การแสดงออกของ MiRNA ส่งผลต่อโรคไตจากเบาหวานอย่างไร?

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

PART Ⅱ: โปรไฟล์การแสดงออกของ MicroRNA ในโรคไตเบาหวาน

ฮิโรกิอิชิอิ,โชเฮ คาเนโกะ,คัตสึโนริ ยานัล,อากิโนริ อาโอมัตสึ,เคอิจ ฮิรัล,ซูซุมุ โอคาวะระ, & โยชิยูกิ โมริชิตะ

ดิmicroRNAs (miRNAs)ที่ควบคุมได้โรคไตจากเบาหวาน(DKD) ยังไม่ได้รับการระบุลักษณะที่สมบูรณ์ จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือเพื่อระบุmiRNAsที่กระทบต่อ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)และสามารถใช้เป็นไบโอมาร์คเกอร์หรือยารักษาโรคเฉพาะ ขั้นแรกให้เนื้อเยื่อไตจากสอง DKD(โรคไตจากเบาหวาน)โมเดลเมาส์และหนูควบคุมได้รับการคัดกรองความแตกต่างในmiRNAการแสดงออกโดยการวิเคราะห์ microarray ตามด้วยการทำสำเนาย้อนกลับแบบเรียลไทม์เชิงปริมาณ-PCR หกmiRNAsแสดงความแตกต่างจากกลุ่มควบคุมในทั้ง DKD(โรคไตจากเบาหวาน)โมเดลเมาส์ ในหมู่พวกเขาmiRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p ถูกปรับลดระดับลงเฉพาะในDKD(โรคไตจากเบาหวาน)โมเดลเมาส์ ต่อไปเราบริหารmiRNA-181b-5p-เลียนแบบ DKD(ไตเบาหวานโรค)หนูซึ่งลดอัลบูมินูเรียและการขยายตัวของ mesangial ผิดปกติ การวิเคราะห์เส้นทางและการวิจัยฐานข้อมูลเปิดเผยว่าการแสดงออกที่มากเกินไปของ miRNA-181b-5p เปลี่ยนแปลงการแสดงออกของ mRNA เจ็ดตัวในเส้นทางการส่งสัญญาณที่รู้จัก 6 ทางในไตของ DKD อย่างมีนัยสำคัญ(โรคไตจากเบาหวาน)หนู นอกจากนี้. ระดับซีรัมของ miRNA-125b-5p สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในผู้ป่วยที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(1.89±040-พับ, P<0.05) compared="" with="" patients="" with="" other="" kidney="" diseases="" (0.94±0.13-fold)and="" healthy="" subjects(1.00±0.19-fold).serum="" levels="" of="" mirna-181b-5p="" were="" lower="" in="" patients="" with="">(โรคไตจากเบาหวาน)({{0}}.30±0.06-เท่า, P<0.05)compared with="" patients="" with="" other="" kidney="" diseases(1.06±0.20-fold)and="" healthy="" subjects(1.00±0.16-fold).="" these="" results="" suggest="" that="" mirna-125b-5p="" and="" mirna-181b-5p="" may="" represent="" novel="" diagnostic="" biomarkers="" and="" that="" mirna-181b-5p="" may="" represent="" a="" therapeutic="" target="" for="" dkd(diabetic="" kidney="" disease).="" (translational="" research="">

