ในชุดยาเสริมฤทธิ์กันหน้าจอที่ใช้ซิลิโคจากยาสมุนไพร: กรณีที่ใช้ Cistanche Tubulosa

กรุณาส่งอีเมลtina.xiang@wecistanche.comหรือติดต่อ WhatsApp: บวก 8618283608063 สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม

การอักเสบของระบบประสาทเป็นลักษณะการแสดงละครตอบสนองการอักเสบที่ซับซ้อนของเนื้อเยื่อระบบประสาทส่วนกลาง ข้อจำกัดของการรักษาในปัจจุบันสำหรับการอักเสบของเส้นประสาทเป็นผลข้างเคียงที่รู้จักกันดีในการทดลองทางคลินิกของการรักษาด้วยยาเดี่ยว การบำบัดด้วยยาผสมเป็นกลยุทธ์ที่มีแนวโน้มดีที่จะเอาชนะกลไกการชดเชยและผลกระทบจากเป้าหมาย อย่างไรก็ตาม การค้นพบยาเสริมฤทธิ์ร่วมกันจากยาสมุนไพรนั้นหาได้ยาก จากกรณีศึกษาที่นำไปใช้ได้สำเร็จ เราจึงดำเนินการตรวจสอบการผสมยาที่มีประสิทธิผลตามเภสัชวิทยาของระบบในกลุ่มสารประกอบจาก Cistanche tubulosa (SCHENK) R. WIGHT ประการแรก สารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่เป็นไปได้ 63 ชนิด เป้าหมายโดยตรงและโดยอ้อม 133 รายการที่เกี่ยวข้องจะถูกคัดกรองโดยการประเมินความเหมือนยาร่วมกับกระบวนการกำหนดเป้าหมายยา ประการที่สอง เครือข่าย Compound-Target ถูกสร้างขึ้นเพื่อรับชุดข้อมูลสำหรับการทำนายการรวมกันของยา เราแสดงรายการยาผสม 10 อันดับแรกที่ใช้โดยอัลกอริธึม Probability Ensemble Approach (PEA) และเครือข่าย Compound-Target-Pathway จะถูกสร้างโดยสารประกอบ 12 ตัวของชุดค่าผสม เป้าหมาย และเส้นทางเพื่อค้นหาการกระทำทางเภสัชวิทยาที่เกี่ยวข้อง ในที่สุด แนวทางการบูรณาการทางพยาธิวิทยาได้รับการพัฒนาขึ้นเพื่ออธิบายผลการรักษาของสมุนไพรในกระบวนการทางชีววิทยาที่เกี่ยวข้องกับลักษณะทางพยาธิวิทยาที่แตกต่างกัน โดยรวม วิธีการนี้อาจจัดให้มีช่องทางที่มีประสิทธิผลสำหรับการพัฒนายารักษาโรคแบบผสมผสาน

เกี่ยวกับระบบประสาทการอักเสบของระบบประสาทถูกกำหนดให้เป็นการกระทำที่ประสานกันของเซลล์ภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดและที่ปรับตัวได้ เซลล์หลอดเลือด และเซลล์ประสาทที่ถูกกระตุ้นโดยสภาวะทางพยาธิวิทยาและการทำงานของเซลล์ประสาทที่เพิ่มขึ้นในระบบประสาทส่วนกลาง (CNS) มีแนวโน้มที่จะมีบทบาทในการเตรียม CNSอักเสบปฏิกิริยาจากสภาวะต่างๆ เช่น ความเจ็บปวด ความเครียดทางจิตใจ และโรคลมบ้าหมู หรือกลายเป็นปัจจัยก่อโรคในโรคทางระบบประสาท ตัวแทนปัจจุบันสำหรับการรักษา neuroinflammation ส่วนใหญ่เป็นของ monotherapy รวมทั้ง dopamine, somatostatin, neuropeptide, adenosine เป็นต้น อย่างไรก็ตาม ตัวอย่างเช่น การใช้ยาทั่วไปแต่ยาเก่า สารยับยั้ง COX, ยาต้านการอักเสบที่ไม่ใช่สเตียรอยด์ (NSAIDs) อาจทำให้เกิดผลข้างเคียงที่ไม่พึงประสงค์ แผลในทางเดินอาหาร หรือความเสี่ยงต่อโรคหัวใจและหลอดเลือด1,2 และผลการทดลองทางคลินิกยังไม่เป็นที่พอใจโดยเฉพาะอย่างยิ่ง3, 4 ดังนั้นจึงมีความจำเป็นที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะสำหรับการรักษาโรคประสาทอักเสบแบบใหม่

การบำบัดแบบใหม่ของยาผสมผสานอาจเป็นกลยุทธ์ที่พุ่งพล่านเพื่อตอบสนองความต้องการของการพัฒนายาชนิดใหม่ เช่นเดียวกับการเอาชนะอุปสรรคในการรักษาโรคที่ซับซ้อน การผสมผสานของการรักษาแบบหลายองค์ประกอบสามารถบรรลุข้อกำหนดข้างต้น โดยใช้ยาตั้งแต่สองตัวขึ้นไปร่วมกัน5 โดยมีข้อดีตามรายการ: ประสิทธิภาพที่สูงขึ้น การต้านทานข้ามน้อยที่สุด ปริมาณต่ำในขณะที่ผลข้างเคียงน้อยกว่า และความเป็นพิษน้อยกว่าเมื่อเทียบกับยาเดี่ยว ตัวแทน6. มีการใช้ในการรักษาโรคที่ซับซ้อน7,8 มาเกือบ 30 ปีแล้ว การบำบัดด้วยยาร่วมที่น่าสนใจยังถูกนำมาใช้ในการวิจัยโรคทางระบบประสาท เช่น การรวมกันของ glimepiride และ ibuprofen สามารถลดการอักเสบในโรคอัลไซเมอร์ (AD) 9 ได้อย่างมีประสิทธิภาพ หรือ ketamine/atropine อาจลดการแสดงออกของโปรตีน pro-inflammatory ในหนูที่เป็นโรคลมชัก10 การผสมผสานยาเสริมฤทธิ์กันอาจนำแรงบันดาลใจใหม่ในการติดตามการรักษาที่มีประสิทธิภาพสำหรับการอักเสบของระบบประสาท. ดังนั้นเราจะแยกฮาร์ดน็อตเพื่อให้ได้ยาผสมที่ดีที่สุดได้อย่างไร?

1Key Laboratory of Resource Biology and Biotechnology in Western China, Ministry of Education, School of Life Sciences, Northwest University, Xi'an, China. 2Lab of Systems Pharmacology, Center of Bioinformatics, College of Life Science, Northwest A&F University, Yangling ประเทศจีน 3State Key Laboratory of New-tech for Chinese Medicine Pharmaceutical Process, Jiangsu Kanion Parmaceutical Co. Ltd, Lianyungang ประเทศจีน Jianling Liu และ Jinglin Zhu มีส่วนร่วมในงานนี้อย่างเท่าเทียมกัน จดหมายโต้ตอบและคำขอวัสดุควรส่งถึง CZ

Jianling Liu1, Jinglin Zhu1, Jun Xue1, Zonghui Qin1, Fengxia Shen1, Jingjing Liu1, Xuetong Chen2, Xiaogang Li1, Ziyin Wu2, Wei Xiao3, Chunli Zheng1 & Yonghua Wang1

ในปัจจุบัน วิธีการคัดแยกยาที่มีอยู่ในปัจจุบันมีดังนี้ การสำรวจคู่ยาในหลอดทดลองอย่างเป็นระบบ เช่น วิธีการคัดกรองปริมาณงานสูง11 และ 'การตรวจคัดกรองสารก่อภูมิแพ้แบบทวีคูณ' (MuSIC)12 หรือการประเมินยาแบบคู่ร่วมกับยาขนาดใหญ่ -ขนาดทดลอง13,14. อย่างไรก็ตาม การใช้กำลังคน ทรัพยากรธรรมชาติ และเวลาของการทดสอบเชิงประจักษ์ที่ลำบากมากเกินไป อาจเป็นปัญหาที่หลีกเลี่ยงไม่ได้ในการประเมินการผสมยาที่มีประสิทธิภาพ ในการตอบสนองต่อการเอาชนะข้อบกพร่อง แนวทางที่อิงจากการวิเคราะห์เครือข่าย โดยเฉพาะอย่างยิ่งเครือข่ายปฏิสัมพันธ์ทางพันธุกรรม15 ข้อมูลชีววิทยาของระบบเคมี16 และข้อมูลระดับโมเลกุลและเภสัชวิทยา17 ได้ปรากฏขึ้นเพื่อการค้นพบยาแบบผสมผสาน นอกจากนี้ กลุ่มผู้ตรวจสอบที่เพิ่มขึ้น 18,19 ได้เสนอแนวทางเครือข่ายแบบใหม่เพื่อทำนายชุดค่าผสมที่เหมาะสมที่สุด และเสนอการตรวจสอบความถูกต้องของการทดลองที่สอดคล้องกันในระหว่างนี้ ดังนั้นการรวมการทำนายเครือข่ายกับการตรวจสอบการทดลองอาจเป็นเทรนด์ใหม่ในการทำนายแบบผสมผสาน

ยาสมุนไพรเกี่ยวข้องกับสูตรจำนวนมาก (Fang-Ji ในภาษาจีนกลาง) และส่วนผสมทางเคมี ซึ่งเป็นฐานข้อมูลผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ เพื่อให้สามารถหาเบาะแสที่เป็นนวัตกรรมใหม่ ข้อมูลพื้นฐานทางชีววิทยาสำหรับการพัฒนายาผสม เช่น ศาสตราจารย์ Li20,21 และศาสตราจารย์ Liu22 นำเสนอวิธีการวิเคราะห์แบบองค์รวมตามชีววิทยาแบบบูรณาการเพื่อถอดรหัสกลไกระดับโมเลกุลของยาสมุนไพร: ยาเม็ด Liu-Wei-Di-Huang หรือการฉีดลดขนาด ในงานก่อนหน้านี้ เราพบว่าไม่เพียงแต่สมุนไพรที่เป็นตัวแทนสองชนิด Lonicera japonica และ Fructus Forsythia เท่านั้นที่แสดงผลแบบเสริมฤทธิ์กันต่อไข้หวัดใหญ่หรือการติดเชื้อ23 แต่ยังรวมถึงสารประกอบรูตินและอะเมนทอฟลาโวนยังให้ผลเสริมฤทธิ์กันในการป้องกันภาวะซึมเศร้า24

