ความมุ่งมั่นของ HPLC ของ Echinacoside ใน Cistanche Cistanche

การกําหนด HPLC ของ echinacoside ใน Cistanche Cistanche

สําหรับ information:ali.ma@wecistanche.com เพิ่มเติม

จุดประสงค์:HPLC กําหนดจํานวนเอจินาโคไซด์ในซิสตันเช่พื้นดินในสภาพไนโตรเจนเหลวเช่นเดียวกับในสภาพอากาศแห้งตามธรรมชาติเปรียบเทียบในป่า cistancheและCistanche ที่ได้รับการปลูกฝังเทียม

วิธี:ระบบ HPLC LC-20a (Shimadzu ประเทศญี่ปุ่น) ถูกนํามาใช้ คอลัมน์คือ YMC เฉื่อย ods-sp (4.6 มม. × 150 มม., 5μm; YMC Co Ltd, ญี่ปุ่น); ระยะเคลื่อนที่: อะซิโตไนไตรล์ - เมทานอล - กรดฟอร์มิก 1% (10:15:75); ความยาวคลื่นตรวจจับ 334 นาโนเมตร; ปริมาตรการสูบน้ํา 0.7 มก. · 1 ทิปส์ มล. -1 อุณหภูมิคอลัมน์ 30 ° C

ผลลัพธ์:เงื่อนไขการรักษาที่แตกต่างกันมีผลชัดเจนมากต่อเนื้อหา echinacoside โดยทั่วไปมีระดับ echinacoside ในพื้น Cistanche ภายใต้ไนโตรเจนเหลวสูงกว่าในพื้นดินเหล่านั้นภายใต้สภาวะที่แห้งด้วยอากาศตามธรรมชาติ เนื้อหาสารออกฤทธิ์ของป่าซิสตันเช่สูงกว่าวัฒนธรรมเทียมมาก

คลิกเพื่อสกัดผลิตภัณฑ์ผง Cistanche

Cistanche เป็นสัตว์ใกล้สูญพันธุ์ซึ่งเป็นพืชกาฝากที่อาศัยอยู่ในรากของ Clostridium, Salix rubrum ในประเทศจีน Cistanche ส่วนใหญ่กระจายอยู่ในมองโกเลียในหนิงเซี่ยกานซู่และซินเจียงโดยมีชื่อเสียงที่ยอดเยี่ยมสําหรับ " โสมทะเลทราย " ซึ่งมีคุณค่าทางยาอย่างมาก ส่วนผสมทางยาหลักของมันคือฟีนิลเอทานิคไกลโคไซด์ซึ่งสามารถแบ่งออกเป็นเอจินาโคไซด์, โคโฮไซด์ใบ, Cistanche และอื่น ๆ ขึ้นอยู่กับสารทดแทนของพวกเขา ในหมู่พวกเขา, echinacoside มีการปรับปรุงการทํางานทางเพศ, สารต้านอนุมูลอิสระ, และผลการกําจัดอนุมูลอิสระ, แต่ยังมีผลต่อต้าน apoptotic บาง. ตั้งแต่ทศวรรษ 1980 เทคโนโลยี HPLC ซึ่งเป็นวิธีการที่ง่ายและรวดเร็วสําหรับการแยกฟีนิลเอทานิคไกลโคไซด์ถูกนํามาใช้กันอย่างแพร่หลายในการแยกผลิตภัณฑ์จากธรรมชาติ วิธีการ HPLC ได้รับเลือกให้วิเคราะห์เนื้อหาของ Cistanche ซึ่งเป็นองค์ประกอบสําคัญของ Cistanche ป่าและได้รับการปลูกฝังเทียมในช่วงเวลาการเจริญเติบโตที่แตกต่างกันซึ่งเป็นพื้นฐานทางวิทยาศาสตร์สําหรับการพัฒนาอย่างมีเหตุผลและการใช้ประโยชน์จาก Cistanche และเพื่อการประเมินคุณภาพอย่างมีประสิทธิภาพ

เครื่องมือและรีเอเจนต์

Shimadzu, อุปกรณ์ HPLC lc-20a ของญี่ปุ่น, ปั๊มลูกสูบคู่ควบคู่ lc-20at, เตาอบคอลัมน์ cto-20a, เครื่องตรวจจับความยาวคลื่นคู่ spda-20a UV Vis; Kunshan kq-100 ทําความสะอาดอัลตราโซนิก; Acetonitrile (โครมาโตกราฟีบริสุทธิ์, เทียนจินกวงฟูสถาบันวิจัยเคมี); เมทานอล (โครมาโตกราฟีบริสุทธิ์, เทียนจิน Guangfu สถาบันวิจัยเคมี); กรดฟอร์มิก (โครมาโตกราฟีบริสุทธิ์, เทียนจิน Guangfu สถาบันวิจัยเคมี); น้ํากลั่น

