อีเมล:joanna.jia@wecistanche.com

กิจกรรมปรับปรุงยากล่อมประสาทและความรู้ความเข้าใจของ Cistanche สมุนไพรจีนโบราณ

Dongfang Wang,1 Haizhen Wang,2 และ Li Gu2

1State Key Laboratory of Biocontrol, Institute of Aquatic Economic Animal and Guangdong Province Key Laboratory for Aquatic Economic Animal, School of Life Sciences, Sun Yat-sen University, Guangzhou 510275, China

2ศูนย์วิจัยวิศวกรรมอาหารและสุขภาพกระทรวงศึกษาธิการ มหาวิทยาลัยซุนยัดเซ็น กวางโจว 510275 ประเทศจีน

ควรส่งจดหมายโต้ตอบถึงหลี่กู่ ได้รับ 20 กุมภาพันธ์ 2017; แก้ไขเมื่อ 11 พฤษภาคม 2560; ยอมรับ 28 พฤษภาคม 2017; Published 28 มิถุนายน 2017 Academic Editor: Ki-Wan Oh Copyright © 2017 Dongfang Wang et al. นี่เป็นบทความที่เข้าถึงได้ซึ่งเผยแพร่ภายใต้ Creative Commons Attribution License ซึ่งอนุญาตให้ใช้ แจกจ่าย และทำซ้ำได้ไม่จำกัดในสื่อใดๆ โดยต้องอ้างอิงงานต้นฉบับอย่างเหมาะสม ผู้คนมากกว่าสิบเปอร์เซ็นต์ต้องทนทุกข์ทรมานจากภาวะซึมเศร้าและความผิดปกติทางจิตที่เกี่ยวข้องอย่างน้อยหนึ่งครั้งในช่วงชีวิต และภาวะซึมเศร้าและความผิดปกติทางจิตที่เกี่ยวข้องเป็นปัญหาด้านสาธารณสุขที่ยิ่งใหญ่ที่สุดปัญหาหนึ่งของโลก ทฤษฎีระบบพหุคูณถือได้ว่าการไม่เป็นระเบียบของระบบหลาย ๆ ระบบรองรับการเกิดโรคของภาวะซึมเศร้าและความผิดปกติทางจิตที่เกี่ยวข้อง และการบำบัดแบบใหม่ที่ยึดตามทฤษฎีการควบคุมหลายระบบเป็นสิ่งที่จำเป็นอย่างเร่งด่วน ในการศึกษานี้ ฤทธิ์ยากล่อมประสาทของยาต้มจากสมุนไพรCistancheทะเลทรายYCMa และ Cistanchetubulosaถูกตรวจสอบ สมุนไพรCistancheยาต้มลดระยะเวลาการไม่สามารถเคลื่อนที่ได้อย่างมีนัยสำคัญในการทดสอบการระงับหางของเมาส์ หนูที่บำบัดด้วยยาต้มสมุนไพรแสดงให้เห็นความสามารถในการเรียนรู้เชิงพื้นที่และความจำที่ดีขึ้นในการทดสอบเขาวงกตในน้ำของมอร์ริส ยาต้มสมุนไพรในกลุ่มที่ได้รับการบำบัดแสดงกิจกรรมโมโนเอมีนออกซิเดส (MAO) ที่ปรับลด; ความเข้มข้นของโดปามีน (DA) ในสมองถูกควบคุม ซึ่งบ่งชี้ว่าสมุนไพรCistancheยาต้มปรับปรุงความตื่นเต้นง่ายของเส้นประสาท; ความเข้มข้นของคอร์ติโคสเตอโรนในซีรัม (CORT) ในซีรัมลดลง แสดงว่าหนูได้รับประโยชน์จากระดับความเครียดที่ลดลง ดังนั้นประสิทธิภาพและกลไกของยากล่อมประสาทแบบดั้งเดิมชาวจีนสมุนไพรCistancheถูกสำรวจในการศึกษาครั้งนี้ สมุนไพรCistancheแสดงให้เห็นถึงศักยภาพที่จะพัฒนาเป็นการบำบัดแบบเสริมและทางเลือกสำหรับภาวะซึมเศร้า

ป้องกันโรคอัลไซเมอร์ด้วย cistanche

1. บทนำ

อาการซึมเศร้าและความผิดปกติทางอารมณ์ที่เกี่ยวข้อง โดยประมาณร้อยละ 12-17 ของประชากรที่ประสบอย่างน้อยหนึ่งครั้งในชีวิต เป็นสาเหตุสำคัญของความบกพร่องทางจิตและถือเป็นปัญหาด้านสาธารณสุขที่สำคัญอย่างหนึ่งทั่วโลก[1].โดยเฉพาะอย่างยิ่ง สัดส่วนที่มีนัยสำคัญของผู้ป่วยที่มีภาวะซึมเศร้าประสบกับการสูญเสียความทรงจำ ปัญหาสมาธิ พลังงานหรือความเหนื่อยล้าที่ลดลง การสูญเสียความสนใจหรือความเพลิดเพลินในงานอดิเรกและกิจกรรมต่างๆ นอนหลับยาก ตื่นเช้าขึ้น หรือนอนมากเกินไป แม้ว่าสารตั้งต้นของระบบประสาทสำหรับความผิดปกติในภาวะซึมเศร้าและอาการที่เกี่ยวข้องจะไม่ชัดเจน แต่ก็เป็นที่ยอมรับกันโดยทั่วไปว่าการด้อยค่าของ neuroplasticity และความยืดหยุ่นของเซลล์ทำให้เกิดพยาธิสรีรวิทยาของภาวะซึมเศร้าและการรักษาที่ประสบความสำเร็จอาจขึ้นอยู่กับการแทรกแซงของระดับสารสื่อประสาท[2]. แนวทางในการใช้ยารักษาโรคซึมเศร้านั้นขึ้นอยู่กับระบบโมโนเอมีนแบบคลาสสิก

สมมติฐานซึ่งอ้างว่าการควบคุมที่ผิดปกติของโมโนเอมีนโดยเฉพาะอย่างยิ่งเซโรโทนิน (5-HT) และนอร์เอพิเนฟริน (NE) มีส่วนทำให้เกิดโรคซึมเศร้า และการแทรกแซงของระบบสารสื่อประสาทด้วยตัวเร่งปฏิกิริยาโดปามีนและตัวปรับแก้โดปามีน-นอแรดรีเนอจิกจะช่วยบรรเทาอาการของภาวะซึมเศร้าได้ ความผิดปกติ [3]. แม้ว่าจะมีการกำหนดอย่างกว้างขวาง แต่ประสิทธิภาพการรักษาของยากล่อมประสาทนั้นเป็นที่น่าสงสัยและไม่สามารถละเลยผลข้างเคียงได้ เนื่องจากผู้ป่วยส่วนใหญ่ไม่ตอบสนองต่อการควบคุมระบบโมโนเอมีน [4]. เมื่อเร็ว ๆ นี้ ทฤษฎีใหม่เกี่ยวกับการเกิดโรคซึมเศร้าระบุว่าระบบหลายระบบ รวมทั้งเส้นทางการอักเสบ เส้นทางความเครียดออกซิเดชัน แกนไฮโปทาลามิค-ต่อมใต้สมอง-ต่อมหมวกไต (HPA) ระบบเมตาบอลิซึมและพลังงานชีวภาพ เส้นทางประสาท ระบบกลูตาเมต ระบบฝิ่น และ ระบบ cholinergic มีความเกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการเกิดภาวะซึมเศร้า [3] หลักฐานแสดงให้เห็นว่าการแทรกแซงหลายเป้าหมายให้ประสิทธิภาพที่ดีกว่าการแทรกแซงเป้าหมายเดียว [5] จำเป็นต้องมีการบำบัดแบบใหม่โดยใช้ทฤษฎีการไม่ควบคุมระบบหลายระบบโดยด่วน

