โรคของมารดาและการควบคุม Epigenetic ในการพัฒนาไต

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:ali.ma@wecistanche.com

PART Ⅱ: ผลกระทบของสภาวะสิ่งแวดล้อมต่อจำนวน Nephron: แบบจำลองโรคของมารดาและระเบียบ Epigenetic ในการพัฒนาไต

Lars Fuhrmann, Saskia Lindner, Alexander-Thomas Hauser, Clemens Höse & และคณะ

เชิงนามธรรม

หลักฐานที่เพิ่มขึ้นเรื่อย ๆ ชี้ให้เห็นว่าจำนวน nephron ต่ำตั้งแต่แรกเกิดสามารถเพิ่มความเสี่ยงต่อโรคไตเรื้อรังหรือความดันโลหิตสูงในภายหลังได้ ความเครียดจากสิ่งแวดล้อม เช่น ภาวะทุพโภชนาการของมารดา การใช้ยา และการสูบบุหรี่ อาจส่งผลต่อขนาดไตตั้งแต่แรกเกิด โดยใช้การเพาะเลี้ยงอวัยวะ metanephric เพื่อจำลองสภาวะแวดล้อมแบบตัวแปรเดียว แบบจำลองของโรคของมารดาได้รับการประเมินสำหรับรูปแบบของความบกพร่องทางพัฒนาการ ในขณะที่ภาวะอุณหภูมิเกินมีผลจำกัดต่อการพัฒนาของไต การขาดธาตุเหล็กของทารกในครรภ์มีความสัมพันธ์กับการด้อยค่าของไตอย่างรุนแรงและการสร้างไตด้วยฟีโนไทป์ใกล้เคียงทั้งหมด การเพาะเลี้ยงไต explants ภายใต้สภาวะที่มีน้ำตาลกลูโคสสูงทำให้เกิดการเปลี่ยนแปลงระดับเซลล์และ transcriptomic คล้ายกับโรคไตโรคเบาหวานของมนุษย์ สภาวะการเพาะเลี้ยงกลูโคสในระดับสูงในระยะสั้นนั้นเพียงพอสำหรับการเปลี่ยนแปลงในระยะยาวในหน่วยความจำ epigenetic ที่เกี่ยวข้องกับ DNA methylation ในที่สุด บทบาทของตัวดัดแปลง epigenetic ในการพัฒนาไตได้รับการทดสอบโดยใช้คลังสารประกอบขนาดเล็ก ในบรรดาสารยับยั้งอีพิเจเนติกที่เลือก สารประกอบต่างๆ กระตุ้นการเจริญของไต เช่น HDAC (entinostat, TH39), histone demethylase (deferasirox, deferoxamine) และ histone methyltransferase (cyproheptadine) inhibitors ดังนั้นการเพาะเลี้ยงอวัยวะ metanephric จึงเป็นระบบที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาสภาวะการเผาผลาญและเครื่องมือสำหรับการตรวจคัดกรองสารดัดแปลงอีพีเจเนติกในการพัฒนาไต

คลิกเพื่อ Cistanche ในภาษาอูรดูสำหรับการทำงานของไต

คลิกที่นี่เพื่อเป็นส่วนหนึ่ง Ⅰ

3. อภิปราย

การพัฒนาของไตส่วนใหญ่เกิดขึ้นในมดลูกและอาจถูกรบกวนจากอิทธิพลของการเผาผลาญและสิ่งแวดล้อม จำนวน Nephron ถูกกำหนดตั้งแต่แรกเกิด และหลักฐานที่เพิ่มขึ้นแสดงให้เห็นว่าจำนวน nephron ต่ำเป็นปัจจัยเสี่ยงสำหรับการเกิดความดันโลหิตสูงและโรคไตเรื้อรังในภายหลัง [2-4,60] อย่างไรก็ตาม ปัจจัยหลายอย่างที่มีอิทธิพลต่อจำนวน nephron และรูปแบบการดำเนินการยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด ในที่นี้ ไตของตัวอ่อนจากหนูรายงานแบบเรืองแสงคู่ที่เพาะเลี้ยงบนเม็ดมีด Transwell ถูกใช้เพื่อสร้างแบบจำลองสภาวะการเผาผลาญของมารดาและคัดกรองสารยับยั้งอีพีเจเนติก

