การแสดงออกของ Neuronal Nitric Oxide Synthase และ Renin ใน Dysplastic Kidneys of Young Dogs

บทคัดย่อ:

Renin และ neuronal nitric oxide synthase ในไตควบคุมระบบป้อนกลับของ renin-angiotensin และ tubuloglomerular การศึกษานี้ศึกษาการแสดงออกของ renin และ neuronal nitric oxide synthase ในไตผิดปกติของสุนัขสามตัว Renin-immunoreactivity ซึ่งเกิดขึ้นในเซลล์ juxtaglomerular และ tubular ของไตผิดปกติก็ไม่ต่างจากไตปกติของสุนัขอายุน้อย เซลล์ Macula densa ในไตปกติพบ neuronal nitric oxide synthase -immunoreactivity แต่เซลล์ในไตที่ผิดปกตินั้นไม่มีสัญญาณที่ชัดเจน การสังเกตนี้อาจสัมพันธ์กับกลไกทางพยาธิวิทยาของภาวะไตวายในสุนัขอายุน้อย

คีย์เวิร์ด: โรคไตเรื้อรัง, ไตผิดปกติ, อิมมูโนฮิสโตเคมี, การสังเคราะห์ไนตริกออกไซด์ของเซลล์ประสาท, เรนิน

สำหรับข้อมูลเพิ่มเติมกรุณาติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com

cistanche ปรับปรุงการทำงานของไต

ภาวะไตวายบางครั้งเกิดขึ้นในสุนัขอายุน้อย ในกรณีเช่นนี้ การตรวจเนื้อเยื่อมักแสดงให้เห็นไตผิดปกติแผล อย่างไรก็ตาม กลไกทางพยาธิสรีรวิทยาที่เกิดขึ้นในไตผิดปกติของสุนัขยังคงไม่ชัดเจน เมื่อเร็วๆ นี้ เราได้สาธิตการลดทอนของไซโคลออกซีเจเนส (COX)-2 ในโรคไตเรื้อรังในสุนัขอายุน้อยด้วยไตผิดปกติโดยใช้การวิเคราะห์อิมมูโนฮิสโตเคมี [19]

COX-2 เป็นเอนไซม์กระตุ้นการอักเสบซึ่งจำเป็นสำหรับการพัฒนาไตตามปกติในระยะของทารกในครรภ์และทารกแรกเกิด [12, 15] หลังคลอด COX-2 แสดงออกในไตและมีความเข้มข้นในบริเวณจำกัดของ macula densa (MD) ของแขนขาที่หนาขึ้น [1, 4, 22] MD เป็นบริเวณเฉพาะที่อยู่ติดกับขั้วหลอดเลือดของโกลเมอรูลัส ควบคุมการหลั่งของเรนินและระบบป้อนกลับของทูบูโลโกลเมอร์รูลาร์ (TGF) COX-2 ที่แสดงออกในเซลล์ MD ควบคุมกลไกเหล่านี้ [6, 8] นอกจาก COX-2 แล้ว neuronal nitric oxide synthase (nNOS) ซึ่งยังแสดงออกในเซลล์ MD ยังเป็นที่รู้จักว่าเป็นตัวควบคุมหลักของระบบ TGF [3, 18] โมเลกุลทั้งสองนี้ ซึ่งแสดงร่วมกันใน MD เป็นที่ทราบกันว่ามีปฏิสัมพันธ์ซึ่งกันและกัน [2, 5, 9] ในการศึกษานี้ เราได้ตรวจสอบการแสดงออกของ renin และ nNOS ในไตผิดปกติโดยอิมมูโนฮิสโตเคมีเพื่อตรวจสอบว่าการลดทอนของ COX-2 inไตผิดปกติทำให้เกิดการหยุดชะงักของระบบ renin-angiotensin และระบบ TGF ในสุนัขอายุน้อย