ในงานปัจจุบันของเรา เราได้พัฒนาวิธีการทางเภสัชวิทยาของระบบเพื่อค้นหาการผสมผสานยาที่เสริมฤทธิ์กันระหว่างสารประกอบจากสมุนไพรCistanche tubulosa(SCHENK) R. WIGHT ได้เสนอขั้นตอนต่อไปนี้: ประการแรก เราเลือกสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพผ่านการทำนายความคล้ายคลึงของยา ซึ่งใช้เป็นเหยื่อในการจับปลาเป้าหมายที่เกี่ยวข้อง จากนั้น ด้วยแรงบันดาลใจจากกระบวนทัศน์ที่อิงตาม "เป้าหมายเครือข่าย" เพื่อจัดลำดับความสำคัญของการรวมตัวแทนเสริมในวิธีที่ให้ปริมาณงานสูง25 เราได้รับการผสมผสานยาที่มีประสิทธิภาพระหว่างสารประกอบที่เป็นไปได้ตามอัลกอริทึมภายในองค์กรที่เรียกว่า Probability Ensemble Approach (PEA)26 ด้วย ประสิทธิภาพการฝึกอบรมสูง การบังคับใช้อย่างกว้างขวาง และดัชนีเชิงปริมาณสองรายการเพื่ออธิบายคุณสมบัติของชุดค่าผสมยา สุดท้าย เราใช้เป้าหมายที่ได้รับและสารประกอบของคู่ตัวเลือกเพื่อสร้างเครือข่าย/เส้นทาง จากนั้นทำการวิเคราะห์เพื่อเข้ารหัสกลไกของCistanche tubulosaบนการอักเสบของระบบประสาทแบบองค์รวม ตัวอย่างเช่น เป็นครั้งแรกในการคัดเลือกการผสมยาที่มีประสิทธิภาพจากผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติตามเภสัชวิทยาของระบบผ่านการผสานรวมวิธีการคำนวณและการตรวจสอบเชิงทดลองเพื่อรับรองความเชื่อถือได้ของการคาดคะเน เราเชื่อว่าสิ่งนี้อาจช่วยในการปรับเปลี่ยนในแบบของคุณการรักษาโรคประสาทอักเสบปรับปรุงความเข้าใจของเราเกี่ยวกับการพัฒนาการป้องกันระบบประสาทที่มีประสิทธิภาพ และจะช่วยในการวิจัยพรีคลินิกในอนาคต

ผลลัพธ์

เป้าหมายของ Cistanche tubulosa

เพื่อให้ได้เป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของระบบประสาทอันดับแรกเราบรรลุส่วนผสมในCistanche tubulosa(เช็ง)อาร์ WIGHT โดยการค้นหาฐานข้อมูล TCMSP (http://lsp.nwu.edu. cn/) ซึ่งส่งผลให้มีสารประกอบ 103 ชนิด (ตารางเสริม S1 ดูวัสดุและวิธีการ) จากนั้น เราวิเคราะห์ความคล้ายคลึงของยาโดยใช้แบบจำลองการทำนาย DL ที่สร้างขึ้นในงานก่อนหน้าของเรา (ดูวัสดุและวิธีการ) ด้วยวิธีนี้ เราบรรลุสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่เป็นไปได้ 63 รายการ (ตารางเสริม S2) ด้วยดัชนี DL มากกว่าหรือเท่ากับ 0.18. ต่อจากนั้น โดยใช้อัลกอริธึม Sys DT และ WES เราระบุเป้าหมาย 117 เป้าหมายของสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่มีศักยภาพเหล่านี้ ในที่สุด เป้าหมายที่เป็นไปได้ 43 รายการ (ตารางเสริม S3) ที่เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการอักเสบของระบบประสาทจะถูกดึงมาหลังจากลบเสียงรบกวนและข้อผิดพลาดผ่านการทำแผนที่ 117 เป้าหมายของสารประกอบกับฐานข้อมูล CTD

การวิเคราะห์การเพิ่มสมรรถนะของ GOBP สำหรับเป้าหมาย

เพื่อตรวจสอบว่าโปรตีนที่เป็นเป้าหมายของสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพมีความเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับ .หรือไม่การอักเสบของระบบประสาทเราทำการวิเคราะห์การตกแต่ง GOBP ผ่านเป้าหมายการทำแผนที่กับ DAVID รูปที่ 1 แสดงแผนผัง GO ที่แสดงผลลัพธ์ของเงื่อนไข GOBP ที่ได้รับการเสริมสมรรถนะอย่างมีนัยสำคัญ (ค่า P น้อยกว่าหรือเท่ากับ 0.05) โดยที่เป้าหมายถูกแบ่งออกเป็น 20 กลุ่มที่แตกต่างกัน เช่น การควบคุมเชิงบวกของกล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด การเพิ่มจำนวนเซลล์และการควบคุมเชิงบวกของการย้ายถิ่นของเม็ดเลือดขาว ในบรรดากลุ่มเหล่านี้ การส่งสัญญาณไซแนปติกทางเคมีอักเสบการตอบสนอง การส่งสัญญาณของเซลล์ และอื่นๆ ล้วนเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการอักเสบของระบบประสาท. ตัวอย่างเช่น การเปลี่ยนแปลง synaptic ที่เกิดขึ้นระหว่างโรคเกี่ยวกับระบบประสาทส่วนใหญ่มักเป็นสื่อกลางโดยอักเสบไซโตไคน์ที่ปล่อยออกมาจากการแทรกซึมของทีเซลล์และจากไมโครเกลียที่ถูกกระตุ้น และอย่างน้อยก็มีส่วนรับผิดชอบต่อพยาธิสภาพของเดนไดรต์ที่ไม่สามารถกลับคืนสภาพเดิมได้ (โดยรวมแล้ว การสังเกตเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าเป้าหมายที่คาดการณ์ไว้อาจมีส่วนช่วยในการรักษาการอักเสบของระบบประสาท.

การสร้างและวิเคราะห์เครือข่ายแบบผสมเป้าหมาย

โดยทั่วไป การรักษาแบบผสมผสานที่เป็นไปได้และมีประสิทธิภาพคือการผสมผสานของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่มีคุณสมบัติทางเภสัชจลนศาสตร์ในอุดมคติ ซึ่งสามารถปรับสมดุลเครือข่ายของโรคด้วยการควบคุมเป้าหมายเฉพาะ ดังนั้นเราจึงสร้างเครือข่ายเป้าหมายผสมแบบคงที่เพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์เชิงทอพอโลยี ดังที่แสดงในรูปที่ 2 เครือข่ายแบบผสม-เป้าหมายแบบสองส่วน (CT) แสดงปฏิสัมพันธ์ 482 อันระหว่างสารประกอบ 63 ตัวและเป้าหมาย 43 ตัวในลักษณะที่ดึงดูดสายตา เราวิเคราะห์ระดับของโหนดในเครือข่ายเป้าหมายแบบผสม ซึ่งส่งผลให้ระดับเฉลี่ยต่อสารประกอบเท่ากับ 11.209 และ 7.651 ต่อเป้าหมาย ตามลำดับ เราสังเกตว่าในสารประกอบ 63 ชนิดนั้น 38 ชนิดปรับเป้าหมายมากกว่า 7 รายการ (มากกว่าระดับเฉลี่ย) ซึ่งแสดงให้เห็นถึงผลเสริมฤทธิ์กันที่อาจเกิดขึ้นในหมู่พวกเขา

ตัวอย่างเช่น เข็มฉีดยา (mol30) โต้ตอบกับเป้าหมายจำนวนมากที่สุด ซึ่งอาจมีบทบาทศูนย์กลางในเครือข่าย น่าสนใจ การศึกษาพิสูจน์ว่าเข็มฉีดยาที่เป็นองค์ประกอบฟีนอลิกที่แยกได้จาก Euonymus alatus(Thunb.) Sieb (Celastraceae) มีฤทธิ์ต้านการอักเสบโดยยับยั้ง NO Production2.2'-acetylacteoside (mol42) ที่ควบคุมเป้าหมายที่แตกต่างกัน 10 แบบ(ดีกรี=10) ในกลุ่มเป้าหมายเหล่านี้ HSPB1 (หรือที่เรียกว่า HSP27) เป็น ตัวอย่างเช่น เป็นโมเลกุลพี่เลี้ยงที่แสดงคุณสมบัติป้องกันระบบประสาทในหลายโรคและแบบจำลองการบาดเจ็บ สำหรับ verbascoside (mol33) สมบัติทางประสาทของสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพนี้เกี่ยวข้องกับการปรับปัจจัยการถอดรหัสและส่งผลให้การแสดงออกของยีนเปลี่ยนแปลงไป ซึ่งส่งผลให้เกิดการลดระดับของความเสียหาย 30 เป็นที่น่าสังเกตว่าแม้ว่าคุณสมบัติโทโพโลยีของเครือข่ายจะไม่เอนเอียงไปทางเอไคนาโคไซด์ (mol41, ดีกรี=7) แต่ก็เป็นสารประกอบออกฤทธิ์ทางปากแบบใหม่ที่มีศักยภาพในการควบคุมการอักเสบของเส้นประสาทและสัญญาณที่เกี่ยวข้องในโรคพาร์กินสันและอาจให้สิ่งใหม่ โอกาสในการรักษาทางคลินิก เมื่อนำมารวมกัน ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าสารออกฤทธิ์ที่มีศักยภาพที่คัดกรองแล้วทั้งหมดเกี่ยวข้องกับการอักเสบของเส้นประสาทและถือได้ว่าเป็นชุดข้อมูลสำหรับการทำนายการรวมกันของยา