ในขณะที่การศึกษาจำนวนมากในปัจจุบันเกี่ยวข้องกับอวัยวะในไตโดยใช้เซลล์ iPS ของมนุษย์ [61] การเพาะเลี้ยงไตเป็นเครื่องมือที่มีค่าสำหรับการวิเคราะห์โดยละเอียดของฟีโนไทป์ที่อาศัยสภาวะการเผาผลาญหรือสารยับยั้ง แม้ว่าการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดและอวัยวะในไตจะเป็นทางเลือกที่มีศักยภาพอย่างมากสำหรับการตรวจสอบการก่อมะเร็งในอวัยวะต่างๆ แต่ก็มีข้อจำกัด เช่น ความแปรปรวนสูงในด้านความแตกต่างและการเจริญเติบโต และการขาดโครงสร้างอวัยวะแบบเดิม สิ่งนี้ทำให้การเพาะเลี้ยงอวัยวะ metanephric เป็นทางเลือกที่มีคุณค่าในการตรวจสอบสภาพที่ไม่น่าจะเป็นไปได้ในร่างกาย

ดังนั้น ภาวะอุณหภูมิเกินและการขาดธาตุเหล็กจึงเป็นตัวอย่างสองตัวอย่างในการตรวจสอบสภาวะแวดล้อมโดยให้ผลลัพธ์ที่แตกต่างกันต่อการเจริญเติบโตของไตและจำนวนเนฟรอน ในขณะที่ข้อมูลเกี่ยวกับผลกระทบของภาวะอุณหภูมิเกินต่อการเจริญเติบโตของไตมีน้อยมาก ผลกระทบของการจำกัดธาตุเหล็กจากร่างกายภายนอกนั้นสอดคล้องกับรายงานก่อนหน้านี้เกี่ยวกับภาวะขาดธาตุเหล็กของมารดาในหนูทดลอง [23.24] แม้ว่าแบบจำลองจะมีข้อจำกัดในการจำลองสถานะในครรภ์อย่างแม่นยำในแง่ของ ความเข้มข้นและจลนพลศาสตร์ของเหล็ก ผลลัพธ์ของเรายังแสดงให้เห็นว่ากิจกรรมไมโทติคลดลงในสภาวะจำกัดธาตุเหล็ก ธาตุเหล็กมีบทบาทสำคัญในกระบวนการของเซลล์หลายอย่าง เช่น วัฏจักรของเซลล์ [62] การวิเคราะห์ทางสัณฐานวิทยาของเราแสดงให้เห็นฟีโนไทป์ของการสร้างความแตกต่างของเนฟรอนใกล้เคียงทั้งหมด ซึ่งอาจเป็นผลมาจากการยับยั้งการส่งสัญญาณ Wnt ที่เป็นที่ยอมรับ ก่อนหน้านี้มีรายงานการลดลงอย่างกว้างขวางของยีนที่เกี่ยวข้องกับการส่งสัญญาณ Wnt ในการวิเคราะห์ microarray ของลูกหนูที่สัมผัสกับการขาดธาตุเหล็กของมารดา [63] ในทางกลไก การพร่องของธาตุเหล็กภายในเซลล์โดยสารคีเลตสามารถกระตุ้นการเสื่อมสลายของโปรตีอาโซมของ -catenin ซึ่งเป็นโปรตีนเอฟเฟกเตอร์ปลายน้ำที่สำคัญของวิถี Wnt แบบบัญญัติในเซลล์มะเร็งและเซลล์ต้นกำเนิดประสาท [64,65]

