วิธีการสร้างและประเมินแบบจำลอง Zebrafish ของโรคไตในมนุษย์ ตอนที่ 2

การวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อ

การกลายพันธุ์อาจไม่แสดงการเปลี่ยนแปลงทางสัณฐานวิทยาที่ให้ข้อมูลเพียงพอเสมอไป การวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อวิทยาของตัวอ่อนหรืออวัยวะของผู้ใหญ่เหล่านี้อาจจำเป็นเพื่อระบุความแตกต่างระหว่างสัตว์กลายพันธุ์และสัตว์ป่า วิธีการวิเคราะห์ทางจุลกายวิภาคสำหรับทั้งตัวอ่อนและปลาเซเบราฟิชที่โตเต็มวัยนั้นได้รับการยอมรับอย่างดีและสามารถดำเนินการในลักษณะปริมาณงานสูง (Sabaliauskas et al., 2006) ตัวอ่อนของ Zebrafish หรือเนื้อเยื่อผู้ใหญ่สามารถฝังในพาราฟินหรือเรซิน JB-4 ตามด้วยการแบ่งส่วนขนาดเล็กจิ๋วเพื่อศึกษาโครงสร้างเนื้อเยื่อ (Sullivan-Brown et al., 2011; Copper et al., 2018) การแบ่งส่วนด้วยการแช่แข็งสามารถทำได้ด้วยตัวอ่อน zebrafish (Ferguson and Shive, 2019) ส่วนเนื้อเยื่อเหล่านี้ใช้สำหรับการย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์ การศึกษาทางอิมมูโนฮิสโตเคมี หรือการย้อมสี H&E การย้อมสี H&E ของส่วนไตของผู้ใหญ่แสดงให้เห็นว่าปลายยอดของท่อใกล้เคียงถูกย้อมด้วยสีชมพูเข้มและมีลูเมนกว้าง ในขณะที่ท่อส่วนปลายมีรอยเปื้อนสีชมพูอ่อนที่มีลูเมนแคบ ดังนั้นจึงเป็นการทำเครื่องหมายรูปแบบการย้อมสีที่แตกต่างกันระหว่างส่วนต่าง ๆ อย่างชัดเจน ( McCampbell et al., 2015) เทคนิคการย้อมสีแบบคาบกรด-ชิฟฟ์ (PAS) ซึ่งตรวจหาพอลิแซ็กคาไรด์ในเนื้อเยื่อมีความสัมพันธ์กับเยื่อบุผิวขอบแปรงของท่อส่วนต้น (McCampbell et al., 2015; McKee and Wingert, 2015) เมธามีนซิลเวอร์จะเปื้อนเยื่อชั้นใต้ดินและสามารถใช้สำหรับท่อไตและการย้อมสีเยื่อหุ้มชั้นใต้ดินของโกลเมอรูไล (McCampbell et al., 2015) แบบจำลอง AKI ของ zebrafish โดยการดูถูก gentamicin แสดงให้เห็นการแบนของเยื่อบุผิว การสูญเสียของขอบปลายพู่กัน ท่อบวม และการสะสมของเศษซากในลูเมน ดังนั้นจึงเน้นถึงประโยชน์ของมิญชวิทยาในการวิเคราะห์แบบจำลองโรค zebrafish (Cianciolo Cosentino et al., 2013) .

ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา การวิจัยเกี่ยวกับการใช้สเต็มเซลล์และสมุนไพรจีนในการรักษาโรคไตได้รับความสนใจอย่างมาก กลไกหลักของการรักษาทั้งสองแบบคือส่งเสริมการซ่อมแซมเนื้อเยื่อไตที่บาดเจ็บและปกป้องการทำงานของไตที่เหลืออยู่

ยาสมุนไพรจีน cistanche ถูกนำมาใช้ในการแพทย์แผนจีนเพื่อรักษาต่างๆโรคไตเรื้อรังตั้งแต่สมัยโบราณ มีรายงานว่า cistanche มีศักยภาพในการลดการอักเสบลดการเกิดพังผืดในไตและส่งเสริมการสังเคราะห์ส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์ มีการเปิดเผยว่าผลกระทบเหล่านี้เกิดจากส่วนประกอบที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพ ซึ่งรวมถึงสารฟีนอลิก ไตรเทอร์พีนอยด์ และคูมาริน

ในทางกลับกัน เทคโนโลยีสเต็มเซลล์ทำให้เกิดการปฏิวัติวงการแพทย์ การวิจัยได้แสดงให้เห็นว่าสเต็มเซลล์สามารถแยกความแตกต่างเป็นเซลล์ไตประเภทต่างๆ และดำเนินกิจกรรมการรักษา รวมถึงปกป้องเนื้อเยื่อไตที่ยังใช้งานได้ ชะลอการเกิดพังผืดของเนื้อเยื่อ และซ่อมแซมความเสียหายเนื้อเยื่อไต.

คลิกที่วิธีการใช้ Cistanche

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:

david.deng@wecistanche.com วอทแอพ:86 13632399501

ในที่สุด การผสมผสานระหว่างการแพทย์แผนจีนกับวิทยาศาสตร์สมัยใหม่อาจเป็นกุญแจสำคัญในการรักษาต่างๆโรคไต. กลยุทธ์นี้ค่อยๆ ได้รับการยอมรับจากวงการแพทย์ และจากการศึกษาได้แสดงให้เห็นแล้วว่าการบำบัดแบบผสมผสานของกระท่อมและการรักษาด้วยสเต็มเซลล์อาจลดอัตราการเสียชีวิตจากโรคไตได้อย่างมาก

สรุปแล้วการใช้กระท่อมและการใช้สเต็มเซลล์ในการรักษาโรคไตนั้นมีศักยภาพสูงและต้องมีการศึกษาวิจัยต่อไป การบำบัดร่วมกันของการรักษาทั้งสองสามารถให้ทางเลือกการรักษาที่ดีขึ้นสำหรับผู้ที่เผชิญกับโรคไต

การระบุข้อบกพร่องของการแบ่งส่วน pronephros

pronephros มีรูปแบบเป็นส่วนต่าง ๆ ที่ทำหน้าที่แตกต่างกัน กลไกที่อยู่เบื้องหลังการแบ่งส่วนนี้ไม่เป็นที่เข้าใจอย่างชัดเจน แม้ว่าจะมีการระบุปัจจัยการถอดความหลายตัวว่าเป็นตัวควบคุมการแบ่งส่วน ความแตกต่างของรูปแบบการแบ่งส่วนสามารถระบุได้ง่ายโดยการวิเคราะห์ WISH ด้วยไรโบโพรบที่ทำเครื่องหมายส่วนต่าง ๆ ของโพรเนฟรอสโดยเฉพาะ ตำแหน่งที่แน่นอนของส่วน pronephros สามารถทำเครื่องหมายได้โดยใช้การผสมสองครั้งในแหล่งกำเนิดของเครื่องหมายเฉพาะส่วนและแอนติเซนส์ไรโบโพรบที่ทำเครื่องหมาย somite (เช่น smyhc1 และ xirp2a) เครื่องหมายระบุเซ็กเมนต์ที่พบมากที่สุดคือ slc20a1a สำหรับ PCT, trpm7 สำหรับ PST, slc12a1 สำหรับ DE, stc1 สำหรับ CS และ slc12a3 สำหรับ DL (รูปที่ 2) การกลายพันธุ์ใน HNF1b ของมนุษย์มีความเชื่อมโยงกับความผิดปกติของไต เช่น ไตทำงานผิดปกติ ไต glomerulocycstic ไต oligomeganephronia และไตทำงานเดี่ยว (Lindner, 1999; Bingham et al., 2002; Bohn et al., 2003) Naylor et al., (2013) วิเคราะห์การแบ่งส่วน pronephros โดย WISH ในตัวอ่อน zebrafish แบบน็อคเอาต์ hnf1b โดยใช้ยีนเครื่องหมายเฉพาะส่วน และพบว่าเครื่องหมายส่วนปลายและท่อส่วนปลายขาดหายไปในการกลายพันธุ์ จากการทดลองที่คล้ายคลึงกันพบว่าปัจจัยการถอดรหัสของยีน homeobox 1 (emx1) ที่ว่างเปล่าช่วยส่งเสริมชะตากรรมปลายส่วนปลายและยับยั้งชะตากรรมส่วนต้นส่วนปลายในระหว่างการเกิด nephrogenesis (โมราเลส et al., 2018) Wingert et al., (2007) ได้ทำการวิเคราะห์ WISH ของตัวอ่อนที่ได้รับการรักษาด้วย RA และ DEAB และพบว่าการรักษาด้วย DEAB ส่งผลให้สูญเสียส่วนใกล้เคียงและการขยายตัวของส่วนปลาย ในขณะที่การรักษาด้วย RA จากภายนอกจะกลับลักษณะฟีโนไทป์นี้ พวกเขายังสร้างความเชื่อมโยงระหว่างปัจจัยการถอดรหัสหาง (cdx) และ RA ในการควบคุมตำแหน่งของ nephron และการแบ่งส่วน (Wingert et al., 2007) เราได้แสดงให้เห็นว่าโดเมน EF-hand ที่มี 2 (efhc2) น็อคดาวน์ส่งผลให้เกิดการขยายเซ็กเมนต์ช่วงต้นที่อยู่ไกลออกไปและการลดลงใน CS และเซ็กเมนต์ปลายสุดที่อยู่ไกลออกไป การแสดงออกของ odf3 ซึ่งทำเครื่องหมายเซลล์หลายเซลล์ของท่อโพรเนฟริกก็ลดลงเช่นกันใน morphants ของ efhc2 (Barrodia et al., 2018)