การควบคุม: echineoside, เนื้อหา≥ 98.43% (เซี่ยงไฮ้หยวนเย่ไบโอเทคโนโลยี จํากัด )

ห้าตัวอย่างของ Cistanche: ปลูกเทียมเป็นเวลาหนึ่งปีด้วย Cistanche ต่อไปนี้ปลูกเทียมสําหรับ Cistanche, Cistanche แห้งเทียม, Cistanche ป่าและปลูกเทียมมานานกว่าสามปีกับ Cistanche

2 วิธีและผลลัพธ์

2.1 การกําหนดเงื่อนไขโครมาโตกราฟี

เพื่อที่จะแยกจุดสูงสุดของ echineoside ที่วัดได้ในโครมาโตแกรม LC จากสารอื่น ๆ รวมถึงการควบคุมความดันปั๊มและตารางเวลาให้อยู่ในช่วงที่เหมาะสมการปรับเปลี่ยนการทดลองของเงื่อนไขโครมาโตกราฟีได้ดําเนินการและหลังจากการทดลองเพิ่มประสิทธิภาพกับเฟสมือถือก็สรุปได้ว่ายิ่งอุณหภูมิสูงขึ้น ยิ่งเวลาการเก็บรักษาสั้นลงและความเข้มข้นก็จะยิ่งต่ําลงแรงดันปั๊มก็จะยิ่งสั้นลงและเวลาการเก็บรักษาก็จะยิ่งต่ําลง แต่ความสูงสูงสุดก็ลดลงซึ่งไม่เอื้ออํานวยต่อการวัด ในที่สุดเฟสเคลื่อนที่ก็ถูกกําหนดให้เป็นกรดฟอร์มิก acetonitrile-methanol-1% (10:15:75), ความยาวคลื่นการตรวจจับ 334 นาโนเมตร, อัตราการไหล 0.7 มล. / นาทีและอุณหภูมิคอลัมน์ 30 ° C ตามเงื่อนไขวัตถุประสงค์ของอุณหภูมิห้องและความดันแบริ่งสูงสุดของปั๊มซึ่งส่งผลให้เกิดข้อมูลมากมายด้วยรูปทรงสูงสุดที่คมชัดและการแยกองค์ประกอบที่ดี。

2.2 การกําหนดคอลัมน์

YMC-Inertsil ODS-SP (4.6 มม. × 150 มม., 5 μ m;YMC Co Ltd,Japan)

2.3 การเตรียมสารละลายทดลอง

2.3.1 การเตรียมสารละลายมาตรฐาน

ปริมาณที่เหมาะสมของมาตรฐาน echineoside ถูกชั่งน้ําหนักอย่างถูกต้องและแทงด้วย acetonitrile เฟสมือถือ - เมทานอล - กรดฟอร์มิก 1% (10:15:75) เพื่อให้ 0.06 มก. · ML - 1, 0.05 มก. · 1 ทิปส์ ML - 1, 0.04 มก. · ML - 1, 0.03 มก. · ML - 1, 0.02 มก. · ML - 1, 0.01 มก. · ML - 1 และ 0.005 มก. · ML - 1 โซลูชั่นของมาตรฐาน echinacoside

2.3.2 การเตรียมสารละลายทดสอบ

Cistanche สดที่ปลูกเทียมในปริมาณที่เหมาะสม (ต่ํากว่าหนึ่งปี) Cistanche สดเทียมและ Cistanche สดจากป่าถูกบดเป็นผงโดยใช้ปูนภายใต้ไนโตรเจนเหลว นอกจากนี้ปริมาณที่เหมาะสมของ 3 Cistanche ข้างต้นถูกตัดเป็นบล็อกอากาศแห้งตามธรรมชาติในการระบายอากาศที่ร่มและหลังจากการอบแห้งมันถูกบดและบดเป็นผง Cistanche แห้งประดิษฐ์และป่ากว่าสามปีแห้ง Cistanche ถูกบดโดยตรงลงในผง ผง Cistanche 0.5 กรัมที่เตรียมไว้ด้านบนถูกนําไปวางลงในท่อหมุนเหวี่ยงเพิ่มเฟสมือถือ 25 มล. ชั่งน้ําหนักและแช่เป็นเวลา 30 นาที sonicated เป็นเวลา 40 นาทีระบายความร้อนแล้วชั่งน้ําหนักอีกครั้งเพื่อชดเชยน้ําหนักที่ขาดหายไปด้วยเฟสมือถือเขย่าและหมุนเหวี่ยงและ supernatant ถูกนํามาสําหรับการกรองเมมเบรนกรองพรุนขนาดเล็ก 0.45 μ M