บล็อกพาราฟินตรึงฟอร์มาลินของไตผิดปกติจากสุนัขอายุน้อย (n{{{{10}}}} ไตปกติจากสุนัขหนุ่ม (n=3) และไตปกติจากสุนัขโต (n=4) เช่นเดียวกับที่ใช้ในการศึกษาครั้งก่อน ซึ่งได้อธิบายประวัติทางคลินิกและการเตรียมเนื้อเยื่อไว้ก่อนหน้านี้แล้ว [19] การศึกษาได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการทดลองสัตว์ของมหาวิทยาลัยคาโกชิมะ ประเทศญี่ปุ่น (VM15020) ส่วนต่างๆ ถูกเตรียมด้วยความหนา 3-µm และการวิเคราะห์อิมมูโนฮิสโตเคมีสำหรับ renin และ nNOS ถูกดำเนินการตามโปรโตคอลต่อไปนี้: (1) การแยกพาราฟินไลเซชัน; (2) การดึงแอนติเจนโดยการให้ความร้อนด้วยไมโครเวฟในบัฟเฟอร์ซิเตรต 10 มิลลิโมลาร์ (pH 6.0) สำหรับ nNOS (3) ฟักไข่ 3 เปอร์เซ็นต์ H2O2 เป็นเวลา 30 นาที (4) การปิดกั้นด้วยอัลบูมินในซีรัมวัว 3 เปอร์เซ็นต์ (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) สำหรับเรนินหรือเคซีน 0.25 เปอร์เซ็นต์ (Sigma-Aldrich) สำหรับ nNOS เจือจางในน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟตเป็นเวลา 30 นาที; (5) ฟักไข่ค้างคืนที่ 4 องศาด้วยการเจือจาง 1:3,000 ของ Rabbit anti-recombinant renin polyclonal antiserum (จัดทำโดย Dr. Murakami, University of Tsukuba, Japan) หรือ 1:3,{{31 }} การเจือจางของ anti-nNOS polyclonal antiserum ของกระต่าย (Cayman Chemical, Ann Arbor, MI, USA) ในสารละลายบล็อก (6) การฟักตัวเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องด้วยแอนติบอดีสากล peroxidase-polymer-conjugated (anti-mouse immunoglobulin (Ig) G และ anti-rabbit IgG; simple stain MAX-PO [MULTI]; Nichirei Biosciences, Tokyo, Japan) ; และ (7) การตรวจหาภูมิคุ้มกันโดยใช้ระบบ 3,3ʹ-diaminobenzidine (3,3ʹ-diaminobenzidine buffer tablet; Merck, Darmstadt, Germany) สำหรับส่วนควบคุมเชิงลบ IgG ของกระต่ายปกติ (Lab Vision, Fremont, CA, USA) ถูกใช้แทนแอนติบอดีปฐมภูมิ

การวิเคราะห์ทางสัณฐานวิทยาแบบสุ่มสำหรับ renin immunoreactivity ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [20] โดยสังเขป ดัชนีเรนินถูกกำหนดให้เป็นอัตราส่วนของจำนวนรวมของหลอดเลือดแดงที่เป็นบวกของเรนินต่อจำนวนโกลเมอรูไลทั้งหมดและแสดงออกต่อ 100 โกลเมอรูไล วิเคราะห์ความแตกต่างระหว่างกลุ่มโดยใช้วิธีเปรียบเทียบหลายรายการของ Bonferroni กับ SPSS เวอร์ชัน 24 (สถิติ IBM SPSS, Armonk, NY, USA)

การวินิจฉัยทางจุลพยาธิวิทยาได้ดำเนินการตามเกณฑ์กล้องจุลทรรศน์ของ dysplasia ไตสุนัขโดย Picut และ Lewis [14] ส่วนเนื้อเยื่อวิทยาของทั้งสามกรณีแสดงความแตกต่างแบบอะซิงโครนัส ซึ่งบ่งชี้ว่ามีแผลที่มีโกลเมอรูไลของทารกในครรภ์/ที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ การเปลี่ยนแปลงทุติยภูมิของความรุนแรงแบบแปรผัน เช่น ความเสียหายของท่อ พังผืดคั่นระหว่างหน้า และ sclerotic glomeruli ถูกสังเกตพบภายในเนื้อเยื่อไตที่โตเต็มที่

