ผลของไกลโคไซด์ของ Cistanche ต่อการแสดงออกของโปรตีนพรีเคอร์เซอร์ของไมโตคอนเดรียและเคราติน Type II Cytoskeletal 6A ในหนูทดลองของภาวะสมองเสื่อม

ข้อมูลเพิ่มเติมกรุณาติดต่อ:Joanna.jia@wecistanche.com

เชิงนามธรรม

บทนำ

หลอดเลือดภาวะสมองเสื่อมเป็นภาวะสมองเสื่อมประเภทที่สองที่พบบ่อยที่สุด (Neltner et al., 2014; Sachdev et al., 2014; Tatlisumak et al., 2014; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Reijmer et al., 2016 ). ความเสียหายของหน่วยความจำอย่างต่อเนื่องและไม่สามารถย้อนกลับได้ซึ่งเกิดขึ้นในผู้ป่วยที่มีภาวะสมองเสื่อมเกี่ยวกับหลอดเลือดนำไปสู่การเสื่อมถอยอย่างรุนแรงในคุณภาพชีวิตและทำให้ครอบครัวมีภาระทางเศรษฐกิจหนัก (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Chen et คณะ, 2014; Brandenburg et al., 2016). การป้องกันและรักษาโรคมีความสำคัญมากขึ้นในประเทศที่มีประชากรสูงอายุ ดังนั้นจึงมีงานวิจัยที่สนใจมากขึ้นในการค้นหายาที่มีประสิทธิภาพในการรักษาภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด

Cistancheเป็นพืชที่ใช้เป็น nootropic ในทฤษฎีการแพทย์แผนจีน (Chen et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015) ไกลโคไซด์ของCistanche(GC) เป็นสารเตรียมที่สกัดจากCistanche. มีหลักฐานมากมายที่สนับสนุนแนวคิดที่ว่า GC สามารถปรับปรุงการสร้างใหม่ตามแกน (Procaccio et al., 2014; Love et al., 2015; Brandenburg et al., 2016; Gu et al., 2016) การศึกษาในสัตว์จำนวนมากแสดงให้เห็นว่า GC ช่วยเพิ่มการทำงานขององค์ความรู้ (Procaccio et al., 2014; Talarowska et al., 2014; Fischer and Maier, 2015)

ก่อนหน้านี้เราใช้การอุดหลอดเลือดแดงร่วมทวิภาคีร่วมกันเพื่อสร้างแบบจำลองหนูของหลอดเลือดภาวะสมองเสื่อม. ในรูปแบบนี้ การเรียนรู้เชิงพื้นที่และหน่วยความจำจะดีขึ้นอย่างมีนัยสำคัญหลังจากการแทรกแซงด้วย GC (Chen et al., 2015) GC ยังควบคุมและปรับปรุงได้ภูมิคุ้มกันแต่เป็นที่รู้จักกันเป็นอย่างดีในชื่อยาบำรุงเส้นประสาทและสารเพิ่มความจำ (Chen et al., 2014; Procaccio et al., 2014; Szalárdy et al., 2015; You et al., 2015; Brandenburg et al., 2016)

อย่างไรก็ตาม มีการศึกษาเพียงไม่กี่ชิ้นที่ตรวจสอบกลไกระดับโมเลกุลที่เป็นสาเหตุของผลกระทบของ GC ในหลอดเลือดภาวะสมองเสื่อม. ในที่นี้ เราใช้โปรตีโอมิกส์เพื่อสำรวจความสัมพันธ์ระหว่างโปรตีนและภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด เพื่อกำหนดกลไกที่เป็นสาเหตุของผลการป้องกันระบบประสาทของ GC

CistancheDeserticola มีเอฟเฟกต์มากมาย คลิกที่นี่เพื่อทราบข้อมูลเพิ่มเติม

วัสดุและวิธีการ

สัตว์

หนู Wistar เพศผู้ที่โตเต็มวัยเพศผู้ปลอดโรคเฉพาะ (n=37) ซึ่งมีน้ำหนัก 230–270 กรัม จัดหาให้โดยศูนย์สัตว์ทดลอง มณฑลหูเป่ย์ ประเทศจีน (หมายเลขใบอนุญาต: SYXK (E) { {7}}). การทดลองเป็นไปตามแนวทางแห่งชาติสำหรับการดูแลและการใช้สัตว์ทดลอง และแนวทางผู้เขียนฉันทามติเกี่ยวกับจริยธรรมและสวัสดิภาพสัตว์ที่จัดทำโดยสมาคมบรรณาธิการสัตวแพทย์นานาชาติ ต้นฉบับจัดทำขึ้นตามแนวทางของ Animal Research: Reporting of In Vivo Experiments (ARRIVE)

หนูถูกเลี้ยงเป็นกลุ่มละ 3 ตัวต่อกรงที่อุณหภูมิ 25 องศา โดยมีวงจรแสง/ความมืด 12 -ชั่วโมง และสามารถเข้าถึงอาหารและน้ำได้ฟรี หนู (n=37) ถูกสุ่มให้กับกลุ่มควบคุม (n=10), กลุ่มภาวะสมองเสื่อมเกี่ยวกับหลอดเลือด (n=12) และภาวะสมองเสื่อมจากหลอดเลือดบวกกับกลุ่ม GC (ที่บำบัดด้วย GC น=15)

การสร้างแบบจำลองหนูของภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด

ภายใต้การดมยาสลบที่มีคลอราลไฮเดรต 10 เปอร์เซ็นต์ หลอดเลือดแดงแคโรทีดร่วมทวิภาคีของหนูในภาวะสมองเสื่อมเกี่ยวกับหลอดเลือดและกลุ่มที่ได้รับการรักษาด้วย GC อย่างระมัดระวังจะถูกแยกออกจากเนื้อเยื่อรอบข้าง จากนั้นมัดให้แน่นโดยใช้ไหมเย็บ 10-0 ที่ปลายทั้งสองข้าง หลอดเลือดแดงถูกตัด หนูในกลุ่มควบคุมต้องได้รับการผ่าตัดแบบเดียวกัน ยกเว้นว่าหลอดเลือดแดงทั่วไปถูกเปิดออกแต่ไม่ได้ผูกมัด เขาวงกตน้ำของมอร์ริสได้ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้เพื่อตรวจสอบว่ามีการสร้างแบบจำลองสัตว์สำเร็จหรือไม่ (Chen et al., 2015)

