ผลของตัวยับยั้ง STAT6 AS1517499 ในการรักษาภาวะไตวาย

ติดต่อ:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

PART Ⅰ: การยับยั้งทางเภสัชวิทยาของ STAT6 Ameliorates Myeloid Fibroblast Activation และ Alternative Macrophage Polarization ใน Renal Fibrosis

Baihai Jiao, Changlong An, Melanie Tran, Hao Du, Penghua Wang, Dong Zhou และ Yanlin Wang

การแนะนำ

โรคไตเรื้อรัง (CKD) ได้กลายเป็นความท้าทายด้านสาธารณสุขที่สำคัญ(1) การเกิดพังผืดเป็นแนวทางร่วมกันขั้นสุดท้ายสำหรับการพัฒนาของ CKD และถือเป็นปัจจัยสำคัญสำหรับความก้าวหน้าของ CKD ทุกรูปแบบ (2)พังผืดของไตเป็นลักษณะทางพยาธิวิทยาของ CKD ที่นำไปสู่การแทนที่โครงสร้างเนื้อเยื่อไตปกติด้วย extracellular matrix (ECM) ที่มีความเสียหายต่อการทำงานของไตอย่างต่อเนื่องและไม่สามารถย้อนกลับได้ (3) อย่างไรก็ตาม แม้จะมีความเข้าใจเพิ่มขึ้นเกี่ยวกับกลไกระดับโมเลกุลของพังผืดของไต, ไม่มีการรักษาเฉพาะเพื่อควบคุมการเกิดพังผืดและฟื้นฟูการทำงานของไต เนื่องจากยังไม่มีความเข้าใจถึงต้นกำเนิดและหน้าที่ของไฟโบรบลาสต์อย่างสมบูรณ์ การกำหนดเป้าหมายไฟโบรบลาสต์อย่างมีประสิทธิผลในการเกิดพังผืดของอวัยวะจึงยังคงเป็นเรื่องท้าทาย

หลักฐานที่สะสมบ่งชี้ว่าไมอีลอยด์ มัยโอไฟโบรบลาสต์ที่เรียกว่าไฟโบรไซต์มีบทบาทสำคัญในกระบวนการเกิดพังผืด (4-7) เราและคนอื่น ๆ ได้แสดงให้เห็นก่อนหน้านี้ว่าการจัดหาไฟโบรบลาสต์ที่ได้จากไขกระดูกช่วยเพิ่มการลุกลามและการพัฒนาของไตพังผืด(8-12) ดังนั้น การกำหนดเป้าหมายเซลล์เหล่านี้อาจเป็นกลยุทธ์การรักษาที่มีประสิทธิภาพในการรักษาโรคไตเรื้อรัง ไฟโบรบลาสต์ที่ได้มาจากไขกระดูกมีลักษณะร่วมกันของเซลล์มีเซนไคม์และเซลล์เม็ดเลือด (13,14) อย่างไรก็ตาม ไซโตไคน์หลายชนิดที่ผลิตในสภาพแวดล้อมจุลภาคในท้องถิ่นเป็นตัวกำหนดความแตกต่างของไฟโบรบลาสต์ที่ได้มาจากไขกระดูก ก่อนหน้านี้เราได้แสดงให้เห็นแล้วว่า Th2 cytokines(I-4 และ IL-13) ซึ่งจัดอยู่ในประเภท profibrotic cytokines ช่วยเพิ่มการแสดงออกของคอลลาเจน type I, fibronectin และ -SMA ใน monocytes ที่ได้จากไขกระดูก (15 , 16).

