ฟลาโวนอยด์ในฐานะตัวแทนต้านไวรัสที่มีแนวโน้มว่าจะต่อต้านการติดเชื้อ SARS-CoV-2: การทบทวนกลไก

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติม ติดต่อtina.xiang@wecistanche.com

เชิงนามธรรม: ตรวจพบ coronavirus ใหม่ในปี 2019(โควิด-19) ได้ส่งผลกระทบต่อกิจกรรมของมนุษย์ทั้งหมดตั้งแต่ค้นพบสารฟลาโวนอยด์พบได้ทั่วไปในอาหารของมนุษย์ได้รับความสนใจเป็นอย่างมากเนื่องจากกิจกรรมทางชีววิทยาที่โดดเด่นของพวกเขา เอกสารนี้ให้การทบทวนอย่างครอบคลุมเกี่ยวกับประโยชน์ของฟลาโวนอยด์ในโรคโควิด-19 ผลของฟลาโวนอยด์ที่รายงานก่อนหน้านี้ต่อไวรัส RNA 5 ตัวที่มีอาการทางคลินิกและ/หรือการรักษาที่คล้ายคลึงกัน เช่น ไข้หวัดใหญ่ ไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ (HIV) โรคทางเดินหายใจเฉียบพลันรุนแรง (SARS) กลุ่มอาการระบบทางเดินหายใจตะวันออกกลาง (MERS) และอีโบลา ที่พิจารณา. สารฟลาโวนอยด์ออกฤทธิ์โดยตรงยาต้านไวรัสคุณสมบัติ ซึ่งยับยั้งระยะต่างๆ ของวัฏจักรการติดเชื้อไวรัสและผลกระทบทางอ้อมเมื่อปรับเปลี่ยนการตอบสนองของโฮสต์ต่อการติดเชื้อไวรัสและภาวะแทรกซ้อนที่ตามมา ฟลาโวนอยด์แสดงฤทธิ์ต้านไวรัสผ่านการยับยั้งโปรตีเอสของไวรัส, RNA polymerase, mRNA, การจำลองแบบไวรัส และการติดเชื้อ สารประกอบยังมีประสิทธิผลสำหรับการควบคุมของอินเตอร์เฟอรอน, โปร-อินฟินิซึม cytokines และวิถีการอักเสบย่อยของเซลล์ เช่น นิวเคลียสแฟคเตอร์-kB และไคเนสที่ปลาย Jun N ไบคาลินเควอซิทินและอนุพันธ์ของเฮสเพอริดินและคาเทชินเป็นฟลาโวนอยด์ที่มีการศึกษามากที่สุดในเรื่องนี้ โดยสรุป ฟลาโวนอยด์ในอาหารเป็นทางเลือกในการรักษาโรคติดเชื้อโควิด-19 อย่างไรก็ตาม ควรมีการตรวจสอบในอนาคตเพื่อประเมินคุณสมบัติต้านไวรัสของสารเหล่านี้ในโรคนี้

คีย์เวิร์ด: การอักเสบ;ปอด; ความเสียหายจากการเกิดออกซิเดชัน; ต้านไวรัส; โพลีฟีนอล

คลิกที่นี่เพื่อเรียนรู้ผลิตภัณฑ์เพิ่มเติม

1. บทนำ

ภายในสิ้นปี 2019 มีรายงานโรคปอดบวมที่ผิดปกติจากประเทศจีนซึ่งได้รับการวินิจฉัยเพิ่มเติมว่าเป็น coronavirus นวนิยาย (CoV) ที่ก่อให้เกิดโรคทางเดินหายใจเฉียบพลันรุนแรง (SARS) และเรียกว่า COVID-19[1,2] ต่อมาไวรัส (SARS-CoV-2) ได้แพร่กระจายไปยังประเทศอื่น ๆ และได้รับการประกาศเป็นโรคระบาดโดย WHO เมื่อวันที่ 11 มีนาคม 2020 [3] ดิไวรัสส่วนใหญ่ติดต่อโดยละอองทางเดินหายใจ และความรุนแรงมีตั้งแต่อาการเล็กน้อยจนถึงรุนแรงถึงตาย กรณีที่ไม่มีอาการในระยะฟักตัวถือเป็นแหล่งแพร่เชื้อที่สำคัญ [4] ในกรณีส่วนใหญ่ อาการเล็กน้อยจะใช้เวลา 1-2 สัปดาห์ในการแก้ไข ในขณะที่อาการรุนแรงอาจทำให้เสียชีวิตได้ [5]

SARS-CoV-2 ส่งผลกระทบต่อระบบทางเดินหายใจ ทำให้มีไข้และไอแห้ง [4]; อย่างไรก็ตาม ไวรัสสามารถทำให้อวัยวะล้มเหลวได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่งในหัวใจและไต รวมทั้งทำให้เกิดพายุไซโตไคน์ซึ่งเพิ่มอัตราการตายต่อไป วงจรชีวิตไวรัสของ SARS-CoV-2 รวมถึง

การยึดติด การแทรกซึม การสังเคราะห์ทางชีวภาพ การสุก และการปลดปล่อย หลังจากการยึดติด RNA ของไวรัสจะเข้าสู่นิวเคลียสของเซลล์เพื่อทำการจำลอง และ mRNA ของไวรัสเริ่มสร้างโปรตีนโครงสร้างของไวรัส ซึ่งรวมถึงเข็ม (S) เมมเบรน (M) ซองจดหมาย (E) และโปรตีนนิวคลีโอแคปซิด (N) [6] ตัวรับ 2(ACE2) ของเอ็นไซม์แปลง angiotensin ซึ่งแสดงออกอย่างมากในปอด ยังแสดงให้เห็นว่าทำหน้าที่เป็นตัวรับร่วมสำหรับ SARS-CoV [7]

SARS, MERS และ SARS-CoV-2 เป็น RNA CoV ทั้งหมด จีโนม SARS-CoV-2 เท่ากับ 88 เปอร์เซ็นต์เหมือนกับ CoVs ที่คล้ายกับกลุ่มอาการทางเดินหายใจเฉียบพลันรุนแรงที่ได้รับจากค้างคาว, 79 เปอร์เซ็นต์คล้ายกับ SARS-CoV และ 50 เปอร์เซ็นต์คล้ายกับ MERS-CoV [8,9] SARS-CoV-2 โปรตีน 90 เปอร์เซ็นต์ -100 เปอร์เซ็นต์คล้ายคลึงกันกับ SARS-CoV; แม้ว่า orf10 และ orf8 จะแตกต่างกันระหว่าง SARS-CoV-2 และ SARS-CoV.Orf8 เป็นโปรตีนเสริมสำหรับ CoV มันสร้างโปรตีนอัลฟาเฮลิกส์หกสายที่ช่วยเพิ่มความสามารถของไวรัสในการแพร่กระจาย SARS-CoV-2 orfla/b, สไปค์, ซองจดหมาย, เมมเบรน และนิวคลีโอโปรตีนยังมีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับไวรัส SARS-CoV [10] .