การสร้างและวิเคราะห์เครือข่ายแบบผสม-เป้าหมาย-เส้นทาง

โดยใช้อัลกอริธึมกฟภ. เราจะได้ยา 10 ชนิด (ตารางที่ 1) ซึ่งเกี่ยวข้องกับสารประกอบ 12 ชนิด ยาผสมเหล่านี้ล้วนมีความน่าจะเป็นในการทำงานร่วมกันสูง ซึ่งแสดงถึงความเป็นไปได้ที่จะกระตุ้นการทำงานร่วมกันระหว่างสารประกอบสองชนิด ดังนั้น สารประกอบเหล่านี้จึงถือเป็นสารพื้นฐานทางเภสัชวิทยาของ Cistanche tubulosa ในระดับหนึ่ง จากข้อมูลเป้าหมายของสารประกอบเหล่านี้และวิถีทางที่ได้จาก DAVID เราสร้างเครือข่ายเส้นทางผสมเป้าหมาย (CTP) เพื่อให้เข้าใจกลไกระดับโมเลกุลของสารประกอบเหล่านี้ในเบื้องต้น เครือข่ายเส้นทางแบบผสม-เป้าหมาย-เส้นทางที่เป็นผลประกอบด้วย 47 โหนดและ 99 ขอบ ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 3 สารประกอบเหล่านี้สามารถทำหน้าที่ไม่เพียงแต่กับโปรตีนของต้นน้ำเท่านั้น แต่ยังรวมถึงปลายน้ำของวิถีทางที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของเส้นประสาทด้วย โดยเฉพาะอย่างยิ่งตัวบ่งชี้โดยตรงของตัวบ่งชี้การอักเสบ

โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สารประกอบส่วนใหญ่มุ่งเป้าไปที่โปรตีนต้นน้ำ เช่น HSPB1, HTR2A, NTSRl และอื่นๆ ซึ่งบ่งชี้ถึงการควบคุมระดับมหภาคของสารประกอบเหล่านี้สำหรับการรักษาโรคประสาทอักเสบ ตัวอย่างเช่น สารประกอบอิชินาโคไซด์(mol41) กำหนดเป้าหมายวิถีทาง VEGF ผ่านทางโปรตีน HSPB1 (รูปที่ 1) โชคดีที่การศึกษาแสดงให้เห็นว่า HSPB1 มีคุณสมบัติในการป้องกันเซลล์ที่สำคัญในหลายรูปแบบของโรคทางระบบประสาท ในร่างกาย หรือ ในหลอดทดลอง และอาจมีบทบาทในการต้านการอักเสบโดยควบคุมวิถีการส่งสัญญาณของปัจจัยนิวเคลียร์ KB(NF-KB) 435 นอกจากนี้ การศึกษายังแสดงให้เห็นว่า R-Ras สามารถควบคุมกิจกรรมการสร้างเส้นเลือดใหม่ของเซลล์บุผนังหลอดเลือดในบางส่วนผ่านการยับยั้งไคเนสโปรตีนที่กระตุ้นด้วยไมโทเจน p38 (p38 MAPK) -HSPB1 ของวิถีการส่งสัญญาณ VEGF*

เราสามารถให้สารประกอบทูบูโลไซด์ A (mol56) กำหนดเป้าหมายเส้นทางการส่งสัญญาณแคลเซียมผ่านโปรตีน NTSRl ในเครือข่าย เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่าแคลเซียมไอออน (Ca² plus ) เป็นตัวส่งสารตัวที่สองในเซลล์ระบบภูมิคุ้มกัน การลดลงของกิจกรรม synaptic หรือการเพิ่มสัญญาณของตัวรับ N-methyl-D-aspartic acid (NMDA) ที่เพิ่มขึ้นอาจนำไปสู่การสร้างแคลเซียมผิดปกติของแคลเซียม 37,38 ซึ่งจะเป็นการเพิ่มการเสื่อมสภาพของระบบประสาทและความผิดปกติทางสติปัญญา นอกจากนี้ โปรตีนเป้าหมาย NTSRl ยังเป็นสมาชิกของซูเปอร์แฟมิลีขนาดใหญ่ของ G-protein coupled receptors และการส่งสัญญาณจะถูกสร้างขึ้นผ่านการจับ G-proteins ที่อาจกระตุ้นระบบสารที่สองของ phosphatidylinositol-calcium และ MAP kinases9 ที่ปลายน้ำ

อีกตัวอย่างหนึ่งคือว่าสารประกอบ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์(mol42) มุ่งเป้าเส้นทางการส่งสัญญาณ GnRH ผ่านทางโปรตีน PRKCD PRKCD หนึ่งในไอโซฟอร์มของ PKC เป็นตัวกลางสำคัญของการกระตุ้นโปรตีนไคเนสที่ควบคุมภายนอกเซลล์1/2 MAPK(ERK1/2 MAPK), c-Jun N-terminal โปรตีนไคเนส MAPK(JNK MAPK) และ p38 MAPK โดย gonadotropin- การปล่อยฮอร์โมน (GnRH)0 และเนื่องจากกระบวนการหลักในเครือข่ายการส่งสัญญาณที่กระตุ้นด้วย GnRH MAPK ดาวน์สตรีมและเมแทบอไลต์ของกรดอาราคิโดนิก (AA) สามารถผลิตได้อักเสบโปรตีน COX-2 สำหรับ kankanoside O (mol18) และ syringin (mol30) พวกมันมีปฏิกิริยาโดยตรงกับโปรตีนปลายน้ำ PTGS2, NOS2 และอื่น ๆอักเสบตัวชี้วัด ซึ่งเป็นภาพสะท้อนโดยสัญชาตญาณของประสิทธิภาพของสารประกอบ การศึกษาแสดงให้เห็นว่า syringin สามารถยับยั้งการผลิต tumor necrosis factor-c (TNF-c) ในเซลล์ RAW264.7 ที่กระตุ้นด้วย Lipopolysaccharides (LPS) และการศึกษาอื่น ๆ แสดงให้เห็นว่า svringin สามารถลดความเข้มข้นของ NO และกิจกรรม NOS หรือการผลิต prostaglandin E2 ได้ Isoacteoside (mol43) เป้าหมาย MMP9 เป็นผู้เล่นที่สำคัญในระบบประสาทส่วนกลางและจะเป็นเอนไซม์สื่อกลางที่คาดเดาได้สำหรับความผิดปกติของระบบประสาทเช่นโรคจิตเภทและโรคสองขั้ว5, การเสื่อมสภาพของ NF-KB และ phosphorylation ของ p38, ERK1/2, JNK MAPK หรือ Akt (Protein Kinase B) ของเส้นทางการส่งสัญญาณต้นน้ำสามารถปรับการแสดงออกของยีน MMP9 และการยับยั้ง MMP9 ที่อาจลดการแสดงออกของเซลล์ที่ไม่ทำงานไนตริกออกไซด์ที่เหนี่ยวนำ (iNOS) 46-48

การวิเคราะห์เส้นทาง

"เส้นทางการอักเสบของระบบประสาท" ที่รวมเข้าไว้ด้วยกันถูกสร้างขึ้นโดยการรวมเส้นทางหลักที่ได้จากการวิเคราะห์เครือข่ายเส้นทางผสมเป้าหมาย ซึ่งรวมถึงเส้นทางของโรคอัลไซเมอร์ เส้นทางการส่งสัญญาณแคลเซียม เส้นทางการส่งสัญญาณ GnRH เส้นทางการส่งสัญญาณ VEGF และไซแนปส์เซโรโทนเนอร์จิก จาก 43 เป้าหมาย สามารถระบุ 19 เป้าหมายบน "เส้นทางการอักเสบของเส้นประสาท" ดังที่แสดงในรูปที่ 4 Cistanche tubulosa แสดงถึงเป้าหมายของสารประกอบออกฤทธิ์ที่กระจายอยู่ใน "เส้นทางการอักเสบของเส้นประสาท" "เส้นทางการอักเสบของระบบประสาท" แบ่งออกเป็น 13 โมดูลการรักษาที่แตกต่างกัน เช่น การตายของเซลล์ การตายของเซลล์ การตายของเซลล์ การอักเสบ และการป้องกันระบบประสาท ในการศึกษานี้ เรานำโมดูลการตายของเซลล์ การอักเสบ และการป้องกันระบบประสาทมาเป็นตัวอย่างเพื่อทำให้กลไกของ Cistanche tubulosa สำหรับการอักเสบของระบบประสาทชัดเจนขึ้น

โมดูลการตายของเซลล์ เป้าหมายที่อยู่ในเส้นทางของโรคอัลไซเมอร์ส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับกระบวนการตายของเซลล์ ซึ่งบ่งชี้ว่าการตายของเซลล์มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับการอักเสบของเส้นประสาท การศึกษาแสดงให้เห็นว่าการอักเสบของเส้นประสาทที่เกิดจาก microglia มีส่วนทำให้เซลล์ประสาทตาย ซึ่งไม่ได้จำกัดเฉพาะโรคแต่เกี่ยวข้องกับโรคต่างๆ เช่น ขาดเลือด 4 โรคพาร์กินสัน และโรคอัลไซเมอร์5l ดังแสดงในรูปที่ 4

เป้าหมาย APP, GRIN2B และ MAPT ถูกควบคุมโดยสารประกอบออกฤทธิ์จาก Cistanche tubulosa ซึ่งบ่งชี้ว่าพวกมันสามารถยับยั้งการตายของเซลล์และด้วยเหตุนี้จึงเสนอการรักษาสำหรับการอักเสบของเส้นประสาท สิ่งที่น่าสนใจคือ โดเมนภายในเซลล์ของ APP บั่นทอนการสร้างเซลล์ประสาทของผู้ใหญ่ในหนูดัดแปลงพันธุกรรมโดยการกระตุ้นการสร้างเซลล์ประสาท52 การไร้ความสามารถของ MAPT จะควบคุมไดนามิกของไมโครทูบูลของเซลล์ประสาทอย่างเหมาะสม และทำให้เป็นสื่อกลางในการตายของเซลล์ประสาท53 ทั้งหมดนี้บ่งชี้ว่า Cistanche tubulosa อาจรักษาการอักเสบของเส้นประสาทโดยการยับยั้งการตายของเซลล์

