อาหารที่มีไขมันสูงทำให้ไตขาดเลือด - การบาดเจ็บซ้ำ

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม:ali.ma@wecistanche.com

ตอนที่ Ⅰ: การปรับเปลี่ยนอาหารทำให้ไมโครมิลิเยอในภูมิคุ้มกันภายในไตและความอ่อนแอต่อการบาดเจ็บของไตเฉียบพลันจากการขาดเลือด

Junseok Jeon'f, Kyungho Leef, Kyeong Eun Yang, Jung Eun Lee, Ghee Young Kwon, Wooseong Huh & et al.

การแนะนำ

ขาดเลือดไตวายเฉียบพลัน(AKI) เป็นสาเหตุที่พบบ่อยที่สุดของ AKI และมักก่อให้เกิดการพัฒนาและความก้าวหน้าของโรคไตเรื้อรัง(CKD) ทั้งในประเทศและที่ปลูกถ่ายไต(1,2). Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ(IRI) ทำให้เกิดการบาดเจ็บจากการต่อกิ่งซึ่งเป็นผลที่หลีกเลี่ยงไม่ได้ของไตการปลูกถ่าย (3). บทบาทที่สำคัญของกลไกภูมิคุ้มกัน นอกเหนือจากการบาดเจ็บจากการขาดออกซิเจนอย่างง่าย ในการเกิดโรคของ AKI ขาดเลือดได้รับการแสดงให้เห็นในการศึกษาจำนวนมาก(4,5)ในการศึกษาหลังขาดเลือดไตกำลังติดตาม IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ) การตอบสนองการอักเสบที่แข็งแกร่งที่เกิดจากระบบภูมิคุ้มกันทั้งโดยกำเนิดและปรับตัวส่งผลให้ไตเสียหาย(6). นอกจากการแทรกซึมของเซลล์ภูมิคุ้มกันที่ไหลเวียนแล้ว สภาพแวดล้อมระดับไมโครอิมมูโนโลยีในไต ซึ่งรวมถึงเซลล์ภูมิคุ้มกันภายในไตที่อาศัยอยู่ (7) และตัวรับค่าโทร (TLRs) บนท่อไต (8) มีส่วนสำคัญต่อการบาดเจ็บของไตตาม IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ) (6).

การศึกษาล่าสุดได้รายงานความสัมพันธ์ระหว่างอาหารและการทำงานของภูมิคุ้มกัน (9) การเปลี่ยนแปลงในองค์ประกอบของอาหารมีศักยภาพในการทำให้รุนแรงขึ้นหรือบรรเทาความรุนแรงของโรคที่กลไกภูมิคุ้มกันมีบทบาทสำคัญในการเกิดโรค เช่น ความดันโลหิตสูงในรูปแบบ murine ของความดันโลหิตสูงที่ไวต่อเกลือหรือโรคอ้วนไตเสียหายในไขมันสูง(HF) แบบจำลองโรคอ้วนที่เกิดจากอาหาร (10-12) อย่างไรก็ตาม ยังไม่เป็นที่แน่ชัดว่าการดัดแปลงอาหารสามารถเปลี่ยนแปลงสภาวะแวดล้อมไมโครอิมมูโนโลยีภายในไตและความอ่อนแอต่อ AKI ขาดเลือดได้หรือไม่ แม้ว่าจะมีการรายงานบทบาทของการแทรกแซงทางโภชนาการใน CKD (13) เมื่อพิจารณาถึงศักยภาพในการป้องกันหรือผลการรักษาของการแทรกแซงทางอาหารใน AKI ขาดเลือด การตรวจสอบผลกระทบของการปรับเปลี่ยนอาหารในภาวะปกติเป็นสิ่งสำคัญไต.

ในการศึกษานี้ เรามุ่งที่จะเปิดเผยผลกระทบของ HF(ไขมันสูง) หรืออาหารที่มีเกลือสูง (HS) ในไตปกติและการพัฒนาของ AKI ขาดเลือดโดยเน้นที่สภาวะแวดล้อมไมโครภูมิคุ้มกันภายในไต

คลิกเพื่อออร์แกนิกCISTANCHE สำหรับโรคไต

วัสดุและวิธีการ

การปรับเปลี่ยนอาหารและ IRI ของไต(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)แบบอย่าง

การศึกษานี้ได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการการดูแลและการใช้สัตว์ในศูนย์การแพทย์ของ Samsung และคณะกรรมการตรวจสอบสถาบันของศูนย์การแพทย์ Samsung (IACUC No.20180314002) และดำเนินการตามการวิจัยในสัตว์: การรายงานแนวทางการทดลองในสัตว์ทดลอง (14,15) หนูซื้อ C57BL/6 เพศผู้ 9-สัปดาห์จาก Orient Bio Inc. (ซองนัม, คยองกี-โด, เกาหลี) หนูทั้งหมดถูกเลี้ยงในสิ่งอำนวยความสะดวกที่ปราศจากเชื้อโรคโดยเฉพาะ

เราตรวจสอบผลกระทบของHF(ไขมันสูง)หรืออาหาร HS ในไตปกติและไตหลังขาดเลือดในรูปแบบ AKI ขาดเลือดที่เกิดจาก IRI ทวิภาคี(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)การผ่าตัด. ในแต่ละแบบจำลอง หนูถูกสุ่มจัดสรรเป็นสี่แผนอาหาร; อาหารปกติ (0.25 เปอร์เซ็นต์ NaCl โดยน้ำหนัก, 10 เปอร์เซ็นต์ไขมันโดยแคลอรี่), HF(ไขมันสูง) อาหาร (0.25 เปอร์เซ็นต์ NaCl โดยน้ำหนัก, 60 เปอร์เซ็นต์ไขมันโดยแคลอรี่), อาหาร HS (8 เปอร์เซ็นต์ NaCl โดยน้ำหนัก, 10 เปอร์เซ็นต์ไขมันโดยแคลอรี่) และอาหารที่มีไขมันสูงที่มีเกลือสูง (HF(ไขมันสูง)บวก HS) (8 เปอร์เซ็นต์ NaCl โดยน้ำหนัก, 60 เปอร์เซ็นต์ไขมันโดยแคลอรี่) องค์ประกอบของอาหารปกติและอาหาร HS คือโปรตีน 20 เปอร์เซ็นต์ (เคซีนจากแหล่งหลัก) คาร์โบไฮเดรต 70 เปอร์เซ็นต์ (ซูโครสจากแหล่งหลัก) และไขมัน 10 เปอร์เซ็นต์ (น้ำมันถั่วเหลืองแหล่งหลัก) (D12450B, Research Diets, New Brunswick, NJ) องค์ประกอบของHF(ไขมันสูง)อาหารและ HF(ไขมันสูง) บวกกับอาหาร HS คือโปรตีน 20 เปอร์เซ็นต์ (เคซีนแหล่งหลัก) คาร์โบไฮเดรต 20 เปอร์เซ็นต์ (แหล่งหลัก Lodex 10) และไขมัน 60 เปอร์เซ็นต์ (น้ำมันหมูจากแหล่งหลัก) (D12492 อาหารสำหรับการวิจัย) สูตรอาหารทั้งหมดมีแร่ธาตุและวิตามินเข้มข้นเท่ากัน ยกเว้น NaCl