การย้อมสีและการถ่ายภาพของ Pronephric cilia

Cilia เป็นออร์แกเนลล์ที่มีไมโครทูบูลซึ่งมีทั้งแบบเคลื่อนที่และไม่เคลื่อนไหว ความผิดปกติของมนุษย์ที่เกิดจากความบกพร่องของโครงสร้างและการทำงานของตาเรียกว่า ciliopathies ข้อบกพร่องของ cilia ที่มีอยู่ใน zebrafish pronephros มักนำไปสู่การม้วนตัว การก่อตัวของถุงน้ำ และการขยายท่อ (Sullivan-Brown et al., 2008) เซลล์หลายเซลล์ที่มีอยู่ใน zebrafish pronephros สามารถมองเห็นได้ด้วย WISH หรือการเรืองแสงในแหล่งกำเนิดลูกผสม (FISH) โดยใช้ antisense odf3b หรือ rfx2 riborobes (Liu et al., 2007; Barrodia et al., 2018) Cilia ในเอ็มบริโอปลาม้าลายสามารถย้อมได้โดยใช้ a-acetylated tubulin และ g-tubulin สามารถใช้ทำเครื่องหมายที่ฐาน (Jaffe et al., 2010; Zaghloul and Katsanis 2011) การเคลื่อนไหวของ cilia ที่เคลื่อนที่ได้สามารถบันทึกได้โดยใช้กล้องจุลทรรศน์ที่มีกล้องความเร็วสูงโดยใช้ปลาซีเบฟิชดัดแปรพันธุกรรม เช่น Tg(Foxj1a: GFP) (Tavares et al., 2017) เทคนิครวมของ FISH และการทดสอบการเรืองแสงของภูมิคุ้มกันได้รับการพัฒนาเพื่อทำเครื่องหมายเซลล์หลายเซลล์, ตา, และร่างกายพื้นฐาน (Marra et al., 2017) การกลายพันธุ์ของปลาซีเบราฟิชที่แตกต่างกันซึ่งมีข้อบกพร่องของตา เช่น Locke, swt และ curly ได้รับการตรวจสอบอย่างละเอียด และพบว่าพวกมันแสดงข้อบกพร่องในการเคลื่อนไหวของ cilia (Sullivan-Brown et al., 2008) การเคลื่อนไหวปรับเลนส์ลดลงใน Locke กลายพันธุ์และ cilia ไม่เคลื่อนไหวใน swt ในขณะที่การเคลื่อนไหวของ cilia ในหยิกมีตั้งแต่การเคลื่อนไหวที่ไม่เคลื่อนไหวไปจนถึงการเลื่อนที่ผิดปกติ การสร้างภูมิคุ้มกันด้วย a-acetylated tubulin แสดงให้เห็นว่าความยาวของ cilia เป็นปกติใน swt และ curly ในขณะที่ locke แสดง cilia ที่สั้นกว่า (Sullivan-Brown et al., 2008) วิธีการที่อธิบายไว้ที่นี่ถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางเพื่อระบุข้อบกพร่องของตาในโรคไตที่เกี่ยวข้องกับตา

การประเมินการทำงานของโกลเมอรูลัส

หน้าที่หลักของไตคือการกรองเลือดและกำจัดของเสียและของเหลวส่วนเกินออกจากร่างกาย ในขณะเดียวกันก็ป้องกันการสูญเสียโมเลกุลขนาดใหญ่ในปัสสาวะ โกลเมอรูลัสสามารถกรองโมเลกุลขนาด 5 kDa ออกได้ แต่ไม่อนุญาตให้มีการขับถ่ายของโมเลกุลขนาดใหญ่ เช่น ซีรัมอัลบูมิน (Chang et al., 1976) วิธีการวินิจฉัยที่ใช้กันทั่วไปในการประเมินความผิดปกติของไตในมนุษย์ไม่สามารถใช้กับเซเบราฟิชได้เนื่องจากมีขนาดเล็ก อย่างไรก็ตาม สีย้อมเรืองแสงที่มีน้ำหนักโมเลกุลต่างกันซึ่งเลียนแบบโมเลกุลที่พบได้ทั่วไปในไตของมนุษย์สามารถฉีดเข้าไปในปลาเซเบราฟิชได้ และการประเมินการกวาดล้างหรือการคงอยู่ของสารเหล่านี้สามารถใช้เป็นตัวแทนเพื่อตรวจสอบการทำงานของไต (Christou-Savina et al., 2015) ). ได้รับการพิสูจน์แล้วว่าการฉีด 10 kDa fluorescent dextran เข้าไปในช่องเยื่อหุ้มหัวใจของตัวอ่อน zebrafish ทำให้สูญเสียสีย้อมประมาณ 85 เปอร์เซ็นต์ผ่านการหลั่งจากไตภายใน 24 ชั่วโมงหลังการฉีด (HPI) (Christou-Savina et al. , 2558). สีย้อมที่มีน้ำหนักโมเลกุลสูง เช่น 70 kDa หรือสูงกว่านั้นจำเป็นต้องฉีดเข้าไปในหลอดเลือดและถูกเก็บรักษาไว้ในตัวอ่อนประเภทธรรมชาติ อย่างไรก็ตาม สามารถตรวจพบเดกซ์แทรน 70 kDa ในผนังท่อส่วนต้นเมื่อฉีดเข้าไปในหลอดเลือดของปลาม้าลายกลายพันธุ์ cystinosis (ctn's) ซึ่งบ่งชี้ว่าความสมบูรณ์ของร่องกรอง glomerulus ลดลงในหน่วย cents-/- larvae (Elmonem et al., 2017) . Kramer-Zucker et al., (2005) ฉีด FITC-dextran ขนาด 500 kDa เข้าไปใน cardinal vein ของตัวอ่อน zebrafish ชนิด wild-type และ nephrin และ podocin morphant ขนาด 84 แรงม้า และตรวจพบสีย้อมใน pronephros ซึ่งบ่งบอกถึงความผิดปกติของ nephrons ใน morphants เหล่านี้

การประเมินการดูดซึมกลับของสาร

Transmembrane endocytic receptor megalin / LRP2, อะแดปเตอร์ของมันถูกปิดใช้งาน 2 (dab2) และ coreceptor Dublin มีบทบาทสำคัญในการกวาดล้างสารเมตาโบไลต์ที่อาศัย endocytosis จากตัวกรองของไต (Anzenberger, 2006) การฉีด 70 kDa fluorescently labeled dextran หรือ fluorescently conjugated receptor-associated protein (RAP) ซึ่งเป็นโปรตีนที่เชื่อมโยงทางกายภาพกับ megalin/ LRP2 ในกระแสเลือดของตัวอ่อน zebrafish นำไปสู่การดูดซึมโมเลกุลเหล่านี้เพื่อการดูดซึมกลับ วิธีนี้เป็นวิธีการที่สะดวกสำหรับการประเมินฟังก์ชันการดูดซึมสารเมตาบอไลต์ของไต ในข้อตกลงกับบทบาทหลักในการดูดซึมกลับของสารเมแทบอไลต์ การลดลงของเมกาลิน/LRP2 หรือ dab2 อย่างใดอย่างหนึ่งนำไปสู่ความล้มเหลวโดยสิ้นเชิงของการดูดซึม endocytic ที่รับตัวรับเป็นตัวกลางของตัวติดตามใน morphants (Anzenberger, 2006)