STAT6การส่งสัญญาณถูกกระตุ้นเป็นหลักโดย Th2 cytokines เช่น IL-4 และ IL-13 และเกี่ยวข้องกับการเกิดโรคของปอด (17,18), ตับ(19) และไตพังผืด(15, 20) เมื่อเร็ว ๆ นี้เราได้แสดงให้เห็นว่า JAK3/STAT6มีบทบาทสำคัญในการกระตุ้นไฟโบรบลาสต์จากไขกระดูกและการพัฒนาของไตพังผืดในโรคไตอุดกั้น(15). นอกจากนี้ เราได้แสดงให้เห็นว่าน็อคเอาท์ของ IL-4Ro ยับยั้งSTAT6การกระตุ้น การสะสมของไมอีลอยด์ ไฟโบรบลาสต์ และการแปรสภาพเป็นไมโอไฟโบรบลาสต์ โพลาไรเซชันของมาโครฟาจ M2 และการพัฒนาของไตพังผืดหลังจากได้รับบาดเจ็บอุดกั้นหรือการบริหารกรดโฟลิก (16) ผลการวิจัยเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าSTAT6เส้นทางการส่งสัญญาณอาจเป็นเป้าหมายการรักษาใหม่สำหรับไตพังผืด.

ในการศึกษานี้ เราประเมินบทบาทการรักษาที่เป็นไปได้ของAS1517499, ที่มีศักยภาพและเลือกสรรมาอย่างดีSTAT6ตัวยับยั้ง(21) ในการกระตุ้นไมอีลอยด์ไฟโบรบลาสต์และการพัฒนาของไตพังผืดในสองแบบจำลองหนูทดลอง ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่าAS1517499ยกเลิกSTAT6การกระตุ้นในเซลล์คั่นระหว่างหน้าของไตที่มีอาการบาดเจ็บอุดกั้นหรือโรคไตจากกรดโฟลิก นอกจากนี้การบริหารงานของAS1517499ยับยั้งการกระตุ้นของไมอีลอยด์ ไฟโบรบลาสต์ ลดโพลาไรเซชันของมาโครฟาจ M2 และลดทอนไตพังผืด. การค้นพบนี้ชี้ให้เห็นว่าการยับยั้งSTAT6กับAS1517499มีศักยภาพในการรักษาโรคไต fibrotic

สารสกัดจาก Cistanche:สกัดจากสมุนไพร cistancheเพื่อรักษาโรคไต

ผลลัพธ์

AS1517499 ยับยั้งการกระตุ้น STAT6 ในไตด้วยการบาดเจ็บจากการอุดกั้น

เราได้รายงานว่า JAK3/STAT6การส่งสัญญาณถูกเปิดใช้งานในเซลล์คั่นระหว่างหน้าของไฟโบรติกไตหลังการบาดเจ็บอุดกั้นหรือการบริหารกรดโฟลิก (15,16) เพื่อประเมินว่าSTAT6สามารถใช้เป็นเป้าหมายการรักษาสำหรับการรักษาไตพังผืดหนูเมาส์ป่าได้รับการบาดเจ็บจากการอุดกั้นและจากนั้นบำบัดด้วยกระสายยาหรือAS1517499, a STAT6-ตัวยับยั้งจำเพาะ ทุกสองวันเป็นเวลา 10 วัน ทำการย้อมอิมมูโนฮิสโตเคมีและการวิเคราะห์ Western blot เพื่อตรวจสอบSTAT6กระตุ้นการทำงานของไต การย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีเปิดเผยว่าฟอสฟอรัสที่เป็นบวกSTAT6ส่วนใหญ่ตรวจพบการย้อมสีในเซลล์คั่นระหว่างหน้าของไตที่มีโรคไตอุดกั้นซึ่งลดลงโดยAS1517499การรักษา (รูปที่ 1A, B) สอดคล้องกับการค้นพบนี้ การวิเคราะห์ Western blot แสดงระดับของฟอสโฟ-STAT6ถูกยับยั้งในไตด้วยโรคไตอุดกั้นตามหลังAS1517499การรักษา (รูปที่ 1C, D) ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่าการยับยั้งของSTAT6กับAS1517499ป้องกันSTAT6การกระตุ้นในไตด้วยโรคไตอุดกั้นAS1517499ทำให้การสะสม Myeloid Fibroblast บกพร่องในโรคไตอุดกั้น หลักฐานที่สะสมบ่งชี้ว่าการจัดหา myeloid fibroblasts มีส่วนสำคัญต่อการเกิดโรคของไตพังผืด. เพื่อตรวจสอบว่าAS1517499ส่งผลต่อการสะสมของไมอีลอยด์ ไฟโบรบลาสต์ ส่วนของไตถูกย้อมสำหรับ CD45 เครื่องหมายเม็ดเลือด CD45 และ PDGFR- มาร์กเกอร์มีเซนไคมอล