มีรายงานว่าผลิตภัณฑ์สมุนไพรบริโภคมากกว่าครึ่งหนึ่งของประชากรสหรัฐ[6];ความสนใจและความต้องการสมุนไพรหรือผลิตภัณฑ์สมุนไพรเป็นวิธีเสริมในการรักษาภาวะซึมเศร้ากำลังเติบโตทั่วโลก พบพืชทางการแพทย์หลายแห่งเพื่อแสดงให้เห็นถึงประโยชน์ในการบรรเทาภาวะซึมเศร้า สมุนไพรที่มีรายงานว่ามีผลในการระงับภาวะซึมเศร้าและปรับปรุงการทำงานขององค์ความรู้ ได้แก่ ทะเล buckthorn [7], แปะก๊วย biloba[8], พริกไทยดำ[9], Hypericum perforatum [10], Griffonia simplicifolia[11]. การบริหารร่วมกันของกรด ferulic และ piperine แสดงผลคล้ายยากล่อมประสาทที่เสริมฤทธิ์กันในหนูโดยการจัดการระบบ monoaminergic[7]. Albiflorin มีลักษณะเฉพาะด้วยความสัมพันธ์แบบเลือกเฟ้นสูงกับตัวรับสารสื่อประสาทและผู้ขนส่ง และเพิ่มความเข้มข้นนอกเซลล์ของ 5-HT และ NE ในมลรัฐของหนูที่เคลื่อนไหวอย่างอิสระอย่างมีนัยสำคัญ[12]. สมุนไพรทางการแพทย์ Melissa officinalis L. บรรเทาพฤติกรรมซึมเศร้าของหนูด้วยการใช้อิทธิพลต่อระดับสารสื่อประสาท serotonergic[13].สมุนไพรหรือยาต้มเหล่านี้พัฒนาขึ้นเพื่อเป็นทางเลือกในการรักษาภาวะซึมเศร้า ช่วยบรรเทาอาการซึมเศร้าและเป็นแหล่งที่มาใหม่สำหรับการพัฒนายาแก้ซึมเศร้า สมุนไพรCistancheพันธุ์ที่จำหน่ายในดินแดนแห้งแล้งและทะเลทรายทางตอนเหนือของจีน เป็นสมุนไพรยาจีนโบราณ และใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษาโรคต่างๆ ในประเทศจีนเป็นเวลานานกว่า 1,000 ปี สรรพคุณมากมายของสมุนไพรCistancheยาต้มช่วงระหว่างยาโป๊ [14], ส่งเสริมภูมิคุ้มกัน[15], สารต้านอนุมูลอิสระ [16] และป้องกันตับ [17] คุณสมบัติ. C. Deserticola decoctions กระตุ้นการทำงานของเอ็นไซม์ steroidogenic ของอัณฑะ [18] ส่งเสริมการแข็งตัวของอวัยวะเพศ และลดระยะเวลาแฝงของปฏิกิริยาการแข็งตัวของอวัยวะเพศในหนูตอนตอน [19] สมุนไพรCistancheมีรายงานว่ายับยั้งการทำงานของเซลล์ประสาทโดปามีนโดยควบคุมยีนที่ยับยั้งการตายของเซลล์และปัจจัยเกี่ยวกับระบบประสาท [20] ค.tubulosaยาต้มแก้ไขความผิดปกติของความรู้ความเข้าใจที่เกิดจาก A� 1-42 ผ่านการปิดกั้นการสะสมของอะไมลอยด์และฟื้นฟูการทำงานของเซลล์ประสาทโดปามีนเนอร์จิก cholinergic และ hippocampal [21]. คุณสมบัติทางประสาทของสมุนไพร Cistanche แสดงถึงศักยภาพในการรักษาโรคที่เกี่ยวข้องกับความรู้ความเข้าใจ อาการซึมเศร้าเป็นปฏิกิริยาทางอารมณ์ที่ผสมผสานกันโดยทั่วไป โดยมีอาการหลงลืมและความรู้ความเข้าใจเสื่อมถอย [22] สมุนไพร Cistanche มักใช้เป็นยาจีนโบราณเพื่อรักษาอาการหลงลืม นอกจากนี้ รายงานล่าสุดแสดงให้เห็นว่าการให้ cornmeal เสริมด้วย C.tubulosaมีประโยชน์สำหรับการส่งเสริมอายุยืนและการเรียนรู้ที่เกี่ยวข้องกับการดมกลิ่นและการปรับปรุงความจำในแบบจำลองแมลงหวี่ที่ไม่มีกระดูกสันหลัง [23]. ข้อเท็จจริงเหล่านี้บ่งบอกถึงคุณสมบัติในการปรับปรุงความรู้ความเข้าใจของสมุนไพรCistanche; ในการวิจัยครั้งนี้ เราจำแนกคุณสมบัติของยากล่อมประสาทและความสัมพันธ์กับกิจกรรมการปรับปรุงความรู้ความเข้าใจในแบบจำลองสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมเป็นครั้งแรกโดยควบคุมระบบโมโนเอมีนและแกน HPA ให้ความสว่างแก่คุณสมบัติยากล่อมประสาทและกลไกเบื้องต้นของสมุนไพรCistancheสามารถขยายขอบเขตการประยุกต์ใช้สมุนไพร Cistanche ซึ่งสามารถพัฒนาเป็นวิธีการรักษาทางเลือกสำหรับภาวะซึมเศร้าได้

2. วัสดุและวิธีการ

1.1. การเตรียมวัสดุจากพืชและยาต้ม C. deserticola YCMa ได้มาจากเขตปกครองตนเอง Nei Mongol ประเทศจีน; ค.tubulosaได้มาจากเขตปกครองตนเองซินเจียงอุยกูร์ ประเทศจีน ก่อนใช้ยาต้ม สมุนไพร (C. deserticola YCMa หรือ C. tubulosa) ได้รับการตรวจสอบเพื่อตรวจหาเนื้อหาของ echinacoside และ verbascoside โดยใช้ HPLC (high-performance liquid chromatography) (Milford, MA, Waters, USA) และผลิตภัณฑ์ที่เข้าเงื่อนไข (ตาม สู่ตำรับยาแห่งสาธารณรัฐประชาชนจีน) ถูกนำมาใช้ในการทดลองกับสัตว์ทดลอง ยาต้มได้มาจากวิธีการระเหยของน้ำที่พัฒนาโดยศูนย์วิจัยวิศวกรรมอาหารและสุขภาพแห่งกระทรวงศึกษาธิการ มหาวิทยาลัยซุนยัดเซ็น Cistanche deserticola YCMa แห้งขนาด 125 ก. ถูกทุบและกรองด้วย120-ตะแกรงตาข่าย จากนั้นให้ผงละลายในน้ำบริสุทธิ์พิเศษ 3 ลิตร ให้ความร้อน

ที่ 100∘C เป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นให้เย็นลงจนถึงอุณหภูมิห้องแล้วกรอง ส่วนลอยเหนือตะกอนถูกนำกลับมาใช้ใหม่ จากนั้นตะกอนจะถูกละลายในน้ำบริสุทธิ์พิเศษ 2 ลิตร จากนั้นให้ความร้อนเป็นเวลา 1.5 ชั่วโมงและทำให้เย็นลงตามที่กล่าวไว้ข้างต้นเพื่อรีไซเคิลส่วนลอยเหนือตะกอน จากนั้นนำตะกอนไปรีไซเคิลส่วนลอยเหนือตะกอน เนื้อหาของส่วนลอยเหนือตะกอนทั้งหมดถูกทำให้อุดมด้วยเครื่องระเหยสูญญากาศแบบหมุนที่อุณหภูมิ 60∘C; ในที่สุด ความเข้มข้นของยาที่ยังไม่ผ่านกระบวนการใดๆ ถูกกำหนดเป็น 0.5 ก./มล. และผลิตภัณฑ์ถูกเก็บไว้ที่ -20∘C

1.2. การทดสอบ Echinacoside และ Verbascoside โดยการวิเคราะห์ HPLC HPLC (โครมาโตกราฟีของเหลวประสิทธิภาพสูง) ถูกใช้เพื่อวัดการสอบวิเคราะห์เชิงคุณภาพและเชิงปริมาณของเอไคนาโคไซด์และเวอร์บาสโคไซด์ verbascoside (ความบริสุทธิ์ > 93 เปอร์เซ็นต์) และ echinacoside (ความบริสุทธิ์ > 93 เปอร์เซ็นต์) ถูกซื้อจากสถาบันแห่งชาติเพื่อการควบคุมอาหารและยา (ปักกิ่ง ประเทศจีน) และใช้เป็นตัวควบคุมมาตรฐาน

1.3. การดูแลสัตว์และการดำเนินการทดลอง หัวข้อย่อยคือหนูคุนหมิงเพศผู้ SPF (ปลอดเชื้อก่อโรค) ที่มีน้ำหนัก 21∼25 กรัม จัดหาโดยศูนย์สัตว์ทดลองทางการแพทย์ของมณฑลกวางตุ้ง สัตว์ถูกเลี้ยงในกรงพลาสติก (กรงละสิบตัว) สภาพแวดล้อมถูกกำหนดดังนี้: ความชื้น 40∼70 เปอร์เซ็นต์ , อุณหภูมิห้อง 21 ± 1∘C และ 12 ชั่วโมง: 12 ชั่วโมงแสงมืดระยะเวลา การทดลองกับสัตว์ทั้งหมดได้รับการอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ของมหาวิทยาลัยซุนยัดเซ็น

1.4. การทดสอบช่วงล่างหาง การทดสอบระบบกันสะเทือนท้ายเป็นไปตามโปรโตคอลที่ Cryan et al อธิบายไว้ [24] มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย โดยสังเขป ในวันที่ 21 หนูถูกแขวนไว้ที่หางโดยใช้ตะแลงแกงโลหะที่ผูกไว้ด้วยสายสวนไนลอน โดยมีหัวอยู่ที่ความสูง 50 มม. จากพื้น หนูถูกแขวนไว้บนตะขอบนเทปกาว 10∼20 มม. จากปลายหางของมัน และถูกแยกออกมาทางเสียงและทางสายตาด้วยไม้กระดาน การเคลื่อนไหวของร่างกายของเมาส์ได้รับการบันทึกและไม่สนใจการเคลื่อนไหวของระบบทางเดินหายใจ ก่อนวันของการทดลอง หนูถูกพักไว้เป็นเวลา 8 นาทีเพื่อการปรับตัว

1.5. การทดสอบเขาวงกตน้ำมอร์ริส การทดสอบเขาวงกตในน้ำเป็นไปตามคำอธิบายของ Vorhees et al [25–27] โดยใช้อุปกรณ์ที่พัฒนาโดย Chinese Academy of Medical Sciences สระน้ำทรงกลม (เส้นผ่านศูนย์กลาง 150 ซม.) เต็มไปด้วยน้ำ (26

± 1∘C; ความสูงขอบล้อ (ระยะผิวน้ำถึงขอบผนัง): 10 ซม.