สำหรับหนูปกติ แต่ละกลุ่มจะได้รับอาหารตามที่กำหนดเป็นเวลา 42 วัน จากนั้นจึงเปลี่ยนเป็นอาหารปกติเป็นเวลา 14 วัน

เกี่ยวกับแบบจำลอง AKI ที่ขาดเลือด เราใช้ IRI ของหนูที่จัดตั้งขึ้น(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)แบบจำลองด้วยวิธีการผ่าตัดผ่านกล้อง (16, 17) IRI ทวิภาคี(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)เกิดขึ้นหลังจากระยะเวลา 1-สัปดาห์หรือ 6-สัปดาห์ของการปรับเปลี่ยนอาหาร โดยสรุป หนูเมาส์ถูกทำให้หมดความรู้สึกด้วยการฉีดคีตามีนในช่องท้อง (100 มก./กก.;ยูฮัน โซล เกาหลี) และไซลาซีน (10 มก./กก.; ไบเออร์, เลเวอร์คูเซ่น, เยอรมนี) หลังจากกรีดช่องท้องตรงกลาง ขั้วไตทั้งสองข้างจะถูกแยกและหนีบเป็นเวลา 27 นาทีด้วยแคลมป์หลอดเลือดขนาดเล็ก (Roboz Surgical Instrument, Gaithersburg, MD) ในระหว่างการผ่าตัด หนูที่ได้รับการดมยาสลบจะถูกเก็บกักน้ำไว้อย่างดีด้วยน้ำเกลือปลอดเชื้ออุ่น ๆ และวางไว้บนโต๊ะให้ความร้อนที่ควบคุมด้วยอุณหภูมิ หลังจาก 27 นาที ที่หนีบ microvascular จะถูกปล่อยออกจากหัวของไตเพื่อให้เกิด reperfusion หลังจากเย็บแผลแล้ว หนูได้รับอนุญาตให้ฟื้นตัวโดยสามารถเข้าถึงอาหารและน้ำที่จัดสรรไว้ได้ฟรี หนูทั้งหมดถูกสังเวยในวันที่ 2 หลังจาก IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)การผ่าตัดและไตหลังขาดเลือดถูกเก็บเกี่ยวหลังจากการขับเลือดออก

CISTANCHE สารสกัดสามารถป้องกัน KIDNEY จากความเสียหาย

การประเมินการทำงานของไต

ในหนูปกติ ความเข้มข้นของยูเรียไนโตรเจนในเลือด (BUN;Fujifilm, Bedford, UK) และ creatinine ในพลาสมา (Arbor Assays,Ann Arbor, MI) ถูกวัดในตัวอย่างพลาสมาที่เก็บจากหลอดเลือดดำส่วนหางตามลำดับในวันที่ 0,7,14 , 28,42 และ 56 หลังการปรับเปลี่ยนอาหาร ใช้ชุดสีตามวิธีที่ผู้ผลิตแนะนำ ใน IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)แบบจำลอง ตัวอย่างพลาสมาถูกวัดในวันที่ 0, 1, และ 2 หลังการดำเนินการโดยใช้วิธีการเดียวกัน

การวิเคราะห์เนื้อเยื่อเนื้อเยื่อ

ใน IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)แบบจำลองส่วนเนื้อเยื่อไตหลังขาดเลือดได้รับการแก้ไขด้วยฟอร์มาลินบัฟเฟอร์ 10 เปอร์เซ็นต์และย้อมด้วยฮีมาทอกซิลินและอีโอซิน นักพยาธิวิทยาของไตที่ตาบอดต่อการจัดสรรอาหารได้คะแนนเนื้อร้ายของท่อไตในคอร์เทกซ์และไขกระดูกด้านนอกของไตหลังขาดเลือด

CD45 อิมมูโนฮิสโตเคมีและการวิเคราะห์ FAXS ของเนื้อเยื่อ

ส่วนเนื้อเยื่อไตที่ตรึงฟอร์มาลินถูกย้อมภูมิคุ้มกันเพื่อตรวจหา CD45 ดังนี้ ส่วนต่างๆ (4-ไมโครเมตร-หนา) ถูกกำจัดพาราฟินด้วยไซลีน นำกลับมาใช้ใหม่ในชุดแอลกอฮอล์ที่จัดระดับแล้ว และวางในสารละลายบัฟเฟอร์ซิเตรต (pH6.0) สไลด์วางในหม้อความดันและให้ความร้อนสำหรับ 10 นาทีเพื่อเพิ่มการดึงแอนติเจน หลังจากเย็นตัวลง ส่วนของไตจะถูกแช่ในสารละลายไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ (Dako, Carpinteria, CA) เป็นเวลา 30 นาที เพื่อป้องกันกิจกรรมของเปอร์ออกซิเดสภายในร่างกาย ตามด้วยบ่มค้างคืนที่ 4 องศาด้วยบล็อกโปรตีนที่ปราศจากซีรัม (Dako) วันรุ่งขึ้น สไลด์ถูกบ่มด้วยการเจือจาง 1:100 ของโมโนโคลนัลแอนติบอดีต้านเมาส์ CD45 (BD Biosciences, San Jose, CA) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หลังจากล้างแล้ว ส่วนที่เปื้อน CD45- ถูกบ่มเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องด้วยแอนติบอดีทุติยภูมิโดยใช้ Dako REAL EnVison kit (Dako) ต่อจากนั้น 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (Dako) ถูกนำไปใช้กับ สไลด์เพื่อสร้างสีน้ำตาล และตัวสไลด์ถูกย้อมด้วยสารละลายฮีมาทอกซิลินของเมเยอร์ (ดาโก)