การประเมินการขยายตัวของท่อ

ท่อโพรเนฟริกเรียงรายไปด้วยเซลล์เยื่อบุผิวโพลาไรซ์ชั้นเดียว สัณฐานวิทยาของท่อโพรเนฟริกและการตบเบา ๆ ของมันกลายเป็นส่วนต่าง ๆ นั้นถูกควบคุมโดยการเพิ่มจำนวนของเซลล์บุผิวที่แตกต่างกันใกล้กับปลายส่วนปลายและการอพยพไปยังโกลเมอรูลัส เหตุการณ์เหล่านี้ถูกควบคุมโดยของเหลวที่ไหลในโพรเนฟรอส ดังนั้น จึงทำให้เกิดความสัมพันธ์ระหว่างสัณฐานวิทยาของอวัยวะและการทำงานของอวัยวะ (Vasilyev et al., 2009) เซลล์ที่อยู่ปลายสุดมีลักษณะโค้งมนและมีแนวเสามากกว่า ในขณะที่เซลล์ที่อยู่ปลายสุดเป็นรูปลูกบาศก์ (Vasilyev et al., 2009) การลดลงของอัตราการกรองของไต การอุดตันในท่อไต หรือความบกพร่องในการพัฒนาและความสามารถในการเคลื่อนที่ของ cilia ขัดขวางการย้ายเซลล์โดยรวมนี้จากทิศทางด้านหลังไปยังทิศทางด้านหน้า อย่างไรก็ตาม เซลล์ที่ส่วนปลายยังคงเพิ่มจำนวนอย่างต่อเนื่อง ทำให้เกิดการขยายของท่อโพรเนฟริก (Naylor and Davidson, 2017) การขยายท่อสามารถประเมินได้โดยการสังเกตตัวอ่อนทั้งหมดโดยตรงภายใต้กล้องจุลทรรศน์หรือผ่านการวิเคราะห์ทางเนื้อเยื่อวิทยา สามารถใช้เลนส์ DIC เพื่อถ่ายภาพและคำนวณเส้นผ่านศูนย์กลางของท่อนำไข่ของตัวอ่อนเซเบริฟิช Sullivan-Brown et al., (2008) เปรียบเทียบการขยายท่อในพันธุ์ป่าและพันธุ์กลายแบบหยิกที่มีข้อบกพร่องในขน และพบว่าในพันธุ์ธรรมชาติ ท่อตรงกลางมีเส้นผ่านศูนย์กลางใหญ่กว่าเมื่อเทียบกับท่อส่วนหลัง และเส้นผ่านศูนย์กลางของ ท่อตรงกลางลดลงเมื่อเวลาผ่านไป ในการกลายพันธุ์แบบหยิก เส้นผ่านศูนย์กลางของท่อที่อยู่ตรงกลางและท่อหลังนั้นคล้ายกับชนิดไวด์ที่ 26-30 hpf แต่เส้นผ่านศูนย์กลางของท่อตรงกลางเพิ่มขึ้นอย่างต่อเนื่องถูกสังเกตพบในการกลายพันธุ์เหล่านี้ที่ 48 แรงม้าเป็นต้นไป มีการสังเกตเพิ่มเติมว่าจำนวนเซลล์รอบท่อตรงกลางเพิ่มขึ้นในเอ็มบริโอที่กลายพันธุ์ (Sullivan-Brown et al., 2008) การกลายพันธุ์ในยีน MNX1 ของมนุษย์ (เซลล์ประสาทสั่งการและโฮมโอบ็อกซ์ 1 ของตับอ่อน) ทำให้เกิดกลุ่มอาการเคอร์ราริโน ซึ่งเป็นโรคประจำตัวที่หาได้ยากซึ่งมีลักษณะเฉพาะโดยการเกิดศักดิ์สิทธิ์และความผิดปกติของระบบทางเดินปัสสาวะและไต เช่น ไตรูปเกือกม้า ไตข้างเดียว ภาวะไฮโดรนีไฟรซิส และการตีบบริเวณทวารหนัก (Currarino et al., 1981; Lee et al., 2018; Dworschak et al., 2021) Ott et al., (2016) สร้าง mnx2b morphants ในพื้นหลัง Tg(-8cldnb.1:lynEGFP)zf106 เพื่อแสดงภาพเซลล์เยื่อบุผิวในการพัฒนา pronephros และพบว่า morphants แสดงเส้นผ่านศูนย์กลางท่อใกล้เคียงที่ขยายใหญ่ขึ้นเมื่อเปรียบเทียบกับไวด์ - ประเภทการควบคุมที่ 4 pdf การวิเคราะห์เพิ่มเติมพบว่า morphants เหล่านี้ได้เปลี่ยนแปลงการทำงานของไต, ต่อมใต้สมองที่ไม่เป็นระเบียบ, และ microvilli ปลายยอดที่ผิดรูป (Ott et al., 2016) การวิเคราะห์ดังกล่าวโดยใช้ zebrafish จะช่วยให้เราเข้าใจกลไกพื้นฐานของโรคในมนุษย์อย่างไม่ต้องสงสัย

การประเมินขั้วของเซลล์เยื่อบุผิว

ขั้วของเซลล์เยื่อบุผิวของท่อโพรเนฟริกได้รับการดูแลโดยโปรตีนคอมเพล็กซ์ที่แยกเยื่อหุ้มเซลล์ออกเป็นโดเมนส่วนยอดและฐานด้านล่าง และจัดระเบียบโดเมนย่อยของเมมเบรนสำหรับการทำงานเฉพาะ เช่น การหลั่ง การกรอง การดูดซึม และการกระตุ้นประสาทสัมผัส (Pieczynski และ Margolis, 2011) มีการระบุความคลาดเคลื่อนของตัวรับ ตัวขนส่ง และช่องสัญญาณหลายตัวในสภาวะโรคต่างๆ เช่น Na บวก K บวก -ATPase, Na บวก K บวก 2Cl− cotransporter และ EGFR ใน PKD และ H บวก -ATPase ในโรค Dent's (Wilson, 2011) . ขั้วของเซลล์เยื่อบุผิวสามารถตรวจสอบได้โดยการย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ของตัวอ่อนทั้งหมดโดยใช้แอนติบอดีต่อ Na บวก /K บวก -ATPase, เครื่องหมายจุดเชื่อมต่อแน่น ZO-1 หรืออัลคาไลน์ฟอสฟาเทส (AP) เพื่อระบุข้อบกพร่องในการโพลาไรเซชันของ เยื่อบุผิวท่อในการกลายพันธุ์เมื่อเทียบกับเอ็มบริโอชนิดป่า Na plus /K plus -ATPase เป็นหนึ่งในโปรตีนที่มีมากที่สุดในเซลล์เยื่อบุผิวแบบท่อซึ่งรักษาสภาวะสมดุลของโซเดียม-โพแทสเซียมและควบคุมการทำงานของตัวขนส่งอื่น ๆ ที่มีอยู่ในเซลล์เยื่อบุผิว (Fernández and Malnic, 1998) มันถูกแปลเป็นภาษาท้องถิ่นที่เยื่อหุ้มเซลล์พลาสมาและมีความสำคัญต่อโพลาไรเซชันของเซลล์เยื่อบุผิวและการสร้างและการรักษารอยต่อที่แน่น (Rajasekaran et al., 2001) ZO-1 และ AP ใช้เพื่อทำเครื่องหมายพื้นผิวส่วนปลายของเซลล์เยื่อบุผิวส่วนต้น Drummond et al., (1998) วิเคราะห์กลุ่มมนุษย์กลายพันธุ์ที่มีความบกพร่องเล็กน้อยถึงรุนแรงในโพรเนฟรอส พวกเขาตรวจสอบขั้วของเซลล์เยื่อบุผิวในเอ็มบริโอ 2.5 pdf โดยการย้อมอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ด้วย anti-Na plus /K plus -ATPase alpha subunit monoclonal antibody (a6F) ตามด้วยการแบ่งส่วนเนื้อเยื่อ การวิเคราะห์นี้แสดงให้เห็นว่าการแปล Na บวก /K บวก -ATPase ถูกเปลี่ยนแปลงในสายการกลายพันธุ์ส่วนใหญ่เมื่อเทียบกับการแสดงออกของฐานปกติ ในการกลายพันธุ์แบบฟองคู่ (bb) และเฟลอร์ (flr) Na บวก / K บวก -ATPase ถูกแสดงที่พื้นผิวปลายในขณะที่พื้นผิวฐานแสดงการย้อมสีที่ลดลง การกลายพันธุ์อื่น ๆ มีการย้อมสีด้านข้างมากกว่าโดยมีพื้นผิวที่ปลายยอดและฐานด้านข้างที่ไม่มีการย้อมสี (Drumond et al., 1998)