การรักษาทางเภสัชวิทยา

แป้งซิสแทนเช่(Certificate No. Z20050216, Sinphar Tian-Li Pharmaceutical Co., Ltd., Hangzhou, China) ผสมกับน้ำบริสุทธิ์พิเศษและสกัดโดย TF-2000C Ultrasonicator (Tuofen, Shanghai, China) (กำลัง 100 เปอร์เซ็นต์ , 30 องศา , 40 นาที). ความเข้มข้นของ GC ถูกวัดโดยการสอบวิเคราะห์ฟีนิลทานอยด์ไกลโคไซด์ หลังการบาดเจ็บ หนูทั้งหมดในกลุ่มที่ได้รับ GC ได้รับ GC (10 มก./กก./วัน, 1 มล., ในช่องท้อง วันละครั้ง) เป็นเวลา 14 วันติดต่อกัน หนูแรทในกลุ่มควบคุมและกลุ่มโรคสมองเสื่อมได้รับน้ำเกลือ (1 มล., ในช่องท้อง)

อิมมูโนฮิสโตเคมี

หลังจาก 14 วันของการบริหาร GC (หรือน้ำเกลือ) หนูเจ็ดตัวจากแต่ละกลุ่มถูกตัดหัวและแยกสมองออก เยื่อหุ้มสมองถูกเอาออก และเนื้อเยื่อของฮิปโปแคมปัลถูกผ่าอย่างระมัดระวังและตัดออกเป็นส่วนที่หนา 3-ไมโครเมตรโดยใช้ไมโครโทมแช่แข็ง ส่วนของเนื้อเยื่อฮิปโปแคมปัลได้รับการแก้ไขด้วยพาราฟอร์มัลดีไฮด์ 4% เป็นเวลา 30-60 นาที ล้างด้วย PBS และฟักใน H2O2 3% เป็นเวลา 10 นาที ตามด้วยเซรั่มแพะเป็นเวลา 15 นาที ทั้งหมดที่อุณหภูมิห้อง

จากนั้นจึงทำการฟักไข่ในแอนติบอดีปฐมภูมิ p-tau ต้านหนูแรท phosphorylated p-tau

(1:1,000 ใน PBS; Bioworld Technology, Inc., TX, USA) และแอนติบอดีปฐมภูมิต้านหนูแอมีลอยด์-เบตา (A ) ของกระต่าย (1:1,000; Bioworld Technology, Inc.) ในกล่องเปียกที่ 37 องศาเป็นเวลา 2 –3 ชั่วโมง ก่อนฟักตัวในแอนติบอดีทุติยภูมิ (IgG ต่อต้านเมาส์ของแพะ; Bioworld Technology, Inc.) เป็นเวลา 15 นาทีที่อุณหภูมิห้อง ตัวอย่างถูกมองเห็นด้วย 3,3′-diaminobenzidine tetrahydrochloride (Dako, Tokyo, Japan) รูปภาพถูกถ่ายโดยใช้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสง (Olympus, Tokyo, Japan) และประมวลผลโดยใช้ Photoshop (เวอร์ชัน 7.0; Adobe, San Jose, CA, USA)

อนุภาคภูมิคุ้มกันบกพร่องมีสีน้ำตาล ดังนั้นการย้อมสีน้ำตาลในไซโตพลาสซึมจึงถูกเลือกให้เป็นปฏิกิริยาเชิงบวก และการหาปริมาณกึ่งถูกดำเนินการโดยใช้ระบบวิเคราะห์ภาพ HMIAS-2000 (Qianpin Co., Wuhan, China) ในแต่ละตัวอย่าง มีการเลือกมุมมองห้าฟิลด์โดยการสุ่ม และเลือกเซลล์บวกห้าเซลล์ในแต่ละมุมมอง และวัดค่าสีเทาโดยเฉลี่ยเป็นชุดของค่าสัมพัทธ์

Cistancheสามารถเสริมได้ภูมิคุ้มกันและป้องกันหลอดเลือดหัวใจและหลอดเลือดสมองโรค

อิเล็กโตรโฟรีซิสแบบเจลสองมิติ (2-DE)

หลังจาก 14 วันของการบริหาร GC หรือน้ำเกลือ หนูแปดตัวจากแต่ละกลุ่มได้รับการดมยาสลบและตัดหัว และเนื้อเยื่อของฮิปโปแคมปัลถูกเก็บเกี่ยวอย่างรวดเร็วและแช่แข็งทันทีในไนโตรเจนเหลว เนื้อเยื่อทั้งหมดถูกทำให้เป็นเนื้อเดียวกันในไนโตรเจนเหลวโดยใช้ครกและสาก และรวบรวมในบัฟเฟอร์การสลาย (7 โมลาร์ยูเรีย, 2 โมลาร์ไทโอยูเรีย, 2 เปอร์เซ็นต์ CHAPS, 20 มิลลิโมลาร์ทริส) อนุภาคที่ไม่ละลายน้ำถูกกำจัดออกโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 13,000 × g เป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 องศา กรดนิวคลีอิกที่ปนเปื้อนถูกรบกวนโดยการสั่นของคลื่นเสียงเป็นช่วงๆ เป็นเวลา 5 นาที ตัวอย่างถูกหมุนเหวี่ยงอีกครั้งภายใต้สภาวะเดียวกันและรวบรวมส่วนเหนือตะกอน วัดความเข้มข้นของโปรตีนโดยใช้การทดสอบ Bradford (Beyotime Inc., China) และเก็บตัวอย่างไว้ที่ −80 องศาจนกว่าจะใช้

เพื่อตรวจสอบโปรไฟล์การแสดงออกของโปรตีนในฮิบโปแคมปัส 2-DE ถูกดำเนินการตามคำแนะนำของผู้ผลิต (GE Healthcare, Pittsburgh, PA, USA) สารละลายโปรตีน (120 ไมโครกรัม/ตัวอย่าง) ถูกปรับด้วยบัฟเฟอร์การคืนสภาพสำหรับปริมาตรสุดท้าย 350 ไมโครลิตร ทำการโฟกัสด้วยไอโซอิเล็กทริกโดยใช้แถบ IPG (pH 4–7 ขนาด 22 ซม.) บนระบบ Ettan IPG หรือ II (ทั้งหมดจาก GE Ettan IPGphor3, GE Healthcare) หลังจากนั้น แถบถูกปรับสมดุลเป็นเวลา 15 นาที

{0}}DE ดำเนินการโดยใช้เจลโพลีอะคริลาไมด์โซเดียม โดเดซิลซัลเฟต (SDS) 12.5 เปอร์เซ็นต์ (24 ซม. × 19.5 ซม. × 10 มม.) ด้วยกาวปิดผนึกอะกาโรส 0.5 เปอร์เซ็นต์ในอิเล็กโตรโฟรีซิส Ettan DALTSix ระบบ (GE, Ettan DALTSix, GE Healthcare)

ดำเนินการอิเล็กโตรโฟรีซิสที่ 2 วัตต์ เป็นเวลา 45 นาที ตามด้วยการแยกที่ 17 วัตต์ เป็นเวลา 4 ชั่วโมง จนกระทั่งโบรโมฟีนอลสีน้ำเงินใกล้ถึงจุดต่ำสุดของเจล 2-DE

เจลถูกย้อมโดยใช้ซิลเวอร์ไนเตรต (Damao Chemical Reagent Factory, Tianjin, China) และจับภาพบนระบบสแกนภาพ 2-DE (VT, USA)

ซอฟต์แวร์ Image Master 2D Platinum 5.0 (GE, Inc., PA, USA) ใช้เพื่อสแกนและวิเคราะห์ภาพ 2-DE

ได้ข้อมูลโดยใช้แมสสเปกโตรมิเตอร์ 4700 MALDI TOF/TOF (GE, Inc.)