สมุนไพรบำบัดสำหรับโรคไต:สมุนไพรมังกร cistanche

คลิกที่นี่เพื่อเป็นส่วนหนึ่ง Ⅰ& Ⅲ

ผลลัพธ์

การทำโปรไฟล์ของ miRNAs ในไตของแบบจำลองเมาส์ของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน).ทำการวิเคราะห์ไมโครอาร์เรย์ของไตของหนูเมาส์ C57BL/6-Ins2Akit/J (หนู AKITA) และ C57BLKS/J Tar- plus Leprh/ บวก Leprb (db/db หนู) อายุ 28 สัปดาห์ ห้าสิบชนิดmiRNAsจากจำนวนทั้งหมด 1,881 แสดงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติในไตของ AKITA (n=4) และหนูกลุ่มควบคุมที่อายุเท่ากัน (n=4) (ตารางที่ 1 รูปที่ 1) นอกจากนี้แล้ว 87 ชนิด ของmiRNAsแสดงความแตกต่างที่มีนัยสำคัญทางสถิติในไตของหนูเมาส์ db/db (n=4) และกลุ่มควบคุมที่เทียบอายุ (n=4) (ตาราง ⅡI และรูปที่ 2) ในจำนวนนี้ มี 15 ชนิดmiRNAs(miRNA-20a-5p, miRNA-34a-5p,miRNA-125b-5p,miRNA-129-1-3p, miRNA-142a-3p,miRNA-129b-5p,miRNA-142a-5p, miRNA-146a-5p, miRNA-181b-5p,miRNA-342-3p,miRNA -455-5p, miRNA-223-3p,rmiRNA-652-3p, miRNA-6401 และ miRNA-6980-5p) ถูกแสดงออกอย่างแตกต่างจากกลุ่มควบคุมใน AKITA และ db /db เมาส์ในบรรดา 15 . เหล่านี้miRNAs,การแสดงออกของหกmiRNAs(สองควบคุมmiRNAs(miRNA-34a-5p และ miRNA-129b-1-3p) และสี่ miRNA-142a-3p, (miRNA{{6 }}b-5p,miRNA-181b-5p,และ miRNA-223-3p))ได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์ qRT-PCR(รูปที่ 3).เก้า miR-NA อื่นๆ ไม่พบการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญทางสถิติโดยการวิเคราะห์ qRT-PCR

รูปที่ 3แสดงความแตกต่างmiRNAsในไตของหนู AKITA และหนู db/db ตามการวิเคราะห์ qRT-PCR qRT-PCR ถูกใช้เพื่อกำหนดหาการแสดงออกของ miRNA-34a-5p, miRNA-125b-5p, miRNA-129b- 1-3 p, miRNA-142a-3p, miRNA{{10}}b-5p และ miRNA-223a-3p ใน แต่ละกลุ่ม (n=6 ต่อกลุ่ม) การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี <>

การกำหนดลักษณะของ miRNA ที่แสดงออกอย่างแตกต่างระดับการแสดงออกของหกแสดงต่างกันmiRNAs(miRNA-34a-5p,-125b-5p,-129b-1-3p, -142a{{7 }}p,-181b-5p,และ -223-3p) ในไตของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)หนูวัดในไตของหนูเมาส์รุ่นอื่นๆ ของโรคไตโดย qRT-PCR: แบบจำลองของการเกิดพังผืดของไตที่เกิดจากท่อไตอุดกั้นข้างเดียว แบบจำลองของการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน (หนูที่เร่งการชราภาพ) และแบบจำลองของภาวะไตวายของอิมมูโนโกลบูลิน (หนู HIGA/NscSlc) ระดับการแสดงออกของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p ไม่แตกต่างกันระหว่างแบบจำลองเมาส์และหนูควบคุมที่เกี่ยวข้อง (รูปที่ 4) แต่ ระดับการแสดงออกของอีกสี่miRNAs(miRNA-34a-5p,-129b-1-3p,-142a-3p,and -223-3p)แตกต่างกัน (รูปที่ 4). ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าการแสดงออกที่แตกต่างกันของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p ในไตอาจจำเพาะต่อ DKD(โรคไตจากเบาหวาน).

รูปที่ 4เปรียบเทียบmiRNAระดับการแสดงออกในโรคไตต่างๆ ระดับการแสดงออกของ miRNA{{0}}a-5p, miRNA-125b-5p, miRNA-129b-1-3p, miRNA -142a-3p, miRNA-181b-5p และ miRNA-223-3p ในไตของแบบจำลองเมาส์ของโรคไต (n{{11} } ต่อกลุ่ม) การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี < 0.05.="" ตัวย่อ:="" samp,="" เมาส์ที่เร่งความเร็วในวัยชรา;="" samr,="" ความทนทานต่อเมาส์ที่เร่งการชราภาพ;="" iri,="" การบาดเจ็บของไอออน="" ischemia-reperfu;="" uuo="" การอุดตันของท่อไตข้างเดียว="" higa,="" อิมมูโนโกลบูลินสูง="" a;="" น.="">