โมดูลการอักเสบ

คำว่า neuroinflammation คือปฏิกิริยาการอักเสบใน CNS เพื่อตอบสนองต่อกิจกรรมของเซลล์ประสาท1 ในการศึกษานี้ เราตรวจพบเส้นทางการส่งสัญญาณ GnRH และการมีส่วนร่วมของเส้นทางการส่งสัญญาณ VEGF ในโมดูลการอักเสบ (รูปที่ 4) ตัวอย่างเช่น MMP2 ในเส้นทางการส่งสัญญาณ GnRH เป็นของตระกูล MMP ซึ่งแสดงออกในสถานการณ์ทางสรีรวิทยาและสภาวะทางพยาธิวิทยาที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบ และ MMPs ควบคุมการทำงานหลายอย่างที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบ รวมถึงการดูดซึมและการออกฤทธิ์ของไซโตไคน์ที่อักเสบและคีโมไคน์54 นอกจากนี้ เส้นทางการส่งสัญญาณ VEGF สามารถนำไปสู่การสร้าง NOS2 ยิ่งไปกว่านั้น ยังมีส่วนร่วมในการตอบสนองต่อการอักเสบเฉียบพลันต่อ LPS โดยกลไกหลายอย่าง: การมีส่วนร่วมในการส่งสัญญาณไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบและการเปลี่ยนแปลงการแสดงออกของยีนต่างๆ ที่ส่งผลต่อการตอบสนองต่อการอักเสบ-ภูมิคุ้มกันต่อ LPS55. โดยรวมแล้ว สิ่งเหล่านี้บ่งชี้ว่า Cistanche tubulosa อาจรักษา neuroinflammation โดยการควบคุมระบบการอักเสบ

โมดูลป้องกันระบบประสาท

การป้องกันระบบประสาทเป็นกลไกและกลยุทธ์ที่ใช้เพื่อป้องกันการบาดเจ็บหรือความเสื่อมของเส้นประสาทในระบบประสาทส่วนกลางหลังจากเกิดความผิดปกติเฉียบพลัน (เช่น โรคหลอดเลือดสมองหรือการบาดเจ็บ/การบาดเจ็บของระบบประสาท) หรือเป็นผลมาจากโรคทางระบบประสาทเรื้อรัง (เช่น พาร์กินสัน อัลไซเมอร์ และโรคปลอกประสาทเสื่อมแข็ง) เป้าหมายของการป้องกันระบบประสาทคือการจำกัดการทำงานผิดปกติของเส้นประสาท/การเสียชีวิตหลังจากได้รับบาดเจ็บที่ระบบประสาทส่วนกลาง และพยายามรักษาความสมบูรณ์สูงสุดที่เป็นไปได้ของการโต้ตอบของเซลล์ในสมองซึ่งส่งผลให้การทำงานของระบบประสาทไม่ถูกรบกวน ดังที่เห็นได้จากรูปที่ 4 เป้าหมายบางอย่างบนเส้นทางไซแนปส์ของ Serotonergic มีส่วนเกี่ยวข้องในการทำงานของการป้องกันระบบประสาท ตัวอย่างเช่น การผลิตพรอสตาแกลนดินผ่าน PTGS1 และ PTGS2 (หรือที่รู้จักในชื่อ COX-1 และ COX-2) เป็นตัวกลางสำคัญในการกระตุ้นกลไกการต้านการอักเสบและการแก้ปัญหาที่แปลกใหม่56 การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้แสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของยีนของ ADCY5 ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่กระตุ้นการสร้าง cAMP57 ​​นั้นลดลงโดยโปรโมเตอร์เมทิลเลชันในเซลล์ HCC ของมนุษย์ที่เหนี่ยวนำ COX-2-58 จากการวิเคราะห์ข้างต้น เราคาดการณ์ว่าการสะสม COX-2 อาจส่งผลต่อการหลั่งของ sAPP ความแตกแยกของ APP ที่แยกออกโดย -secretase ที่ถูกมอดูเลตโดย cAMP และออกแรงกระตุ้นการทำงานของระบบประสาท 59,60 ต่อไป ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่าการป้องกันระบบประสาทมีบทบาทสำคัญในการรักษาโรคประสาทอักเสบ

การตรวจสอบการทดลอง

ความมีชีวิตของเซลล์ BV2 microglial ที่บำบัดโดยสารประกอบ

เซลล์ไมโครเกลีย BV2(8×104 เซลล์/มล.) ถูกป้อนด้วยความเข้มข้น 37.5 ถึง 300 ไมโครโมลาร์ต่ออาหารเลี้ยงเชื้อมิลลิลิตร โดยไม่มีซีรัมของสารประกอบทั้งสี่เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เราถือว่าเซลล์มีชีวิตของกลุ่มควบคุมที่เพาะเลี้ยงในกรณีที่ไม่มีซีรัมที่มี DMSO น้อยกว่า 0.1 เปอร์เซ็นต์เป็น 100 เปอร์เซ็นต์ (รูปที่ 5(โฆษณา)) เห็นได้ชัดว่าไม่พบความเป็นพิษต่อเซลล์ของเซลล์ในปริมาณที่กำหนดของกลุ่ม

การตรวจสอบการทำงานร่วมกันของยาและฤทธิ์ต้านการอักเสบที่อาจเกิดขึ้นในหลอดทดลอง

เพื่อประเมินผลลัพธ์ที่ได้รับในซิลิโกเพิ่มเติม สารประกอบสี่ชนิดที่ครอบคลุมสามคู่เสริมฤทธิ์กัน ได้แก่ ไอโซแอคทีโอไซด์ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์ อิไคนาโคไซด์ และเวอร์บาสโคไซด์ ได้รับการคัดเลือกเพื่อตรวจสอบผลเสริมฤทธิ์ของยาและฤทธิ์ต้านการอักเสบที่อาจเกิดขึ้นได้โดยใช้เซลล์ BV2 ที่รับการรักษาด้วย LPS โดยเฉพาะอย่างยิ่ง เราทำการวิเคราะห์ western blot สำหรับการแสดงออกของโปรตีน iNOS และ COX-2 เพื่อให้สอดคล้องกับผลการทำงานร่วมกันและการต้านการอักเสบของการรวมกันของยาที่คาดการณ์ไว้

ดังที่แสดงในรูปที่ 5(เช่น) รายงานระดับของโปรตีน iNOS และ COX-2 ในแผงของเซลล์ BV2 ที่ทดสอบ เราสังเกตว่าการรักษาด้วยไอโซแอคทีโอไซด์หรือ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์ การแสดงออกของโปรตีนของ iNOS และ COX-2 ในเซลล์ BV2 ทั้งคู่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญที่ระดับขนานยาที่ต่างกัน อย่างไรก็ตาม การรักษาด้วยไอโซแอคทีโอไซด์และ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์ร่วมกันทำให้เกิดปัจจัยการอักเสบ iNOS และ COX-2(รูปที่ 5(จ)) เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ รูปที่ 5(1)แสดงให้เห็นว่าการบำบัดด้วยเอไคนาโคไซด์หรือเวอร์บาสโคไซด์ในฐานะตัวแทนเดี่ยว ทำให้การแสดงออกของ iNOS และ COX-2 ลดลง นอกจากนี้ ตามที่คาดไว้ การรักษาด้วยอิชินาโคไซด์ร่วมกับ verbascoside ที่ความเข้มข้น 150 ไมโครโมลาร์ ส่งผลให้ระดับการแสดงออกของโปรตีนลดลงอย่างเห็นได้ชัด (iNOS และ COX-2) ซึ่งบ่งชี้ถึงฤทธิ์ต้านการอักเสบร่วมกันของสิ่งนี้ การผสมยา ในทำนองเดียวกัน ดังที่แสดงไว้ในรูปที่ 5(g) การรวมกันของเอไคนาโคไซด์และ 2'-อะซิติแลคติโอไซด์แสดงผลแบบเสริมฤทธิ์กันอย่างมีนัยสำคัญต่อการยับยั้ง COX-2 ที่ความเข้มข้น 75μM หรือ 300 μM อย่างไรก็ตาม สำหรับ iNOS ที่ขนาด 300 ไมโครโมลาร์ การรวมกันแสดงถึงการปราบปรามของโปรตีนที่ทำเครื่องหมายไว้ ในทางตรงกันข้าม เราพบว่าไม่มีผลยับยั้งที่ชัดเจนใน iNOS และ COX-2 เกี่ยวกับการรวมกันของ isoacteoside และ 2'-acetylacteoside หรือ echinacoside และ verbascoside ที่ความเข้มข้น 75μM (รูปที่ 2 เสริม) นอกจากนี้การรักษา กับคู่อื่น ๆ แสดงผลที่อ่อนแอกว่ามากเมื่อเทียบกับตัวแทนเดี่ยวที่ปริมาณ 150 หรือ300μuM ที่สามารถเห็นได้ในรูปที่ 5 (เช่น)

โดยสรุป การศึกษาในหลอดทดลองได้ให้ข้อมูลเพิ่มเติมสำหรับการตรวจคัดกรองการผสมยาที่มีฤทธิ์ต้านการอักเสบ และแสดงให้เห็นถึงความน่าเชื่อถือของกลยุทธ์การคัดกรองซิลิโค