ในฐานะที่เป็นสภาวะทางเมตาบอลิซึมอื่น การสร้างแบบจำลองการได้รับกลูโคสในระดับสูงส่งผลให้เกิดผลกระทบที่คล้ายคลึงกับการเกิดโรคเบาหวานของมารดาที่เกิดจากสเตรปโตโซโตซินในร่างกาย[10,26,27,66-71] แม้ว่าแบบจำลองของเราไม่สามารถทำซ้ำผลกระทบของสภาวะน้ำตาลกลูโคส 30 มิลลิโมลาร์ได้ แต่น่าจะเกิดจากอิทธิพลที่รายงานไว้ก่อนหน้านี้ของพื้นหลังของเมาส์ [28,72] สภาวะน้ำตาลกลูโคส 55 มิลลิโมลาร์ส่งผลให้การเจริญเติบโตลดลงและจำนวน nephron ลดลง การเปลี่ยนแปลงที่เด่นชัดนั้นมองเห็นได้ชัดเจนในเนื้อเยื่อและโครงสร้างย่อยในโกลเมอรูลี โดยมีการขยายตัวของเมทริกซ์ใต้ดินของไตที่คล้ายกับโรคไตจากเบาหวานในมนุษย์ ความคล้ายคลึงกันระหว่างการตอบสนองของไตในครรภ์ของทารกในครรภ์และผู้ใหญ่ของมนุษย์ต่อระดับน้ำตาลในเลือดสูงที่มีการขยายตัวของ ECM ที่แตกต่างกันและการปรับลดยีนของ podocyte ที่สำคัญมีความโดดเด่นและเผยให้เห็นยีนที่เกี่ยวข้องกับโรคเบาหวานที่เป็นที่รู้จักจำนวนมาก ซึ่งบ่งชี้ถึงการใช้กลไกที่คล้ายคลึงกันใน podocytes และ tubules อย่างไรก็ตาม ไม่ว่าเส้นทางพื้นฐานเดียวกันจะนำไปสู่การแยกความแตกต่างในโรคไตจากเบาหวานและการลดลงของความแตกต่างระหว่างการแยกตัวของทารกในครรภ์หรือไม่นั้นยังไม่เป็นที่ทราบแน่ชัด สิ่งที่น่าสนใจคือ การเปลี่ยนแปลงของ nonglucose ของสภาพแวดล้อมที่เป็นเบาหวาน เช่น hyper-ketonemia ยังแสดงให้เห็นด้วยว่าเป็นสื่อกลางในการก่อกำเนิดการก่อวิรูปแต่ไม่ได้จำลองแบบในแบบจำลองการเพาะเลี้ยงไต [73,74] ผลกระทบระยะยาวของภาวะน้ำตาลในเลือดสูงสามารถทำซ้ำได้ในแบบจำลองของเรา ซึ่งแสดงให้เห็นการชะลอการเจริญเติบโตอย่างต่อเนื่องหลังจากการทำให้ระดับน้ำตาลในเลือดเป็นปกติคล้ายกับรายงานก่อนหน้านี้ [10] นอกจากนี้ การวิเคราะห์ DNA methylation เผยให้เห็น DNA hypomethylation ที่ยืดเยื้อที่บริเวณที่เกิดซ้ำและการเกิด hypermethylation ที่ Ppargcla locus หลังจากการย้อนกลับไปยังตัวกลางที่มีกลูโคสต่ำ ซึ่งบ่งชี้ถึงการก่อตัวของหน่วยความจำเมตาบอลิซึมหลังจากช่วงเวลาของความเครียดจากการเผาผลาญอาหาร [30] ก่อนหน้านี้ ยีนควบคุมที่แตกต่างกันอีกจำนวนมากยังเคยแสดงให้เห็นว่ามีการควบคุมโดยอีพีเจเนติกในโรคเบาหวาน ตัวอย่างเช่น ยีน MEST ที่ถูกควบคุมขึ้นนั้นถูกพิมพ์โดยมารดาและถูกไฮโปเมทิลเลตในเบาหวานขณะตั้งครรภ์[75] S100A4 เป็นตัวบ่งชี้การดื้ออินซูลินที่แตกต่างกันในเด็กที่เป็นโรคอ้วน [76] จากยีนที่มีการควบคุมดาวน์ ESM1 และ RASGRP3 เป็นตัวอย่างของยีนที่มีเมทิลเลตต่างกันในเบาหวานขณะตั้งครรภ์ [77,78] ซึ่งแสดงให้เห็นถึงความเชื่อมโยงระหว่างโรคเบาหวานและการควบคุมอีพีเจเนติกที่เพิ่มขึ้น ดังนั้น ระบบของเราจึงเน้นย้ำถึงการดัดแปลงอีพีเจเนติกหรือการเขียนโปรแกรมของทารกในครรภ์เป็นกลไกการกำกับดูแลที่สำคัญ