ต่อไป เราวิเคราะห์ระดับการแสดงออกของmiRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p ในไตและซีรัมของหนู AKITA และหนู db/db เมื่อเวลาผ่านไปโดยใช้การวิเคราะห์ qRT-PCR ระดับการแสดงออกของ miRNA-125b-5p ในไตลดลงตามความก้าวหน้าของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ในหนูเมาส์ db/db และหนู AKITA เมื่อเปรียบเทียบกับหนูเมาส์ควบคุม (หนูเมาส์ db/db {{0}}.79±0.03-พับที่อายุ 12 สัปดาห์;P<0.05,0.59±0.03-fold at="" 28=""><0.01, akita="" mice:0.71±0.04-fold="" at="" 12=""><0.01, 0.16±0.03-fold="" at="" 36=""><0.05)(fig.5a).in contrast,="" the="" expression="" levels="" of="">miRNA{{0}}b-5p ในซีรัมเพิ่มขึ้นเป็น 1.76±0.11-เท่า(P<0.05) in="" db/db="" mice="" at="" 28="" weeks-old;="" however,they="" did="" not="" change="" in="" akita="" mice="" (fig.5a).="" the="" expression="" levels="" of="" mirna-181b-5p="" in="" the="" kidney="" also="" decreased="" with="" the="" progression="" of="">(โรคไตจากเบาหวาน)ในหนูเมาส์ db/db และหนู AKITA เมื่อเปรียบเทียบกับหนูควบคุม (หนูเมาส์ db/db {{0}}.64±0.03-พับที่อายุ 28 สัปดาห์;P< 0.05,="" akita="" mice:="" 0.75±0.05-fold="" at="" 12=""><0.05 and="" 0.38±0.07-fold="" at="" 36=""><0.05)(fig. 5b).additionally,="" the="" expression="" levels="" of="">miRNA{{0}}b-5p ในซีรัมลดลงเป็น 0.63±0.05-เท่า(P<0.05)in db/db="" mice="" at="" 28="" weeks-old;="" however,="" they="" did="" not="" show="" statistically="" significant="" changes="" in="" akita="" mice="">

รูปที่ 5การวิเคราะห์ช่วงเวลาของระดับของ miRNA{{0}}b-5p และ miRNA-181b-5p ในไตและซีรัมของหนู AKITA และ db/db . ระดับของ miRNA-125b-5p ในไต (กราฟบน) และซีรัม (กราฟล่าง) ของ db/db และหนู AKITA (n=6 ต่อกลุ่ม) (a) ระดับของ miRNA-181b-5p ในไต (กราฟบน) และซีรัม (กราฟล่าง) ของ db/db และหนู AKITA (n=6 ต่อกลุ่ม) (b) การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี <>

การวิเคราะห์ในแหล่งกำเนิดไฮบริด (ISH) แสดงให้เห็นว่า miRNA-125b-5p ถูกแสดงออกในนิวเคลียสและไซโตซอลของโกลเมอรูลีและท่อของไตของหนู db/db แต่ miRNA{{3 }}b-5p ตรวจไม่พบโดยใช้วิธีนี้ (รูปที่ 6) นี่อาจแนะนำว่า miRNA-125b-5p แสดงออกอย่างแพร่หลายในไต แต่การแสดงออกของไตของ miRNA-181b-5p ต่ำกว่าเกณฑ์ความไวสำหรับการตรวจจับ โดย ISH.

รูปที่ 6อิมเมจไฮบริไดเซชันในแหล่งกำเนิดสำหรับ miRNA-181b-5p และ miRNA-125b-5p ในไตจากหนูเมาส์ db/db ในไตของหนู db/db การผสมพันธุ์ด้วยโพรบแอนติเซนส์กับ miR-125b-5p เผยให้เห็นการแสดงออกในนิวเคลียสและไซโตซอลของเซลล์ไตและเซลล์แบบท่อ (เม็ดสีดำบ่งชี้สัญญาณบวก) ในขณะที่ การผสมข้ามพันธุ์กับโพรบ miR-181b-5p ไม่ได้ สเกลบาร์ 50 มม. ตัวย่อ: RNU6, U6 นิวเคลียร์ขนาดเล็ก 1

ผลกระทบของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p ต่อ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ในร่างกายการแสดงออกของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p ถูกปรับลดลงอย่างจำเพาะใน DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(หนู AKITA และหนู db/db) ดังนั้นเราจึงพิจารณาผลกระทบของการแสดง miRNA แต่ละตัวมากเกินไปโดยใช้ miRNA-mimics ในหนู db/db เพื่อตรวจสอบความเหมาะสมของพวกเขาเป็นเป้าหมายการรักษาสำหรับ DKD(โรคไตจากเบาหวาน). การส่ง miRNA-เลียนแบบไปยังไตของหนู db/db ในการส่งการจำลอง miRNA ไปยังไตของหนู db/db เราใช้อนุภาคนาโนโพลีเอทิลเลนิมีน (PEI-NPs) ซึ่งเป็นพาหะนำโรคที่ไม่ใช่ไวรัส เพื่อยืนยันการส่งมอบที่เพียงพอของmiRNA-เลียนแบบโดยใช้ PEI-NPs, Cy-3-ติดป้ายกำกับ miRNA-mimic คอนจูเกตที่มี PEI-NPs (miRNA-mimic-PEI-NPs) ถูกฉีดเข้าเส้นเลือดดำผ่านทางหลอดเลือดดำส่วนหางลงในหนูเมาส์ db/db จากนั้นจึงระบุ miRNA-mimic-PEI-NPs ที่ติดฉลาก Cy3-ในพื้นที่ไตและท่อไตของไตของหนูเมาส์ db/db (รูปที่ 7A)

รูปที่ 7ระดับการกระจายและการแสดงออกของmiRNAsบริหารร่วมกับ PEI-NPs ในไตของหนูเมาส์ miRNA-mimic (สีแดง) ถูกฉีดด้วย PEI-NPs และสามารถสังเกตได้ในพื้นที่ tubulointerstitial (สีเขียว) และบริเวณไตของไต แถบมาตราส่วน=200 มม. (A) การแสดงออกของ miRNA-181b-5p ในไตโดยใช้ miRNA-181b-5p-mimic-PEI-NPs (n=3 ต่อกลุ่ม) (ข). การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี<0.05. abbreviations.="" dapi,="" 40="" ,6-diamidino-2-phenylindole;="" fitc,="" flfluorescein="" isothiocyanate;="" pei-nps,="" polyethylenimine="" nanoparticles.="" (color="" version="" of="" fifigure="" is="" available="">

ผลกระทบของ miRNA-181b-5p การแสดงออกที่มากเกินไปต่อ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ในร่างกายการบริหารงานเดียวของmiRNA-181b-5p-mimic-PEI-NPs ผ่านทางหลอดเลือดดำส่วนหางทำให้เกิดการแสดงออกที่มากเกินไปในไตสองเท่าซึ่งคงอยู่เป็นเวลาหนึ่งสัปดาห์ (รูปที่ 7B) เพื่อตรวจสอบผลการรักษาที่เป็นไปได้ 1 ประการของmiRNA-181ข-5p ใน DKD(โรคไตจากเบาหวาน), miRNA-181b-5p-mimic-PEI-NPs (เลียนแบบ nmol miRNA-mimic, อัตราส่วน N/P 6) ถูกฉีดเข้าเส้นเลือดดำสัปดาห์ละครั้งลงในหนูเมาส์ db/db ตั้งแต่ 10 ถึง 20 สัปดาห์ของ อายุ. การบริหารให้ miRNA-181b-5p-mimc-PEI-NPs ลดโปรตีนในปัสสาวะอย่างมีนัยสำคัญ (538±44 ug/mg creatinine) เทียบกับการควบคุม db/db หนูเมาส์ (869±84 ug /mg ครีเอตินีน)และ db/db หนูเมาส์ที่ถูกบริหารให้กลุ่มควบคุม-miRNA-PEI-NPs (965±152ug/mg creatinine) ที่อายุ 20 สัปดาห์ (รูปที่ 8A) การบริหารให้miRNA-181b-5p-mimic-PEI-NP ยังปรับปรุงการเปลี่ยนแปลงทางเนื้อเยื่อวิทยาที่เป็นลักษณะของ DKD เช่น การขยายตัวของไตที่ผิดปกติและการขยายตัวของพื้นที่ mesangial ในหนูเมาส์ db/db (รูปที่ 8B) นอกจากนี้ สิ่งนี้ลดระดับการแสดงออกของคอลลาเจน I และคอลลาเจน IV ในไตของหนูเมาส์ db/db (รูปที่ 8C และ 8D) ลงครึ่งหนึ่ง การค้นพบนี้แสดงให้เห็นว่าmiRNA-181b-5p-mimic-PEI-NPs มีผลในการป้องกันการลุกลามของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน).