แมสสเปกโตรเมทรีแมสสเปกโตรเมทรีด้วยเลเซอร์ช่วยเมทริกซ์/เวลาของการบิน

สำหรับการวิเคราะห์ลายนิ้วมือมวลเปปไทด์และการวิเคราะห์ที่ตามมา เจลจะถูกหั่นเป็นชิ้นและอยู่ภายใต้โปรโตคอลในเจลที่ดัดแปลงเล็กน้อยตามที่อธิบายไว้ในคำแนะนำของผู้ผลิต มีเมทานอล (Fisher M/4056/17), acetonitrile (Fisher A/0626/17), trypsin (Promega V5280), สารละลายทริปซิน (Promega V530), แอมโมเนียมไบคาร์บอเนต (Sigma A6141), C-18 ZipTip (Millipore ZTC18M096) และกรดไตรฟลูออโรอะซิติก (GE HealthCare)

โดยสังเขป จุดโปรตีนถูกขจัดออกด้วยสารละลายขจัดคราบ (30 mM K3Fe(CN)6:100 mM NaS2O3=1:1) และถูกทำให้แห้งด้วยแอมโมเนียม ไบคาร์บอเนต 100 มม. และอะซีโตไนไตรล์ ลดลงด้วยไตรคลอโรเมทิล ฟอสเฟต เป็นเวลา 20 นาทีที่อุณหภูมิห้อง แล้วอัลคิลเลตในกรดไอโอโดอะซิติกเป็นเวลา 30 นาทีในที่มืด เจลถูกบ่มใน 50 ไมโครลิตรของสารละลายทริปซินดัดแปลง 12 นาโนกรัม/ไมโครลิตรในแอมโมเนียม ไบคาร์บอเนต 25 มิลลิโมลาร์, pH 8.6, ที่ 37 องศาค้างคืน สกัดเปปไทด์จากเจลปลั๊กด้วยกรดฟอร์มิก 1 เปอร์เซ็นต์/2 เปอร์เซ็นต์อะซิโตไนไตรล์และทำให้เข้มข้นโดยใช้ C-18 Zip-Tips หลังจากนั้น ตัวอย่างถูกเตรียมโดยใช้เป้าหมาย Prespotted AnchorChip (PAC96) ที่มีเมทริกซ์กรดอัลฟา-ไซยาโน-4-กรดไฮดรอกซีซินนามิกสำหรับจุดตัวอย่าง 96 จุดและจุดสอบเทียบ 24 จุด ข้อมูลเปปไทด์มวลได้มาจากการใช้แมสสเปกโตรมิเตอร์ 4700 MALDI TOF/TOF ข้อมูลผลลัพธ์ถูกวิเคราะห์โดยใช้ GPS Explorer (Applied Biosystems Inc., NY, USA) ซึ่งเรียกใช้การค้นหาฐานข้อมูล MASCOT (Matrix Science, London, UK) โดยใช้ชุดย่อยของเมาส์ของฐานข้อมูลศูนย์ข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ

Cistancheสามารถต้านเชื้อแบคทีเรียและป้องกันได้หลอดเลือดภาวะสมองเสื่อม

การทดสอบ blot แบบตะวันตก

ฮิบโปแคมปัสถูกเตรียมและวัดความเข้มข้นของโปรตีนตามที่บรรยายไว้ข้างต้น ตัวอย่างโปรตีนถูกบรรจุลงในเจล SDS พอลิอะคริลาไมด์, อิเล็กโตรโฟเรส และถ่ายโอนไปยังเมมเบรนโพลีไวนิลลิดีนไดฟลูออไรด์ เมมเบรนถูกล้างในน้ำเกลือ Tris-buffered และ Tween 20 ปิดกั้นในนมที่ไม่มีไขมัน 10 เปอร์เซ็นต์ และ Tween 0.05 เปอร์เซ็นต์ในน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต เยื่อหุ้มเซลล์ถูกบ่มในชั่วข้ามคืนที่ 4 องศาด้วยโพลีโคลนอล แอนติบอดีโปรตีนที่ต่อต้านไมโทคอนเดรียของกระต่าย (1:2,000; Proteintech Inc., ชิคาโก, อิลลินอยส์, สหรัฐอเมริกา) และกระต่ายแอนติ-เคราตินชนิด II cytoskeletal 6A (KRT6A) โพลีโคลนอลแอนติบอดี (1:1,000; Proteintech Inc.) ในนมที่ไม่มีไขมัน 10 เปอร์เซ็นต์ แอนติบอดีทุติยภูมิ, ฮอร์สแรดิชเปอร์ออกซิเดส-คอนจูเกตแพะต่อต้านกระต่าย (Google Biotechnology Inc., หวู่ฮั่น, มณฑลหูเป่ย์, จีน) ถูกเจือจาง (1:2,000) ในนมที่ไม่มีไขมัน 10 เปอร์เซ็นต์ และบ่มที่ 25 องศา เป็นเวลา 1 ชั่วโมง โมโนโคลนอลแอนติบอดีต้านหนู -แอกตินของหนูเมาส์ (1:2,000; Google Biotechnology Inc.) ถูกใช้เป็นข้อมูลอ้างอิงภายใน ระบบสแกนแบบ Western blot (V300; EPSON, Nagano-ken, Japan) และ AlphaEaseFC Adobe PhotoShop (Alpha Innotech, CA, USA) ถูกใช้เพื่อกำหนดหาโปรตีนพรีเคอร์เซอร์ของไมโทคอนเดรียและระดับการแสดงออก KRT6A ที่แสดงเป็นความหนาแน่นของแสงแบบรวมที่ปรับให้เป็นมาตรฐานเป็น -แอคติน

การวิเคราะห์ทางสถิติ

ข้อมูลเชิงปริมาณแสดงเป็นค่าเฉลี่ย± SD ซอฟต์แวร์ ImageMaster 2D Platinum 50 (GE, Inc.) ถูกใช้เพื่อสแกนและวิเคราะห์ข้อมูล 2-DE การวิเคราะห์ความแปรปรวนแบบสองทางดำเนินการโดยใช้ GraphPad Prism 60 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, CA, USA) P < 0.05="">

ผลลัพธ์

ผลของ GC ต่อ p-tau และ A immunoreactivity ในฮิบโปแคมปัสของหนูที่เป็นภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด

อิมมูโนฮิสโตเคมีแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ p-tau และ A มีค่ามากกว่าหลังการรักษาด้วย GC 14 วัน มากกว่าในกลุ่มควบคุม อย่างไรก็ตาม การแสดงออกของโปรตีนเหล่านี้ในกลุ่มที่ได้รับ GC นั้นต่ำกว่าในกลุ่มหลอดเลือดสมองเสื่อมอย่างมีนัยสำคัญ (P < 0.05;="" รูปที่="">

GC ควบคุมการแสดงออกของโปรตีนพรีเคอร์เซอร์ไมโตคอนเดรียและ KRT6A ในฮิบโปแคมปัสของหนูที่เป็นภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด

การแสดงออกของโปรตีนทั้งสองมีความแตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญในกลุ่มที่ได้รับการรักษาด้วย GC มากกว่าในกลุ่มภาวะสมองเสื่อมจากหลอดเลือด: โปรตีนพรีเคอร์เซอร์ของไมโตคอนเดรีย (หรือที่เรียกว่าโปรตีนช็อตด้วยความร้อน (HSP) 75 kDa) ถูกควบคุม และ KRT6A ถูกปรับลด (รูปที่ 22, 33 ). ข้อมูลโปรตีนแสดงไว้ในตารางที่ 1

การอภิปราย

ภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือดเป็นกลุ่มอาการที่มีลักษณะเฉพาะโดยความบกพร่องในความจำ พฤติกรรม และการรับรู้ และส่วนใหญ่เกิดจากโรคหลอดเลือดในสมอง (Barker et al., 2014; Burke et al., 2014; Oliveira et al., 2014; Szalárdy et al., 2558). พยาธิสภาพที่พบได้ทั่วไปในภาวะสมองเสื่อมทุกประเภท และมีส่วนรับผิดชอบต่อความก้าวหน้าของโรคนี้ คือ การเสื่อมของระบบประสาท (Foster et al., 2014; Fischer and Maier, 2015; Kalaria et al., 2015;

Cistancheสามารถเสริมภูมิต้านทานและป้องกันหลอดเลือดภาวะสมองเสื่อม

เฉิน et al., 2016; Pérez -Hernández et al., 2016). สารสกัดจากพืชหลายชนิดมีคุณสมบัติในการรักษา ฤทธิ์ทางชีวภาพของสารเหล่านี้ต่อต้านการเสื่อมของระบบประสาทส่วนใหญ่เกิดจากสารต้านอนุมูลอิสระและฤทธิ์ต้านอะไมลอยด์ (Fischer and Maier, 2015; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016).

Cistancheเป็นสมุนไพรจีนที่ใช้เป็น nootropic ในการแพทย์แผนจีน การวิจัยที่เกิดขึ้นใหม่ระบุว่าCistancheมีประโยชน์ในภาวะความจำเสื่อม โดยเฉพาะในการยับยั้งความก้าวหน้าของการสูญเสียความจำ (Procaccio et al., 2014; You et al., 2015; Pérez -Hernández et al., 2016) มีหลักฐานมากมายที่แสดงว่า GC สามารถส่งเสริมการสร้าง axonal และทำหน้าที่เป็นตัวปรับการเจริญเติบโตของเส้นประสาท (Talarowska et al., 2014; Gu et al., 2016; Xu et al., 2016) ในงานก่อนหน้านี้ของเราโดยใช้เขาวงกตน้ำ Morris เราพบว่าเวลาแฝงในการหลบหนีของแบบจำลองหนูของภาวะสมองเสื่อมเกี่ยวกับหลอดเลือดลดลงหลังการรักษาด้วย GC ซึ่งบ่งชี้ว่า GC ช่วยเพิ่มความสามารถในการเรียนรู้เชิงพื้นที่ แม้ว่า GC จะถูกนำมาใช้อย่างกว้างขวางสำหรับผลกระทบต่อระบบประสาท (Chen et al., 2015) กลไกที่เป็นสาเหตุของผลกระทบนี้ก็ยังไม่ชัดเจน

เป็นที่ทราบกันดีว่าเปปไทด์ A และ p-tau แสดงออกอย่างมากในเนื้อเยื่อชราและผ้าพันกันของเส้นประสาทเส้นใยประสาท โปรตีน A และ tau มีบทบาทสำคัญในการสร้างรูปร่างของเซลล์ประสาท แต่ในสถานการณ์ทางพยาธิวิทยาบางอย่าง พวกมันสร้างมวลรวมที่ผิดปกติซึ่งเป็นพิษต่อระบบประสาท (Love et al., 2015; Sadigh-Eteghad et al., 2015; Sinclair et al., 2015; Thomas et al., 2015; Wang et al., 2015; Reijmer et al., 2016). ผลอิมมูโนฮิสโตเคมีในปัจจุบันบ่งชี้ว่าการแสดงออกของโปรตีน p-tau และ A ในแบบจำลองหนูที่บำบัดด้วย GC ของภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือดมีค่ามากกว่าในหนูควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ แต่ต่ำกว่าในหนูทดลองที่ไม่ได้รับการรักษา ดังนั้นผลทางประสาทของ GC อาจเกิดขึ้นได้โดยการลดความเป็นพิษของ A และ p-tau

การศึกษาโปรตีโอมิกของเราในหนูแรทฮิปโปแคมปัสเผยให้เห็นความแตกต่างอย่างมากในการแสดงออกของโปรตีนสารตั้งต้นของไมโตคอนเดรีย เคราติน และ KRT6A ในแง่ของการทำงาน เราคาดการณ์ว่าผลกระทบต่อระบบประสาทของ GC อาจเกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างกระดูกสันหลังของเดนไดรต์

โปรตีนสารตั้งต้นของไมโตคอนเดรียเป็นของตระกูล HSP70 (Rao et al., 2014; Gutiérrez -Aguilar and Baines, 2015; McGeer and McGeer, 2015) HSP75 เกี่ยวข้องกับการกระตุ้นและการเจริญเติบโตของโมเลกุลพี่เลี้ยงและรักษาเสถียรภาพและการทำงานปกติของเซลล์ (Booth et al., 2014, 2016; Tavallai et al., 2015)

โปรตีนสารตั้งต้นของไมโตคอนเดรียมีบทบาทสำคัญในการถ่ายโอนเส้นทางการส่งสัญญาณบางอย่าง (Reid et al., 2014; Booth et al., 2015a, b) การศึกษาเมื่อเร็ว ๆ นี้เปิดเผยว่าตระกูล HSP90 ควบคุมสภาพแวดล้อมการทำงานของการพับโปรตีนยล (An et al., 2014; Liu and Landgraf, 2015; Roberts et al., 2015; Stary and Giffard, 2015) HSP75 มีการแปลในไมโตคอนเดรียและยับยั้งการสร้างอนุมูลอิสระ (Radu et al., 2014; Holloway et al., 2016) ผลลัพธ์ของเราแสดงให้เห็นว่าการแสดงออกของ HSP75 ในกลุ่มที่ได้รับการรักษาด้วย GC เพิ่มขึ้น 2.54-เท่า ซึ่งบ่งชี้ว่า GC มีบทบาทในการต้านอนุมูลอิสระ ปรับปรุงสมดุลของเซลล์ออกซิเดชัน และชะลอการตายของเซลล์ การค้นพบนี้ให้เบาะแสที่น่าสนใจเกี่ยวกับปฏิสัมพันธ์ของโปรตีนพี่เลี้ยงไมโตคอนเดรียกับโปรตีนอื่นๆ