การอภิปราย

การอักเสบของระบบประสาทมีส่วนเกี่ยวข้องกับโรคทางระบบประสาท จิตเวช และพัฒนาการทางระบบประสาทส่วนใหญ่ เนื่องจากไม่เพียงแต่เป็นผลที่ตามมาเท่านั้น แต่ยังเป็นตัวกระตุ้นของพยาธิวิทยา6! อย่างไรก็ตาม การรักษาในปัจจุบันสำหรับโรคประสาทอักเสบนั้นเป็นวิธีการรักษาแบบเดี่ยว ซึ่งส่วนใหญ่จำกัดโดยผลข้างเคียงที่เป็นที่รู้จักกันดีอย่างที่เราทราบ สารยับยั้ง COX-2 อาจนำไปสู่ข้อบกพร่องของระบบหัวใจและหลอดเลือดซึ่งตอบสนองต่อการรักษาในระยะยาว และการรักษาที่มุ่งเป้า TNF อาจทำให้เกิดการติดเชื้อผ่านการกดภูมิคุ้มกัน62 แนวทางการรักษาแบบผสมผสานอาจมีความจำเป็นในการปรับปรุงการรักษาโรคที่ซับซ้อนโดยมีข้อดีดังต่อไปนี้: ความแข็งแกร่งของเครือข่ายที่มีการตอบโต้และการชดเชยบายพาส ประสิทธิภาพทางคลินิกที่เพิ่มขึ้นในขณะที่ยังคงความเป็นพิษของมนุษย์น้อยที่สุดและปริมาณที่ลดลงของสารประกอบแต่ละชนิด63 อย่างไรก็ตาม การสำรวจการรวมกันของยาเสริมฤทธิ์กันระหว่างสารประกอบที่ได้มาจากยาสมุนไพรตามเภสัชวิทยาของระบบนั้นถูกจำกัดโดยเหตุผลหลักที่เป็นไปได้ของสารประกอบจำนวนมาก

In the work, we firstly gain 63 potential bioactive compounds from the herb Cistanche tubulosa, fulfilling the criteria (DL>0.18) สำหรับการวิเคราะห์เพิ่มเติมด้วยความช่วยเหลือของการทำนายซึ่งจำเป็นต่อการคัดกรองโมเลกุลที่มีแนวโน้มมากขึ้นด้วยคุณสมบัติที่ต้องการ หลังจากจับคู่เป้าหมาย 133 เป้าหมายของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพ 63 ชนิดกับฐานข้อมูล เราได้ 43 เป้าหมายที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของระบบประสาท จากนั้นการวิเคราะห์การจัดกลุ่ม GOBP ของเป้าหมายที่คาดการณ์ไว้อาจมีส่วนช่วยในการรักษาโรคประสาทอักเสบ ผลการวิเคราะห์ของเครือข่าย CT แสดงระดับเฉลี่ยต่อสารประกอบ 11.209 และ 7.651 ต่อเป้าหมาย ตามลำดับ และ 38 รายการปรับมากกว่า 7 เป้าหมาย (มากกว่าระดับเฉลี่ย) ตัวอย่างเช่น echinacoside (mol41)4- ทำนายด้วย 7 เป้าหมาย verbascoside (mol33)3067 กับ 9 เป้าหมาย หรือ tubuloside B(mol57)686 กับ 8 เป้าหมายสามารถมีบทบาทสำคัญในการป้องกันระบบประสาทตามวรรณกรรมที่เพิ่มขึ้น

เราบรรลุเป้าหมายการรักษาโดยตรง เช่น APP, MAPT(หรือที่รู้จักในชื่อ Tau), PPARG70, MMP9, MMP27172 และ HTR2A(หรือที่รู้จักในชื่อ 5-HT2A), GRIN2B (glutamate ionotropic receptor NMDA type subunit 2B) และ GRIA1( glutamate ionotropic receptor ยูนิตย่อยชนิด AMPA 1) หรือเป้าหมายที่เป็นไปได้ปลายน้ำ เช่น PTGS274 หรือ NOS27 ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของระบบประสาทหรือโรคต่างๆ ของระบบประสาท

การวิเคราะห์เครือข่าย Compound-Target-Pathway แสดงสารประกอบ 12 ชนิดจากคู่ยา 10 อันดับแรกผ่านอัลกอริธึมของกฟภ. ซึ่งเชื่อมต่อกับเป้าหมายที่เป็นไปได้ 43 รายการและเส้นทางที่เชื่อมโยงกับการอักเสบของเส้นประสาท ตัวอย่างเช่น วิถีการส่งสัญญาณแคลเซียม อันตรกิริยาของลิแกนด์-รีเซพเตอร์ที่ออกฤทธิ์ทางประสาท หรือ เส้นทางการส่งสัญญาณ TNF เป็นต้น ในระบบ สารประกอบที่คาดการณ์ไว้เหล่านี้สามารถทำหน้าที่ไม่เพียง แต่โปรตีนของต้นน้ำเท่านั้น แต่ยังรวมถึงปลายน้ำของเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของระบบประสาทและไบโอมาร์คเกอร์การอักเสบ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ยิ่งกว่านั้น ยังมีข้อมูลเพิ่มเติมสำหรับการตรวจคัดกรองการผสมยาที่มีฤทธิ์ต้านการอักเสบได้ และความน่าเชื่อถือของกลยุทธ์ในการตรวจคัดกรองซิลิโคนั้นได้รับการตรวจสอบโดยการตรวจสอบการทดลอง เส้นทางการอักเสบของระบบประสาทประกอบด้วยวิถีของโรคอัลไซเมอร์ เส้นทางการส่งสัญญาณแคลเซียม เส้นทางการส่งสัญญาณ GnRH เส้นทางการส่งสัญญาณ VEGF และไซแนปส์เซโรโทนเนอร์จิก ผลการวิเคราะห์อธิบายให้เราทราบอย่างชัดเจนว่าโมดูลการตายของเซลล์ การอักเสบ และการป้องกันระบบประสาทนั้นเป็นตัวอย่างที่ดีในการถอดรหัสกลไกของ Cistanche tubulosa ในการรักษาภาวะการอักเสบของเส้นประสาท

การอักเสบของระบบประสาทมาพร้อมกับโรคต่างๆ เกี่ยวกับความเสื่อมของระบบประสาท ซึ่งอาจไม่เพียงแต่เป็นผลที่ตามมาเท่านั้น แต่ยังเป็นตัวกระตุ้นของพยาธิวิทยา ดังนั้น การบำบัดแก้อาการอักเสบจึงแนะนำเป็นแนวทางการรักษาที่มีแนวโน้ม! สำหรับความผิดหวังของเรา แม้ว่าเราจะตระหนักถึงข้อจำกัดของการบำบัดแบบเดี่ยว การประเมินและกลไกพื้นฐานของการรักษาแบบผสมผสานยังคงเป็นความท้าทายหลักในการพัฒนากลยุทธ์ทางเลือกใหม่ งานนี้จึงสามารถเสนอโอกาสใหม่ในการรักษาโรคประสาทอักเสบ และอาจเปิดช่องทางใหม่ในการค้นหาส่วนผสมของยาจากผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ

วัสดุและวิธีการ

การรวบรวมสารประกอบ

ส่วนผสมทางเคมีทั้งหมด 66 อย่างของ Cistanche tubulosa ถูกรวบรวมจาก TCMSP (http://lsp.nwuedu.cn/)6 ซึ่งประกอบด้วย phenylethanoid glycosides 26 ตัว, iridoids 22 ตัว, 4lignans, 7 mono-terpene glycosides, 2 สารไนโตรเจน, 3 เบนซิน น้ำตาลอะคริโลอิล, 1 สเตอรอล, 1 คีตอล เนื่องจากไกลโคไซด์ใน Cistanche tubulosa มักจะถูกไฮโดรไลซ์เพื่อปลดปล่อย aglycone ซึ่งจากนั้นถูกดูดซึมในเยื่อบุลำไส้ ดังนั้นเราจึงนำโมเลกุลที่ไม่มีไกลโคลิกมาพิจารณาซึ่งถูกแท็กเป็น qt สิ่งนี้นำไปสู่การสร้างสารประกอบ 103 โมเลกุลเหล่านี้ถูกจัดให้มีไว้ในตารางเสริม S1

การประเมินความเหมือนยา เพื่อให้ได้สารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่อาจเกิดขึ้นจาก Cistanche tubulosa เราประเมินความคล้ายคลึงของยาของส่วนผสมเหล่านี้โดยการคำนวณความคล้ายคลึงของ Tanimoto77 ระหว่างสารประกอบสมุนไพรและคุณสมบัติระดับโมเลกุลเฉลี่ยของสารเคมีทั้งหมดในฐานข้อมูล Drugbank8 และได้นำแบบจำลองการทำนาย DL มาใช้อย่างประสบความสำเร็จในการศึกษาจำนวนมาก98 เพื่อเลือกสารประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพ ในงาน ดัชนี DL ที่มากกว่าหรือเท่ากับ 0.18 ของผู้สมัครถูกกำหนดให้เป็นค่าเกณฑ์เพื่อให้เหมาะสมกับการวิเคราะห์ในภายหลัง

การทำนายเป้าหมายยา

การระบุเป้าหมายประสิทธิภาพสำหรับสารประกอบชั้นนำยังคงเป็นขั้นตอนสำคัญในการพัฒนาสารประกอบไปสู่การพัฒนายา เครื่องมือในบ้านสองอย่าง: SysDT และ WES ดำเนินการเพื่อให้ได้ข้อมูลเป้าหมายระดับโมเลกุลสำหรับการตกปลายา Sys DT เป็นแบบจำลองในซิลิโอซึ่งดำเนินการร่วมกับข้อมูลทางเคมี จีโนม และเภสัชวิทยาโดยอิงจากเครื่องมือทางคณิตศาสตร์อันทรงพลังสองอย่าง ได้แก่ Random Forest (RF) และ Support Vector Machine (SVM) เพื่อจัดการกับปัญหาการระบุเป้าหมายได้อย่างมีประสิทธิภาพ2 แบบจำลองที่ได้รับนั้นทำหน้าที่เป็นแพลตฟอร์มที่มีคุณค่าสำหรับการคาดคะเนปฏิกิริยาระหว่างยากับเป้าหมายโดยมีความแม่นยำโดยรวม 97.3 เปอร์เซ็นต์ ความแม่นยำในการทำนายที่เปิดใช้งาน 87.7 เปอร์เซ็นต์ และความแม่นยำในการทำนายที่ยับยั้งได้ 99.8 เปอร์เซ็นต์ เพื่อที่จะจับส่วนประกอบที่มีแนวโน้มมากขึ้น เกณฑ์การกรองถูกกำหนดเป็นค่า RF มากกว่าหรือเท่ากับ 0.7 หรือ SVM มากกว่าหรือเท่ากับ 0.8 ในการศึกษานี้