การตรวจหานิ่วในไต

นิ่วในไตเป็นผลึกของเกลือที่สะสมอยู่ ซึ่งในบรรดานิ่วแคลเซียมนั้นพบได้บ่อยที่สุด (Evan, 2010) ประกอบด้วยแคลเซียมออกซาเลต (CaOx) และแคลเซียมฟอสเฟต (CaP) ในอัตราส่วนต่างๆ สามารถคาดหวังนิ่วแคลเซียมในการกลายพันธุ์ของม้าลายที่มีการเปลี่ยนแปลงสภาวะสมดุลของแคลเซียม สีย้อมที่สำคัญเช่น Alizarin red (เรืองแสงสีแดง) และ Calcein (เรืองแสงสีเขียว) สามารถใช้เพื่อตรวจหาเนื้อเยื่อที่มีแคลเซียมและนิ่วในไตในตัวอ่อนปลาม้าลาย Elizondo et al., (2010) แสดงให้เห็นว่า 57 - 97 เปอร์เซ็นต์ของตัวอ่อนกลายพันธุ์ homozygous trpm7 พัฒนานิ่วในไตที่ 5 dpf ในขณะที่เพียง 0-1.4 เปอร์เซ็นต์ของพี่น้องสัตว์ป่าพัฒนานิ่วดังกล่าว การถ่ายภาพตัวอ่อนกลายพันธุ์โฮโมไซกัส trpm7 ย้อมสีแดง alizarin ที่จุดเวลาต่างๆ กันแสดงให้เห็นว่า 2-4 ตัวอ่อน dpf ไม่มีนิ่ว และนิ่วถูกสังเกตที่ 5 dpf ในลูเมนและไม่ได้อยู่ในเยื่อบุผิวของท่อโพรเนฟริก (Elizondo et al ., 2553).

บทสรุปและโอกาส

อุบัติการณ์ของโรคไตเพิ่มขึ้นในอัตราที่น่าตกใจทั่วโลก มีความจำเป็นเร่งด่วนในการระบุสาเหตุของโรคเหล่านี้และพัฒนาวิธีการใหม่ๆ สำหรับการวินิจฉัยและการรักษา ไต metanephric ของสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมมีความซับซ้อน ทำให้ยากที่จะเข้าใจพยาธิสภาพของโรคไต โพรเนฟรอสในตัวอ่อนปลาซีบีฟิชทำงานได้และมีเนฟรอนเพียงสองตัวที่ด้านใดด้านหนึ่งของโนโทคอร์ดโดยมีโกลเมอรูลัสร่วมกันที่ส่วนหน้าและโคลเอคาที่ส่วนหลัง ในการทบทวนนี้ เราได้กล่าวถึงวิธีการต่างๆ ที่สามารถใช้ในการสร้างแบบจำลองเซเบราฟิชของโรคไตในมนุษย์ และวิธีการวิเคราะห์ฟีโนไทป์ของแบบจำลองโรคเหล่านี้ในระดับสัณฐานวิทยา เซลล์ และโมเลกุล การวิจัยอย่างอุตสาหะจากหลายกลุ่มได้กำหนดวิธีการสร้างแบบจำลองและการวิเคราะห์โรคเหล่านี้ในช่วงหลายปีที่ผ่านมา ความพยายามเหล่านี้ได้พิสูจน์แล้วว่าตัวอ่อนเซเบฟิชและตัวเต็มวัยสามารถใช้เป็นแบบจำลองโรคไตของมนุษย์ ซึ่งสามารถสรุปแง่มุมต่างๆ ของความผิดปกติของไตที่พบในมนุษย์ได้อย่างซื่อสัตย์ ความพยายามเหล่านี้ยังสร้างเครื่องมือและทรัพยากรที่มีประโยชน์มากมาย รวมถึงสายพันธุ์กลายพันธุ์และสายพันธุ์ดัดแปลงพันธุกรรม นี่เป็นโอกาสที่ไม่เพียง แต่จะเข้าใจกลไกของโรคไตโดยใช้เซเบราฟิช แต่ยังใช้เพื่อค้นพบยาใหม่สำหรับรักษาโรคไต โรคเบาหวานเป็นตัวการสำคัญที่ทำให้เกิดภาวะแทรกซ้อนที่เกี่ยวข้องกับไตในมนุษย์ Zebrafish เสนอโอกาสในการศึกษาความผิดปกติของไตที่เกี่ยวข้องกับโรคเบาหวาน (Jör gens et al., 2012) ดังนั้น zebrafish จึงมีรากฐานที่ยอดเยี่ยมในฐานะแบบจำลองของโรค และมีศักยภาพมหาศาลในการหาวิธีแก้ไขใหม่ๆ สำหรับโรคในมนุษย์

กิตติกรรมประกาศ

เราขอขอบคุณ Tarique Anwar และ Supriya Borah สำหรับการสนทนาและความคิดเห็นของพวกเขา SF เป็นผู้รับ DBT (DBT/2015/ILS/361) และ UR เป็นผู้รับทุน DST-Inspire การวิจัยในห้องปฏิบัติการ RKS ได้รับการสนับสนุนโดย SERB-EMR (EMR/2016/003780) และกองทุนภายในจาก ILS ซึ่งเป็นสถาบันอิสระของ DBT รัฐบาลอินเดีย

ผลงานผู้เขียน

เอสเอฟคิดและเขียนต้นฉบับแรก UN และ RKS หารือและแก้ไขต้นฉบับ

อ้างอิง

1. อัมสเตอร์ดัม A, BURGESS S, GOLLING G, CHEN W, SUN Z, TOWNSEND K, FARRINGTON S, HALDI M, HOPKINS N (1999) หน้าจอการกลายพันธุ์แบบแทรกขนาดใหญ่ในปลาเซเบราฟิช ยีน Dev 13: 2713–2724

2.ANZENBERGER U (2549). การอธิบายเมกาลิน/LRP2-กระบวนการขนส่งเอนโดซิติกที่ขึ้นกับตัวอ่อนในโพรเนฟรอสของปลาเซบราฟิชที่เป็นตัวอ่อน J Cell Sci 119: 2127–2137.

3.BARRODIA P, PATRA C, SWAIN RK (2018) โดเมน EF-hand ที่มี 2 (Efhc2) มีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการแบ่งส่วนปลายของโพรเนฟรอสในเซเบฟิช เซลล์ไบโอไซ 8: 53.

4.BEGEMANN G, SCHILLING TF, RAUCH GJ, GEISLER R, INGHAM PW (2001) การกลายพันธุ์แบบไม่มีคอของม้าลายเผยให้เห็นความต้องการสำหรับ raldh2 ในสัญญาณ mesodermal ซึ่งสร้างรูปแบบสมองส่วนหลัง การพัฒนา 128: 3081–3094

5. BIKBOV B, PURCELL CA, LEVEY AS, SMITH M, ABDOLI A, ABEBE M, ADEBAYO OM, AFARIDEH M, AGARWAL SK, AGUDELO-BOTERO M, et al., (2020) ภาระโรคไตเรื้อรังระดับโลก ระดับภูมิภาค และระดับประเทศ พ.ศ. 2533–2560: การวิเคราะห์อย่างเป็นระบบสำหรับการศึกษาภาระโรคทั่วโลก พ.ศ. 2560 Lancet 395: 709–733

6.BILL BR, PETZOLD AM, CLARK KJ, SCHIMMENTI LA, EKKER SC (2009) ไพรเมอร์สำหรับ morpholino ใช้ใน zebrafish เซเบราฟิช 6:69–77.

7. BINGHAM C, ELLARD S, COLE TRP, JONES KE, ALLEN LIS, GOODSHIP JA, GOODSHIP THJ, BAKALINOVA-PUGH D, RUSSELL GI, WOOLF AS, NICHOLLS AJ, HATTERSLEY AT (2002) ไตทำงานเดี่ยวและความผิดปกติของระบบสืบพันธุ์ที่หลากหลายซึ่งเกี่ยวข้องกับการกลายพันธุ์ของปัจจัยนิวเคลียสของเซลล์ตับ-1b ไต อินท์ 61: 1243–1251.

8.BOCH J, BONAS U (2010). Xanthomonas AvrBs3 Family-Type III Effectors: การค้นพบและการทำงาน Annu Rev Phytopathol 48: 419–436.

9.BOHN S, THOMAS H, TURAN G, ELLARD S, BINGHAM C, HATTERSLEY AT, RYFFEL GU (2003) คุณสมบัติเฉพาะของโมเลกุลและลักษณะทางสัณฐานวิทยาของการกลายพันธุ์ในยีน HNF1b ของมนุษย์ที่นำไปสู่การพัฒนาไตที่บกพร่อง เจ แอม ซอก เนฟรอล 14: 2033–2041

10.CANTAGREL V, SILHAVY JL, BIELAS SL, SWISTUN D, MARSH SE, BERTRAND JY, AUDOLLENT S, ATTIÉ-BITACH T, HOLDEN KR, DOBYNS WB, et al., (2008) การกลายพันธุ์ในยีน Cilia ARL13B นำไปสู่รูปแบบคลาสสิกของ Joubert Syndrome แอม เจ ฮัม เจเนท 83:170–179.