ตารางที่ 1: เนื้อหาของ echinacoside และ verbascoside ในผงและยาต้มของ C. deserticola YCMa และ C.tubulosa.

ใช้แท่นกู้ภัยทรงกลม (เส้นผ่านศูนย์กลาง 11 ซม. ระยะทาง

ตัวอย่าง

เปอร์เซ็นต์ ECH เปอร์เซ็นต์กริยาระหว่างจุดศูนย์กลางของแท่นและผนังสระ: 27 ซม.) จมอยู่ใต้น้ำ 1–1.5 ซม. ใต้ผิวน้ำ และพื้นที่ทดสอบถูกส่องสว่างด้วยแสงทางอ้อม (50 ± 10 ลักซ์) เพื่อหลีกเลี่ยงแสงสะท้อน ใช้ตำแหน่งเริ่มต้นสี่ตำแหน่ง ได้แก่ N, S, E และ W สำหรับการทดสอบการเรียนรู้เชิงพื้นที่ สัตว์จะได้รับการฝึกทุกวันในวันที่ 9-11 บนตำแหน่งเริ่มต้นที่แน่นอน ระยะเวลาแฝงของการหลบหนีถูกวัดเพื่อแสดงหน่วยความจำเชิงพื้นที่และความสามารถในการเรียนรู้ของหนู ถ้าหนูไม่สามารถหาหรือปีนขึ้นไปบนแท่นได้ หนูจะถูกพาไปที่แท่นและอยู่ 10 วินาที หลังจากพักผ่อนเป็นเวลา 60 วินาที การฝึกครั้งต่อไปจะเริ่มขึ้น ข้อมูลที่ได้จากการทดสอบการเรียนรู้เชิงพื้นที่ครั้งล่าสุดถูกใช้เป็นค่าพื้นฐานสำหรับการขึ้นรูป ในวันที่ 23-28 ได้ทำการทดสอบการนำทางสถานที่และการสำรวจเชิงพื้นที่ การทดสอบการนำทางสถานที่ใช้เวลา 6 วัน และดำเนินการเวลา 13.00 น. สัตว์ต่างๆ ถูกวางลงไปในน้ำโดยให้หัวของพวกมันหันไปทางผนังสระตามเข็มนาฬิกา และบันทึกช่วงเวลาแฝง (ภายใน 2 นาที) หลังจากการทดสอบการนำทางสถานที่เสร็จสิ้น แพลตฟอร์มก็ถูกนำออกไป หนูถูกวางลงในน้ำโดยให้ศีรษะหันไปทางผนังสระในตำแหน่งแบบสุ่ม และบันทึกเส้นทางการเคลื่อนไหวและความถี่ที่หนูว่ายข้ามบริเวณที่แพลตฟอร์มอยู่ภายใน 2 นาที เส้นทางการเคลื่อนไหวได้รับการบันทึกโดยเครื่องบันทึกการเคลื่อนไหวของหนูโดยอัตโนมัติแบบมัลติฟังก์ชั่น (YLS-1A, Yiyan Technology, Jinan, China)

echincoside ใน cistanche

1.6. การตรวจจับกิจกรรม MAO กิจกรรม MAO วัดโดยใช้ชุดตรวจจับ MAO (A034, Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, China) และการตรวจจับทำได้ตามโปรโตคอลของผู้ผลิต ได้รับโฮโมจิเนตจากเนื้อเยื่อสมอง 500 �l ถูกผสมกับ 300 �l ของสาร 1 และ 300 �l ของสาร 2 บ่มเป็นเวลา 3 ชั่วโมง ที่ 37∘C จากนั้นจึงเติมอย่างต่อเนื่องด้วย 300 �l ของสาร 3, 3 มล. ของสาร 4 และกระแสน้ำวนสำหรับ 2 นาที ของผสมของปฏิกิริยาถูกหมุนเหวี่ยงที่ 3,000 รอบต่อนาที เป็นเวลา 10 นาที และความหนาแน่นทางแสงของส่วนลอยเหนือตะกอนถูกกำหนดหาโดยเครื่องวัดสเปกตรัมของรังสีอัลตราไวโอเลตและที่มองเห็นได้ (Lambda 25, PerkinElmer, USA) โดยใช้แสงกระตุ้น 242 นาโนเมตร

1.7. การทดสอบภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ของสารสื่อประสาทและ ACTH และ CORT ชุดตรวจหาสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ (ELISA) สำหรับโดปามีน (DA), norepinephrine (NE) และ 5-hydroxytryptamine (5-HT) ที่ซื้อมาจาก BLUE GENE เมืองเซี่ยงไฮ้ ซื้อชุดตรวจจับ ELISA จาก Qiyun Biotech เมืองกวางโจว

มีขั้นตอนดังนี้ ทำการทดลองที่อุณหภูมิห้อง เคลือบหลุมของเพลตไมโครไทเทอร์ PVC ด้วยแอนติบอดีจับที่ความเข้มข้น 1–10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรในบัฟเฟอร์คาร์บอเนต/ไบคาร์บอเนต (pH 9.6) ปิดผนึกจานและฟักค้างคืนที่อุณหภูมิ 4∘C; ล้างจานด้วย PBS/tween 3 ครั้ง และ Block Solution บล็อกไซต์ที่ไม่จำเพาะเจาะจง แล้วล้างจานด้วย PBS/tween 3 ครั้ง มาตรฐานและตัวอย่างถูกเจือจางในสารละลายบล็อค และเติม 100 �l ลงในหลุมของเพลต และเพลตถูกปิดผนึกและบ่มที่อุณหภูมิ 37∘C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เติม 100 �l แอนติบอดีสำหรับตรวจหาสารเจือจางและบ่มเพลตที่

ค. ผง Deserticola 1.27 ± 0.009 0.52 ± 0.003

C. tubulosaผง 19.81 ± 0.66 2.45 ± 0.12

ค. ยาต้มจากทะเลทราย {{0}}.90 ± 0.001 0.20 ± 0.001 C.tubulosaยาต้ม 5.90 ± 0.12 0.54 ± 0.05 Echinacoside, ECH; ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์, PeGs; verbascoside, กริยา.

37∘C เป็นเวลา 1 ชั่วโมง; ล้างจานด้วย PBS/Tween 3 ครั้ง เติมสารละลายพัฒนาสี 50 �l และเก็บจานให้ห่างจากแสงและฟักที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 15 นาที เพิ่มบัฟเฟอร์หยุด 50 �l เพื่อหยุดปฏิกิริยา วัดความหนาแน่นของแสง (OD) สำหรับแต่ละหลุมด้วยเครื่องอ่านไมโครเพลทที่ตั้งค่าไว้ที่ 405 นาโนเมตรใน 30 นาที

1.8. การวิเคราะห์ทางสถิติ. ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM (ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย) ความแตกต่างที่มีนัยสำคัญถูกวิเคราะห์โดย t-test หรือ ANOVA ทางเดียวตามด้วยการทดสอบหลายช่วงของ Duncan โดยใช้ SPSS 160 และความแตกต่างระหว่าง กลุ่มที่มี � < 0.05="">

2. ผลลัพธ์

2.1. การกำหนดเนื้อหาของส่วนผสมออกฤทธิ์ทางชีวภาพหลักใน C. deserticola YCMa และ C.tubulosaตัวอย่าง phenylethanoid glycosides เช่น echinacoside และ verbascoside ถือเป็นส่วนผสมหลักที่ออกฤทธิ์ทางชีวภาพ ดังนั้นเนื้อหาของ echinacoside และ verbascoside ทั้งใน C. deserticola YCMa และ C.tubulosaตัวอย่างถูกกำหนดหาโดย HPLC โครมาโตแกรมของ HPLC ถูกแสดงในรูปที่1และผลการศึกษาพบว่าเนื้อหาทั้งหมดของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์จาก C. deserticola YCMa อยู่ที่ประมาณสองเท่าของจาก C. tubulosa น้ำหนัก Echinacoside และ verbascoside ตามลำดับคิดเป็น 1.27 ± 0009 เปอร์เซ็นต์และ {{10}}.52 ± 0.003 เปอร์เซ็นต์ของผงที่เตรียมจาก C. deserticola YCMa และ 19.81 ± 0.66 เปอร์เซ็นต์ และ 2.45 ± 0.12 เปอร์เซ็นต์ของผงที่เตรียมจาก C.tubulosa. น้ำหนัก Echinacoside และ verbascoside ตามลำดับ คิดเป็น {{0}}.90 ± 0.{{10}}01 เปอร์เซ็นต์และ 0.20 ± 0.001 เปอร์เซ็นต์ของยาต้ม C. deserticola YCMa และ 5.90 ± 0.12 เปอร์เซ็นต์ และ 0.54 ± 0.05 เปอร์เซ็นต์ของผงที่เตรียมจาก C.tubulosa(โต๊ะ1).