โปรตีนที่แสดงออกที่ต่างกันอีกตัวหนึ่งคือ KRT6A Keratins หรือที่เรียกว่า cytokeratins เป็นโปรตีนเส้นใยระดับกลางที่สร้างตาข่ายหนาแน่นที่ไม่ละลายน้ำผ่านไซโตพลาสซึมซึ่งให้การสนับสนุนโครงสร้างแก่เซลล์เยื่อบุผิว (Haricharan et al., 2014; Rorke et al., 2015; Szymanski et al., 2015) . อย่างไรก็ตาม cytokeratins ยังมีบทบาทสำคัญในกระบวนการอยู่รอดของเซลล์ต่างๆ (การเพิ่มจำนวนและการตายของเซลล์) (Zhu et al., 2013; Schwingshackl et al., 2015; Popov and Komianos, 2016) โปรตีนเหล่านี้อาจได้รับฟอสโฟรีเลชันและยังเป็นส่วนหนึ่งของการติดต่อระหว่างเซลล์เยื่อบุผิวและสภาพแวดล้อมขนาดเล็กของมัน (Lessard et al., 2013; Gil Lorenzo et al., 2014; Zhou et al., 2014; Chakrabarti et al., 2015) . CK6a เป็นไอโซฟอร์มที่โดดเด่นในต่อมน้ำนม (Bramanti et al., 2015a, b, 2016) และได้รับการควบคุมในการรักษาขอบแผลของผิวหนัง ซึ่งบ่งชี้ว่า cytokeratin เกี่ยวข้องกับการเพิ่มจำนวนและการย้ายถิ่นของเซลล์ อย่างไรก็ตาม เราเป็นคนแรกที่แสดงการปรับลด KRT6A ในฮิบโปแคมปัส การแสดงออกของ KRT6A ลดลง 158-เท่าในกลุ่มที่ได้รับ GC เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด

ดังนั้นผลทางประสาทของ GC อาจเกี่ยวข้องกับการยับยั้งการเกิด neuroglial hyperplasia ระหว่างภาวะหลอดเลือดสมองขาดเลือด

ผลการศึกษาของเราร่วมกันชี้ให้เห็นว่า GC ออกแรงกระตุ้นการเรียนรู้และส่งเสริมความจำในแบบจำลองหนูที่มีภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือดโดยการลดการแสดงออกของ A และ p-tau ซึ่งจะทำให้การสะสมของโปรตีนที่เป็นพิษทั้งสองนี้อ่อนแอลง ในทางกลับกัน การลด ความเป็นพิษของเส้นประสาท นอกจากนี้ GC อาจควบคุมการแสดงออกของโปรตีนสารตั้งต้นของไมโตคอนเดรียและ KRT6A ซึ่งสัมพันธ์กับ morphogenesis ของโครงร่างเซลล์ synaptic และเมแทบอลิซึมของพลังงานยล ดังนั้น ข้อมูลของเราจึงให้ข้อมูลเชิงลึกใหม่เกี่ยวกับกลไกเบื้องหลังของ GCs โดยเน้นถึงความเป็นไปได้ของ GCs ที่มีหลายเป้าหมาย ซึ่งเสนอทางเลือกในการรักษาแบบใหม่สำหรับการรักษาภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด

เชิงอรรถ

เงินทุน:การศึกษานี้ได้รับการสนับสนุนโดย National Natural Science Foundation of China, No. 30960520; มูลนิธิวิทยาศาสตร์ธรรมชาติเขตปกครองตนเองมองโกเลียในของจีน ฉบับที่ 2016MS0837

ความขัดแย้งทางผลประโยชน์: ไม่มีการประกาศ

จริยธรรมการวิจัย:โปรโตคอลการศึกษาได้รับการอนุมัติโดยคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ของโรงพยาบาลแห่งแรกของหวู่ฮั่น ขั้นตอนการทดลองเป็นไปตาม National Institutes of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals (NIH Publications No. 8023, revised 1978) และ "Consensus Author Guidelines on Animal Ethics and Welfare" ซึ่งจัดทำโดย International Association for Veterinary Editors (IAVE ). มีความพยายามทั้งหมดเพื่อลดจำนวนและความทุกข์ทรมานของสัตว์ที่ใช้ในการทดลองให้เหลือน้อยที่สุด บทความนี้จัดทำขึ้นตาม "การวิจัยเกี่ยวกับสัตว์: การรายงานแนวทางการทดลองใน Vivo" (ARRIVE Guidelines)

ข้อตกลงผู้มีส่วนร่วม: คำชี้แจงของ "ข้อตกลงการเผยแพร่" ได้รับการลงนามโดยผู้เขียนที่มีอำนาจในนามของผู้เขียนทั้งหมดก่อนที่จะเผยแพร่

การตรวจสอบการลอกเลียนแบบ: กระดาษนี้ได้รับการตรวจสอบสองครั้งด้วยซอฟต์แวร์ตรวจสอบการทำซ้ำ iThatticate

การตรวจสอบโดยเพื่อน:มีการดำเนินการกระบวนการตรวจสอบโดยเพื่อนแบบปกปิดสองทางและเข้มงวดเพื่อรับรองความสมบูรณ์ คุณภาพ และความสำคัญของบทความนี้

คัดลอกโดย Slone-Murphy J, Frenchman B, Yu J, Li CH, Qiu Y, Song LP, Zhao M

อ้างอิง

1. An J, Haile WB, Wu F, Torre E, Yepes M. ตัวกระตุ้น plasminogen ชนิดเนื้อเยื่อเป็นสื่อกลางในการเชื่อมต่อ neuroglial ในระบบประสาทส่วนกลาง ประสาทวิทยา 2014;257:41–48.

2. Barker R, Ashby EL, Wellington D, Barrow VM, Palmer JC, Kehoe PG, Esiri MM, Love S. พยาธิสรีรวิทยาของการแพร่กระจายของสารสีขาวในโรคอัลไซเมอร์และภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด สมอง. 2014;137:1524–1532.

3. บูธ L, Roberts JL, Cruickshanks N, Grant S, Poklepovic A, Dent P. ระเบียบ OSU-03012 ความเป็นพิษโดยโปรตีนความเครียด ER และยากระตุ้นความเครียด ER โมลมะเร็งเธอ. 2014;13:2384–2398.