เนื่องจากไม่มียาต้านไวรัสที่จำเพาะต่อ SARS-CoV-2 ยาต้านไวรัสที่มีอยู่ในปัจจุบันจึงได้รับการพิจารณาสำหรับการรักษาโควิด-19 เรมเดซิเวียร์เป็นยาต้านไวรัสชนิดใหม่ที่เปิดตัวโดยเฉพาะสำหรับไวรัสอีโบลาในปี 2558 มีฤทธิ์ยับยั้ง RNA polymerase ของไวรัส และเพิ่งถูกใช้ในการทดลองบางกรณีสำหรับการรักษาโควิด-19 [11] ฟาวิพิราเวียร์มีฤทธิ์ยับยั้งโรคไข้หวัดใหญ่และไวรัสอีโบลาด้วยกลไกเดียวกัน และยังได้รับการประเมินใน SARS-CoV-2 [12-14] Lopinavir เป็นตัวยับยั้งโปรตีเอสของไวรัสและได้รับการพัฒนาขึ้นเป็นครั้งแรกสำหรับการรักษา HV การศึกษาในหลอดทดลองแสดงผลการยับยั้งของ lopinavir ในเซลล์ที่ติดเชื้อ CoV [15,16]; อย่างไรก็ตาม การทบทวนอย่างเป็นระบบล้มเหลวในการแสดงผลประโยชน์ใดๆ ต่อ SARS-CoV-2 [17]

พืชสมุนไพรเป็นแหล่งยาธรรมชาติที่น่าเชื่อถือ รวมทั้งยาต้านไวรัสตั้งแต่สมัยโบราณ การแพทย์แผนโบราณและการศึกษาทางชาติพันธุ์วิทยาของประเทศต่างๆ ทั่วโลกได้เปิดช่องทางใหม่ในการค้นพบยาอยู่เสมอ [18-22] Oseltamivir ซึ่งเป็นยาต้านไวรัสทั่วไป เป็นอนุพันธ์ของกรดชิกิมิก ซึ่งเป็นสารเมตาโบไลต์ทุติยภูมิของโป๊ยกั๊ก (Illicium verum Hook.f.) ในกรณีของ SARS-CoV-2 ในการศึกษาซิลิโคได้เปิดเผยคุณสมบัติต้านไวรัสที่เป็นไปได้ของส่วนผสมสมุนไพร [23-25] ฟลาโวนอยด์เป็นไฟโตเคมิคอลกลุ่มใหญ่ซึ่งมักพบในอาหารและผักหลายชนิดในอาหารของมนุษย์ โดยมีกิจกรรมทางเภสัชวิทยาที่มีคุณค่ามากมาย รวมถึงคุณสมบัติต้านไวรัส แสดงให้เห็นว่าสารประกอบเหล่านี้สามารถยับยั้งการเกิดโรคของไวรัสได้โดยการกำหนดเป้าหมายระยะสำคัญของวงจรชีวิตของไวรัส [26] Quercetin, catechins, kaempferol และ baicalein เป็นตัวอย่างของ flavonoids ที่สำคัญที่สุดที่แสดงคุณสมบัติต้านไวรัส [18,27,28] การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อหารือเกี่ยวกับหลักฐานต้านไวรัสที่มีอยู่ของฟลาโวนอยด์ในการรักษาโรคซาร์ส-CoV-2 ที่เป็นไปได้ โดยพิจารณาถึงผลกระทบที่รายงานไว้ก่อนหน้านี้ของสารประกอบเหล่านี้ต่อไวรัสอาร์เอ็นเอ 5 ตัวที่มีอาการทางคลินิกและ/หรือการรักษาทางเภสัชวิทยาที่คล้ายคลึงกัน ซึ่งรวมถึงไข้หวัดใหญ่ ไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ (HIV), โรคระบบทางเดินหายใจเฉียบพลันรุนแรง (SARS), โรคระบบทางเดินหายใจในตะวันออกกลาง (MERS) และอีโบลา

2. ผลลัพธ์

ฤทธิ์ต้านไวรัสของฟลาโวนอยด์สามารถแบ่งได้เป็นฤทธิ์ต้านไวรัสโดยตรง โดยที่ไวรัสได้รับผลกระทบโดยตรงจากฟลาโวนอยด์และผลกระทบทางอ้อม โดยที่ฟลาโวนอยด์จะปรับปรุงกลไกการป้องกันของโฮสต์ต่อการติดเชื้อไวรัส ในที่นี้ มีการกล่าวถึงกลไกต้านไวรัสพื้นฐานของฟลาโวนอยด์โดยอ้างอิงถึงฟลาโวนอยด์ที่สำคัญที่สุดที่แสดงกลไกเหล่านี้

2.1.กลไกต้านไวรัสโดยตรงS

2.1.1. การยับยั้งโปรตีเอสของไวรัส

โปรตีเอสของไวรัสถูกใช้เพื่อแยกสารตั้งต้นของโพลีโปรตีนจากไวรัส ณ สถานที่บางแห่งเพื่อปลดปล่อยโปรตีนที่ใช้งานได้ โปรตีเอสของไวรัสจำเพาะยังแสดงให้เห็นเพื่อแยกโปรตีนของเซลล์เจ้าบ้าน ซึ่งรวมถึงปัจจัยการเริ่มต้นการแปล (eF4 และ elF3d) ในเอชไอวี เพื่อป้องกันการแปลโปรตีนของโฮสต์ [29,30] ไวรัสโคโรน่าสร้างโปรตีเอสจากไวรัสสามประเภท ได้แก่ 3-ซิสเทอีนคล้ายไคโมทริปซิน (3CLpro) โปรตีเอสคล้ายปาเปน (PLpro) และโปรตีเอสหลัก (M pro) [31].3CLpro มีความสำคัญต่อชีวิต SARS-CoV วงจร PLpro มีบทบาทในการจำลองแบบ SARS-CoV-2 และ Mopar รับผิดชอบการเจริญเติบโตของโปรตีนที่ทำหน้าที่ใน SARS-CoV-2 [32,33] เป็นผลให้โมเลกุลเหล่านี้เป็นเป้าหมายของยาที่เหมาะสมในการวิจัยต้านไวรัสและการค้นพบยา [34]

กระชายซึ่งเป็นฟลาโวนอยด์จำนวนมากในอาหารหลายชนิดลด CPE ในเซลล์ Vero E6 ที่ติดเชื้อจากเชื้อ SARS-CoV-2 ที่แยกได้จากทางคลินิก โดยมีการยับยั้งประมาณ 88 เปอร์เซ็นต์ที่ความเข้มข้น 125 ไมโครโมลาร์ การตรวจสอบซิลิโกร่วมกับการศึกษาพบว่าการยับยั้งเอนไซม์ SARS-CoV-2 3CLpro เป็นกลไกหลักของการออกฤทธิ์ [35] การเพิ่ม kaempferol ใน 3CLpro และ PLpro ของ SARS-CoV และ MERS-CoVexpressed ใน E.coli ทำให้เกิดฤทธิ์ต้านไวรัสผ่านการยับยั้งเอนไซม์เหล่านี้ [36] Park และเพื่อนร่วมงาน (2017) แสดงให้เห็นว่าการมีอยู่ของกลุ่มไฮดรอกซิลใน kaempferol ทำให้เกิดฤทธิ์ต้านไวรัสที่มีศักยภาพมากขึ้นผ่านการยับยั้ง 3CLpro และ PLpro [37] Epigallocatechin gallate (EGCG) เป็นฟลาโวนอยด์ที่พบในชา (Camellia sinensis L. ) ที่มีคุณสมบัติต้านเชื้อรา ต้านแบคทีเรีย และต้านไวรัส [38.39] การศึกษาระบุว่า EGCG ยับยั้งการทำงานของ reverse transcriptase (RT) กิจกรรมของ protease p24 การเข้าสู่ไวรัส และการผลิตไวรัสใน THP-1 และเซลล์ H9 ที่ติดเชื้อ HIV-1 และการปรับเปลี่ยนไลโปโซมของ EGCG ได้ขยายการยับยั้ง ผลกระทบ การศึกษาที่ปราศจากเซลล์ยังแสดงให้เห็นการลดลงของจลนพลศาสตร์ของโปรตีเอสหลังการรักษาด้วย EGCG กลุ่ม Galloyl ใน EGCG ได้รับการพิจารณาว่ามีหน้าที่ในการต้านเชื้อแบคทีเรียและไวรัส [40] Isoliquiritigenin เป็น chalcone สามารถใช้เป็นยารักษาโรคในการติดเชื้อแบคทีเรียและไวรัส [41] สารประกอบนี้แสดงผลการยับยั้งต่อ SARS-CoV และ MERS-CoV 3CLpro และ PLpro ที่แสดงใน E.coli การมีอยู่ของกลุ่มฟังก์ชันพรีนิลบนวงแหวน resorcinol ช่วยให้เกิดปฏิกิริยาที่ไม่ชอบน้ำกับโปรตีเอส [37] ธีฟลาวินเป็นโพลีฟีนอลที่พบในชาหลายชนิด [42] การทดลองกับโปรตีเอส recombinant SARS-CoV แสดงให้เห็นการลดลงอย่างมีนัยสำคัญในการทำงานของ 3CLpro หลังการรักษาด้วย theaflavin-3,3'-digallate ด้วยค่า IC50 ที่ 9.5 uM กลุ่ม gallate ที่ติดอยู่กับตำแหน่ง 3' ใน theaflavins บางตัวอาจจำเป็นสำหรับการโต้ตอบกับไซต์เชิงรุก 3CL [43] Prenylisoflavonoids ที่สกัดจาก Erythrina senegalensis DC ถูกใช้เพื่อประเมินฤทธิ์ต้านโปรตีเอสต่อโปรตีเอส HIV-1 รีคอมบิแนนท์ ผลการศึกษาพบว่า สารประกอบสามารถยับยั้ง HIV{42}} recombinant protease ในหลอดทดลอง โดยมีค่า 0.5 ถึง 30 μMIC50 กลุ่มไฮดรอกซีและพรีนิลอาจมีหน้าที่ในการยับยั้งโปรตีเอสเอชไอวี [44] Quercetin และ quercetin- -galactoside downregulated PLpro, 3CLpro, deubiquitination และ DelSGylation activity ใน SARS-CoV, MERS-CoV และ HIV-1 ตำแหน่งของหมู่ไฮดรอกซิลอาจมีประสิทธิผลในฤทธิ์ต้านโปรตีเอส เควอซิทินที่มีหมู่ไฮดรอกซิลห้าหมู่ที่ตำแหน่ง 3,5,7,3' และ 4' แสดงผลการยับยั้งที่รุนแรงต่อโปรตีเอสของไวรัส ในขณะที่การปรากฏตัวของกลุ่มไกลโคซิลที่ตำแหน่ง 3,7A'ลดผลการยับยั้ง [37,45]

