การแยกและการระบุ Phenylethanol Glycosides จาก Cistanche Deserticola

ติดต่อ: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 อีเมล:audrey.hu@wecistanche.com

บทนำ

Cistanche deserticolaรวบรวมในตำรับยาจีนเป็นลำต้นเนื้อแห้งของCistanche deserticola, พืช Orobanchaceae ซึ่งเป็นยาที่ใช้กันทั่วไปในการบำรุงไตในการแพทย์แผนจีน Cistanche deserticola มีหลายพันธุ์ และมีรายงานการวิจัยมากมายเกี่ยวกับ Cistanche salsa andCistanche tubulosaในวรรณคดี แต่มีการศึกษาเกี่ยวกับพันธุ์ต่างๆ ที่รวบรวมไว้ในตำรับยาเพียงเล็กน้อย Luo Shangfeng และคนอื่นๆ ได้รับ mannitol, 8-กรด epigastric และกรดอะมิโนจาก Cistanche deserticola เพื่อพัฒนาและศึกษา Cistanche ภาควิชาเภสัชศาสตร์ วิทยาลัยการแพทย์ซินเจียงสกัดและแยกส่วนประกอบที่ละลายน้ำได้ นั่นคือ ฟีนิลเอธานอลไกลโคไซด์ ผลการวิจัยพบว่ามีการแยกส่วนประกอบ 4 ส่วน คือเอ็กไคนาโคไซด์, คาสทาโนไซด์ เอ,แอคทีโอไซด์และ 2'-อะเซทิแลคทีโอไซด์ ส่วนประกอบข้างต้นมีผลทางเภสัชวิทยา เช่น ส่งเสริมการทำงานของไตและต่อต้านริ้วรอย.

ส่วนทดลอง

วัสดุยาทดลองถูกซื้อมาจากบริษัทวัสดุยา Urumqi และผลิตในเขต Jinghe Li Jiazheng ผู้ร่วมวิจัยของสถาบันการแพทย์ชาติพันธุ์ซินเจียงระบุสายพันธุ์ แบบจำลองของเรซินที่มีรูพรุนคือ AB-B ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์เคมีของมหาวิทยาลัย Nankai ซิลิกาเจลที่ใช้ในชั้นคอลัมน์เป็นผลิตภัณฑ์ของโรงงานเคมีทางทะเลของชิงเต่า Stephan-dex LH-20 เป็นผลิตภัณฑ์ของโรงงานผลิตยา Shanghai Changzheng แบบจำลองของเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ UV คือ Shimadzu UV-360 สเปกโตรโฟโตมิเตอร์อินฟราเรดคือ Shimadzu IR-440 แบบจำลองของเครื่องมือ H-NMR และ C-NMR คือ Bruker MSL-300 (300 megacycles)

1. การสกัดและการแยกออก

สารสกัดจาก Cistanche deserticolaโดยเอทานอลไหลย้อน 10 กก. สามครั้ง ผสมสารสกัดและเข้มข้นเพื่อวางภายใต้แรงดันที่ลดลง เติมน้ำเล็กน้อยสำหรับแขวนลอย ขจัดไขมันด้วยเอทิลอะซิเตต สกัดด้วยเอ็น-บิวทานอล รวมสารสกัด เข้มข้นให้แห้ง ภายใต้แรงดันที่ลดลง ให้เติมน้ำจำนวนเล็กน้อยเพื่อละลาย รวบรวมและทำให้ส่วนเมทานอลเข้มข้นอย่างต่อเนื่องผ่านคอลัมน์เรซินแมโครพอรัสและคอลัมน์โพลีอะไมด์ (ล้างด้วยน้ำก่อนแล้วจึงตามด้วยเมทานอล) ฟีนิลเอธานอลไกลโคไซด์ทั้งหมดได้มาจากชั้นคอลัมน์ซิลิกาเจล ด้วยการชะแบบเกรเดียนท์ของ CHCl3-MeOH (10:3 ถึง 10:5) มีการรวบรวมทั้งหมด 78 สตรีม (ประมาณ 300 มล. ต่อสตรีม) โดยที่ 16-23 เป็นสารประกอบที่หยาบกร้าน IV (2.1 กรัม) 28-42 เป็นสารประกอบดิบ III (5.4 กรัม) 48-61 เป็นสารประกอบที่ยังไม่ละเอียด II (3.2 กรัม) 65-78 เป็นสารประกอบดิบ I (5.1 กรัม) ส่วนประกอบข้างต้นถูกทำให้บริสุทธิ์โดยซิลิกาเจลคอลัมน์โครมาโตกราฟี (สภาวะการชะเหมือนกันกับด้านบน) และจากนั้นทำให้บริสุทธิ์โดยเดกซ์แทรนเจลคอลัมน์ LH-20 ชะล้างด้วย CH3OH: H20 (l:1) และรวบรวมส่วนเมทานอลเพื่อให้ได้สารประกอบโมโนเมอร์ IV (1.3g), III (3.5g), II (1.8g) และ I (3.5g)