รูปที่ 8ผลของการบริหารงานของmiRNA-181b-5p-mimic-PEI-NP ในหนูเมาส์ db/db การเปลี่ยนแปลงของอัลบูมินูเรีย (n=6 ต่อกลุ่ม) (A) การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี<0.05. histological="" evaluation="" of="" 20="" glomeruli="" per="" group="" (3-="" 4="" glomeruli="" per="" mouse="" and="" six="" mice="" per="" group).="" mesangial="" index="" was="" calculated="" using="" periodic="" acid-schiff="" (pas)-stained="" sections="" from="" the="" kidneys="" of="" normal="" mice="" (control),="" untreated="" db/db="" mice="" (db/db),="" db/db="" mice="" administered="">miRNA-181b-5p-mimic-PEI-NPs (db/db plusmiRNA-181b-5p-PEI-NPs) และหนูเมาส์ db/db ที่บริหารให้กลุ่มควบคุม-miRNA-PEI-NP (db/db บวกกลุ่มควบคุม-miRNA-PEI-NP) การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี<0.05; y=""><0.05 compared="" with="" control="" (b).="" scale="" bar="50" mm.="" immunohistochemical="" and="" qrt-pcr="" evaluation="" of="" collagen="" i="" (c)="" and="" collagen="" iv="" (d)="" expression="" (n="6" per="" group).="" collagen="" i="" expression="" in="" glomerular="" and="" tubulointerstitial="" areas,="" evaluated="" using="" immunohistochemistry="" (upper="" panels)="" and="" col1a1="" mrna="" expression="" in="" the="" kidney,="" evaluated="" using="" real-time="" pcr="" (lower="" graphs)="" in="" each="" group.="" collagen="" iv="" expression="" in="" glomerular="" and="" tubulointerstitial="" areas,="" evaluated="" using="" immunohistochemistry="" (upper="" panels)="" and="" col4a1="" mrna="" expression="" in="" the="" kidney,="" evaluated="" using="" real-time="" pcr="" (lower="" graphs)="" in="" each="" group.="" wilcoxon="" rank="" sum="" test.="" *=""><0.05. scale="" bar="" 50="" mm.="" abbreviations:="" pei-nps,="" polyethylenimine="" nanoparticles;="" uacr,="" urine="" albumin-to-creatinine="">

กลไกของผลกระทบของ miRNA-181b-5p-mimic-PEI-NPs ต่อ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ในร่างกายการวิเคราะห์ยีน microarray ถูกดำเนินการบนเนื้อเยื่อไตจากแต่ละกลุ่ม: หนูเมาส์ปกติ (n=2), หนูเมาส์ db/db ที่ไม่ถูกบำบัด (n=2), db/db หนูเมาส์ที่ถูกบริหารให้ miRNA-181 b-5p-mimic-PEI-NPs (n=2) ​​และ db/db หนูเมาส์ที่ถูกบริหารให้กลุ่มควบคุม-miRNA-PEI-NPs (n=2) การบริหาร miRNA-181b-5p-mimic-PEI-NP เพิ่มการแสดงออกของยีน 24 ตัวและลดการแสดงออกของยีน 27 ตัวรวมถึง Slc25a25 และ Grm7 ซึ่งคาดว่าจะเป็น mRNA เป้าหมายของmiRNA-181b-5p มากกว่าสี่เท่าเทียบกับหนู db/db ที่ไม่ผ่านการบำบัด (ตาราง Ⅲa และรูปที่ 9) การบริหารการควบคุม-miRNA-PEI-NP เพิ่มการแสดงออกของยีนหนึ่งยีนและลดการแสดงออกของยีนหนึ่งยีนมากกว่าสี่เท่าเทียบกับหนู db/db ที่ไม่ได้รับการรักษา (ไม่แสดงข้อมูล) นอกจากนี้ การวิเคราะห์เส้นทางการส่งสัญญาณโดยใช้ microarray ตามด้วย qRT-PCR (แต่ละกลุ่ม:n=6) แสดงmiRNA-181b-5p-mimic-PEI-NP admin-istration เปลี่ยนนิพจน์ของ mRNA เจ็ดตัว (Slc25a25,Gli3,Cryl,Erc2,Nrld,Creb313,Psme3) ในหกเส้นทางการส่งสัญญาณใน db/db หนู (รูปที่ 10) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าmiRNA-181ข-5p มีอิทธิพลต่อ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)โดยการปรับเส้นทางสัญญาณต่างๆ