4. บูธ L, Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Chuckalovcak J, Carter J, Poklepovic A, Dent P. OSU-03012 และการรักษาด้วยไวอากร้าช่วยยับยั้งการทำงานของโปรตีนพี่เลี้ยงหลายตัวและขัดขวางสิ่งกีดขวางเลือดและสมอง : ผลกระทบต่อการรักษามะเร็ง เจ เซลล์ ฟิสิออล 2015a;230:1982–1998.

5. Booth L, Roberts JL, Cash DR, Tavallai S, Jean S, Fidanza A, Cruz-Luna T, Siembiba P, Cycon KA, Cornelissen CN, Dent P. GRP78/BiP/HSPA5/Dna K เป็นเป้าหมายการรักษาสากล สำหรับโรคของมนุษย์ เจ เซลล์ ฟิสิออล 2015b;230:1661– 1676.

6. Booth L, Shuch B, Albers T, Roberts JL, Tavallai M, Proniuk S, Zukowski A, Wang D, Chen CS, Bottaro D, Ecroyd H, Lebedyeva IO, Dent P. multi-kinase inhibitors สามารถเชื่อมโยงกับความร้อนช็อก โปรตีนผ่านทางปลาย NH2-ของพวกมันโดยที่พวกมันไปกดการทำงานของพี่เลี้ยง Oncotarget. 2016;7:12975–12996.

7. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Raciti G, Viola M, Avola R. การปรับไคเนสที่เกี่ยวข้องกับสัญญาณภายนอกเซลล์, cyclin D1, glial fibrillary acidic protein และการแสดงออกของ vimentin ในวัฒนธรรม astrocyte ที่ปรับสภาพด้วย estradiol ที่ได้รับการบำบัดด้วย

ความสามารถและปัจจัยการเจริญเติบโตก้าวหน้า เจ Neurosci Res. 2015a;93:1378– 1387.

8. Bramanti V, Grasso S, Tomassoni D, Traini E, Raciti G, Viola M, Li Volti G, Campisi A, Amenta F, Avola R. ผลของปัจจัยการเจริญเติบโตและฮอร์โมนสเตียรอยด์ต่อการแสดงออกของ heme oxygenase และ cyclin D1 ใน astroglial หลัก การเพาะเลี้ยงเซลล์ เจ Neurosci Res. 2015b;93:521–529.

9. Bramanti V, Grasso S, Tibullo D, Giallongo C, Pappa R, Brundo MV, Tomassoni D, Viola M, Amenta F, Avola R. โมเลกุลของระบบประสาทและปัจจัยการเจริญเติบโตปรับการแสดงออกของโปรตีนโครงร่างระหว่างการเพิ่มจำนวนเซลล์ astroglial และความแตกต่างในวัฒนธรรม เจ Neurosci Res. 2016;94:90–98.

10. Brandenburg S, Muller A, Turkowski K, Radev YT, Rot S, Schmidt C, Bungert AD, Acker G, Schorr A, Hippe A, Miller K, Heppner FL, Homey B, Vajkoczy P. Resident microglia มากกว่า macrophages ต่อพ่วง ส่งเสริมการสร้างหลอดเลือดในเนื้องอกในสมองและเป็นแหล่งของปัจจัยกระตุ้นการสร้างเส้นเลือดใหม่ แอคตา นิวโรพาทอล. 2016;131:365–378.

11. Burke MJ, Nelson L, Slade JY, Oakley AE, Khundakar AA, Kalaria RN สัณฐานวิทยาของ microvasculature hippocampal ในภาวะสมองเสื่อมหลังโรคหลอดเลือดสมองและอายุที่เกี่ยวข้อง Neuropathol Appl นิวโรไบโอล. 2014;40:284–295.

12. Chakrabarti KR, Whipple RA, Boggs AE, Hessler LK, Bhandary L, Vitolo MI, Thompson K, Martin SS การควบคุมทางเภสัชวิทยาของ AMPK ในมะเร็งเต้านมส่งผลต่อคุณสมบัติของโครงร่างเซลล์ที่เกี่ยวข้องกับการสร้างไมโครเทนทาเคิลและการเกิดซ้ำ

สิ่งที่แนบมา Oncotarget. 2015;6:36292–36307.

13. Chen A, Akinyemi RO, Hase Y, Firbank MJ, Ndung'u MN, Foster V, Craggs LJ, Washida K, Okamoto Y, Thomas AJ, Polvikoski TM, Allan LM, Oakley AE, O'Brien JT, Horsburgh K , Ihara M, Kalaria RN. ภาวะ hyperintensities ของสารสีขาวที่หน้าผาก, ภาวะสมองเสื่อมและความผิดปกติของหลอดเลือดในวัยชราและภาวะสมองเสื่อมภายหลังโรคหลอดเลือดสมอง สมอง. 2016;139:242–258.

14. Chen J, Zhou SN, Zhang YM, Feng YL, Wang S. Glycosides of Cistanche ปรับปรุงการเรียนรู้และความจำในรูปแบบหนูของภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด Eur Rev Med Pharmacol วิทย์ 2015;19:1234–1240.

15. Chen S, Yin ZJ, Jiang C, Ma ZQ, Fu Q, Qu R, Ma SP. Asiaticoside ช่วยลดความบกพร่องของหน่วยความจำที่เกิดจากการขาดเลือดกลับในสมองชั่วคราวในหนูโดยใช้กลไกต้านการอักเสบ Pharmacol Biochem บีฮาฟ. 2014;122:7–

16. Fischer R, Maier O. ความสัมพันธ์ของความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชันและการอักเสบในโรคทางระบบประสาท: บทบาทของ TNF Oxid Med Cell Longev. 2015;2015:610813.

17. Foster V, Oakley AE, Slade JY, Hall R, Polvikoski TM, Burke M, Thomas AJ, Khundakar A, Allan LM, Kalaria RN เซลล์ประสาทเสี้ยมของเยื่อหุ้มสมองส่วนหน้าในภาวะสมองเสื่อมภายหลังโรคหลอดเลือดสมอง หลอดเลือด และภาวะสมองเสื่อมอื่นๆ ที่เกี่ยวข้องกับอายุ สมอง. 2014;137:2509– 2521.

18. Gil Lorenzo AF, Bocanegra V, Benardon ME, Cacciamani V, Valles PG. ระเบียบ Hsp70 เกี่ยวกับ Nox4/p22phox และความสมบูรณ์ของโครงร่างโครงร่างจากผลของยาโลซาร์แทนในเซลล์กล้ามเนื้อเรียบของหลอดเลือด พี่เลี้ยงความเครียดของเซลล์ 2014;19:115–134.

19. Gu C, Yang X, Huang L. Cistanches herba: การทบทวนทางเภสัชวิทยา ฟาหน้า. 2016;7:289.

20. Gutiérrez -Aguilar M, Baines CP. กลไกโครงสร้างของการควบคุมที่ขึ้นกับ cyclophilin D ของรูพรุนการเปลี่ยนผ่านของ mitochondrial ไบโอชิม ไบโอฟิส แอคตา 2015;1850:2041–2047.