รูปที่ 1|AS1517499 ยับยั้งการกระตุ้น STAT6 ในไตด้วยอาการบาดเจ็บที่อุดกั้น(A) photomicrographs ตัวแทนของส่วนของไตในวันที่ 10 ของ UUO ที่ย้อมด้วยฟอสโฟรีเลตSTAT6(สีน้ำตาล) และย้อมเคาน์เตอร์ด้วยฮีมาทอกซิลิน (สีน้ำเงิน) สเกลบาร์ 50um. (B) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ phosphorylatedSTAT6-เซลล์บวกในไต***P<0.001 vs.=""><0.01 vs=""><0.01 vs="" as-uuo.n="6" per="" group.="" (c)="" representative="" western="" blots="" show="" protein="" levels="" of="">STAT6และSTAT6ในไตในวันที่ 10 ของ UUO.(D) การวิเคราะห์เชิงปริมาณ p-STAT6ระดับโปรตีนในไต,***P<0.001 vs=""><0.05 vs="" vehicle-uuo;="">< 0.05="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="">

จำนวนเซลล์บวกคู่ CD45 และ PDGFR เพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในไตที่อุดตันในขณะที่AS1517499การบำบัดลด CD45 และ PDGFR- เซลล์บวกคู่ลงอย่างเห็นได้ชัด (รูปที่ 2A, B) ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าSTAT6ตัวยับยั้งAS1517499ปรับปรุง myeloid fibroblasts ที่สะสมในไตหลังจากได้รับบาดเจ็บจากการอุดกั้นAS1517499ลดทอน M2 Macrophage Polarization ใน Obstructive Nephropathy การเปลี่ยนแปลงของ monocytes ไปเป็นไฟโบรบลาสต์ที่ได้จากไขกระดูกนั้นอาศัย M2 macrophage polarizationSTAT6มีบทบาทสำคัญในการโพลาไรซ์ของมาโครฟาจ M2 ดังนั้นเราจึงตรวจสอบว่าการยับยั้งของSTAT6กับAS1517499ไกล่เกลี่ยโพลาไรเซชันมาโครฟาจ ส่วนของไตถูกย้อมสำหรับ CD206 (M2 macrophage marker) และ PDGFR- .CD206 และ PDGFR- เซลล์ที่เป็นบวกคู่เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในไตของหนูเมาส์ที่มีอาการบาดเจ็บอุดกั้น ในทางตรงกันข้าม,AS1517499ลดจำนวนเซลล์ CD206 plus และ PDGFR- plus ในไตที่มีโรคไตอุดกั้นอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 2C, D) ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่าAS1517499ลดทอนการเปลี่ยนแปลงของ monocytes เป็น myeloid fibroblasts อย่างมีนัยสำคัญ และลด M2 macrophage polarization