ความคล้ายคลึงกันของ Weighted Ensemble (WES) เป็นรูปแบบการคำนวณที่มีประสิทธิภาพแบบใหม่เพื่อระบุเป้าหมายโดยตรงของยาของส่วนผสมออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่แท้จริง ในฐานะเครื่องมือใหม่ แบบจำลองที่ได้รับจะทำงานได้ดีในการทำนายการผูกมัดด้วยความไวเฉลี่ย 85 เปอร์เซ็นต์ (SEN) และรูปแบบที่ไม่มีผลผูกพันที่ 71 เปอร์เซ็นต์ (SPE) กับพื้นที่เฉลี่ยภายใต้เส้นโค้งการทำงานของตัวรับ (ROC, AUC) ร้อยละ 85.2 และความสอดคล้องเฉลี่ยร้อยละ 77.5 เป้าหมายที่ได้รับจะถูกจับคู่เพิ่มเติมกับ Uniprot (http://www,uniprot.org) เพื่อทำให้ชื่อและสิ่งมีชีวิตเป็นปกติในภายหลัง ที่นี่เราเลือกเฉพาะเป้าหมายของ Homo sapiens สำหรับการวิเคราะห์เพิ่มเติม เป้าหมายของผู้สมัครของสารประกอบที่เลือกจะถูกจับคู่กับฐานข้อมูล CTD (http://ctdbase.org/) เพื่อรับโรคที่เกี่ยวข้อง และเราจะคัดกรองเป้าหมายที่เป็นไปได้ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของระบบประสาทในที่สุด

GO การตกแต่งและการวิเคราะห์สำหรับเป้าหมาย ในการตรวจสอบกระบวนการทางชีววิทยาที่เกี่ยวข้องของเป้าหมายที่ได้รับ เราจับคู่เป้าหมายกับ DAVID(http://david.abcc.ncifcrf.gov)8 และเลือกเงื่อนไขที่มีค่า P น้อยกว่า 0.05 ส่วนนี้

การวิเคราะห์การผสมยา

ในงานก่อนหน้านี้ เฟรมเวิร์กเภสัชวิทยาของระบบถูกใช้เพื่อทำนายการผสมยาในแบบจำลองที่ออกแบบใหม่ ซึ่งเรียกว่า Probability Ensemble Approach (PEA) โดยมีวัตถุประสงค์เพื่อวิเคราะห์ประสิทธิภาพทางคลินิกและผลข้างเคียงของการใช้ยาร่วมกัน ในรายละเอียด เครือข่าย Bayesian ที่ผสานรวมกับอัลกอริธึมความคล้ายคลึงกันได้รับการพัฒนาเพื่อจำลองการรวมกันจากผลทางโมเลกุลและเภสัชวิทยาของสารประกอบ การประเมินแบบผสมผสานที่แสดงให้เห็นถึงประสิทธิภาพทางคลินิกและผลข้างเคียงสำหรับคู่ที่คาดการณ์ไว้ได้ถูกนำเสนอแล้ว26 โดยสังเขป มันแสดงให้เห็นว่า กฟภ. สามารถทำนายประสิทธิภาพของคู่ที่มีความจำเพาะและความไวสูง (AUC=0.90) ในงานของเรา ในงานนี้ เราเลือกยาผสมสิบอันดับแรกโดยพิจารณาจากความน่าจะเป็นในการประสานกัน ซึ่งแสดงถึงความเป็นไปได้ที่จะกระตุ้นการทำงานร่วมกันระหว่างสารประกอบสองชนิด

การสร้างและวิเคราะห์เครือข่าย/เส้นทาง

เพื่อตรวจสอบความสัมพันธ์ระหว่างสารออกฤทธิ์และโรคที่เกิดจากการอักเสบ เครือข่ายแบบผสมเป้าหมาย (CT) และเครือข่ายเส้นทางผสมเป้าหมาย (CTP) ถูกสร้างขึ้นโดย Cytoscape 2.8.1 ซึ่งเป็นแพ็คเกจชีวสารสนเทศยอดนิยมสำหรับการสร้างภาพเครือข่ายทางชีววิทยาและการรวมข้อมูล※ คุณสมบัติเชิงปริมาณของเครือข่ายได้รับการวิเคราะห์โดยปลั๊กอินสองตัวต่อไปนี้ Network Analyzer และ CentiScaPe 1.2 ในเครือข่ายกราฟิก โหนดระบุถึงสารประกอบ เป้าหมาย หรือวิถีทางใดทางหนึ่ง ในขณะที่ขอบเข้ารหัสปฏิสัมพันธ์ระหว่างยากับเป้าหมาย เพื่อสำรวจเพิ่มเติมถึงผลกระทบทางชีวภาพของการทำงานของเซลล์เป้าหมายผ่านการปรับเส้นทางการเผาผลาญที่หลากหลาย และรวม "เส้นทาง" เข้าด้วยกันตาม ข้อมูลที่เป็นปัจจุบันของพยาธิวิทยาการอักเสบของระบบประสาท ประการแรก โดยการทำแผนที่เข้ากับฐานข้อมูล KEGG (http://www.genome.jp/kegg/) โปรไฟล์เป้าหมายที่สำเร็จจะถูกรวมเข้าเป็นหลายเส้นทาง หลังจากละทิ้งส่วนทางอ้อมแล้ว เส้นทางที่สังเคราะห์ค่อนข้างจะรวมเข้าด้วยกันโดยคำนึงถึงข้อมูลทางพยาธิวิทยาและทางคลินิก

การตรวจสอบการทดลอง

การเตรียมตัวอย่าง

ซื้อ Echinacoside, verbascoside, isoacteoside และ 2'-acetylacteoside จาก Nanjing Zelang Biological Technology Co., Ltd. (หนานจิง เจียงซู จีน) ตัวอย่างทดสอบถูกละลายในไดเมทิลซัลฟอกไซด์(DMSO)(ซิกมา สหรัฐอเมริกา) เพื่อให้ได้ 100 มิลลิโมลาร์ เป็นสารละลายสต็อก แล้วเก็บไว้ที่ 4C การเจือจางสุดท้ายของ DMSO ที่เติมลงในอาหารเลี้ยงเชื้อจะไม่เกิน 0.1 เปอร์เซ็นต์ซึ่งประกันว่าไม่มีผลต่อความมีชีวิตของเซลล์

การเพาะเลี้ยงเซลล์ เซลล์ microglia ของเมาส์ BV2 ได้รับการพัฒนาโดยธนาคารเซลล์ Chinese Academy of Sciences Shanghai และเพาะเลี้ยงในขวดขนาด 25 หรือ 75 ซม. 2 ด้วยสื่อกลางของ Eagle ที่ดัดแปลงจาก Dulbecco (DMEM/25mM HEPES) (Gibco BRL, USA) เสริมด้วยซีรัมของทารกในครรภ์ 10 เปอร์เซ็นต์ (FBS) ( Gibco BRL, USA), เพนิซิลลิน G(100 หน่วย/มล.) และสเตรปโตมัยซิน (100 มก./มล.) ในตู้อบความชื้นที่มีคาร์บอนไดออกไซด์ 5 เปอร์เซ็นต์ / 95 เปอร์เซ็นต์ O ที่ 37 องศา .5 เปอร์เซ็นต์ CO2

การวิเคราะห์ blot แบบตะวันตก โปรตีนจากเซลล์ถูกสกัดจากสายพันธุ์ของเซลล์โดยใช้ QproteomeMammalian Protein Prep Kit (Qiagen, เยอรมนี) หลังจากขั้นตอนที่ระบุตามโปรโตคอลของผู้ผลิต Quick Stari Bradford Protein Assay Kit (Bio-Rad, USA) ใช้กับการหาปริมาณโปรตีน ปริมาณโปรตีนที่เท่ากัน (50ug) ถูกทำให้เสียสภาพโดยการต้มที่ 100 องศาเป็นเวลา 10 นาทีด้วยบัฟเฟอร์โหลดตัวอย่าง 2*laemmli (Bio-Rad, USA) บวก 5 เปอร์เซ็นต์ 3-mercaptoethanol ในอัตราส่วนของ 1:1 และบรรจุต่อเลนบน SDS-PAGE 12 เปอร์เซ็นต์ (มินิเจลโซเดียม dodecyl sulfate-polyacrylamide) ถ่ายด้วยไฟฟ้าบนเยื่อแผ่นโพลีไวนิลลิดีนฟลูออไรด์ 0.45um (PDVF) (Millipore, Bedford, MA, USA) เป็นเวลา 150 นาทีที่ 200 mA ต่อจากนั้น เยื่อหุ้มจะถูกปิดกั้นใน 3 เปอร์เซ็นต์ของ bovine serum albumin (BSA) ที่อุณหภูมิห้องและฟักด้วยแอนติบอดีปฐมภูมิ iNOS และ COX-2 (Abcam) ที่ 4 องศาในชั่วข้ามคืน หลังจากล้างอย่างละเอียดสามครั้งใน Tris-buffered Saline-Tween (TBST) แต่ละครั้งเป็นเวลา 5 นาที เยื่อจะถูกตรวจสอบด้วยฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส (HRP)-คอนจูเกตแอนติบอดีทุติยภูมิ (1:10000 เจือจาง; Abcam) เป็นเวลา 1.5 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง จากนั้น แถบอิมมูโนรีแอคทีฟจะมองเห็นได้โดยใช้ชุดตรวจจับเคมีลูมิเนสเซนส์ของ ECL (Bio-Rad Laboratories, ริชมอนด์, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) หลังจากล้างสองครั้งใน TBST และหนึ่งครั้ง TBS แต่ละครั้งเป็นเวลา 5 นาที ค่า Densitometric จะถูกทำให้เป็นมาตรฐานโดยใช้ -actin เป็นการโหลดการควบคุมภายใน