21. Haricharan S, Hein SM, Dong J, Toneff MJ, Aina OH, Rao PH, Cardiff RD, Li Y. การมีส่วนร่วมของเซลล์ถุงต้นกำเนิดต่อฟีโนไทป์มะเร็งคุณภาพสูงของมะเร็งเต้านมที่เกี่ยวข้องกับการตั้งครรภ์ เนื้องอก 2014;33:5729–5739. [

22. Holloway KR, Sinha VC, Bu W, Toneff M, Dong J, Peng Y, Li Y. การกำหนดเป้าหมายเนื้องอกในเซลล์ต่อมน้ำนมที่กำหนดไว้แสดงให้เห็นว่าการกลายพันธุ์ของเนื้องอกที่เริ่มต้นจะกำหนดฟีโนไทป์ของเนื้องอกที่เป็นผลลัพธ์ Int J Biol

วิทย์. 2016;12:381–388.

23. Kalaria RN, Ferrer I, Love S. โรคหลอดเลือด, การขาดออกซิเจน, และเงื่อนไขที่เกี่ยวข้อง ใน: Love S, Perry A, Ironside J, Budka H, ​​บรรณาธิการ พยาธิวิทยาของกรีนฟิลด์ ลอนดอน: ซีอาร์ซี; 2015.

24. Lessard JC, Pina-Paz S, Rotty JD, Hickerson RP, Kaspar RL, Balmain A, Coulombe PA Keratin 16 ควบคุมภูมิคุ้มกันโดยธรรมชาติเพื่อตอบสนองต่อการละเมิดสิ่งกีดขวางของผิวหนังชั้นนอก Proc Natl Acad Sci US A. 2013;110:19537–19542.

25. Liu W, Landgraf R. Phosphorylated และ unphosphorylated serine 13 ของ CDC37 ทำให้การโต้ตอบที่แตกต่างกันระหว่างไคลเอ็นต์และโดเมนที่มีผลผูกพัน HSP90 มีความเสถียร ชีวเคมี. 2015;54:1493–1504.

26. Love S, Chalmers K, Ince P, Esiri M, Attems J, Kalaria R, Jellinger K, Yamada M, McCarron M, Minett T, Matthews F, Greenberg S, Mann D, Kehoe PG Erratum: การพัฒนา การประเมิน การตรวจสอบ และการดำเนินการตามโปรโตคอลที่เป็นเอกฉันท์สำหรับการประเมินภาวะหลอดเลือดในสมองแบบอะไมลอยด์ในเนื้อเยื่อสมองภายหลังการชันสูตรพลิกศพ Am J Neurodegener Dis. 2015;4:49.

27. McGeer PL, McGeer EG. กำหนดเป้าหมาย microglia สำหรับการรักษาโรคอัลไซเมอร์ ผู้เชี่ยวชาญชี้เป้าหมาย 2015;19:497–506.

28. Neltner JH, Abner EL, Baker S, Schmitt FA, Kryscio RJ, Jicha GA, Smith CD, Hammack E, Kukull WA, Brenowitz WD, Van Eldik LJ, Nelson PT ภาวะหลอดเลือดตีบที่ส่งผลต่อบริเวณสมองหลายส่วนเชื่อมโยงกับเส้นโลหิตตีบของ hippocampal ของวัย สมอง. 2014;137:255–267.

29. Oliveira NR, Marques SO, Luciano TF, Pauli JR, Moura LP, Caperuto E, Pieri BL, Engelmann J, Scaini G, Streck EL, Lira FS, Pinho RA, Ropelle ER, Silva AS, De Souza CT การฝึกบนลู่วิ่งช่วยเพิ่มระดับโปรตีนอัลฟา SIRT-1 และ PGC-1 และฟอสโฟรีเลชั่น AMPK ในสัตว์สี่ขาของหนูวัยกลางคนในลักษณะที่ขึ้นกับความเข้มข้น ผู้ไกล่เกลี่ย Inflamm 2014;2014:987017. [บทความฟรี PMC]

30. Pérez -Hernández J, Zaldívar -Machorro VJ, Villanueva-Porras D, Vega-Ávila E, Chavarría A. ทางเลือกที่มีศักยภาพในการต่อต้านโรคเกี่ยวกับระบบประสาท: phytodrugs Oxid Med Cell Longev. 2016;2016:8378613. [PMC ฟรี

บทความ] [PubMed] [Google Scholar]

31. Popov K, Komianos J. MEDIAN: การจำลองทางกลเคมีของการหดตัวและการจัดตำแหน่งขั้วในเครือข่าย actomyosin PLOS คอมพิวเตอร์

ไบโอล. 2016;12:e1004877. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [Google Scholar]

32 Procaccio V, Bris C, Chao de la Barca JM, Oca F, Chevallier A, Amati-Bonneau P, Bonneau D, Reynier P. มุมมองของการป้องกันระบบประสาทด้วยยาที่กำหนดเป้าหมายไปยังไมโตคอนเดรีย Rev Neurol (ปารีส) 2014;170:390–400. [PubMed] [Google Scholar]

33. Radu M, Semenova G, Kosoff R, Chernoff J. PAK ส่งสัญญาณระหว่างการพัฒนาและความก้าวหน้าของมะเร็ง แนท เรฟ แคนเซอร์. 2014;14:13–25. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [Google Scholar]

34. Rao VK, Carlson EA, Yan SS. รูพรุนการเปลี่ยนผ่านของไมโตคอนเดรียเป็นเป้าหมายของยาที่มีศักยภาพในการเสื่อมสภาพของระบบประสาท ไบโอชิม ไบโอฟิส แอคตา 2014;1842:1267– 1272 [บทความฟรี PMC] [PubMed] [Google Scholar]

35. Reid SP, Shurtleff AC, Costantino JA, Tritsch SR, Retterer C, Spurgers KB, Bavari S. HSPA5 เป็นปัจจัยโฮสต์ที่จำเป็นสำหรับการติดเชื้อไวรัสอีโบลา ยาต้านไวรัส 2014;109:171–174. [PubMed] [Google Scholar]

36. Reijmer YD, รถตู้ Veluw SJ, Greenberg SM การบาดเจ็บที่สมองขาดเลือดในโรคหลอดเลือดหัวใจตีบตัน เจ เซเรบ เลือดไหล Metab. 2016;36:40–54. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [Google Scholar]

37. Roberts JL, Tavallai M, Nourbakhsh A, Fidanza A, Cruz-Luna T, Smith E, Siembida P, Plamondon P, Cycon KA, Doern CD, Booth L, Dent P. GRP78/Dna K เป็นเป้าหมายของ Nexavar/ stivarga/votrient ในการรักษาโรคมะเร็งของมนุษย์ การติดเชื้อไวรัส และโรคจากแบคทีเรีย เจ เซลล์ ฟิสิออล 2015;230:2552–2578. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [Google Scholar]