2.1.2. การยับยั้งไวรัส RNA Polymerase และ Viral mRNA

RNA-dependent RNA polymerase (RdRp) ขึ้นอยู่กับ RNA เป็นเอนไซม์สำคัญที่เร่งการจำลอง RNA จากลำดับ RNA [46] เอ็นไซม์นี้ถูกเข้ารหัสในไวรัสอาร์เอ็นเอทั้งหมด รวมทั้งยูคาริโอตบางชนิด [47] ไวรัสเป็นหน้าที่ของปรสิตภายในเซลล์ กล่าวคือ พวกมันไม่สามารถอยู่รอดจากเซลล์ได้อย่างอิสระ พวกเขาต้องใช้อุปกรณ์การแปลระดับเซลล์เพื่อแปล mRNA สำหรับการผลิตโปรตีน ซึ่งจำเป็นสำหรับการจำลองแบบ ดังนั้น การรบกวนใดๆ กับการแปล mRNA จะยับยั้งการจำลองแบบของไวรัส การแพร่กระจาย และวิวัฒนาการ [48]

การสืบสวนล่าสุดโดย Zandi et al. เปิดเผยฤทธิ์ต้านไวรัสในหลอดทดลองของ baicalin และ baicalein ต่อการติดเชื้อ SARS-CoV-2 ในสายเซลล์ Vero CCL-81 ผ่านการยับยั้ง RdRp โดยให้ baicalein มีประสิทธิภาพสูงขึ้น นอกจากนี้ ในการประเมินซิลิโกยังแสดงให้เห็นว่าสารประกอบทั้งสองนี้มีความสัมพันธ์ใกล้ชิดกับ RdRp มากกว่าเมื่อเปรียบเทียบกับการนำส่งซ้ำ: ตำแหน่งที่แนบของไบคาลินและไบคาลีนก็ดูเหมือนจะแตกต่างจากเรมเดซิเวียร์เช่นกัน ดังนั้น ฟลาโวนอยด์เหล่านี้จึงสามารถใช้เป็นยาเสริมร่วมกับเรมเดซิเวียร์ [49] ผลของเควอซิทิน-7-O-glucoside(Q7G)ได้รับการประเมินในการศึกษาในหลอดทดลองในเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A และ B เมื่อเปรียบเทียบกับยาต้านไวรัสมาตรฐานอย่างโอเซลทามิเวียร์ Oseltamivir ถูกใช้เป็นยาควบคุมและแสดงฤทธิ์ต้านไวรัสในระดับปานกลางโดยมีค่า IC50 เท่ากับ 25.4 ถึง 42.2 ug/mL; ในขณะที่ Q7G ยับยั้งไวรัสไข้หวัดใหญ่ A และ B ด้วยค่า IC50 ที่ 3.10ug/mL ถึง 8.19 ug/mL นอกจากนี้ Oseltamivir ยังแสดงกิจกรรมที่อ่อนแอต่อโรคไข้หวัดใหญ่ B มากกว่าไข้หวัดใหญ่ A; ในขณะที่ Q7G แสดงให้เห็นถึงกิจกรรมที่แข็งแกร่งในการต่อต้านไวรัสไข้หวัดใหญ่ทั้งหมด นอกจากนี้ การตรวจ PCR เชิงปริมาณรายงานว่าการสังเคราะห์ RNA ของไวรัสลดลงมากขึ้นหลังการรักษาด้วย Q7G เมื่อเทียบกับยาโอเซลทามิเวียร์ ซึ่งบ่งชี้ถึงผลการยับยั้งของ Q7G ต่อ RNA polymerase ของไวรัส การวิเคราะห์การเทียบท่าระดับโมเลกุลเปิดเผยว่าปฏิสัมพันธ์นี้เกิดจากการยึดติดของ Q7G กับหน่วยย่อย PB2 ของ RNA polymerase ของไวรัส [50]

Oroxylin A(OA) เป็นฟลาโวนอยด์ที่พบใน Oroxylum Indicum(L.)Kurz มีการแสดงให้เห็นว่า OA สามารถยับยั้งเชื้อไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ A หลายสายพันธุ์ในเซลล์ MDCK ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา การรักษาหนูที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ H1N1 ที่มี OA ในช่องปากยังช่วยลดการเสียชีวิตจากไวรัส การลดน้ำหนักตัว และอาการบาดเจ็บที่ปอด ด้วยอัตราการรอดชีวิต 60.0 เปอร์เซ็นต์ที่ขนาดยา 100 มก./กก. ต่อวัน มีรายงานว่าผลของการต้านไวรัสของ OA เกิดจากการปรับลด H1N1 matrix1(M1)mRNA การถอดรหัสและการสังเคราะห์โปรตีน (ใน et al. 2018) โปรตีน M1 เป็นโปรตีนภายในซองของไวรัสที่จับกับ RNA ของไวรัส และสามารถไกล่เกลี่ยการห่อหุ้มของแกน RNA nucleoprotein เข้าไปในเยื่อหุ้มเยื่อหุ้มเซลล์ [51] แม้ว่า OA สามารถยับยั้งการสังเคราะห์โปรตีน แต่ก็ไม่สามารถปิดกั้นการเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้านหรือทางเข้านิวคลีโอโปรตีน (NP) ไปยังนิวเคลียสของเซลล์เจ้าบ้านได้ [52] Baicalin และ biochanin A สามารถยับยั้งการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ H5N1 ในเซลล์ A549 ที่มีค่า IC50 เท่ากับ 18.79 และ 8.92 μM ตามลำดับ ผลกระทบนี้ถูกไกล่เกลี่ยโดยการยับยั้งการส่งออกไรโบนิวคลีโอโปรตีนจากไวรัสนิวเคลียร์ (RNP) [53] การศึกษาอื่น ๆ ยังแสดงให้เห็นว่าไบคาลินสามารถลดการแสดงออกของโปรตีนไข้หวัดใหญ่ M1 [54,55]