เวิร์กสเตชัน TissueFAXS (Tissue Gnostics,Vienna, Austria) ถูกใช้เพื่อวิเคราะห์และคำนวณเปอร์เซ็นต์ของเซลล์บวกของ CD45-ในตัวอย่างไต ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (18)

การวิเคราะห์โฟลไซโตเมทริกของเซลล์โมโนนิวเคลียร์ที่แทรกซึมในไต

การแยกเซลล์นิวเคลียสของไต (KMNCs) ขึ้นอยู่กับโปรโตคอลที่กำหนดไว้ (19) โดยสังเขป ไตที่แยกแคปซูลแล้วถูกแช่ในบัฟเฟอร์ RPMI (Mediatech, Manassas, VA) ที่มี FBS 5 เปอร์เซ็นต์และหยุดชะงักทางกลไกโดยใช้ Stomacher 80 Biomaster (Seward, Worthing สหราชอาณาจักร). ตัวอย่างถูกทำให้เครียด ล้าง และแขวนลอยใหม่ในเปอร์โคลล์ 36 เปอร์เซ็นต์ (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ) ตามด้วยการวางซ้อนอย่างอ่อนโยนบน Percoll 72 เปอร์เซ็นต์ ตัวอย่างถูกหมุนเหวี่ยงที่ 1,000g เป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง KMNCs ถูกรวบรวมจากส่วนต่อประสาน 36 เปอร์เซ็นต์และ 72 เปอร์เซ็นต์ Percoll

KMNC ที่แยกออกมาถูกแขวนลอยใหม่ในบัฟเฟอร์ FACS และบ่มล่วงหน้าด้วยแอนติบอดีต้าน CD16/CD32 เป็นเวลา 10 นาทีเพื่อลดการจับที่ไม่จำเพาะผ่านตัวรับ Fc KMNC ถูกบ่มด้วยแอนติ-CD3,CD4, CD8, CD19, CD21,CD25,CD44,CD45,CD62L,CD69,CD126,CD138,Gr-1, F4/80, FoxP3 และ NK1.1 (ทั้งหมดจาก BD Biosciences, San Jose, CA) เป็นเวลา 25 นาทีที่ 4 องศา ล้างด้วยบัฟเฟอร์ FACS และตรึงด้วยสารละลายพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 1 เปอร์เซ็นต์ ตัวอย่างได้มาโดยใช้โฟลว์ไซโตมิเตอร์ BD FACSVerse วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้โปรแกรม FACSuite (BD Biosciences)

Multiplex Cytokine/Chemokine Assay

การวิเคราะห์ไซโตไคน์และคีโมไคน์แบบมัลติเพล็กซ์ในสารสกัดจากโปรตีนไตทั้งหมดได้ดำเนินการโดยใช้ Milliplex MAP Mouse Cytokine/Chemokine Kit (Luminex, Austin, TX) โดยปฏิบัติตามคำแนะนำของผู้ผลิต แอนติบอดีโมโนโคลนอลต้านไซโตไคน์ที่เชื่อมโยงกับไมโครสเฟียร์ที่รวมคุณสมบัติที่แตกต่างกันของสีย้อมเรืองแสงสองสีถูกนำมาใช้ในการสอบวิเคราะห์โฟลว์ไซโตเมทริกที่มีอนุภาคแบบมัลติเพล็กซ์นี้ การทดสอบของเราออกแบบมาเพื่อหาปริมาณ interleukin(I)-2;IL-4; อิลลินอยส์-6; ฉัน-10;อินเตอร์เฟอรอน (IFN)-y; มอนอไซต์ คีโมแอตแทรกแตนต์โปรตีน(MCP)-1;ควบคุมโดยการกระตุ้น, ทีเซลล์ปกติที่แสดงออกและคัดหลั่ง (RANTES/CCL5); ปัจจัยเนื้อร้ายของเนื้องอก(TNF)- ; และ vascular endothelial growth factor (VEGF) ค่าของไซโตไคน์หรือคีโมไคน์แต่ละตัวถูกทำให้เป็นมาตรฐานโดยการหารความเข้มข้นดิบ (pg/ml) ด้วยความเข้มข้นของโปรตีนในไต (มก./มล. วัดโดยใช้ชุดตรวจวิเคราะห์โปรตีน Pierce BCA, Thermo Fisher วิทยาศาสตร์, วอลแทม, แมสซาชูเซตส์).

การวิเคราะห์ Western Blot ของตัวรับค่าผ่านทางภายในไต 2 และ 4

รีเซพเตอร์ที่คล้ายค่าโทรในไต 2 และ 4(TLR-2 และ TLR-4) ถูกวิเคราะห์โดยการวิเคราะห์ Western blot ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ปริมาณที่เท่ากันของสารสกัดโปรตีนจากไตทั้งหมด (30 ug) ถูกแยกโดยอิเล็กโตรโฟรีซิสบนระบบเจลขนาดเล็ก NuPAGE Bolt (Thermo Fisher Scientific) เจลถูกถ่ายโอนไปยังเมมเบรนไนโตรเซลลูโลสโดยใช้ iBlot 2 Dry Blotting System (Thermo Fisher Scientific) หลังจากอิเล็กโตรโฟรีซิส เมมเบรนถูกปิดกั้นด้วยสารละลายน้ำเกลือไตรสบัฟเฟอร์ 5% ของนมพร่องมันเนยที่มี 0.1 เปอร์เซ็นต์ Tween20 (TBST) เป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง จากนั้นจึงฟักตัวในชั่วข้ามคืนที่ 4 องศาด้วยหนึ่งในแอนติบอดีต่อไปนี้: โมโนโคลนัลแอนติบอดีต่อ TLR2 ของเมาส์ (MyBioSource, San Diego ,CA)หรือแอนติบอดีต้าน TLR4 (Novus Biologicals, Centennial, CO) แอนติบอดีทุติยภูมิที่คอนจูเกตจากฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดสถูกนำไปใช้เป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องหลังจากล้างด้วย TBST สัญญาณถูกแสดงภาพโดยใช้ระบบตรวจจับ Amersham ECL (GE Healthcare, Chicago, IL) โดยทำตามคำแนะนำของผู้ผลิต แถบถูกวิเคราะห์โดย densitometrically โดยใช้ซอฟต์แวร์ ImageJ 1.8 (Wayne Rasband, National Institutes of Health, MD) และปรับให้เป็นมาตรฐานเทียบกับความเข้มของแถบ -actin ที่สอดคล้องกันในฐานะการควบคุมภายใน