ในไตผิดปกติ, สัญญาณการทำงานของเรนิน-ภูมิคุ้มกันถูกสังเกตพบในเซลล์ juxtaglomerular (JGCs) (รูปที่ 1A) และเซลล์ท่ออยู่ในไตส่วนปลาย (รูปที่ 1B) ในโกลเมอรูไลบางชนิด เซลล์สองสามเซลล์แสดงสัญญาณบวกของเรนินใกล้ขั้วหลอดเลือด (รูปที่ 1A) ในไตควบคุมอายุน้อย ยังตรวจพบสัญญาณเรนินทั้งใน JGCs และท่อส่วนปลาย ซึ่งรวมถึงเซลล์ MD ในไตที่ควบคุมโดยผู้ใหญ่ สัญญาณที่เป็นบวกของ renin ถูกจำกัดไว้ที่ JGCs ตามสถิติ จำนวนบริเวณที่มีเรนินเป็นบวกในไตที่ผิดปกตินั้นไม่มีความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญกับไตในเด็กและผู้ใหญ่

เป็นที่ทราบกันดีว่าการกระตุ้นการผลิตเรนินมีบทบาทในการส่งสัญญาณ COX-2 และการศึกษาก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมและความเข้มข้นของเรนินในพลาสมาลดลงหลังการให้สารยับยั้ง COX-2 หรือในการทำให้ล้มลงของ COX -2 ยีน [10, 11] ในฐานะที่เป็นไตผิดปกติตรวจสอบในการศึกษาปัจจุบันไม่พบการแสดงออกของ COX ของไต-2 [19] การลดลงในสัญญาณภูมิคุ้มกันของ renin ใน JGCs ถูกสงสัยว่าเป็นความผิดปกติทางสรีรวิทยาที่เป็นไปได้ในไต dysplastic อย่างไรก็ตาม การวิเคราะห์อิมมูโนฮิสโตเคมีในปัจจุบันไม่สามารถยืนยันสมมติฐานนี้ได้ และไม่มีการแนะนำให้มีการลดเรนินที่ชัดเจนใน JGCs แม้ว่าบทบาททางสรีรวิทยาของ renin แบบท่อยังไม่ได้รับการชี้แจงก่อนหน้านี้ การจัดการกับไตของโซเดียมอาจเป็นบทบาทที่เป็นไปได้ของ renin แบบท่อ เนื่องจากการเพิ่มประสิทธิภาพของการแสดงออกของ renin ถูกกระตุ้นใน nephron ที่ส่วนปลายหลังจากให้อาหารที่มีเกลือต่ำในหนู [16] และไตที่ผิดปกติของสุนัขที่ตรวจสอบในการศึกษาครั้งนี้อาจรักษาหน้าที่ของท่อนี้ไว้ได้

COX-2 ยังมีความสำคัญในการควบคุมระบบ TGF ซึ่งมีความสำคัญสำหรับการรักษาอัตราการกรองไต การศึกษาในหนูที่ใช้วิธีการเจาะด้วยจุลภาคแสดงให้เห็นถึงการปราบปรามการตอบสนองของ TGF หลังการรักษาด้วยสารยับยั้ง COX-2 [2] การตอบสนอง TGF ในไตผิดปกติอาจถูกลดทอนลงเนื่องจากไม่มีการแสดงออกของ COX-2 ของไต อย่างไรก็ตาม ก่อนหน้านี้ยังไม่มีรายงานการค้นพบที่เกี่ยวข้อง ในไต nNOS แสดงออกในเซลล์ MD และช่วยควบคุมระบบ TGF [18]

ในการวิเคราะห์ nNOS ปัจจุบัน ไม่พบสัญญาณที่ชัดเจนในบริเวณ MD ของทุกกรณี (รูปที่ 2) การลดลงของ nNOS นี้ถือเป็นเหตุการณ์ที่ก่อให้เกิดโรคในไตผิดปกติมากกว่าสิ่งที่ได้มาหลังจากภาวะไตวายของคดี ที่จริงแล้ว การศึกษาก่อนหน้านี้ของเราโดยใช้หนู OLETF (Otsuka Long-Evans Tokushima Fatty) เป็นแบบจำลองของโรคเบาหวานประเภท 2 แสดงให้เห็นว่า nNOS แสดงออกมากเกินไปใน MD และรอบๆ เซลล์ท่อในระยะต่อมาของโรคไตจากเบาหวาน [21] ในข้อบังคับของระบบ TGF หน้าที่ของ nNOS จะคล้ายกันและมีปฏิสัมพันธ์กับ COX-2 การศึกษาบางชิ้นได้เสนอแนะว่า nNOS อยู่ในตำแหน่งต้นน้ำของเส้นทางการส่งสัญญาณและกระตุ้นการแสดงออกของ COX-2 [5, 9] ในทางกลับกัน การศึกษาอื่นๆ ได้เสนอแนะตรงกันข้ามว่า COX-2 อยู่ในตำแหน่งต้นน้ำจากนั้น NOS [2, 13] โดยไม่คำนึงถึงความแตกต่างในเส้นทางการส่งสัญญาณ การขาด nNOS-immunosignals ในเซลล์ MD อาจทำให้การแสดงออกของ COX-2 ของไตลดลงในไตผิดปกติ.