Host cdc2-like kinase 1(CLK1) มีบทบาทสำคัญในการต่อยีน M2 ของไวรัส H1N1 และเป็นเป้าหมายในการต่อต้านไข้หวัดใหญ่ที่สำคัญ M2 เป็นช่องโปรตอนในซองไวรัสของไวรัสไข้หวัดใหญ่ A [56,57] แสดงให้เห็นว่า gallocatechin-7-gallate ที่แยกได้จาก Pithecellobium clypearia เป็นตัวยับยั้งของ host cdc2-เหมือน kinase 1 (CLK1) ซึ่งเป็นเป้าหมายในการต่อต้านไข้หวัดใหญ่เนื่องจากมีบทบาทในการประกบทางเลือกของ M2 mRNA ของไวรัส การตรวจสอบผลของ gallocatechin-7-gallate ที่ปริมาณ 30 มก./กก. ต่อวันในหนูทดลอง ICR ที่ติดเชื้อไวรัส H1N1 พบว่าอัตราการรอดชีวิตสูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญถึง 8 วัน นอกจากนี้ยังยับยั้งการบาดเจ็บที่ปอดเฉียบพลันที่เกิดจากไวรัสและการลดน้ำหนัก นอกจากนี้ การประเมินบนเซลล์ A549 ที่ติดเชื้อ H1N1- แสดงให้เห็นการปรับลดที่มีนัยสำคัญของ NP และ M2 mRNA ของไวรัส นอกจากนี้ ฟอสโฟรีเลชั่นของปัจจัยต่อ SF2/ASF และ SC35 ซึ่งเป็นปัจจัยหลักสำหรับการประกบยีนทางเลือกของยีน M2 ของไวรัส ลดลงอย่างมีนัยสำคัญหลังการรักษาด้วยกัลโลคาเทชิน-7-แกลเลต [58] Cirsimaritin(CST) ซึ่งเป็นฟลาโวนอยด์จาก Artemisia scoparia Waldst และ Kitam ได้รับการประเมินเกี่ยวกับผลต้านไวรัสในหลอดทดลองในเซลล์ MDCK และ THP-1 ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ 3 สายพันธุ์ ซึ่งแสดงค่า IC50 ตั้งแต่ 5.8 ถึง 11.1 ug/mL เทียบกับ 3.4 ถึง 8.9 ug/mL สำหรับ ribavirin ข้อมูลแสดงให้เห็นว่า CST สามารถลด M2 ของไข้หวัดใหญ่และการแสดงออกของโปรตีนได้อย่างมีประสิทธิภาพในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา ดังนั้นศักยภาพของ CST ที่ 20 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรจะสูงกว่า 10 ไมโครโมลาร์ของไรโบวิรินต้านไวรัสมาตรฐาน [59] ลูทีโอลินเป็นฟลาโวนอยด์อีกชนิดหนึ่งที่มีผลยับยั้งการแสดงออกของ M2mRNA ในเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ต่างๆ ลูเทโอลิน 15 ไมโครโมลาร์มีประสิทธิภาพมากกว่าโอเซลทามิเวียร์ 10 ไมโครโมลาร์ในเซลล์ที่ติดเชื้อทั้ง H1N1 และ H2N3 ลูทีโอลินยังลดการแสดงออกของโปรตีนเคลือบไวรัสไข้หวัดใหญ่ I (COPI) ซึ่งเป็นสื่อกลางในการเข้าสู่ไวรัสและทางเดินภายในเซลล์ในเซลล์ที่ติดเชื้อ [60] Santin เป็นฟลาโวนอยด์ที่สกัดจาก Artemisia rupestris L. ซึ่งได้รับการแนะนำว่ามีฤทธิ์ต้านไวรัสไข้หวัดใหญ่ผ่านการยับยั้งการแสดงออกของ M2 mRNA ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา [61]

มีการบ่งชี้ว่าเควอซิทินอาจเป็นยารักษาโรคที่น่าจะเป็นไปได้สำหรับการติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ในระยะแรกของการติดเชื้อ เพื่อให้สามารถนำไปใช้ในการป้องกันโรคไข้หวัดใหญ่ได้ การตรวจสอบผลของเควอซิทินต่อเซลล์ MDCK และ A549 ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ A พบว่าสามารถยับยั้ง NP mRNA ของไวรัสในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา โดยมีฤทธิ์สูงสุดที่ความเข้มข้น 50 ไมโครโมลาร์ 【 62】

การวิจัยพบว่า tricin(4'5,7-trihydroxy-3',5'-dimethoxyflavone) แสดงฤทธิ์ต้านไวรัสกับสายพันธุ์ A และ B ของไข้หวัดใหญ่ การทดสอบ RT-PCR ระบุว่า tricin สามารถยับยั้งการสังเคราะห์โปรตีน M mRNA ในเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ โดยไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญต่อการสังเคราะห์นิวรามินิเดสและฮีแมกกลูตินิน ความเข้มข้นที่มีประสิทธิผล 50 เปอร์เซ็นต์ของทริซิน ซึ่งสามารถยับยั้งการสังเคราะห์ mRNA ของไวรัส เท่ากับ 3.4-10 uM

สำหรับไวรัสไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ A และ 4.9 μM สำหรับไวรัสไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์บี ในหนูทดลองที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ ให้ยาทริซินขนาด 20 ไมโครกรัม/กิโลกรัม ทำให้น้ำหนักตัวลดลงและมีเวลารอดชีวิตดีขึ้น [63]

2.1.3. รายการไวรัส การจำลองแบบ และการติดเชื้อ

ไวรัสอาร์เอ็นเอเข้ารหัสโปรตีนโดยใช้กลไกเซลลูลาร์ของโฮสต์สำหรับวงจรชีวิต การทำความเข้าใจความจำเป็นของเซลล์เจ้าบ้านเหล่านี้ไม่เพียงแต่แจ้งให้เราทราบถึงวิถีทางโมเลกุลที่ไวรัสใช้ แต่ยังนำเสนอเป้าหมายเพิ่มเติมสำหรับการพัฒนายาด้วย [64]