HK-2 แบบจำลองเซลล์ขาดออกซิเจนและการทดสอบการเพิ่มจำนวน

เซลล์ -2(HK-2) ของไตของมนุษย์ (เส้น cll เยื่อบุผิวส่วนต้นที่เป็นอมตะจากไตของมนุษย์ที่เป็นผู้ใหญ่ปกติ) แบบจำลองภาวะขาดออกซิเจนถูกใช้สำหรับการศึกษาในหลอดทดลอง เพื่อตรวจสอบผลของ HS หรือ HF(ไขมันสูง) สิ่งแวดล้อมในระดับเซลล์

เซลล์ไตของมนุษย์-2(HK-2)ถูกซื้อจาก American Type Culture Collection(CRL-2190, Manassas, VA) และเพาะเลี้ยงในตัวกลางที่ปราศจาก keratinocyte serum (Thermo Fisher Scientific) ด้วยสารสกัดจากต่อมใต้สมองจากวัวและปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนังชั้นนอกของมนุษย์ เซลล์ถูกบ่มที่ 37 องศาในบรรยากาศที่มีความชื้นเป็น 5 เปอร์เซ็นต์ของ CO2 โดยที่ตัวกลางเปลี่ยนไปทุก 2-3 วัน ภาวะขาดออกซิเจนเกิดขึ้นจากการสัมผัสกับ 1 เปอร์เซ็นต์ O2 และ 5 เปอร์เซ็นต์ CO2 ที่สมดุลกับไนโตรเจนในตู้ฟักไข่แบบหลายก๊าซ (APM-30D,Astec, Fukuoka, Japan) เป็นเวลา 48 ชั่วโมง

เซลล์ HK-2 ถูกแบ่งออกเป็นสี่กลุ่ม กลุ่มแรกและกลุ่มที่สองถูกควบคุมภายใต้สภาวะปกติ (21 เปอร์เซ็นต์ O2) และภาวะขาดออกซิเจน (1 เปอร์เซ็นต์ O2) ตามลำดับ กลุ่มที่สามและสี่ได้รับการรักษาด้วย NaCl เพิ่มเติม 25 mM และ 1:250 ความเข้มข้นของไขมันเจือจาง (Thermo Fisher Scientific) ตามลำดับ , ก่อนและหลังดูถูก hypoxic.

ระดับของการเพิ่มจำนวนเซลล์ HK{{0}} ในวันที่ 0,1,และ 2 หลังจากขาดออกซิเจนถูกประเมินด้วยการสอบวิเคราะห์การงอกขยายของเซลล์ที่มีน้ำหนึ่งสารละลาย (Promega,Madison, WI) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต

สำหรับการหาปริมาณของการแสดงออกของโมเลกุลส่งสัญญาณการอักเสบในเซลล์ HK{0}} ขาดออกซิเจน, TLR-2 และ TLR-4 ถูกวัดด้วยการวิเคราะห์ western blot โดยใช้โมโนโคลนัลแอนติ-TLR2 ของหนูเมาส์ (ซานตาครูซ เทคโนโลยีชีวภาพ ดัลลัส รัฐเท็กซัส) และแอนติบอดีต้าน TLR4 (Novus Biologicals, Centennial, CO) ในวันที่ 0 และ 2 โดยสังเขป เซลล์ถูกวางไว้ในบัฟเฟอร์ RIPA (Sigma-Aldrich, St.Louis, MO) ที่มีค็อกเทลตัวยับยั้งโปรตีเอส (ซิกมา-อัลดริช). โฮโมจีเนตถูกหมุนเหวี่ยงที่ 13,000g ที่ 4 องศาเป็นเวลา 10 นาที และส่วนลอยเหนือตะกอนถูกนำเข้าสู่กระบวนการเวสเทิร์บล็อตติงที่กล่าวไว้ข้างต้น

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย±ข้อผิดพลาดมาตรฐานของค่าเฉลี่ย (SEM) วิเคราะห์ความแตกต่างระหว่างกลุ่มหรือจุดเวลาโดยใช้การทดสอบ Mann-Whitney U หรือการวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบสองทาง (ANOVA) ตามด้วยการวิเคราะห์หลังการวิเคราะห์ของ Tukey การวิเคราะห์ทางสถิติทั้งหมดดำเนินการโดยใช้ซอฟต์แวร์ GraphPad Prism เวอร์ชัน 8 (ซอฟต์แวร์ GraphPad, La Jolla, CA)<0.05 were="" considered="" statistically="">

ผลลัพธ์

ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อการเปลี่ยนแปลงทางสรีรวิทยาในหนูปกติ เพื่อตรวจสอบการเปลี่ยนแปลงทางสรีรวิทยาที่เกิดจากการปรับเปลี่ยนอาหารในหนูปกติ น้ำหนักตัว คอเลสเตอรอลรวมในพลาสมา ครีเอตินีน และความเข้มข้นของ BUN ตามลำดับ ปริมาณการบริโภคอาหารทั้งหมดใน HE, HF(ไขมันสูง)บวก HS และกลุ่มควบคุมมีความคล้ายคลึงกัน ในขณะที่กลุ่ม HS มีแนวโน้มที่จะบริโภคเชามากกว่าเล็กน้อย (รูปที่ 1) น้ำหนักตัวของ HF(ไขมันสูง)กลุ่มอาหารเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญจากวันที่ 7 หลังจากเริ่ม HF(ไขมันสูง)อาหาร. กลุ่มอาหาร HS มีน้ำหนักตัวต่ำกว่ากลุ่มควบคุมในวันที่ 42 และน้ำหนักตัวเทียบได้กับกลุ่มควบคุมจาก l สัปดาห์หลังจากเปลี่ยนเป็นอาหารปกติ (รูปที่ 1A) ระดับคอเลสเตอรอลรวมในพลาสมาของ HF(ไขมันสูง)กลุ่มอาหารสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมในวันที่ 14 และเทียบได้กับกลุ่มควบคุมที่ 1 สัปดาห์หลังจากเปลี่ยนมารับประทานอาหารปกติ ระดับคอเลสเตอรอลในพลาสมาในกลุ่มควบคุม อาหาร HS และHF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหารที่มี HS เปรียบเทียบได้ในช่วง 6 สัปดาห์ของการปรับเปลี่ยนอาหาร (รูปที่ 1B) BUN สูงกว่าใน HF(ไขมันสูง)กลุ่มอาหารและ HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มควบคุมอาหาร HS ในวันที่ 7 การทำงานของไตโดยรวมเปรียบเทียบได้ระหว่างกลุ่มที่มีการปรับเปลี่ยนอาหารเป็นเวลา 6 สัปดาห์ (รูปที่ 1C)