เป็นที่ทราบกันดีว่าเอ็นไซม์ควบคุมอีพีเจเนติกหลายตัวเกี่ยวข้องกับทั้งมอร์โฟเจเนซิสของไตและการควบคุมการถอดรหัสในการทำงานของอวัยวะในผู้ใหญ่และโรค [30,40,79-81] การใช้การเพาะเลี้ยงไตเป็นเครื่องมือในการตรวจคัดกรอง เราค้นหาตัวดัดแปลงอีพีเจเนติกเพิ่มเติมที่มีบทบาทในการพัฒนาไตและมอร์โฟเจเนซิสของเนฟรอน Entinostat (MS-275) ลดขนาดไตให้สอดคล้องกับการลบ HDAC1 และ HDAC2 ทางพันธุกรรมที่รายงานก่อนหน้านี้ในเซลล์ต้นกำเนิด nephron หรือเซลล์ตาของไต[44,82,83] ในขณะที่การยับยั้ง HDAC8 โดย TH39 ยังทำให้เกิดการลดลงอย่างรุนแรงของการค้นพบและการขาดความแตกต่าง แต่ตัวยับยั้ง HDAC8 PCI-34051ที่มีความจำเพาะสูงนั้นไม่แสดงผลใดๆ ดังนั้นจึงชี้ไปที่ผลกระทบนอกเป้าหมายของ TH39 เช่น HDAC อื่นๆ ด้วยฟีโนไทป์ที่คล้ายกับของไตที่เพาะเลี้ยงภายใต้สภาวะที่ขาดธาตุเหล็ก ดีเฟอราซิรอกซ์และดีเฟอรอกซามีน สารยับยั้งที่ตีพิมพ์ของฮิสโตนดีเมทิเลสที่มีโดเมน JumonjiC ที่ขึ้นกับธาตุเหล็ก [50] อาจแสดงผลนอกเป้าหมายเนื่องจากการขับธาตุเหล็ก ในขณะที่ไซโปรเฮปตาดีนซึ่งเป็นตัวต่อต้านฮีสตามีนและตัวยับยั้งฮิสโตนเมทิลทรานสเฟอเรสที่ตีพิมพ์เผยแพร่แล้ว แสดงฟีโนไทป์เฉพาะตัวโดยนำไปสู่การแพร่กระจายของประชากรเซลล์ต้นกำเนิด ผลลัพธ์เพิ่มเติมชี้ให้เห็นถึงผลกระทบนอกเป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับเส้นทางการส่งสัญญาณ Wnt [48] ไลบรารีของสารยับยั้งที่ได้รับการอนุมัติจาก FDA นี้แสดงให้เห็นถึงศักยภาพในการตรวจคัดกรองอย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพสำหรับตัวดัดแปลงอีพีเจเนติก เนื่องจากใช้กรอบเวลาจำกัด สารยับยั้งที่ต้องใช้การเปิดรับแสงเป็นเวลานานจึงจะพลาดผลได้ในการตั้งค่านี้ ดังนั้น azacytidine จึงไม่แสดงผลแม้ว่าจะมีการตีพิมพ์ฟีโนไทป์ของ Dnmt1 knockout [30]

ในขณะที่ระบบการเพาะเลี้ยงไตมีการพัฒนาของไตที่แข็งแกร่ง มีหลายแง่มุมที่จำกัดการตรวจสอบหรือการตีความผลลัพธ์ในแบบจำลองการลดขนาดนี้ ประการแรก การศึกษาได้แสดงให้เห็นความแตกต่างในการพัฒนาเมาส์และมนุษย์และการแสดงออกของยีน โดยจำกัดการใช้แบบจำลองเมาส์ ต่อไป ข้อจำกัดด้านเวลาในระบบนี้อาจไม่อนุญาตให้กระบวนการที่ซับซ้อนทั้งหมดเกิดขึ้น ซึ่งอาจอธิบายสภาพแวดล้อมบางอย่างและสารยับยั้ง epigenetic ที่ไม่ส่งผลต่อการพัฒนาของไตในการศึกษานี้ นอกจากนี้ สารยับยั้งบางชนิดยังแสดงผลที่ไม่เฉพาะเจาะจงที่สามารถนำไปสู่การยับยั้งวิถีทางอื่นๆ เช่น ในกรณีของไซโปรเฮปตาดีน ซึ่งดูเหมือนว่าจะแสดงผลของมันผ่านการกระตุ้น GSK3-เบตา หรือกรณีของคีเลชั่นธาตุเหล็กโดย ดีเฟอราซิรอกซ์/ดีเฟโรซามีน นอกเหนือจากการศึกษาพิสูจน์แนวคิดนี้ หน้าจอตัวยับยั้งอีพีเจเนติกยังสามารถขยายไปยังสารยับยั้ง (เฉพาะ) ที่มากขึ้นได้ ช่วงเวลาที่ยืดเยื้อ เกณฑ์การศึกษาเพิ่มเติม เช่น จำนวนไตและไตแตกแขนงของไต และการศึกษาทรานสคริปโตมิกและอีพีเจเนติกส์