2.4 แปลงของเส้นโค้งการถดถอยสําหรับตัวอย่างมาตรฐานของ echinacoside

ตัวอย่างมาตรฐานที่เตรียมไว้ของ echineoside ถูกฉีดเข้าไปในอุปกรณ์ LC แยกต่างหากและความเข้มข้นของตัวควบคุม (มก. · L-1) ถูกใช้เป็น abscissa และพื้นที่จุดสูงสุดที่สอดคล้องกันได้รับการแต่งตั้งให้พล็อตเส้นโค้งมาตรฐานส่งผลให้เกิดสมการการถดถอย: y = 66 867 100x-46 360.83, R2 = 0.98637 ซึ่งแสดง echineoside ที่ 0.1 ~ 1.2 μg ภายในความสัมพันธ์เชิงเส้นที่ดี

3 การสนทนา

Echinacoside เป็นหนึ่งในองค์ประกอบหลักของ Cistanche ซึ่งสามารถแสดงถึงพื้นฐานทางเคมีของผลกระทบทางเภสัชวิทยาของ Cistanche ทําให้การประเมินคุณภาพของวัสดุยาและฤทธิ์ทางเภสัชวิทยาสอดคล้องกันและปรับปรุงความเกี่ยวข้องของการประเมินคุณภาพ Cistanche

เงื่อนไขการรักษาที่แตกต่างกันมีผลอย่างชัดเจนต่อเนื้อหา echinacoside โดยโดยทั่วไประดับ echinacoside ในพื้น Cistanche ภายใต้ไนโตรเจนเหลวสูงกว่าในพื้นดินเหล่านั้นภายใต้สภาวะอากาศแห้งตามธรรมชาติ การอบแห้งด้วยอากาศทั่วไปลดปริมาณ echineoside ซึ่งอาจถูกบริโภคในระหว่างการทําให้อากาศแห้งหรือถูกแปลง เพื่อป้องกันการลดลงของปริมาณสารออกฤทธิ์และรับประกันประสิทธิภาพของ Cistanche ควรเลือกการรักษาที่เหมาะสม

อย่างต่อเนื่องส่วนใหญ่เชื่อว่าสภาพแวดล้อมการเพาะปลูกเทียมของ Cistanche เช่นเดียวกับนิสัยการเจริญเติบโตนั้นแยกไม่ออกจากป่าโดยไม่มีความแตกต่างในด้านคุณภาพมีแนวโน้มที่จะเน้นเฉพาะผลผลิตและไม่ได้วิเคราะห์คุณภาพ การศึกษาในปัจจุบันแสดงให้เห็นว่าปริมาณของ Cistanche echinacoside ที่ปลูกเทียมนั้นต่ํากว่า Cistanche echinacoside ป่า สูงสุดคือ 0.3360% ของ cistanche ป่าและต่ําสุดคือ 0.007 0% ของ Cistanche เทียม ดังนั้นจึงต้องมีการศึกษาเทคโนโลยีการเพาะปลูกเพื่อปรับปรุงเนื้อหาของสารออกฤทธิ์

คุณภาพของ Cistanche ขึ้นอยู่กับปริมาณของสารออกฤทธิ์ echinacoside ซึ่งมีความสัมพันธ์ที่แน่นแฟ้นกับฤดูกาลเวลาและวิธีการเก็บเกี่ยวดังนั้นการเก็บเกี่ยว Cistanche ควรคํานึงถึงสถานะการสะสมของสารออกฤทธิ์และขั้นตอนของการเจริญเติบโตและการพัฒนา พิจารณาทั้งคุณภาพและผลผลิต

วิธีการที่กล่าวถึงในบทความนี้นั้นง่ายแม่นยําทําซ้ําได้และแม่นยําในการกําหนด echineoside มีประโยชน์สําหรับการกําหนด Cistanche