การวิเคราะห์ทางสถิติ. ข้อมูลถูกนำเสนอเป็นค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐาน การวิเคราะห์ Western blot ทำซ้ำสามการทดลองอิสระด้วยผลลัพธ์เดียวกัน การวิเคราะห์ความแปรปรวนทางเดียวใช้เพื่อเปรียบเทียบความแตกต่างของค่าเฉลี่ยสำหรับกลุ่มตั้งแต่สามกลุ่มขึ้นไป วิเคราะห์นัยสำคัญทางสถิติด้วยการทดสอบนักเรียนระหว่างสองกลุ่ม อุปกรณ์และการตั้งค่า ใช้ Excel ของ Microsoft Office2013 ในรูปที่ 1

Cytoscape 2.8.1 ถูกใช้ในรูปที่ 2 ใช้ Cytoscape 2.8.1 ในรูปที่ 3

Visio ของ Microsoft Office2013 ถูกใช้ในรูปที่ 4

Graphpad Prism 6 และ Visio ของ Microsoft Office2013 ถูกใช้ในรูปที่ 5

ความพร้อมใช้งานของข้อมูล ชุดข้อมูลที่สร้างขึ้นระหว่างและ/หรือวิเคราะห์ระหว่างการศึกษาปัจจุบันมีให้จากผู้เขียนที่เกี่ยวข้องตามคำขอที่สมเหตุสมผล

อ้างอิง

1.แซนโทส,DN&แซนด์คูห์เลอร์,เจ. neurogenic neuroinflammation: ปฏิกิริยาของ CNS ที่ตอบสนองต่อกิจกรรมของเซลล์ประสาท

ธรรมชาติวิจารณ์ประสาท 15,43-53(2014).

2. สารยับยั้ง Funk, CD&FitzGerald, GACOX-2 และความเสี่ยงต่อโรคหัวใจและหลอดเลือด วารสารเภสัชวิทยาโรคหัวใจและหลอดเลือด 50,470-479 (2007).

3. Reines, S.et al.Rofecoaxib ไม่มีผลกับโรคอัลไซเมอร์ใน 1-ปี, สุ่ม, ปิดตา, การศึกษาแบบควบคุม ประสาทวิทยา 62,66-71 (2004).

4. Trepanier, CH& Milgram, NW Neuroinflammation in Alzheimer's disease: เป็น NSAIDs และ selective COX-2 inhibitors เป็นตัวต่อไป

สายการบำบัด? วารสารโรคอัลไซเมอร์ 21,1089-1099 (2010).

5. Fitzgerald, JB, Schoeberl, B., Nielsen, UB& Sorger, ชีววิทยา PKSystems และการบำบัดแบบผสมผสานในการแสวงหาประสิทธิภาพทางคลินิก ชีววิทยาเคมีธรรมชาติ 2,458-466 (2006)

6. ซัน,เอ็กซ์ Vilar,S.& Tatonetti.NP วิธีการให้ปริมาณงานสูงสำหรับการค้นพบยาแบบผสมผสาน Si TranslMed5,205rv201-205rv201 (2013)

7. Manchado, E. et al. กลยุทธ์แบบผสมผสานสำหรับการรักษามะเร็งปอดชนิด KRAS-mutant ธรรมชาติ (2016).

8. Musumeci, G. et al. การผสมผสานระหว่าง M48U1 และ Tenofovir ยับยั้งการติดเชื้อเอชไอวีใน PBMC ที่ถูกกระตุ้นและการตรวจเนื้อเยื่อปากมดลูกของมนุษย์ รายงานทางวิทยาศาสตร์ 7, 41018 (2017)

9. Anastasio, TJ Computational การระบุการรวมกันของยาหลายชนิดที่อาจเกิดขึ้นเพื่อลดการอักเสบของ microglial ในโรคอัลไซเมอร์ Front Pharmacol 6 (2015).

10. Dhote, F. et al. การรวมกันของ ketamine และ atropine ช่วยป้องกันระบบประสาทและลดการอักเสบของระบบประสาทหลังจากเกิดโรคลมบ้าหมูในหนู Toxicol Appl Pharm 259, 195–209 (2012)

11. Lehár, J. et al. การผสมผสานยาเสริมฤทธิ์กันมีแนวโน้มที่จะปรับปรุงการคัดเลือกที่เกี่ยวข้องกับการรักษา เทคโนโลยีชีวภาพธรรมชาติ 27, 659–666 (2009)

12. Tan, X. et al. การระบุคู่ยาเสริมฤทธิ์กันอย่างเป็นระบบที่กำหนดเป้าหมายเอชไอวี เทคโนโลยีชีวภาพธรรมชาติ 30, 1125–1130 (2012)

13. Cokol, M. et al. การสำรวจคู่ยาเสริมฤทธิ์กันอย่างเป็นระบบ ชีววิทยาระบบโมเลกุล 7, 544 (2011).

14. ฤดูหนาว GE และคณะ การผ่าระบบ-เภสัชวิทยาของการทำงานร่วมกันของยาใน CML ที่ดื้อต่ออิมาทินิบ ชีววิทยาเคมีธรรมชาติ 8, 905–912 (2012).

15. Wang, Y.-Y., Xu, K.-J., เพลง, J. & Zhao, X.-M. การสำรวจการผสมยาในเครือข่ายปฏิสัมพันธ์ทางพันธุกรรม BMC ชีวสารสนเทศ 13, S7 (2012)

16. วิธีทางชีววิทยาของ Ryall, KA & Tan, AC Systems เพื่อความก้าวหน้าในการค้นพบการผสมผสานยาที่มีประสิทธิภาพ วารสารเคมี 7, 7 (2015).

17. จ้าว X.-M. และคณะ การทำนายการผสมยาโดยการรวมข้อมูลระดับโมเลกุลและเภสัชวิทยา PLoS ชีววิทยาการคำนวณ 7, e1002323 (2011)

18. Sun, Y. et al. การผสมผสานคุณลักษณะของจีโนมและเครือข่ายเพื่อเพิ่มขีดความสามารถในการทำนายยาเสริมฤทธิ์กันสำหรับโรคมะเร็ง การสื่อสารธรรมชาติ 6, 8481 (2015).

19. Jaeger, S. et al. การหาปริมาณของ Pathway cross-talk เผยให้เห็นการผสมผสานของยาเสริมฤทธิ์กันแบบใหม่สำหรับมะเร็งเต้านม การวิจัยโรคมะเร็ง 77, 459–469 (2017)

20. Li, S. , Zhang, B. , Jiang, D. , Wei, Y. & Zhang, N. Herb การสร้างเครือข่ายและการวิเคราะห์โมดูลร่วมเพื่อเปิดเผยกฎการผสมผสานของสูตรสมุนไพรจีนโบราณ BMC ชีวสารสนเทศ 11, S6 (2010)

21. Liang, X., Li, H. & Li, S. วิธีการทางเภสัชวิทยาเครือข่ายแบบใหม่เพื่อวิเคราะห์สูตรสมุนไพรแบบดั้งเดิม: ยาเม็ด Liu-Wei-Di-Huang เป็นกรณีศึกษา มล. ไบโอซิสเต็ม 10, 1014–1022, https://doi.org/10.1039/c3mb70507b (2014)

22. Liu, J. et al. เส้นทางสู่เป้าหมายทางเภสัชวิทยาของยาสมุนไพร : การตรวจสอบจากการลดปริมาณการฉีด กรุณา หนึ่ง 10, e0123109, https://doi.org/10.1371/journal.pone.0123109 (2015)

23. วัง X. et al. เภสัชวิทยาของระบบเผยให้เห็นหน้าที่ของ Janus ของยาทางพฤกษศาสตร์: การกระตุ้นระบบป้องกันโฮสต์และการยับยั้งการจำลองแบบของไวรัสไข้หวัดใหญ่ ชีววิทยาเชิงบูรณาการ 5, 351–371 (2013).

24. Huang, C. et al. เภสัชวิทยาของระบบในการค้นคว้ายาและความเข้าใจในการรักษาโรคสำหรับยาสมุนไพร การบรรยายสรุปในชีวสารสนเทศ 15, 710–733 (2014)

25. เป้าหมายเครือข่าย Li, S., Zhang, B. & Zhang, N. สำหรับการคัดกรองยาเสริมฤทธิ์ร่วมกับการประยุกต์ใช้กับการแพทย์แผนจีน ชีววิทยาระบบ BMC 5, S10 (2011)

26. Li, P. et al. การสำรวจและวิเคราะห์การผสมยาในวงกว้าง ชีวสารสนเทศศาสตร์ 31, 2007–2016 (2015).

27. จอง EJ และคณะ องค์ประกอบยับยั้งของใบและกิ่ง Euonymus alatus ต่อการผลิตไนตริกออกไซด์ในเซลล์ BV2 microglia พิษวิทยาอาหารและเคมี 49, 1394–1398 (2011)

28. อ่าน DE & Gorman, AM โปรตีนช็อกความร้อน 27 ในการอยู่รอดของเซลล์ประสาทและผลพลอยได้ของนิวไรท์ การสื่อสารการวิจัยทางชีวเคมีและชีวฟิสิกส์ 382, ​​6–8 (2009)

29. Sharp, P. et al. โปรตีนช็อตความร้อน 27 ช่วยชีวิตเซลล์ประสาทสั่งการหลังจากได้รับบาดเจ็บที่เส้นประสาทและรักษาการทำงานของกล้ามเนื้อ ประสบการณ์ Neurol 198, 511–518 (2006)

30. Esposito, E. et al. ผลการป้องกันของ verbascoside ในเซลล์ C6 glioma ที่ถูกกระตุ้น: กลไกระดับโมเลกุลที่เป็นไปได้ เอกสารสำคัญของเภสัชวิทยาของ Naunyn Schmiedeberg 381, 93–105 (2010)

31. ชาร์ป PS และคณะ ผลการป้องกันของโปรตีนช็อกความร้อน 27 ในรูปแบบของ ALS เกิดขึ้นในระยะแรกของการลุกลามของโรค Neurobiol Dis 30, 42–55 (2008)