โดยสรุป การเพาะเลี้ยงไตช่วยให้สามารถจำแนกลักษณะเฉพาะของแบบจำลองโรคของมารดาได้หลายแบบ เช่น ภาวะอุณหภูมิเกิน การขาดธาตุเหล็ก และโรคเบาหวานของมารดา และการตรวจคัดกรองสารประกอบทางเภสัชวิทยา ซึ่งเป็นเวทีที่เหมาะสมสำหรับการตรวจสอบการแทรกสอดระหว่างอิทธิพลของสิ่งแวดล้อมของการพัฒนา ไตและโปรแกรมอีพีเจเนติกส์ของมัน

อ้างอิง

1. บาร์เกอร์, ดีเจต้นกำเนิดโรคของผู้ใหญ่และทารกในครรภ์ BMJ 1990, 301, 1111. [ข้ามอ้างอิง]

2. วัง X .; Garrett, MR Nephron number, ความดันโลหิตสูง และ CKD: ความเข้าใจทางสรีรวิทยาและพันธุกรรมจากแบบจำลองมนุษย์และสัตว์ Phy/ดิน. Genom.2017,49, 180-192. [CrossRef] [PubMed]

3. ฮิวจ์สัน, MDDouglas-Denton, R.; เบอร์แทรม เจเอฟ; Hoy, WE ความดันโลหิตสูง จำนวนไต และน้ำหนักแรกเกิดในชาวอเมริกันเชื้อสายแอฟริกันและคนผิวขาวในภาคตะวันออกเฉียงใต้ของสหรัฐอเมริกา ไตอินเตอร์ 2549. 69,671-678. [CrossRefl [PubMedl .]

4. เคลเลอร์, จี.; ซิมเมอร์, จี.; ห้างสรรพสินค้า G.; ริทซ์ อี.; Amann, K. Nephron number ในผู้ป่วยโรคความดันโลหิตสูงเบื้องต้นN.Engl.I. เมดิ. 2003, 348, 101-108. [CrossRef] [PubMed]

5. เลลีฟร์-เปกอเรียร์, เอ็ม; วิลาร์ เจ.; เฟอร์เรียร์ มลรัฐแมสซาชูเซตส์; Moreau, อี.; Freund, NGilbert, T.; Merlet-Benichou, C. การขาดวิตามินเอที่ไม่รุนแรงทำให้เกิดภาวะไตบกพร่องโดยกำเนิดในหนู ไต Int. 1998,54, 1455-1462. [CrossRef] [PubMed]

6. แลงลีย์-อีแวนส์ เซาท์แคโรไลนา; เวลแฮม, เอสเจ; Jackson, AA Fetal การสัมผัสอาหารโปรตีนต่ำของมารดาทำให้ไตบกพร่องและส่งเสริมความดันโลหิตสูงในหนู วิทย์ชีวิต 1999, 64, 965-974. [ข้ามอ้างอิง]

7. ซิงห์ RR; มอริตซ์ KM; เบอร์แทรม เจเอฟ; Cullen-McEwen, LA ผลของการสัมผัส dexamethasone ต่อการพัฒนา metanephric ของหนู: การศึกษาในหลอดทดลองและในร่างกาย แอมเจ Physiol.ไต. Physiol.2007, 293, F548-F554. [ข้ามอ้างอิง]

8. Cain IE: Di Giovanni, V; สมีตัน เจ; Rosenblum, ND Genetics of renal hypoplasia: ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับกลไกการควบคุมการบริจาคไต กุมาร. Res.2010, 68, 91-98. [CrossRefl

9. ลูอิส RM: หน้าผาก, AJ: Petry, CL: Ozanne.SE:Hales C, N, โปรแกรมความดันโลหิตระยะยาวโดยข้อจำกัดธาตุเหล็กในอาหารของมารดาในหนู บรา เจ. นุ. 2002, 88, 283-290. [ข้ามอ้างอิง]

10. ฮกเกะ SN; อาร์มิเทจ เจเอ; ปูเอลล์, VG; สั้น KM; โจนส์, แอล.; สมิท, ไอเอ็ม.; เบอร์แทรม เจเอฟ; Cullen-McEwen, LAAltered morphogenesis แตกแขนงของ ureteric และ nephron endowment ในลูกหลานของการตั้งครรภ์ที่เป็นเบาหวานและอินซูลิน โปรดหนึ่ง 2013, 8, e58243.