หลอดสองสามตัวแสดงสัญญาณเชิงบวกสำหรับ nNOS ในสองกรณี ในกรณีที่เหลือ ท่อที่ขยายและแบนจำนวนมาก ซึ่งอาจอยู่ในไตส่วนปลาย แสดงสัญญาณเชิงบวกที่ชัดเจน (รูปที่ 3) ในกรณีนี้ ด้วยท่อที่เป็นบวก nNOS ที่โดดเด่น

การพัฒนาของเนื้อเยื่อไตนั้นยังไม่บรรลุนิติภาวะมากที่สุด ในไตปกติของวัยรุ่นและผู้ใหญ่ สัญญาณ nNOS-positive ถูกสังเกตพบในแขนขาที่หนาขึ้นโดยเฉพาะในเซลล์ MD (รูปที่ 4) การกระจายของการเปลี่ยนแปลง nNOS ระหว่างการพัฒนาไต ในการพัฒนาไตของสุกร nNOS กระจายอย่างกว้างขวางและสังเกตได้ในส่วนของกิ่งที่หนาขึ้นซึ่งนำไปสู่จุดภาพชัด [17] ในหนูแรท พบ nNOS ในท่อส่วนปลายที่พัฒนาแล้วในร่างกายรูปตัว S ตั้งแต่ระยะแรกสุดของการก่อไต [7] แม้ว่าจะไม่มีการตรวจสอบการกระจายของ nNOS ในไตที่กำลังพัฒนาของสุนัขมาก่อน แต่ก็มีความเป็นไปได้ที่สัญญาณ nNOS ที่โดดเด่นในท่ออาจเป็นข้อพิสูจน์ถึงท่อที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะสูงในท่อไตผิดปกติแทนที่จะเป็นท่อที่โตเต็มที่ที่เสียหาย

โดยสรุป การแสดงออกของ renin และ nNOS ในไตผิดปกติของสามสุนัขอายุน้อยได้รับการตรวจสอบทางอิมมูโนฮิสโตเคมีในการศึกษาปัจจุบัน สิ่งนี้แสดงให้เห็นถึงการเสื่อมสภาพของ nNOS ในเซลล์ MD ด้วยการแสดงออกของเรนินคงที่ การลดลงของการแสดงออกของ nNOS ในเซลล์ MD อาจทำให้ระบบ TGF ของไตอ่อนลง และอาจเป็นหนึ่งในกลไกทางพยาธิวิทยาที่อยู่ภายใต้ภาวะไตวายในสุนัขอายุน้อยด้วยไตผิดปกติ.

ผลประโยชน์ทับซ้อนที่อาจเกิดขึ้น

ผู้เขียนไม่มีอะไรจะเปิดเผย

การรับทราบ

ส่วนหนึ่งของงานนี้ได้รับการสนับสนุนโดย Grant-in-Aid for Scientific Research (หมายเลข 19K06385) จาก Japan Society for the Promotion of Science

ผู้เขียน

Akira YABUKI1,2)*, Yu FURUSAWA2), Noriaki MIYOSHI3), Kazuyuki TANIGUCHI4)และ Osamu YAMATO1)

1)Laboratory of Veterinary Clinical Pathology, Joint Faculty of Veterinary Medicine, Kagoshima University, Kagoshima 890-0065 ประเทศญี่ปุ่น

2)Kagoshima University Veterinary Teaching Hospital, Joint Faculty of Veterinary Medicine, Kagoshima University, 1-21-24 Korimoto, Kagoshima 890-0065 ประเทศญี่ปุ่น