การศึกษาในหลอดทดลองประเมินผลของเควอซิทินและไอซอร์ฮัมนีตินต่อ SARS-CoV-2ในการพยายามต่อเซลล์ ACE2h ACE2 ที่แสดงออกบนเซลล์ปอดเป็นตัวรับร่วมของโปรตีนขัดขวางจากไวรัส ดังนั้นจึงเป็นเป้าหมายหลักของยาต้านไวรัสที่ต่อต้าน SARS-CoV-2 สังเกตได้ว่าฟลาโวนอยด์ทั้งสองนี้มีความสัมพันธ์ใกล้ชิดกับ ACE2 สูง และต่อมาลดการเข้าสู่ไวรัสโดยการยับยั้งการเกาะติดของโปรตีนขัดขวางกับตัวรับนี้ [65] การศึกษาอื่นประเมินผลของไบคาลีนต่อการติดเชื้อ SARS-CoV-2 ในเซลล์ Vero E6 และหนูแปลงพันธุ์ hACE2 การจำลองแบบของไวรัสในหลอดทดลองและในร่างกายลดลงอย่างมีนัยสำคัญ เช่นเดียวกับการลดน้ำหนักตัวและการบาดเจ็บที่ปอดในสัตว์ [66] ไดไฮดรอกซี-6'-เมทอกซี-3',5'-ไดเมทิลชาลโคนและไมริซิติน-3'5'-ไดเมทิล อีเทอร์ 3-O- -D-กาแลคโตไพราโนไซด์เป็นฟลาโวนอยด์ มาจาก Cleistocalyx operculate(Roxb.) Merry. และ แอล.เอ็ม. เพอร์รี่ การทดสอบการลดผลกระทบของ Cytopathic (CPE) แสดงให้เห็นว่าฟลาโวนอยด์เหล่านี้ยับยั้งการจำลองแบบไวรัสของไวรัสไข้หวัดใหญ่ H1N1 ในเซลล์ MDCK การศึกษาความสัมพันธ์ระหว่างโครงสร้างกับกิจกรรม (SAR) ระบุว่าหมู่ OH ที่ C-7 และ C-4 พันธะคู่ระหว่าง C-2 และ C-3 และโดยเฉพาะอย่างยิ่ง หมู่คาร์บอนิล ที่ตำแหน่ง C-4 เป็นกลุ่มการทำงานที่สำคัญที่ช่วยปรับปรุงคุณสมบัติต้านไวรัสของฟลาโวนอยด์อย่างมีนัยสำคัญ [67].3-ดีออกซีซัปแพนชาลโคน (3DSC) ที่แยกได้จาก Caesalpinia sappan L. สามารถยับยั้งการจำลองไวรัสไข้หวัดใหญ่ในระดับความเข้มข้นสูงได้ผ่านทาง การยับยั้งการแสดงออกของไวรัส NP ในเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อไวรัส H1N1 ที่ความเข้มข้นเท่ากัน (30 ไมโครโมลาร์) ทั้ง ribavirin และ 3DSC แสดงการยับยั้งการแสดงออกของ NP อย่างมีนัยสำคัญ แม้ว่า ribavirin จะมีผลรุนแรงกว่า [68] การศึกษาได้แสดงให้เห็นว่า biochanin A และ baicalein ยับยั้งการกระตุ้น caspase-3 ซึ่งเป็นเอนไซม์ที่เกี่ยวข้องกับการจำลองแบบของไวรัส [53,69] สารประกอบเหล่านี้ยังสามารถยับยั้งการส่งออกนิวเคลียร์ของสารเชิงซ้อน RNP ของไวรัส ซึ่งมีความสำคัญต่อการจำลองแบบของไวรัส [53] Biochanin A แสดงผลในการยับยั้ง p38 และ NF-kB ที่กระตุ้นด้วยไมโตเจน ซึ่งแสดงให้เห็นว่าเกี่ยวข้องกับการจำลองแบบของไวรัส NF kB และ p38 ถูกกระตุ้นเนื่องจากความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน และเป็นที่ทราบกันดีว่ามีผลต่อการจำลองแบบของไวรัสไข้หวัดใหญ่ A และพยาธิวิทยา [53,70] การตรวจสอบการเพาะเลี้ยงเซลล์ของเซลล์ MDCK และเซลล์ A549 ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่พบว่าไบคาลีนสามารถยับยั้งการจำลองแบบของไวรัสที่ความเข้มข้น 20-80 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร ที่น่าสนใจคือ ไบคาลินแสดงฤทธิ์ต้านไวรัสที่คล้ายคลึงกันกับไรโบวิรินและโอเซลทามิเวียร์ที่ความเข้มข้น 40 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรและ 60 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรตามลำดับ ไบคาลินยังยับยั้งการจำลองแบบของไวรัสในปอดของหนูในร่างกาย[71] CST ถูกแสดงเพื่อลดระดับโปรตีน NF-kB และฟอสโฟรีเลชัน NF-KB ในนิวเคลียส [59] เป็นที่ทราบกันดีอยู่แล้วว่า NF-KB มีบทบาทสำคัญในการอักเสบ, ความเครียดออกซิเดชัน, และการปราบปรามภูมิคุ้มกันของโฮสต์ [72]. การปรับลด NF-kB ยังยับยั้งการจำลองแบบในไวรัสประเภทต่างๆ รวมถึงไวรัสไข้หวัดใหญ่ [73]

ในเซลล์ Vero E6 ที่ติดเชื้อ SARS-CoV-2 naringenin สามารถยับยั้ง CPE ในลักษณะที่ขึ้นกับเวลาและความเข้มข้น ผลกระทบนี้เป็นสื่อกลางผ่านการยับยั้ง endo-lysosomal Two-Pore Channels (TPCs) ซึ่งเป็นเส้นทางที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อของ SARS-CoV-2, Ebola และ MERS ผ่านการอำนวยความสะดวกในการเข้าสู่ไวรัส [74] EGCG แสดงผลการยับยั้งที่ขึ้นกับขนาดยา (25,50 μM) ต่อการจำลองแบบ HIV ใน T-cells; อย่างไรก็ตาม การยับยั้งการจำลองแบบของไวรัสไม่ได้รับผลกระทบโดยตรงจากการยับยั้ง RT Fassina และคณะวิเคราะห์เอนไซม์ p24 ซึ่งเกี่ยวข้องกับการบรรจุอนุภาคไวรัส ผลการศึกษาพบว่าความเข้มข้นของ p24 และ RT ลดลงใน T lymphoblasts ที่ติดเชื้อ HIV จากผลการศึกษาต่อไปนี้ พบว่า EGCGยับยั้งการจำลองแบบไวรัสผ่านการปรับลดการติดเชื้อไวรัส ยังไม่มีความแน่นอนเกี่ยวกับผลที่แน่นอนของการติดเชื้อไวรัส ECGon [75] การส่งสัญญาณ gp120 มักเกี่ยวข้องกับการจำลองแบบ HIV-1 ที่เพิ่มขึ้นในเซลล์ที่ติดเชื้อก่อนหน้านี้[75] การศึกษาแสดงผลการยับยั้งของ genistein ต่อ gp120 และต่อมา การจำลองแบบของไวรัส HV-1 ไม่มีการเปลี่ยนแปลงในการจำลองแบบไวรัสหลังจากผู้ดูแลระบบ

การให้เจนิสไตน์ที่มีความเข้มข้น {{0}}.5 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร แต่ในช่วง 5-10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร เจนิสไตน์สามารถยับยั้งการจำลองแบบของไวรัสได้ [76] Herbacitrin เป็นฟลาโวนอยด์ที่ได้จาก Drosera peltata Thunb และเคยเป็นที่รู้จักในนามของยาต้านไวรัส แสดงให้เห็นว่าเฮอร์บาซิทรินยับยั้งทั้ง RT และ integrase ในการเพาะเลี้ยงเซลล์ MT-4 และ MT-2 ที่ติดเชื้อ HIV-1 ส่งผลให้เกิดการปิดกั้นการจำลองแบบของไวรัสในระยะต่างๆ ที่ความเข้มข้น 21.5 ไมโครกรัม/โมลาร์ เฮอร์บาซิทรินสามารถยับยั้งการทำงานของ R ในขณะที่สามารถยับยั้งอินทิเกรสที่ความเข้มข้นต่ำกว่า 2.15 ไมโครโมลาร์ [77] Scutellin บริสุทธิ์จาก Erigeron breviscapus เป็นฟลาโวนอยด์ที่มีฤทธิ์ต้านเอชไอวี-1 ฟลาโวนอยด์นี้ยับยั้งการทำงานของ RT ของ HIV-1 และการหลอมรวมของเซลล์ในฐานะผู้เข้าร่วมหลักของการจำลองแบบของไวรัส [Z8] เฮสเพอริดินและลินารินเป็นฟลาโวนอยด์ที่มีรูติโนสที่วงแหวน A และมีการแทนที่เมทอกซี (-OCH3) ที่วงแหวน B Isoquercetin แสดงให้เห็นว่าสามารถยับยั้งการจำลองแบบของไวรัสไข้หวัดใหญ่ A และ B ในเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อ การรวมกันของ isoquercetin กับ amantadine ยังแสดงผลเสริมฤทธิ์กันในการจำลองแบบของไวรัสในเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A ในปริมาณต่ำเท่านั้น (0.5 uM สำหรับ isoquercetin และ 1 uM สำหรับ amantadine) ค่า titer ของไวรัสหลังการให้ isoquercetin และ amantadine มีค่าประมาณ 7.5; การเพิ่มความเข้มข้นของ isoquercetin และ amantadine ทำให้ผลเสริมฤทธิ์กันใน titers ไวรัสเป็น 5 [79] Q3R ที่ได้มาจาก Houttuynia cordata มีฤทธิ์ต้านไวรัสไข้หวัดใหญ่ ผลของ Q3R ต่อเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A ถูกนำมาเปรียบเทียบกับโอเซลทามิเวียร์ แผลในปอดและอาการบวมน้ำถูกยับยั้งโดย Q3R มากกว่ายาโอเซลทามิเวียร์ Q3R ยังมีประสิทธิภาพที่สูงกว่าเมื่อเทียบกับโอเซลทามิเวียร์ ผลการยับยั้งของ Q3R ต่อการจำลองแบบของไวรัสไข้หวัดใหญ่เป็นทางอ้อมและผ่านการปฏิสัมพันธ์กับอนุภาคไวรัส Oseltamivir แสดงให้เห็นฤทธิ์ต้านไวรัสในระดับปานกลาง ประมาณร้อยละ 58 เทียบกับไวรัสไข้หวัดใหญ่ A และฤทธิ์ต้านไวรัสที่อ่อนแอน้อยกว่าร้อยละ 49 ด้วยขนาดที่ต่ำกว่า 10 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร ในขณะที่ Q3R แสดงการยับยั้งไวรัส 86 เปอร์เซ็นต์ที่ 100 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรและการยับยั้ง 66 เปอร์เซ็นต์ในความเข้มข้น 10 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร [80] Quercetin 3- -OD-Glucoside(Q3G) ถูกแสดงเพื่อป้องกันการจำลองแบบของไวรัสอีโบลาในหลอดทดลอง การให้ Q3G ป้องกัน 30 นาทีก่อนการติดเชื้อพบว่ามีการป้องกันไวรัสอีโบลาอย่างมีนัยสำคัญ Q3G สามารถยับยั้งการเข้าสู่ไวรัสได้ในระยะแรก ดังนั้น O3G อาจเป็นฟลาโวนอยด์ที่มีประสิทธิภาพในการป้องกันโรคอีโบลา [81]