รูปที่ 9แผนที่ความร้อนของยีนที่แสดงความแตกต่างในไต แผนที่ความร้อนแสดงการจัดกลุ่มตามลำดับชั้นและความแปรผันเชิงระบบในการแสดงออกของยีนในไตของหนูเมาส์จากแต่ละกลุ่ม (n=2 ต่อกลุ่ม) คำย่อ: PEI-NPs, อนุภาคนาโนโพลีเอทิลเลนิมีน

ผลของ miRNA-125b-5p ต่อ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ในร่างกาย miRNA-125b-5p-mimic-PEI-NP ถูกบริหารให้แก่หนูเมาส์ db/db โดยใช้วิธีการเดียวกันกับ miRNA-181b-5p-mimic-PEI-NPs การบริหาร. อย่างไรก็ตาม การบริหารงานของmiRNA-125b-5p-mimic-PEI-NPs ไม่มีผลต่อความก้าวหน้าของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ในหนู db/db (วัสดุเสริม) ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าmiRNA-125b-5p อาจไม่ส่งผลต่อความก้าวหน้าของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน).

รูปที่ 10.การเปลี่ยนแปลงของ mRNA โดยการแสดงออกที่มากเกินไปของmiRNA-181ข-5น. การวิเคราะห์ qRT-PCR (n=6 ต่อกลุ่ม) แสดงmiRNAการบริหาร -181b-5p-mimic-PEI-NP เปลี่ยนการแสดงออกของ mRNA เจ็ดตัว (Slc25a25, Gli3, Cry1, Erc2, Nr1d1, Creb3l3, Psme3) ในแต่ละกลุ่ม (n=6 ต่อกลุ่ม) การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี<>

ความเหมาะสมของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p ในฐานะตัวบ่งชี้ทางชีวภาพในการวินิจฉัยของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน).เพื่อตรวจสอบประโยชน์ของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p เป็นไบโอมาร์คเกอร์ในการวินิจฉัยของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน), ระดับซีรั่มของแต่ละคนถูกวัดในผู้ป่วยที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=25), อาสาสมัครสุขภาพดี(n=25) และผู้ป่วยโรคไตที่เข้าคู่กันที่ไม่ใช่ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=50) โดยใช้ qRT-PCR ลักษณะเฉพาะของแต่ละกลุ่มแสดงไว้ในตารางที่ IV ระดับเซรั่มของmiRNA{{0}}b-5p สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (1.89±0.40-เท่า, P<0.05)and that="" of="" mirna-181b-5p="" was="" significantly="" lower="" ((0.30±0.06-fold,=""><0.05)in patients="" with="">(โรคไตจากเบาหวาน)เมื่อเปรียบเทียบกับโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD (miRNA{{0}}b-5p:(0.94±0.13-เท่า)miRNA{{0}}b-5p:(1.{{10}}6±0.20-เท่า))และอาสาสมัครที่มีสุขภาพดี (miRNA{{6 }}b-5p:(1.00±0.19-เท่า), miRNA-181b-5p:(1.{{15} }±0.16-เท่า)))(รูปที่ 11A) miRNA ทั้งสองนี้ยังสามารถแยกแยะDKD .ได้(โรคไตจากเบาหวาน)จากโรคไตอื่นๆ ตามการวิเคราะห์ลักษณะการทำงานของตัวรับ (ROC) [iRNA{{0}}b-5p: cut-off value 0.78,พื้นที่ใต้เส้นโค้ง( AUC)0.74, ความไว 0.86, ความจำเพาะ 0.58, P<0.05; mirna-181b-5p:="" cut-off="" value="" 0.58,auc="" 0.79,sensitivity="" 0.93,="" specificity=""><0.05](fig.11b).the ratio="" of="" the="" serum="" levels="" of="" mirna-125b-5p="" and="">miRNA-181b-5p (miRNA-125b-5p/miRNA-181b-5p) สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในผู้ป่วยที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(7.23±1.50-พับ P<0.01)compared with="" patients="" with="" renal="" diseases="" other="" than="">(โรคไตจากเบาหวาน)(1.78±028-เท่า) และวัตถุที่มีสุขภาพดี (1.32±025-เท่า)(รูปที่.11C) การใช้อัตราส่วนการแสดงออกนี้ช่วยปรับปรุงประโยชน์ของการวัดเหล่านี้เพื่อแยกความแตกต่างของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)จากโรคไตอื่น ๆ ตามการวิเคราะห์ ROC (miRNA{0}}b-5p/miRNA-181b-5p: ค่า cut-off 2.{{ 11}}5, ความไว 1.00, ความจำเพาะ 0.73, AUC 0.92,P<>