2. บัตรประจำตัว

สารประกอบ I: ผงอสัณฐานสีเหลืองอ่อน, ปฏิกิริยา FeCl3 และ - Naphthol test positive, ซิลิกาเจลบางเลเยอร์โครมาโตกราฟี Rf ของ 0.3 (CHCl3:MeOH:H2O=6:4:1 การขยายตัว, 20 เปอร์เซ็นต์การตรวจจับสเปรย์ H2SO4), UV λ (MeOH/นาโนเมตร):244, 292, 333. IR (KBr/MAX): cm-1: 3360, 1690, 1625, 1598, 1518. H-NMR (เมทานอล- d1) δ: 1.08 (3H, D, J=6Hz, CH3), 2.79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-) , 4.29, 4.39 (1H, D, J=8Hz, โปรตอนปลายทางของกลูโคสสองตัว), 5.18 (1H, D, J=1Hz, โปรตอนปลายทาง rhamnosyl), 6.28 (1H, J{{50) }}Hz, Ar-CH=CH-), 6.5-7.1 (6H, aryl H), 7.59 (1H, D, J=16Hz, Ar-CH{ {63}}CH-) ข้อมูล C-NMR แสดงไว้ในตารางที่ 1 ปฏิกิริยาเคมีและข้อมูลสเปกตรัมข้างต้นสอดคล้องกับรายงานของเอ็กไคนาโคไซด์ในวรรณคดี ดังนั้น สารประกอบ I ถูกระบุเป็นอิชินาโคไซด์