2.2. ยาต้มของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa บรรเทาความเครียดและระดับภาวะซึมเศร้า การทดสอบการระงับหาง (TST) เป็นวิธีที่รวดเร็วและคลาสสิกในการประเมินผลยากล่อมประสาทของยาในหนูทดลอง [24]; ในงานวิจัยนี้ สถานะที่ไม่สามารถเคลื่อนไหวได้ซึ่งเกิดจากความเครียดระยะสั้นและหลีกเลี่ยงไม่ได้จากการถูกแขวนไว้ที่หาง ถูกใช้เป็นลักษณะเพื่อสะท้อนถึงระดับความหดหู่ใจของหนู เราตรวจสอบว่ายาต้มของ C. deserticola YCMa และ C.tubulosaสามารถย้อนกลับการไม่สามารถเคลื่อนที่ได้และส่งเสริมให้เกิดพฤติกรรมที่เกี่ยวข้องกับการหลบหนี เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ระยะเวลาที่ไม่สามารถเคลื่อนไหวได้ของกลุ่มความเครียดเพิ่มขึ้นร้อยละ 27.4 ; เมื่อเทียบกับความเครียด

รูปที่ 1: โพรไฟล์โครมาโตกราฟี HPLC ของฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์จากผง C. deserticola YCMa และ C. tubulosa พีค 1 และ 2 เป็นตัวแทนของเอไคนาโคไซด์และเวอร์บาสโคไซด์ ตามลำดับ

รูปที่ 2: ผลของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoctions ต่อระยะเวลาที่ไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ของหนูแขวนลอยหางใน 5 นาที หลังจากการปรับตัว กลุ่มทดลองถูกบริหารให้ด้วยยาต้ม Cistanche สมุนไพรโดยทางสายยางเป็นเวลา 21 วันแล้วแขวนไว้ที่หางและติดตามการเคลื่อนไหวใน 5 นาทีหลังการระงับ แต่ละกลุ่มประกอบด้วยหนู 10 ตัว L, M และ H ตามลำดับ หมายถึง ต่ำ กลาง และสูง CD และ CT ตามลำดับ เป็นตัวแทนของ

C. deserticola YCMa และ C. tubulosa ยาต้ม ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM พี< 0.05="" was="" considered="" as="" significantly="" different="" and="" was="" marked="" as="">

กลุ่ม

กลุ่มที่บำบัดด้วยยาต้มสมุนไพร C. deserticola YCMa ความเข้มข้นสูงปานกลาง พบว่าระยะเวลาการไม่สามารถเคลื่อนที่ได้ลดลงอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติในแต่ละครั้ง ร้อยละ 44.1 และ 56.1 เปอร์เซ็นต์ ; กลุ่มที่บำบัดด้วยความเข้มข้นสูงปานกลางของ

ยาต้มสมุนไพร C. tubulosa พบว่าระยะการเคลื่อนตัวลดลงอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติในแต่ละครั้ง ร้อยละ 41.9 และร้อยละ 47.7 (รูปที่2). ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่ายาต้มของ C. deserticola YCMa และ C.tubulosaสามารถลดความเครียดและระดับภาวะซึมเศร้าของหนูได้ และยาต้ม C. deserticola YCMa มีประสิทธิภาพที่สูงกว่า C.tubulosaยาต้ม

1.1. ยาต้มของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa ปรับปรุงการเรียนรู้เชิงพื้นที่และความจำของหนู คน (ทั้งวัยรุ่นและผู้ใหญ่) ที่เป็นโรคซึมเศร้ามีแนวโน้มสูง

ที่ต้องทนทุกข์ทรมานจากความบกพร่องทางการเรียนรู้ [28]; ยาต้มของ C. deserticola YCMa และ C.tubulosaได้รับการพิสูจน์แล้วว่าสามารถบรรเทาความเครียดและระดับภาวะซึมเศร้าได้ จากนั้นเราจึงเลือกประเมินว่ายาต้มของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa อาจส่งผลต่อการเรียนรู้เชิงพื้นที่และความจำโดยใช้แบบจำลอง Morris water maze ซึ่งใช้กันอย่างแพร่หลายในการประเมินการเรียนรู้เชิงพื้นที่และการทำงานของหน่วยความจำของพื้นที่สมองที่เกี่ยวข้อง[29]. เส้นทางการเคลื่อนไหวแบ่งออกเป็นสี่ประเภทระหว่างเวลาแฝงในการค้นหา วิถีเส้นตรงแสดงให้เห็นว่าหนูระบุตำแหน่งของแท่นกู้ภัย วิถีโคจรแสดงให้เห็นว่าหนูแสดงทิศทางที่ถูกต้องโดยทั่วไป และวิถีทางที่เฉียบแหลมแสดงให้เห็นว่าหนูทั้งสองอยู่ในช่วงฝึกหัดช่วงต้นหรือเป็นโรคสมองเสื่อม โดยพยายาม ค้นหาตำแหน่งเป้าหมายตามสัญชาตญาณ วิถีการค้นหาแบบสุ่มพบว่าหนูมีความสามารถในการวางตำแหน่งต่ำและค้นหาสถานที่เป้าหมายอย่างไร้จุดหมาย ได้ข้อมูลมาตามเกณฑ์

ผลของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoctions ต่อการเรียนรู้ในอวกาศและความสามารถด้านความจำของหนูที่ถูกตรึงเครียดแสดงไว้ในรูป3. หลังจากการทดสอบช่วงล่างหาง หนูแสดงช่วงเวลาแฝงที่ยืดเยื้ออย่างมีนัยสำคัญ เมื่อเทียบกับกลุ่มความเครียด หนูที่ได้รับ C. deserticola YCMa ในปริมาณปานกลางและสูง และยาต้ม C. tubulosa ที่มีปริมาณสูงต่ำมีระยะเวลาแฝงที่สั้นลง ความถี่ที่หนูว่ายบนแพลตฟอร์มที่ซ่อนอยู่นั้นถูกควบคุมอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มที่รับการรักษาด้วยยาต้ม C. deserticola YCMa ในปริมาณสูงในระดับปานกลางและสูง ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าหนูที่เครียดได้รับประโยชน์จากการบริหารยาต้มสมุนไพร Cistanche และแสดงการปรับปรุงในการเรียนรู้เชิงพื้นที่และหน่วยความจำ

1.2. ยาต้มของ C. deserticola YCMa และ C.tubulosaควบคุมกิจกรรมโมโนเอมีนออกซิเดสลง MAO เร่งปฏิกิริยาออกซิเดชันดีอะมิเนชันของเอมีน เช่น tyramine, catecholamine และ 5-hydroxytryptamine (5-HT) ในสมองและเนื้อเยื่อส่วนปลาย การยับยั้งการทำงานของ MAO ส่งผลให้เกิดประสิทธิภาพของยากล่อมประสาท [30] เราพยายามอธิบายผลของยากล่อมประสาทโดย C. deserticola YCMa และ C.tubulosa; จากนั้นจึงกำหนดกิจกรรม MAO ในสมอง หลังจากการทดสอบช่วงล่างหาง กิจกรรม MAO ได้รับการควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ กิจกรรม MAO ในกลุ่มที่รักษาด้วยการระงับหางแล้วตามด้วยปริมาณที่สูงปานกลาง

รูปที่ 3: ผลกระทบของ C. deserticola YCMa และ C.tubulosaยาต้มในการเรียนรู้อวกาศและความสามารถในการจำของหนูที่ถูกตรึงเครียด หลังจากการปรับตัว กลุ่มทดลองถูกบริหารให้ด้วยยาต้มสมุนไพร Cistanche โดยทางสายยางเป็นเวลา 21 วัน แล้วทดสอบด้วย

R. Morris water maze สำหรับกำหนดการเรียนรู้เชิงพื้นที่และความจำ L, M และ H ตามลำดับ หมายถึง ต่ำ กลาง และสูง CD และ CT ตามลำดับ เป็นตัวแทนของ C. deserticola YCMa และ C.tubulosaยาต้ม "#" และ "∗" แต่ละตัวเป็นตัวแทนของพี่< 0.05="" and="" p="" <="">

รูปที่ 4: ผลของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoctions ต่อกิจกรรม monoamine oxidase ในสมอง (MAO) ของหนูเมาส์ที่ถูกตรึงหาง หลังจากการปรับตัว กลุ่มทดลองถูกบริหารให้ด้วยยาต้มสมุนไพร Cistanche โดยทางสายยางเป็นเวลา 21 วันแล้วแขวนไว้ที่หางเป็นเวลา 5 นาที แต่ละกลุ่มประกอบด้วยหนู 10 ตัว และหนูถูกสังเวยเพื่อเก็บเกี่ยวเนื้อเยื่อสมอง และใช้สำหรับวัดกิจกรรม MAO L, M และ H ตามลำดับ หมายถึง ต่ำ กลาง และสูง CD และ CT ตามลำดับ เป็นตัวแทนของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoction ป= 10; ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM P < 0.05="" ถือว่าแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญและถูกทำเครื่องหมายเป็น="">

ยาต้มจาก C. deserticola YCMa ลดลงอย่างมีนัยสำคัญประมาณ 13.9 เปอร์เซ็นต์ ∼12.3 เปอร์เซ็นต์ ; กิจกรรมของ MAO ในกลุ่มที่บำบัดด้วยสารแขวนลอยหางและยาต้มที่มีปริมาณสูงจาก C. tubulosa ลดลงอย่างมีนัยสำคัญประมาณ 13.2 เปอร์เซ็นต์ (รูปที่4).ข้อมูลแสดงให้เห็นว่ายาต้มจากทั้ง C. deserticola YCMa และ C. tubulosa สามารถยับยั้งการทำงานของ MAO และอาจส่งผลต่อยากล่อมประสาท