3)ห้องปฏิบัติการจุลพยาธิวิทยาทางสัตวแพทย์ คณะสัตวแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัย Kagoshima เมือง Kagoshima 890-0065 ประเทศญี่ปุ่น

4)Laboratory of Veterinary Anatomy, Faculty of Agriculture, Iwate University, Morioka 020-8550 ประเทศญี่ปุ่น

ข้อมูลอ้างอิง

1. Adegboyega, PA and Ololad, O. 2004. การแสดงออกทางอิมมูโนฮิสโตเคมีของไซโคลออกซีเจเนส-2ในไตปกติ แอปพลิเค อิมมูโนฮิสโตเคม มล. มอร์โฟล 12: 71–74. [การแพทย์] [CrossRef]

2. Araujo, M. และ Welch, WJ 2009 การยับยั้ง Cyclooxygenase 2 ยับยั้งการป้อนกลับของ tubuloglomerular: บทบาทของตัวรับ thromboxane และไนตริกออกไซด์ เป็น. เจ. ฟิสิออล. ไต ฟิสิโอล. 296: F790–F794 [การแพทย์] [CrossRef]

3. Blantz, RC, Deng, A. , Lortie, M. , Munger, K. , Vallon, V. , Gabbai, FB and Thomson, SC 2002 บทบาทที่ซับซ้อนของไนตริกออกไซด์ในการควบคุมการกรองของไต ไตอินเตอร์ 61: 782–785. [การแพทย์] [CrossRef]

4. Câmpean, V. , Theilig, F. , Paliege, A. , Breyer, M. และ Bachmann, S. 2003. เอนไซม์ที่สำคัญสำหรับการสังเคราะห์ prostaglandin ของไต: การแสดงออกเฉพาะไซต์ในไตหนู (หนู, หนูเมาส์) เป็น. เจ. ฟิสิออล. ไต ฟิสิโอล. 285: F19–F32. [การแพทย์] [CrossRef]

5. Cheng, HF, Zhang, MZ and Harris, RC 2006 ไนตริกออกไซด์กระตุ้นไซโคลออกซีเจเนส-2ในเซลล์ CTAL ที่เพาะเลี้ยงผ่าน38-วิถีที่ขึ้นกับ ap เป็น. เจ. ฟิสิออล. ไต ฟิสิโอล. 290: F1391–F1397 [การแพทย์] [CrossRef]

6. Deng, A., Wead, LM and Blantz, RC 2004. การปรับชั่วคราวของคำติชมของ tubuloglomerular: ผลกระทบของ COX-2 ไตอินเตอร์ 66: 2348–2353.[การแพทย์] [ข้ามอ้างอิง]

7. Fischer, E. , Schnermann, J. , Briggs, JP, Kriz, W. , Ronco, PM and Bachmann, S. 1995. พัฒนาการของ NO synthase และ renin ในอุปกรณ์วางไข่ของไตหนู เป็น. เจ. ฟิสิออล. 268: F1164–F1176 [เมดไลน์]

8. Hao, CM and Breyer, MD 2008. การควบคุมทางสรีรวิทยาของพรอสตาแกลนดินในไต อันนุ. รายได้ Physiol. 70: 357–377. [การแพทย์] [CrossRef]

9. Ichihara, A., Imig, JD, Inscho, EW and Navar, LG 1998. Cyclooxygenase-2 มีส่วนร่วมในกระแสหลอดเลือดแดงอวัยวะที่ขึ้นอยู่กับการไหล: ปฏิสัมพันธ์กับ NOS ของเซลล์ประสาท เป็น. เจ. ฟิสิออล. 275: F605–F612 [เมดไลน์]

10. Kim, SM, Chen, L. , Mizel, D. , Huang, YG, Briggs, JP and Schnermann, J. 2007. เรนินในพลาสมาต่ำและการตอบสนองต่อสารคัดหลั่งของ renin ที่ลดลงต่อสิ่งเร้าเฉียบพลันใน COX ที่มีสติสัมปชัญญะ-2-บกพร่อง หนู เป็น. เจ. ฟิสิออล. ไต ฟิสิโอล. 292: F415 F422 [การแพทย์] [CrossRef]