รูปที่ 11ประโยชน์ของระดับซีรัมของ miR-125b-5p และ miRNA-181b-5p เป็นตัวบ่งชี้ทางชีวภาพในการวินิจฉัยสำหรับ DKD(โรคไตจากเบาหวาน). ระดับซีรัมของ miR-125b-5p (แผงด้านซ้าย) และ miRNA-181b-5p (แผงด้านขวา) ในอาสาสมัครที่มีสุขภาพดี (n=25) , ผู้เข้าร่วมที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=25) และผู้เข้าร่วมที่เป็นโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=50) (A) การวิเคราะห์ ROC ของระดับซีรัมของ miRNA-125b-5p (แผงด้านซ้าย) และ miRNA-181b-5p (แผงด้านขวา) สำหรับการวินิจฉัย DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(ข). อัตราส่วนของระดับซีรัมของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p (miRNA-125b-5p/miRNA - 181ข-5p) ในวิชาที่มีสุขภาพดี (n=25) ​​ผู้เข้าร่วมที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=25) และผู้เข้าร่วมที่เป็นโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD (n=50) (แผงด้านซ้าย); และการวิเคราะห์ ROC ของอัตราส่วนของระดับซีรัมของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p (miRNA-125b{{7} }p/miRNA-181b-5p) สำหรับการวินิจฉัยโรค DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(แผงด้านขวา) (C). การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * พี<0.05. abbreviations:="" dkd,="" diabetic="" kidney="">

ประโยชน์ของก้านซิสแทนเช่

ต่อไป ระดับซีรัมของ miRNA-181b-5p และ miRNA-125b-5p และอัตราส่วนการแสดงออกในผู้เข้าร่วมที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=25)หรือโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ที่มีความซับซ้อนโดยโรคเบาหวาน (n=25) ถูกนำมาเปรียบเทียบ ลักษณะของทั้งสองกลุ่มนี้แสดงไว้ในตารางที่ 5 แม้ว่าระดับซีรัมของ miRNA-125b-5p จะลดลงในผู้ป่วยที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)กว่าผู้ที่เป็นโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ที่มีความซับซ้อนโดยโรคเบาหวาน สิ่งนี้ไม่มีนัยสำคัญทางสถิติ (รูปที่ 12A) ระดับซีรัมของ miRNA-181b-5p ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในผู้ป่วยที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)({{0}}.37±0.08-เท่า, P<0.05) compared="" with="" patients="" with="" kidney="" diseases="" other="" than="">(โรคไตจากเบาหวาน)ที่มีความซับซ้อนโดยโรคเบาหวาน({{0}}.94±0.24-เท่า)(รูปที่.12A) อัตราส่วนของระดับซีรั่มของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p(miRNA-125b-5p/miRNA -181b-5p) สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญ (6.65±1.57-เท่า,P<0.01) in="" patients="" with="">(โรคไตจากเบาหวาน)กว่าในผู้ป่วยโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ที่มีความซับซ้อนโดยโรคเบาหวาน (2.13±0.51 เท่า) (รูปที่ 12B) miRNA-125b-5p/miRNA-181b-5p แยกแยะผู้เข้าร่วมที่มี DKD อย่างมีนัยสำคัญ(โรคไตจากเบาหวาน)จากผู้ที่เป็นโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ที่มีความซับซ้อนโดยโรคเบาหวานตามการวิเคราะห์ ROC(ค่าตัด 3.11, ความไว 0.77, ความจำเพาะ 0.91, AUC 0.84,P<0.05)(fig.12b).these findings="" suggest="" that="" the="" serum="" levels="" of="" mirna-125b-5p="" and="" mirna-181b-5p="" and="" their="" ratio="" may="" be="" useful="" diagnostic="" biomarkers="" of="">(โรคไตจากเบาหวาน).