ผลและยาต้มของ C. deserticola YCMa แสดงให้เห็นประสิทธิภาพที่แรงกว่าของ C. tubulosa

1.1. การบริหารยา C. deserticola YCMa และ C. tubulosa Decoction ส่งผลให้เกิดการควบคุมความเข้มข้นของโดปามีนส่วนกลางและการลดความเข้มข้นของคอร์ติโคสเตอโรนในซีรัม ระดับของ DA และ NE ใน

รูปที่ 5: ผลของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoctions ต่อระดับสารสื่อประสาทในสมองของหนูเมาส์ที่ถูกตรึงเครียด หลังจากการปรับตัว กลุ่มทดลองได้รับยาต้ม Cistanche สมุนไพรโดยทางสายยางเป็นเวลา 21 วันแล้วแขวนไว้ที่หางเป็นเวลา 5 นาที แต่ละกลุ่มประกอบด้วยหนู 10 ตัว และหนูถูกสังเวยเพื่อเก็บเกี่ยวเนื้อเยื่อสมองและใช้สำหรับสารสื่อประสาทในสมอง การวัดระดับ L, M และ H ตามลำดับ หมายถึง ต่ำ กลาง และสูง CD และ CT ตามลำดับ เป็นตัวแทนของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoction ป= 10; ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM พี< 0.05="" was="" considered="" as="" significantly="" different="" and="" was="" marked="" as="">

ศูนย์กลาง

วัดระบบประสาทส่วนกลางเพื่อกำหนดความตื่นเต้นง่ายของเส้นประสาท หลังจาก 4 สัปดาห์ของการทดสอบช่วงล่างหาง เมื่อเทียบกับกลุ่มที่มีความเครียด ระดับ DA ของกลุ่มที่ได้รับยา C. deserticola YCMa ในระดับปานกลางได้เพิ่มการควบคุมอย่างมีนัยสำคัญในแต่ละกลุ่มโดย 43.5 เปอร์เซ็นต์ ; ระดับ DA ของกลุ่มที่ได้รับ C. tubulosa ในระดับปานกลางก็ถูกควบคุมอย่างมีนัยสำคัญเช่นกัน (Figure5(a)). ระดับ NE เพิ่มขึ้นเล็กน้อยในกลุ่มที่บำบัดด้วยยาต้มสมุนไพรทั้งสองชนิด เมื่อเทียบกับกลุ่มที่มีความเครียด และไม่พบความแตกต่างทางสถิติ (รูปที่5(b)).ผลลัพธ์เหล่านี้อาจอธิบายกลไกระดับโมเลกุลของฤทธิ์ต้านอาการซึมเศร้าของสมุนไพร Cistanche

ฮอร์โมน Adrenocorticotropic (ACTH) ซึ่งเป็นฮอร์โมนโพลีเปปไทด์ที่ผลิตและหลั่งโดยต่อมใต้สมองส่วนหน้า กระตุ้นการหลั่งของกลูโคคอร์ติโคสเตียรอยด์โดยออกฤทธิ์ที่ต่อมหมวกไต zona fasciculata [31]; คอร์ติโคสเตอโรน ซึ่งเป็นฮอร์โมนสเตียรอยด์ที่ผลิตโดยคอร์เทกซ์ของต่อมหมวกไต มีส่วนเกี่ยวข้องกับการควบคุมกระบวนการทางสรีรวิทยา เช่น การเพิ่มพลังงาน ปฏิกิริยาภูมิคุ้มกัน และการตอบสนองต่อความเครียด [32] เราจึงเลือกศึกษาผลของยาต้มสมุนไพรต่อแกน HPA และวัดความเข้มข้นของ ACTH และคอร์ติโคสเตอโรนในซีรัม หลังการทดสอบช่วงล่างหาง 4 สัปดาห์ ความเข้มข้นของ ACTH และคอร์ติโคสเตอโรนของกลุ่มความเครียดถูกควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่6).ไม่พบการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญในกลุ่มยาต้มสมุนไพร Cistanche เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มที่มีความเครียด (Figure6(a)).เมื่อเทียบกับกลุ่มที่มีความเครียด ความเข้มข้นของคอร์ติโคสเตอโรนในซีรัมของกลุ่มที่ได้รับยา C. deserticola YCMa ในปริมาณสูงในระดับปานกลางและสูงลดลงอย่างมีนัยสำคัญ ความเข้มข้นของคอร์ติโคสเตอโรนของกลุ่มที่ได้รับ C. tubulosa ในปริมาณสูงถูกปรับลดลงแต่ไม่มีความแตกต่างทางสถิติที่มีนัยสำคัญ

(รูป5(b)).จากข้อมูลพบว่ายาต้มจากทั้งสองอย่าง

C. deserticola YCMa และ C. tubulosa สามารถลดความเข้มข้นของคอร์ติโคสเตอโรนในซีรัม และอาจเกี่ยวข้องกับการควบคุมแกน HPA และยาต้มของ C. deserticola YCMa มีประสิทธิภาพมากกว่าของ C. tubulosa

1. อภิปราย

ในการศึกษานี้ มีการกำหนดกิจกรรมยากล่อมประสาทและการปรับปรุงความจำและการเรียนรู้สมุนไพร Cistanche ซึ่งอาจให้แสงสว่างใหม่เกี่ยวกับการทำงานของสมุนไพร Cistanche และให้เบาะแสในการขยายขอบเขตการใช้ในการรักษา การศึกษาก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าสมุนไพร Cistanche เป็นยาจีนแบบมัลติฟังก์ชั่นที่มีฤทธิ์ทางชีวภาพในการต่อต้านวัย สารต้านอนุมูลอิสระ เอสโตรเจน ฤทธิ์ต้านกระดูกพรุน ยาโป๊ และฤทธิ์ต้านการอักเสบ [33]. Herb Cistanche ได้รับการยอมรับว่าเป็นการรักษาโรคไต ภาวะมีบุตรยาก และอาการท้องผูกเรื้อรัง (Pharmacopoeia Committee of China, 2010) ยาต้มสมุนไพร Cistanche ประกอบด้วยน้ำมันหอมระเหย, ฟีนิลแทนอยด์ไกลโคไซด์ที่ไม่ระเหย (PeGs), อิริดอยด์, ลิกแนน, อัลดิทอล, โอลิโกแซ็กคาไรด์และโพลีแซ็กคาไรด์ Echinacoside และ verbascoside มักถูกมองว่าเป็นส่วนประกอบออกฤทธิ์ทางชีวภาพหลัก [34] มีสี่สายพันธุ์ Cistanche หลัก ได้แก่ C. deserticola YCMa, C. tubulosa, Cistanche Sinensis G. Beck และ Cistanche salsa var albiflorashi และคณะ [35]; เราเลือก C. deserticola YCMa และ C. tubulosa เป็นแบบจำลองของเราในการพิจารณาเนื้อหาของ PeG และ C. deserticola YCMa มีเนื้อหา PeG ที่สูงกว่า (รูปที่1) ซึ่งอาจอธิบายประสิทธิภาพที่สูงขึ้นของ C. deserticola YCMa ผลการวิจัยระบุว่าเนื้อหาของสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพหลักเป็นตัวกำหนดประสิทธิภาพของสมุนไพร Cistanche

รูปที่ 6: ผลของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoctions ต่อความเข้มข้นของฮอร์โมนในซีรัมในหนูที่แขวนคอ หลังจากการปรับตัว กลุ่มทดลองถูกบริหารให้ด้วยยาต้มสมุนไพร Cistanche โดยทางสายยางเป็นเวลา 21 วัน และจากนั้นแขวนไว้ที่หางเป็นเวลา 5 นาที แต่ละกลุ่มประกอบด้วยหนู 10 ตัว และเลือดถูกเก็บเกี่ยวและใช้สำหรับการกำหนด ของซีรั่ม adrenocorticotrophic ฮอร์โมน (ACTH) และระดับคอร์ติโคสเตอโรน (CORT) L, M และ H ตามลำดับ หมายถึง ต่ำ กลาง และสูง CD และ CT ตามลำดับ เป็นตัวแทนของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa decoction ป=10; ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SEM P < 0.05="" ถือว่าแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญและถูกทำเครื่องหมายเป็น="">