11. ฮิวจ์สัน เอ็ม; Farris, AB, 3; ดักลาส-เดนตัน อาร์.; Hov เรา; Bertram, JF จำนวนและขนาดของไตในการชันสูตรพลิกศพ: ความสัมพันธ์กับน้ำหนักแรกเกิด ไต Int.2003, 63,2113-2122. [CrossRef] [PubMed]

12. Bianchi, G.; ฟ็อกซ์ ยู.; ดิ ฟรานเชสโก้ GF; จิโอวาเนตติ, น.; Pagetti, D. การเปลี่ยนแปลงความดันโลหิตที่เกิดจากการปลูกถ่ายข้ามไตระหว่างหนูที่มีความดันโลหิตสูงตามธรรมชาติและหนูที่มีภาวะปกติ คลินิก วิทย์. มล. เมดิ. 1974, 47, 435-448. [CrossRef] [PubMed]

13. Trowell เทคนิคดัดแปลง OAA สำหรับการเพาะเลี้ยงอวัยวะในหลอดทดลอง ประสบการณ์ ความละเอียดของเซลล์ 1954, 6,246-248. [CrossRefl

14. แซ็กซอน, แอล.; Lehtonen, E.Embryonic ไตในการเพาะเลี้ยงอวัยวะ ความแตกต่าง 1987, 36,2-11 [ข้ามอ้างอิง]

15. แอนเดอร์เซ็น AM; Vastrup, P.; Wohlfahrt, เจ.; แอนเดอร์เซน, พีเค; โอลเซ่น เจ.; Melbye, M.Fever ในการตั้งครรภ์และความเสี่ยงต่อการเสียชีวิตของทารกในครรภ์: การศึกษาตามรุ่น มีดหมอ 2002, 360, 1552-1556 [ข้ามอ้างอิง]

16. เอ็ดเวิร์ด เอ็มเจ Hyperthermia เป็นสารก่อมะเร็ง: การทบทวนการศึกษาทดลองและความสำคัญทางคลินิก โตรอนโต. สารก่อมะเร็ง กลายพันธุ์ 1986, 6, 563-582. [CrossRef] [PubMed]

17. ดรีเออร์ เจดับบลิว; แอนเดอร์เซ็น น.; Berg-Beckhoff, G. การทบทวนอย่างเป็นระบบและการวิเคราะห์เมตา: ไข้ในการตั้งครรภ์และผลกระทบต่อสุขภาพในลูกหลาน กุมารเวชศาสตร์ 2014, 133, e674-e688. [ข้ามอ้างอิง]

18. วอลเลอร์ ดีเค; Hashmi, เอสเอส; ฮอยต์ AT; Duong, HT: ทิงเกอร์, เซาท์แคโรไลนา; กัลลาเวย์, มิสซิสซิปปี; โอลนีย์ อาร์เอส; ฟินเนลล์ RH; เฮชท์ เจที; แคนฟิลด์, แมสซาชูเซตส์; และคณะ รายงานของมารดาที่มีไข้จากไข้หวัดหรือไข้หวัดใหญ่ในระหว่างตั้งครรภ์ในระยะแรกและความเสี่ยงต่อความพิการแต่กำเนิดที่ไม่ใช่หัวใจ, National Birth Defects Prevention Study, 1997-2011.Birth Defects Res.2018, 110,342-351 [ข้ามอ้างอิง]

19. อาเบะ เค; Honein, แมสซาชูเซตส์; Moore, CAM โรคไข้จากมารดา การใช้ยา และความเสี่ยงของความผิดปกติของไตแต่กำเนิด ข้อบกพร่องที่เกิด Res.A Clin โมล.Teratol.2003,67, 911-918. [ข้ามอ้างอิง]