38. Rorke EA, Adhikary G, Young CA, Rice RH, Elias PM, Crumrine D, Meyer J, Blumenberg M, Eckert RL การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างและชีวเคมีที่อยู่ภายใต้ฟีโนไทป์ที่เหมือน keratoderma ในหนูที่ไม่มีฟังก์ชันปัจจัยการถอดรหัส suprabasal AP1 เซลล์ตาย Dis. 2015;6:e1647. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [Google Scholar]

39. Sachdev P, Kalaria R, O'Brien J, Skoog I, Alladi S, Black SE, Blacker D, Blazer DG, Chen C, Chui H, Ganguli M, Jellinger K, Jeste DV, Pasquier F, Paulsen J, Prins N, Rockwood K, Roman G, Scheltens P. International Society for Vascular Behavioral and Cognitive Disorders (2014) เกณฑ์การวินิจฉัยสำหรับความผิดปกติของความรู้ความเข้าใจเกี่ยวกับหลอดเลือด: คำแถลงของ VASCOG อัลไซเมอร์ ดิส แอสโซค ดิสคอร์ด. 28:206–218.

40. Sadigh-Eteghad S, Sabermarouf B, Majdi A, Talebi M, Farhoudi M, Mahmoudi J. Amyloid-beta: ปัจจัยสำคัญในโรคอัลไซเมอร์ ป.ป.ช. 2015;24:1–10.

41. Schwingshackl A, Roan E, Teng B, Waters CM. TREK-1 ควบคุมการหลั่งไซโตไคน์จากเซลล์เยื่อบุผิวที่มีถุงน้ำของมนุษย์ที่เพาะเลี้ยงโดยไม่ขึ้นกับการจัดเรียงใหม่ของโครงร่างโครงกระดูก ป.ล. หนึ่ง 2015;10:e0126781.

42. Sinclair LI, Tayler HM, Love S. ระดับโปรตีน Synaptic เปลี่ยนแปลงไปในภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด Neuropathol Appl นิวโรไบโอล. 2015;41:533–543.

43. สตาร์รี่ CM, กิฟาร์ด อาร์จี. ความก้าวหน้าในแนวทางการรักษาโรคหลอดเลือดสมองที่กำหนดเป้าหมาย astrocyte: บทบาทที่เกิดขึ้นใหม่สำหรับไมโตคอนเดรียและไมโครอาร์เอ็นเอ Neurochem Res. 2015;40:301–307.

44. Szalárdy L, Z ádori D, Klivényi P, Toldi J, Vécsei L. การรบกวนการขนส่งอิเล็กตรอนและการเสื่อมของระบบประสาท: จากแนวคิดของ Albert Szent-Gyorgyi (Szeged) จนถึงแนวทางใหม่ในการเพิ่มพลังงานชีวภาพของไมโตคอนเดรีย เซลล์ Oxid Med

ลองเยฟ 2015;2015:498401.

45. Szymanski WG, Zauber H, Erban A, Gorka M, Wu XN, Schulze WX ส่วนประกอบของโครงร่างโครงร่างกำหนดตำแหน่งโปรตีนให้กับไมโครโดเมนของเมมเบรน โมล เซลล์ โปรตีโอมิกส์. 2015;14:2493–2509.

46 Talarowska M, Bobinska K, Zajaczkowska M, Su KP, Maes M, Galecki P. ผลกระทบของความเครียดจากปฏิกิริยาออกซิเดชัน/ไนโตรและการอักเสบต่อการทำงานของความรู้ความเข้าใจในผู้ป่วยที่มีอาการซึมเศร้าซ้ำซาก หมอวิทย์ มอนิต. 2014;20:110–115.

47. Tatlisumak T, Putaala J, Debette S. สาเหตุที่พบได้บ่อยของโรคหลอดเลือดสมอง: การวินิจฉัยและการจัดการ ใน: Norrving B, บรรณาธิการ. ตำราอ็อกซ์ฟอร์ดโรคหลอดเลือดสมองและโรคหลอดเลือดสมอง. อ็อกซ์ฟอร์ด: สำนักพิมพ์มหาวิทยาลัยอ็อกซ์ฟอร์ด; 2014. หน้า 153–162. [Google Scholar]

48. Tavallai M, Hamed HA, Roberts JL, Cruickshanks N, Chuckalovcak J, Poklepovic A, Booth L, Dent P. Nexavar/Stivarga และไวอากร้าโต้ตอบเพื่อฆ่าเซลล์เนื้องอก เจ เซลล์ ฟิสิออล 2015;230:2281–2298. [บทความฟรี PMC] [PubMed] [Google Scholar]

49 Thomas T, Miners S, Love S. การประเมินการชันสูตรพลิกศพของ hypoperfusion ของเปลือกสมองในโรคอัลไซเมอร์และภาวะสมองเสื่อมในหลอดเลือด สมอง. 2015;138:1059– 1069 [PubMed] [Google Scholar]

50. Wang Y, Lin J, Chen QZ, Zhu N, Jiang DQ, Li MX, Wang Y. การแสดงออกของ mitochondrial Hsp75 ที่มากเกินไปจะปกป้องเซลล์ต้นกำเนิดจากระบบประสาทจากความเป็นพิษต่อระบบประสาทที่เกิดจากปัจจัยที่ละลายได้ของ microglia โดยการควบคุมการเปิดรูขุมขนการเปลี่ยนผ่านของ mitochondrial ในหลอดทดลอง อินท์ เจ โมล เมด 2015;36:1487–1496.

51. Xu Q, Fan W, Ye SF, Cong YB, Qin W, Chen SY, Cai J. Cistanche tubulosa ปกป้องเซลล์ประสาท Dopaminergic ผ่านระเบียบของ Apoptosis และ Glial Cell-Derived Neurotrophic Factor: ในร่างกาย และ ในหลอดทดลอง ริ้วรอยก่อนวัย

ประสาทวิทยา 2016;8:295.

52. คุณ SP, Zhao J, Ma L, Tudimat M, Zhang SL, Liu T. ผลการป้องกันของ phenylethanol glycosides จาก Cistanche tubulosa ต่อการเกิดพังผืดของตับที่เกิดจาก albumin ในหนูในหนู ดารุ. 2015;23:52.

53. Zhou Q, Anderson C, Zhang H, Li X, Inglis F, Jayagopal A, Wang S. การกดขี่ของ choroidal neovascularization ผ่านวิถีของ actin cytoskeleton pathways โดย microRNA-24 โมล เธอ. 2014;22:378–389.

54 Zhu M, Lu C, Li W. การได้รับ echinacoside ชั่วคราวนั้นเพียงพอที่จะกระตุ้นการส่งสัญญาณ Trk และปกป้องเซลล์ประสาทจาก rotenone เจ นิวโรเคม. 2013;124:571–580.