การศึกษาก่อนหน้านี้ระบุว่าผลิตภัณฑ์สมุนไพร Cistanche มีประโยชน์สำหรับการรักษาความผิดปกติของระบบประสาทโดยการควบคุมปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) ในฮิบโปของหนู [36,37] แต่ไม่มีรายงานการวิจัยเกี่ยวกับกิจกรรมการเรียนรู้เกี่ยวกับยากล่อมประสาทและความรู้ความเข้าใจของสมุนไพร Cistanche ในแบบจำลองสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ในการศึกษานี้ ยาต้มสมุนไพร Cistanche ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพในการบรรเทาระดับความเครียดและเพิ่มพฤติกรรมการเอาชีวิตรอดในการทดสอบช่วงล่างหางอย่างมาก (รูปที่2) และปรับปรุงความสามารถในการเรียนรู้เชิงพื้นที่และความจำในแบบจำลองเขาวงกตน้ำ (รูป3). ลินและคณะ พิสูจน์ว่าสมุนไพร Cistanche ปรับปรุงความจำที่เกี่ยวข้องกับการดมกลิ่นในแบบจำลองแมลงวันผลไม้ [23]; เรามุ่งเน้นการวิจัยของเราเกี่ยวกับผลของยากล่อมประสาทและนำรูปแบบสัตว์ที่แตกต่างกันมาใช้ ผลที่ได้พิสูจน์ว่าสมุนไพร Cistanche ปรับปรุงการทำงานขององค์ความรู้ประเภทต่างๆ กล่าวคือ ความสามารถในการเรียนรู้เชิงพื้นที่ในหนู ตามทฤษฎีโมโนเอมีน ประสบการณ์ความเครียดและภาวะซึมเศร้าสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับระดับสมองของสารสื่อประสาทโมโนเอมีน เช่น DA, NE, 5-HT และอะดรีนาลีน [38]. และเราพบว่าสมุนไพรต้ม Cistanche สามารถบ่อนทำลายกิจกรรม MAO (Figure4) และเพิ่มความเข้มข้นของ DA ส่วนกลาง (Figure5(ก)). น่าแปลกที่ 5-ความเข้มข้นของ HT ส่วนกลางลดลงโดยการรักษาด้วยยาต้มสมุนไพร Cistanche (ไม่แสดงข้อมูล) เนื่องจากการวิจัยก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า 5-กิจกรรม HT ส่วนกลางที่ลดลงสัมพันธ์กับภาวะซึมเศร้า [39] ความผิดปกติของแกน hypothalamic-pituitary-adrenal มักเกี่ยวข้องกับภาวะซึมเศร้า [40] การแทรกแซงระบบ glucocorticoid receptor (GR) ประสบความสำเร็จในการย้อนกลับฟีโนไทป์ของ depressant ในหนูทดลอง[41], และเราพบว่าสมุนไพร Cistanche ช่วยบรรเทาเซรั่มได้อย่างมาก

ความเข้มข้นของ CORT (Figure6(b)).การปรับระบบโมโนเอมีนและแกน HPA มีส่วนช่วยในฤทธิ์ต้านอาการซึมเศร้าของสมุนไพร Cistanche เอ็กไคนาโคไซด์สามารถข้ามอุปสรรคเลือดและสมองได้อย่างอิสระและออกฤทธิ์ต่อระบบประสาทส่วนกลาง [42] ซึ่งอาจอธิบายได้ว่าทำไมยาต้มสมุนไพร Cistanche จึงมีการทำงานของยากล่อมประสาท เป็นครั้งแรกที่เราระบุคุณสมบัติของยากล่อมประสาทและความสัมพันธ์กับกิจกรรมการปรับปรุงความรู้ความเข้าใจในแบบจำลองเมาส์ และทำการสำรวจกลไกเบื้องต้น อย่างไรก็ตาม กลไกของคุณสมบัติยากล่อมประสาทของ Cistanche ยังไม่ได้รับการชี้แจงในระดับโมเลกุล และจำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติมเพื่ออธิบายกลไกยากล่อมประสาทที่ครอบคลุมของสมุนไพร Cistanche

ยาต้ม Cistanche สมุนไพรเป็นส่วนผสมของสารประกอบ ยาต้ม Cistanche สมุนไพรอาจมีหลายวิธีที่ออกฤทธิ์ยากล่อมประสาทและเพิ่มความสามารถในการเรียนรู้ ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันส่งผลต่อการทำงานของเซลล์ประสาทจำนวนมาก และการผลิตออกซิเจนชนิดปฏิกิริยา (ROS) ที่มากเกินไปทำให้เกิดความเสียหายต่อเซลล์ การตายของเซลล์ และการเสียชีวิต [43]. Echinacoside ที่สกัดจากลำต้นของ C. salsa มีฤทธิ์ปกป้องระบบประสาทโดยการลดการผลิต ROS และการตายของเซลล์ไมโตคอนเดรีย [44]; แอกทิโอไซด์ ซึ่งเป็นสารประกอบต้านอนุมูลอิสระที่แรงมาก อาจมีส่วนรับผิดชอบต่อผลการป้องกันระบบประสาท[45]. นอกจากวิธีการต้มแบบดั้งเดิมแล้ว การใช้วิธีการทางเภสัชกรรมสมัยใหม่ เช่น แคปซูลไกลโคไซด์ที่ควบคุมการปลดปล่อยอาจเพิ่มผลของยาต้มสมุนไพร เนื่องจากส่วนผสมออกฤทธิ์ทางชีวภาพสามารถย่อยและย่อยสลายได้โดยทางเดินอาหาร [37].

การศึกษาก่อนหน้านี้ระบุว่าผลิตภัณฑ์สมุนไพร Cistanche มีประโยชน์สำหรับการรักษาความผิดปกติของระบบประสาทโดยการควบคุมปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (NGF) ในฮิบโปของหนู [36,37] แต่ไม่มีรายงานการวิจัยเกี่ยวกับกิจกรรมการเรียนรู้เกี่ยวกับยากล่อมประสาทและความรู้ความเข้าใจของสมุนไพร Cistanche ในแบบจำลองสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม ในการศึกษานี้ ยาต้มสมุนไพร Cistanche ได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีประสิทธิภาพในการบรรเทาระดับความเครียดและเพิ่มพฤติกรรมการเอาชีวิตรอดในการทดสอบช่วงล่างหางอย่างมาก (รูปที่2) และปรับปรุงความสามารถในการเรียนรู้เชิงพื้นที่และความจำในแบบจำลองเขาวงกตน้ำ (รูป3). ลินและคณะ พิสูจน์ว่าสมุนไพร Cistanche ปรับปรุงความจำที่เกี่ยวข้องกับการดมกลิ่นในแบบจำลองแมลงวันผลไม้ [23]; เรามุ่งเน้นการวิจัยของเราเกี่ยวกับผลของยากล่อมประสาทและนำรูปแบบสัตว์ที่แตกต่างกันมาใช้ ผลที่ได้พิสูจน์ว่าสมุนไพร Cistanche ปรับปรุงการทำงานขององค์ความรู้ประเภทต่างๆ กล่าวคือ ความสามารถในการเรียนรู้เชิงพื้นที่ในหนู ตามทฤษฎีโมโนเอมีน ประสบการณ์ความเครียดและภาวะซึมเศร้าสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับระดับสมองของสารสื่อประสาทโมโนเอมีน เช่น DA, NE, 5-HT และอะดรีนาลีน [38]. และเราพบว่าสมุนไพรต้ม Cistanche สามารถบ่อนทำลายกิจกรรม MAO (Figure4) และเพิ่มความเข้มข้นของ DA ส่วนกลาง (Figure5(ก)). น่าแปลกที่ 5-ความเข้มข้นของ HT ส่วนกลางลดลงโดยการรักษาด้วยยาต้มสมุนไพร Cistanche (ไม่แสดงข้อมูล) เนื่องจากการวิจัยก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่า 5-กิจกรรม HT ส่วนกลางที่ลดลงสัมพันธ์กับภาวะซึมเศร้า [39] ความผิดปกติของแกน hypothalamic-pituitary-adrenal มักเกี่ยวข้องกับภาวะซึมเศร้า [40] การแทรกแซงระบบ glucocorticoid receptor (GR) ประสบความสำเร็จในการย้อนกลับฟีโนไทป์ของ depressant ในหนูทดลอง[41], และเราพบว่าสมุนไพร Cistanche ช่วยบรรเทาเซรั่มได้อย่างมาก

ความเข้มข้นของ CORT (Figure6(b)).การปรับระบบโมโนเอมีนและแกน HPA มีส่วนช่วยในฤทธิ์ต้านอาการซึมเศร้าของสมุนไพร Cistanche เอ็กไคนาโคไซด์สามารถข้ามอุปสรรคเลือดและสมองได้อย่างอิสระและออกฤทธิ์ต่อระบบประสาทส่วนกลาง [42] ซึ่งอาจอธิบายได้ว่าทำไมยาต้มสมุนไพร Cistanche จึงมีการทำงานของยากล่อมประสาท เป็นครั้งแรกที่เราได้จำแนกคุณสมบัติของยากล่อมประสาทและความสัมพันธ์กับกิจกรรมการปรับปรุงความรู้ความเข้าใจในแบบจำลองเมาส์ และทำการสำรวจกลไกเบื้องต้น อย่างไรก็ตาม กลไกของคุณสมบัติยากล่อมประสาทของ Cistanche ยังไม่ได้รับการชี้แจงในระดับโมเลกุล และจำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติมเพื่ออธิบายกลไกยากล่อมประสาทที่ครอบคลุมของสมุนไพร Cistanche

ยาต้ม Cistanche สมุนไพรเป็นส่วนผสมของสารประกอบ ยาต้ม Cistanche สมุนไพรอาจมีหลายวิธีที่ออกฤทธิ์ยากล่อมประสาทและเพิ่มความสามารถในการเรียนรู้ ความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันส่งผลต่อการทำงานของเซลล์ประสาทจำนวนมาก และการผลิตออกซิเจนชนิดปฏิกิริยา (ROS) ที่มากเกินไปทำให้เกิดความเสียหายต่อเซลล์ การตายของเซลล์ และการเสียชีวิต [43]. Echinacoside ที่สกัดจากลำต้นของ C. salsa มีฤทธิ์ปกป้องระบบประสาทโดยการลดการผลิต ROS และการตายของเซลล์ไมโตคอนเดรีย [44]; อะซิโตไนด์ซึ่งเป็นสารประกอบต้านอนุมูลอิสระที่แรงมาก อาจมีส่วนรับผิดชอบต่อผลการป้องกันระบบประสาท[45]. นอกจากวิธีการต้มแบบดั้งเดิมแล้ว การใช้วิธีการทางเภสัชกรรมสมัยใหม่ เช่น แคปซูลไกลโคไซด์ที่ควบคุมการปลดปล่อยอาจเพิ่มผลของยาต้มสมุนไพร เนื่องจากส่วนผสมออกฤทธิ์ทางชีวภาพสามารถย่อยและย่อยสลายได้โดยทางเดินอาหาร [37].