รูปที่ 1|ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อการเปลี่ยนแปลงทางสรีรวิทยาของหนูปกติ(A) HF(ไขมันสูง)กลุ่มอาหารน้ำหนักขึ้นอย่างมีนัยสำคัญตั้งแต่วันที่ 7 หลังจากเริ่ม HF(ไขมันสูง)ควบคุมอาหารและแสดงน้ำหนักตัวคงที่หลังจากเปลี่ยนมาเป็นอาหารปกติ กลุ่มอาหาร HS มีน้ำหนักตัวต่ำกว่ากลุ่มควบคุมในวันที่ 42 และกลับมามีน้ำหนักตัวเทียบเท่ากับกลุ่มควบคุม 1 สัปดาห์หลังจากเปลี่ยนไปรับประทานอาหารปกติ (B) HF(ไขมันสูง)อาหารเพิ่มความเข้มข้นของคอเลสเตอรอลรวมในพลาสมาอย่างมีนัยสำคัญจากวันที่ 14 หลังจากการปรับเปลี่ยนอาหาร ระดับคอเลสเตอรอลรวมของHF(ไขมันสูง)กลุ่มอาหารกลับมามีความเข้มข้นเทียบเท่ากันหลังจากเปลี่ยนมารับประทานอาหารปกติ (C) ระดับ BUN ในวันที่ 7 สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในHF(ไขมันสูง)อาหารและกลุ่มอาหาร HS การทำงานของไตโดยรวมที่วัดโดย creatinine ในพลาสมาเปรียบเทียบกันได้ระหว่างกลุ่มต่างๆ ตลอดระยะเวลาการศึกษา*P < {{0}}.05="" เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมในแต่ละช่วงเวลา="" †p="">< 0.05="" เทียบกับวันที่="" 7="" ในกลุ่มเดียวกัน="" (n="5" สำหรับแต่ละกลุ่มในแต่ละช่วงเวลา)="" วิเคราะห์ทางสถิติด้วยการทดสอบ="" anova="" แบบสองทาง="" ตามด้วยการทดสอบของ="" tukey="">(ไขมันสูง), ไขมันสูง; HS, เกลือสูง; HF(ไขมันสูง)บวก HS ไขมันสูงพร้อมเกลือสูง

ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อเม็ดเลือดขาวในหนูปกติของหนูที่ลักลอบค้าเม็ดโลหิตขาวทั้งหมดในไตปกติได้รับการประเมินโดยการย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีของ CD45 ตามด้วยการวิเคราะห์เชิงกึ่งปริมาณด้วย TissueFAXS (รูปที่ 2A) สัดส่วนของเม็ดเลือดขาวรวมภายในเซลล์ระหว่างเซลล์ที่มีนิวคลีเอตทั้งหมดเปรียบเทียบกันได้ระหว่าง กลุ่มในแต่ละจุดเวลา (รูปที่ 2B)

รูปที่ 2|ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อเม็ดเลือดขาวในไตของหนูปกติเม็ดเลือดขาวที่อาศัยอยู่ถูกวิเคราะห์ด้วยอิมมูโนฮิสโตเคมีของ CD45 และโฟลโฟลว์ ไซโตเมทรีบนเนื้อเยื่อไตปกติ (A) การหาตำแหน่งอิมมูโนฮิสโตเคมีที่เป็นตัวแทนและการวิเคราะห์กึ่งปริมาณของ CD45-เม็ดเลือดขาวที่เป็นบวกในไตปกติของกลุ่มควบคุมในวันที่ 0 ลูกศรระบุซีดี45-เม็ดเลือดขาวที่เป็นบวก (×200) (B) เปอร์เซ็นต์ของเม็ดเลือดขาวทั้งหมดที่แสดงออก CD45 ระหว่างเซลล์ที่มีนิวคลีเอตทั้งหมดสามารถเปรียบเทียบกันได้ระหว่างกลุ่มที่เลี้ยงด้วยอาหาร

เซลล์เอฟเฟกเตอร์ที่สำคัญของระบบภูมิคุ้มกันโดยกำเนิดและแบบปรับตัวได้ถูกส่งเข้าสู่ไตหลังจากวิเคราะห์การดัดแปลงอาหารด้วยโฟลว์ไซโตเมทรี เกี่ยวกับชนิดย่อยของทีเซลล์, เซลล์ CD8 T ทั้งหมด, เซลล์ CD4T หน่วยความจำเอฟเฟกต์ และเซลล์ NK T เพิ่มขึ้นเมื่อเวลาผ่านไปในระหว่างการปรับเปลี่ยนอาหาร ในขณะที่เซลล์ CD4 T ทั้งหมดลดลง ในแง่ของความแตกต่างระหว่างกลุ่มในแต่ละจุดเวลา HF(ไขมันสูง)กลุ่มและHF(ไขมันสูง)บวกกับ HSgroup แสดงสัดส่วนที่มากขึ้นของเซลล์ CD8T ใน T เซลล์ทั้งหมดในวันที่ 42 หลังจากการปรับเปลี่ยนอาหารเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมอาหาร HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่ม HS ยังแสดงให้เห็นสัดส่วนที่มากขึ้นของชุดย่อยของหน่วยความจำเอฟเฟกเตอร์ของเซลล์ CD4 และ CD8T และเซลล์ CD4 และ CD8 T ที่ถูกกระตุ้น (รูปที่ 3A,B, รูปที่ 2) เกี่ยวกับประชากรเซลล์ที่ไม่ใช่ T เซลล์ B ทั้งหมดลดลงและเซลล์ NK เพิ่มขึ้น ในวันที่ 14 เทียบกับวันที่ 7 หลังการปรับเปลี่ยนอาหาร เซลล์พลาสม่าถึงจำนวนสูงสุดในHF(ไขมันสูง)การควบคุมอาหารและกลุ่มควบคุมอาหาร HS ในวันที่ 42 และลดลงจนอยู่ในระดับที่เทียบได้กับกลุ่มควบคุมหลังรับประทานอาหารปกติเป็นเวลา 2 สัปดาห์ สัดส่วนของเซลล์ NK และเซลล์ B ที่เจริญเต็มที่ในเซลล์ B ทั้งหมดมีค่าสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน HF(ไขมันสูง)อาหารและ HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหาร HS ในวันที่ 14 หลังจากการปรับเปลี่ยนอาหาร HF(ไขมันสูง)การควบคุมอาหารและกลุ่มอาหาร HS แสดงการแทรกซึมของนิวโทรฟิลภายในไตที่สูงขึ้นในวันที่ 14 หลังจากการดัดแปลงอาหาร (รูปที่ 3C,D, รูปที่ 2)