11.CAO Y, SEMANCHIK N, LEE SH, SOMLO S, BARBANO PE, COIFMAN R, SUN Z (2009) หน้าจอตัวปรับแต่งทางเคมีระบุตัวยับยั้ง HDAC เป็นตัวยับยั้งโมเดล PKD Proc Natl Acad Sci 106: 21819–21824.

12. คาร์นีย์ อีเอฟ (2020) ผลกระทบของโรคไตเรื้อรังต่อสุขภาพทั่วโลก. แนท เรฟ เนฟรอล 16:251–251.

13. ห้อง BE, WINGERT RA (2016) ต้นกำเนิดของไต: บทบาทในโรคไตและการฟื้นฟู เวิล์ด เจ สเต็มเซลล์ 8:367–375.

14. CHANG RLS, DEEN WM, ROBERTSON CR, BENNETT CM, GLASSOCK RJ, BRENNER BM, TROY JL, UEKI IF, RASMUSSEN B (1976) Permselectivity ของผนังเส้นเลือดฝอยของไต การศึกษาไตอักเสบในหนูทดลองโดยใช้เดกซ์แทรนที่เป็นกลาง เจ คลิน อินเวสท์ 57: 1272–1286.

15. CHRISTOU-SAVINA S, BEALES PL, OSBORN DPS (2015) การประเมินการทำงานของไต Zebrafish โดยใช้ Fluorescent Clearance Assay J Vis ประสบการณ์ 96: e52540.

16.CIANCIOLO COSENTINO C, ROMAN BL, DRUMMOND IA, HUKRIEDE NA (2010) การฉีดไมโครอินเจ็กชั่นของตัวอ่อนปลาม้าลายเพื่อศึกษาการบาดเจ็บของไตเฉียบพลัน J Vis ประสบการณ์ 42: e2079.

17.CIANCIOLO COSENTINO C, SKRYPNYK NI, BRILLI LL, CHIBA T, NOVITSKAYA T, WOODS C, WEST J, KOROTCHENKO VN, MCDERMOTT L, DAY BW, DAVID SON AJ, HARRIS RC, DE CAESTECKER MP, HUKRIEDE NA (2013) สารยับยั้ง Histone Deacetylase ช่วยเพิ่มการฟื้นตัวหลังจาก AKI เจ แอม ซ็อก เนฟรอล 24: 943–953.

18. ทองแดง JE, BUDGEON LR, FOUTZ CA, VAN ROSSUM DB, VANSELOW DJ, HUBLEY MJ, CLARK DP, MANDRELL DT, CHENG KC (2018) การวิเคราะห์เปรียบเทียบเทคนิคการตรึงและการฝังสำหรับการเตรียมทางเนื้อเยื่อที่เหมาะสมที่สุดของปลาเซเบราฟิช

19. Comp Biochem Physiol ส่วน C Toxicol Pharmacol 208: 38–46. CREWS DC, BELLO AK, SAADI G (2019) ภาระ การเข้าถึง และความเหลื่อมล้ำโรคไต. รายได้ Nefrol Dial y Traspl 39: 1–11

20.Curado S, STAINIER DYR, ANDERSON RM (2008) Nitroreductase-mediated เซลล์ / เนื้อเยื่อ ablation ใน zebrafish: วิธีการระเหยที่ควบคุมเชิงพื้นที่และชั่วคราวพร้อมการใช้งานในการศึกษาพัฒนาการและการฟื้นฟู แนท โปรโตคอล 3: 948–954.

21.CURRARINO G, COLN D, VOTTELER T (1981) Triad of anorectal, sacral และ presacral anomalies แอม เจ เรินต์เกนอล 137:395–398.

22.DESGRANGE A, CEREGHINI S (2015) การสร้างลวดลายของเนฟรอน: บทเรียนจากการศึกษา Xenopus, Zebrafish และ Mouse เซลล์ 4: 483–499

23.DIEP CQ, MA D, DEO RC, HOLM TM, NAYLOR RW, ARORA N, WINGERT RA, BOLLIG F, DJORDJEVIC G, LICHMAN B, ZHU H, IKENAGA T, ONO F, ENGLERT C, COWAN CA, HUKRIEDE NA, ฮันดิน รี, เดวิดสัน เอเจ (2554). การระบุต้นกำเนิด nephron ที่โตเต็มวัยที่สามารถฟื้นฟูไตใน zebrafish ธรรมชาติ 470: 95–100.

24.DIEP CQ, PENG Z, UKAH TK, KELLY PM, DAIGLE R V., DAVIDSON AJ (2015) การพัฒนาของ mesonephros zebrafish กำเนิด 53: 257–269

25. ดรัมมอนด์ I (2546). การทำไตม้าลาย: เรื่องราวของสองหลอด แนวโน้มเซลล์ Biol 13: 357–365

26.DRUMMOND IA, MAJUMDAR A, HENTSCHEL H, ELGER M, SOLNICA-KREZEL L, SCHIER AF, NEUHAUSS SCF, STEMPLE DL, ZWARTKRUIS F, RANGINI Z, DRIEVER W, FISHMAN MC (1998) การพัฒนาระยะเริ่มต้นของซีเบฟิช โพรเนฟรอส และการวิเคราะห์การกลายพันธุ์ที่ส่งผลต่อการทำงานของโพรเนฟริก การพัฒนา 125: 4655–4667

27.DWORCHAK GC, REUTTER HM, ลุดวิก เอ็ม (2021) กลุ่มอาการเคอร์ราริโน: การทบทวนพันธุกรรมอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับความผิดปกติแต่กำเนิดที่หาได้ยาก Orphanet J หายาก Dis 16:167.

28. EISEN JS, SMITH JC (2008) ควบคุมการทดลอง morpholino: อย่าหยุดสร้าง antisense การพัฒนา 135: 1735–1743

29.EL-BROLOSY MA, STAINIER DYR (2017) การชดเชยทางพันธุกรรม: ปรากฏการณ์ในการค้นหากลไก Ed. ซี โมนส์. PLOS ยีน 13: e1006780

30.ELIZONDO MR, BUDI EH, PARICHY DM (2010) Trpm7 การควบคุมสภาวะสมดุลของไอออนบวกในร่างกายและการทำงานของไตเกี่ยวข้องกับ Stanniocalcin 1 และ Fgf23 ต่อมไร้ท่อ 151: 5700–5709.

31.ELMONEM M, BERLINGERIO S, VAN DEN HEUVEL L, DE WITTE P, LOWE M, LEVTCHENKO E (2018) โรคไตทางพันธุกรรม: บทบาทใหม่ของ Zebrafish Models เซลล์ 7: 130.

32. ELMONEM MA, KHALIL R, KHODAPARAST L, KHODAPARAST L, ARCOLINO FO, MORGAN J, PASTORE A, TYLZANOWSKI P, NY A, LOWE M, DE WITTE PA, BAELDE HJ, VAN DEN HEUVEL LP, LEVTCHENKO E (2017) Cystinosis (ctn's) zebrafish กลายพันธุ์แสดงความผิดปกติของไตและท่อไต ตัวแทนวิทยาศาสตร์ 7: 42583

33.ENE-IORDACHE B, PERICO N, BIKBOV B, CARMINATI S, REMUZZI A, PERNA A, ISLAM N, BRAVO RF, ALECKOVIC-HALILOVIC M, ZOU H, et al., (2016) โรคไตเรื้อรังและความเสี่ยงต่อโรคหลอดเลือดหัวใจใน 6 ภูมิภาคของโลก (ISN-KDDC): การศึกษาแบบภาคตัดขวาง Lancet Glob Heal 4: e307–e319.

34. อีวาน เอพี (2010). สรีรวิทยาและสาเหตุของการเกิดนิ่วในไตและทางเดินปัสสาวะ Pediatr Nephrol 25: 831–841.

35. เฟอร์กูสัน เจแอล, SHIVE HR (2019) อิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ตามลำดับและอิมมูโนฮิสโตเคมีของตัวอ่อนเซบราฟิชที่ตัดด้วยความเย็น J Vis ประสบการณ์ 147: e59344.

36.FERNANDEZ R, MALNIC G. (1998). H บวก ATPase และ Cl − ปฏิสัมพันธ์ในการควบคุมค่า pH ของเซลล์ MDCK J Membr Biol 163: 137–145.