32. ช้าง KH et al. ศักยภาพของสารอินโดล/อินโดลิลควิโนลีนในการลดการบิดเบือนของเอกภาพโดยการเพิ่มประสิทธิภาพของ HSPB1 Cns Neurosci Ter 23, 45–56 (2017)

33. Evgrafov, OV และคณะ โปรตีนช็อตความร้อนขนาดเล็กที่กลายพันธุ์ 27 ทำให้เกิดโรค Charcot-Marie-Tooth แอกซอนและเส้นประสาทส่วนปลายของมอเตอร์ที่ถ่ายทอดทางพันธุกรรม พันธุศาสตร์ธรรมชาติ 36, 602–606 (2004)

34. Voegeli, TS & Currie, RW siRNA ล้มลง Hsp27 และเพิ่มระดับ NF-κB p65 ที่เกิดจาก angiotensin II-Induced NF-κB p65 ในเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด Infamm Res 58, 336–343 (2009)

35. Lim, W. et al. การปรับวิถีการส่งสัญญาณ NF-κB ที่กระตุ้นด้วยไลโปโพลีแซ็กคาไรด์โดยการฉายรังสี 635 นาโนเมตรผ่านโปรตีนช็อกความร้อน 27 ในเซลล์ไฟโบรบลาสต์ของมนุษย์ เคมีแสงและชีววิทยาแสง 89, 199–207 (2013)

36. Sawada, J. , Li, F. & Komatsu, M. R-Ras ยับยั้งการกระตุ้น p38MAPK ที่เกิดจาก VEGF และ HSP27 phosphorylation ในเซลล์บุผนังหลอดเลือด วารสารการวิจัยหลอดเลือด 52, 347–359 (2015).

37. Feske, S. สัญญาณแคลเซียมในการกระตุ้นและโรคของลิมโฟไซต์ บทวิจารณ์ธรรมชาติวิทยาภูมิคุ้มกัน 7, 690–702 (2007)

38. Bading, H. การส่งสัญญาณแคลเซียมนิวเคลียร์ในการควบคุมการทำงานของสมอง ธรรมชาติรีวิวประสาทวิทยา 14, 593–608 (2013).

39. Heakal, Y. และคณะ ตัวรับนิวโรเทนซิน-1 ปาล์มมิโทเลชันที่เหนี่ยวนำได้จำเป็นสำหรับการส่งสัญญาณไมโทเจนิกที่อาศัยรีเซพเตอร์ที่มีประสิทธิภาพภายในไมโครโดเมนของเมมเบรนที่มีโครงสร้าง ชีววิทยามะเร็งและการบำบัด 12, 427–435 (2011)

40. Naor, Z. Signaling โดย G-protein-coupled receptor (GPCR): การศึกษาเกี่ยวกับตัวรับ GnRH พรมแดนในระบบประสาทวิทยา 30, 10–29 (2009)

41. Mugami, S. , Dobkin-Bekman, M. , Navi, LRB & Naor, Z. บทบาทที่แตกต่างของ PKC isoforms (PKCs) ในการกระตุ้น GnRH ของ MAPK phosphorylation ในเซลล์ที่ได้รับ gonadotrope ต่อมไร้ท่อระดับโมเลกุลและเซลล์ (2017)

42. โช เจวาย และคณะ ผลภูมิคุ้มกันในหลอดทดลองและในร่างกายของเข็มฉีดยา เจ Pharm Pharmacol 53, 1287–1294 (2001)

43. Cui, Y., Zhang, Y. & Liu, G. Syringin อาจออกแรงกระตุ้นการนอนหลับผ่านวิถี NOS/NO กองทุนคลินิก Pharmacol 29, 178–184 (2015).

44. ยามาซากิ ต. และคณะ ( บวก )-Syringaresinol-di-O- -d-glucoside ซึ่งเป็นสารประกอบฟีนอลจาก Acanthopanax senticosus Harms ยับยั้งตัวกลางที่ทำให้เกิดการอักเสบในเซลล์ซาร์โคมาของไขข้อของมนุษย์ SW982 โดยการยับยั้งการกระตุ้นโปรตีน-1 และ/หรือปัจจัยนิวเคลียร์- กิจกรรม ก. พิษวิทยาในหลอดทดลอง 21, 1530–1537 (2007)

45. Rybakowski, JK Matrix metalloproteinase-9 (MMP9)—เอนไซม์ไกล่เกลี่ยในโรคหลอดเลือดหัวใจ มะเร็ง และโรคทางจิตเวช จิตเวชศาสตร์โรคหัวใจและหลอดเลือด 2552 (2009)

46. ​​ซอ เอส.เจ. และคณะ Deoxypodophyllotoxin, favolignan จาก Anthriscus sylvestris Hofm ยับยั้งการย้ายถิ่นและ MMP-9 ผ่านทางเส้นทาง MAPK ใน HASMC ที่เหนี่ยวนำโดย TNF- - เภสัชวิทยาของหลอดเลือด 51, 13–20 (2009)

47. ลี อี.-เจ. & คิม, H.-S. กลไกการยับยั้งของการแสดงออกของยีน MMP-9 โดยเอทิล ไพรูเวตในเซลล์ไมโครไกลัลที่กระตุ้นด้วยไลโปโพลีแซ็กคาไรด์ จดหมายประสาทวิทยา 493, 38–43 (2011)

48. Kim, S.-S. ในการประชุมนานาชาติด้านวิศวกรรมชีวการแพทย์ครั้งที่ 4 ที่เวียดนาม 238–243 (สปริงเกอร์).

49. Gehrmann, J. , Bonnekoh, P. , Miyazawa, T. , Hossmann, K.-A. & Kreutzberg การศึกษา GW Immunocytochemical ของการกระตุ้น microglial ในระยะเริ่มต้นในภาวะขาดเลือด วารสารการไหลเวียนของเลือดในสมองและการเผาผลาญ 12, 257–269 (1992)

50. Le, W.-d. และคณะ การกระตุ้นด้วยไมโครเกลียลและการบาดเจ็บของเซลล์โดปามีน: แบบจำลองในหลอดทดลองที่เกี่ยวข้องกับโรคพาร์กินสัน เจ นิวโรซี 21, 8447–8455 (2001)

การวิจัยการยอมรับได้รับการสนับสนุนทางการเงินโดยมูลนิธิวิทยาศาสตร์ธรรมชาติแห่งชาติของจีน (NO. U1603285, NO. 81373892 และ NO. 31540008) และการพัฒนาอุตสาหกรรมของโครงการนำร่องในมณฑลส่านซี กรมสามัญศึกษา: อุตสาหกรรมของสารเติมแต่งอาหารสัตว์หมักจุลินทรีย์ที่ปราศจากมลภาวะสีเขียว (ฉบับที่ 2010JC22).

ผลงานของผู้เขียน

ผู้เขียนมีส่วนร่วมในแนวคิดและการออกแบบ: JLL, YHW และ CLZ คิดและออกแบบการศึกษา การทำนายเป้าหมายยาและการเสริมสมรรถนะและการวิเคราะห์สำหรับเป้าหมาย: XTC และ ZHQ การวิเคราะห์การรวมยาและการสร้างและวิเคราะห์เครือข่าย/เส้นทาง: JLZ, ZHQ, FXS และ JJL การทดลองและการได้มาซึ่งข้อมูล JLZ, JX และ ZHQ การวิเคราะห์และการตีความข้อมูล JLZ , JX, ZYW และ WX การร่างต้นฉบับ: JLZ และ CLZอนุมัติเวอร์ชันสุดท้ายของต้นฉบับที่ส่งมา: J.LL, CL.Z.and YH.W.Revised by CLZ, JLZand XGL

ข้อมูลเพิ่มเติม

ข้อมูลเพิ่มเติมมาพร้อมกับเอกสารนี้ที่ https://doi.org/10.1038/s41598-017-16571-3 ความสนใจที่แข่งขันได้: ผู้เขียนประกาศว่าพวกเขาไม่มีส่วนได้เสียที่แข่งขันกัน

หมายเหตุของผู้จัดพิมพ์: Springer Nature ยังคงเป็นกลางเกี่ยวกับการอ้างสิทธิ์ในเขตอำนาจศาลในแผนที่ที่เผยแพร่และความเกี่ยวข้องกับสถาบัน

การเข้าถึงแบบเปิด บทความนี้ได้รับอนุญาตภายใต้ Creative Commons Attribution 40 International License ซึ่งอนุญาตให้ใช้ แบ่งปัน ดัดแปลง แจกจ่าย และทำซ้ำในสื่อหรือรูปแบบใดๆ ตราบใดที่คุณให้เครดิตที่เหมาะสมกับผู้เขียนต้นฉบับ (s) และแหล่งที่มา ระบุลิงก์ไปยังใบอนุญาต Creative Commons และระบุว่ามีการเปลี่ยนแปลงหรือไม่ รูปภาพหรือเนื้อหาของบุคคลที่สามในบทความนี้รวมอยู่ในใบอนุญาต Creative Commons ของบทความ เว้นแต่จะระบุไว้เป็นอย่างอื่นในเครดิตของเนื้อหา หากเนื้อหาไม่รวมอยู่ในใบอนุญาตครีเอทีฟคอมมอนส์ของบทความ และการใช้งานตามวัตถุประสงค์ของคุณไม่ได้รับอนุญาตตามข้อบังคับทางกฎหมายหรือเกินกว่าการใช้งานที่ได้รับอนุญาต คุณจะต้องได้รับอนุญาตโดยตรงจากผู้ถือลิขสิทธิ์ หากต้องการดูสำเนาใบอนุญาตนี้ ไปที่ http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ © ผู้แต่ง Te 2017

© 2017. งานนี้เผยแพร่ภายใต้http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ ("ใบอนุญาต") โดยไม่คำนึงถึงข้อกำหนดและเงื่อนไขของ ProQuest คุณสามารถใช้เนื้อหานี้ตามข้อกำหนดของใบอนุญาต