2.2.ผลต้านไวรัสทางอ้อม

2.2.1. ผลกระทบต่ออินเตอร์เฟอรอน

Interferons (IFNs) ประกอบด้วยกลุ่มของโปรตีนที่ผลิตโดยเซลล์ภูมิคุ้มกันหลายชนิดเพื่อตอบสนองต่อเชื้อโรคต่างๆ เช่น ไวรัส ปรสิต แบคทีเรีย และเซลล์เนื้องอก IFN มีสามประเภทหลัก ได้แก่ type I หรือ interferons ที่มีความเสถียรของกรด (IFN- subtypes, IFN- , IFN-K, IFN-e, IFN-w และ IFN-t), type II (IFN-y) และประเภท III IFN ที่เรียกว่า IFN-λ 【82-84】 พวกมันแสดงกิจกรรมทางชีวภาพที่หลากหลาย เช่น การกระตุ้นการตอบสนองของภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติ เพิ่มการแสดงออกของโมเลกุลเชิงซ้อนของ histocompatibility (MHC) ที่สำคัญ ยับยั้งการสร้างเส้นเลือดใหม่ บทบาทที่สำคัญที่สุดของพวกเขาคือการแทรกแซงการติดเชื้อไวรัส [84,85]

ในระยะแรกของการติดเชื้อไวรัส IFNs กระตุ้นโดยกำเนิดระบบภูมิคุ้มกัน. การศึกษาล่าสุดรายงานว่าการเหนี่ยวนำและการส่งสัญญาณ IFN ประเภท I และ IFN ในผู้ป่วย COVID-19 [86] ลดลง IFN ประเภทนี้แสดงให้เห็นผลของการต้านไวรัสโดยลดการอพยพของนิวโทรฟิลไปยังบริเวณที่เกิดการอักเสบ เพิ่มการนำเสนอแอนติเจน ยับยั้งโปรอักเสบที่อาศัยนิวเคลียสมาโครฟาจเป็นสื่อกลาง และกระตุ้นภูมิคุ้มกันที่ได้มาเพื่อความก้าวหน้าของการตอบสนองของบีและทีเซลล์ที่จำเพาะต่อแอนติเจน [ 86-90]. ดังนั้น การใช้ IFN ในระยะเริ่มต้นของโรคสามารถลดอาการของ COVID-19 ได้โดยการลดการจำลองแบบของไวรัส นักวิจัยยังรายงานด้วยว่าระดับ IFN อาจเพิ่มขึ้นในผู้ป่วย COVID-19 ที่เป็นโรค ARDS การเพิ่มขึ้นอย่างรวดเร็วของระดับ IFN สามารถเชื้อเชิญไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบเข้าไปในเนื้อเยื่อของถุงลมและส่งผลให้เกิดการอักเสบในปอดและการบาดเจ็บที่ปอด[90,91] ดังนั้น ดูเหมือนว่าการปรับเพิ่มขึ้นหรือการปรับที่ผิดปกติของ IFN และการตอบสนองของไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบอื่นๆ หรือทั้งสองอย่างอาจมีบทบาทสำคัญในการลุกลามและลักษณะทางพยาธิวิทยาของ SARS-CoV-2

ให้อัล ศึกษาฤทธิ์ต้านไข้หวัดใหญ่ของ baicalin ซึ่งเป็น glycosyloxy flavone ที่เป็น 7-O-glucuronide ของ baicalein ในแบบจำลองในหลอดทดลองและในร่างกายของการติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A ปัจจัยที่เกี่ยวข้องกับตัวรับ TNF 6(TRAF6) เป็นตัวกลางที่มีประสิทธิผลในเส้นทางการส่งสัญญาณการผลิต IFN การแสดงออกที่มากเกินไปของ TRAF6 นำไปสู่การผลิตที่เพิ่มขึ้นของ IFN ประเภท I [54] MicroRNAs (miRNAs) เป็นโมเลกุลขนาดเล็กที่ควบคุมการควบคุมยีนหลังการถอดเสียง [92] miR-146a แสดงให้เห็นว่ามีบทบาทในการควบคุมการอักเสบ [93] miR-146a สามารถปรับปรุงการจำลองแบบของ H1N1 และ H3N2 ผ่านการปรับลด TRAF6 ไบคาลิน (20 ไมโครกรัม/มิลลิลิตร) บ่งชี้การลดลงอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของ miR-146a, NP ของไวรัส, ระดับโปรตีน Ml, ระดับของไวรัส และยังเพิ่มอัตราการรอดชีวิตของหนู [54] ในการศึกษาอื่น Nayak และเพื่อนร่วมงานได้แสดงฤทธิ์ต้านไวรัสไข้หวัดใหญ่ (H1N1-pdm09) ของไบคาลินผ่านการควบคุมโปรตีนของไวรัส NS1 ส่งผลให้มีการควบคุมปัจจัยควบคุม interferon 3 (IRF-3) เพิ่มขึ้น IFN - และ IFN- การควบคุมการเพิ่มขึ้นของ IFN นี้ช่วยลดการจำลองแบบของไวรัสที่สามารถลดทรานสคริปต์ของไวรัสและการแสดงออกของไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ ซึ่งรวมถึง IL-8 และ TNF- x [55]

Ding และคณะ ได้ออกแบบการศึกษาเพื่อตรวจสอบผลของเฮสเพอริดิน ซึ่งเป็นฟลาโวนโนนไกลโคไซด์ ในการบาดเจ็บที่ปอดที่เกิดจากไวรัสไข้หวัดใหญ่ชนิดเอ (H1N1) ในหนูเพศผู้ ผลการศึกษาพบว่าเฮสเพอริดินลดอาการบาดเจ็บที่ปอดโดยการลดการผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ ซึ่งรวมถึง IFN- , TNF- x และ IL-6 โดยการยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK เฮสเพอริดินยังลด IFN- ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กในปอดที่ติดเชื้อ H1N1 [94] ในการศึกษาอื่นโดย Kim et al. isoquercetin ช่วยลดอาการบาดเจ็บของปอดที่เกิดจากไวรัส H1N1 ในหนูได้อย่างมีประสิทธิภาพ โดยการลด IFN-,iNOS, RANTES, titers ไวรัส, หลอดลมอักเสบจากไวรัส และ bronchiolitis [79]

Oroxylin A (OA) จาก Oroxylum Indicum(L.)Kurz ป้องกันการบาดเจ็บที่ปอดที่เกิดจากไวรัสไข้หวัดใหญ่ A H1NI ในหนูทดลองด้วยการควบคุม IFN- และ IFN- 【52】 Wogonin ซึ่งเป็นฟลาโวนอยด์อีกชนิดหนึ่งที่แยกได้จาก Scutellaria baicalensis Georgi แสดงฤทธิ์ต้านไข้หวัดใหญ่ที่มีนัยสำคัญโดยกฎระเบียบของ AMPKpathways Wogonin ยังเพิ่มการควบคุมของโมเลกุลดาวน์สตรีม IFN- , IFN-λl และ IFN ซึ่งรวมถึงยีนต้านทาน myxovirus A (MxA) และ 2-5' oligoadenylate synthetase (OAS) ในเซลล์ที่ติดเชื้อ MDCK และ A549 [95]