37. FOREMAN KJ, MARQUEZ N, DOLGERT A, FUKUTAKI K, FULLMAN N, McGaughey M, PLETCHER MA, SMITH AE, TANG K, YUAN CW, et al., (2018) การพยากรณ์อายุขัย จำนวนปีที่เสียชีวิต และการตายจากทุกสาเหตุและเฉพาะสาเหตุสำหรับ 250 สาเหตุการตาย: สถานการณ์อ้างอิงและทางเลือกสำหรับปี 2559-40 สำหรับ 195 ประเทศและดินแดน มีดหมอ 392: 2052–2090. 38.GELDSETZER P, MANNE-GOEHLER J, THEILMANN M, DAVIES JI, AWASTHI A, VOLLMER S, JAACKS LM, BÄRNIGHAUSEN T, ATUN R (2018) โรคเบาหวานและความดันโลหิตสูงในอินเดีย JAMA แพทย์ฝึกหัด 178: 363.

39.HANKE N, STAGGS L, SCHRODER P, LITTERAL J, FLEIG S, KAUFELD J, PAULI C, HALLER H, SCHIFFER M (2013) "Zebrafishing" สำหรับยีนใหม่ที่เกี่ยวข้องกับ Glomerular Filtration Barrier Biomed Res Int 2013: 1–12.

40. HELLMAN NE, LIU Y, MERKEL E, AUSTIN C, LE CORRE S, BEIER DR, SUN Z, SHARMAN, YODER BK, DRUMMOND IA (2010) ปัจจัยการถอดรหัส zebrafish foxj1a ควบคุมการทำงานของ cilia ในการตอบสนองต่อการบาดเจ็บและการยืดของเยื่อบุผิว Proc Natl Acad Sci สหรัฐอเมริกา 107: 18499–18504

41.HENTSCHELDM, PARKKM, CILENTIL, ZERVOSAS, DRUMMONDI, BONVENTRE J V. (2005) ภาวะไตวายเฉียบพลันใน zebrafish: ระบบใหม่เพื่อศึกษาโรคที่ซับซ้อน Am J Physiol Physiol 288: F923–F929.

42. HILL NR, FATOBA ST, OKE JL, HIRST JA, O'CALLAGHAN CA, LASSERSON DS, HOBBSFDR(2016).GlobalPrevalenceofChronicKidneyDisease–ASystematic Review and Meta-Analysis Ed. จี เรมุซซี. กรุณาหนึ่ง 11: e0158765

43. HOW K, CLARK MD, TORROJA CF, TORRANCE J, BERTHELOT C, MUFFATO M, COLLINS JE, HUMPHREY S, MCLAREN K, MATTHEWS L, et al., (2013) ลำดับจีโนมอ้างอิง zebrafish และความสัมพันธ์กับจีโนมมนุษย์ ธรรมชาติ 496: 498–503.

44. JAFFE KM, THIBERGE SY, BISHER ME, BURDINE RD (2010) การสร้างภาพ Cilia ใน Zebrafish ในวิธีการทางชีววิทยาของเซลล์ (Ed. Cassimeris L, Tran P) เล่มที่ 97 สำนักพิมพ์วิชาการ หน้า 415-435

45. เชน เอส (2014). การพัฒนาไตและความผิดปกติที่เกี่ยวข้อง ใน พยาธิชีววิทยาของโรคในมนุษย์ Elsevier, หน้า 2701–2715

46. ​​JHA V, GARCIA-GARCIA G, ISEKI K, LI Z, NAICKER S, PLATTNER B, SARAN R, WANG AYM, YANG CW (2013) โรคไตเรื้อรัง: มิติและมุมมองระดับโลก. มีดหมอ 382: 260–272.

47.JOBST-SCHWAN T, HOOGSTRATEN CA, KOLVENBACH CM, SCHMIDT JM, KOLB A, EDDY K, SCHNEIDER R, ASHRAF S, WIDMEIER E, MAJMUNDAR AJ, HILDEBRANDT F (2019) การรักษาด้วยคอร์ติโคสเตียรอยด์ทำให้อาการของโรคไตรุนแรงขึ้นในแบบจำลอง zebrafish ของ magi2a น่าพิศวง ไต อินท์ 95: 1079–1090.

48.JOHNSON CS, HOLZEMER NF, WINGERT RA (2554) การระเหยด้วยเลเซอร์ของ Zebrafish Pronephros เพื่อศึกษาการฟื้นฟูเยื่อบุผิวของไต เจ วิส ประสบการณ์ 54: 2845.

49.JÖRGENS K, HILLEBRANDS JL, HAMMES HP, KROLL J (2012) Zebrafish: แบบจำลองสำหรับการทำความเข้าใจภาวะแทรกซ้อนจากโรคเบาหวาน Exp Clin Endocrinol Diabetes 120: 186–187.

50.KAMEI CN, LIU Y, DRUMMOND IA (2015) การสร้างไตใน Zebrafish สำหรับผู้ใหญ่โดย Gentamicin Induced Injury J Vis ประสบการณ์ 102: e51912.

51.KAUFMAN CK, WHITE RM, ZON L (2552) การตรวจคัดกรองทางพันธุกรรมทางเคมีในตัวอ่อนของม้าลาย Nat Protoc 4: 1422–1432

52.KAWASUMI M, NGHIEM P (2550). พันธุศาสตร์เคมี: อธิบายระบบชีวภาพด้วยสารประกอบโมเลกุลขนาดเล็ก เจ อินเวสท์ เดอร์มาทอล 127: 1577–1584.

53.KIM BH, จาง GJ (2020). การสร้างเส้น zebrafish ที่น่าพิศวงที่เสถียรโดยการลบชิ้นส่วนโครโมโซมขนาดใหญ่โดยใช้ gRNA หลายตัว ยีน G3, จีโนม, ยีน 10: 1029–1037

54.เครเมอร์-ซัคเกอร์ เอจี (2548). การไหลของของเหลวที่ขับเคลื่อนด้วย Cilia ใน zebrafish pronephros, สมอง และ Kupffer's vesicle เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการสร้างอวัยวะตามปกติ การพัฒนา 132: 1907–1921

55.KRAMER-ZUCKER AG, WIESSNER S, JENSEN AM, DRUMMOND IA (2005) องค์กรของเครื่องมือกรอง pronephric ใน zebrafish ต้องใช้ Nephrin, Podocin และ FERM โดเมนโปรตีน Mosaic eyes Dev Biol 285: 316–329

56. กฤษณมูรติ VG (1976). ไซโตสรีรวิทยาของ Corpuscles of Stannius Int Rev Cytol 46: 177–249.

57. KROEGER PT, DRUMMOND BE, MICELI R, MCKERNAN M, GERLACH GF, MARRA AN, FOX A, MCCAMPBELL KK, LESHCHINER I, RODRIGUEZ-MARI A, BREMILLER R, THUMMEL R, DAVIDSON AJ, POSTLETHWAIT J, GOESSLING W, WINGERT ร.อ.(2560). Zeppelin กลายพันธุ์ไต zebrafish เปิดเผยว่า brca2/fancd1 เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการพัฒนา pronephros Dev Biol 428: 148–163

58. ลอว์สัน ND, WOLFE SA (2554). แนวทางทางพันธุกรรมไปข้างหน้าและย้อนกลับสำหรับการวิเคราะห์การพัฒนาสัตว์มีกระดูกสันหลังใน Zebrafish Dev เซลล์ 21: 48–64

59. LEE S, KIM EJ, CHO SI, PARK H, SEO SH, SEONG MW, PARK SS, JUNG SE, LEE SC, PARK KW, KIM HY (2018) สเปกตรัมของตัวแปรก่อโรค MNX1 และลักษณะทางคลินิกที่เกี่ยวข้องในผู้ป่วยชาวเกาหลีที่มีอาการเคอร์ราริโน แอนแล็บเมด 38: 242–248.

60. LEVEY AS, ASTOR BC, STEVENS LA, CORESH J (2010) โรคไตเรื้อรัง เบาหวาน และความดันโลหิตสูง ชื่ออะไร? ไต อินท์ 78:19–22.

61.LINDNER TH, NJOLSTAD PR, HORIKAWA Y, BOSTAD L, BELL GI, SOVIK O (1999) กลุ่มอาการใหม่ของโรคเบาหวาน ความผิดปกติของไต และความพิการของอวัยวะเพศที่เกี่ยวข้องกับการลบบางส่วนของโดเมนเทียม POU ของปัจจัยนิวเคลียสของเซลล์ตับ-1เบตา ฮัม โมล เจเนท 8: 2544–2551.

62. LIU K, PETREE C, REQUENA T, VARSHNEY P, VARSHNEY GK (2019) ขยายกล่องเครื่องมือ CRISPR ใน Zebrafish เพื่อศึกษาพัฒนาการและโรค ฟรอนต์เซลล์ เดฟ ไบออล 7:13.