สารประกอบ II: ผงอสัณฐานสีเหลืองอ่อน ปฏิกิริยา FeCl3 และ - การทดสอบแนฟทอลเป็นบวก และโครมาโตกราฟีแบบชั้นบางของซิลิกาเจล Rf 0.35 (สภาวะการพัฒนาและการตรวจจับเหมือนกันกับด้านบน) สเปกตรัม UV และ IR มีความคล้ายคลึงกับสเปกตรัมของเอ็กไคนาโคไซด์แต่สัญญาณ H-NMR ปรากฏขึ้น δ 3.84 (3H, s) C-NMR ปรากฏขึ้น δ 56.5 สัญญาณ แสดงว่าโครงสร้างมีเมทอกซี 1 ตัว UV λ (MeOH/นาโนเมตร):246, 290, 333. IR (KBr/MAX)ซม.-1: 3350, 1655, 1620, 1596, 1508. H-NMR(เมทานอล-d1) δ: 1.08 (3H, d, J=6Hz, หมู่เมทิลใน rhamnose), 2.86 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2- CH2-), 3.84 (3H, s, OCH3), 4.28, 4.39 (1H, d, J=8Hz, โปรตอนกลุ่มปลายกลูโคสสองตัว), 5.18 (1H, s, โปรตอนกลุ่มสิ้นสุดของ แรมโนส), 6.27 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-), 6.65-7.1 (6H, aryl H), 7.60 (1H, d , J=16Hz, Ar-CH=CH-). ดูตารางที่ 1 สำหรับข้อมูล C-NMR ข้อมูลสเปกตรัมข้างต้นสอดคล้องกับค่าวรรณกรรมของแคสทาโนไซด์ A ดังนั้น สารประกอบ II ถูกระบุว่าเป็นสารประกอบคาสทาโนไซด์ ACompound III: ผงอสัณฐานสีเหลืองอ่อน ซิลิกาเจลโครมาโตกราฟีแบบชั้นบางๆ ค่า Rf คือ 0.40 (การพัฒนา และเงื่อนไขการตรวจจับเหมือนกับด้านบน) สเปกตรัม UV และ IR นั้นคล้ายคลึงกับสเปกตรัมของอิชินาโคไซด์ มีโปรตอนขั้วกลูโคสน้อยกว่าหนึ่งตัวใน H-NMR และสัญญาณกลูโคสที่น้อยกว่าหนึ่งตัวใน C-NMR ซึ่งบ่งชี้ว่าเป็นไดแซ็กคาไรด์ UV λ (MeOH/นาโนเมตร):247, 292, 334. IR (KBr/MAX):3350, 1690, 1625, 1600, 1515. H-NMR(เมทานอล-d1) δ: 1.10 (3H, d, J{{ 83}}Hz, แรมโนส เมทิล), 2.79 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4.38 (1H, d, J{{94} }Hz, โปรตอนขั้วกลูโคส), 5.19 (1H, d, J=1Hz, โปรตอนปลายทาง rhamnose), 6.28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 6.5-7.1 (6H, aryl H), 7.59 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-) ข้อมูล C-NMR แสดงในตารางที่ 1 ข้อมูลสเปกตรัมข้างต้นสอดคล้องกับค่าวรรณกรรมของแอคทีโอไซด์ดังนั้นสารประกอบ LII จึงถูกกำหนดให้เป็นแอคทีโอไซด์.

สารประกอบ IV: ผงอสัณฐานสีเหลืองอ่อน ค่า Rf โครมาโตกราฟีแบบชั้นบางของซิลิกาเจลคือ 0.42 (เงื่อนไขการพัฒนาและการตรวจจับเหมือนกับด้านบน) ข้อมูลสเปกตรัมมีความคล้ายคลึงกันมากกับแอคทีโอไซด์. มีจุดสูงสุดการดูดกลืนแสงที่ 1735 ซม.-1 อีกหนึ่งช่วงในสเปกตรัมอินฟราเรด และ H-NMR แสดงสัญญาณจากอะซีติลเมทริกซ์ที่ δ1.98(3H.S) และ C-NMR แสดงสัญญาณจากกลุ่มคาร์บอนและเมทิลของ δ171.5 และ 20.9. ตามกฎของการกำจัดกลูโคซิเลชั่น อะซิติเลชั่นตั้งอยู่บนกลุ่มน้ำตาลไฮดรอกซิล 2 ' λ (MeOH/นาโนเมตร):247, 292, 333. IR (KBr/MAX):3430, 1725, 1700, 1630, 1605. 1525. H-NMR(เมทานอล-d1) δ: 1.08 (3H, d, J{ {27}}Hz, แรมโนส เมทิล), 1.98 (3H, s. OAc), 2.70 (2H, t, J=7Hz, Ar-CH2-CH2-), 4.50 (1H, d=8Hz, โปรตอนขั้วกลูโคส), 5.19 (1H, d, โปรตอนปลายทาง rhamnose), 6.28 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH -), 6.5-7.1 (6H, aryl H), 7.60 (1H, d, J=16Hz, Ar-CH=CH-) ข้อมูล C-NMR แสดงในตารางที่ 1 ข้อมูลสเปกตรัมข้างต้นสอดคล้องกับค่าวรรณกรรมของ 2 '- Acetylacteoside ดังนั้นสารประกอบ IV ได้รับการยืนยันว่าเป็น 2' - Acetylacteoside