รูปที่ 2|AS1517499 ช่วยลดการสะสมของไมอีลอยด์ไฟโบรบลาสต์และโพลาไรเซชันของมาโครฟาจในไตด้วยอาการบาดเจ็บที่อุดกั้น(A) photomicrographs ที่เป็นตัวแทนของกลุ่ม Kidhey ในวันที่ 10 ของ UUO ที่ย้อมสีสำหรับ CD45 (สีแดง), PDGFR- (สีเขียว) และ DAPI (สีน้ำเงิน) แถบมาตราส่วน 50μm B） การวิเคราะห์เชิงปริมาณของไฟโบรบลาสต์ CD45*และ PDGFR- * ในไต**P<0.001 vs=""><0.01 vs=""><0.01 vs="" as-uuo.n="6" per="" group.="" (c)representative="" photomicroaraphs="" of="" the="" kidney="" at="" day="" 10ofuuo="" stained="" for="" cd206="" (red).pdgfr-b="" (green).and="" dapiblue).scale="" bar.,50um.(d)="" quantitative="" analysis="" of="" cd206t="" and="" pdgfr-b+="" fibroblasts="" in=""><0.01 ys=""><0.01 vs=""><0.01 vs="" as-uuo.n="6" per="" group.="" (e)quantitative="" analysis="" of="" mrnaexpression="" of="" m2="" macrophage="" markers="" (mrc.fzz1.arg1.ccl17="" in="" the="" kidney="" of="" vehide="" or="">AS1517499หนูที่ได้รับการรักษา * P<><><0.05 vs=""><><0.05 vs=""><><0.05vs as-uuo.n="6" per="">

เพื่อประเมินผลกระทบของ .เพิ่มเติมSTAT6ตัวยับยั้งAS1517499บนโพลาไรซ์มาโครฟาจ M2 นั้น RT-PCR แบบเรียลไทม์ถูกดำเนินการเพื่อตรวจจับการแสดงออกของ mRNA ของมาร์กเกอร์มาโครฟาจ M2AS1517499การรักษายับยั้งการแสดงออกของ mRNA ที่อุดมสมบูรณ์ของ Argl, MRCl, Fizzl และ CCL17 ในไตที่อุดตัน (รูปที่ 2E) ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้STAT6ส่งสัญญาณการย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์และการวิเคราะห์ Western blot การย้อมด้วยอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์และการวิเคราะห์ Western blot เผยให้เห็นระดับของไฟโบรเนกตินและคอลลาเจน I เพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัดในไตที่อุดกั้นAS1517499การรักษาลดระดับโปรตีนของคอลลาเจน I และไฟโบรเนกตินในไตที่อุดตันอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 4C-H)

รูปที่ 3|AS1517499 ช่วยลดการสร้าง myofibroblast ในไตด้วยอาการบาดเจ็บที่อุดกั้น(A) photomicrographs ที่เป็นตัวแทนของ UUO ที่รักษาส่วนของไตที่ย้อมด้วย a-SMA (สีเขียว) และย้อมทับด้วย DAPI (สีน้ำเงิน) สเกลบาร์ 50มม. (B) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของพื้นที่บวก a-SMA ในไต ***P < 0.001="" เทียบกับ="" vehicle-con,="" #="" p="">< 0.05="" เทียบกับ="" vehicle-uuo="" บวกบวก="" p="">< 0.01="" เทียบกับ="" as-uuo="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (c)="" ตัวแทน="" western="" blots="" แสดงระดับโปรตีน="" a-sma="" ในไต="" (d)="" การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการแสดงออกของโปรตีน="" a-sma="" ในไต="" ***p="">< 0.001="" เทียบกับ="" vehicle-con,="" ##p="">< 0.01="" เทียบกับ="" vehicle-uuo="" บวกกับ="" p="">< 0.01="" เทียบกับ="" as-uuo="" n="6">