63.LIU Y, LUO D, LEI Y, HU W, ZHAO H, CHENG CHK (2014) วิธีการไกล่เกลี่ย TALEN ที่มีประสิทธิภาพสูงสำหรับการหยุดชะงักของยีนเป้าหมายใน Xenopus tropicalis และ zebrafish วิธีที่ 69: 58–66

64. LIU Y, PATHAK N, KRAMER-ZUCKER A, DRUMMOND IA (2007) การส่งสัญญาณรอยบากควบคุมความแตกต่างของการขนส่งเยื่อบุผิวและเซลล์หลายเซลล์ในโพรเนฟรอสเซเบฟิช พัฒนาการ 134: 1111–1122.

65. LUNT SC, HAYNES T, PERKINS BD (2009) Zebrafish ift57, ift88 และ ift172 การกลายพันธุ์ของการขนส่งภายในแฟลกเจลลาร์จะรบกวน cilia แต่ไม่ส่งผลต่อการส่งสัญญาณของเม่น เดฟ ดีน 238: 1744–1759.

66. MANGOS S, LAM Py., ZHAO A, LIU Y, MUDUMANA S, VASILYEV A, LIU A, DRUMMOND IA (2010) ยีน ADPKD pkd1a/b และ pkd2 ควบคุมการสร้างเมทริกซ์นอกเซลล์ Dis Model Mech 3: 354–365

67.MARRA AN, ULRICH M, WHITE A, SPRINGER M, WINGERT RA (2017) การแสดงภาพเซลล์หลายเซลล์ใน Zebrafish ผ่านโปรโตคอลรวมของการผสมฟลูออเรสเซนต์ในแหล่งกำเนิดและอิมมูโนฟลูออเรสเซนต์ J Vis ประสบการณ์ 129: 56261.

68. MCCAMPBELL KK, SPRINGER KN, WINGERT RA (2558). Atlas of Cellular Dynamics ระหว่างการฟื้นฟูไตผู้ใหญ่ของ Zebrafish Stem Cells Int 2015: 1–19.

69.MCKEE RA, WINGERT RA (2558). พยาธิวิทยาของไต Zebrafish: แบบจำลองใหม่ของการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน Curr Pathobiol ตัวแทน 3: 171–181

70.MINGEOT-LECLERCQ MP, TULKENS PM (1999) Aminoglycosides : พิษต่อไต. ยาต้านจุลชีพ เคมีภัณฑ์ 43(5): 1003–1012.

71. MORALES EE, HANDA N, DRUMMOND BE, CHAMBERS JM, MARRA AN, ADDI EGO A, WINGERT RA (2018) Homeogene emx1 จำเป็นสำหรับการพัฒนาส่วนปลายของเนฟรอนในปลาเซเบราฟิช ตัวแทนวิทยาศาสตร์ 8: 18038

72.MULLINS MC, HAMMERSCHMIDT M, HAFFTER P, NÜSSLEIN-VOLHARD C (1994) การกลายพันธุ์ขนาดใหญ่ในปลาเซเบราฟิช: เพื่อค้นหายีนที่ควบคุมการพัฒนาในสัตว์มีกระดูกสันหลัง Curr Biol 4: 189–202.

73. NAYLOR RW, CHANG H-HG, QUBISI S, DAVIDSON AJ (2018) กลไกใหม่ของการสร้างต่อมในปลาเซเบราฟิชที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนผ่านของเซลล์เยื่อบุผิวของไตและการบีบตัวของเซลล์ที่มีชีวิต อีไลฟ์ 7: e38911.

74. เนย์เลอร์ อาร์ดับบลิว เดวิดสัน เอเจ (2017) การก่อตัวของท่อโพรเนฟริกในปลาเซเบราฟิช: morphogenesis และการย้ายถิ่น Pediatr Nephrol 32: 211–216.

75.NAYLOR RW, PRZEPIORSKI A, REN Q, YU J, DAVIDSON AJ (2013) HNF1 b จำเป็นสำหรับการแบ่งกลุ่มของ Nephron ระหว่างการสร้าง Nephrogenesis เจ แอม ซ็อก เนฟรอล 24:77–87.

76.OTT E, WENDIK B, SRIVASTAVA M, PACHO F, TÖCHTERLE S, SALVENMOSER W, MEYER D (2016) morphogenesis ท่อ Pronephric ใน zebrafish ขึ้นอยู่กับการกด Mnx-mediated ของ irx1b ภายใน mesoderm ระดับกลาง Dev Biol 411: 101–114

77.OUTTANDY P, RUSSELL C, KLETA R, BOCKENHAUER D (2019) Zebrafish เป็นแบบจำลองสำหรับการทำงานของไตและโรค Pediatr Nephrol 34: 751–762.

78.PALMYRE A, LEE J, RYKLIN G, CAMARATA T, SELIG MK, DUCHEMIN AL, NOWAK P, ARNAOUT MA, DRUMMOND IA, VASILYEV A (2014) การย้ายถิ่นของเยื่อบุผิวโดยรวมช่วยซ่อมแซมไตหลังจากได้รับบาดเจ็บเฉียบพลัน Ed. เอเจ กะบลา. โปรดหนึ่ง 9: e101304

79.PATTON EE, ZON LI (2544) ศิลปะและการออกแบบหน้าจอพันธุกรรม: ปลาม้าลาย แนท เรฟ เจเนท 2: 956–966.

80.PIECZYNSKI J, มาร์โกลิส บี (2554). คอมเพล็กซ์โปรตีนที่ควบคุมขั้วเยื่อบุผิวของไต Am J Physiol Physiol 300: F589–F601.

81.POUREETEZADI SJ, WINGERT RA (2559). ปลาเล็กจับใหญ่: ปลาม้าลายต้นแบบโรคไต ไต อินท์ 89: 1204–1210.

82.RAJAPURKAR MM, JOHN GT, KIRPALANI AL, ABRAHAM G, AGARWAL SK, ALMEIDA AF, GANG S, GUPTA A, MODI G, PAHARI D, PISHARODY R, PRAKASH J, RAMAN A, RANA DS, SHARMA RK, SAHOO R, สาคูจะ V, TATAPUDI RR, JHA V (2012). เรารู้อะไรเกี่ยวกับโรคไตเรื้อรังในอินเดีย: รายงานฉบับแรกของการลงทะเบียน CKD ของอินเดีย บีเอ็มซี เนฟรอล 13:10.

83.RAJASEKARAN SA, PALMER LG, MOON SY, PERALTA SOLER A, APODACA GL, HARPER JF, ZHENG Y, RAJASEKARAN AK (2001) กิจกรรม Na, K-ATPase เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการก่อตัวของทางแยกแน่น, Desmosomes และการเหนี่ยวนำของขั้วในเซลล์เยื่อบุผิว Ed. จี กุยดอตติ โมลไบโอลเซลล์ 12: 3717–3732.

84. โรเบิร์ต อาร์เจ เอลลิส เออี (2012) กายวิภาคศาสตร์และสรีรวิทยาของเทเลส ใน Fish Pathol Fourth Ed (Ed. Roberts RJ) Wiley, pp. 17–61.

85.ROBU ME, LARSON JD, NASEVICIUS A, BEIRAGHI S, BRENNER C, FARBER SA, EKKER SC (2007) p53 การเปิดใช้งานโดย Knockdown Technologies Ed. เอ็ม มัลลินส์. กรุณา Genet 3: e78.

86.ROSSI A, KONTARAKIS Z, GERRI C, NOLTE H, HÖLPER S, KRÜGER M, STAINIER DYR (2015) การชดเชยทางพันธุกรรมเกิดจากการกลายพันธุ์ที่เป็นอันตราย แต่ไม่ใช่การทำให้ยีนล้มลง ธรรมชาติ 524: 230–233.

87.SABALIAUSKAS NA, FOUTZ CA, MEST JR, BUDGEON LR, SIDOR AT, GERSHENSON JA, JOSHI SB, CHENG KC (2549) มิญชวิทยา zebrafish ความเร็วสูง วิธีที่ 39: 246–254

88. SERTORI R, TRENGOVE M, BASHEER F, WARD AC, LIONGUE C (2016) การแก้ไขจีโนมใน zebrafish: ภาพรวมเชิงปฏิบัติ ฟังก์ชันโดยย่อ จีโนมิกส์ 15: 322–330.

89. SHAH AN, DAVEY CF, WHITE BIRCH AC, MILLER AC, MOENS CB (2016) การคัดกรองพันธุกรรมแบบย้อนกลับอย่างรวดเร็วโดยใช้ CRISPR ใน Zebrafish เซเบราฟิช 13:152–153.

90. SHAO W, ZHONG D, JIANG H, HAN Y, YIN Y, LI R, QIAN X, CHEN D, JING L (2020). aminoglycoside gentamicin ใหม่แสดงความเป็นพิษต่อไตและ ototoxicity ต่ำในตัวอ่อน zebrafish เจ แอพเพิล ท็อกซิคอล 41:1063-1075.