2.2.2. ผลต่อ Pro-Inflammatory Cytokines (TNF, IL และ MCP)

CoVs มีกรอบการอ่านแบบเปิดซึ่งเข้ารหัสโปรตีนเสริมบางตัว โปรตีนที่เป็นส่วนประกอบเหล่านี้ได้รับการแสดงเพื่อมอดูเลตวิถีการอักเสบ เช่น การส่งสัญญาณ IFN และไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ [96] มีการชี้แจงอย่างชัดเจนว่าการพยากรณ์โรคของ COVID-19 อาจทำให้แย่ลงได้จากการหลั่งของไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ ซึ่งรวมถึงอินเตอร์ลิวกินส์ IFNy และ TNF- [97] Blanco-Mello et al. ระบุว่าการตอบสนองของภูมิคุ้มกันที่ไม่เหมาะสมอาจช่วยการจำลองแบบของไวรัสและภาวะแทรกซ้อนอันเนื่องมาจาก COVID ชนิดร้ายแรง-19 [98] Ruan และคณะยังแสดงให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นของไซโตไคน์ที่มีการอักเสบ เช่น IL-6 มีความเกี่ยวข้องกับ ARDS การหายใจล้มเหลว และผลลัพธ์ทางคลินิกที่ไม่พึงประสงค์ [99] ความล้มเหลวของระบบทางเดินหายใจที่เกิดจากความเสียหายของปอดเป็นผลมาจากการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบมากเกินไปหลังจากการแทรกซึมของเซลล์ภูมิคุ้มกันเข้าไปในปอด [100] พายุไซโตไคน์เป็นการตอบสนองต่อการอักเสบอย่างเป็นระบบที่เกี่ยวข้องกับปัจจัยหลายประการ เช่น การติดเชื้อและยาบางชนิด การศึกษาหลายชิ้นแสดงให้เห็นความเชื่อมโยงที่สำคัญระหว่างพายุไซโตไคน์ การอักเสบอย่างรุนแรง และความล้มเหลวของอวัยวะหลายส่วนในผู้ป่วยโควิด-19 [101-103] การจดจำไวรัส SARS-CoV-2 ด้วยระบบภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติและแบบปรับตัวได้อาจส่งผลให้เกิดการกระตุ้นและการผลิตไซโตไคน์ที่อักเสบ จากการศึกษาเมื่อเร็วๆ นี้ ระดับของไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบในพลาสมาจะเพิ่มขึ้นในผู้ป่วยโควิด-19 ไซโตไคน์ที่มีการอักเสบเหล่านี้ เช่น TNF- , IL6, IL 2, IL-1 , IL7, IL 10 และ IL-18 รวมทั้งโปรตีนเคมีบำบัดโมโนไซต์-1(MCP-1 ) มีบทบาทสำคัญในความก้าวหน้าทางพยาธิวิทยาและความรุนแรงของโควิด-19 จากการเพิ่มขึ้นของปริมาณไวรัส โรคปอดบวม ความเสียหายของปอด ความผิดปกติของระบบประสาท และการเสียชีวิต [97,101]

เหตุการณ์เหล่านี้อาจนำไปสู่ความล้มเหลวของหลายอวัยวะและการบาดเจ็บที่ปอดซึ่งเป็นภาวะแทรกซ้อนหลักของ SARS-CoV-2; ดังนั้น การปรับไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบจึงถือเป็นเป้าหมายการรักษาที่สมเหตุสมผลในโควิด-19 นอกจากนี้ยังมีการศึกษาผลการต้านการอักเสบที่สำคัญของฟลาโวนอยด์ในการศึกษาจำนวนมาก ดังนั้น พวกเขาอาจเป็นสารที่มีแนวโน้มดีในการต่อสู้กับโรคแทรกซ้อนที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบของ COVID-19 [97]

หยางและคณะ พิสูจน์ผลการป้องกันของ 3-deoxysappanchalcone (30 μM) ต่อการอักเสบที่เกิดจากไวรัสไข้หวัดใหญ่ H1N1 และการตายของเซลล์โดยการลดระดับ IL-1 และ IL-6 [68] Baicalein, flavone และ biochanin A ซึ่งเป็น O-methylated isoflavone ช่วยลดการแสดงออกของ cytokine ที่ทำให้เกิดการอักเสบในเซลล์ A549 และมาโครฟาจที่ได้มาจากโมโนไซต์ (MDM) ของมนุษย์ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่สายพันธุ์ H5N1 ซึ่งสามารถป้องกันการกระตุ้นทางเดินอักเสบและความเสียหายของเนื้อเยื่อ [53]. ในเซลล์ A549 และ MDCK ที่ติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ baicalin ซึ่งเป็นรูปแบบไกลโคซิเลตของ baicalein (baicalein-7-glucuronide) สามารถเพิ่มระดับ IFN ส่งผลให้การผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบลดลง ดังนั้น IL-8 และ TNF- มีค่าต่ำกว่าในเซลล์ที่บำบัดด้วยไบคาลินอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับเซลล์ควบคุมที่ไม่บำบัด [55]

การศึกษาในหลอดทดลองแสดงให้เห็นว่าความเข้มข้นของ CST 2.5, 5 และ 10 ug/mL ซึ่งเป็นไดเมทอกซีฟลาโวนมีผลอย่างมีนัยสำคัญต่อการลดทอนเส้นทางการส่งสัญญาณ NF-kB ในเซลล์ THP-1 ที่ติดเชื้อไข้หวัดใหญ่ A (H1N1) ไวรัส หลังจากการยับยั้ง NF-kB การผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบซึ่งรวมถึง I-1 , IL-8, IL-10 และ TNF- ตลอดจนโปรตีน COX ที่เกี่ยวข้องกับการอักเสบ{{ 15}} ถูกระงับโดย CST ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา[59] ในการศึกษาในหลอดทดลองโดย Yonekawa และคณะเกี่ยวกับคุณสมบัติต้านไวรัสของเฮสเพอริดินและลินาริน ฟลาโวนอยด์ไกลโคไซด์เหล่านี้ยับยั้ง R5-เอชไอวี-1-NL(AD8)การจำลองแบบของไวรัสใน CD4 บวกกับเซลล์ NKT โดยการเพิ่มการผลิต ของไซโตไคน์ต้านการอักเสบซึ่งรวมถึง IL-2, IL-5 และ IL-13 สังเกตได้ว่าผลกระตุ้นของฟลาโวนอยด์ทั้งสองนี้ขึ้นอยู่กับวิกฤตของน้ำตาล เนื่องจาก aglycones (เฮสเพอเรตินและอะคาเซติน) ไม่สามารถแสดงกิจกรรมดังกล่าวได้ นอกจากนี้ การแทนที่เมทอกซี (-OCH3) ที่วงแหวน B เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับกิจกรรมการกระตุ้นของเฮสเพอริดินและลินารินบน CD4 บวกกับเซลล์ NKT พวกมันยังสามารถกระตุ้นการหลั่ง RANTES, MIP-1 และ MIP-1 จาก V61 บวกกับการแสดงตัวรับ T เซลล์ ซึ่งต่อมาระงับการจำลองของไวรัสในเซลล์ CD4 บวก NKT[104] คัง et al. รายงานฤทธิ์ต้านไข้หวัดใหญ่ของฟลาโวนอยด์บริสุทธิ์จาก Pithecellobium clypearia Benth ต่อแบบจำลองในหลอดทดลองของการติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A ฟลาโวนอยด์บริสุทธิ์เหล่านี้ยับยั้งการผลิต IL-6 และ MCP-1 ในเซลล์ปอด A549 ของมนุษย์ที่ติดเชื้อ H1N1-[105] Mehrbod และคณะ ศึกษาฤทธิ์ต้านการอักเสบของ quercetin-3-O- -L-rhamnopyranoside(Q3R) ซึ่งเป็น glycosylated flavone ในเซลล์ MDCK ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ H1N1 Q3R ที่ความเข้มข้น 150 ug/mL ช่วยลดระดับของไวรัสและเพิ่มการผลิต IL-27 ซึ่งสามารถยกระดับการคัดหลั่ง IL-10 โดย CD4 บวก T เซลล์และเพิ่มการออกฤทธิ์ต้านไวรัสของพวกมัน ในทางกลับกัน O3R ยับยั้งการผลิต TNF เป็นหนึ่งในตัวกลางในการอักเสบที่สำคัญทำให้เกิดไข้และกระตุ้นเส้นทางการอักเสบของ NF-kB ทำให้สภาพของผู้ป่วยแย่ลงไปอีก [106] ไตรเมทอกซีฟลาโวน Santin ได้แสดงให้เห็นฤทธิ์ต้านไข้หวัดใหญ่ในเซลล์ THP-1 และ MDCK ที่ความเข้มข้น 60 ไมโครโมลาร์ ไวรัสไข้หวัดใหญ่ A (H3N2) กระตุ้นการผลิตไซโตไคน์ที่มีการอักเสบในเซลล์ THP-1 ส่งผลให้ปอดอักเสบและได้รับบาดเจ็บ [61] ไซโตไคน์ต้านการอักเสบอาจเปลี่ยนแปลงได้ในระหว่างการติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ IL-10 เป็นไซโตไคน์ต้านการอักเสบที่สามารถเหนี่ยวนำให้เกิดโดยไวรัสไข้หวัดใหญ่ IL-10 ยับยั้ง T เซลล์นักฆ่าตามธรรมชาติที่คงค่าโดยปรับลดการผลิต IL-12 โดยเซลล์เดนไดรต์ที่ได้มาจากโมโนไซต์ในปอด[107] ระดับของ IL-6, IL-8, IL-10, IL-1 และ TNF- ลดลงอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มที่บำบัดด้วย Santin โดยการปรับลด MAPK และ NF- เส้นทางการส่งสัญญาณ kB [61].