รูปที่ 4|AS1517499 ลดทอนไฟโบรซิสของไตและการผลิตโปรตีน ECM ในไตด้วยอาการบาดเจ็บที่อุดกั้น(A) photomicrographs ที่เป็นตัวแทนของไตที่ย้อมด้วยสีแดงซิเรียสสำหรับการประเมินการสะสมคอลลาเจนทั้งหมดในไต สเกลบาร์ 50 มม. (B) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการสะสมคอลลาเจนในไต ***พี่<0.001 vs="" vehicle-con.="" ##p="" <="" 0.01="" vs="" vehicle-uuo,="" ++p="" <="" 0.01="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="" group.="" (c)="" representative="" photomicrographs="" of="" the="" kidney="" sections="" stained="" for="" fibronectin="" (green)="" and="" counterstained="" with="" dapi="" (blue).="" scale="" bar,="" 50mm.="" (d)="" quantitative="" analysis="" of="" the="" fibronectin-positive="" area="" in="" the="" kidney.="" ***p="" <="" 0.001="" vs="" vehicle-con.="" ##p="" <="" 0.01="" vs="" vehicle-uuo,="" +="" p="" <="" 0.05="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="" group.="" (e)="" representative="" photomicrographs="" of="" the="" kidney="" sections="" stained="" for="" collagen="" i="" (green)="" and="" counterstained="" with="" dapi="" (blue).="" scale="" bar,="" 50mm.="" (f)="" quantitative="" analysis="" of="" collagen="" i="" positive="" area="" in="" the="" kidney.="" ***p="" <="" 0.001="" vs="" vehicle-con.="" #="" p="" <="" 0.05="" vs="" vehicle-uuo,="" ++p="" <="" 0.01="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="" group.="" (g)="" representative="" western="" blots="" show="" protein="" expression="" of="" fibronectin="" and="" collagen="" i="" in="" the="" kidney.="" (h)="" quantitative="" analysis="" of="" protein="" levels="" of="" fibronectin="" and="" collagen="" i="" in="" the="" kidney.="" ***p="" <="" 0.001="" vs="" veh-con;="" ##p="" <="" 0.01,="" #="" p="" <="" 0.05="" vs="" veh-uuo;="" ++p="" <="" 0.01="" vs="" as-uuo.="" n="6" per="">

AS1517499 ยับยั้งSTAT6การกระตุ้นในกรดโฟลิกโรคไต

โรคไตที่เกิดจากกรดโฟลิกเป็นอีกแบบจำลองหนึ่งของหนูที่ใช้กันทั่วไปของไตพังผืด. ดังนั้นเราจึงตรวจสอบว่าAS1517499ยับยั้งได้STAT6การกระตุ้นและการเกิดโรคของไตพังผืดในโรคไตกรดโฟลิก ส่วนของไตถูกย้อมด้วยฟอสโฟ-STAT6.STAT6phosphorylation เกิดขึ้นอย่างมีนัยสำคัญในเซลล์คั่นระหว่างหน้าของไตที่มี FA nephropathy ในขณะที่AS1517499การบำบัดยับยั้งการแสดงออกของฟอสโฟ-STAT6 อย่างเห็นได้ชัด (รูปที่ 5A, B) การค้นพบนี้ได้รับการยืนยันเพิ่มเติมโดยการวิเคราะห์ Western blot (รูปที่ 5C, D) ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่าSTAT6ถูกกระตุ้นในเซลล์คั่นระหว่างหน้าของไตที่เสียหายด้วยกรดโฟลิก nephropathy ซึ่งถูกยับยั้งอย่างมีนัยสำคัญดังต่อไปนี้AS1517499การรักษา.

รูปที่ 5|AS1517499 ยับยั้งการกระตุ้น STAT6 ในโรคไตจากกรดโฟลิก(A) ภาพตัวแทนของการย้อมสีอิมมูโนฮิสโตเคมีของฟอสโฟรีเลตSTAT6ในไต 2 สัปดาห์หลังยานพาหนะหรือAS1517499การรักษา. สเกลบาร์ 50 มม. (B) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ phosphorylatedSTAT6- เซลล์บวกในไต 2 สัปดาห์หลังยานพาหนะหรือAS1517499การรักษา. ***P < {{0}}.001="" เทียบกับ="" con;="" ##p="">< 0.01="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (c)="" ตัวแทน="" western="" blot="" ของ="">STAT6และSTAT6ในไต (D) การวิเคราะห์เชิงปริมาณ p-STAT6ระดับโปรตีนในไต ***P < {{0}}.001="" เทียบกับ="" con;="" ##p="">< 0.01="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6">