91.SHARMA KR, HECKLER K, STOLL SJ, HILLEBRANDS JL, KYNAST K, HERPEL E, PORUBSKY S, ELGER M, HADASCHIK B, BIEBACK K, HAMMES HP, NAWROTH PP, KROLL J (2016) ELMO1 ปกป้องโครงสร้างไตและการกรองพิเศษในการพัฒนาไตและภายใต้สภาวะที่เป็นเบาหวาน ตัวแทนวิทยาศาสตร์ 6: 37172

92.SMYTH IM, CULLEN-MCEWEN LA, CARUANA G, BLACK MJ, BERTRAM JF (2017) พัฒนาการของไต ใน Fetal and Neonatal Physiology Elsevier, pp. 953-964.e4.

93. ซัลลิแวน-บราวน์ เจ, บิเชอร์ มี, BURDINE RD (2011) การฝัง การแบ่งส่วนแบบอนุกรม และการย้อมสีตัวอ่อนเซเบฟิชโดยใช้เรซิน JB-4 แนท โพรทอค 6:46–55.

94.SULLIVAN-BROWN J, SCHOTTENFELD J, OKABE N, HOSTETTER CL, SERLUCA FC, THIBERGE SY, BURDINE RD (2008) การกลายพันธุ์ของ Zebrafish ที่ส่งผลต่อการเคลื่อนไหวของ cilia มีฟีโนไทป์แบบซิสติกที่คล้ายคลึงกันและแนะนำกลไกของการก่อตัวของซีสต์ที่แตกต่างจาก pkd2 morphants Dev Biol 314: 261–275

95. ซัมเมอร์ตัน เจ (1999). Morpholino antisense oligomers: กรณีสำหรับประเภทโครงสร้างที่ไม่ขึ้นกับ RNase H Biochim Biophys Acta - โครงสร้างยีน Expr 1489: 141–158

96.SUN, Z. อัมสเตอร์ดัม, A. PAZOUR, GJ COLE, DG MILLER SM (2004) หน้าจอทางพันธุกรรมใน zebrafish ระบุว่ายีน cilia เป็นสาเหตุหลักของโรคปอดเรื้อรัง การพัฒนา 131: 4085–4093

97.TAHARA T, OGAWA K, TANIGUCHI K (1993). การกำเนิดของ Pronephros และ Mesonephros ในกบเล็บแอฟริกาใต้ Xenopus laevis Daudin โดยมีการอ้างอิงพิเศษเกี่ยวกับลักษณะที่ปรากฏและการเคลื่อนไหวของเซลล์ Renin-immunopositive Exp Anim 42: 601–610

98. ทัลลาฟัส A, GIBSON D, MORCOS P, LI Y, SEREDICK S, EISEN J, WASHBOURNE P (2012) การเปิดและปิดการทำงานของยีนโดยใช้เซนส์และแอนติเซนส์โฟโตมอร์โฟลิโนในเซเบฟิช พัฒนาการ 139: 1691–1699.

99.TAVARES B, JACINTO R, SAMPAIO P, PESTANA S, PINTO A, VAZ A, ROXO-ROSA M, การ์ดเนอร์ R, LOPES T, SCHILLING B, HENRY I, SAÚDE L, LOPES SS (2017) การส่งสัญญาณ Notch/Her12 มอดูเลต อัตราส่วน cilia ที่เคลื่อนที่ได้/ไม่เคลื่อนไหว ดาวน์สตรีมของ Foxj1a ในออร์กาไนเซอร์ซ้าย-ขวา zebrafish อีไลฟ์ 6: e25165.

100.THOMAS R, KANSO A, SEDOR JR (2551). โรคไตเรื้อรังและภาวะแทรกซ้อน Prim Care - คลินิคออฟปฏิบัติ 35: 329–344.

101.วาร์มาพีพี (2558). ความชุกของโรคไตเรื้อรังในอินเดีย - เรากำลังมุ่งหน้าไปทางไหน? อินเดียน เจ เนฟรอล 25:133–135.

102.VARSHNEY GK, BURGESS SM (2014) ทรัพยากรการกลายพันธุ์และฟีโนไทป์ในปลาเซเบราฟิชสำหรับศึกษาการพัฒนาและโรคในมนุษย์ ฟังก์ชั่นโดยย่อ จีโนมิกส์ 13: 82–94.

103.VARSNEY GK, CARRINGTON B, PEI W, BISHOP K, CHEN Z, FAN C, XU L, JONES M, LAFAVE MC, LEDIN J, SOOD R, BURGESS SM (2016) เวิร์กโฟลว์จีโนมิกเชิงฟังก์ชันปริมาณงานสูงที่อิงตาม CRISPR/Cas9- ซึ่งเป็นสื่อกลางในการทำให้เกิดการกลายพันธุ์แบบกำหนดเป้าหมายในเซเบฟิช แนท โพรโทก 11: 2357–2375.

104.VARUGHESE S, อับราฮัม จี (2018). โรคไตเรื้อรังในอินเดีย คลินิค เจ แอม ซอก เนฟรอล 13:802–804.

105.VASILYEV A, LIU Y, MUDUMANA S, MANGOS S, LAM PY, MAJUMDAR A, ZHAO J, POON KL, KONDRYCHYN I, KORZH V, DRUMMOND IA (2009) การย้ายถิ่นของเซลล์โดยรวมทำให้เกิด morphogenesis ของไต Nephron Ed วัดดีแอล. กรุณา Biol 7: e1000009

106.เวอร์แลนเดอร์ เจดับบลิว (1998). การทำงานของไตปกติและการเปลี่ยนแปลงของการทำงานของไตในสภาวะที่มีความเป็นพิษต่อไต โครงสร้างพื้นฐานของไตและทางเดินปัสสาวะส่วนล่างปกติ ท็อกซิคอล พาทอล 26:1–17.

107.WILSON PD (2554). Apico-basal polarity ในเยื่อบุผิวโรคไต polycystic Biochim Biophys Acta - Mol Basis Dis 1812: 1239–1248

108.WINGERT RA, DAVIDSON AJ (2554). การสร้างเนโฟรจีเนซิสของ Zebrafish เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกเชิงพื้นที่ชั่วคราวแบบไดนามิกในต้นกำเนิดของไตและสัญญาณที่จำเป็นจากกรดเรติโนอิกและ irx3b เดฟ ไดน์ 240: 2554–2570

109.WINGERT RA, SELLECK R, YU J, SONG HD, CHEN Z, SONG A, ZHOU Y, THISSE B, THISSE C, MCMAHON AP, DAVIDSON AJ (2007) ยีน cdx และกรดเรติโนอิกควบคุมตำแหน่งและการแบ่งส่วนของโพรเนฟรอสเซเบฟิช กรุณา Genet 3: 1922–1938

110.YAKULOV TA, TODKAR AP, SLANCHEV K, WIEGEL J, BONA A, GROSS M, SCHOLZ A, HESS I, WURDITSCH A, GRAHAMMER F, et al., (2018) CXCL12 และ MYC ควบคุมการเผาผลาญพลังงานเพื่อสนับสนุนการตอบสนองที่ปรับตัวได้หลังจากการบาดเจ็บของไต นัท คอมมูน 9:1–15.

111.YAMAGUCHI T, HAMPSON SJ, REIF GA, HEDGE AM, WALLACE DP (2549) แคลเซียมช่วยฟื้นฟูฟีโนไทป์ของการเพิ่มจำนวนตามปกติในเซลล์เยื่อบุผิวของโรคไตที่มีถุงน้ำหลายใบในมนุษย์ เจ แอม ซ็อก เนฟรอล 17:178–187.

112.ZAGHLOUL NA, KATSANIS N (2011). การทดสอบ Zebrafish ของ Ciliopathies ในวิธีการทางชีววิทยาของเซลล์ (Ed. Detrich HW, Westerfield M, Zon L. I) ฉบับ 105. สำนักพิมพ์วิชาการ หน้า 257-272.

113.ZHAO C, มาลิคกี้เจ (2550). ความบกพร่องทางพันธุกรรมของ pronephric cilia ใน zebrafish หุ่นยนต์ Dev 124: 605–616

114.ZHOU W, DAI J, ATTANASIO M, HILDEBRANDT F (2010) Nephrocystin-3 จำเป็นสำหรับการทำงานของเลนส์ปรับเลนส์ในเอ็มบริโอ zebrafish Am J Physiol Physiol 299: F55–F62.

115.ZHOU W, HILDEBRANDT F (2012) การบาดเจ็บของพอดไซต์ที่เหนี่ยวนำและโปรตีนในปัสสาวะในปลาม้าลายดัดแปลงพันธุกรรม เจ แอม ซ็อก เนฟรอล 23: 1039–1047.

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501