นอกเหนือจากข้างต้น แกลโลคาเทชิน-7-แกลเลต เจนิสไตน์ และธีฟลาวินยังเป็นฟลาโวนอยด์อื่นๆ ที่มีผลการปรับต่อการผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ [58,76,108]; ดังนั้น โมเลกุลเหล่านี้จึงดูเหมือนว่าจะมีฤทธิ์ต้านการอักเสบได้ ซึ่งเป็นประโยชน์ในการควบคุมการอักเสบที่เกี่ยวข้องกับการติดเชื้อไวรัส

2.2.3.ผลกระทบต่อเส้นทางการอักเสบของเซลล์ย่อย (NF-kB, PI3K/Akt และ MAPK/JNK)

เมื่อไวรัสเข้าสู่เซลล์เจ้าบ้าน เซลล์เจ้าบ้านจะรับรู้การทำซ้ำของมันผ่านตัวรับการรู้จำรูปแบบ (PRR)[109] โครงสร้าง RNA ของไวรัสเกี่ยวข้องกับ oligomerization ของ PRR และการกระตุ้นปัจจัยการถอดรหัสดาวน์สตรีม โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ปัจจัยควบคุมอินเตอร์เฟอรอน (IRF) และ NF-kB การเปิดใช้งาน NF-kB และ IRFs นำไปสู่การมีส่วนร่วมของการป้องกันไวรัสในระดับเซลล์โดยการเหนี่ยวนำของอินเตอร์เฟอรอนชนิดที่ 1 และ I และการหลั่งคีโมไคน์ [110]

Chiou และคณะได้ตรวจสอบผลกระทบของ8-prenylkaempferol(8-PK)ในเซลล์ A549 ที่ติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A (H1N1) ผลการวิจัยพบว่าการรบกวนเส้นทาง PI3K-Akt เป็นกลไกหลักของ 8-PK ที่นำไปสู่ผลในการป้องกันไวรัสไข้หวัดใหญ่ A8-PK ลด NF-kB และ IRF-3 การเคลื่อนย้ายนิวเคลียร์ ผ่านการลดทอนของ Akt phosphorylation และกิจกรรม PI3K สุดท้าย ด้วยการผลิตที่ลดลงของการกระตุ้นแบบควบคุม ทีเซลล์ปกติที่ถูกแสดงออกและคัดหลั่ง (RANTES) ผ่าน H1N1-เซลล์ A549 ที่ติดเชื้อ [111] จูและคณะ แสดงว่า autophagy ที่เกิดจากไวรัสไข้หวัดใหญ่ A (H3N2) ในเซลล์ที่ติดเชื้อ A549 และ Ana-1 ผ่านการยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ mTOR Baicalin สามารถเพิ่ม mTOR phosphorylation และช่วยชีวิตไวรัส H3N2 ในลักษณะที่ขึ้นกับขนาดยา [112] ในการศึกษาอื่น พบว่า baicalin มีฤทธิ์ต้านไวรัสไข้หวัดใหญ่ (H1N1-pdm09) โดยการปรับลดวิถีทาง PI3k/Akt ที่เกิดจากการปรับการแสดงออกของโปรตีน NS1 55] นอกจากนี้ biochanin A ซึ่งเป็น O-methylated isoflavone ระบุถึงผลในการป้องกันต่อเซลล์ที่ติดเชื้อไวรัส H5N1 A ผ่านการลด AKT, ERK1/2, JNK และ p38 phosphorylation นอกจากนี้ยังสามารถปรับเส้นทางการส่งสัญญาณของเซลล์ ลด IL-6, IL-8, CXCL10(IP-10), TNF- และปรับปรุงระดับ IkB [53]

CST แสดงถึงผลการยับยั้งต่อแบบจำลองในหลอดทดลองของการติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A ผ่านการยับยั้งเส้นทางสัญญาณ NF-kB/p65 ส่งผลให้มีการปรับลดของโปรโตไคน์ที่เกิดจากการอักเสบ CST ยังลดระดับ MAPK phospho-p38 และ phospho-JNK อีกด้วย [59] ในการศึกษาอื่นโดย Ding et al. การให้เฮสเพอริดินในปริมาณ 200 และ 500 มก./กก. ต่อวันเป็นเวลาห้าวันสามารถยับยั้งการอักเสบของปอดในหนูที่ได้รับบาดเจ็บที่ปอดจากไวรัสไข้หวัดใหญ่ A (H1N1) ผลกระทบนี้ถูกอาศัยโดยผ่านการลดทอนการผลิตไซโตไคน์ที่ก่อให้เกิดการอักเสบ ซึ่งรวมถึง IL-6 และ TNF- เฮสเพอริดินยังลดการแสดงออกของ IL-6 และการแสดงออกของ TNF ในเซลล์บุผนังหลอดเลือดขนาดเล็กในปอดที่ติดเชื้อ H1N1 ผ่านการยับยั้งเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK [94] นอกจากนี้ การศึกษายังเสนอแนะเส้นทางการส่งสัญญาณ ERK ให้เป็นโมดูเลเตอร์หลักของเส้นทางการส่งสัญญาณ MAPK Isorham-netin (50 μM) ซึ่งเป็น monomethoxy flavone ช่วยลด ERK phosphorylation ในเซลล์ MDCK หลังจากติดเชื้อไวรัสไข้หวัดใหญ่ A (H1N1) [113] จองและเพื่อนร่วมงานได้ตรวจสอบผลกระทบของพิษต่อเซลล์ของ pyroxylin A และ tecorigenin ในเซลล์ CHME5 และมาโครฟาจปฐมภูมิของมนุษย์ที่ติดเชื้อ HIV-1-D3 ฟลาโวนอยด์เหล่านี้ออกฤทธิ์โดยการลดฟอสโฟรีเลชั่นของ PI3K, Akt, mTOR, PDK1, GSK-3 และไม่ดีในเซลล์ที่ได้รับไลโปโพลีแซ็กคาไรด์/ไซโคลเฮกซิไมด์ Santin ยับยั้งการจำลองแบบไวรัสไข้หวัดใหญ่ A ใน MDCK และ THP-1 เซลล์ที่ติดเชื้อ [114]. ที่ความเข้มข้น 60 ไมโครโมลาร์ ฟอสโฟรีเลชั่นของ Santin ถูกทำให้อ่อนฤทธิ์ของ p38 MAPK, ERK, JNK/SAPK และ NF-kB[61]