รูปที่ 3|การวิเคราะห์โฟลว์ไซโตเมทรีของ KMNC ที่แยกได้จากไตของหนูปกติ(A) การเปลี่ยนแปลงในประชากรย่อยของทีเซลล์ภายในไตโดยการปรับเปลี่ยนอาหาร HF(ไขมันสูง)และอาหาร HF บวกกับ HS เพิ่มสัดส่วนของทีเซลล์ CD8 ทั้งหมดระหว่างทีเซลล์ทั้งหมดในวันที่ 42 หลังจากการปรับเปลี่ยนอาหาร HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหาร HS ยังเพิ่มสัดส่วนของหน่วยความจำเอฟเฟกเตอร์ CD4 และ CD8 T เซลล์ (B) แผนภาพจุดที่เป็นตัวแทนซึ่งวิเคราะห์ทีเซลล์ในวันที่ 42 เซลล์แบบเกตระบุ CD4 ทีเซลล์และ CD8 ทีเซลล์ในทีเซลล์ทั้งหมด (C) HF(ไขมันสูง)อาหารและอาหาร HS เพิ่มการแทรกซึมของเซลล์พลาสมาและนิวโทรฟิลในวันที่ 42 และ 14 หลังการปรับเปลี่ยนอาหารตามลำดับ HF(ไขมันสูง)การควบคุมอาหารและอาหาร HF บวกกับ HS ช่วยเพิ่มการแทรกซึมของเซลล์ B ที่เจริญเต็มที่และเซลล์ NK ที่กระตุ้นในวันที่ 14 หลังจากการปรับเปลี่ยนอาหาร (D) แผนภาพจุดที่เป็นตัวแทนซึ่งวิเคราะห์เซลล์พลาสมาในวันที่ 42 เซลล์แบบมีรั้วรอบขอบชิดบ่งชี้ว่าเซลล์พลาสมาซึ่งแสดงออก CD138 และ CD126 ระหว่างเซลล์ที่มีนิวเคลียสเดียวในไตทั้งหมด *P < 0.05="" เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมในแต่ละช่วงเวลา="" †p="">< 0.05="" เทียบกับวันที่="" 7="" ในกลุ่มเดียวกัน="" (n="5" สำหรับแต่ละกลุ่มในแต่ละช่วงเวลา)="" วิเคราะห์ทางสถิติด้วยการทดสอบ="" anova="" แบบสองทาง="" ตามด้วยการทดสอบของ="" tukey="">ไขมันสูง; HS, เกลือสูง; HF(ไขมันสูง)บวก HS,ไขมันสูงด้วยเกลือสูง

ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อ Cytokines/Chemokines ในไตของหนูปกติ

เมื่อเทียบกับอาหารปกติ อาหาร HS หรือ HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหาร HS เสริมการแสดงออกในไตของไซโตไคน์/คีโมไคน์ที่มีการอักเสบซึ่งรวมถึง TNF- , INF-y, MCP-1 และ RANTES (รูปที่ 4A) การแสดงออกของ IL-6 สูงขึ้นใน HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหาร HS ในวันที่ 7 (รูปที่ 3) ในทางกลับกัน การแสดงออกภายในไตของ VEGF ในหนูที่เลี้ยงด้วยอาหาร HS และ HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหารที่มี HS ต่ำกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 4B)

รูปที่ 4|ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อไซโตไคน์ภายในไตและคีโมไคน์ของหนูปกติHS และ HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหารที่มี HS เพิ่มการแสดงออกภายในไตของ TNF- , INF- , MCP-1 และ RANTES ในวันที่ 42 HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหาร HS ยังเพิ่มการแสดงออกของ IL-6 ในวันที่ 7 หลังการปรับเปลี่ยนอาหาร แม้ว่าจะไม่มีความแตกต่างที่มีนัยสำคัญในการแสดงออกของ IL-10 แต่การแสดงออกภายในไตของ VEGF ต่ำกว่าในกลุ่มควบคุมอาหารแบบ HS และ HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหาร HS ในวันที่ 7 และวันที่ 42 หลังการปรับเปลี่ยนอาหาร *P < 005="" เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมในแต่ละช่วงเวลา="" †p="">< 0.05="" เทียบกับวันที่="" 7="" ในกลุ่มเดียวกัน="" (n="5" สำหรับแต่ละกลุ่มในแต่ละช่วงเวลา)="" วิเคราะห์ทางสถิติด้วยการทดสอบ="" anova="" แบบสองทาง="" ตามด้วยการทดสอบของ="" tukey="">ไขมันสูง; HS, เกลือสูง; HF บวก HS,ไขมันสูงด้วยเกลือสูง

การปรับเปลี่ยนอาหารส่งผลต่อความอ่อนแอต่อโรค AKI

เพื่อตรวจสอบผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อไตหลังขาดเลือด IRI . ทวิภาคี(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)ดำเนินการ 1 หรือ 6 สัปดาห์หลังจากการปรับเปลี่ยนอาหาร โดยรวมแล้วการเสื่อมสภาพของการทำงานของไตตาม IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)มีความโดดเด่นมากขึ้นในหนูที่ได้รับการดัดแปลงอาหารตาม HS เป็นเวลา 1 สัปดาห์และ 6 สัปดาห์เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม ทั้งความเข้มข้นของ BUN และ creatinine ในพลาสมามีค่าสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในหนูที่เลี้ยงด้วย HS หรือ HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหาร HS เป็นเวลา 1 สัปดาห์ เทียบกับกลุ่มควบคุมในวันที่ 2 หลัง IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)(รูปที่ 5A). ความเข้มข้นของครีเอตินีนในพลาสมาในหนูที่เลี้ยงด้วยHF(ไขมันสูง)บวกกับอาหาร HS เป็นเวลา 6 สัปดาห์สูงกว่าในกลุ่มควบคุมในวันที่ 1 และ 2 หลังจาก IRI . อย่างมีนัยสำคัญ(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)(รูปที่ 5B).