AS1517499ยับยั้งการสะสม Myeloid Fibroblast ใน Folic Acid Nephropathy เพื่อตรวจสอบบทบาทของAS1517499ในการสะสมไมอีลอยด์ไฟโบรบลาสต์ในไตด้วยโรคไตจากกรดโฟลิก เราทำการย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนซ์สองครั้งสำหรับ CD45 และ PDGFR- จำนวนเซลล์บวกคู่ CD45 และ PDGFR เพิ่มขึ้นในไตด้วยโรคไตจากกรดโฟลิกAS1517499ยับยั้งจำนวนเซลล์บวกคู่ CD45 และ PDGFR ในไตอย่างมากด้วยโรคไตจากกรดโฟลิก (รูปที่ 6A, B)

AS1517499ลดทอน M2 Macrophage Polarization ใน Folic Acid Nephropathy เราจึงตรวจสอบว่าการยับยั้งทางเภสัชวิทยาของSTAT6กับAS1517499ควบคุม M2 macrophage polarization ใน FA nephropathy ตามที่ได้รับการยืนยันโดยการวิเคราะห์การย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์ การรักษาAS1517499ยับยั้งจำนวนเซลล์บวกคู่ CD206 และ PDGFR อย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับหนูเมาส์ที่ได้รับการบำบัดด้วยพาหะนำยาที่มีการบริหารให้ FA (รูปที่ 6C, D) นอกจากนี้ M2 มาโครฟาจมาร์กเกอร์, Argl, MRC1, Fizzl และ CCL17 ถูกเหนี่ยวนำในโรคไตจากกรดโฟลิก เครื่องหมายมาโครฟาจ M2 เหล่านี้ลดลงหลังจากAS1517499การรักษา(รูปที่ 6E) ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่าการยับยั้งทางเภสัชวิทยาของSTAT6กับAS1517499ลดทอน M2 macrophage polarization ในไตด้วย FA nephropathy

รูปที่ 6|AS1517499 ลดทอนการสะสมไมอีลอยด์ ไฟโบรบลาสต์และโพลาไรเซชันมาโครฟาจในโรคไตที่เกิดจากกรดโฟลิก(A) โฟโตไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนของไต 2 สัปดาห์หลังยานพาหนะหรือAS1517499การทรีทเมนต์ย้อมสำหรับ CD45 (สีแดง), PDGFR-b (สีเขียว) และ DAPI (สีน้ำเงิน) สเกลบาร์ 50มม. (B) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ CD45 plus และ PDGFR-b บวกไฟโบรบลาสต์ในไต **P < 0.01="" เทียบกับ="" con="" #="" p="">< 0.05="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (c)="" photomicrographs="" ตัวแทนของไต="" 2="">AS1517499การบำบัดที่ย้อมสำหรับ CD206 (สีแดง), PDGFR-b (สีเขียว) และ DAPI (สีน้ำเงิน) แถบมาตราส่วน 50มม. (D) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของ CD206 plus และ PDGFR-b บวกไฟโบรบลาสต์ในไต ***P < 0.001="" เทียบกับ="" con="" ##p="">< 0.01="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (e)="" การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการแสดงออกของ="" mrna="" ของผู้ผลิตมาโครฟาจ="" m2="" (mrc,="" fizz1,="" arg1,="" ccl17)="" ในไต="" 2="">AS1517499การรักษา. ***P < {{0}}.001="" เทียบกับ="" con;="" ###p="">< 0.001="" เทียบกับ="" fa="" บวก="" veh;="" ##p="">< 0.01="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6">

AS1517499ลดทอนการสร้าง Myofibroblast ใน Folic Acid Nephropathy เพื่อตรวจสอบว่าAS1517499ส่งผลกระทบต่อการเปลี่ยนแปลง myofibroblast การแสดงออก -SMA ถูกตรวจสอบในส่วนของไตและโดยการวิเคราะห์ western blot สอดคล้องกับการค้นพบของเราในแบบจำลอง UUO myofibroblasts ที่เป็นบวก -SMA และการแสดงออกของโปรตีน -SMA ถูกปรับปรุงในไตหลังการรักษาด้วย FA เมื่อเทียบกับหนูที่ได้รับการบำบัดด้วยกระสายยา นอกจากนี้การบริหารร่วมกับ FA กับAS1517499เซลล์ที่ให้ผลบวก -SMA และระดับโปรตีน -SMA ในไตลดลงอย่างมีนัยสำคัญเมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มกระสายยาที่บริหารร่วมด้วย FA (รูปที่ 7A-D) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่าAS1517499ยับยั้งการสร้าง myofibroblast ในไตด้วยกรดโฟลิก nephropathy