1. บทสรุป

ในการศึกษานี้ เราพบว่ายาต้มของ C. deserticola

YCMa และ C. tubulosa แสดงผลยากล่อมประสาทและปรับปรุงการเรียนรู้เชิงพื้นที่และความสามารถในหน่วยความจำในแบบจำลองเมาส์ และยาต้มของ C. deserticola YCMa และ C. tubulosa มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อแกน HPA;

C. deserticola YCMa แสดงให้เห็นการทำงานทางเภสัชวิทยาที่แข็งแกร่งขึ้น C. deserticola และ C. tubulosa อาจมีศักยภาพในการพัฒนาเป็นยาทางเลือกสำหรับภาวะซึมเศร้า

การเปิดเผยข้อมูล

ความคิดเห็นที่แสดงในที่นี้เป็นความคิดเห็นของผู้เขียนและไม่จำเป็นต้องสะท้อนความคิดเห็นของหน่วยงานเหล่านี้

ผลประโยชน์ทับซ้อน

ผู้เขียนประกาศว่าพวกเขาไม่มีความขัดแย้งทางผลประโยชน์

รับทราบ

โครงการนี้ได้รับการสนับสนุนโดยทุนจากมูลนิธิวิทยาศาสตร์ธรรมชาติแห่งชาติ (81503333) และการสนับสนุนด้านวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีโดยโครงการในเขตปกครองตนเองซินเจียงอุยกูร์ (จีน) (200840102-15)

อ้างอิง

[1] RC Kessler, KA McGonagle, S. Zhao, et al., "ช่วงชีวิตและความชุก 12-เดือนของความผิดปกติทางจิตเวช DSM-III-R ในสหรัฐอเมริกา: ผลลัพธ์จาก National Comorbidity Survey, Archives of จิตเวชศาสตร์ทั่วไป เล่ม 1 51, ไม่ 1, หน้า 8–19, 1994.

[2] HK Manji, GJ Moore, G. Rajkowska และ G. Chen, "ความยืดหยุ่นของระบบประสาทและความยืดหยุ่นของเซลล์ในความผิดปกติของอารมณ์" Molecular Psychiatry, vol. 5 ไม่ 6 น. 578–593, 2000.

[3] JD Rosenblat, RS McIntyre, GS Alves, KN ​​Fountoulakis และ AF Carvalho "นอกเหนือจากเป้าหมายนวนิยายโมโนเอมีนสำหรับภาวะซึมเศร้าที่ดื้อต่อการรักษา: การทบทวนอย่างครอบคลุม" ปัจจุบัน Neuropharmacology, vol. 13 ไม่ 5 น. 636–655, 2015.

[4] K. Wilson และ P. Mottram "การเปรียบเทียบผลข้างเคียงของสารยับยั้งการรับ serotonin reuptake inhibitor และยาซึมเศร้า tricyclic ในผู้ป่วยสูงอายุที่หดหู่: การวิเคราะห์อภิมาน" International Journal of Geriatric Psychiatry, vol. 19 ไม่ 8, หน้า 754–762, 2004.

[5] S. Vezmar, B. Miljkovic´, K. Vucˇic´evic´ et al., "เภสัชจลนศาสตร์และประสิทธิภาพของ fluvoxamine และ amitriptyline ในภาวะซึมเศร้า" Journal of Pharmacological Sciences, vol. 110 หมายเลข 1, หน้า 98–104, 2552.

[6] CH Halsted, "อาหารเสริมและอาหารที่มีประโยชน์: เหรียญ 2 ด้าน?" American Journal of Clinical Nutrition, ฉบับที่. 77, pp. 1001S–1007S, 2003.

[7] เจ.-เอส. เทียน, ซี.-ซี. Liu, H. Xiang et al., "การสอบสวนผลของยากล่อมประสาทของน้ำมันเมล็ดทะเล buckthorn ผ่านวิธีการเมตาโบโลมิกส์ที่ใช้ GC- MS ควบคู่ไปกับการวิเคราะห์หลายตัวแปร" อาหารและหน้าที่ เล่ม 1 6 ไม่ 11, หน้า 3585–3592, 2015.

[8] Y. Hou, MA Aboukhatwa, D.-L. Lei, K. Manaye, I. Khan, และ

Y. Luo "สารฟลาโวนอลธรรมชาติต้านอาการซึมเศร้าปรับ BDNF และ

beta-amyloid ในเซลล์ประสาทและฮิปโปแคมปัสของหนู TgAD สองตัว" Neuropharmacology, vol. 58, no. 6, pp. 911–920, 2010

[9] เจ. วัฒนธร, ป. ชลปฐมพิกุลเลิศ, ส. มุจิมาปุระ,

A. Priprem และ O. Tankamnerdthai "Piperine อาหารที่มีศักยภาพสำหรับความผิดปกติทางอารมณ์และความรู้ความเข้าใจ" Food and Chemical Toxicology, vol. 46 หมายเลข 9, pp. 3106–3110, 2008.

[10] เอ็ม. ชิราอิ, วาย. คาวาอิ, อาร์. ยามานิชิ และเจ เทราโอ, "แนวทางอาหารใหม่เพื่อการควบคุมความเครียด 5. โปรไฟล์กิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระของสมุนไพรยากล่อมประสาทและส่วนประกอบออกฤทธิ์" วารสารการสืบสวนทางการแพทย์ ฉบับที่. 52, หน้า 249–251, 2005.

[11] PS Kumar, T. Praveen, NP Jain และ B. Jitendra "การทบทวน Griffonia simplicifollia - ยาแก้ซึมเศร้าสมุนไพรในอุดมคติ" International Journal of Pharmacy & Life Sciences, 2010

[12] ซ.-ล. Jin, N. Gao, W. Xu et al., "การผูกมัดตัวรับและตัวขนส่งและโปรไฟล์กิจกรรมของ albiflorin ที่สกัดจาก Radix Paeonia Alba" รายงานทางวิทยาศาสตร์ฉบับที่ 6, รหัสบทความ 33793, 2016.

[13] ส.-ส. หลิน ม.-ล. ชู, W.-C. Chen et al., "สมุนไพร Melissa officinalis L. ช่วยบรรเทาพฤติกรรมซึมเศร้าของหนูในการทดสอบว่ายน้ำบังคับด้วยการควบคุมสารสื่อประสาท serotonergic" Journal of Ethnopharmacology, vol. 2 175 ข้อที่. 9741, pp. 266–272, 2015.

[14] H. Shimoda, J. Tanaka, Y. Takahara, K. Takemoto, S.-J. Shan และ M.-H. ซู "ผลกระทบจากไขมันในเลือดต่ำของสารสกัด Cistanche tubulosa ซึ่งเป็นยาแผนโบราณของจีนในหนู" American Journal of Chinese Medicine, vol. 2 37, ไม่ 6, หน้า 1125– 1138, 2009.

[15] LI Xia, MA Yong-Qing, YX Song, JF Shui และ LI Xiu-Wei, "ผลของสารควบคุมการเจริญเติบโตของพืชที่แตกต่างกันต่ออัตราการรอดชีวิตในการย้ายปลูกของต้นกล้า haloxyfop ammodendron และอัตราส่วนปรสิตของ cistanche deserticola" Journal of Chinese วัสดุยา, เล่มที่. 32 น. 1651–1654, 2552.

[16] Q. Xiong, S. Kadota, T. Tani และ T. Namba, "ฤทธิ์ต้านอนุมูลอิสระของฟีนิลเลธานอยด์จาก Cistanche deserticola" Biological and Pharmaceutical Bulletin, vol. 19 ไม่ 12, หน้า 1580–1585, 1996.

[17] Y. Wu, L. Li, T. Wen และ Y.-Q. Li, "ผลการป้องกันของ echinacoside ต่อความเป็นพิษต่อตับที่เกิดจากคาร์บอนเตตระคลอไรด์ในหนู" Toxicology, vol. 232 หมายเลข 1-2, หน้า 50–56, 2550.

[18] T. Wang, C. Chen, M. Yang, B. Deng, GM Kirby และ X. Zhang, "สารสกัดจากเอทานอล Cistanche tubulosa ไกล่เกลี่ยระดับฮอร์โมนเพศหนูโดยการเหนี่ยวนำของเอ็นไซม์สเตียรอยด์อัณฑะ" Pharmaceutical Biology, vol. 54 หมายเลข 3, หน้า 481–487, 2016.