รูปที่ 5|ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อการพัฒนาของการบาดเจ็บที่ไตเฉียบพลัน (AKI) หลังจาก IRI . ทวิภาคี(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)การผ่าตัด.(A,B) การทำงานของไตเปลี่ยนแปลงตาม IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)ในแต่ละกลุ่มอาหาร การเสื่อมสภาพของการทำงานของไตตาม IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)มีแนวโน้มที่จะกำเริบโดยHF(ไขมันสูง)หรืออาหาร HS ที่ให้ทั้ง 1 สัปดาห์และ 6 สัปดาห์ ระดับ BUN และครีเอตินินในพลาสมาสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน HS และ HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหาร HS ที่ได้รับอาหารเป็นเวลา 1 สัปดาห์หลังจาก IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ). ระดับครีเอตินีนในพลาสมาใน HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหาร HS ที่กินเป็นเวลา 6 สัปดาห์สูงกว่ากลุ่มควบคุมในวันที่ 2 หลัง IRI อย่างมีนัยสำคัญ(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ). *P < 0.05="" เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมในแต่ละจุดเวลา="" (n="5–10" สำหรับแต่ละกลุ่ม)="" การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้การทดสอบ="" mann-whitney="" u-test="">ไขมันสูง; HS, เกลือสูง; HF บวก HS,ไขมันสูงด้วยเกลือสูง

สัดส่วนของท่อเนื้อตายมีแนวโน้มที่จะสูงขึ้นในหนูที่เลี้ยงด้วย HS หรือ HF(ไขมันสูง)อาหารเทียบกับกลุ่มควบคุม (รูปที่ 6) กลุ่มที่เลี้ยงHF(ไขมันสูง)บวกกับอาหารที่มี HS เป็นเวลา 1 สัปดาห์พบว่ามีสัดส่วนของท่อที่เป็นเนื้อตายมากกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 6C)

รูปที่ 6|ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อการบาดเจ็บของโครงสร้างหลังการทำ IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)การผ่าตัด.(A,B) การย้อมสี Hematoxylin และ eosin ของไตหลังขาดเลือดในวันที่ 2 หลัง IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ). ลูกศรแสดงถึงท่อที่เสียหายหรือเน่าเสีย (×200) (C) เปอร์เซ็นต์ของหลอดเนื้อตายมีแนวโน้มสูงขึ้นในหนูที่ได้รับ HF(ไขมันสูง)หรืออาหาร HS เทียบกับกลุ่มควบคุม HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหาร HS ที่เลี้ยงเป็นเวลา 1 สัปดาห์พบว่ามีเปอร์เซ็นต์ของท่อเนื้อตายที่สูงกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ *P < 0.05="" เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม="" (n="5–10" สำหรับแต่ละกลุ่ม)="" การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้การทดสอบ="" mann-whitney="" u-test="">ไขมันสูง; HS, เกลือสูง; HF บวก HS,ไขมันสูงด้วยเกลือสูง

เปอร์เซ็นต์ของเม็ดเลือดขาวทั้งหมดที่แสดง CD45 ระหว่างนิวเคลียสทั้งหมดในไตหลังขาดเลือดมีค่าสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มที่เลี้ยงด้วย HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหาร HS สำหรับทั้ง l สัปดาห์และ 6 สัปดาห์ (ภาพที่ 7A,B) กลุ่มที่เลี้ยงHF(ไขมันสูง)การรับประทานอาหารเป็นเวลา 6 สัปดาห์ยังแสดงสัดส่วนของซีดี45-เซลล์ที่เป็นบวกมากกว่ากลุ่มควบคุม (รูปที่ 7C)

รูปที่ 7|ผลของการปรับเปลี่ยนอาหารต่อการลำเลียงเม็ดโลหิตขาวเข้าสู่ไตหลังขาดเลือด(A,B) การค้นพบอิมมูโนฮิสโตเคมีที่เป็นตัวแทนและการวิเคราะห์เชิงกึ่งปริมาณของ CD45-เม็ดเลือดขาวที่เป็นบวกในไตหลังขาดเลือดในวันที่ 2 หลังจาก IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ). มีการแทรกซึมของเม็ดเลือดขาวที่เด่นชัดมากขึ้นในไตหลังขาดเลือดของหนูที่เลี้ยงด้วย HF(ไขมันสูง)หรืออาหาร HS เป็นเวลา 1 สัปดาห์และ 6 สัปดาห์ ลูกศรระบุซีดี45-เม็ดเลือดขาวที่เป็นบวก (×200) (C) เปอร์เซ็นต์ของเม็ดเลือดขาวทั้งหมดที่แสดง CD45 ระหว่างเซลล์ที่มีนิวคลีเอตทั้งหมดสูงกว่าในไตหลังขาดเลือดของ HF(ไขมันสูง)- หรือหนูที่เลี้ยงด้วย HS เมื่อเปรียบเทียบกับหนูที่กินอาหารปกติ *P < 0.05="" เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม="" (n="5–10" สำหรับแต่ละกลุ่ม)="" การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้การทดสอบ="" mann-whitney="" u-test="">ไขมันสูง; HS, เกลือสูง; HF บวก HS,ไขมันสูงด้วยเกลือสูง

การแสดงออกภายในไตของ TLR-2 และ TLR-4 ในวันที่ 2 หลัง IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ)ได้รับการประเมินด้วย Western blotting ของตัวอย่างโปรตีนที่สกัดจากไตหลังขาดเลือด การแสดงออกของทั้ง TLR-2 และ TLR-4 มีแนวโน้มเพิ่มขึ้นในหนูที่ได้รับ HF(ไขมันสูง)หรืออาหาร HS เป็นเวลา 1 สัปดาห์ (รูปที่ 8A,C)หนูที่ได้รับอาหาร HF(ไขมันสูง)บวกกับอาหารที่มี HS เป็นเวลา 6 สัปดาห์แสดงการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของทั้ง TLR-2 และ TLR-4(รูปที่ 8B,C)