รูปที่ 7|AS1517499 ช่วยลดการสร้าง myofibroblast ในโรคไตจากกรดโฟลิก(A) โฟโตไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนของไต 2 สัปดาห์หลังยานพาหนะหรือAS1517499ทรีทเมนต์ย้อมสำหรับ a-SMA (สีเขียว) และย้อมเคาน์เตอร์ด้วย DAPI (สีน้ำเงิน) สเกลบาร์ 50มม. (B) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของพื้นที่บวก a-SMA ในไต ***P < 0.001="" เทียบกับ="" con;="" ###p="">< 0.001="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (c)="" western="" blots="" ที่เป็นตัวแทนแสดงระดับโปรตีน="" a-sma="" ในไต="" 2="">AS1517499การรักษา. (D) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการแสดงออกของโปรตีน a-SMA ในไต ***P < 0.001="" vs="" con,="" ##p="">< 0.01="" vs="" fa="" plus="" veh.="" n="6">

มาค่าโสม cistanche

AS1517499 Amelioratesไตพังผืดและรักษาการทำงานของไตในกรดโฟลิกโรคไต

เพื่อประเมินผลกระทบของAS1517499บนไตพังผืด,ทำการย้อมสี picrosiriusred ที่ไต หนูที่ได้รับการรักษาด้วย FA มีระดับการสะสมคอลลาเจนเพิ่มขึ้นอย่างเห็นได้ชัด ในขณะที่AS1517499การรักษาลดปริมาณคอลลาเจนที่สะสมในไตลงอย่างมาก (รูปที่ 8A, B) นอกจากนี้ การย้อมสีอิมมูโนฟลูออเรสเซนส์และการวิเคราะห์ Western blot ยังแสดงให้เห็นอีกว่าAS1517499ยับยั้งการแสดงออกของโปรตีน ECM อย่างมีนัยสำคัญ(fibronectin และ collagen I) ในไตด้วยกรดโฟลิก nephropathy(รูปที่ 8C-H) ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่าAS1517499ยับยั้งการผลิต ECM ในไตและการพัฒนาของไตพังผืดในโรคไตกรดโฟลิก

เพื่อประเมินผลกระทบของSTAT6การทำงานของไตบกพร่องในโรคไตที่เกิดจากกรดโฟลิก ครีเอตินีนในเลือดถูกวัด หนูที่ได้รับกรดโฟลิกแสดงระดับครีเอตินีนในซีรัมอย่างมีนัยสำคัญ (รูปที่ 8I) ในทางตรงกันข้าม หนูที่ได้รับการรักษาด้วยAS1517499ครีเอตินีนในเลือดต่ำมากในโรคไตจากกรดโฟลิก ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่าการยับยั้งของSTAT6กับAS1517499ปกป้องไตจากโรคไตจากกรดโฟลิก