[19] L. Gu, WT Xiong, YL Zhuang, JS Zhang และ X. Liu, "Effects of Cistanche deserticola extract on penis erectile response in castrated rats," Pakistan Journal of Pharmaceutical Sciences, vol. 29 ไม่มี 2, หน้า 557–562, 2016.

[20] SG Lin, SF Ye, JM Huang, et al., "ยาจีนที่ช่วยปรับสภาพไตจะยับยั้งอะพอพโทซิสของเซลล์ประสาทโดปามีนได้อย่างไร" การวิจัยการฟื้นฟูระบบประสาท, ฉบับที่. 8 ไม่ 30 น. 2820–2826, 2556.

[21] ซี.-อาร์. วู, H.-C. Lin และ M.-H. Su, "การกลับรายการโดยสารสกัดจากน้ำของ Cistanche tubulosa จากการขาดดุลทางพฤติกรรมในแบบจำลองหนูที่เป็นโรคอัลไซเมอร์: ความเกี่ยวข้องสำหรับการสะสมของอะไมลอยด์และการทำงานของสารสื่อประสาทส่วนกลาง" BMC Complementary and Alternative Medicine, vol. 14, หน้า 1–11, 2014.

[22] DR Lara, LW Bisol และ LR Munari "ยากล่อมประสาท การรักษาเสถียรภาพทางอารมณ์ และการพยากรณ์ผลของคีตามีนใต้ลิ้นขนาดต่ำมากในภาวะซึมเศร้าแบบขั้วเดียวและสองขั้วที่ทนไฟ" วารสารนานาชาติของ 16 ไม่ 9, pp. 2111–2117, 2013.

[23] W. Lin, C. Yao, J. Cheng, S. Kao, F. Tsai, and H. Liu, "เส้นทางโมเลกุลที่เกี่ยวข้องกับการยืดอายุขัยและการปรับปรุงความรู้ความเข้าใจของ Cistanche tubulosa ในแมลงหวี่"

ไฟโตเมดิซีน, เล่ม. 26 น. 37–44, 2017.

[24] JF Cryan, C. Mombereau และ A. Vassout "การทดสอบการระงับหางเป็นแบบจำลองสำหรับการประเมินกิจกรรมยากล่อมประสาท: การทบทวนการศึกษาทางเภสัชวิทยาและพันธุกรรมในหนู" Neuroscience and Biobehavioral Reviews, vol. 29 ไม่มี 4-5, หน้า 571–625, 2005.

[25] CV Vorhees และ MT Williams, "Morris water maze: ขั้นตอนสำหรับการประเมินการเรียนรู้และความจำในรูปแบบเชิงพื้นที่และรูปแบบที่เกี่ยวข้อง" Nature Protocols, vol. 1 ไม่ 2, หน้า 848–858, 2549.

[26] R. Morris, "การพัฒนาขั้นตอนเขาวงกตน้ำสำหรับการศึกษาการเรียนรู้เชิงพื้นที่ในหนู" Journal of Neuroscience Methods, vol. 11 ไม่ใช่ 1, หน้า 47–60, 1984.

[27] A. Wolf, B. Bauer, EL Abner, T. Ashkenazy-Frolinger และ A.

MS Hartz, "แบตเตอรี่ทดสอบพฤติกรรมที่ครอบคลุมเพื่อประเมินการเรียนรู้และหน่วยความจำในหนู 129S6/Tg2576" PLoS ONE, vol. 11 ไม่ใช่ 1, รหัสบทความ e0147733, 2016.

[28] BP Rourke, GC Young และ AA Leenaars "ความบกพร่องในการเรียนรู้ในวัยเด็กที่จูงใจผู้ที่ประสบภาวะซึมเศร้าในวัยรุ่นและผู้ใหญ่และความเสี่ยงต่อการฆ่าตัวตาย" Journal of Learning Disabilities, vol. 22 ไม่ 3, หน้า 169–175, 1989.

[29] R. D'Hooge และ PP De Deyn, "การใช้งานของเขาวงกตน้ำ Morris ในการศึกษาการเรียนรู้และความจำ" Brain Research Reviews, vol. 36 ไม่ 1, หน้า 60–90, 2001.

[30] JC Shih, K. Chen และ MJ Ridd "โมโนเอมีนออกซิเดส: จากยีนสู่พฤติกรรม" การทบทวนประสาทวิทยาประจำปีฉบับที่. 22, หน้า 197–217, 1999.

[31] SR Bornstein, WC Engeland, M. Ehrhart-Bornstein, and JP Herman, "Dissociation of ACTH and glucocorticoids," Trends in Endocrinology and Metabolism ฉบับที่. 19 ไม่ 5, หน้า 175–180, 2008.

[32] S. Whirledge และ JA Cidlowski, "Glucocorticoids, stress, and fertility" Minerva Endocrinologica, vol. 35 ไม่ 2, หน้า 109–125, 2010.

[33] L. Wang, H. Ding, H. Yu et al., "Cistanches Herba: องค์ประกอบทางเคมีและผลทางเภสัชวิทยา" ยาสมุนไพรจีน, เล่มที่. 7 ไม่ใช่ 2, หน้า 135–142, 2015.

[34] Z. Li, H. Lin, L. Gu, J. Gao และ C.-M. Tzeng, "Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): หนึ่งในของขวัญทางเภสัชกรรมที่ดีที่สุดของการแพทย์แผนจีน" Frontiers in Pharmacology, vol. 7 บทความ 41, 2016.

[35] HM Shi, J. Wang, MY Wang, PF Tu และ XB Li, "การระบุสายพันธุ์ Cistanche ด้วยลายนิ้วมือซ้ำทางเคมีและระหว่างลำดับ" Biological and Pharmaceutical Bulletin, vol. 32 ไม่ 1, หน้า 142–146, 2009.

[36] JG Choi, M. Moon, HU Jeong, MC Kim, SY Kim และ

MS Oh, "Cistanches Herba ช่วยเพิ่มการเรียนรู้และความจำโดยการกระตุ้นปัจจัยการเจริญเติบโตของเส้นประสาท" Behavioral Brain Research, vol. 216 ไม่ใช่ 2, หน้า 652–658, 2011.

[37] Q. Guo, Y. Zhou, C.-J. Wang et al., "การศึกษาแบบ open-label, nonplacebo- controlled study เกี่ยวกับแคปซูล cistanche tubulosa glycoside (Memoregain®) สำหรับการรักษาโรคอัลไซเมอร์ในระดับปานกลาง" American Journal of Alzheimer's Disease and other Dementias, vol. 28 ไม่ 4, หน้า 363–370, 2013.

[38] M. Popoli, M. Gennarelli และ G. Racagni, "Modulation of synaptic plasticity by stress and antidepressants," Bipolar Disorders, vol. 4 ไม่ 3, หน้า 166–182, 2002.

[39] AJ Cleare, A. McGregor และ V. O'Keane, "หลักฐานทางระบบประสาทสำหรับความสัมพันธ์ระหว่าง hypothyroidism, ลดกิจกรรมส่วนกลาง 5- HT และภาวะซึมเศร้า" Clinical Endocrinology, vol. 43 เลขที่ 6, หน้า 713–719, 1995.

[40] NL Lopez-Duran, M. Kovacs และ CJ George, "ความผิดปกติของแกน Hypothalamic-pituitary-adrenal ในเด็กและวัยรุ่นที่หดหู่ใจ: การวิเคราะห์อภิมาน" Psychoneuroendocrinology, vol. 34 ไม่ 9, pp. 1272–1283, 2009.

[41] N. Barden "ความหมายของแกน hypothalamic-pituitary-adrenal ในสรีรวิทยาของภาวะซึมเศร้า" Journal of Psychiatry and Neuroscience, vol. 29 ไม่มี 3, หน้า 185–193, 2004.

[42] M. Zhu, C. Lu และ W. Li "การได้รับ echinacoside ชั่วคราวเพียงพอที่จะกระตุ้นการส่งสัญญาณ Trk และปกป้องเซลล์ประสาทจาก rotenone" Journal of Neurochemistry, vol. 124 หมายเลข 4, หน้า 571–580, 2556.

[43] ท.-เอช. ลู ซี.-ซี. ซู, เอฟ.ซี. Tang et al., "กรดคลอโรอะซิติกกระตุ้นการตายของเซลล์ประสาทผ่านทางเส้นทางส่งสัญญาณความเครียดเอนโดพลาสมิกเรติเคิลความเครียดที่เกิดจากออกซิเจนที่มีปฏิกิริยา" 225 น. 1–12, 2558.

[44] ย.-ส. วัง Z.-H. Xuan, S. Tian และ G.-H. Du, "Echinacoside ปกป้อง 6-การทำงานผิดปกติของไมโตคอนเดรียที่เกิดจากไฮดรอกซีโดพามีนและการตอบสนองต่อการอักเสบในเซลล์ PC12 ผ่านการลดการผลิต ROS" Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, vol. 2015, รหัสบทความ 189239, 9 หน้า, 2015.

[45] WF Chiou, LC Lin และ CF Chen, "Acteoside ปกป้องเซลล์บุผนังหลอดเลือดจากความเครียดออกซิเดชันที่เกิดจากอนุมูลอิสระ" Journal of Pharmacy and Pharmacology, vol. 56 หมายเลข 6, หน้า 743– 748, 2004.