รูปที่ 8|ตัวอย่างโปรตีนซับแบบตะวันตกที่สกัดจากไตหลังขาดเลือดในวันที่ 2 หลังจาก IRI(Ischemia-reperfusion บาดเจ็บ).(A) การแสดงออกโดยรวมของ TLR2 และ TLR4 มีแนวโน้มสูงขึ้นในไตหลังขาดเลือดของหนูที่ได้รับอาหาร HF หรือ HS เป็นเวลา 1 สัปดาห์ เมื่อเทียบกับหนูที่ได้รับอาหารปกติ (B,C) การแสดงออกของ TLR-2 และ TLR-4 สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญใน HF(ไขมันสูง), HS และ HF(ไขมันสูง)บวกกับกลุ่มอาหาร HS ที่เลี้ยงเป็นเวลา 6 สัปดาห์เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม *P < 0.05="" เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม="" (n="3–4" สำหรับแต่ละกลุ่ม)="" การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้การทดสอบ="" mann-whitney="" u-test="">ไขมันสูง; HS, เกลือสูง; HF บวก HS,ไขมันสูงด้วยเกลือสูง

ผลของโซเดียมและลิปิดสูงต่อ Hypoxic HK-2 Cells

รูปที่ 9A แสดงระดับของการเพิ่มจำนวนเซลล์ HK หลังจากการดูถูกขาดออกซิเจนซึ่งขึ้นอยู่กับการบำบัดด้วย NaClandlipid เพิ่มเติม วันที่ 0 สิ้นสุดของการขาดออกซิเจน เป็นวันที่เซลล์ HK-2 ถูกกำจัดออกจากตู้ฟักไข่หลายก๊าซหลังจาก 48 ชั่วโมงของการขาดออกซิเจน การบำบัดด้วยเกลือสูง (เสริม NaCl 25 mM) ยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์ HK-2 ที่ขาดออกซิเจน ในทางกลับกัน การรักษาด้วยไขมันช่วยให้การเพิ่มจำนวนของเซลล์ HK-2ขาดออกซิเจน

การวิเคราะห์ Western blot ของ TLR-2 และ TLR-4 ในสารสกัดโปรตีนของเซลล์ HK ที่ขาดออกซิเจน-2 พบว่าการรักษาด้วยไขมันลดการแสดงออกของ TLR-2 และเพิ่มการแสดงออกของ TLR{ {4}} เปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมการขาดออกซิเจนในวันที่ 2 หลังจากการดูถูกเหยียดหยาม (รูปที่ 9B,C) การบำบัดด้วย NaCl เพิ่มเติมไม่ได้เปลี่ยนแปลงการแสดงออกของ TLR-2 หรือTLR-4 อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมภาวะขาดออกซิเจน

รูปที่ 9|ผลของการบำบัดโซเดียมและไขมันต่อเซลล์ HK-2 ที่ขาดออกซิเจน(A) การบำบัดด้วย NaCl เพิ่มเติมยับยั้งการเพิ่มจำนวนของเซลล์ HK{0}} หลังการดูถูกการขาดออกซิเจนเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมการขาดออกซิเจน ในทางกลับกัน การรักษาไขมันเพิ่มเติมช่วยอำนวยความสะดวกในการเพิ่มจำนวนของเซลล์ HK-2 หลังจากการดูถูกเหยียดหยาม (B,C) Western blotting ของ TLR-2 และ TLR-4 แสดงให้เห็นว่าการรักษาด้วยไขมันลดการแสดงออกของ TLR-2 และเพิ่มการแสดงออกของ TLR-4 เมื่อเทียบกับภาวะขาดออกซิเจน กลุ่มควบคุมในวันที่ 2 หลังจากดูถูกเหยียดหยาม วันที่ 0: วันที่เซลล์ HK-2 ถูกกำจัดออกจากตู้ฟักไข่แบบหลายก๊าซ 48 ชั่วโมงหลังขาดออกซิเจน *P < 0.05="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม="" normoxia="" †="" p="">< 0.05="" เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมขาดออกซิเจน="" การวิเคราะห์ทางสถิติดำเนินการโดยใช้การทดสอบ="" mann-whitney="">

สมุนไพรจีนโบราณ:cistanche

หมายเหตุ: ยาจีนโบราณสมุนไพร cistanche(หรือที่รู้จักในชื่อ "สมุนไพรมังกร" และ "โสมทะเลทราย") เติบโตได้ในทะเลทรายที่แห้งแล้งและอบอุ่นเท่านั้น เป็นหนึ่งในเก้าสมุนไพรอมตะCistanche(ซิสแทนเช่ ทูบูโลซ่า/cistanche deserticola/desertliving cistanche/cistanche salsa)เนื้อหาที่มีส่วนผสมที่มีประสิทธิภาพมากมาย เช่น อิชินาโคไซด์, แอคทีโอไซด์, ไกลโคไซด์ฟีนิลทานอยด์รวม, ฟลาโวนอยด์, โพลีแซ็กคาไรด์ ฯลฯ ส่วนผสมที่มีประสิทธิภาพเหล่านี้ทำให้ซิสแทนช์เป็นสมุนไพรบำรุงล้ำค่าและเป็นอาหารสำหรับภูมิคุ้มกันของผู้คน อวัยวะภายใน และเซลล์สมอง และเซลล์ประสาท เป็นต้น การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ได้ยืนยันสิ่งต่อไปนี้ผลกระทบของ cistanche(ประโยชน์ของ cistanche): ปรับปรุงภูมิคุ้มกัน; ปรับปรุงสมรรถภาพทางเพศและการทำงานของไต ป้องกันความเมื่อยล้า; ต่อต้านริ้วรอย; ปรับปรุงหน่วยความจำ โรคพาร์กินสัน; โรคอัลไซเมอร์; สารต้านอนุมูลอิสระ; สบายท้องผูก; ต้านการอักเสบ; ส่งเสริมการเจริญเติบโตของกระดูก ผิวขาว; ปกป้องตับ; เป็นต้น

คลิกที่นี่เพื่อเป็นส่วนหนึ่ง Ⅱ