รูปที่ 12.ประโยชน์ของระดับซีรัมของ miR-125b-5p และ miRNA-181b-5p เพื่อแยกความแตกต่างของ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)จากโรคไตอื่น ๆ ที่ซับซ้อนด้วยโรคเบาหวาน ระดับซีรัมของ miR-125b-5p (แผงด้านซ้าย) และ miRNA- 181b-5p (แผงด้านขวา) ในผู้เข้าร่วมที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=25) และผู้เข้าร่วมที่เป็นโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD(โรคไตจากเบาหวาน)ที่มีความซับซ้อนโดยโรคเบาหวาน (n=25) (A) อัตราส่วนของระดับซีรัมของ miRNA-125b-5p และ miRNA-181b-5p (miRNA-125b-5p/miRNA -181ข-5p) ในผู้เข้าร่วมที่มี DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(n=25) และผู้เข้าร่วมที่เป็นโรคไตอื่นที่ไม่ใช่ DKD (n=25) (แผงขวา) การวิเคราะห์ ROC ของอัตราส่วนของระดับซีรัมของ miRNA- 125b-5p และ miRNA-181b-5p (miRNA-125b-5 p/miRNA-181b-5p) สำหรับการวินิจฉัยโรค DKD(โรคไตจากเบาหวาน)(แผงด้านซ้าย) (B) การทดสอบผลรวมอันดับ Wilcoxon * p<0.05. abbreviations:="" dkd,="" diabetic="" kidney="">

ตัวย่อ:BMI= ดัชนีมวลกาย; DAPI=4,6-ไดอะมิดิโน-2-ฟีนิลลินโดล; FITC= ฟลูออเรสซีน ไอโซไทโอไซยาเนต; DKD= โรคไตจากเบาหวาน; eGFR= อัตราการตกไข่โดยประมาณ;ไลโปโปรตีนความหนาแน่นสูง HDL; HIGA= อิมมูโนโกลบูลินสูง A; IRI= การบาดเจ็บจากการขาดเลือดกลับเลือด LDL= ไลโปโปรตีนความหนาแน่นต่ำ; ns= ไม่มีนัยสำคัญ; PEI-NPs= อนุภาคนาโนโพลีเอทิลเลนิมีน RNU6=U6 นิวเคลียร์ขนาดเล็ก 1; SAMP=เมาส์ที่เร่งอายุ; SAMR=ควบคุมเมาส์ที่เร่งการชราภาพ UACR= อัตราส่วนอัลบูมินต่อครีเอตินินในปัสสาวะ UUO=การอุดตันของท่อไตข้างเดียว

พืชผักชนิดหนึ่ง

หมายเหตุ: สมุนไพรจีนโบราณ cistanche (เรียกอีกอย่างว่า "สมุนไพรมังกร" และ "โสมทะเลทราย") เติบโตในทะเลทรายที่แห้งแล้งและอบอุ่นเท่านั้น ในฐานะหนึ่งในสมุนไพรอมตะทั้งเก้า Cistanche (cistanche tubulosa/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa) มีส่วนผสมที่ทรงประสิทธิภาพมากมาย เช่น echinacoside, acteoside, ไกลโคไซด์ฟีนิลเลทานอยด์ทั้งหมด, ฟลาโวนอยด์, โพลีแซคคาไรด์ ฯลฯ ส่วนผสมที่มีประสิทธิภาพเหล่านี้ทำให้ซิสทานช์กลายเป็นสมุนไพร สมุนไพรบำรุงและวัสดุอาหารสำหรับภูมิคุ้มกันของผู้คน อวัยวะภายใน เซลล์สมองและเซลล์ประสาท ฯลฯ การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ได้ยืนยันผลต่อไปนี้ของ cistanche (ประโยชน์ของ cistanche): ปรับปรุงภูมิคุ้มกัน; ปรับปรุงสมรรถภาพทางเพศและการทำงานของไต ป้องกันความเมื่อยล้า; ต่อต้านริ้วรอย; ปรับปรุงหน่วยความจำ โรคพาร์กินสัน; โรคอัลไซเมอร์; สารต้านอนุมูลอิสระ; สบายท้องผูก; ต้านการอักเสบ; ส่งเสริมการเจริญเติบโตของกระดูก ผิวขาว; ปกป้องตับ; เป็นต้น

cistanche คืออะไร