รูปที่ 8|AS1517499 ช่วยลดการเกิดพังผืดในไตและรักษาการทำงานของไตในโรคไตที่เกิดจากกรดโฟลิก. (A) โฟโตไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนของไต 2 สัปดาห์หลังยานพาหนะหรือAS1517499การรักษาที่ย้อมด้วยสีแดงซิเรียสเพื่อประเมินการสะสมคอลลาเจนทั้งหมดในไต แถบมาตราส่วน 50มม. (B) การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการสะสมคอลลาเจนในไต ***P < 0.0{{10}}1="" vs="" con,="" ##p="">< 0.01="" vs="" fa="" plus="" veh="" .="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (c)="" โฟโตไมโครกราฟที่เป็นตัวแทนของส่วนไตที่ย้อมสำหรับไฟโบรเนกติน="" (สีเขียว)="" และย้อมทับด้วย="" dapi="" (สีน้ำเงิน)="" แถบมาตราส่วน="" 50มม.="" (d)="" การวิเคราะห์เชิงปริมาณของบริเวณ="" fifibronectin-positive="" ในไตที่ได้รับการรักษาด้วย="" fa="" ***p="">< 0.001="" เทียบกับ="" con,="" ##p="">< 0.01="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (e)="" photomicrographs="" ที่เป็นตัวแทนของไตที่ย้อมสำหรับคอลลาเจน="" i="" (สีเขียว)="" และย้อมทับด้วย="" dapi="" (สีน้ำเงิน)="" สเกลบาร์="" 50="" มม.="" (f)="" การวิเคราะห์เชิงปริมาณของคอลลาเจน="" 1="" บริเวณที่เป็นบวกในไต="" ***p="">< 0.001="" เทียบกับ="" con,="" #="" p="">< 0.05="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (g)="" western="" blots="" ที่เป็นตัวแทนซึ่งแสดงการแสดงออกของโปรตีนของไฟโบรเนกตินและคอลลาเจน="" i="" ในไต="" (h)="" การวิเคราะห์เชิงปริมาณของระดับโปรตีนของไฟโบรเนกตินและคอลลาเจน="" 1="" ในไต="" ***="" p="">< 0.001="" เทียบกับ="" con;="" ##p="">< 0.01="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6" ต่อกลุ่ม="" (i)="">AS1517499บน creatinine ในซีรัม **P < {{0}}.001="" เทียบกับ="" con;="" #="" p="">< 0.05="" เทียบกับ="" fa="" plus="" veh="" n="6">

สมุนไพรจีนโบราณ:cistanche

หมายเหตุ: ยาจีนโบราณสมุนไพร cistanche(หรือที่รู้จักในชื่อ "สมุนไพรมังกร" และ "โสมทะเลทราย") เติบโตได้ในทะเลทรายที่แห้งแล้งและอบอุ่นเท่านั้น เป็นหนึ่งในเก้าสมุนไพรอมตะCistanche(ซิสทานเช ทูบูโลซา/cistanche deserticola/cistanche ชีวิตในทะเลทราย/ซิสแทนเช่ ซัลซ่า)เนื้อหาที่อุดมไปด้วยส่วนผสมที่มีประสิทธิภาพ เช่น อิชินาโคไซด์ แอกทิโอไซด์ ฟีนิลลีทานอยด์ ไกลโคไซด์ ฟลาโวนอยด์ โพลีแซ็กคาไรด์ ฯลฯ ส่วนผสมที่มีประสิทธิภาพเหล่านี้ทำให้ซิสทานช์เป็นสมุนไพรบำรุงล้ำค่าและวัสดุอาหารสำหรับภูมิคุ้มกันของผู้คน อวัยวะภายใน เซลล์สมองและเซลล์ประสาท เป็นต้น การศึกษาทางเภสัชวิทยาสมัยใหม่ได้ยืนยันสิ่งต่อไปนี้ผลกระทบของ cistanche(ประโยชน์ของ cistanche): ปรับปรุงภูมิคุ้มกัน; ปรับปรุงสมรรถภาพทางเพศและการทำงานของไต ป้องกันความเมื่อยล้า; ต่อต้านริ้วรอย; ปรับปรุงหน่วยความจำ โรคพาร์กินสัน; โรคอัลไซเมอร์; สารต้านอนุมูลอิสระ; สบายท้องผูก; ต้านการอักเสบ; ส่งเสริมการเจริญเติบโตของกระดูก ผิวขาว; ปกป้องตับ; เป็นต้น

cistanche wikung

คลิกที่นี่เพื่อเป็นส่วนหนึ่ง Ⅱ