11. Matzdorf, C. , Kurtz, A. และ Höcherl, K. 2007. กิจกรรม COX-2 กำหนดระดับของการแสดงออกของ renin แต่จ่ายได้สำหรับการควบคุมการแสดงออกของ renin อย่างเฉียบพลันในไตของหนู เป็น. เจ. ฟิสิออล. ไต ฟิสิโอล. 292: F1782–F1790. [การแพทย์] [CrossRef]

12. Norwood, VF, Morham, SG and Smithies, O. 2000. พัฒนาการหลังคลอดและความก้าวหน้าของ dysplasia ของไตใน cyclooxygenase-2 หนูที่ไม่มีผล ไตอินเตอร์ 58: 2291–2300. [การแพทย์] [CrossRef]

13. Paliege, A. , Mizel, D. , Medina, C. , Pasumarthy, A. , Huang, YG, Bachmann, S. , Briggs, JP, Schnermann, JB and Yang, T. 2004. การยับยั้งการแสดงออกของ nNOS ใน macula densa โดย COX-2-ที่ได้รับ prostaglandin E2 เป็น. เจ. ฟิสิออล. ไต ฟิสิโอล. 287: F152–F159. [การแพทย์] [CrossRef]

14. Picut, CA และ Lewis, RM 1987 ลักษณะทางจุลทรรศน์ของ dysplasia ของไตในสุนัข สัตวแพทย์ ปทุม. 24: 156–163. [การแพทย์] [CrossRef]

15. Seta, F., Chung, AD, Turner, PV, Mewburn, JD, Yu, Y, and Funk, CD 2009. ลักษณะการทำงานของไตและหลอดเลือดหัวใจของ COX-2 หนูล้มลง เป็น. เจ. ฟิสิออล. ระเบียบ จำนวนเต็ม. คอมพ์ ฟิสิออล 296: R1751–R1760. [การแพทย์] [CrossRef]

16. Shao, W. , Seth, DM, Prieto, MC, Kobori, H. และ Navar, LG 2013 การเปิดใช้งานระบบ renin-angiotensin โดยอาหารที่มีเกลือต่ำไม่ได้เสริม angiotensinogen และ angiotensin II ในหนู เป็น. เจ. ฟิสิออล. ไต ฟิสิโอล. 304: F505 F514. [การแพทย์] [CrossRef]

17. Solhaug, MJ, Ballèvre, LD, Guignard, JP, Granger, JP and Adelman, RD 1996. ไนตริกออกไซด์ในไตที่กำลังพัฒนา กุมาร. เนฟรอล 10: 529–539. [การแพทย์] [CrossRef]

18. Wilcox, CS 1998. บทบาทของ macula densa NOS ในการตอบสนองของ tubuloglomerular สกุลเงิน ความคิดเห็น เนฟรอล ความดันโลหิตสูง 7: 443–449. [การแพทย์] [CrossRef]

19. Yabuki, A. , Miyazaki, A. , Ichii, O. , Kohyama, M. , Sawa, M. และ Yamato, O. 2016. การแสดงออกของ cyclooxygenase ต่ำ-2 ในโรคไตเรื้อรังในสุนัขอายุน้อย ความละเอียด สัตวแพทย์ วิทย์. 109: 71–73. [การแพทย์] [CrossRef]

20. Yabuki, A., Suzuki, S., Matsumoto, M., Taniguchi, K. and Nishinakagawa, H. 2002. วิธีง่ายๆในการตรวจหา Ren-1 renin โดยเฉพาะ ไตอินเตอร์ 62: 2294–2299. [การแพทย์] [CrossRef]

21. Yabuki, A. , Tahara, T. , Taniguchi, K. , Matsumoto, M. and Suzuki, S. 2006. Neuronal nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 ในโรคไตจากเบาหวานของหนู OLETF ที่เป็นเบาหวานชนิดที่ 2 ประสบการณ์ แอนิม. 55: 17–25 [ข้ามอ้างอิง] [เมดไลน์]

22. Zhang, MZ, Wang, JL, Cheng, HF, Harris, RC and McKanna, JA 1997. Cyclooxygenase-2 ในการพัฒนา rat nephron เป็น. เจ. ฟิสิออล.

23: F994–F1002 [เมดไลน์]