (1984).

23) Xu Z., Yang S., Yang J., Lu R., Zhongcaoyao, 30, 244-246 (1999).

24) วัง SJ, Pei YH, Hua HM, Chin เคมี. เล็ตต์., 12, 343–344 (2001).

25) สารประกอบที่รู้จักเหล่านั้นถูกระบุโดยการเปรียบเทียบข้อมูลทางกายภาพของพวกมันกับตัวอย่างที่ได้มาในเชิงพาณิชย์

26) Pires R. , Burger K. , Tetrahedron, 53, 9213—9218 (1997).

27) Kamal A., Ramana KV, Ramana AV, Babu AH, Tetrahedron: Asymmetry, 14, 2587-2594 (2003).

28) สเปกตรัม 1 H- และ 13C-NMR ของ 1-6 และสารประกอบที่เกี่ยวข้อง (19, 1a, 5a, 14a, 14b) ถูกกำหนดด้วยความช่วยเหลือของการเพิ่มประสิทธิภาพที่ไม่มีการบิดเบือนโดยการถ่ายโอนโพลาไรซ์ (DEPT), สเปกโตรสโคปีของตัวกรองควอนตัมคู่ ( DQF COSY), เฮเทอโรนิวเคลียร์หลายควอนตัมเชื่อมโยงกัน (HMQC) และการทดลองการเชื่อมต่อพันธะพหุคูณแบบเฮเทอโรนิวเคลียร์ (HMBC)

29) Nishizawa M. , Kodama S. , Yamase Y. , Kayano K. , Hatakeyama S. , Ya mada H. , Chem. เภสัช. บูล., 42, 982-984 (1994).

30) Yoshikawa M. , Ueda T. , Matsuda H. , Yamahara J. , Murakami N. , เคมี เภสัช. บูล., 42, 1691-1693 (1994).

31) Matsuda H. , Shimoda H. , Uemura T. , Ueda T. , Yamahara J. , Yoshikawa M. , Chem. เภสัช. บูล., 47, 1753–1758 (1999).

32) Damtoft S., Jensen SR, Nielsen BJ, ไฟโตเคมี, 24, 2281— 2283 (1985)

33) Watanabe K. , Takada Y. , Matsuo N. , Nishimura H. , Biosci. ไบโอเทค Biochem., 59, 1979-1980 (1995).

34) Takikawa H. , Yamazaki Y. , Mori K. , Eur. เจ. องค์กร. เคมี., 229—232 (1998).

35) Kitagawa I. , Fukuda Y. , Taniyama T. , Yoshikawa M. , Chem. เภสัช. บูล., 39, 1171-1176 (1991).

36) Yamaguchi K. , Shinohara C. , Kojima S. , Sodeoka M. , Tsuji T. , Biosci ไบโอเทค ไบโอเคมี., 63, 731-735 (1999).